專利名稱:喹唑啉衍生物的制作方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種新型的喹唑啉衍生物。更具體地說,本發(fā)明涉及具有酪氨酸特異性蛋白激酶(以下稱為酪氨酸激酶)抑制活性的喹唑啉衍生物。
另外,本發(fā)明涉及含有該喹唑啉衍生物和藥學上可接受的載體的藥物組合物、含有該喹唑啉衍生物的酪氨酸激酶抑制劑、以及抗癌劑、對基于動脈硬化的疾病及干癬等酪氨酸激酶活性亢進引起的疾病的治療和/或預防藥。
背景技術:
在癌癥的化學治療中,多使用抑制DNA合成或直接抑制細胞分裂的藥物。但是,目前這些藥物都是作為細胞毒性發(fā)揮作用,雖然對急速分裂的癌細胞有效,但是在多數(shù)情況下,由于其細胞毒性不限于癌細胞,因此對正常細胞也顯示強的毒性,其結(jié)果,在利用這種藥物的化學療法中存在產(chǎn)生副作用的問題。作為以所述以外的機理作用的另外途徑,已知有提高對癌細胞的增殖抑制的選擇性方法。
酪氨酸激酶,是將蛋白質(zhì)中的酪氨酸殘基磷酸化的酶,已知在細胞分化、增殖或細胞內(nèi)信息傳導系統(tǒng)發(fā)揮著重要并且中心的作用。同時考慮到,若酪氨酸激酶活性的控制受到了破壞,則會引起細胞分化、增殖或細胞內(nèi)信息傳遞機構(gòu)的異常,直接涉及到很多疾病的發(fā)病。例如除動脈硬化[Am.J.Physiol.,1991,260(4-part 1),C721-C730;Biochem.Biophys.Commun.,1993,192(3),1319-1326.等]、干癬[JInvest.Deruatol.,1990,75,75-95]之外,還發(fā)現(xiàn)與正常細胞相比,在腫瘤細胞內(nèi)酪氨酸激酶活性異常[Cell,1987,50,823]?,F(xiàn)在已經(jīng)明確其中HER2(也稱為ErbB2或Neu)、EGF受體等的增殖因子受體酪氨酸激酶(以下稱為受體酪氨酸激酶)與癌的形成有很大關系,也發(fā)現(xiàn)了在人癌中受體酪氨酸激酶活性亢進[Cancer Res.,1991,51,4430-4435;Cancer Res.,1992,52,3636-3641;Cancer Chemother.Pharmacol.,1993,32,1-19.等]。另外,報道發(fā)現(xiàn)這些受體酪氨酸激酶在腦、肺、胃、腸、胰藏、頭頸部、食道、膀胱、腎、前列腺、卵巢、乳、子宮、甲狀腺等很多的腫瘤中過剩[Med.Bull.,1991,47,87;Expert.Opin.Invest.Drugs,1994,3(6),577-595;特開平5-208911]。另外,即使在與癌的轉(zhuǎn)移有很大關系的血管增生中也顯示與EGF受體有關[J.Biol.Chem.,1995,912,895-898;Cancer Res.,1995,55,3772-3776]。因此認為抑制酪氨酸激酶的藥物,不僅作為所述疾病的預防或治療藥,而且具有新的作用機制,作為適用于多種癌癥并且副作用小的抗癌劑也是有效的。目前,各種酪氨酸激酶抑制劑的研究正在進行之中,雖然在特開平6-73025號公報、特開平5-208911號公報、日本特許第2994165號公報、特表平12-508657號公報或Diane H.Boschelli的最近的論文[Drugs of the Future 1999 24(5),515-537;]已經(jīng)公開,但是仍然沒有達到實用的程度。
EGF受體、HER2、ErbB3以及ErbB4的四種受體都屬于ErbB家族,發(fā)現(xiàn)這些受體之間形成異種復合體并在細胞內(nèi)信息傳遞中相互作用[J.Clin.Oncol.2001 19(18s),32s-40s]。例如,已知由于EGF受體和HER2的共同出現(xiàn),使只基于EGF受體的癌化進一步加速[Cell 1987 58,287-292]。另外,有報道在乳腺癌、口腔癌、肺癌等中,一旦共同出現(xiàn)EGF受體和HER2,則導致愈后不良[Clin.Cancer Res.1999 5,4164-4174]。另外,也有報道在乳腺癌中,EGF受體和HER2的共同出現(xiàn)與內(nèi)分泌療法對抗性相關[J.SteroidBiochem.1989 34,123-131]。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供抑制EGF受體酪氨酸激酶的藥物以及抑制EGF受體酪氨酸激酶和HER2酪氨酸激酶雙方的藥物。EGF受體和HER2的雙抑制劑,與只作用單獨激酶的藥物相比,不僅具有適應癥廣泛的優(yōu)點,而且還具有通過雙抑制的協(xié)同作用發(fā)揮更強治療效果的優(yōu)點。
本發(fā)明的化合物具有持續(xù)的酶抑制作用,與以往報道的可逆性抑制劑相比,能夠獲得優(yōu)良的治療效果。
本發(fā)明人等為了解決所述課題,進行了銳意的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)特定結(jié)構(gòu)的喹唑啉衍生物具有強的酪氨酸激酶抑制活性和癌細胞的增殖抑制作用,從而完成了本發(fā)明。
即本發(fā)明的要點是(1)通式(I)所示的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物, [式中n表示0~3的整數(shù),R1表示氫原子、鹵原子、羥基、氰基、硝基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷酰基或C1~C5烷基磺?;?。)、C2~C5鏈烯基或C2~C5炔基,R2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、(R28SO2)2N-(式中R28表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、MeCOCH2CO-、MeSCH2CH2CO-、NCCH2CO-、 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。),R2、R3中的剩余的一個表示 或 {式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基、c)R8和R9一起表示C=O、或d)R8和R9一起形成環(huán)并表示可以通過介入-O-、-S-、-NR10(式中R10表示氫原子或C1~C5烷基)的C3~C8環(huán)亞烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16a)表示氫原子、b)表示可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,u和j同時表示0時,v表示2~5的整數(shù)。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、-S(O)g-(式中g表示0~2的整數(shù)。)、羰基或-NR20-(式中R20a)表示氫原子、b)表示C1~C5烷基磺?;?、c)表示C1~C5烷酰基、d)表示C1~C5烷氧基羰基或e)表示可以被氰基、羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
(2)根據(jù)上述(1)所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如通式(I)所示, [式中n表示1或2的整數(shù),R1表示鹵原子、氰基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷?;駽1~C5烷基磺酰基。)、或C2~C5炔基,R2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、(R28SO2)2N-(式中R28表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、MeCOCH2CO-、MeSCH2CH2CO-、NCCH2CO-、
(式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示C1~C5烷基。),R2、R3中的剩余的一個表示 或 {式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16表示氫原子、或者可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,u和j同時表示0時,v表示2~5的整數(shù)。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、羰基或NR20-(式中R20表示氫原子、C1~C5烷基磺?;?、C1~C5烷?;?、C1~C5烷氧基羰基或可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或
{式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
(3)根據(jù)上述(1)或(2)中所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如通式(I)所示, [式中n表示0~3的整數(shù),R1表示氫原子、鹵原子、羥基、氰基、硝基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷?;駽1~C5烷基磺?;?。)、C2~C5鏈烯基或C2~C5炔基,R2表示 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。),R3表示 或 {式中R8、R9各自獨立表示氫原子、可以被羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,或者R8和R9一起表示C=O,或者R8和R9一起形成環(huán)并表示可以通過介入-O-、-S-、-NR10(式中R10表示氫原子或C1~C5烷基)的C3~C8環(huán)亞烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16表示氫原子、或可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、-S(O)g-(式中g表示0~2的整數(shù)。)、羰基或-NR20-(式中R20表示氫原子、或者可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
(4)根據(jù)上述(1)~(3)中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如下式(1a)所示。
(5)根據(jù)上述(4)所述的化合物,藥學上可接受的鹽是甲苯亞磺酸的鹽。
(6)下式(1a)所示化合物的甲苯亞磺酸鹽的結(jié)晶。
(7)根據(jù)上述(6)所述的結(jié)晶,在粉末X線衍射圖形中具有以下所示的特征吸收峰(2θ)中的任意一個、任意兩個、任意三個、任意四個、任意五個、任意六個或所有峰,特征吸收峰(2θ、±0.20)3.30、6.60、7.50、9.40、13.90、17.40、19.10(8)根據(jù)上述(4)所述的化合物,水合物是1/2水合物。
(9)下式(1a)所示化合物的1/2水合物的結(jié)晶。
(10)根據(jù)上述(9)所述的結(jié)晶,在粉末X線衍射圖形中具有以下所示的特征吸收峰(2θ)中的任意一個、任意兩個、任意三個、任意四個、任意五個、任意六個或所有峰,特征吸收峰(2θ、±0.20)7.10、10.60、11.90、12.20、13.80、17.30、18.40(11)一種藥物組合物,含有上述(1)~(10)中任一項所述的化合物和藥學上可接受的載體。
(12)一種酪氨酸特異性蛋白激酶抑制劑,以上述(1)~(10)中任一項所述的化合物為有效成分。
(13)根據(jù)上述(12)所述的抑制劑,其中,酪氨酸特異性蛋白激酶是EGF受體酪氨酸特異性蛋白激酶。
(14)根據(jù)上述(12)或(13)所述的抑制劑,酪氨酸特異性蛋白激酶是EGF受體酪氨酸特異性蛋白激酶和HER2酪氨酸特異性蛋白激酶。
(15)一種由于酪氨酸特異性蛋白激酶的活性亢進引起的疾病的治療和/或預防藥,以上述(1)~(10)中任一項所述的化合物為有效成分。
(16)根據(jù)上述(15)所述的治療和/或預防藥,用于抗癌劑、治療和/或預防基于動脈硬化的疾病和干癬。
另外,在以下本發(fā)明中將這些簡單稱為“酪氨酸激酶抑制劑”。
以下對本發(fā)明進行詳細說明。
本發(fā)明的化合物是上述通式(I)所示的喹唑啉衍生物。
作為在所述通式(I)的各取代基中定義的鹵原子,可以舉出氟原子、氯原子、溴原子、碘原子,作為C1~C5烷基,可以舉出甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、新戊基等,作為C1~C5烷氧基,可以舉出甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基等,作為C2~C5鏈烯基,可以舉出乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-甲基丙烯-1-基炔基、2-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基等,作為C2~C5炔基,可以舉出乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、1-戊炔基等,作為C1~C5烷酰基,可以舉出甲酰基、乙酰基、丙?;?、丁酰基、異戊?;?、戊?;取?br>
本發(fā)明的喹唑啉衍生物,通過公知的方法依據(jù)相應的酸或堿轉(zhuǎn)變?yōu)辂}。
作為鹽例如可以舉出鹽酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽等的無機酸鹽;或蟻酸鹽、醋酸鹽、丙酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、安息香酸鹽、苯二甲酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、羥乙基磺酸鹽、葡糖醛酸鹽、葡糖酸鹽等的有機酸鹽。另外,還可以舉出鈉鹽、鉀鹽等的堿金屬鹽;鎂鹽、鈣鹽等的堿土類金屬的鹽;或銨鹽、藥理學上可接受的有機胺鹽(四甲基胺、三乙胺、芐胺、苯乙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三(羥乙基胺)、賴氨酸、精氨酸等)的鹽。
本發(fā)明的喹唑啉衍生物,可以取各種立體結(jié)構(gòu)。例如將手性碳作為中心考慮時,其絕對配置可以是(S)體,也可以是(R)體,或消旋體。純粹形式的光學異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體、這些異構(gòu)體的任意混合物、或消旋體等均包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
另外,式(I)所示的喹唑啉衍生物,例如可以是水合物那樣的溶劑化或非溶劑化的形式存在,本發(fā)明包括具有抗癌活性的所有這種溶劑化形式。
以下,在表1~9中示出了本發(fā)明化合物的優(yōu)選的具體例子。表中Me表示甲基,Et表示乙基,Pr表示丙基。
表1Y1Y1Y1
表2Y1Y1Y1
表3Y2Y2
Y2Y2Y2
表5Y2Y2
表6R2R2R2
表7R2R2R2
表8X1X1X1
表9Ar Ar Ar
在所述通式(I)所示的化合物中,R2、R3中其中一個含有酰胺鍵的化合物,例如可以通過以下路線制備(Schemel)。
[式中R31表示 或 (式中各符號與所述意義相同。),另外,R31結(jié)合在喹唑啉環(huán)的6位或7位中的任何一方,-NH2和-NO2結(jié)合在剩余的一方,其余的符號與所述意義相同。]例如可以由化合物(I’)通過在四氫呋喃(以下稱為THF。)、乙醚等醚類溶劑;甲苯、庚烷等烴類溶劑;二甲基甲酰胺(以下稱為DMF。)、二甲基亞砜(以下稱為DMSO。)、乙腈等非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、叔丁醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合溶劑中,在0~10等量的三乙胺、二乙胺、吡啶、4-(N,N-二甲胺)吡啶(以下稱為DMAP。)等含氮堿或碳酸鈉、碳酸氫鈉等的無機堿的存在下,或在不存在的情況下,以-20℃~200℃溫度使對應的磺酰氯、磺酸酐、酰氯或酸酐反應5分鐘~48小時的方法,或者通過使對應的磺酸或羧酸和例如二環(huán)己基碳化二亞胺等的碳化二亞胺類;羰基二咪唑、二苯基磷?;B氮等的活化劑共存的縮合反應制備化合物(I)。另外,可以由2-鹵乙基磺酰鹵化物和化合物(I’)通過在過剩的三乙胺等的堿存在下或者用堿處理制備乙烯磺酰胺體,另外也可以由化合物(I’)和乙酰基乙烯酮通過在甲苯、乙腈等溶劑中反應而制備乙酰基乙酰胺體。
化合物(I’)可以由對應的硝基化合物(I”)在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯、庚烷等的烴類溶劑、DMF、乙腈等的非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、乙醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合溶劑中,在0.1~10等量的鹽酸、硫酸等的無機酸;醋酸等的有機酸的存在下或者不存在的情況下,用1~50等量的還原鐵、鋅末或氯化錫等以+20℃~+200℃的溫度反應5分鐘~48小時而制備,也可以在0.1~10等量的FeCl3等的鐵鹽存在下通過使肼反應5分鐘~48小時的方法,或者通過基于LiAlH4、NaBH4、NaAlH2(OCH2CH2OMe)2等的金屬配位化合物、NaH等的金屬氫化物的還原方法而制備。
另外,所述通式(I’)、(I”)、(I)的化合物,可以通過如下方法制備。
(Scheme 2) [式中P’表示氨基、硝基、烷氧基、或磺酰胺、丙烯酰胺等的酰胺基,Q表示鹵原子、三氟甲磺?;?OTf)等的消除基,P’和Q結(jié)合在喹唑啉環(huán)的6位或7位上;M表示氫原子、Li、MgBr、SnR3、B(OR)2;M’表示Li、MgBr、SnR3、AlR2、B(OR)2、ZrCp2Cl(式中R表示氫原子或低級烷基,Cp表示環(huán)戊二烯基)等的金屬原子或原子(團)或Br、I等的鹵原子;其它的如同前述定義]。
例如可以由化合物(II’)和化合物(III)或化合物(III’)通過在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯等烴類溶劑;DMF、二甲基亞砜、乙腈等非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、叔丁醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合溶劑中,在0~10等量的三乙胺、二乙胺、吡啶等含氮堿或碳酸鈉、碳酸氫鈉、氟化銫等的無機堿、0.001~0.5等量的Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2、PdCl2、(PPh3)2等的鈀的配位化合物、0.001~0.5等量的CuI等的銅化合物的存在下,以+20℃~+200℃溫度使反應5分鐘~48小時制備化合物(I’)、(II’)或(I)。此時,化合物(III)(M=H)可以使用在THF、乙醚等的醚類溶劑、苯、甲苯等的烴類溶劑中,例如可以使丁基鋰等烷基鋰、溴化乙基鎂等的格利雅試劑作用而調(diào)配的乙炔化物(III)[M=Li、MgX(X表示鹵原子)],另外,在其中也可以使用例如可以使和氯化三烷基錫化合物、氯化鋅或三烷氧基硼化合物作用而調(diào)配的(III)[M=SnR3、ZnCl、B(OR’)2](式中R表示低級烷基、R’表示氫原子或低級烷基)。另外,在(III’)(M’=Br、I)的情況下,可以使該化合物(III’)(M’=Br、I)和(II’)例如在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯等烴類溶劑;DMF、DMSO、乙腈等非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、叔丁醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合溶劑中,在0~10等量的三乙胺、二乙胺、吡啶等含氮堿或碳酸鈉、碳酸氫鈉、氟化銫等的無機堿、0.001~0.5等量的Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2、PdCl2、(PPh3)2或Pd/C等的鈀的配位化合物的存在下,通過使0.5~5等量的六甲基二錫、雙(頻那醇鹽)二甲硼烷共存制備所述通式(I’)、(I”)或(I)所示的化合物。另外,可以使(III’)(M’=Br、I)例如在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯等烴類溶劑,利用正丁基鋰、叔丁基鋰等進行鋰化,形成(III’)(M’=Li)后,與0.001~0.5等量的Pd(PPh3)4、Pd(OAc)2、PdCl2、(PPh3)2等的鈀的配位化合物一起,使與(II’)反應而制備。
由化合物(II’)(P’=NO4)轉(zhuǎn)換為化合物(II’)(P’=NH2)的方法,可以使用由上述化合物(I”)還原為(I’)的方法,由化合物(II’)(P’=NH2)轉(zhuǎn)換為(II’) (P’表示磺酰胺、丙烯酰胺等的酰胺基)可以使用由上述化合物(I’)縮合為(I)的縮合反應。
另外,所述通式(I)所示的化合物中,R2、R3中其中一個以烷氧基表示的化合物也可以通過(II’)(P’表示C1~C5烷氧基)和化合物(III)或化合物(III’)之間的反應制備(Scheme 2)。
另外,所述通式(I’)或(I”)所示的化合物中,R3以 (式中Y、R8、R9、R11、R12以及m與所述定義相同)表示的化合物,可以由所述通式(I’)或(I”)所示的化合物中R3以
(式中Y、R8、R9、R11、R12以及m與所述定義相同)表示的化合物,例如在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯等烴類溶劑;二氯甲烷等鹵代烴、DMF、乙腈等非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、叔丁醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合溶劑中,通過基于將0.0001~0.5等量的Pd/BaSO4、PtO2、Pd/C等作為催化劑的催化加氫還原的方法或例如利用0.1~5等量的LiAlH4、(i-Bu)2AlH、二甲硼烷的氫金屬化反應,接著進行水解的方法而制備。
以下敘述化合物(III)和(III’)的制備方法。
化合物(III),例如可以由對應的炔系化合物(III)(M=H)在THF、乙醚等醚類溶劑;甲苯等烴類溶劑;DMF、乙腈等非質(zhì)子性極性溶劑中或它們的混合溶劑中或在無溶劑的條件下,以-30℃~+150℃的溫度,通過例如利用LiAlH4、(i-Bu)2AlH、R3SnH、Cp2Zr(H)Cl、Cp2TiCl2-RMgX(Cp表示環(huán)戊二烯基,R表示低級烷基,X表示鹵原子)的氫金屬化反應而制備。另外,也可以通過例如利用碘、N-碘化琥珀酰亞胺、N-溴化琥珀酰亞胺等的鹵化劑對它們進行補充而轉(zhuǎn)換為化合物(III’)(M’=Br、I)。
(Scheme 3) [式中R23表示 (式中各符號與上述意義相同。),X1、X2同時或一方表示溴原子或氯原子]。
化合物(III)(M=H)例如可以通過Scheme 3所示的方法進行制備。即,可以在將對應的醇氧化而制備的醛中,通過在二氯甲烷、四氯化碳等適當?shù)娜軇┲?,例如各?.1~10等量的四溴化碳以及三苯基膦,在-20℃~+50℃的溫度下使反應5分鐘~48小時反應的方法或者在THF、乙醚等溶劑或它們的混合溶劑中,例如在-10℃~+100℃的溫度使(EtO)2P(O)CCl3和正丁基鋰等有機鋰化合物反應5分鐘~48小時的方法而制備鹵代鏈烯,進而例如在THF、乙醚等溶劑或它們的混合溶劑中,用正丁基鋰等的有機鋰化合物在-100℃~+100℃的溫度下對其處理5分鐘~48小時后,通過水解的方法制備化合物(III)。也可以根據(jù)需要保護化合物中的官能團而進行該轉(zhuǎn)換。
(Scheme 4) [式中R24表示氫原子或三烷基甲硅烷基,M1表示Li、MgBr或CeCl2等的金屬原子(團),R27表示氫原子、C1~C5烷基或C1~C5烷?;?,R25、R26或各自表示R16-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中各符號與所述意義相同),或和一起形成環(huán), (式中各符號與所述意義相同)或 (式中各符號與所述意義相同。)。]另外,尤其在制備化合物(III)(m=0,M=H,Y如上所定義,但是除去Y=H的情況)時(Scheme 4),可以在對應的酮或醛中,通過在THF、乙醚、甲苯等適當?shù)娜軇┲?,使乙炔基鎂鹵化物、三甲基甲硅烷基乙炔化鋰或可以使它們與例如CeCl3反應而調(diào)配的乙炔基鋰化合物等的乙炔化劑在-100℃~+100℃的溫度反應5分鐘~48小時而制備醇化體(III)(m=0,M=H,Y=OH)。可以由醇化體在二氯甲烷、甲苯、乙腈等的適當溶劑中,在吡啶或者三乙胺等的堿存在下或者這些堿兼作溶劑用,使用醋酸酐等的酸酐、乙酰氯等的酰氯等的?;瘎┗蛲榛u化物、烷基甲磺酸鹽等的烷基化劑,通過在0℃~150℃的溫度下反應5分鐘~48小時而制備?;w或醚化體(III)(m=0,M=H,Y=C1~C5烷氧基、或者C1~C5烷?;?。這里,也可以使用在酮中使乙炔化劑反應后,不單獨分離醇化體,而是利用酸酐、酰氯等的?;瘎┗蛘咄榛瘎┲苯硬蹲较到y(tǒng)中產(chǎn)生的醇化物的方法。另外,可以由醇化體通過在乙腈、甲苯、THF等的適當溶劑中,以-30℃~120℃的溫度在0.0001~0.5等量的適當路易斯酸、例如Sc(OTf)3、BF3·OEt2的存在下,使酸酐、酰氯反應的方法而制備?;w。在使用三甲基乙炔鋰時,可以根據(jù)需要在酰化工序或醚化工序前或者之后進行基于常法的脫三甲基甲硅烷基化處理。
可以由?;w例如在THF、二氯甲烷、甲苯、乙腈等的適當溶劑中,在0.001等量~0.5等量的CuCl,CuI或銅粉等銅化物的存在下,通過使對應的胺在0℃~+100℃的溫度下反應5分鐘~48小時而制備(III)[m=0,M=H,Y=NR25R26(式中R25、R26同所述定義)]。相對于可以通過這種方法制備的(III)[m=0,M=H,Y=NHR16(式中R16同所述定義)],可以通過在THF、乙醚等的醚類溶劑;甲苯、庚烷等的烴類溶劑;DMF、二甲基亞砜、乙腈等的非質(zhì)子性極性溶劑中;甲醇、數(shù)丁醇、水等的質(zhì)子性極性溶劑或它們的混合物溶劑中,在0~10等量的三乙胺、二乙胺、吡啶、DMAP等的含氮堿或碳酸鈉、碳酸氫鈉等的無機堿的存在下,或者不存在的情況下,使對應的羧酸酰氯或酸酐在-20℃~+200℃反應5分鐘~48小時的方法,或者通過基于使對應的羧酸和例如二環(huán)己基碳化二亞胺等的碳化二亞胺類、羰基二咪唑、二苯基磷?;B氮等的縮合劑共存的縮合反應而制備(III)[m=0,M=H,Y=N(R16)-(CO)(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16~R19、j和v與如所述定義]。
在制備化合物(III) (m=1~3,M=H,Y=NR25R26,R25、R26同所述定義,但除去Y=H的情況)時,可以由對應的化合物(III)中Y表示氯、溴等的鹵原子或以甲苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽等的消除基表示的化合物,例如在乙腈、THF、DMF等的適當溶劑中,在碳酸鈉、二異丙基乙胺、氫化鈉等的堿存在下或者不存在的情況下,于-20℃~+150℃的℃下使對應的0.5~100等量的胺反應5分鐘~72小時而制備(III)[m=1~3,M=H,Y=NR25R26(式中NR25、R26同所述定義)]。另外,相對于通過該方法制備的(III)[m=1~3,M=H,Y=NHR16(式中R16同所述定義)],可以通過與上述(III)[m=0,M=H,Y=NHR16(式中R16同所述定義)]的情況下所用的相同的縮合反應而制備化合物(III)[m=1~3,M=H,Y=N(R16)-(CO)(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16~R19、j和v與如所述定義]。
本發(fā)明的喹唑啉衍生物,可以用作相對于酪氨酸激酶活性亢進引起的疾病的治療和/或預防藥,即,抗癌劑、相對于基于動脈硬化作用的疾病(例如缺血性心臟病或急性冠狀動脈癥候群等)或干癬的治療和/或預防藥。
在將所述通式(I)所示的本發(fā)明的化合物用作所述目的時,通常是以全身或局部的口服或者非口服的形式給藥。給藥量根據(jù)年齡、體重、癥狀、治療效果、給藥方法、處理時間等而不同。通常成年人每人一次1mg~5g的范圍,一日一次~數(shù)次口服,或者成年人每人一次1mg~5g的范圍,一日一次~數(shù)次非口服給藥,或者一日1~24小時內(nèi)連續(xù)靜脈給藥。當然,如前述,由于給藥量因各種條件而變化,因此有比上述給藥量還少的量就足夠的情況,也有必須超過上述范圍的情況。
在服用本發(fā)明的化合物時,可以作為用于口服給藥的固體組合物、液體組合物以及其它組合物、用于非口服給藥的注射劑、外用劑、貼劑、栓劑等使用?;衔锟梢詥为毞茫部梢宰鳛楹兴帉W上可接受的賦形劑的藥學上可接受的組合物的一部分服用。也可以同時或依次服用所述通式(I)所示的化合物中的一種以上。
在用于口服的固體組合物中,包括片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等。在膠囊劑中包括硬膠囊和軟膠囊。在這種固體組合物中,一種或兩種以上的活性物質(zhì)至少與一種惰性稀釋劑、例如乳糖、甘露醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微結(jié)晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸鋁酸鎂混合。組合物根據(jù)常法可以含有惰性稀釋劑以外的添加物,例如滑石粉、硬脂酸鎂、固形聚乙二醇、月桂基硫酸鈉類的潤滑劑;纖維素甘油酸鈣類的崩解劑;乳糖類的穩(wěn)定劑;谷氨酸或天冬氨酸類的溶解輔助劑。片劑或者丸劑,根據(jù)需要可以用白糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯等的具有胃溶性或腸溶性物質(zhì)的薄膜進行包衣衣,另外也可以進行兩層以上的包衣。另外,也可以包含如明膠類的可以吸收物質(zhì)的膠囊。
用于口服的液體組合物,含有藥學上可接受的溶液劑、乳濁劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等,還可以含有通常所用的惰性稀釋劑,例如水或其它溶劑;溶解劑以及乳化劑,例如乙二醇,異丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、卞醇、安息香酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、棉籽油、Apios americana oil、玉米胚芽油、橄欖油、蓖麻油以及芝麻油、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇以及山梨聚糖的脂肪酸酯或這些物質(zhì)的混合物等。除了這種惰性稀釋劑以外,其組合物還可以含有潤濕劑、懸濁劑類的輔助劑;甜味劑;風味劑;芳香劑;防腐劑。
懸濁液,除活性化合物外,還可以含有懸濁劑例如乙氧基異硬脂?;?、聚氧化乙烯山梨醇以及山梨聚糖酯、微結(jié)晶性纖維素、甲基羥化鋁,皂土、瓊脂以及西黃芪膠、或者它們的混合物等。
作為用于口服的其它組合物,含有一種或者兩種以上的活性物質(zhì),包括根據(jù)公知的方法形成處方的噴霧劑。該組合物,除含有惰性稀釋劑以外,還可以含有亞硫酸氫鈉類的穩(wěn)定劑和保持等滲透性的緩沖劑,例如氯化鈉、檸檬酸鈉或檸檬酸。噴霧劑的制備方法,已經(jīng)公開在例如美國專利第2868691號和同第3095355號各號公報中。
作為本發(fā)明的用于非口服給藥的注射用組合物,含有生理學上可接受的滅菌后水性或非水性的溶液劑、懸濁劑、乳濁劑。作為水性的溶液劑、懸濁劑,例如含有注射用蒸餾水以及生理鹽水。作為非水性的溶液劑、懸濁劑,例如有丙二醇、聚乙二醇、橄欖油、乙醇、聚山梨醇酯80等。這種組合物還可以進一步含有防腐劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑(例如乳糖)、溶解輔助劑(例如谷氨酸、天冬氨酸)類的輔助劑。它們可以例如通過細菌保留過濾器的過濾、通過殺菌劑的配合或照射進行滅菌。另外,它們也可以在制備無菌的固體組合物后,例如在冷凍干燥品的使用前溶解在無菌水或無菌注射用溶劑中而使用。
作為用于非口服的其它組合物,含有一種或者兩種以上的活性物質(zhì),包括通過常法而形成處方的外用液劑、軟膏、涂敷劑、栓劑以及子宮托等。
圖1表示化合物1a·1/2H2O A型結(jié)晶體的XRD圖形。
圖2表示化合物1a·2TsOH A型結(jié)晶體的XRD圖形。
具體實施例方式
以下列舉實施例和合成例對本發(fā)明進行詳細說明,但是只要是不脫離本發(fā)明宗旨,都包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。本發(fā)明不限于以下實施例。在這些中,只要沒有特殊記載,各操作都按照以下方式進行。
1)反應操作在環(huán)境溫度、即18~25℃,于惰性氣體、例如氮氣氣氛下進行。
2)濃縮通過減壓下旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)進行,干燥例如在無水硫酸鈉上進行,通過過濾除去干燥劑。
3)精制中例如采用重結(jié)晶、在懸濁狀態(tài)下進行攪拌的懸洗、升華、或者柱層析(基于快速層析法)。在柱層析中利用適當?shù)恼归_劑例如氯仿-甲醇等實施。
4)所述通式(I)的目的化合物的結(jié)構(gòu)通過氫(1H或1H)核磁共振(NMR)法(300MHz或270MHz,若沒有特殊記載則為300MHz)和/或質(zhì)譜法來確認。1HNMR若沒有特殊指定,則在氘代二甲基亞砜(DMSO-d6、DMSO-d5)或氘代氯仿(CDCl3、CDCl3)中測定,化學位移值是用以四甲基硅烷(TMS)為基準的δ值(δ.ppm)來表示,峰裂分用以下方式表示s,單峰,d,雙峰,t,三重峰,q,四重峰,m,多重峰,br,寬峰。
5)使用下列簡稱正己烷(Hex或己烷);Ac乙酰基;Ms甲磺?;籘f三氟甲磺?;籈DC1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。
6)粉末X射線衍射圖形,在以下條件下測定。
DiffractometerPHILIPSPW1700TargetCuMonochro.GraphiteTube Voltage40kVTube Current30mADivergence Slit1°Receiving Slit0.2mmScatter Slit1°Range3-40°2θ<合成例11-(1,1-二甲基-2-丙基)-4-甲基哌嗪(4a)>
使醋酸1,1-二甲基-2-丙基酯(2-甲基-3-丁炔-2-基醋酸鹽)(51.5g,408.2mmol)、氯化銅(I)(2.02g,20.4mmol)、三乙胺(56.6mL、408.2mmol)以及1-甲基哌嗪(54.3mL,489.9mmol)的THF(480mL)溶液在回流下反應2小時。濃縮反應液,在殘渣中加入叔丁基甲基醚(200mL),生成物用稀鹽酸萃取。在冰冷下邊攪拌萃取液邊加入6N氫氧化鈉水溶液直至水層顯示堿性,用二氯甲烷萃取(500mL×1,150mL×3)。用14%氨水,接著用飽和食鹽水清洗萃取液,然后干燥濃縮。通過升華精制生成的茶褐色固體(60℃/5~6Torr),得到標題化合物的無色結(jié)晶(49.07g,72%)。
4a1H NMR(CDCl3)δppm1.40(s,6H),2.28(s,1H),2.28(s,3H),2.49(brs,4H),2.69(brs,4H)。
<合成例2 N4-(3-氯-4-氟代苯基)-7-[3-甲基-3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-丁炔基]-4,6-喹唑啉二胺(2a)>
1)在亞硫酰氯(200mL)中加入7-氯-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮和7-氯-8-硝基-3H-喹唑啉-4-酮的混合物(約3∶1,52.0g;Leonard等,J.Org.Chem.1975,40,356-363)以及DMF(0.7mL),加熱回流4小時。將反應液濃縮干燥,加入甲苯(150mL)進一步濃縮。將該操作重復2次后,在殘渣中加入二氯甲烷(280mL),室溫下攪拌。在該懸濁液中滴下3-氯-4-氟苯胺(36.9g,253.6mmol)的異丙烷溶液(760mL)。進而加入二氯甲烷(300mL),在20℃下攪拌20分鐘。在冰冷下加入己烷(600mL),在20℃下繼續(xù)攪拌。濾取沉淀物,用己烷(200mL×2)清洗,減壓下干燥。將所得固體加入甲醇(1L)-水(120mL)中,在冰冷下邊攪拌邊加入三乙胺(30mL)。在室溫下攪拌1小時后,濾取沉淀物,用水(700mL×2)清洗。用乙腈(1.2L)對粗精制物(65g)進行加熱懸洗,過濾得到目的化合物(7-氯-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟代苯基)胺(54.6g,67%)。
2)在(7-氯-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺(14.2g,40.1mmol)、1-(1,1-二甲基-2-丙基)-4-甲基哌嗪(4a)(10.0g,60.1mmol)、碘化銅(I)(380mg)以及四(三苯基膦)鈀(1.39g)的DMF溶液(70mL)中,在50℃下通入氮氣15分鐘后,加入三乙胺(1.39mL,100.0mmol),在油浴溫度140℃下攪拌50分鐘。放冷后濃縮反應液,加入碳酸氫鈉水溶液(300mL)。生成物用乙酸乙酯(200mL×2)萃取,干燥,濃縮。殘渣通過硅膠色譜柱層析(氯仿-甲醇;乙酸乙酯-甲醇),得到目的硝基體的(3-氯-4-氟苯基)-{7-[3-甲基-3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-丁炔基]-6-硝基-4-喹唑啉基}胺(3a)(7.25g,37%)。
3a1HNMR(CDCl3)δppm1.54(s,6H),2.28(s,3H),2.53(s,4H),2.82(s,4H),7.21(t,J=8.7Hz,1H),7.59(m,1H),7.99(m,1H),8.08(s,1H),8.80(s,1H),8.81(s,1H)。
使硝基體3a(3.69g,7.64mmol)、醋酸(5mL)和鐵粉末(1.71g,30.6mmol)的乙醇(100mL)-水(50mL)懸濁液回流20分鐘。在冰冷下向反應液中加入10%碳酸鈉水溶液(90mL),室溫下攪拌1小時后,用C鹽過濾。殘渣用乙醇(150mL×30)清洗,將濾液濃縮后加入水(100mL),濾取析出物,生成物用水清洗。減壓干燥得到目的氨基體的N4-(3-氯-4-氟代苯基)-7-[3-甲基-3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-丁炔基]-4,6-喹唑啉二胺(2a)(3.02g,87%)。
2a1HNMR(CDCl3)δppm1.55(s,6H),2.30(s,3H),2.53(brs,4H),2.80(brs,4H),4.53(brs,2H),6.93(s,1H),7.11(s,1H),7.17(t,J=8.8Hz,1H),7.53(m,1H),7.88(s,1H),7.93(dd,J=2.5,6.5Hz,1H),8.58(s,1H)。
<合成例3(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺>
1)將2,5-二溴-1-硝基苯(4.32g,15.4mmol)的THF溶液(250mL)冷卻至-105℃,緩緩滴下0.88M的苯基鋰/THF溶液(19.8mL,17.4mmol)。30分鐘后,緩緩滴下DMF(5.4mL,69.6mmol),升溫至-20℃。在反應液中加入稀硫酸水溶液(100mL),濃縮后,生成物用乙酸乙酯(80mL×2)萃取。干燥有機層,將濃縮后得到的茶色固體(5.66g)溶解在丙酮(50mL)中。冰冷下,緩緩向該溶液中加入Jones試劑及(20mL),升溫至室溫。在反應液中加入異丙醇后,濃縮。加入2mol/L氫氧化鈉水溶液(100mL),過濾,在濾液中加入濃鹽酸調(diào)制為酸性。濾取析出物,用水清洗殘渣,干燥得到4-溴-2-硝基安息香酸(1.95g,52%)。
1HNMR(DMSO-d6)δppm7.80(brs,1H),7.98(brs,1H),8.25(brs,1H),14.1(brs,1H)。
2)在4-溴-2-硝基安息香酸(1.80g,7.83mmol)中加入0.88N氫氧化鈉水溶液(10mL)、三氯化鐵(1.33mg)、異丙醇(0.7mL),加熱到75℃。邊攪拌邊緩緩加入肼(1.1mL),在75℃反應2小時。過濾反應液,濃縮濾液。析出的固體用水清洗后得到4-溴鄰氨基苯甲酸(1.73g,96%)。
1HNMR(DMSO-d6)δppm6.62(dd,J=1.5,8.5Hz,1H),6.95(d,J=1.5Hz,1H),7.56(d,J=8.5Hz,1H)。
3)在4-溴鄰氨基苯甲酸(1.63g,7.55mmol)中加入醋酸甲脒(1.96g,18.9mmol)和2-甲氧基乙醇(25mL),加熱回流7小時。加入醋酸甲脒(1.45g)后進一步回流6小時。加入稀的氨水(30mL),攪拌一段時間后,濾取生成物,干燥得到目的化合物7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(1.67g,98%)。
1HNMR(DMSO-d6)δppm7.69(dd,J=1.9,8.4Hz,1H),7.89(d,J=1.9Hz,1H),8.04(d,J=8.4Hz,1H),8.14(brs,1H)。
在濃硫酸(3mL)和發(fā)煙硝酸(3mL)的混合溶液中加入7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(1.67g,7.42mmol),在油浴溫度95℃~100℃下加熱1小時。將反應液注入水(50mL)中,濾取生成物。用水清洗后,減壓干燥得到目的化合物7-溴-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮和7-溴-8-硝基-3H-喹唑啉-4-酮的約5.6∶1的混合物(1.3g,65%)。
7-溴-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮1HNMR(DMSO-d6)δppm8.15(s,1H),8.27(s,1H),8.61(s,1H)。
通過與合成例2-1)同樣的方法將該混合物(1.26g)轉(zhuǎn)換為(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺(1.38g,74%)。
(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺1HNMR(DMSO-d6)δppm7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.77(m,1H),8.13(m,1H),8.25(s,1H),8.73(s,1H),9.33(s,1H),10.37(brs,1H)。
<合成例4(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽>
1)在2,5-二溴苯(80g,285mmol)的DMF(500mL)中加入氰化銅(I)(38g,427mmol),在100℃下攪拌1.5小時。將該反應液調(diào)制室溫后,加入甲苯(750mL)-水(1250mL)。然后,加入C鹽(50g)進行充分攪拌,然后濾去不溶物。對濾液進行分配,依次用水(500mL)、1%氨水(250mL×2)、水(250mL)、飽和食鹽水(500mL)清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。得到2-氰基-5-溴硝基苯為主成分的黃色固形物(61.4g)。將其溶解在乙酸乙酯(270mL)中,加入氧化鉑-水合物(330mg,1.35mmol),向反應容器內(nèi)進行氫置換后,在氫氣氛下攪拌41.5小時。濾去不溶物,殘渣用乙酸乙酯(200mL)然后用乙醇(100mL)清洗。減壓蒸餾除去濾液,干燥后,邊使懸濁在乙醚(250mL)中邊加熱回流攪拌。冷卻至室溫后,濾取不溶物得到4-溴鄰氨基苯甲酰胺(40g,186mmol,65%)。
2-氰基-5-溴硝基苯1HNMR(DMSO-d6)δppm8.10(d,J=8.3Hz,1H),8.21(dd,J=1.8,8.3Hz,1H),8.57(d,J=1.8Hz,1H) 4-溴鄰氨基苯甲酰胺1HNMR(DMSO-d6)δppm6.61(dd,J=1.8,8.4Hz,1H),6.81(brs,2H),6.89(d,J=1.8Hz),7.17(brs,1H),7.46(d,J=8.4Hz,1H),7.79(brs,1H)。
2)將1)所得的4-溴鄰氨基苯甲酰胺(40g,186mmol)溶解在乙醇(400mL)中。在冰冷下邊攪拌邊加入甲醇鈉(54.2g,93mmol),然后滴下甲酸乙酯(60.1mL,744mmol),加熱回流1.5小時。將反應液冷卻至室溫后,加入水(500mL),進而加入醋酸(40mL)。減壓下濃縮,進而加入水(200mL),濾取析出物。干燥得到7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(35g,156mmol,84%)。
7-溴-3H-喹唑啉-4-酮1HNMR(DMSO-d6)δppm7.68(dd,J=1.7,8.5Hz,1H),7.88(d,J=1.7Hz,1H),8.03(d,J=8.5Hz,1H),8.14(s,1H)。
3)將2)所得的7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(35g,156mmol)溶解在硫酸(56mL)中,在90℃的油浴上加熱攪拌。在將反應液溫度保持在120℃以下的同時,逐漸少量的滴下發(fā)煙硝酸(56mL)。滴下結(jié)束后,進而在90℃下加熱攪拌1小時。將反應液冷卻至室溫后,倒入冰水(1.5L),濾取析出的固體,用水(500mL)清洗。干燥得到7-溴-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮和7-溴-8-硝基-3H-喹唑啉-4-酮的混合物(約3∶1,37g)。
在其中加入亞硫酰氯(250mL)和DMF(2.5mL)加熱回流2小時。減壓下濃縮干燥反應液。向其中加入二氯甲烷(370mL),在室溫下邊攪拌邊滴下3-氯-4-氟苯胺(21.9g,151mmol)的異丙醇(1.1L)溶液,進-步攪拌4小時。在反應液中加入己烷(1.1L),濾取沉淀物。干燥得到(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽(42.7g,98.4mmol,72%)。
(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽1H NMR(DMSO-d6)δppm7.52(t,J=9.0Hz,1H),7.81(m,1H),8.15(m,1H),8.33(s,1H),8.86(s,1H),9.54(s,1H),11.16(brs,1H)。
4)對于(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽(42.0g,96.8mmol)、1-(1,1-二甲基-2-丙基)-4-甲基哌嗪(4a)(19.3g,116mmol)、三乙胺(42.7mL、339mmol)的DMSO(400mL)溶液,在減壓下脫氣后,進行氮氣置換操作3次,加入碘化銅(I)(460.8mg,2.4mmol)、三苯基膦(2.53g,9.6mmol)、醋酸鈀(II)(543mg、2.4mmol),在80℃下攪拌9小時。將反應液冷卻至室溫后,注入乙酸乙酯(750mL)、1%氨水(1.5L)中,加入C鹽(50g)攪拌。濾去不溶物后,用飽和食鹽水(500mL×2)清洗有機層,用無水硫酸鈉干燥后,減壓下蒸餾除去溶劑。在殘渣中加入乙酸乙酯-甲醇混合溶劑(10∶1,130mL)進行攪拌,濾取析出物。過濾物用乙腈(100mL)進行懸洗,干燥得到硝基體3a(23.3g,48.3mmol,50%)。
<實施例1>
在室溫下將合成例2所得的氨基體2a(6.08g,13.4mmol)、丙烯酸(1.38mL,20.1mmol)、三乙胺(2.8mL,20.1mmol)以及EDC(3.86g,20.1mmol)的DMF(100mL)溶液攪拌一夜。在反應液中加入丙烯酸(0.46mL,6.71mmol)、三乙胺(0.93mL,6.71mmol)以及EDC(1.29g,6.71mmol),進一步攪拌一夜。將反應液倒入碳酸氫鈉水溶液(300mL)中,過濾混合物。殘渣用水-乙醇清洗,干燥。在水-乙醇中加熱攪拌粗精制物后,冷去至室溫。濾取沉淀物,干燥,得到目的化合物1a(3.41g,50%)。
1a1HNMR(DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),2.15(s,3H),2.35(brs,4H),2.64(brs,4H),5.85(d,J=10.3Hz,1H),6.33(d,J=16.9Hz,1H),6.58(dd,J=10.3,16.9Hz,1H),7.47(t,J=9.1Hz,1H),7.84(brs,2H),8.20(brd,J=6.1Hz,1H),8.64(s,1H),8.69(s,1H),9.88(s,1H),10.01(s,1H)。
<實施例2>
利用合成例3得到的(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺和1-(1,1-二甲基-2-丙基)嗎啉(4b),通過與合成例2-2)3)相同的方法得到化合物氨基體。通過與實施例1相同的方法由化合物2b得到化合物1b。
其中反應中所用的4b通過與合成例3相同的方法利用嗎啉來代替嗎啉而制備。
1b(yield 87%)1HNMR(DMSO-d6)δppm1.43(s,6H),2.61(m,4H),4.18(m,4H),5.84(d,J=10.2Hz,1H),6.33(d,J=16.9Hz,1H),6.56(dd,J=10.2,16.9Hz,1H),7.44(t,J=9.1Hz,1H),7.80-8.00(m,2H),7.95(m,1H),8.60-8.70(m,2H),9.85-9.90(m,2H)。
2b(yield 79%)1HNMR(DMSO-d6)δppm1.47(s,6H),2.64(m,4H),3.65(m,4H),5.55(m,2H),7.43(t,J=9.2Hz),7.52(s,1H),7.65(s,1H),7.82(m,1H),8.20(m,1H),8.39(m,1H),9.64(s,1H).
4b(yield 73%)1HNMR(DMSO-d6)δppm1.39(s,6H),2.31(s,1H),2.64(t,J=4.7Hz,4H),3.75(t,J=4.7Hz,4H)。
<合成例5 7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺(5)>
在乙醇(2.5L)中加入還原鐵(84.2g,1.51mol)和1.5mol/L鹽酸(605mL),邊攪拌邊加熱至90℃。每隔30分鐘向該混合液中加入(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺30g,共添加4次。使加熱回流5小時后,將內(nèi)溫調(diào)至50℃,用2當量氫氧化鈉水溶液(450mL)和1當量氫氧化鈉水溶液調(diào)至PH值為7~8,攪拌一段時間。加入乙酸乙酯(1L)和C鹽(300g),繼續(xù)攪拌一段時間,過濾除去C鹽。殘渣用THF-乙酸乙酯(1∶1,1L)清洗,減壓濃縮濾液。在濃縮液中加入水(1L),濾取生成物,減壓下60℃干燥一夜,得到標題化合物(108.76g,98%)。
51HNMR(DMSO-d6)δppm5.77(s,2H),7.43(t,J=9.3Hz,1H),7.60(s,1H),7.80(m,1H),7.94(s,1H),8.18(dd,J=6.9,2.1Hz,1H),8.39(s,1H),9.72(s,1H)。
<合成例6>[4-(1,1-三甲基-2-丙基)-1-哌嗪基]乙腈(4c)的合成在1-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪(350mg,2.3mmol)、碳酸鉀(480mg,3.45mmol)的甲基乙基酮(MEK)懸濁液(10mL)中加入溴代乙腈(0.176mL,2.53mmol)室溫下攪拌30分鐘。反應液用MEK稀釋,過濾。濃縮濾液得到標題化合物的白色固體(0.439g,定量的)。
4c1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.40(s,6H),2.31(s,1H),2.68(brs,8H),3.52(s,2H).
<實施例3>
1)在化合物5(1.0g,2.72mmol)、[4-(1,1-二甲基-2-丙基)-1-哌嗪基]乙腈(4c)(624mg,3.26mmol)中加入三乙胺(15mL)和DMF(3.5mL)。對于該混合液進行減壓脫氣,進行氮氣置換3次,加入三苯基膦(35mg,0.16mmol)以及醋酸鈀(II)(18mg,0.08mmol),在80℃攪拌4小時。將反應液冷卻至室溫后,減壓蒸餾除去溶劑。在殘渣中加入碳酸氫鈉水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層依次用水、飽和食鹽水清洗后,用無水硫酸鈉干燥,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣用硅膠柱色譜層析(乙酸乙酯-甲醇),得到目的偶合化合物2c(1.07g,82%)。
2c1HNMR(270 MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),2.56(brs,4H),2.70(brs,4H),3.73(s,2H),5.54(s,2H),7.42(t,J=8.9Hz,1H),7.51(s,1H),7.64(s,1H),7.81(m,1H),8.20(dd,J=6.9,2.4Hz,1H),8.39(s,1H),9.64(s,1H)。
2)在室溫下將化合物2c(500mg,1.04mmol)、丙烯酸(0.36mL,5.2mmol)、三乙胺(0.22mL,1.56mmol)以及EDC(297mg,1.56mmol)的DMF(7mL)溶液攪拌一夜。減壓蒸餾除去反應液,將反應液倒入碳酸氫鈉水溶液(70mL)中,過濾混合物。殘渣用水-乙醇清洗。粗精制物通過硅膠柱色譜層析,將得到的固形物用水-乙醇重結(jié)晶,得到目的化合物1c(38mg,61%)。
1c1HNMR(DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),2.50(brs,4H),2.67(brs,4H),3.71(s,2H),5.84(d,J=10.1Hz,1H),6.32(d,J=16.9Hz,1H),6.56(dd,J=16.9,10.1Hz,1H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.84(brs,2H),8.18(brd,J=6.8Hz,1H),8.63(s,1H),8.67(s,1H),9.89(s,1H),9.99(s,1H)。
<實施例4~25>
將與7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺(5)對應的炔系化合物4用作起始物質(zhì),通過與實施例3相同的方法如下所示地制備氨基體2、化合物1(scheme 5)。各自的光譜數(shù)據(jù)表示在表10中。
Scheme 5
表10
表10
表10
表10
表10
表10
表10
表10
<合成例7~12>炔系4的合成在所述實施例3~25中作為起始物質(zhì)使用的炔系化合物4,除去下述合成例所示的情況之外,根據(jù)合成例1的方法合成。另外,根據(jù)情況使用變換為相應的鹽酸鹽(4N鹽酸-乙酸乙酯)。收率和1HNMR光譜數(shù)據(jù)記在表中。
<合成例7>
4g在冰冷下攪拌乙炔基鎂鹵化物的0.5M THF溶液(360mL,180mmol),滴下1,3-二乙氧基丙酮(21.93g,150mmol)。在冰冷下攪拌30分鐘后,滴下醋酸酐(18.4mg,195mmol),室溫下攪拌1小時。反應結(jié)束后,加入氯化氨水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水清洗,用無水硫酸鎂干燥,通過濃縮得到1,1-雙乙氧基甲基-2-丙基酯(31.36g,97%)。
使醋酸1,1-雙(乙氧基甲基)-2-丙基酯(15.00g,70mmol)、和1-甲基哌嗪(8.41g,84mmol)、氯化銅(I)(350mg)、三乙胺(9.7mL、70mmol)溶解在THF(150mL)溶液中,加熱回流2小時。反應結(jié)束后,在反應液中加入tBuOMe,用3N鹽酸萃取。用6N氫氧化鈉水溶液將萃取液中和后,用乙酸乙酯萃取,有機層用7%氯化氨水溶液和水清洗后,用無水硫酸鎂干燥,通過濃縮得到標題化合物4g(15.30g,86%)。
<合成例8>
4o將1-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪-4-醇4k[作為起始物質(zhì)使用4-羥基哌嗪,根據(jù)合成例1的方法合成,收率為54%](6.0g,36.0mmol)溶解在THF(100mL)中,加入NaH(1.73g)和碘甲烷(7.7g),室溫下攪拌一天。濃縮反應液,加入水,用二氯甲烷萃取,有機層用硫酸鎂干燥。濃縮有機層后,將殘渣溶解在乙酸乙酯中,在冰冷下滴加4N鹽酸-乙酸乙酯(9mL),濾取生成的沉淀物,干燥得到4o·HCl(4.0g,51%)。
<合成例9>
4m在冰冷下攪拌4-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪[作為起始物質(zhì)使用過剩的哌嗪(2.5等量),根據(jù)合成例1的方法合成,收率為42%](6.0g,40.0mmol)、吡啶(3.50mL)的二氯甲烷溶液(60mL),加入甲磺酰氯(5.6g)。緩慢升溫至室溫后,加入水用二氯甲烷萃取。萃取液依次用硫酸銅水溶液、水、以及飽和食鹽水清洗,用硫酸鎂干燥。濃縮有機層得到化合物4m的淡黃色固體(7.80g,85%)。
<合成例10>
4r將1-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪(5.0g,33mmol)、2-氯乙基甲基醚(4.7g,50mmol)、碘化鈉(35.0g,233mmol)、碳酸鉀(9.2g,66mmol)懸濁于甲基乙基酮(150mL)中,將反應液加熱回流3天。減壓蒸餾除去溶劑,在殘渣中加入乙酸乙酯,用3N鹽酸萃取。萃取液用6N氫氧化鈉水溶液中和后,用二氯甲烷萃取,有機層用水清洗后,用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸餾除去溶劑后,將殘渣溶解在乙酸乙酯中,加入4N鹽酸-乙酸乙酯(17.0mL)。過濾析出的結(jié)晶,減壓干燥得到化合物4r的淡黃色結(jié)晶(7.44g,79%)。
<合成例11>
4s將1-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪(5.0g,33mmol)、丙烯腈(2.6g,49mmol)溶解在甲醇(50mL)中,室溫下攪拌3小時,55℃下攪拌4小時。濃縮反應液,減壓干燥得到化合物4s的黃白色結(jié)晶(6.51g,96%)。
<合成例12>
4v使甲苯-4-磺酸3-丁炔基酯(4.0g,17.8mmol)、嗎啉(2.94mL,26.7mmol)、碳酸鉀(2.96g,21.4mmol)的乙腈懸濁液(40mL)回流2.5小時。放冷后,過濾混合物,殘渣用tBuOMe(20mL)清洗。濃縮濾液,加入tBuOMe(40mL),生成物用3N鹽酸(30mL×1,10mL×1)萃取。在萃取液中加入6N氫氧化鈉水溶液直至顯示堿性,用二氯甲烷(40mL×1,20mL×1)萃取。有機層干燥濃縮,得到化合物4v的油狀物質(zhì)(2.44g,98%)。將該油狀物4v(3.94g,28.2mmol)溶解在乙醚(20mL)中,在冰浴上邊攪拌邊滴下4N鹽酸-乙酸乙酯(7.8mL,31.2mmol)。在室溫下攪拌30分鐘后,濾取析出物,殘渣用乙醚清洗后,通過減壓干燥得到化合物4v·HCl的白色固體(3.78g,76%)。
<實施例26>
1)在三乙胺(5.5mL,40mmol)的乙醇溶液(30mL)中,于室溫下加入二乙胺鹽酸鹽(3.26g,40mmol)、四異丙醇鈦(11.8mL,40mmol)以及1-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪-4-酮(41)(3.3g,20mmol)。攪拌7小時后,加入NaBH4(1.13g,30mmol),在室溫下攪拌一夜。將反應液倒入5%氨水(80mL)中,加入二氯甲烷(100mL)。C鹽過濾混合物,濾取物用二氯甲烷(30mL×3)清洗。將有機層分液后干燥,通過硅膠柱濾過。濃縮濾液,使所得固體在減壓下升華(油浴溫度約100℃/0.1mmHg),得到[1-(1,1-二甲基-2-丙基)-4-哌嗪基]二甲基胺(4aa)的無色結(jié)晶。
2)對于7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺(5)(557mg,1.52mmol)、化合物4aa(383mg,1.97mmol)、三乙胺(12mL的DMF(2.4mL)溶液,在減壓下脫氣后,進行氮氣置換操作3次,加入三苯基膦(24mg,0.09mmol)、醋酸鈀(II)(10mg、0.05mmol),在80℃下攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫后,減壓蒸餾除去溶劑。在殘渣中加入碳酸氫鈉水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層依次用水(×3)、飽和食鹽水清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑,得到氨基體2aa。
3)在室溫下將氨基體2aa(690mg,1.43mmol)、丙烯酸(0.49mL,7.2mmol)、三乙胺(0.30mL,2.15mmol)以及EDC(410mg,2.15mmol)的DMF(8mL)溶液攪拌一夜。減壓蒸餾除去反應液,在殘渣中加入飽和碳酸氫鈉水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層依次用水(×3)、飽和食鹽水清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。粗的精制物通過硅膠柱色譜層析(氯仿-甲醇-三乙胺)精制,將所得的粗精制物用水-乙醇重結(jié)晶,得到目的化合物1aa(127mg,16%)。
1aa1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.32(brd,2H),1.44(s,6H),1.76(brd,J=11.2Hz,2H),1.99(m,1H),2.15(brs,8H),3.10(brd,J=11.3Hz,2H),5.84(d,J=10.1Hz,1H),6.33(d,J=17.0Hz,1H),6.56(dd,J=17.0,10.1Hz,1H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.84(brs,2H),8.19(brd,J=7.2Hz,1H),8.63(s,1H),8.66(s,1H),9.91(s,1H),9.99(s,1H)。
<實施例27>
1)對于將根據(jù)合成例4記載的方法制備的(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽在水-甲醇中用三乙胺處理所得的(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺(3.0g,7.55mmol)和根據(jù)合成例1的方法合成的炔系4ab(1.76g,9.06mmol)、以及三乙胺(60mL)的DMF溶液(9mL),在減壓下脫氣后,進行氮氣置換操作3次,加入三苯基膦(118mg,0.46mmol)、醋酸鈀(II)(51mg、0.23mmol),在80℃下攪拌3小時。將反應液冷卻至室溫后,減壓蒸餾除去溶劑。在殘渣中加入碳酸氫鈉水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層依次用水(×3)、飽和食鹽水清洗,用無水硫酸鎂干燥后,減壓蒸餾除去溶劑,得到硝基體3ab。
3ab1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),1.66(m,4H),1.95(m,2H),2.14(s,3H),2.33(s,3H),2.79(brd,J=11.6Hz,2H),2.97(m,1H),7.48(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),7.88(s,1H),8.16(brd,J=7.0Hz,1H),8.73(s,1H),9.45(s,1H),10.45-10.55(brs,1H)。
4ab[根據(jù)合成例1的方法合成,收率69%]1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.31(s,6H),1.45-1.72(m,4H),1.77-1.93(m,2H),2.11(s,3H),2.21(s,3H),2.70-2.95(m,3H),3.10(s,1H)。
2)使硝基體3ab、1N鹽酸(22.5mL,22.5mmol)和鐵粉末(2.09g,37.5mmol)的乙醇(70mL)混合溶液回流1.5小時。在將反應液調(diào)制50℃后,加入1N氫氧化鈉水溶液(22.5mL,22.5mmol),在50℃下攪拌30分鐘,將反應液調(diào)至室溫后,用C鹽過濾。殘渣用乙酸乙酯清洗,將濾液濃縮后,在殘渣中加入碳酸氫鈉水溶液,用乙酸乙酯萃取。有機層依次用水(×3)、飽和食鹽水清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑,使殘渣懸濁在乙腈中,在加熱回流下攪拌。調(diào)至室溫后,濾取得到目的氨基體2ab(2.78g,76%)。
2ab1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.50(s,6H),1.66(m,4H),1.92(m,2H),2.13(s,3H),2.33(s,3H),2.79(brd,J=10.8Hz,2H),2.99(m,1H),5.53(s,2H),7.42(t,J=9.2Hz,1H),7.50(s,1H),7.57(s,1H),7.80(m,1H),8.21(dd,J=7.0,2.4Hz,1H),8.39(s,1H),9.63(s,1H)。
3)通過與實施例26-3)相同的方法將氨基體2ab轉(zhuǎn)換為目的化合物1ab(收率33%)。
1ab1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),1.63(m,4H),1.86(m,2H),2.10(s,3H),2.30(s,3H),2.74(brd,J=10.8Hz,2H),2.92(m,1H),5.85(d,J=10.0Hz,1H),6.33(d,J=17.0Hz,1H),6.56(dd,J=17.0,10.0Hz,1H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.78(s,1H),7.81(m,1H),8.18(brd,J=6.6Hz,1H),8.62(s,1H),8.66(s,1H),9.88(s,1H),9.99(s,1H)。
<實施例28>
作為起始物質(zhì)使用通過與合成例12相同的方法由1-甲基哌嗪和甲苯-4-磺酸3-丁炔基酯合成的4ac(收率80%)和(7-溴-6-硝基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺,通過與上述實施例27相同的方法轉(zhuǎn)換為3ac、2ac和1ac。] 4ac1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.97(t,J=2.6Hz,1H),2.28(s,3H),2.38(dt,J=2.6,7.7Hz,2H),2.46(brs,4H),2.53(brs,4H),2.61(t,J=7.7Hz,2H)。
3ac1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm2.13(s,3H),2.33(brs,4H),2.47(brs,4H),2.59-2.73(m,4H),7.48(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.90(s,1H),8.14(dd,J=6.8,2.4Hz,1H),8.72(s,1H),9.38(s,1H),10.42(brs,1H)。
2ac1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm2.16(s,3H),2.36(brs,4H),2.47(brs,4H),2.60(t,J=6.5Hz,2H),2.72(t,J=6.5Hz,2H),5.86(s,2H),7.42(t,J=9.2Hz,1H),7.46(s,1H),7.58(s,1H),7.81(m,1H),8.20(dd,J=6.8,2.7Hz,1H),8.37(s,1H),9.60(s,1H)。
1ac1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm2.15(s,3H),2.32(brs,4H),2.46(brs,4H),2.60-2.69(m,4H),5.86(d,J=10.0Hz,1H),6.35(d,J=17.0Hz,1H),6.65(dd,J=17.0,10.0Hz,1H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.81(brs,2H),8.16(brd,J=7.0Hz,1H),8.60(s,1H),8.78(s,1H),9.86(s,1H),10.00(s,1H)。
<實施例29>
在氫氣氛下,于室溫將化合物2a(2.40g,5.3mmol)、10%鈀碳(170mg)的THF(15mL)-乙醇(15mL)混合液攪拌12小時。將反應液進行C鹽過濾,濃縮濾液,殘渣通過硅膠柱色譜層析(氯仿-甲醇)得到氨基體[m/z=455(M+1)](1.69g,70%)。在室溫下將該氨基體(330mg,0.73mmol)、EDC(278mg,1.45mmol)、丙烯酸(99μL)、三乙胺(200μL)的DMF溶液(2mL)攪拌一夜。在反應液中加入碳酸氫鈉水溶液(40mL),用乙酸乙酯(40mL×1,20mL×1)萃取。干燥并濃縮萃取液,得到的粗精制物通過硅膠柱色譜層析(氯仿-甲醇-三乙胺),用乙腈懸洗,得到目的化合物1ad(200mg,54%)。
1ad1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm0.96(s,6H),1.99(s,3H),2.00-2.25(m,4H),2.25-2.60(m,4H),5.73(d,J=12.9Hz,1H),5.81(d,J=10.4Hz,1H),6.30(d,J=16.9Hz,1H),6.48(d,J=12.9Hz,1H),6.59(dd,J=10.4,16.9Hz,1H),7.45(t,J=9.1Hz,1H),7.80-7.92(m,1H),7.90(s,1H),8.20(dd,J=2.2,6.7Hz,1H),8.61(s,1H),9.80(s,1H),9.92(s,1H)。
<實施例30>
在80℃下將化合物4ac(333mg,2.18mmol)、三丁基錫氫化物(764mg,2.62mmol)以及2,2’-偶氮二異丁腈(4mg,0.02mmol)的混合物攪拌2小時。在該溶液中加入化合物5(670mg,1.80mmol)、醋酸鈀(II)(10mg)、三苯基膦(24mg)、DMF(1.3mL)以及三乙胺(7mL),在80℃攪拌4小時。在該反應混合物中加入Pd2(dba)3(dba=dibenzylidenacetone)(15mg),在回流下進一步攪拌4小時。放冷后加入氟化鉀水溶液(50mL),室溫下攪拌一段時間。生成物用乙酸乙酯萃取(50mL×1,20mL×2),干燥并濃縮有機層。殘渣通過硅膠柱色譜層析(氯仿-甲醇-三乙胺),得到含有目的物的油狀物質(zhì)(1.02g)。利用該油狀物質(zhì)(500mg)和EDC(345mg,1.8mmol)、丙烯酸(0.123mL,1.8mmol)、三乙胺(0.25mL,1.8mmol)以及DMF(4.0mL),通過與實施例1相同的方法進行反應。粗精制物通過硅膠柱色譜層析(氯仿-甲醇-三乙胺),在所得的油狀物質(zhì)(180mg)中加入少量的乙腈,使結(jié)晶。進而加入乙腈(4mL),回流下進行攪拌,冷卻至室溫,濾取析出物,得到目的化合物1ae(95mg,理論收率21%)。
1ae1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm2.14(s,3H),2.10-2.50(m,12H),5.82(dd,J=1.5,10.2Hz,1H),6.29(dd,J=1.5,17.1Hz,1H),6.52(dt,J=6.0,15.8 Hz,1H),6.58(dd,J=10.2,17.1Hz,1H),6.67(d,J=15.8Hz,1H),7.42(t,J=9.1Hz,1H),7.80(m,1H),7.90(s,1H),8.15(dd,J=2.6,6.8Hz,1H),8.51(s,1H),8.56(s,1H),9.88(s,1H),10.03(s,1H)。
<實施例31>1a·2對甲苯磺酸鹽(1a·2TsOH)在乙醇-乙酸乙酯溶液(1∶7,140mL)中加入化合物1a(10.00g)攪拌,過濾,在[用乙醇-乙酸乙酯(1∶7,10mL)清洗]所得的溶液中,將對甲苯磺酸(TsOH)·1水合物(7.37g)溶解在乙醇-乙酸乙酯溶液(1∶7,20mL)中,在室溫下加入過濾[乙醇-乙酸乙酯(1∶7,10mL)清洗]所得溶液。室溫下攪拌3小時后,濾取生成的固體,減壓下70℃干燥5小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(15.96g)。
1a2TsOH1HNMR(DMSO-d6)δppm1.49(s,6H),2.27(s,6H),2.59(m,2H),2.81(s,3H),3.06(m,2H),3.28(m,2H),3.48(m,2H),5.91(d,J=10.2Hz,1H),6.38(d,J=16.9Hz,1H),6.62(dd,J=10.2Hz,16.9Hz,1H),7.10(d,J=7.9Hz,2H),7.49(d,J=7.9Hz,2H),7.57(t,J=9.0Hz,1H),7.72(m,1H),7.93(s,1H),8.05(dd,J=2.5Hz,6.8Hz,1H),8.88(s,1H),8.94(s,1H),9.39(brs,1H),10.10(s,1H),11.32(brs,1H)。
<實施例32>1a·3鹽酸鹽(1a·3HCl)在THF(40mL)中加入化合物1a(1.549g)攪拌,并將其過濾[用THF(6.5mL)清洗]所得的溶液冰冷,滴下4當量鹽酸-乙酸乙酯溶液(2.37mL)。冰冷下攪拌5小時后,過濾,減壓干燥,得到標題化合物的黃色固體(1.89g)。
1a 3HCl1HNMR(DMSO-d6)δppm1.75(s,6H),2.86(s,3H),3.25-3.90(m,8H),5.90(dd,J=1.9,10.3Hz,1H),6.39(dd,J=1.9,17.0Hz,1H),6.86(dd,J=10.3,17.0Hz,1H),7.58(t,J=9.2Hz,1H),7.74(m,1H),8.04(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.22(s,1H),8.97(s,1H),9.05(s,1H),10.47(s,1H)。
<實施例33>1a·2鹽酸鹽(1a·2HCl)在THF(38mL)中加入1a(1.27g)溶解,邊攪拌邊滴下4當量鹽酸-乙酸乙酯溶液(1.28mL)。室溫下攪拌一夜后,過濾,通過干燥得到標題化合物的白色固體(1.17g)。使該粗結(jié)晶(0.16g)懸浮在異丙醇(IPA)-THF(1∶1,10mL)中,在油浴溫度70℃攪拌。放冷后,濾取生成物,減壓下干燥,得到標題化合物的結(jié)晶性粉末(78mg)。
1a 2HCl1HNMR(DMSO-d6)δppm1.55(s,6H),2.80(s,3H),2.90-3.80(m,8H),5.90(dd,1H),6.39(dd,1H),6.70(dd,,1H),7.55(t,1H),7.75(m,1H),8.05(dd,1H),8.08(s,1H),8.91(s,2H),10.30(s,1H).元素分析(計算值)(作為C27H30Cl3FN6O 0.1IPA 0.5H2O)C,55.11;H,5.39;Cl,17.88;N,14.13;(分析值)C,55.26;H,5.19;Cl,17.72;N,14.12。
<實施例34>1a·鹽酸鹽(1a·HCl)在THF(3mL)中加入化合物1a(150mg),對所得溶液進行冰冷,邊攪拌邊滴下4當量鹽酸-乙酸乙酯溶液(81μL)。室溫下攪拌一夜后,濾取,減壓干燥,得到標題化合物的白色固體(140mg)。
1a HCl1HNMR(DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),2.78(s,3H),2.61(m,2H),3.02(m,2H),3.10-3.75(m,4H),5.85(dd,1H),6.39(dd,1H),6.70(dd,1H),7.58(t,1H),6.80(m,1H),7.92(s,1H),8.20(m,1H),8.65(s,1H),8.70(s,1H),10.10(br.3H)。
<實施例35>1a·2甲磺酸鹽(1a·2MsOH)在THF(30mL)中加入化合物1a(1.50g),溶解,滴下3當量鹽酸-甲磺酸(MsOH)-THF溶液(1.99mL)。室溫下攪拌一夜后,加入THF(15mL)濾取,減壓下干燥,得到標題化合物的白色固體(1.98g)。
1a 2MsOH1HNMR(DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),2.34(s,6H),2.81(s,3H),2.40-2.70(m,2H),2.90-3.80(m,6H),5.90(dd,1H),6.39(dd,1H),6.55(m,1H),7.54(t,1H),7.75(m,1H),7.95(s,1H),8.10(m,1H),8.84(s,1H),8.87(br,1H)10.04(s,1H)。
<實施例36>1a·對甲苯磺酸鹽(1a·TsOH)在乙酸乙酯(70mL)中加入化合物1a(1.00g),溶解,在室溫下邊攪拌邊滴下0.25當量對甲苯磺酸-乙酸乙酯溶液(8.27mL)。室溫下攪拌2小時后,濾取,減壓下干燥,得到標題化合物的白色固體(1.23g)。
1aTsOH1HNMR(DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.28(s,3H),2.50(m,2H),2.80(s,3H),3.06(m,2H),3.20-3.70(m,4H),5.90(d,1H),6.38(d,1H),6.60(dd,,1H),7.10(d,J=7.9Hz,2H),7.40-7.60(m,3H),7.80(m,1H),7.92(s,1H),8.10(m,1H),8.70(s,1H),8.79(s,1H),9.35(br,1H),9.98(s,1H),10.20(br,1H)。
<實施例37>1a·乙二磺酸鹽 在丙酮(4mL)中加入化合物1a(100mg),溶解,在室溫下邊攪拌邊滴下0.5當量對乙二磺酸-丙酮溶液(0.4mL)。室溫下攪拌一夜后,濾取,減壓下干燥,得到標題化合物的白色固體(89mg)。
1a(CH2SO3H)21HNMR(DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.60(m,2H),2.70-2.90(m,7H),2.90-3.80(m,6H),5.90(d,1H),6.38(d,1H),6.60(dd,1H),7.50(t,1H),7.80(m,1H),7.97(s,1H),8.12(m,1H),8.76(s,2H),9.40(br,1H),10.03(s,1H),10.50(br,1H)。
<實施例38>1a·2乙二磺酸鹽 在丙酮(2mL)中加入化合物1a(100mg),溶解,在室溫下邊攪拌邊滴下0.5當量對乙二磺酸-丙酮溶液(0.8mL)。室溫下攪拌一夜后,濾取,減壓下干燥,得到標題化合物的白色固體(122mg)。
1a2(CH2SO3H)21HNMR(DMSO-d6)δppm1.60(d,J=2.6,6H),2.70-3.00(m,13H),3.20(m.2H),3.60(m,4H),5.40(d,1H),6.60(dd,1H),7.60(t,1H),7.70(m,1H),8.00(s,1H),8.10(d,1H),8.92(s,1H),9.00(s,1H),9.80(br,1H),10.20(s,1H)。
<實施例39>1a·2苯磺酸鹽(1a·2PhSO3H)在丙酮(3mL)中加入化合物1a(100mg),溶解,在室溫下邊攪拌邊滴下0.5當量對苯磺酸-丙酮溶液(0.8mL)。室溫下攪拌一夜后,濾取,減壓下干燥,得到標題化合物的白色固體(60mg)。
1a2PhSO3H1HNMR(DMSO-d6)δppm1.49(s,6H),2.60(m,2H),2.81(s,3H),3.10(m,2H),3.30(d,2H)3.50(d,2H),5.90(d,1H),6.39(d,1H),6.60(dd,1H)7.32(m,6H),7.60(m,5H),7.75(m,1H),7.92(s,1H),8.07(m,,1H),8.88(s,1H),8.96(s,1H),9.40(br,1H),10.10(s,1H)。
<實施例40>1a·1/2水合物(1a·1/2H2O)A型結(jié)晶體的調(diào)制(1)在化合物1a(900g)中加入丙酮(126mL),加熱到內(nèi)溫53℃并攪拌。固體完全溶解后,在攪拌溶液的同時,用7個小時將溶液冷卻至內(nèi)溫24℃。濾取析出物,濾上物用丙酮清洗,減壓下80℃干燥4小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(7.32g,81%)。
該結(jié)晶的XRD圖形如圖1所示,將本結(jié)晶設為A型結(jié)晶。另外,圖1所示的特征峰如下所示。
特征峰(2θ、±0.20)7.1°,10.6°,11.9°,12.2°,13.8°,17.3°,18.4°IR(KBr)vcm-13376,2809,1676,1628,1562,1535,1497,1421,1213,1177.
熔點131~133℃元素分析(計算值)(作為C27H28ClFN60·1/2 H2O)C,62.85;H,5.66,N,16.29;(分析值)C,62.68;H,5.58,N,16.14;<實施例41>1a·1/2H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(2)在化合物1a(150mg)中加入甲苯(3.0mL),以懸濁液的狀態(tài)室溫攪拌69小時。過濾懸濁液,濾上物用甲苯清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃白色結(jié)晶(131mg,87%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例42>1a·1/2H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(3)在化合物1a(150mg)中加入THF(1.0mL),加熱到內(nèi)溫70℃。固體完全溶解后,邊攪拌溶液,邊緩緩滴下庚烷(1.3mL),冷卻至室溫。濾取析出物,濾上物用THF-庚烷(1∶2)清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(90.5mg,59%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
元素分析(計算值)(作為C27H28ClFN60·1/2 H2O)C,62.85;H,5.66;N,16.29;(分析值)C,62.68;H,5.58,N,16.14。
<實施例43>1a·1/2H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(4)在化合物1a(200mg)中加入乙酸乙酯(2.0mL),加熱到內(nèi)溫70℃。固體完全溶解后,邊攪拌溶液,邊緩緩滴下庚烷(3.0mL),冷卻至室溫。濾取析出物,濾上物用乙酸乙酯-庚烷(1∶2)清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(119mg,79%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例44>1a·2TsOH A型結(jié)晶體的調(diào)制(1)在以實施例31的方法得到的粗結(jié)晶(568.23g)中加入乙醇(3.41L),邊攪拌邊加熱到內(nèi)溫約70℃。固體完全溶解后,在攪拌溶液的同時,(攪拌速度約90rpm),用16小時冷卻至內(nèi)溫26℃。濾取析出物,濾上物用乙醇清洗,減壓下60℃干燥20小時,75℃干燥12小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(488.57g,85%)。
本結(jié)晶的XRD圖形表示在圖2中,將本結(jié)晶設為A型結(jié)晶。另外,圖2所示的特征峰如下所示。
特征峰(2θ、±0.20)3.3°,6.6°,7.5°,9.4°,13.9°,17.4°,19.1°熔點208.5~210℃元素分析(計算值)[作為C41H44ClFN6O7S2·1/2H2O(1a·2TsOH/·1/2H2O)]C,57.23;H,5.27;N,9.77;S,7.45(分析值)C,57.05;H,5.09,N,9.74;S,7.45<實施例45>1a·2TsOH A型結(jié)晶體的調(diào)制(2)在以實施例31的方法得到的粗結(jié)晶(148mg)中加入異丙醇(5.0mL),邊攪拌邊加熱到內(nèi)溫約80℃。固體完全溶解后,在攪拌溶液的同時,冷卻至室溫。濾取析出物,濾上物用異丙醇清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(133mg,90%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例46>1a·2TsOH A型結(jié)晶體的調(diào)制(3)在以實施例31的方法得到的粗結(jié)晶(107mg)中加入THF(8.0mL),在室溫下攪拌懸濁液65小時。過濾懸濁液,濾上物用THF清洗,減壓下60℃干燥3小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(97mg,90%)。本結(jié)晶的XED圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例47>1a·2TsOH A型結(jié)晶體的調(diào)制(4)在以實施例31的方法得到的粗結(jié)晶(147mg)中加入乙腈(6.5mL),邊攪拌邊加熱到內(nèi)溫約70℃。固體完全溶解后,在攪拌溶液的同時,冷卻至室溫。濾取析出物,濾上物用乙腈清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(113mg,77%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例48>1a·2TsOH A型結(jié)晶體的調(diào)制(5)在以實施例31的方法得到的粗結(jié)晶(158mg)中加入乙醇(2.5mL),邊攪拌邊加熱到內(nèi)溫約80℃。固體完全溶解后,在攪拌溶液的同時,滴下乙酸乙酯(8.0mL),冷卻至室溫。濾取析出物,濾上物用乙醇-乙酸乙酯(1∶5)清洗,減壓下60℃干燥6小時,得到標題化合物的淡黃色結(jié)晶(125mg,79%)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例49>1a·3HCl·4H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(1)在以實施例32的方法得到的粗結(jié)晶(12.73g)中加入甲醇(310mL),在攪拌下油浴溫度加熱到70℃。固體完全溶解后,在同一溫度下,在攪拌同時,緩緩滴下乙酸乙酯(120mL)。之后邊攪拌該溶液,邊緩緩冷卻至室溫。濾取析出物,減壓下50℃干燥4小時。將得到的結(jié)晶在乳缽內(nèi)粉碎,在75%的濕度條件下,在室溫調(diào)濕3天,得到標題化合物的無色結(jié)晶(10.00g)。
測定本結(jié)晶的XRD圖形,將本結(jié)晶形設為A型結(jié)晶體。
元素分析(計算值)[作為C27H39Cl4FN6O5(1a·3HCl·4H2O)]C,47.10;H,5.71;N,12.21;Cl,20.60;(分析值)C,47.29;H,4.67,N,12.31;Cl,20.45水分析(卡爾-費希爾法)(計算值)10.46%;(分析值)10.20%(水氣化-電量滴定法);10.15%(容量滴定法)<實施例50>1a·3HCl·4H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(2)在以實施例32的方法得到的粗結(jié)晶(0.400g)中加入甲醇(17mL),在攪拌下油浴溫度加熱到70℃。固體完全溶解后,在同一溫度下,在攪拌同時,邊緩緩冷卻至室溫。濾取析出物,減壓下80℃干燥7小時,得到標題化合物的無色結(jié)晶(0.242g)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。<實施例51>1a·3HCl·4H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(3)在以實施例32的方法得到的粗結(jié)晶(0.400g)中加入水(8.0mL),在室溫下攪拌。固體完全溶解后,在攪拌同時,在室溫下加入丙酮(50mL)。濾取析出物,減壓下80℃干燥7小時,得到標題化合物的無色結(jié)晶(0.143g)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例52>1a·3HCl·4H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(4)在以實施例32的方法得到的粗結(jié)晶(0.400g)中加入乙腈(6mL),在室溫下攪拌2小時。過濾懸濁液,將所得結(jié)晶減壓下80℃干燥7小時,得到標題化合物的無色結(jié)晶(0.300g)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例53>1a·3HCl·4H2O A型結(jié)晶體的調(diào)制(5)在以實施例32的方法得到的粗結(jié)晶(0.400g)中加入水(2.0mL),在攪拌下加熱到油浴溫度70℃。固體完全溶解后,將該溶液滴在丙酮(3mL)中。濾取析出物,減壓下80℃干燥7小時,得到標題化合物的無色結(jié)晶(0.313g)。本結(jié)晶的XRD圖形顯示A型結(jié)晶體。
<實施例54>1a·H2SO4在1a(1.09g,2.15mmol)中加入乙酸乙酯(80mL)溶解,加入在濃硫酸(0.68mL,12.5mmol)中加入乙酸乙酯總量設為25mL的溶液(4.31mL,2.15mmol),室溫下攪拌15小時。濾取析出結(jié)晶,用乙酸乙酯清洗結(jié)晶,在60℃干燥4小時,得到淡黃色的粗結(jié)晶(1.27g,97.8%)。
1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),2.79(s,3H),2.90-3.50(m,8H),5.86(dd,1H),6.34(dd,1H),6.59(dd,1H),7.46(t,1H),7.80-7.86(m,1H),7.92(s,1H),8.18(dd,1H),8.63(s,1H),8.69(s,1H),9.95(s,1H),10.01(brs,1H)。
<實施例55>1a·1.5H2SO4·H2O在1a(1.08g,2.14mmol)中加入乙酸乙酯(80mL)溶解,加入在濃硫酸(0.68mL,12.5mmol)中加入乙酸乙酯總量設為25mL的溶液(6.42mL,3.21mmol),室溫下攪拌18小時。濾取析出結(jié)晶,用乙酸乙酯清洗結(jié)晶,在減壓下70℃干燥3小時,得到黃色的粗結(jié)晶(1.34g,95.9%)。在該粗結(jié)晶中(889mg,1.36mmol)中加入甲醇(44.4mL),加熱回流溶解,室溫下攪拌3小時后,放冷至室溫。濾取析出結(jié)晶,所得結(jié)晶用甲醇清洗,70℃減壓干燥2小時,得到黃色結(jié)晶(604mg,68.0%)。
1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.42(s,6H),2.46-2.64(m,2H),2.80(s,3H),2.95-3.11(m,2H),3.16-3.34(m,2H),3.40-3.54(m,2H),5.89(dd,1H),6.36(dd,1H),6.61(dd,1H),7.52(t,1H),7.73-7.79(m,1H),7.94(s,1H),8.10(dd,1H),8.80(s,2H),10.04(s,1H),10.75(brs,1H)。
元素分析(計算值)(作為1a·1.5H2SO4·H2O)C,48.25;H,4.95;N,12.50;S,7.16;(分析值)C,48.47;H,4.95;N,12.56;S,7.11<合成例13>三氟甲磺酸4-(3-乙?;交被?-7-甲氧基-6-喹唑啉基酯(6a)的合成1)使醋酸4-氯-7-甲氧基-6-喹唑啉基酯[美國專利第5770599號以及同5770603號記載](3.74g,14.8mmol)以及3-氨基苯乙酮(2.0g,14.8mmol)的異丙醇溶液(200mL)加熱回流5小時。放冷后,濾取沉淀物,得到醋酸4-(3-乙?;交被?-7-甲氧基-6-喹唑啉基酯鹽酸鹽(4.78g,作為1鹽酸鹽的收率為83%)。在該化合物(3.0g,7.74mmol)的甲醇溶液(100mL)中加入28%氨水(2mL),室溫下攪拌4小時后,回流。濾取生成的沉淀物,減壓下干燥,得到1-[3-(6-羥基-7-甲氧基-4-喹唑啉基)苯基]乙酮(2.07g,87%)。
2)在冰浴上攪拌1-[3-(6-羥基-7-甲氧基-4-喹唑啉基)苯基]乙酮(870mg,2.8mmol)、吡啶(0.34mL,4.2mmol)的乙腈溶液(20mL),滴下三氟甲磺酸酐(0.57mL,3.4mmol)。緩緩將該反應液升溫至室溫,在室溫下攪拌2小時后,濃縮,在殘渣中加入碳酸氫鈉水溶液,室溫下攪拌30分鐘。濾取生成物,減壓干燥得到標題化合物6a(1.20g,98%)。
1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm2.65(s,3H),4.06(s,3H),7.40(s,1H),7.53(t,J=7.9Hz,1H),7.76(brd,J=7.8Hz,1H),7.72-7.83(m,1H),7.91(brs,1H),8.16(brd,J=8.9Hz,1H),8.24(t,J=1.8Hz,1H),8.75(s,1H)。
<合成例14>三氟甲磺酸4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-喹唑啉基酯(6b)的合成利用4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-醇,通過與合成例13-2)相同的方法得到目的化合物6-triflate體6b。
6b1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm4.07(s,3H),7.45(t,J=9.1Hz,1H),7.51(s,1H),7.76(m,1H),8.09(dd,J=2.5,6.8Hz,1H),8.64(s,1H),8.68(s,1H),9.94(s,1H)。
<合成例15>三氟甲磺酸4-(3-甲氧基苯基氨基)-7-甲氧基-6-喹唑啉基酯(6c)的合成利用4-(3-甲氧基苯基氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-醇,通過與合成例13-2)相同的方法得到目的化合物6-triflate體6c。
6c1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm3.79(s,3H),4.06(s,3H),6.75(m,1H),7.34(m,2H),7.44(m,1H),7.51(m,1H),8.61(s,1H),8.74(s,1H),9.84(brs,1H)。
<合成例16>三氟甲磺酸4-(3-氯-4-氟代苯基氨基)-6-甲氧基-7-喹唑啉基酯(6d)的合成1)利用7-芐基氧-4-氯-6-甲氧基喹唑啉鹽酸鹽[記載在Hennequin等,J.Med.Chem.1999,42(26),5369-5389中]以及3-氯-4-氟苯胺,通過上述Hennequin等記載的方法或合成例13的方法轉(zhuǎn)換為7-芐基氧-6-甲氧基-4-喹唑啉基)-(3-氯-4-氟苯基)胺鹽酸鹽(收率83%)。在該化合物(412mL)中加入三氟乙酸(7mL),使加熱回流90分鐘,將放冷后的反應液注入冰水中。濾取析出物,使濾上物溶解在甲醇中,加入稀的氨水直至顯堿性。濾取沉淀物,用水、乙醚清洗后,減壓干燥,得到4-(3-氯-4-氟代苯基氨基)-6-甲氧基喹唑啉-7-醇(定量的)。對該化合物通過與合成例13-2)同樣的方法,進行反應。反應結(jié)束后,將該反應液注入1N鹽酸中,用乙酸乙酯萃取,有機層依次用水、碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水清洗后,用無水硫酸鎂干燥,減壓下蒸餾除去溶媒。殘渣用硅膠色譜柱層析(己烷-乙酸乙酯)精制,得到目的化合物的7-triflate體6d(66%)。
6d1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm4.09(s,3H),7.49(t,J=9.1Hz,1H),7.78(m,1H),7.91(s,1H),8.10(dd,J=2.5,6.8Hz,1H),8.20(s,1H),8.61(s,1H),9.92(s,1H)。
<合成例17>三氟甲磺酸4-(3-氯-4-氟代苯基氨基)-7-乙氧基-6-喹唑啉基酯(6e)的合成1)在甲磺酸(723mL)中加入6,7-二甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮(120.9g,516mmol),邊緩緩加熱,邊在內(nèi)溫59~71℃的范圍內(nèi)用10分鐘加入L-蛋氨酸(88.53g,593mmol)。在80℃~104℃范圍內(nèi)攪拌11小時后,放冷。然后依次加入水(3L)、48%氫氧化鈉水溶液(930g),濾取析出物,用水(200mL×2)清洗,得到7-乙氧基-6-羥基-3H-喹唑啉-4-酮。
2)在醋酸酐(825mL)中加入7-乙氧基-6-羥基-3H-喹唑啉-4-酮(106.4mg,516mmol),在內(nèi)溫88℃攪拌。用10分鐘滴下吡啶(107mL),之后,在內(nèi)溫98℃~103℃下攪拌1.5小時。放冷后,加入冰水(3L),濾取生成物,用水(50mL×4)清洗。在結(jié)晶中加入甲醇(400mL)和1N氫氧化鈉(100mL),攪拌5分鐘。濾取生成的結(jié)晶,與最初得到的結(jié)晶合并,得到目的化合物的醋酸7-乙氧基-4-氧代-3,4-二氫喹唑啉-6-基酯(49.3g,39%)。
3)在內(nèi)溫16℃~21℃的范圍內(nèi),在所述酯體(60.14g,242mmol)中滴下亞硫酰氯(810mL)和DMF(16.8mL),在內(nèi)溫63℃~65℃下攪拌2小時。放冷后,濃縮反應液,加入甲苯(500mL),濃縮。重復該操作2次后,溶解在氯仿(300mL)中,用飽和碳酸氫鈉水溶液(250mL×1,300mL×1)清洗,干燥。減壓下蒸餾除去溶劑后,殘渣用硅膠柱層析色譜精制,得到醋酸4-氯-7-乙氧基-6-喹唑啉基酯(29.2g,45%)。
4)在醋酸4-氯-7-乙氧基-6-喹唑啉基酯(10g,40.3mmol)中加入異丙醇(250mL)和3-氯-4-氟苯胺(58.6g,40.3mmol),在油浴溫度90℃攪拌2小時。放冷后,濾取生成物,干燥后,加入甲醇(120mL)中。加入28%氨水(12mL),室溫下攪拌后,加入水(200mL)。濾取析出的生成物,用水清洗(100mL),減壓下干燥,得到4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-乙氧基喹唑啉-6-醇(10.65g,79%)。
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.44(t,J=6.9Hz,3H),4.34(q,J=6.9Hz,2H),7.19(s,1H),7.41(t,J=6.9Hz,1H),7.80(s,1H),7.83(m,1H),8.22(dd,J=2.5,6.9Hz,1H),8.47(s,1H),9.48(s,1H),9.60(brs,1H)。
5)在冰浴上攪拌4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-乙氧基喹唑啉-6-醇(10.5g,31.5mmol)的乙腈溶液(350mL),加入吡啶(41.3mL,51.1mmol)和三氟甲磺酸酐(7.95mL,47.3mmol),室溫下攪拌15小時。減壓濃縮至大致半量,加入水(700mL)和甲醇(200mL)。濾取生成的固體,減壓下干燥,得到標題化合物6e(9.8g,67%)的白色固體。
6e1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.42(t,J=6.9Hz,3H),4.35(q,J=6.9Hz,2H),7.48(t,J=9.1Hz,1H),7.50(s,1H),7.76(m,1H),8.11(m,1H),8.65(s,1H),8.70(s,1H),9.98(s,1H)。
<實施例56>
在6-triflate體6b(5.63g,12.46mmol)和化合物4a(2.49g,14.95mmol)的DMF溶液(20mL)中用氮氣起泡10分鐘后,加入三乙胺(4.30mL,31.15mmol)、四(三苯基膦)鈀(283mg)和碘化酮(I)(95mg),50℃攪拌1小時。減壓下濃縮,殘渣通過硅膠柱(氯仿-甲醇)精制后,用乙腈-水進行重結(jié)晶,得到目的偶合體1ba(2.71g,46%)的白色結(jié)晶。
1ba1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.52(s,6H),2.32(s,3H),2.57(brs,4H),2.85(brs,4H),3.98(s,3H),7.16(t,J=8.7Hz,1H),7.18(s,1H),7.61(m,1H),7.97(dd,J=2.6,6.6Hz,1H),8.06(brs,1H),8.18(s,1H),8.65(s,1H)。
<實施例57>
利用6-triflate體6b以及化合物4c,通過與實施例56相同的方法得到化合物1bb(收率66%)的白~微桃色結(jié)晶性粉末。
1bb1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.52(s,6H),1.87(s,3H),2.60-2.80(m,8H),3.54(s,2H),3.98(s,3H),7.17(t,J=8.6Hz,1H),7.19(s,1H),7.54(m,1H),7.60(brs,1H),7.94(dd,J=2.6,6.5Hz,1H),8.00(s,1H),8.67(s,1H)。
<實施例58>
利用6-triflate體6b以及化合物4-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪(參照合成例9),通過與實施例56相同的方法進行反應。將反應液減壓濃縮后,在氯仿-碳酸氫鈉水溶液中分配,減壓濃縮有機層。使粗精制物懸濁在乙腈中并攪拌,將濾取得到的固體用硅膠柱層析精制,得到目的化合物的1bc(收率73%)。
1bc1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),2.83(brs,4H),3.11(brs,4H),3.97(s,3H),7.22(s,1H),7.42(t,J=9.1Hz,1H),7.81(m,1),8.16(m,1H),8.56(s,1H),8.58(s,1H),9.83(s,1H)。
4-(1,1-二甲基-2-丙基)哌嗪(作為起始物質(zhì)使用過剩量(2.5當量)的哌嗪,通過與合成例1相同的方法合成,收率為42%)1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.39(s,6H),2.30(s,1H),2.61(brs,4H),2.93(m,4H)。
<實施例59>
將化合物1bc(200mg,0.44mmol)、溴丙烷(40μL,0.44mmol)、碳酸鉀(183mg,1.32mmol)的DMF溶液(5mL)加熱攪拌到60~70℃。逐次添加溴丙烷(16μL×2),加熱攪拌3小時后,添加乙酸乙酯和氯化氨水溶液。干燥有機層,減壓蒸餾除去溶劑,殘渣用硅膠柱層析(氯仿-甲醇)精制。濃縮含有生成物的流份,使懸浮在乙腈-水中攪拌后,通過濾取得到目的化合物1bd(173mg,79%)。
1bd1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm0.85(t,J=7.4Hz,3H),1.30-1.50(m,2H),1.42(s,6H),2.21(t,J=7.4Hz,2H),2.41(brs,4H),2.69(brs,4H),3.97(s,3H),7.22(s,1H),7.44(t,J=9.3Hz,1H),7.83(m,1H),8.18(dd,J=2.4,6.9Hz,1H),8.57(s,1H),8.57(s,1H),9.86(brs,1H)。
<實施例60>
利用化合物1bc、碘化異丁烷,通過與實施例59相同的方法轉(zhuǎn)換為目的化合物1be(收率48%)。
1be1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm0.85(d,J=6.3Hz,6H),1.43(s,6H),1.76(m,1H),2.04(m,2H),2.39(brs,4H),2.70(brs,4H),2.70(brs,4H),4.02(s,3H),7.22(s,1H),7.44(t,J=9.0Hz,1H),7.84(m,1H),8.19(m,1H),8.57(s,2H),9.86(s,1H)。
<實施例61>
在冰冷下攪拌化合物4a(0.44g,2.65mmol)的二氯甲烷溶液(5mL),在其中加入4,4,5,5-四甲基-1,3,2-dioxaborolane(Pin-BH)的1MTHF溶液(2.7mL,2.7mmol)以及RhCl(PPh3)3(25mg)。室溫下攪拌7小時后,加入pin-BH的1M TMF溶液(2.7mL,2.7mmol),進一步攪拌一夜后,加入pin-BH的1MTMF溶液(2.7mL,2.7mmol)。攪拌9小時后,冷卻至-10℃,加入碳酸氫鈉水溶液。混合物用乙醚(40mL×1,10mL×1)萃取,干燥,濃縮。在所得的油狀物質(zhì)(1.08g)中加入化合物6d(452mg,1.0mmol)、PdCl2(dppf)·CH2Cl2[dppf=1,1’-bis(diphenylphosphino)ferrocene](27mg,0.03mmol)、2M碳酸鈉水溶液(4.5mL)、DMF(6mL)。對該混合液重復多次脫氣、氮氣置換的操作后,再80℃下攪拌1小時。將該反應液冷卻至室溫后,加入水(30mL),生成物用乙酸乙酯萃取(30mL×3)。有機層用飽和食鹽水(20mL)清洗后,干燥濃縮。在殘渣中加入乙醚,濾去不溶物。濃縮濾液得到目的的1bf的油狀物質(zhì)(115mg,25%)。將其溶解在乙醚(4mL)中,在冰冷下加入4N鹽酸/乙酸乙酯(61μL),在室溫下攪拌一段時間。濾取沉淀物,得到1bf·鹽酸鹽的淡黃色粉末(作為1鹽酸鹽68mg,收率55%)。
1bf HCl1HNMR(300MHz,CDCl3+D2O)δppm1.50(s,6H),2.70(s,3H),2.80-3.60(m,8H),3.97(s,3H),6.67(d,J=16.2Hz,1H),6.90(d,J=16.2Hz,1H),7.12(t,J=8.8Hz,1H),7.30(s,1H),7.71(m,1H),8.02(dd,J=2.4,6.6Hz,1H),8.57(s,1H),8.72(s,1H),9.70(brs,1H)。
<實施例62>
利用化合物6a、化合物4a,通過與實施例56相同的方法進行反應,得到目的化合物1bg(收率59%)。
1bg1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.53(s,6H),2.31(s,3H),2.55(brs,4H),2.65(s,3H),2.84(brs,4H),3.99(s,3H),7.20(s,1H),7.52(t,J=7.9Hz,1H),7.74(brd,J=7.7Hz,1H),7.78(brs,1H),8.05(s,1H),8.16(dd,J=2.1,8.1Hz,1H),8.69(s,1H)。
<實施例63>
利用化合物6c和化合物4a,通過與實施例56相同的方法進行反應,得到目的化合物1bh(收率68%)。
1bh1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.43(s,6H),2.16(s,3H),2.37(brs,4H),2.69(brs,4H),3.78(s,3H),3.96(s,3H),6.70(dd,J=2.2,8.2Hz,1H),7.20(s,1H),7.28(t,J=8.2Hz,1H),7.42-7.55(m,2H),8.54(s,1H),8.60(s,1H),9.72(brs,1H)。
<實施例64、65>
利用化合物6d、化合物4a和4c,通過與實施例56相同的方法,分別轉(zhuǎn)換為1bi,1bj。
<實施例64>
1biyield78%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.43(s,6H),2.18(s,3H),2.40(brs,4H),2.68(brs,4H),4.00(s,3H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.75(s,1H),7.81(m,1H),7.88(s,1H),8.13(dd,J=2.7,6.6Hz,1H),8.54(s,1H),9.77(s,1H)。
<實施例65>
1bjyield78%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),2.56(brs,4H),2.73(brs,4H),3.73(s,2H),4.00(s,3H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.76(s,1H),7.81(m,1H),7.88(s,1H),8.13(dd,J=2.4,6.9Hz,1H),8.54(s,1H),9.77(s,1H)。
<實施例66>
將以實施例3的方法得到的氨基體2c(700mg,1.46mmol)的吡啶(7mL)溶液冷卻至0℃~5℃后,緩慢滴下甲磺酰氯(125μL,1.61mmol)。將反應器置于水浴上自然升溫,將反應液倒入碳酸氫鈉水溶液中。濾取析出的固體,用冷水清洗。所得粗精制物通過硅膠柱層析(氯仿-甲醇),將得到的化合物用乙腈懸洗。濾取生成物,減壓下干燥得到目的化合物1ca(552mg,68%)。
1cayield68%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),2.55(brs,4H),2.74(brs,4H),3.12(s,3H),3.73(s,2H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),7.85(s,1H),8.13(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.46(s,1H),8.62(s,1H),10.09(s,1H)。
<實施例67~77>
通過與實施例66相同的方法由對應的氨基體2合成。
<實施例67>
1cbyield24%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm2.20(s,3H),2.40(brs,4H),2.60(brs,4H),3.11(s,3H),3.61(s,2H),7.47(t,J=9.1Hz,1H),7.79(m,1H),7.86(s,1H),8.12(dd,J=2.4,6.8Hz,1H),8.42(s,1H),8.60(s,1H),10.07(s,1H)。
<實施例68>
1ccyield45%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm2.59(m,4H),3.13(s,3H),3.63(m,6H),7.47(t,J=9.1Hz,1H),7.79(m,1H),7.89(s,1H),8.13(dd,J=2.4,6.8Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),10.10(s,1H)。
<實施例69>
1cdyield32%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.55(s,6H),2.40(m,4H),3.00(m,4H),3.12(s,3H),7.47(t,J=9.0Hz,1H),7.79(m,1H),7.88(s,1H),8.12(brd,J=6.3Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),10.10(s,1H)。
<實施例70>
1ceyield49%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm2.25-2.80(m,8H),3.11(s,3H),3.58(brs,4H),7.44(t,J=8.9Hz,1H),7.79(m,2H),8.11(m,2H),8.43(s,1H),8.58(s,1H),10.06(s,1H)。
<實施例71>
1cfyield54%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.02(s,6H),2.05(s,3H),2.18(brs,4H),2.51(brs,4H),3.06(s,3H),5.89(d,J=12.9 Hz,1H),6.67(d,J=12.9Hz,1H),7.47(t,J=9.0Hz,1H),7.81(m,1H),7.95(s,1H),8.14(brd,J=6.5Hz,1H),8.34(s,1H),8.60(s,1H),9.99(s,1H)。
<實施例72>
1cgyield62%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.20(s,3H),2.43(brs,4H),2.71(brs,4H),3.10(s,3H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.82(s,1H),8.13(dd,J=2.4,6.8Hz,1H),8.41(s,1H),8.60(s,1H),10.06(s,1H)。
<實施例73>
1chyield29%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.01(t,J=7.3Hz,3H),1.46(s,6H),2.35(q,J=7.3Hz,2H),2.50(brs,4H),2.72(brs,4H),3.09(s,3H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.81(brs,2H),8.12(dd,J=2.4,6.5Hz,1H),8.38(s,1H),8.59(s,1H),10.04(s,1H)。
<實施例74>
1ciyield56%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),1.82(m,2H),2.36(s,3H),2.70(m,4H),2.91(m,4H),3.06(s,3H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.77(brs,2H),8.11(brd,J=7.0Hz,1H),8.29(s,1H),8.55(s,1H),9.98(s,1H)。
<實施例75>
1cjyield46%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.49(s,6H),1.71(m,4H),2.03(m,2H),2.19(s,3H),2.34(s,3H),2.85(brd J=11.3Hz,2H),3.00(m,1H),3.07(s,3H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.73(s,1H),7.80(m,1H),8.12(brd,J=6.8Hz,1H),8.34(s,1H),8.58(s,1H),10.02(s,1H)。
<實施例76>
1ckyield24%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm2.17(s,3H),2.36(brs,4H),2.50(brs,4H),2.69(m,4H),3.10(s,3H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.80(brs,2H),8.13(dd,J=2.4,6.8Hz,1H),8.42(s,1H),8.59(s,1H),10.06(s,1H)。
<實施例77>
1clyield31%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.47(s,6H),2.87(t,J=6.6Hz,4H),3.11(s,3H),3.26(s,6H),3.25-3.51(m,4H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),7.84(s,1H),8.13(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),9.40-9.60(brs,1H),10.09(s,1H)。
<實施例78>
1)在5-溴-4-硝基鄰氨基苯甲酸(記載在特開2000-1 69451中)(5.65g,21.7mmol)中加入醋酸甲脒(4.51g,43.3mmol)和甲氧基乙醇(60mL),加熱回流4小時。加入水使反應液變到大約200mL,過濾析出物,用水清洗。減壓下干燥,得到6-溴-7-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(5.21g,64%)。在6-溴-7-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(1.34g,5.0mmol)的甲苯溶液(20mL)中加入氧氯化磷(0.70mL,7.5mmol)以及異丙基乙基胺(1.29mL,7.5mmol),80℃攪拌5小時。室溫下加入3-氯-4-氟苯胺(1.09g,7.5mmol)的異丙醇溶液(5mL),攪拌一夜。將反應液注入己烷(30mL)中,室溫下攪拌30分鐘后,濾取生成物,干燥。在該化合物中加入還原鐵(1.10g,20.0mmol)、1N鹽酸(10mL)、以及乙醇(30mL),回流1小時。在50℃加入1N氫氧化鈉水溶液(10mL),攪拌30分鐘后,加入飽和食鹽水,用乙酸乙酯萃取。濃縮有機層,殘渣用乙腈(10mL)清洗,得到6-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,7-喹唑啉二胺(5’)(987mg,54%)。
5’1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm6.24(brs,2H),7.00(s,1H),7.42(brt,1H),7.79(brs,1H),8.17(brs,1H),8.43(s,1H),8.68(s,1H),9.64(s,1H)。
2)利用該化合物5’和化合物4a,通過與實施例3相同的方法進行反應得到N4-(3-氯-4-氟苯基)-6-[3-甲基-3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-丁炔基]-4,7-喹唑啉胺(2a’)(收率68%)。
2a’1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.47(s,6H),2.67(s,3H),5.99(s,1H),6.90(s,1H),7.38(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),8.15(dd,J=2.6,6.8Hz,1H),8.37(s,1H),8.44(s,1H),9.65(brs,1H)。
3)在2a’(200mg,0.44mmol)的吡啶溶液(4mL)中加入甲磺酰氯(80μL,1.0mmol),室溫下攪拌4小時,加入甲磺酰氯(80μL,1.0mmol)。攪拌一夜后,進一步加入甲磺酰氯(80μL,1.0mmol),6小時后濃縮。加入水,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,干燥濃縮。得到的固體用乙腈懸洗,過濾得到化合物1cg’(145mg,55%)。
1cg’TOF Massm/z=609[M+1];1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.41(s,6H),2.11(s,3H),2.33(brs,4H),2.66(brs,4H),3.61(s,6H),7.46(t,J=9.1Hz,1H),7.78(m,1H),8.02(s,1H),8.11(m,1H),8.66(s,1H),8.74(s,1H),10.20(brs,1H)。
<實施例79>
在室溫下將以合成例2的方法所得的氨基體2a(453mg,1.00mmol)、3-甲基硫代丙酰氯(152mg,1.20mmol)、三乙胺(167μL,1.20mmol)的DMF(4.5mL)溶液攪拌19小時,進而在40℃下攪拌6小時。將反應液注入碳酸氫鈉水溶液(100mL)中,用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。所得有機層用飽和食鹽水(100×2)清洗,用無水硫酸鎂干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣通過硅膠柱層析(二氯甲烷-甲醇),進而用乙酸乙酯重結(jié)晶,得到目的偶合化合物1af(120mg,22%)。
1af1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.12(s,3H),2.17(s,3H),2.38(brs,4H),2.67(brs,4H),2.74-2.83(m,4H),7.46(t,J=9.0Hz,1H),7.80-7.85(m,2H),8.17(dd,J=6.9,2.4Hz,1H),8.62(brs,2H),9.66(s,1H),10.03(s,1H)。
<實施例80>
在室溫下將以合成例2的方法所得的氨基體2a(452mg,1.00mmol)、2-氧代丁內(nèi)酯(tetronic acid)(126mg,1.50mmol)、碳酸氫鈉(423mg,5.00mmol)、HATU(701mg,1.84mmol)的DMF(1.0mL)溶液攪拌20小時。將反應液注入碳酸氫鈉水溶液(100mL)中,用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。所得有機層用飽和食鹽水(50×2)清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣通過硅膠柱層析(二氯甲烷-甲醇),進而用乙酸乙酯重結(jié)晶,得到目的偶合化合物1ag(71mg,14%)。
1ag1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),2.06(s,3H),2.15(s,3H),2.37(brs,4H),2.67(brs,4H),7.46(t,J=9.0Hz,1H),7.81-7.85(m,2H),8.19(dd,J=6.3,1.8Hz,1H),8.54(s,1H),8.63(s,1H),9.98(s,1H),10.26(s,1H)。
<實施例81>
在室溫下使以合成例2的方法所得的氨基體2a(452mg,1.00mmol)、雙烯酮(220mg,2.61mmol)的甲苯(1.5mL)溶液回流1.5小時。將反應液通過硅膠柱層析(二氯甲烷-甲醇),得到目的偶合化合物1ah(110mg,20%)。
1ah1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.21(s,3H),2.27(s,3H),2.44(brs,4H),2.67(brs,4H),3.17(s,2H),7.45(t,J=9.3Hz,1H),7.78-7.83(m,2H),8.14(dd,J=6.9,2.4Hz,1H),8.60(s,1H),8.71(s,1H),9.93(s,1H),10.01(s,1H)。
<實施例82>
在室溫下將以合成例2的方法所得的氨基體2a(452mg,1.00mmol)、氰基乙酸(425mg,5.00mmol)、三乙胺(209μL,1.50mmol)、EDC(288mg,1.5mmol)的DMF(5.0mL)溶液攪拌14小時。將反應液注入碳酸氫鈉水溶液(100mL)中,用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。所得有機層用飽和食鹽水(50×2)清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣通過硅膠柱層析(二氯甲烷-甲醇),進而用乙酸乙酯重結(jié)晶,得到目的偶合化合物1ai(189mg,37%)。
1ai1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.34(s,3H),2.64(brs,4H),2.74(brs,4H),4.14(s,2H),7.46(t,J=9.0Hz,1H),7.80-7.86(m,2H),8.19(dd,J=6.6,2.1Hz,1H),8.59(s,1H),8.64(s,1H),10.10(s,1H),10.31(s,1H)。
<實施例83>
在室溫下將以合成例2的方法所得的氨基體2a(905mg,2.00mmol)、2-氯乙磺酰氯(840μL,8.00mmol)的吡啶(5.0mL)溶液攪拌1小時。將反應液注入碳酸氫鈉水溶液(200mL)中,用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。所得有機層用飽和食鹽水(300×3)清洗,用無水硫酸鈉干燥后,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣通過硅膠柱層析(二氯甲烷-甲醇),進而用pTLC(二氯甲烷-甲醇)精制,得到目的偶合化合物1aj(9mg,0.8%)。
1aj1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.29(s,3H),2.55(brs,4H),2.77(brs,4H),5.75(s,1H),5.91(d,J=9.9Hz,1H),6.01(d,J=16.5Hz,1H),6.85(dd,J=16.4,9.9Hz),7.45(t,J=9.1Hz,1H),7.74-7.83(m,2H),8.13(dd,J=6.8,2.2Hz,1H),8.35(s,1H),8.57(s,1H),10.00(s,1H)。
<實施例84~87>
作為起始物質(zhì)使用7-溴-6-硝基-3H-喹唑啉-4-酮和7-溴-8-硝基-3H-喹唑啉-4-酮的混合物(大致3∶1)和各種苯胺,根據(jù)合成例2-1)的方法、實施例3-1)的方法(同時也使用化合物4a)、合成例5的方法以及實施例3-2)的方法,合成化合物1ak~1an(Scheme 6)。
Scheme 6
(式中R1表示m-OMe,m-CN,p-NMe2,m-Me等的取代基。)<實施例84>
作為苯胺使用3-甲氧基苯胺,轉(zhuǎn)換為目的化合物1ak(收率40%)。
1ak1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.42(s,6H),2.15(s,3H),2.35(brs,4H),2.63(brs,4H),3.78(s,3H),5.83(dd,J=10.3,1.7Hz,1H),6.32(dd,J=17.0,1.7Hz,1H),6.57(dd,J=17.0,10.1Hz,1H),6.72(dd,J=7.8,2.2Hz,1H),7.29(t,J=8.2Hz,1H),7.48-7.55(m,2H),7.81(s,1H),8.60(s,1H),8.71(s,1H),9.81(s,1H),9.83(s,1H)。
<實施例85>
作為苯胺使用3-氨基芐腈,轉(zhuǎn)換為目的化合物1al(收率11%)。
1al1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.43(s,6H),2.14(s,3H),2.34(brs,4H),2.63(brs,4H),5.84(dd,J=10.3,1.5Hz,1H),6.33(dd,J=17.1,1.5Hz,1H),6.58(dd,J=17.0,10.1Hz,1H),7.57-7.64(m,2H),7.85(s,1H),8.16(d,J=7.1Hz,1H),8.42(s,1H),8.67(s,1H),8.71(s,1H),9.88(s,1H),10.12(s,1H)。
<實施例86>
作為苯胺使用N,N-二甲基苯-1,4-二氨基苯,轉(zhuǎn)換為目的化合物1am(收率72%)。
1am1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.42(s,6H),2.14(s,3H),2.35(brs,4H),2.63(brs,4H),2.90(s,6H),5.82(brd,J=10.0Hz,1H),6.31(brd,J=17.0Hz,1H),6.57(dd,J=17.0,10.0Hz,1H),6.76(d,J=9.2Hz,2H),7.56(d,J=9.2Hz,2H),7.75(s,1H),8.46(s,1H),8.63(s,1H),9.70(s,1H),9.82(s,1H)。
<實施例87>
作為苯胺使用間甲苯胺,轉(zhuǎn)換為目的化合物1am(收率63%)。
1an1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.42(s,6H),2.14(s,3H),2.34(brs,7H),2.62(brs,4H),5.83(dd,J=10.0,1.9Hz,1H),6.31(dd,J=17.3,1.9Hz,1H),6.58(dd,J=17.3,10.0Hz,1H),6.96(d,J=7.0Hz,1H),7.27(m,1H),7.63(brs,2H),7.80(s,1H),8.57(s,1H),8.70(s,1H),9.81(s,1H),9.84(s,1H)。
<實施例88>
加入以合成例17調(diào)制的triflate體6e(1.00g,2.15mmol)、化合物4b(395mg,2.85mmol)、三乙胺(16mL)、DMF(4mL),反復進行脫氣、氮氣置換的操作后,加入醋酸鈀(II) (48.2mg)以及三苯基膦(67.9mg),在85℃攪拌5小時。減壓下濃縮,在殘渣中加入5%的碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水,用乙酸乙酯萃取。干燥,濃縮后精制殘渣[硅膠柱層析色譜,用乙醇-水懸洗,用THF-水重結(jié)晶]得到目的偶合體1bk的無色結(jié)晶(434mg,43%)。
bk1HNMR(270 MHz,CDCl3)δppm1.51(s,6H),1.53(t,J=7.0Hz,3H),2.80(m,4H),3.80(m,4H),4.18(q,J=7.0Hz,2H),7.17(s,1H),7.17(t,J=8.8Hz,1H),7.40(brs,1H),7.54(m,1H),7.92(s,1H),7.95(dd,J=2.6,6.3Hz,1H),8.68(s,1H)。
<實施例89~111>
利用triflate體6e和各種化合物4,通過與實施例97相同的方法合成化合物1bl~1bah。化合物的結(jié)構(gòu)和收率以及光譜數(shù)據(jù)如下所示。
<實施例89>
1bl(yield70%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.51(s,6H),1.51(t,J=7.0Hz,3H),2.43(s,3H),2.82(t,J=6.1Hz,2H),3.39(s,3H),3.54(t,J=6.1Hz,2H),4.17(q,J=7.0Hz,2H),7.15(s,1H),7.16(t,J=8.8Hz,1H),7.52(brs,1H),7.56(m,1H),7.92(s,1H),7.95(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.66(s,1H)。
<實施例90>
1bm(yield 53%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.51(s,6H),1.53(t,J=6.9Hz,3H),2.42(s,3H),2.59(t,J=6.5Hz,2H),3.01(t,J=6.5Hz,2H),4.21(q,J=6.9Hz,2H),7.16(t,J=8.8Hz,1H),7.18(s,1H),7.54(brs,1H),7.56(m,1H),8.00(dd,J=2.6,6.3Hz,1H),8.12(s,1H),8.67(s,1H)。
<實施例91>
1bn(yield55%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.40-1.60(m,11H),1.60-1.75(m,4H),2.74(m,4H),4.19(q,J=6.9Hz,2H),7.17(t,J=8.6Hz,1H),7.17(s,1H),7.34(brs,1H),7.52(m,1H),7.91(brs,1H),7.95(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.67(s,1H)。
<實施例92>
1bo·nHCl[在甲醇-乙酸乙酯(1∶2)中用鹽酸/乙酸乙酯(3等量)對1bo進行鹽酸鹽化](n=3的收率41%)1H NMR(270MHz,CDCl3)δppm1.48(t,J=6.9Hz,3H),1.82(brs,6H),2.89(s,6H),2.92(brs,3H),3.70(brs),4.30(q,J=6.9Hz,2H),7.47(s,1H),7.55(t,J=9.0Hz,1H),7.83(m,1H),8.11(dd,J=2.6,2.7Hz,1H),8.94(s,1H),9.52(brs,1H)。
<實施例93>
1bp(yield48%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.43-1.47(m,3H),1.43(s,6H),2.15(s,3H),2.37(brs,4H),2.71(brs,4H),4.21(q,J=6.8Hz,2H),7.17(s,1H),7.44(t,J=9.2Hz,1H),7.82(m,1H),8.20(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.55(s,1H),8.56(s,1H),9.84(s,1H)。
<實施例94>
1bq(yield23%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.52(t,J=7.0Hz,3H),1.55(s,6H),1.79(m,4H),1.97(m,2H),2.25(s,3H),2.45(s,3H),2.90(m,2H),3.01(m,1H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.17(t,J=8.8Hz,1H),7.17(s,1H),7.36(brs,1H),7.53(m,1H),7.86(s,1H),7.94(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.67(s,1H)。
<實施例95>
1br(yield 55%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.00-1.20(m,6H),1.40-1.60(m,9H),2.80(q,J=7.0Hz,4H),4.18(q,J=7.0Hz,2H),7.16(t,J=8.8Hz,1H),7.16(s,1H),7.38(brs,1H),7.51(m,1H),7.88(s,1H),7.94(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.66(s,1H)。
<實施例96>
1bs(yield31%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.53(s,6H),1.53(t,J=7.0Hz,3H),2.73(m,4H),2.88(m,4H),3.53(s,2H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.13(t,J=8.9Hz,1H),7.13(s,1H),7.39(brs,1H),7.53(m,1H),7.93(s,1H),7.95(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.67(s,1H)。
<實施例97>
1bt(yield 14%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.26(m,1H),1.50(m,2H),1.53(t,J=7.0Hz,3H),1.77(m,5H),2.17(m,2H),2.32(s,3H),2.57(brs,4H),2.88(brs,4H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.15(s,1H),7.17(t,J=8.9Hz,1H),7.65(m,1H),8.01(m,2H),8.17(s,1H),8.65(s,1H)。
<實施例98>
1bu(yield 48%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.52(s,6H),1.52(t,J=7.0Hz,3H),2.96(t,J=6.8Hz,4H),3.37(s,6H),3.51(t,J=6.8Hz,4H),4.18(q,J=7.0Hz,2H),7.16(s,1H),7.17(t,J=8.9Hz,1H),7.44(brs,1H),7.56(m,1H),7.90(s,1H),7.96(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.66(s,1H)。
<實施例99>
1bv(yield 23%)1HNMR(270 MHz,DMSO-d6)δppm1.44(m,11 H),1.77(m,2H),2.35(m,2H),2.99(m,2H),3.40-3.50(m,1H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),4.58(d,J=4.3Hz,1H),7.17(s,1H),7.43(t,J=9.2Hz,1H),7.84(m,1H),8.20(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.54(s,1H),8.56(s,1H),9.83(s,1H)。
<實施例100>
1bw(yield50%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.50(s,6H),1.52(t,J=6.8Hz,3H),1.88(m,2H),2.37(s,3H),2.65(m,4H),2.97(m,4H),4.18(q,J=6.8Hz,2H),7.15(s,1H),7.16(t,J=8.9Hz,1H),7.56(m,1H),7.72(brs,1H),7.96(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.01(s,1H),8.65(s,1H)。
<實施例101>
1bx(yield59%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.51(s,6H),1.53(t,J=7.0Hz,3H),2.49(m,4H),2.58(t,J=6.1Hz,2H),2.99(t,J=6.1Hz,2H),3.68(m,4H),4.20(q,J=7.0Hz,2H),7.17(t,J=8.9Hz,1H),7.18(s,1H),7.48(brs,1H),7.54(m,1H),7.92(s,1H),7.94(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.68(s,1H)。
<實施例102>
1by(yield76%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.23(t,J=7.0Hz,6H),1.50(t,J=7.0Hz,3H),2.29(s,3H),2.50-2.60(brs,4H),2.89(brs,4H),3.57-3.82(m,8H),4.16(q,J=7.0Hz,2H),7.11(s,1H),7.15(t,J=8.9Hz,1H),7.62(m,1H),7.99(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.27(s,1H),8.30(s,1H)。8.62(s,1H)。
<實施例103>
1bz(yield64%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.14(t,J=7.0Hz,3H),1.52(s,6H),1.53(t,J=7.0Hz,3H),2.46(q,J=7.0Hz,2H),2.50-2.60(brs,4H),2.88(brs,4H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.14(s,1H),7.16(t,J=8.9Hz,1H),7.67(m,1H),8.00(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.17(brs,1H),8.24(s,1H),8.64(s,1H)。
<實施例104>
1baa(yield76%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.49(t,J=7.0Hz,3H),1.51(s,6H),2.10(s,3H),2.74(m,4H),3.53(m,2H),3.68(m,2H),4.14(q,J=7.0Hz,2H),7.15(s,1H),7.16(t,J=8.9Hz,1H),7.58(m,1H),7.92(brs,1H),7.96(dd,J=2.4,6.5Hz,1H),7.98(s,1H),8.66(s,1H)。
<實施例105>
1bab(yield47%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.14(t,J=7.0Hz,3H),1.50(s,6H),1.52(t,J=7.0Hz,3H),2.68(m,2H),2.75(q,J=7.0Hz,2H),3.13(m,2H),3.71(s,3H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.16(s,1H),7.16(t,J=8.9Hz,1H),7.68(m,1H),7.79(brs,1H),7.98(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),8.10(s,1H),8.67(s,1H)。
<實施例106>
1bac(yield8%)1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.53(t,J=7.0Hz,3H),2.30(s,3H),2.49(brs,4H),2.64(brs,4H),2.73(m,4H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),7.16(s,1H),7.17(t,J=8.8Hz,1H),7.54(m,1H),7.58(brs,1H),7.95(dd,J=2.7,6.5Hz,1H),7.97(s,1H),8.65(s,1H)。
<實施例107>
1bad(yield65%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.44(t,J=7.0Hz,3H),1.47(s,6H),2.83(brs,4H),2.89(s,3H),3.17(brs,4H),4.22(q,J=7.0Hz,2H),7.18(s,1H),7.44(t,J=9.2Hz,1H),7.82(m,1H),8.20(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.57(s,2H),9.83(s,1H)。
<實施例108>
1bae(yield39%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),1.46(t,J=7.0Hz,3H),2.50(brs,4H),2.54(t,J=5.9Hz,2H),2.67(t,J=5.9Hz,2H),2.73(brs,4H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),7.18(s,1H),7.44(t,J=9.1Hz,1H),7.82(m,1H),8.20(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.57(s,2H),9.84(s,1H)。
<實施例109>
1baf(yield49%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.45(m,11H),1.89(m,2H),2.40(m,2H),2.98(m,2H),3.16(m,1H),3.23(s,3H),4.22(q,J=7.0Hz,2H),7.18(s,1H),7.44(t,J=9.2Hz,1H),7.83(m,1H),8.20(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.55(s,1H),8.56(s,1H),9.83(s,1H)。
<實施例110>
1bag(yield64%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm0.97(t,J=7.0Hz,6H),1.42(t,J=7.0Hz,3H),1.71(m,4H),2.15(s,3H),2.35(brs,4H),2.69(brs,4H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),7.17(s,1H),7.44(t,J=9.2Hz,1H),7.81(m,1H),8.17(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.54(s,1H),8.55(s,1H),9.87(s,1H)。
<實施例111>
1bah(yield29%)1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.43(s,6H),1.45(t,J=7.0Hz,3H),2.42-2.52(m,4H),2.44(t,J=5.8Hz,2H),2.71(brs,4H),3.22(s,3H),3.41(t,J=5.8Hz,2H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),7.17(s,1H),7.44(t,J=8.9Hz,1H),7.83(m,1H),8.20(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.56(s,1H),8.57(s,1H),9.84(s,1H)。
<合成例18>三氟甲磺酸7-甲氧基-4-[3-(3-羥基-3-甲基-1-丁炔基)苯基氨基]-6-喹唑啉基酯(6f)的合成在醋酸4-氯-7-乙氧基-6-喹唑啉基酯(400mg,1.50mmol)中加入異丙醇(10mL)-二氯甲烷(2mL),邊攪拌邊膠乳4-(3-氨基苯基)-2-甲基-3-丁炔-1-醇(290mg,1.65mmol)。在一個半小時后加入己烷(50mL),濃縮。在殘渣中加入異丙醇(10mL)-二氯甲烷(2mL)后,緩緩滴下己烷(30mL),冰冷下攪拌15分鐘。濾取生成物,減壓下干燥,得到醋酸{7-乙氧基-4-[3-(3-羥基-3-甲基-1-丁炔基)苯基氨基]-6-喹唑啉基}酯的黃色固體(547mg,83%)。將該酯體(513mg,1.16mmol)溶解在甲醇(5mL)中,加入28%的氨水(1mL)在室溫下攪拌。加入水(10mL)攪拌30分鐘后,濾取生成物,減壓下干燥,得到7-甲氧基-4-[3-(3-羥基-3-甲基-1-丁炔基)苯基氨基]喹唑啉-6-醇的無色固體(392mg,93%)。
1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.44(t,J=7.0Hz,3H),1.48(s,6H),4.24(q,J=7.0Hz,2H),5.51(s,1H),7.08(d,J=7.8Hz,1H),7.18(s,1H),7.34(t,J=8.0Hz,1H),7.80(s,1H),7.88(d,J=8.4Hz,1H),7.99(s,1H),8.47(s,1H),9.37(s,1H),9.56(brs,1H)。
通過與合成例13-2)相同的方法將該化合物轉(zhuǎn)換為標題化合物(6f)(定量的)。
6f1HNMR(270MHz,DMS0-d6)δppm1.46(t,J=7.0Hz,3H),1.48(s,6H),4.41(q,J=7.0Hz,2H),7.35(d,J=7.6Hz,1H),7.46(s,1H),7.51(t,J=8.0Hz,1H),7.69(d,J=8.1Hz,1H),7.76(s,1H),8.88(s,1H),8.96(s,1H),11.19(brs,1H)。
<實施例112>
利用化合物6f和化合物4c,通過與實施例88相同的方法,得到偶合體(收率76%)。在80℃對該偶合體(565mg,1.05mmol)和氫氧化鉀(299mg,5.33mmol)的甲苯懸濁液(21mL)攪拌1小時,在回流下攪拌1.5小時。濃縮反應液后,在殘渣中加入水,用乙酸乙酯萃取。干燥萃取液,濃縮后通過硅膠柱層析(乙酸乙酯),用乙醇對所得固體進行重結(jié)晶,得到化合物1bai(162mg,32%)。
1bai1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.40-1.50(m,9H),2.56(brs,4H),2.77(brs,4H),3.72(s,2H),4.20(s,1H),4.21(q,J=7.0Hz,2H),7.17(s,1H),7.22(d,J=7.8Hz,1H),7.40(t,J=8.0Hz,1H),7.92(d,J=8.1Hz,1H),8.07(m,1H),8.56(s,1H),8.60(s,1H),9.78(brs,1H)。
<實施例113~117>
利用triflate體6f和各種化合物4,通過與實施例112相同的方法合成1baj~1ban?;衔锏慕Y(jié)構(gòu)和光譜數(shù)據(jù)如下所示。
<實施例113>
1baj1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),1.45(t,J=7.1Hz,3H),2.71(m,4H),3.65(m,4H),4.21(s,1H),4.22(q,J=7.1Hz,2H),7.18(s,1H),7.22(d,1H),7.40(t,J=8.1Hz,1H),7.90(d,1H),8.07(s,1H),8.57(s,1H),8.60(s,1H),9.79(s,1H)。
<實施例114>
1bak1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.40(t,J=7.0Hz,3H),1.53(s,6H),2.01(s,3H),2.81(brs,4H),3.55(brs,4H),4.21(d,J=7.0Hz,2H),4.21(s,J=7.0Hz,1H),7.19(s,1H),7.24(d,J=7.8Hz,1H),7.41(t,J=7.9Hz,1H),7.91(d,J=8.6Hz,1H),8.06(s,1H),8.60(s,1H),8.67(s,1H),9.91(brs,1H)。
<實施例115>
1bal1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.42(t,J=6.8Hz,3H),1.49(s,6H),1.52-1.90(m,6H),2.11(s,3H),2.37(s,3H),2.77(brd,J=11.1Hz,2H),2.95(s,1H),4.21(s,1H),4.22(q,2H),7.17(s,1H),7.21(d,J=7.8Hz,1H),7.40(t,J=8.0Hz,1H),7.91(d,J=8.4Hz,1H),8.07(brs,1H),8.56(s,2H),9.78(brs,1H)。
<實施例116>
1bam1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.52(s,6H),1.52(t,J=7.0Hz,3H),2.31(s,3H),2.55(brs,4H),2.87(brs,4H),3.09(s,1H),4.19(q,J=7.0Hz,2H),7.15(s,1H),7.28(d,1H),7.28(d,1H),7.36(t,1H),7.80(d,1H),7.91(brs,1H),7.96(s,1H),8.12(s,1H),8.66(s,1H)。
<實施例117>
1ban1H NMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.44(m,9H),2.15(s,6H),2.25-2.40(m,5H),2.62(t,J=7.2Hz,2H),4.21(s,1H),4.22(q,2H),7.17(s,1H),7.22(d,J=7.6Hz,1H),7.40(t,J=8.0Hz,1H),7.92(d,J=8.4Hz,1H),8.08(s,1H),8.56(s,1H),8.60(s,1H),9.79(brs,1H)。
<實施例118~130>
通過與實施例66相同的方法由對應的氨基體2合成。
<實施例118>
1cmyield 57%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.33(m,1H),1.63(m,7H),2.00(m,2H),2.21(s,3H),2.44(brs,4H),2.71(brs,4H),3.10(s,3H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.83(s,1H),8.12(dd,J=2.7,6.8Hz,1H),8.39(s,1H),8.60(s,1H),10.06(s,1H)。
<實施例119>
1cnyield62%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.44(s,6H),2.30(s,3H),2.38(s,6H),2.61(t,J=6.3Hz,2H),2.83(t,J=6.3Hz,2H),2.99(s,3H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.77(s,1H),7.79(m,1H),8.11(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.27(s,1H),8.54(s,1H),9.97(s,1H)。
<實施例120>
1coyield41%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.13(t,J=7.0Hz,6H),2.17(s,3H),2.39(brs,4H),2.75(brs,4H),3.08(s,3H),3.52(q,J=7.0Hz,4H),3.67(m,4H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.78(m,1H),7.82(s,1H),8.11(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.40(s,1H),8.59(s,1H),10.07(s,1H)。
<實施例121>
1cpyield56%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.45(s,6H),2.34(s,3H),2.71(t,J=6.3Hz,2H),3.12(s,3H),3.26(s,3H),3.43(t,J=6.3Hz,2H),7.47(t,J=9.1Hz,1H),7.81(m,1H),7.84(s,1H),8.13(dd,J=2.6,6.9Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),10.08(s,1H)。
<實施例122>
1cqyield63%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),2.78(brs,4H),2.87(s,3H),3.10(s,3H),3.15(brs,4H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.87(s,1H),8.12(dd,J=2.4,7.0Hz,1H),8.45(s,1H),8.61(s,1H),9.57(brs,1H),10.09(s,1H)。
<實施例123>
1crvield55%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm0.93(t,J=7.3Hz,6H),1.74(m,4H),2.19(s,3H),2.41(brs,4H),2.68(brs,4H),3.08(s,3H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.77(m,1H),7.81(s,1H),8.10(dd,J=2.4,7.0Hz,1H),8.37(s,1H),8.58(s,1H),10.04(s,1H)。
<實施例124>
1csyield49%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.42(m,2H),1.46(s,6H),1.89(m,2H),2.37(m,2H),2.97(m,2H),3.10(s,3H),3.22(s,3H),3.00-4.00(m,1H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.83(s,1H),8.11(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.44(s,1H),8.61(s,1H),10.08(s,1H)。
<實施例125>
1ctyield34%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.47(s,6H),1.99(s,3H),2.61(brs,2H),2.68(brs,2H),3.09(s,3H),3.44(brs,4H),7.45(t,J=9.2Hz,1H),7.78(m,1H),7.84(s,1H),8.11(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.44(s,1H),8.60(s,1H),10.08(s,1H)。
<實施例126>
1cuyield69%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.06(t,J=7.0Hz,3H),1.47(s,6H),2.50(m,2H),2.75(q,J=7.0Hz,2H),2.98(t,J=7.0Hz,2H),3.11(s,3H),3.59(s,3H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),7.83(s,1H),8.13(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),9.52(brs,1H),10.09(s,1H)。
<實施例127>
1cvyield53%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.50(brs,6H),2.69(brs,4H),3.11(s,3H),3.23(s,3H),3.43(m,2H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.80(m,1H),7.84(s,1H),8.13(dd,J=2.4,6.8Hz,1H),8.44(s,1H),8.62(s,1H),10.08(s,1H)。
<實施例128>
1cwyield48%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.47(s,6H),2.50-2.58(m,6H),2.65-2.70(m,6H),3.12(s,3H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.81(m,1H),7.84(s,1H),8.14(dd,J=2.7,7.0Hz,1H),8.47(s,1H),8.62(s,1H),9,59(brs,1H),10.10(s,1H)。
<實施例129>
1cxyield45%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),1.74(brs,4H),2.76(brs,4H),3.12(s,3H),7.47(t,J=9.2Hz,1H),7.79(m,1H),7.84(s,1H),8.13(dd,J=2.4,7.0Hz,1H),8.45(s,1H),8.62(s,1H),10.09(s,1H)。
<實施例130>
1cyyield42%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),2.36(s,3H),2.68(t,J=6.4Hz,2H),2.82(t,J=6.4Hz,2H),3.12(s,3H),7.47(t,J=9.0Hz,1H),7.81(m,1H),7.88(s,1H),8.13(dd,J=2.4,7.0Hz,1H),8.46(s,1H),8.62(s,1H),9.57(s,1H),10.09(s,1H)。
<實施例131>
利用以實施例78合成的N4-(3-氯-4-氟代苯基)-6-[3-甲基-3-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-丁炔基]-4,7-喹唑啉二胺(2a’),通過與實施例1相同的方法,轉(zhuǎn)換為1a’。粗生成物放置3天,得到化合物1a’(含有大致0.9等量的DMF)的針狀結(jié)晶(收率20%)。
1a’1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.48(s,6H),1.99(s,3H),2.15(brs,4H),2.68(brs,4H),5.88(d,J=10.4Hz,1H),6.36(d,J=17.1Hz,1H),6.61(dd,J=10.4,17.1Hz,1H),7.46(t,J=9.1Hz,1H),7.84(m,1H),8.20(dd,J=2.5,6.8Hz,1H),8.32(s,1H),8.61(s,1H),8.67(s,1H),9.38(s,1H),9.99(s,1H)。
<實施例132>
作為起始物質(zhì)使用以合成例7相同的方法由4-氧代四氫吡喃合成的4ao(收率60%)和7-溴-N4-(3-氯-4-氟代苯基)-4,6-喹唑啉二胺,通過與實施例3相同的方法轉(zhuǎn)換為2ao和1ao。
4aoyield60%;1HNMR(270MHz,CDCl3)δppm1.60-1.71(m,2H),1.87-1.93(m,2H),2.29(s,3H),2.40(s,1H),2.49(brs,4H),2.67(brs,4H),3.64-3.74(m,2H),3.90-3.96(m,2H)。
2aoyield定量的;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.53-1.65(m,2H),2.04-2.12(m,2H),2.15(s,3H),2.37(brs,4H),2.64(brs,4H),3.60(m,2H),3.88(m,2H),5.53(s,2H),7.41(t,J=9.2Hz,1H),7.53(s,1H),7.70(s,1H),7.81(m,1H),8.20(dd,J=6.8,2.7Hz,1H),8.39(s,1H),9.64(s,1H)。
1aoyield31%;1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.55(m,2H),2.01(m,2H),2.15(s,3H),2.36(brs,4H),2.63(brs,4H),3.61(m,2H),3.84(m,2H),5.84(d,J=10.0Hz,1H),6.32(d,J=17.0Hz,1H),6.55(dd,J=17.0,10.0Hz,1H),7.46(t,J=9.2Hz,1H),7.85(m,1H),7.90(s,1H),8.20(brd,J=6.8Hz,1H),8.64(s,1H),8.65(s,1H),9.96(s,1H),10.00(s,1H)。
<實施例133>
將以實施例25的方法合成的丙烯酰胺體1z(300mg,1.46mmol)的二氯甲烷溶液(4.5mL)冷卻至0℃~5℃后,加入三氟乙酸鹽(TFA)(4.5mL)。直接攪拌1.5小時后,減壓蒸餾除去溶劑。殘渣用乙醚懸洗,濾取得到目的化合物1ap·nTFA(50mg)。
1ap nTFA1HNMR(270MHz,DMSO-d6)δppm1.46(s,6H),2.86(brs,4H),3.14(brs,4H),5.87(d,J=10.0Hz,1H),6.34(d,J=17.0Hz,1H),6.58(dd,J=17.0,10.0Hz,1H),7.50(t,J=9.2Hz,1H),7.77(m,1H),7.92(s,1H),8.11(m,1H),8.57(brs,2H),8.75(s,1H),8.77(s,1H),10.01(s,1H),10.53(brs,1H)。
<實施例134>
在室溫下將4-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-酮基-丁酸(0.69g,10.0mmol)、N-甲基炔丙基胺(2.00g,10.0mmol)、EDC(2.88g,15.0mmol)、三乙胺(2.1mL,15.0mmol)的DMF溶液(30mL)攪拌一夜。在反應液中加入水(40mL),生成物用二氯甲烷(40mL×3)萃取。萃取液用碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水清洗,減壓濃縮,得到N-甲基-4-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-酮基-N-(2-丙基)-丁炔酰胺(4aq)的DMF溶液(10.00g)。
利用該4aq的DMF溶液和7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺,通過與實施例3相同的方法轉(zhuǎn)換為1aq。
1aqyield7%;1HNMR(300MHz,354K,DMSO-d6)δppm2.18(s,3H),2.27(m,4H),2.60(m,4H),3.02(s,3H),3.44(m,4H),4.48(s,2H),5.80(dd,J=10.1,1.5Hz,1H),6.33(dd,J=16.8,1.5Hz,1H),6.60(m,1H),7.38(t,J=9.2Hz,1H),7.82(m,1H),7.86(s,1H),8.12(m,1H),8.57(s,1H),8.78(s,1H),9.55(brs,1H),9.82(brs,1H);LC-MSm/z=592(M++1)。
<實施例135>
通過與合成例7相同的方法,使用叔丁基-4-酮基-1-哌嗪羧酸鹽代替1,3-二乙氧基丙酮,使用二乙胺代替1-甲基哌嗪合成4ar(收率97%),使用4ar和7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺,進行與實施例3-1)相同的反應,得到2ar(R=H)。在冰冷下的二氯甲烷中使其與1等量的二叔丁基二羧酸鹽(Boc2O)反應30分鐘,粗生成物通過硅膠柱層析精制,得到化合物2ar(R=Boc;總的收率為85%)。利用實施例3-2)的方法將該化合物2ar(R=Boc)轉(zhuǎn)換為1ar’,然后根據(jù)實施例142記載的方法轉(zhuǎn)換為1ar。
4aryield97%;1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.06(t,J=7.2Hz,6H),1.44(s,9H),1.44-1.69(m,2H),1.80-2.00(m,2H),2.32(s,1H),2.67(q,J=7.2 Hz,4H),2.96-3.19(m,2H),3.77-4.09(m,2H)。
2ar(R=Boc)yield85%;1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.12(t,J=7.1Hz,6H),1.47(s,9H),1.65-1.81(m,2H),1.91-2.11(m,2H),2.78(q,J=7.1Hz,4H),3.07-3.27(m,2H),3.83-4.09(m,2H),4.47(brs,2H),6.98(s,1H),7.15(t,J=8.7Hz,1H),7.24(brs,1H),7.54(m,1H),7.86(s,1H),7.93(dd,J=2.5,6.4Hz,1H),8.58(s,1H)。
1ar’yield63%;1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.04(brt,6H),1.41(s,9H),1.52(m,2H),2.02(brd,J=12.3Hz,2H),2.71(brq,4H),3.12(m,2H),3.82(brd,J=10.0Hz,2H),5.82(d,J=10.2Hz,1H),6.31(d,J=16.9Hz,1H),6.51(dd,10.2,16.9Hz,1H),7.45(t,J=9.1Hz,1H),7.84(m,1H),8.19(dd,J=2.6,6.8Hz,1H),8.61(s,1H),8.64(s,1H),9.98(brs,2H)。
1ar nTFAyield 76%(n=3);1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.29(brs,6H),2.03-2.24(m,2H),3.05-3.65(m,10H),5.90(d,J=10.0Hz,1H),6.38(d,J=17.0Hz,1H),6.56(dd,J=10.0,17.0Hz,1H),7.49(t,J=9.1Hz,1H),7.80(m,1H),8.16(dd,J=2.3,7.0Hz,1H),8.19(s,1H),8.66-9.02(m,2H),8.70(s,1H),8.74(s,1H),10.34(s,2H)。
<實施例136>
使用在冰冷~室溫下、在乙腈中并且在碳酸鉀存在的條件下使丙炔基胺和異哌啶酸乙酯反應得到的化合物4cz和7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺,通過與實施例3相同的方法,得到化合物1-{3-[6-氨基-4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-喹唑啉基]-2-丙基}-4-哌啶羧酸乙酯(2cz)(收率73%)。對化合物2cz,通過與實施例66相同的方法進行反應,粗生成物通過硅膠柱層析,將得到的固體在乙醇中,用大致3等量的2N氫氧化鈉水溶液進行室溫2小時處理,然后,進行中和,生成沉淀物。濾取生成物,用乙腈懸洗,得到化合物1cz的淡黃色固體(收率57%)。
4czyield78%;1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm1.25(t,J=7.1Hz,3H),1.65-1.87(m,2H),1.87-2.06(m,2H),2.02-2.37(m,4H),2.86(m,2H),3.30(d,J=2.3Hz,2H),4.13(q,J=7.1Hz,2H)。
2czyield73%。
1cz1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.46-1.67(m,2H),1.76-1.91(m,2H),2.16-2.39(m,3H),2.80-2.94(m,2H),3.08(s,3H),3.75(s,2H),7.46(t,J=9.1Hz,1H),7.72-7.83(m,1H),7.85(s,1H),8.11(brd,J=6.9Hz,1H),8.35(brs,1H),8.58(s,1H),10.02(brs,1H)。
<實施例137>
使用3-甲氧基丙炔和7-溴-N4-(3-氯-4-氟苯基)-4,6-喹唑啉二胺,通過與實施例3相同的方法,轉(zhuǎn)換為N4-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-甲氧基-1-丙炔基)喹唑啉-4,6-二胺,然后根據(jù)實施例75記載的方法[使用了2-(4-嗎啉代)乙磺酰氯來代替甲磺酰氯]由此合成化合物1caa。
1caayield10%;1HNMR(300MHz,CDCl3)δppm2.38-2.41(m,4H),2.89(t,J=6.9Hz,2H),3.38(t,J=7.2Hz,2H),3.50(s,3H),3.61-3.68(m,4H),4.44(s,2H),7.20(t,J=9.0Hz,1H),7.52-7.56(m,2H),7.92-7.95(m,2H),8.05(s,1H),8.07(s,1H),8.73(s,1H)。
<實施例138>
根據(jù)實施例1記載的方法[使用了4-(4-嗎啉代)-2-丁酸來代替丙烯酸]將化合物2t(實施例20)轉(zhuǎn)換為1as。
1asyield17%;1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δppm1.47(brs,8H),1.72(brs,6H),2.11(brs,4H),2.72(brs,6H),7.45(t,J=9.0Hz,1H),7.81-7.85(m,2H),8.18(d,J=5.1Hz,1H),8.58(s,1H),8.61(s,1H),9.62(s,1H),9.96(s,1H)。
<試驗例1本發(fā)明的酪氨酸激酶抑制劑的評價>
(1)EGFR酪氨酸激酶抑制作用(方法)使用從源于人鱗狀上皮癌的A431細胞株(東北大學加齡醫(yī)學研究所醫(yī)用細胞資源中心提供)中進行部分精制的EGF受體,改良了Linda J.Pike等的酪氨酸激酶活性測定法(proceedings of the NationalAcademy of Science ofthe U.S.A.,1982,79,1433),并進行了活性測定。詳細的方法如下所示。
在含有牛仔血清(FBS)10%的達爾貝克變法EAGLE培養(yǎng)基(DMEM)中,在37℃、5%二氧化碳氣體的條件下培養(yǎng)A431細胞,將該細胞在含有10mM的N-2-羥乙基哌啶子基-N’-2-乙磺酸(Hepes)緩沖液(pH7.4)、0.25M蔗糖、0.1mM EDTA的溶液中勻漿,然后以3000G離心5分鐘,進而以100000G離心上清液30分鐘,得到A431細胞膜部分,將其作為酶源的部分精制EGF受體供與活性測定。
在溶解于上述A431細胞膜部分(10~15μg)、30mM Hepes緩沖液(pH7.7)、2mM MnCl2、100mM Na3VO4和二甲基亞砜(DMSO)中的被測物的反應混合液(最終濃度1%DMSO)中添加100ng的EGF后,加入合成基質(zhì)血管緊張素II(Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe)50μg,腺苷三磷酸(含有γ-32P-標記體37KBq)最終濃度10mM,使反應開始。此時的容量為60μL。
在冰中反應30分鐘,加入10mg/mL牛血清白蛋白6μL、20%三氯醋酸25μL,使反應停止,然后直接在冰中放置30分鐘。
然后,以5000G離心2分鐘后,取上清液40μL,吸附在P81磷纖維素紙上。將其浸漬在0.75%磷酸水溶液中5分鐘,清洗,重復四次浸漬、清洗操作后,取出紙,通過閃爍掃描計數(shù)器測定32P的計數(shù),將該值設定為A。
同時也測定不添加被測物質(zhì)的反應、被測物質(zhì)和EGF都不添加的反應的計數(shù),分別設定為B、C。
由這些值根據(jù)下式計算酪氨酸激酶抑制率。
抑制率(%)=100-{(A-C)/(B-C)}×100根據(jù)變化被測物質(zhì)的添加濃度所得的抑制率,算出IC50值(50%抑制濃度)。
表11
(2)HER2酪氨酸激酶抑制作用(方法)細胞使用通過將第659個纈氨酸取代為谷氨酸而具有穩(wěn)定活性的變異c-erbB2進行變形的NIH3T3小鼠纖維母細胞株(東北大學加齡醫(yī)學研究所醫(yī)用細胞資源中心提供)。以下記為A4細胞。利用添加10%FBS的DMEM/F12混合培養(yǎng)基(以下稱為complete medium),以37℃、5%CO2、95%Air條件,在plastic dish中維持培養(yǎng)該細胞株。
將懸濁在complete medium中的A4細胞以3×105/well分散在12孔板(well plate)中,使變?yōu)閏onfluent的細胞與化合物一起在37℃培養(yǎng)2小時。用PBS將細胞清洗一次后,再次懸濁在1ysis buffer(60mM Tris(pH6.8),2%SDS,10%Glycerol,5%beta-mercaptoethanol,0.001%bromophenol blue)中,用超聲波處理,作為whole cell lysate用于Western blot法中。
將蛋白量25μg份的whole cell lysate用于7.5%SDS-聚丙烯酰胺電泳后,復制在PVDF膜上。將該膜封閉后,在添加0.1%Tween20的Tris緩沖液中與磷酸酪氨酸、小鼠單克隆抗體進行孵化,然后,用HRP標記抗小鼠2次抗體處理。用化學發(fā)光試劑處理膜,用發(fā)光CCD攝像機進行chemiluminescence攝像,記錄在電子媒體中。用Densitometer對所得的磷酸信號進行定量化,將不添加化合物時的信號設為100%抑制,背景信號設為0%,以%抑制來評價基于化合物的磷酸化抑制。
表12
(3)體外癌細胞增殖抑制作用(方法)對于各種癌細胞株的增殖抑制試驗,通過XTT法進行。詳細的方法如下所示。將懸濁于添加10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基的細胞以5000/100μ/1well分散在96孔板中。同時以3倍的公比將該藥物稀釋成8種從100μM至0.04μM濃度的培養(yǎng)基分散成100μl/well。對于低濃度能夠觀察抑制活性的化合物,進行更低用量的試驗。之后,加入添加25μM的Phenazinemethosulfate的1mg/ml的XTT試劑(SIGMA社制)50μl/well,在37℃進一步培養(yǎng)4小時,使生細胞顯色,用吸光度計進行OD490nm的比色定量。
由用量抑制曲線算出IC50值(50%抑制細胞增殖的濃度),作為抑制活性指標。
(4)體內(nèi)抑制癌的效果(方法)在Balb/c雌性裸鼠(Balb/cAJcl-nu小鼠,日本clea社,購入時5周齡)的背部皮下移植懸濁在PBS中的人類表皮癌細胞A4315×106/100μl,經(jīng)過7日前后,在移植腫瘤的平均體積達到100mm3時,進行分組,每組4只,使各組的平均腫瘤體積值一定。用量規(guī)測定長徑和短徑,將[短徑2×長徑/2]=腫瘤體積[mm3]作為腫瘤體積值。從分組日起一日一次連續(xù)14日強制經(jīng)口給予藥物,對照組的小鼠不給藥物。以對照組和藥物處理組算出將給藥開始日的腫瘤體積作為1的相對腫瘤抑制率。抑制癌效果%=(藥物對照組的最后日的相對腫瘤增殖率-1)/(對照組的最后日的相對腫瘤抑制率-1)×100(結(jié)果)化合物1a、化合物1f以及化合物1a·2TsOH顯示劑量依賴性的抗癌效果。由這些結(jié)果可以看出本發(fā)明化合物作為抗癌劑是有效的。
表13對于A431腫瘤的抗癌效果
表14對于A431腫瘤的抗癌效果
(5)變異原性試驗(評價方法)為了探討化合物1a和1A(特表2000-508657號公報實施例24記載的化合物*)的突變誘發(fā)性,使用了鼠傷寒沙門菌TA100、TA98、TA2637以及大腸菌WP2uvrA實施回復突變試驗(Pre incubation法)。對各化合物在50(對于化合物1A為78.1)~5000μg/plate的用量范圍、在存在或不存在源于大鼠肝的S9mix的條件下進行37℃20分鐘的前處理,之后與瓊脂一起疊層在最少葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上。在37℃培養(yǎng)大致48小時后,測定在Plate上出現(xiàn)的回復突變菌落數(shù)。將處理Plate上的回復突變菌落數(shù)存在劑量依賴性增加并且為溶劑對照值得2倍以上的情況判定為陽性。
(結(jié)果)化合物1a,在各菌株中均沒有誘發(fā)超過溶劑對照值2倍的回復突變菌落數(shù)的增加。另一方面,化合物1A,在TA98和TA2637中,無論有無代謝活性化,均誘發(fā)了超過溶劑對照值2倍的回復菌落數(shù)的顯著增加。
根據(jù)以上結(jié)果,可以得出化合物1a變異原性陰性,化合物1A變異原性陽性的結(jié)論。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明的化合物(1),由于具有強的酪氨酸激酶抑制活性(癌細胞增殖抑制作用),因此能夠用于抗癌劑以及基于動脈硬化的疾病和干癬的治療/預防藥。
本申請是以在日本申請的特愿2001-45827和特愿2001-353525為基礎的,它們的內(nèi)容全部包括在本發(fā)明說明書中。
權利要求
1.通式(I)所示的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物, [式中n表示0~3的整數(shù),R1表示氫原子、鹵原子、羥基、氰基、硝基、三氟甲基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷酰基或C1~C5烷基磺?;?。)、C2~C5鏈烯基、C2~C5炔基或C1~C5烷?;琑2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、(R28SO2)2N-(式中R28表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、CH3COCH2CONH-、CH3SCH2CH2CONH-、NCCH2CONH-、 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。),R2、R3中的剩余的一個表示 或 {式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基、或c)R8和R9一起表示C=O、或d)R8和R9一起形成環(huán)并表示可以通過介入-O-、-S-、-NR10(式中R10表示氫原子或C1~C5烷基)的C3~C8環(huán)亞烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16a)表示氫原子、b)表示可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2~5的整數(shù),2)R19表示氰基時,j表示0。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、-S(O)g-(式中g表示0~2的整數(shù)。)、羰基或-NR20-(式中R20a)表示氫原子、b)表示C1~C5烷基磺?;)表示C1~C5烷?;)表示C1~C5烷氧基羰基或e)表示可以被氰基、羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
2.根據(jù)權利要求1所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如通式(I)所示, [式中n表示1或2的整數(shù),R1表示鹵原子、氰基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷?;駽1~C5烷基磺?;?。)、或C2~C5炔基,R2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、(R28SO2)2N-(式中R28表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、CH3COCH2CONH-、CH3SCH2CH2CONH-、NCCH2CONH-、 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示C1~C5烷基。),R2、R3中的剩余的一個表示 或 {式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16表示氫原子、或者可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2~5的整數(shù),2)R19表示氰基時,j表示0。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、羰基或NR20-(式中R20表示氫原子、C1~C5烷基磺?;1~C5烷?;1~C5烷氧基羰基或可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如通式(I)所示, [式中n表示0~3的整數(shù),R1表示氫原子、鹵原子、羥基、氰基、硝基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-S(O)fR13(式中f表示0~2的整數(shù),R13表示C1~C5烷基。)、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷酰基或C1~C5烷基磺?;?、C2~C5鏈烯基、C2~C5炔基、C1~C5烷?;?,R2表示 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子、鹵原子或者可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。)或 (式中R7表示可以被鹵原子、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基取代的C1~C5烷基。),R3表示 或 {式中R8、R9各自獨立表示氫原子、可以被羥基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,或者R8和R9一起表示C=O,或者R8和R9一起形成環(huán)并表示可以通過介入-O-、-S-、-NR10(式中R10表示氫原子或C1~C5烷基)的C3~C8環(huán)亞烷基,m表示0~3的整數(shù),R11、R12各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基,Y表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19(式中R16表示氫原子、或可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基,u和j表示0或1,v表示1~5的整數(shù),R19表示氫原子、羥基、氰基、氨基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2~5的整數(shù),2)R19表示氰基時,j表示0。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、-S(O)g-(式中g表示0~2的整數(shù)。)、羰基或-NR20-(式中R20表示氫原子、或者可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1~3的整數(shù),k表示0或1,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基、氰基、二(C1~C5烷基)氨基、嗎啉代、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或CONR21R22(式中R21、R22各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)。}。]。
4.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,n表示1或2,R1表示鹵原子、氰基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-NR14R15(式中R14和R15各自獨立表示氫原子、C1~C5烷基、C1~C5烷?;駽1~C5烷基磺酰基。)、C2~C5炔基或C1~C5烷?;?。
5.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,n表示1或2,R1表示鹵原子、氰基、C1~C5烷基、C1~C5烷氧基、-NR14R15(式中R14和R15表示C1~C5烷基。)、C2~C5炔基或C1~C5烷?;?。
6.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,n表示2,R1表示鹵原子。
7.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,n表示1,R1表示C1~C5烷氧基、C2~C5炔基或C1~C5烷酰基。
8.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,R2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。)、(R28SO2)2N-(式中R28表示C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、CH3COCH2CONH-、CH3SCH2CH2CONH-、NCCH2CONH-、 (式中X表示-C(O)-或SO2-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子或C1~C5烷基。)或 (式中R7表示可以被嗎啉代取代的C1~C5烷基。),R2、R3中的剩余的一個表示權利要求1~權利要求3中任一項所述的取代基。
9.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,R2、R3中的其中一個表示R27SO2NH-(式中R27表示C1~C5烷基。)、C1~C5烷氧基、或 (式中X表示-C(O)-,R4、R5以及R6各自獨立表示氫原子。),R2、R3中的剩余的一個表示權利要求1~權利要求3中任一項所述的取代基。
10.根據(jù)權利要求8或9所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,R2、R3中的其中一個表示在權利要求1~3中任一項中作為R2、R3中的其中一個所述的取代基,R2、R3中的剩余的一個表示 或 [式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,或者d)R8和R9一起形成環(huán),表示可以通過存在-O-、-NR10-(式中R10表示氫原子。)的C3~C8的環(huán)亞烷基,m表示0或1,R11、R12表示氫原子,Y表示C1~C5烷氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19{式中R16a)表示氫原子、或b)表示可以C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子,u和j表示0或1,v表示0或1,R19表示氫原子、氰基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2,2)當R19為氰基時,j表示0。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、NR20-(式中R20表示a)氫原子、b)C1~C5烷基磺?;)C1~C5烷?;)C1~C5烷氧基羰基或e)可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 {式中r和t各自獨立表示1或2,k表示0,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基。}。]。
11.根據(jù)權利要求8或9所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,R2、R3中的其中一個表示在權利要求1~3中任一項中作為R2、R3中的其中一個所述的取代基,R2、R3中的剩余的一個表示 [式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,或者d)R8和R9一起形成環(huán),表示可以通過存在-O-、-NR10-(式中R10表示氫原子。)的C3~C8的環(huán)亞烷基,m表示0或1,R11、R12表示氫原子,Y表示C1~C5烷氧基、-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19{式中R16a)表示氫原子、或b)表示可以C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子,u和j表示0或1,v表示2,R19表示氫原子、氰基、C1~C5烷氧基、嗎啉代、4-C1~C5烷基哌嗪-1-基或二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2,2)當R19為氰基時,j表示0。}、 {式中p和q各自獨立表示2或3的整數(shù),Z表示-O-、NR20-(式中R20表示a)氫原子、b)C1~C5烷基磺酰基、c)C1~C5烷?;)C1~C5烷氧基羰基或e)可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}、或 (式中r和t各自獨立表示1或2,k表示0,W表示氫原子、羥基、C1~C5烷氧基、C1~C5烷酰氧基、羧基。)。]。
12.根據(jù)權利要求8或9所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,R2、R3中的其中一個表示在權利要求1~3中任一項中作為R2、R3中的其中一個所述的取代基,R2、R3中的剩余的一個表示 [式中R8、R9各自獨立a)表示氫原子、b)表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,m表示1,R11、R12表示氫原子,Y表示、 {式中p和q表示2,Z表示-NR20-(式中R20表示可以被氰基或C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}。]。
13.根據(jù)權利要求1~3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,其特征在于,在通式(I)中,n表示2,R1表示鹵原子,R2表示 (式中X表示-C(O)-,R4、R5以及R6表示氫原子。),R3表示 [式中R8、R9表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,m表示0,Y表示-N(R16)-(CO)u-(CR17R18)v-(CO)j-R19{式中R16表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基,R17、R18各自獨立表示氫原子,u和j表示0,v表示2,R19表示二(C1~C5烷基)氨基。其中,1)u和j同時表示0時,v表示2,2)R19表示氨基時,j表示0。}、或 {式中p和q表示2,Z表示-NR20-(式中R20表示可以被C1~C5烷氧基取代的C1~C5烷基。)。}。]。
14.根據(jù)權利要求1~13中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,且如下式(1a)所示。
15.根據(jù)權利要求14所述的化合物,藥學上可接受的鹽是甲苯亞磺酸的鹽。
16.下式(1a)所示化合物的甲苯亞磺酸鹽的結(jié)晶。
17.根據(jù)權利要求16所述的結(jié)晶,在粉末X線衍射圖形中具有以下所示的特征吸收峰(2θ)中的任意一個、任意兩個、任意三個、任意四個、任意五個、任意六個或所有峰。特征吸收峰(2θ、±0.20)3.30、6.60、7.50、9.40、13.90、17.40、19.10
18.根據(jù)權利要求14所述的化合物,水合物是1/2水合物。
19.由下式(1a)所示化合物的1/2水合物的結(jié)晶。
20.根據(jù)權利要求19所述的結(jié)晶,在粉末X線衍射圖形中具有以下所示的特征吸收峰(2θ)中的任意一個、任意兩個、任意三個、任意四個、任意五個、任意六個或所有峰,特征吸收峰(2θ、±0.20)7.10、10.60、11.90、12.20、13.80、17.30、18.40
21.根據(jù)權利要求1~13中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,如下式所示。
22.一種藥物組合物,含有權利要求1~20中任一項所述的化合物和藥學上可接受的載體。
23.一種酪氨酸特異性蛋白激酶抑制劑,以權利要求1~20中中任一項所述的化合物為有效成分。
24根據(jù)權利要求23所述的抑制劑,酪氨酸特異性蛋白激酶是EGF受體酪氨酸特異性蛋白激酶。
25.根據(jù)權利要求23所述的抑制劑,酪氨酸特異性蛋白激酶是EGF受體酪氨酸特異性蛋白激酶和HER2酪氨酸特異性蛋白激酶。
26.一種由于酪氨酸特異性蛋白激酶的活性亢進引起的疾病的治療和/或預防藥,以權利要求1~20中任一項所述的化合物為有效成分。
27.根據(jù)權利要求26所述的治療和/或預防藥,用于抗癌劑、治療和/或預防基于動脈硬化的疾病和干癬。
全文摘要
通式(I)所示的喹唑啉衍生物或其藥學上可接受的鹽、它們的水合物或溶劑化物、它們的光學活性體或消旋體或者它們的非對映異構(gòu)體混合物,具有優(yōu)良的酪氨酸特異性的蛋白激酶抑制活性,作為藥物,特別是作為各種癌癥、基于動脈硬化的疾病或干癬的治療/預防藥是有效的。
文檔編號A61P35/00GK1492860SQ02805260
公開日2004年4月28日 申請日期2002年2月21日 優(yōu)先權日2001年2月21日
發(fā)明者北野靖典, 河原英治, 鈴木毅, 阿部大輔, 中條雅弘, 上田直子, 子, 弘, 治, 輔 申請人:三菱制藥株式會社