專利名稱：可用作ccr5拮抗劑的哌啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作選擇性CCR5拮抗劑的哌啶衍生物、包含本發(fā)明化合物的藥用組合物以及使用本發(fā)明化合物的治療方法。本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物與一種或多種用于治療人免疫缺陷病毒(HIV)的抗病毒藥物或其它藥物的聯(lián)合藥物的用途。本發(fā)明進(jìn)一步涉及本發(fā)明化合物單獨或結(jié)合另一種藥物在治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘、變態(tài)反應(yīng)或多發(fā)性硬化中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
毫無疑問，獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)的病原體HIV引起了全球性的健康危機(jī)。盡管藥物治療的最新進(jìn)展已經(jīng)在減緩AIDS進(jìn)程方面取得了成功，但是仍然需要尋找一種控制該病毒的更安全、更有效而且更便宜的途徑。
據(jù)報道，CCR5基因在抗HIV感染方面具有某種作用。HIV感染開始于病毒通過與細(xì)胞受體CD4和次級趨化因子輔助受體分子相互作用附著到靶細(xì)胞膜，然后復(fù)制，而且感染細(xì)胞通過血液擴(kuò)散到其它組織。存在各種趨化因子受體，但是對于嗜巨噬細(xì)胞性HIV(人們認(rèn)為嗜巨噬細(xì)胞性HIV是感染早期在體內(nèi)復(fù)制的非常關(guān)鍵的致病株)，HIV進(jìn)入細(xì)胞所需的首要趨化因子受體是CCR5。因此，干擾病毒受體CCR5與HIV間相互作用能夠阻止HIV進(jìn)入細(xì)胞。本發(fā)明涉及為CCR5拮抗劑的小分子。
據(jù)報道，CCR5受體在炎性疾病中介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)移，所述炎性疾病有例如關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘和變態(tài)反應(yīng)。預(yù)計這樣的受體的抑制劑可用于治療所述疾病以及治療其它炎性疾病或病癥，例如炎性腸病、多發(fā)性硬化、實體器官移植排斥和移植物抗宿主病。
用作治療認(rèn)知障礙(例如早老性癡呆)的毒蕈堿拮抗劑的其它哌啶衍生物在美國專利5,883,096、6,037,352、5,889,006、5,952,349和5,977,138中公開。
A-M.Vandamme等，Antiviral Chemistry & Chemotherapy，9187-203(1998)公開了目前臨床治療人HIV-1感染的方法，包括至少三種藥物的聯(lián)合應(yīng)用或稱為高活性抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(“HAART”)。HAART涉及核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(“NRTI”)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(“NNRTI”)和HIV蛋白酶抑制劑(“PI”)的不同聯(lián)合應(yīng)用。在按治療方案用藥的首次治療患者，HAART有效降低死亡率以及減緩HIV-1感染發(fā)展為AIDS。然而，上述多藥物療法不能消除HIV-1并且長期治療往往導(dǎo)致多藥耐藥性。仍然需要優(yōu)先考慮開發(fā)提供更好HIV-1治療的新藥物療法。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一類用作CCR5受體拮抗劑的新化合物、制備所述化合物的方法、包含一種或多種所述化合物的藥用組合物以及治療、預(yù)防或改善一種或多種CCR5受體相關(guān)性疾病的方法。
本發(fā)明一個方面涉及具有式I所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物
其中R1為 或 R2選自以下基團(tuán)H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、烷基酮、芳基酮、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、烷氧基烷基或酰胺；R3選自以下基團(tuán)芳基、6-元雜芳基、芴基；二苯基甲基、6元雜芳基-N-氧化物、 和 其中所述芳基、芴基、二苯基或雜芳基任選被1-4個取代基取代，所述取代基可以相同或不同并且獨立選自R11、R12、R13、R14和R15；R4為選自以下基團(tuán)的1-3個取代基H、鹵基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、酰胺、CF3、OCF3、芳基、雜芳基、-XR7、-C(O)C3-C8環(huán)烷基、-C(O)C3-C8雜環(huán)烷基、-(C1-C6)烷基-N(R21)SO2R22、-(C1-C6)烷基-C(O)NR20R21、-CN、-CO2H、-CO2R22、R8-芳基(C1-C6)烷基-、R8-雜芳基(C1-C6)烷基-、-C(O)-(C1-C6)烷基、R8-芳基-C(O)-、-C(O)NR21R22、-C(O)NH2、-C(O)N(H)OH、-(C1-C6)烷基-N(R21)C(O)R22、-(C1-C6)烷基-N(R21)CO2R22、-(C1-C6)烷基-N(R21)C(O)NR21R22、-(C1-C6)烷基-NR21R22、-(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基SO2NR21R22和-SO2NR21R22，其中當(dāng)存在一個以上R4時，R4可以相同或不同并且獨立選定；R5選自以下基團(tuán)H、芳基烷基、(C1-C6)烷基、R8-芳基(C1-C6)烷基-、R8-雜芳基(C1-C6)烷基-、-SO2-(C1-C6)烷基、-SO2-(C3-C6)環(huán)烷基、-SO2-芳基、R8-芳基-SO2-、-C(O)-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C4-C6)環(huán)烷基、R8-芳基-C(O)-、-C(O)NR21R22和-SO2NR21R22；R6為H、-(C1-C6)烷基或-(C1-C6)鹵代烷基；R7選自以下基團(tuán)芳基、取代的芳基、雜芳基、烷基、鹵代烷基和環(huán)烷基；R8為1、2或3個選自以下的取代基H、鹵基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-CF3、-OCF3、CH3C(O)-、-CN、CH3SO2-、CF3SO2-和-NH2，其中當(dāng)存在一個以上R8時，R8可以相同或不同并且獨立選定；R9、R10和B可以相同或不同并且各自獨立選自氫、(C1-C6)烷基和-(C1-C6)鹵代烷基；R11和R12可以相同或不同并且各自獨立選自以下基團(tuán)(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、鹵素、-NR19R20、-OH、CF3、-OCH3、-O-?；?OCF3；R13選自以下基團(tuán)氫、R11、H、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR19、吡啶基-N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、N(R20)CONR20R21、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-環(huán)烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、-SR22、-SOR22、-SO2R22、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羥基(C1-C6)烷基、-CONR19R20、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R19、-Si(CH3)3和-B(OC(CH3)2)2；R14選自(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基-NH2和R15-苯基；R15為1-3個選自以下的取代基氫、(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、-CF3、-CO2R20、-CN、(C1-C6)烷氧基和鹵素；其中當(dāng)存在一個以上R15時，R15可以相同或不同并且獨立選定；各個R16和R17可以相同或不同并且各自獨立選自氫和(C1-C6)烷基，或者R16和R17一起為C2-C5亞烷基并且與它們所連接碳一起構(gòu)成3-6個碳原子的螺環(huán)；各個R19、R20和R21可以相同或不同并且各自獨立選自H、(C1-C6)烷基和(C3-C6)環(huán)烷基；R22選自以下基團(tuán)(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、(C2-C6)羥基烷基、(C2-C6)亞烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和芳基(C1-C6)烷基-；A選自H、(C1-C6)烷基和(C2-C6)鏈烯基；M為任選被R4取代的芳基或雜芳基；Q為CH或N；X選自以下基團(tuán)CH2、SO2、SO、S和O，并且符合以下條件當(dāng)R1為苯基、吡啶基、噻吩基或萘基時，R2不能為H、-(C1-C6)烷基或-C(O)-(C1-C6)烷基。
本發(fā)明另一方面涉及用于治療HIV的藥用組合物，該組合物包含一種或多種式I化合物。
本發(fā)明另一方面涉及治療人免疫缺陷病毒的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種式I化合物。本發(fā)明的進(jìn)一方面涉及治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘、變態(tài)反應(yīng)或多發(fā)性硬化的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種式I化合物。
本發(fā)明的又一方面涉及治療人免疫缺陷病毒的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者一種或多種式I化合物以及一種或多種用于所述治療的抗病毒藥物或其它藥物。本發(fā)明的進(jìn)一步方面涉及治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘或變態(tài)反應(yīng)的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者一種或多種式I化合物以及一種或多種用于所述治療的抗病毒藥物或其它藥物。
作為聯(lián)合用藥組分的所述CCR5藥物和抗病毒藥物或其它藥物可以以單一劑量或分開給藥。本發(fā)明也包括包含各活性成分的獨立劑型的藥盒。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及具有以下式I所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物 其中，R1、R2、R3、R9、R10、A和B的定義同上。
當(dāng)R1為 或 Q優(yōu)選CH或N，R2優(yōu)選烷基、芳基或芐基。
當(dāng)R1為M-R4時，R2優(yōu)選芐基、苯基或環(huán)丙基甲基。
除非另有說明，否則本文使用的以下術(shù)語具有下文中定義的含義。
“烷基”是指可以為直鏈或支鏈的脂肪烴基并且鏈中包含1至約20個碳原子。優(yōu)選的烷基在鏈中含1至約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中含1至約6個碳原子。支鏈烷基是指諸如甲基、乙基或丙基的一個或多個低級烷基連接到直鏈烷基鏈?！暗图壨榛笔侵告溨芯哂屑s1至約6個碳原子的基團(tuán)，它可為直鏈或支鏈基團(tuán)。本發(fā)明優(yōu)選的烷基為低級烷基。合適的烷基的非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、庚基、壬基、癸基、三氟甲基和環(huán)丙基甲基。
“鹵基”是指氟基、氯基、溴基或碘基。優(yōu)選氟基、氯基或溴基，更優(yōu)選氟基和氯基。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯或溴，更優(yōu)選氟和氯。
“鹵代烷基”或“鹵化烷基”是指含一個或多個鹵基取代基的烷基。優(yōu)選鹵代烷基為鹵代烷基。非限制性的實例包括-CH2Cl、-CHCl2、-CCl3、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CH2-CH2F、-CH2CHF2、-CH2CF3和-CF2CF3。
“環(huán)系取代基”是指連接至芳族環(huán)或非芳族環(huán)系的取代基，例如它置換了所述環(huán)系上的有效氫。環(huán)系取代基可以相同或不同，各自獨立選自以下基團(tuán)芳基、雜芳基、芳烷基、烷基氨基、芳基氨基、烷基芳基、芳鏈烯基、雜芳烷基、烷基雜芳基、雜芳鏈烯基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、芳烷基氧基、酰基、芳?；?、鹵基、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、雜芳基磺?；⑼榛鶃喕酋；⒎蓟鶃喕酋；?、雜芳基亞磺?；?、烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以相同或不同并且獨立選自氫、烷基、芳基和芳烷基。
“環(huán)烷基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)稠合環(huán)系，包含3-10個環(huán)碳原子、優(yōu)選3-7個環(huán)碳原子、更優(yōu)選3-6個環(huán)碳原子。環(huán)烷基可以任選被一個或多個“環(huán)系取代基”取代，所述環(huán)系取代基可以相同或不同并且定義同上。合適的單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。合適的多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括1-十氫萘基、降冰片烯基、金剛烷基等。
“雜環(huán)烷基”是指非芳族的單環(huán)或多環(huán)稠合環(huán)系，包含3-10個環(huán)碳原子、優(yōu)選3-7個環(huán)碳原子、更優(yōu)選3-6個環(huán)碳原子，其中所述雜環(huán)烷基含有1個或2個獨立選自O(shè)、S或N的雜原子，所述雜原子隔斷碳環(huán)結(jié)構(gòu)，條件是所述環(huán)不含相鄰的氧和/或硫原子。雜環(huán)烷基可以任選被一個或多個“環(huán)系取代基”取代，所述環(huán)系取代基可以相同或不同并且定義同上。
“芳基”是指芳族單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，包含6-14個環(huán)碳原子，優(yōu)選6-10個環(huán)碳原子。芳基可以任選被一個或多個“環(huán)系取代基”取代，所述環(huán)系取代基可以相同或不同并且定義同上。合適的芳基的非限制性實例包括苯基和萘基。
“雜芳基”為含有1個或2個獨立選自O(shè)、S或N的雜原子的5-6個環(huán)原子的環(huán)芳族基團(tuán)或11-12個環(huán)原子的雙環(huán)基團(tuán)，所述雜原子隔斷碳環(huán)結(jié)構(gòu)并且具有足夠數(shù)量的離域π電子提供芳族特性，前提是所述各環(huán)不含相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜芳基包含5-6個環(huán)原子。“雜芳基”可以任選被一個或多個“環(huán)系取代基”取代，所述環(huán)系取代基可以相同或不同并且定義同上。雜芳基基礎(chǔ)命名前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子存在。氮原子可以構(gòu)成N-氧化物。本發(fā)明包括所有的的位置異構(gòu)體，例如2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。可用的6-元雜芳基包括吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基等以及其N-氧化物?？捎玫?-元雜芳基環(huán)包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、異噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基等?？捎玫碾p環(huán)基團(tuán)包括由上述雜芳基衍生的苯并稠合環(huán)系，例如喹啉基、2，3-二氮雜萘基、喹唑啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基等。
酰胺表示為RCONH2，其中RCONH2的一個或兩個氫原子可以被烷基取代，所述烷基具有以上定義的相同含義。
芳基烷基或芳烷基是指芳基經(jīng)烷基連接至主體基團(tuán)或環(huán)的部分。
烷基酮是指烷基經(jīng)酮連接至主體基團(tuán)或環(huán)的部分。
芳基酮是指芳基經(jīng)酮連接至主體基團(tuán)或環(huán)的部分。
烷基芳基是指烷基經(jīng)芳基連接至主體基團(tuán)或環(huán)的部分。
雜芳基烷基是指雜芳基經(jīng)烷基連接至主體基團(tuán)或環(huán)的部分。
術(shù)語“任選取代(的)”是指用規(guī)定基團(tuán)、原子團(tuán)或部分任選取代。
本文使用的術(shù)語“溶劑化物”是指由溶質(zhì)離子或分子與一個或多個溶劑分子構(gòu)成的聚集體，例如包含所述離子的水合物。
本文使用的術(shù)語“組合物”和“制劑”包括包含指定成分的產(chǎn)品以及由所述指定成分的聯(lián)合用藥直接或間接得到的任何產(chǎn)品。
“患者”包括哺乳動物和其它動物。
“哺乳動物”包括人和其它哺乳動物。
術(shù)語“治療有效量”是指管理人員(例如研究者、醫(yī)生或獸醫(yī))尋找的治療藥物式I化合物的有效作用于組織、系統(tǒng)、動物或患者的用量，有效作用包括減緩所治療病癥或疾病的癥狀以及預(yù)防、減緩或中止所述疾病或病癥(例如本文討論的炎癥、免疫調(diào)節(jié)病或呼吸性疾病)的進(jìn)程。
本發(fā)明化合物的前體藥物和溶劑化物也包括在本發(fā)明范圍。本文使用的術(shù)語“前體藥物”是指為藥物前體的化合物，一旦將其給予患者，它將通過代謝過程或化學(xué)過程發(fā)生化學(xué)轉(zhuǎn)化，得到式I化合物或其鹽和/或溶劑化物。前體藥物的闡述參見T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)，A.C.S.SymposiumSeries的第14卷；Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)EdwardB.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and PergamonPress，兩篇文獻(xiàn)都通過引用結(jié)合到本文。
式I化合物可以形成也屬本發(fā)明范圍的鹽、溶劑化物和前體藥物。除非另有說明，否則本文提及式I化合物時應(yīng)當(dāng)理解為涉及包括其鹽、溶劑化物和前體藥物。
本文使用的術(shù)語“鹽”是指與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸鹽以及與無機(jī)堿和/或有機(jī)堿形成的堿鹽。此外，當(dāng)式I化合物既包含堿性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)又包含酸性部分(例如但不限于羧酸)時，可能形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)并且包括在此使用的術(shù)語“鹽”內(nèi)。盡管其它鹽也是有用的，但是優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(即非毒性、生理上可接受的)鹽。式I化合物的鹽可以通過例如以下方式生成使式I化合物與一定量的酸或堿(例如一當(dāng)量)反應(yīng)，介質(zhì)使用例如所述鹽在其中沉淀的介質(zhì)，或者使用水溶液介質(zhì)并且隨后冷凍干燥。
示例性的酸加成鹽包括醋酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽(例如上述的磺酸鹽)、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽等。此外，一般認(rèn)為適合與堿性藥用化合物生成藥用鹽的酸在例如以下的文獻(xiàn)中有論述S.Berge等，Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.ofPharmaceutics(1986)33201-217；Anderson等，The Practice ofMedicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York)。上述文獻(xiàn)的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文。
示例性堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽、鋰鹽和鉀鹽)、堿土金屬-鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)、與有機(jī)堿(例如有機(jī)胺)如芐星、二環(huán)己基胺、哈胺(hydrabamines)(用N，N-雙(脫氫松香基)乙二胺生成)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡萄糖酸酰胺(glucamide)、叔丁胺的鹽；以及與氨基酸(例如精氨酸、賴氨酸)形成的鹽等。堿性含氮基團(tuán)可以用例如以下試劑季銨化低級烷基鹵(例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙脂、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、十二烷基、十四烷基和硬脂?；穆然?、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵(例如芐基溴和苯乙基溴)以及其它試劑。
所有這樣的酸鹽和堿鹽為本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽，并且所有酸鹽和堿鹽被認(rèn)為是等價于相應(yīng)本發(fā)明目的化合物的游離形式。
式I化合物及其鹽、溶劑化物和前體藥物可能存在互變異構(gòu)體形式(例如為酰胺或亞氨醚)。所有這樣的互變異構(gòu)體形式都是本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明化合物(包括所述化合物的鹽、溶劑化物和前體藥物以及前體藥物的鹽和溶劑化物)的所有立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等)包括在本發(fā)明范圍，所述立體異構(gòu)體有例如由于不對稱碳上存在不同取代基產(chǎn)生的立體異構(gòu)體，包括對映異構(gòu)體形式(它甚至可以在沒有不對稱碳時存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式。例如，本發(fā)明化合物的單獨立體異構(gòu)體可以基本沒有其它異構(gòu)體，或者可以混合為例如外消旋體或者與所有其它立體異構(gòu)體或所選的其它立體異構(gòu)體混合。本發(fā)明的手性中心可具有IUPAC 1974 Recommendations定義的S或R構(gòu)型。在使用術(shù)語“鹽”、“溶劑化物”、“前體藥物”等時同樣適用于本發(fā)明化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體或前體藥物的鹽、溶劑化物和前體藥物。
本文使用的術(shù)語“核苷和核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑”(“NRTI”)是指抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶活性的核苷和核苷酸以及其類似物，所述酶催化病毒基因組HIV-1 RNA轉(zhuǎn)化為前病毒HIV-1 DNA。
通常合適的NRTI包括齊多夫定(AZT)，商品名RETROVIR，Glaxo-Wellcome Inc.，Research Triangle，NC 27709；去羥肌苷(ddl)，商品名VIDEX，Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ 08543；扎西他濱(ddC)，商品名HIVID，Roche Pharmaceuticals，Nutley，NJ07110；司他夫定(d4T)，商品名ZERIT，Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ 08543；拉米夫定(3TC)，商品名EPIVIR，Glaxo-WellcomeResearch Triangle，NC 27709；WO96/30025中公開的阿巴卡韋(1592U89)，商品名ZIAGEN，Glaxo-Wellcome Research Triangle，NC27709；阿德福韋二匹伏酯[bis(POM)-PMEA]，商品名PREVON，GileadSciences，F(xiàn)oster City，CA 94404；洛不卡韋(BMS-180194)，EP-0358154和EP-0736533中公開的一種核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，由Bristol-MyersSquibb(Princeton，NJ 08543)開發(fā)；BCH-10652，一種逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(為BCH-10618和BCH-10619的外消旋混合物形式)，由BiochemPharma(Laval，Quebec H7V，4A7，Canada)開發(fā)；恩曲他濱[(-)-FTC]，Emory University許可，Emory Univ.的美國專利5,814,639，由TrianglePharmaceuticals(Durham，NC 27707)開發(fā)；β-L-FD4(也稱為β-L-D4C和β-L-2＇，3＇-dicleoxy-5-fluoro-cytidene)，Yale University許可給VionPharmaceuticals，New Haven CT 06511；DAPD，嘌呤核苷，(-)-β-D-2，6-二氨基-嘌呤二氧戊環(huán)在EP 0656778中公開，Emory University和University of Georgia許可給Triangle Pharmaceuticals，Durham，NC27707；洛德腺苷(FddA)，9-(2，3-二脫氧-2-氟-b-D-蘇型-戊呋喃糖基)腺嘌呤，一種酸穩(wěn)定的基于嘌呤的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，由美國BioscienceInc.(West Conshohoken，PA 19428)開發(fā)。
本文使用的術(shù)語“非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑”(“NNRTI”)是指抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶活性的非核苷。
通常合適的NNRTI包括奈韋拉平(BI-RG-587)，商品名VIRAMUNE，Boehringer Ingelheim(Roxane Laboratories的生產(chǎn)廠)，Columbus，OH 43216；地拉韋啶(BHAP，U-90152)，商品名RESCRIPTOR，Pharmacia & Upjohn Co.，Bridge Water NJ08807；依法韋侖(DMP-266)，WO94/03440公開的苯并噁嗪-2-酮，商品名SUSTIVA，DuPont Pharmaceutical Co.，Wilmington，DE 19880-0723；PNU-142721，Pharmacia and Upjohn(Bridge Water NJ 08807)開發(fā)的一種呋喃并吡啶-硫代-嘧啶；AG-1549(以前為Shionogi # S-1153)；5-(3，5-二氯苯基)-硫代-4-異丙基-1-(4-吡啶基)甲基-1H-咪唑-2-基甲基碳酸酯，公開于WO 96/10019，由Agouron Pharmaceuticals Inc.(LaJolla CA92037-1020)臨床開發(fā)；MKC-442(1-(乙氧基-甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2，4(1H，3H)-嘧啶二酮)，由Mitsubishi Chemical Co.發(fā)現(xiàn)，由Triangle Pharmaceuticals(Durham，NC27707)開發(fā)；(+)-calanolide A(NSC-675451)和B，公開于NIH美國專利5,489,697的香豆素衍生物，許可給Med Chem Research，該公司將(+)calanolide A與Vita-Invest共同開發(fā)為口服產(chǎn)品。
本文使用的術(shù)語“蛋白酶抑制劑”(“PI”)是指HIV-1蛋白酶抑制劑，病毒多聚蛋白前體(例如病毒GAG和GAG Pol多聚蛋白)蛋白水解性斷裂為傳染性HIV-1中發(fā)現(xiàn)的單獨功能蛋白時需要所述酶。HIV蛋白酶抑制劑包括具有擬肽結(jié)構(gòu)、高分子量(7600道爾頓)以及實質(zhì)性的肽特征的化合物例如CRIXIVAN(Merck)，以及非肽蛋白酶抑制劑例如VIRACEPT(Agouron)。
通常合適的PI包括沙奎那韋(Ro 31-8959)，其硬質(zhì)凝膠膠囊的商品名INVIRASE，其軟質(zhì)凝膠膠囊的商品名FORTOVASE，RochePharmaceuticals，Nutley，NJ 07110-1199；利托那韋(ABT-538)，商品名NORVIR，Abbott Laboratories，Abbott Park，IL 60064；茚地那韋(MK-639)，商品名CRIXIVAN，Merck & Co.，Inc.，West Point，PA19486-0004；奈非那韋(AG-1343)，商品名VIRACEPT，AgouronPharmaceuticals，Inc.，LaJolla CA 92037-1020；氨普奈韋(141W94)，商品名AGENERASE，Vertex Pharmaceuticals，Inc.(Cambridge，MA02139-4211)開發(fā)的一種非肽蛋白酶抑制劑，并且可購自Glaxo-Wellcome，Research Triangle，NC(正進(jìn)行擴(kuò)張市場計劃)；拉西那韋(BMS-234475)，Bristol-Myers Squibb，Princeton，NJ 08543(最初發(fā)現(xiàn)者是Novartis，Basel，Switzerland(CGP-61755)；DMP-450，Dupont發(fā)現(xiàn)的一種環(huán)狀脲，由Triangle Pharmaceuticals開發(fā)；BMS-2322623，由Bristol-Myers Squibb(Princeton，NJ 08543)開發(fā)的一種氮雜肽，為第二代HIV-1 PI；ABT-378，由Abbott，Abbott Park，IL 60064開發(fā)；AG-1549，一種口服活性咪唑氨基甲酸酯，由Shionogi(Shionogi #S-1153)，由Agouron Pharmaceuticals，Inc.(LaJolla CA 92037-1020)開發(fā)。
其它抗病毒藥物包括羥基脲、利巴韋林、IL-2、IL-12、噴他夫西和Yissum Project No.11607。羥基脲(Droxia)是一種核糖核苷三磷酸酯還原酶抑制劑，所述酶參與活化T-細(xì)胞，羥基脲由NCI發(fā)現(xiàn)并由Bristol-Myers Squibb開發(fā)；在臨床前研究中，證明其對去羥肌苷有協(xié)同作用，并且已經(jīng)與司他夫定一起研究。IL-2公開于Ajinomoto的EP-0142268、Takeda的EP-0176299以及Chiron的美國專利RE33653、4530787、4569790、4604377、4748234、4752585和4949314，并且商品名為PROLEUKIN(阿地白介素)，Chiron Corp.，Emeryville，CA 94608-2997，為冷凍干燥粉末，在還原并用水稀釋后用于IV輸注或sc給藥；優(yōu)選劑量為約1至約20百萬IU/d的sc；更優(yōu)選劑量為約15百萬IU/d的sc。IL-12公開于WO96/25171，可從RochePharmaceuticals(Nutley，NJ 07110-1199)和American HomeProdocts(Madison，NJ 07940)購買；優(yōu)選劑量為約0.5mg/kg/d至約10mg/kg/d的sc。噴他夫西(DP-178，T-20)是一種36-氨基酸合成肽，公開于美國專利5,464,933，由Duke University許可給Trimeris，Trimeris正與Duke University合作開發(fā)噴他夫西；噴他夫西通過抑制HIV-1融合至靶膜作用。噴他夫西(3-100mg/d)與依法韋侖以及2種PI一起連續(xù)sc輸注或注射給予三聯(lián)療法難以治療的HIV-1陽性患者；優(yōu)選使用100mg/d。Yissum Project No.11607是一種基于HIV-1 Vif蛋白的合成蛋白，由Yissum Research Development Co.(Jerusalem91042，Israel)進(jìn)行臨床前研究。利巴韋林是1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-甲酰胺，可從ICN Pharmaceuticals，Inc.(Costa Mesa，CA)購買；其制造和配制參見美國專利4,211,771。
本文使用的術(shù)語“抗HIV-1療法”是指可用于單獨治療人HIV-1感染，或作為多藥物聯(lián)合療法、尤其是HAART三聯(lián)和四聯(lián)療法的一部分用于治療HIV-1感染的任何抗HIV-1的藥物。通常已知的合適抗HIV-1療法包括但不限于多藥聯(lián)合療法，例如(i)選自兩種NRTI、一種PI、第二種PI以及一種NNRTI的至少三種抗HIV-1藥物；(ii)選自NNRTI和PI的至少兩種抗HIV-1藥物。通常合適的HAART-多藥聯(lián)合療法包括(a)三聯(lián)療法例如兩種NRTI和一種PI；或(b)兩種NRTI和一種NNRTI；以及(c)四聯(lián)療法例如兩種NRTI、一種PI和第二種PI或一種NNRTI。在治療未用過藥的患者時，優(yōu)選開始用三聯(lián)療法開始抗HIV-1治療；除非對PI有耐藥性，否則優(yōu)選使用兩種NRTI和一種PI。藥物順從是必須的。應(yīng)該每3-6個月監(jiān)測CD4+和HIV-1-RNA血漿水平。如果病毒量達(dá)到穩(wěn)定水平，可加入第四種藥，例如一種PI或一種NNRTI。參見以下表格，進(jìn)一步介紹了通常的療法抗HIV-1多藥聯(lián)合療法A.三聯(lián)療法1.兩種NRTI1+一種PI22.兩種NRTI1+一種NNRTI3B.四聯(lián)療法4兩種NRTI+一種PI+第二種PI或一種NNRTI
C.備選療法5兩種NRTI1一種NRTI5+一種PI2兩種PI6+一種NRTI7或NNRTI3一種PI2+一種NRTI7+一種NNRTI3對表中腳注的解釋1.以下其中一種齊多夫定+拉米夫定；齊多夫定+去羥肌苷；司他夫定+拉米夫定；司他夫定+去羥肌苷；齊多夫定+扎西他濱。
2.茚地那韋、奈非那韋、利托那韋或沙奎那韋軟質(zhì)凝膠膠囊。
3.奈韋拉平或地拉韋啶。
4.參見A-M.Vandamne等，Antiviral Chemistry & Chemotherapy9187，p.193-197和

圖1+2。
5.備選方案用于因為順從性問題或毒性原因不能采用推薦方案的患者以及用于使用推薦方案失敗或復(fù)發(fā)的患者。兩種核苷聯(lián)合可能在很多患者中導(dǎo)致HIV耐藥性以及臨床失敗。
6.大部分?jǐn)?shù)據(jù)用沙奎那韋和利托那韋(各400mg bid)獲得。
7.齊多夫定、司他夫定或去羥肌苷。
本發(fā)明化合物的具體實例包括但不限于這樣的化合物其中R1、R2和R3如以下表格中的定義表1









表1中優(yōu)選的化合物為表IA的化合物表IA



本發(fā)明更優(yōu)選的化合物為以下結(jié)構(gòu)式表示的化合物

本發(fā)明化合物尤其用作CCR5拮抗劑。
本發(fā)明化合物可以按照本領(lǐng)域已知的方法制備，例如以下反應(yīng)流程中介紹的方法、以下實施例介紹的方法以及美國專利5,883,096；6,037,352；5,889,006；5,952,349和5,977,138介紹的方法。
以下的溶劑和試劑在本文可能以所指出的縮寫出現(xiàn)四氫呋喃(THF)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟醋酸酐(TFAA)；1-羥基-苯并三唑(HOBT)；間氯過苯甲酸(MCPBA)；三乙胺(Et3N)；乙醚(Et2O)；叔丁氧基羰基(BOC)；1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)；二甲亞砜(DMSO)；對甲苯磺酸(p-TSA)；雙(三甲硅烷基)-氨基鉀(KHMDA)；4-二甲氨基吡啶(DMAP)；N，N，N-二異丙基乙胺(DIPEA)；1-(3-二甲基-氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)。RT為室溫。
按照流程A制備式IA化合物，其中X為CH2或N，R2為烷基、芳基或芐基，R3和R5同本發(fā)明概述中的定義。
流程A 為了合成式IA化合物，將4-羥基-哌啶1和N-Boc-4-哌啶酮2依次用異丙醇鈦和二乙基氰化鋁處理得到氰基-胺3。將氰基-胺3用甲基溴化鎂處理得到甲基化衍生物4。將哌啶醇4通過swern氧化反應(yīng)氧化為酮5。用酸例如TFA處理脫去5中的Boc基團(tuán)，用標(biāo)準(zhǔn)條件使游離胺與酸如R3CO2H偶合得到酮-酰胺6。在三乙酰氧基硼氫化鈉存在下，使酮-酰胺8與取代的4-氨基哌啶7反應(yīng)得到胺8。通過還原性氨化(RCHO/Na(AcO)3BH)或烷基化(NaH或Cs2CO3/R2X)將8的游離胺官能化獲得式IA化合物。
按照以下流程B、C和D制備式IIA化合物，其中R2、R3、R4和M同上定義。
流程B 在三乙酰氧基硼氫化鈉存在下，使酮-酰胺5與胺10反應(yīng)得到官能化胺11。胺11用NaH、Cs2CO3/R2X或Na(AcO)3BH/RCHO烷基化得到叔胺12。用酸例如HCl或TFA除去12的Boc基團(tuán)，所得哌啶可偶合至酸獲得式IB化合物。
流程C 在Na(AcO)3BH存在下，使N-Boc-4-哌啶酮2與胺(R2NH2)反應(yīng)得到胺13。胺13可在鈀催化下與芳基或雜芳基的鹵化物/三氟甲磺酸酯反應(yīng)或者與Cu(OAc)2/(R4M)3Bi反應(yīng)得到芳化胺14?？梢悦撊?4的Boc基團(tuán)，按照前面說明的方法(流程1；步驟1和2)加入第二個哌啶環(huán)得到哌啶15。用酸如TFA或HCl脫去15中的Boc基團(tuán)，將胺與R3CO2H表示的酸偶合獲得式IB化合物。
流程D 按照以上流程C介紹的方法，官能化的胺11可以反應(yīng)獲得式IB化合物。
為了用本發(fā)明化合物制備藥用組合物，惰性藥學(xué)上可接受的載體可以為固體或液體。固體形式的制劑包括散劑、片劑、可分散的顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。散劑和片劑可以包含約5％至約95％的活性成分。合適的固體載體是本領(lǐng)域中已知的，例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖或乳糖。片劑、散劑、扁囊劑和膠囊劑可以用作適合口服的固體劑型。用于各種組合物的藥學(xué)上可接受的載體和制備方法的例子可以參見A.Gennaro(編輯)，Remington＇sPharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania。
液體形式制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑。這類制劑的例子包括但不限于用于胃腸外注射的水或水-丙二醇溶液劑或者加入甜味劑和遮光劑用于口服的溶液劑、混懸劑和乳劑。液體形式制劑還可以包括用于鼻內(nèi)給藥的溶液劑。
適合吸入給藥的氣霧劑可以包括溶液和粉末形式的固體，它可以結(jié)合藥學(xué)上可接受的載體，例如惰性壓縮氣體如氮。
還包括這樣的固體形式制劑在臨用前將其轉(zhuǎn)化為液體形式制劑，用于口服或胃腸外給藥。這樣的液體形式包括溶液、懸浮液和乳液。
本發(fā)明化合物也可通過透皮給藥。透皮組合物可以采用乳膏、洗液、氣溶膠和/或乳液形式，并且可以包括在基質(zhì)型或貯庫型透皮貼劑中，所述劑型為本領(lǐng)域用于此目的的常規(guī)方式。
本發(fā)明化合物還可以皮下給藥。
本發(fā)明化合物優(yōu)選口服給藥。
優(yōu)選所述藥用制劑為單位劑型。在這樣的劑型中，制劑細(xì)分為適當(dāng)大小的包含治療有效量式I化合物的單位劑量。
制劑的單位劑量中活性化合物的數(shù)量可以根據(jù)具體情況變化或調(diào)整，從約10mg至約500mg，優(yōu)選約25mg至約300mg，更優(yōu)選約50mg至約250mg，最優(yōu)選約55mg至約200mg。
本發(fā)明化合物的實際劑量可以根據(jù)患者的需要和所治療疾病的嚴(yán)重程度而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)唧w情況確定合適的劑量方案。為了方便，可以將每天的總劑量分為幾份并根據(jù)需要每天分幾次給予。
本發(fā)明化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的給藥量和給藥頻率將由臨床醫(yī)師考慮各種因素如患者的年齡、身體狀況和大小以及所治療癥狀的嚴(yán)重程度后調(diào)節(jié)。通常推薦的口服日劑量方案可以為約100mg/d至約300mg/d，優(yōu)選150mg/d至250mg/d，更優(yōu)選約200mg/d，分為2-4次分劑量。
用于和本發(fā)明化合物聯(lián)合用藥的NRTI、NNRTI、PI以及其它藥物的劑量和劑量方案由臨床醫(yī)師根據(jù)包裝插頁的或治療方案說明的許可劑量和劑量方案并考慮患者的年齡、性別和身體狀況以及所治療疾病的嚴(yán)重程度后確定。
在一個優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明化合物可以用于治療人免疫缺陷病毒，所述治療通過給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種式I化合物，優(yōu)選結(jié)合一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。一種或多種、優(yōu)選1-4種用于抗HIV-1治療的抗病毒藥物可以與本發(fā)明化合物聯(lián)合用藥。一種或多種抗病毒藥物可以與一種或多種本發(fā)明化合物結(jié)合為單一劑型，或者一種或多種本發(fā)明化合物和一種或多種抗病毒藥物可以以多個獨立劑型同時或序貫給藥。
預(yù)期用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合用藥的抗病毒藥物包括核苷和核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和以下所列未進(jìn)入上述分類的其它抗病毒藥物。抗病毒藥的具體實例包括但不限于齊多夫定、拉米夫定、扎西他濱、去羥肌苷、司他夫定、阿巴卡韋、阿德福韋二匹伏酯、洛布卡韋、BCH-10652、恩曲他濱、β-L-FD4、DAPD、洛德腺苷、奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖、PNU-142721、AG-1549、MKC-442、(+)-calanolide A和B、沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋、奈非那韋、拉西那韋、DMP-450、BMS-2322623、ABT-378、氨普奈韋、羥基脲、利巴韋林、IL-2、IL-12、噴他夫西、Yissum No.11607和AG-1549。特別地，預(yù)期被稱為HAART的聯(lián)合用藥可用于與本發(fā)明化合物的聯(lián)合應(yīng)用。
對于超過一種活性藥物的聯(lián)合療法，當(dāng)活性藥物為多個獨立劑型時，各活性成分可以單獨或一起給予。此外，一種藥物的給予可以在給予另一種藥物之前、同時或之后進(jìn)行。
本發(fā)明的另一方面提供治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘、變態(tài)反應(yīng)或多發(fā)性硬化的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種式I化合物，優(yōu)選結(jié)合一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。在另一種實施方案中，治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病或多發(fā)性硬化的方法進(jìn)一步包括給予一種或多種用于治療所述疾病的其它藥物和一種或多種式I化合物。
可以聯(lián)合本發(fā)明化合物給藥的用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、移植和移植物抗宿主病、炎性腸病和多發(fā)性硬化的已知藥物如下實體器官移植排斥和移植物抗宿主病免疫抑制劑例如環(huán)孢霉素和白介素-10(IL-10)、他克莫司、抗淋巴細(xì)胞球蛋、OKT-3抗體和類固醇；炎性腸病IL-10(參見US 5,368,854)、類固醇和水楊酰偶氮磺胺砒啶；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺、類固醇和麥考酚酸嗎乙酯；多發(fā)性硬化干擾素-β、干擾素-α和類固醇。
本發(fā)明的另一方面涉及藥盒，該藥盒包括在多個獨立容器中單獨包裝用于聯(lián)合治療人免疫缺陷病毒的藥用組合物。在一個容器中裝有包含一種或多種式I化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物，而在獨立的容器中裝有一種或多種包含有效量的一種或多種用于治療人免疫缺陷病毒的抗病毒藥物或其它藥物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
本發(fā)明HIV-1療法的目標(biāo)是減少HIV-1-RNA病毒量至低于可檢測限度。本發(fā)明中“HIV-1-RNA的可檢測限度”是指通過多周期逆轉(zhuǎn)錄酶PCR方法定量檢測時少于約200個到少于約50個HIV-1-RNA/ml患者血漿。本發(fā)明中HIV-1-RNA檢測優(yōu)選通過Amplicor-1Monitor 1.5(可從Roche Diagnsotics獲得)方法或Nuclisens HIV-1 QT-1方法進(jìn)行。
以下的分析可以用于確定本發(fā)明化合物的CCR5抑制活性和拮抗活性。
CCR5膜結(jié)合分析利用CCR5膜結(jié)合分析的高通量篩選鑒定RANTES結(jié)合抑制劑。該分析利用由表達(dá)人CCR5趨化因子受體的NIH 3T3細(xì)胞制備的膜，所述受體具有結(jié)合至該受體的天然配體RANTES的能力。使用96-孔板形式，用125I-RANTES在化合物存在或不存在下溫育膜制劑1小時。各化合物系列稀釋至很寬的范圍，0.001ug/ml至1ug/ml，一式三份測試。通過玻璃纖維過濾器收獲反應(yīng)混合物，充分洗滌。平均各平行測試的總計數(shù)，數(shù)據(jù)報告為抑制50％總125I-RANTES結(jié)合所需的濃度。在膜結(jié)合分析中具有有效活性的化合物進(jìn)一步在第二個基于細(xì)胞的HIV-1進(jìn)入和復(fù)制分析中表征。
HIV-1進(jìn)入分析復(fù)制缺陷型HIV-1報道病毒粒子通過如下方法制備將編碼HIV-1的NL4-3病毒株(它已經(jīng)通過包膜基因突變并引入螢光素酶報道質(zhì)粒進(jìn)行了修飾)的質(zhì)粒與編碼若干HIV-1包膜基因之一的質(zhì)粒一起共轉(zhuǎn)染，參見Connor等，Virology，206(1995)，p.935-944。在轉(zhuǎn)染兩個質(zhì)粒后磷酸鈣沉淀，在第三天收獲病毒上清液，檢測功能病毒效價。然后將上述母液感染穩(wěn)定表達(dá)CD4和趨化因子受體CCR5的U87細(xì)胞，所述細(xì)胞已經(jīng)在受試化合物存在或不存在下經(jīng)過預(yù)溫育。感染在37℃下進(jìn)行2小時，洗滌細(xì)胞，將培養(yǎng)基用含化合物的新鮮培養(yǎng)基替換。溫育細(xì)胞3天，檢測溶解活性和螢光素酶活性。結(jié)果報告為抑制對照培養(yǎng)物的50％螢光素酶活性所需的化合物濃度。
HIV-1復(fù)制分析此分析使用原代外周血單核細(xì)胞或穩(wěn)定的U87-CCR5細(xì)胞系檢測抗CCR5化合物阻止原HIV-1病毒株感染的效果。從正常健康供體純化得到原代淋巴細(xì)胞，將其用PHA和IL-2體外刺激3天，然后感染。使用96-孔板形式，細(xì)胞用藥物在37℃下預(yù)處理1小時，隨后用M-嗜性HIV-1分離物感染。在感染后，洗滌細(xì)胞以除去殘余接種物，在化合物存在下培養(yǎng)4天。收獲培養(yǎng)物上清液，通過檢測病毒p24抗原濃度測量病毒復(fù)制。
鈣流量分析用鈣敏感染料加載于表達(dá)HIV輔助受體CCR5的細(xì)胞，然后加入化合物或天然CCR5配體。具有激動特性的化合物將引起細(xì)胞中的鈣流動信號，然而本發(fā)明化合物被認(rèn)為是本身不會引起該信號的發(fā)出，但是能夠通過天然配體RANTES阻止信號發(fā)出。
GTP S結(jié)合分析(第二種膜結(jié)合分析)GTP S結(jié)合分析檢測CCR5配體的受體活化作用，該分析檢測35S標(biāo)記的GTP對偶合G-蛋白的受體的結(jié)合，所述結(jié)合是由于受體被合適配體活化的結(jié)果。在該分析中，CCR5配體RANTES用從表達(dá)CCR5的細(xì)胞獲得的膜溫育，并通過分析結(jié)合的35S標(biāo)記物檢測結(jié)合至受體的活化作用(或結(jié)合)。如下進(jìn)行定量檢測如果化合物具有激動劑特性，檢測引起受體活化的作用，或者如果化合物具有拮抗劑特性，以競爭性或非競爭性方式檢測對RANTES結(jié)合的抑制作用。
趨化性分析趨化性分析是表征受試化合物的激動劑特性對拮抗劑特性的功能分析。所述分析檢測表達(dá)人CCR5(BaF-550)的非粘著小鼠細(xì)胞系對受試化合物或天然配體(即RANTES，MIP-1β)反應(yīng)而遷移穿過膜的能力。細(xì)胞遷移穿過滲透膜接近具有激動活性的化合物。具有拮抗活性的化合物不僅不能誘導(dǎo)趨化性，而且能夠抑制細(xì)胞響應(yīng)已知的CCR5配體而進(jìn)行的遷移。
螢光素酶復(fù)制分析從Dr.Susan Pontow(Washington University，St.Louis MO)獲得編碼HIV-1 pNL-4-Luc的全長基因組的質(zhì)粒，HIV-1 pNL-4-Luc中g(shù)p120V-3環(huán)被HIV-1 ADA、YU-2或HxB的Bg1 II片斷(ADA-Luc-FL、YU-2-Luc-FL和HxB-Luc-FL)代替。有復(fù)制能力的螢光素酶報道病毒母液通過如下方式產(chǎn)生用Superfect(Qiagen)或Mirus轉(zhuǎn)染劑將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染后48小時收集病毒母液并滴定測定在U-87-CCR5或CXCR4細(xì)胞上產(chǎn)生螢光素酶的效價。U87-CD4-CCR5細(xì)胞(104/孔)接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，溫育過夜。除去培養(yǎng)基，用50μl新鮮培養(yǎng)基(DMEM，10％FCS)以及稀釋于培養(yǎng)基的50μl化合物替換。將細(xì)胞與化合物在37℃溫育1小時。除去生成物上清液，用20μl含化合物的培養(yǎng)基替換，并用等體積的稀釋或未稀釋的病毒母液在37℃下感染3-4小時。細(xì)胞用DMEM洗滌一次，加入200μl含化合物的培養(yǎng)基。將培養(yǎng)物溫育3天，細(xì)胞在螢光素酶緩沖液(Promega，Madison，WI)中溶解，轉(zhuǎn)移至Immulon板(Dynex Technologies；ChantillyVA)。將等體積的螢光素酶底物(Promega，Madison WI)加入溶解產(chǎn)物，立即在Wallac Luminometer讀取所述板。用GraphPad PRISM軟件確定50％和90％抑制濃度。
通過以下的制備實施例說明用于本發(fā)明的化合物，這些實施例不應(yīng)該解釋為對公開內(nèi)容范圍的限制?；蛘弑景l(fā)明范圍內(nèi)的機(jī)械途徑和類似結(jié)構(gòu)對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員是顯而易見的。
實施例1 化合物4步驟1將4-羥基-哌啶(1.0g，9.9mmol)、N-Boc-4-哌啶酮(1.97g，9.9mmol)和Ti(OiPr)4(3.2mL，10.9mmol)溶于二氯甲烷，在室溫下攪拌19h。向此溶液中加入24mL Et2AlCN(1.0M甲苯溶液)。將所得溶液在室溫下攪拌24h。冷卻溶液，用飽和碳酸氫鈉猝滅?；旌衔镉肊tOAc稀釋，通過硅藻土墊過濾。濾餅用EtOAc和H2O沖洗。分離出各層，水層用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合并的EtOAc層，用硫酸鈉干燥。通過硅藻土過濾，濃縮獲得固體氰化物(2.84g，93％)。
步驟2將步驟1的氰化物(2.84g，9.2mmol)溶于THF，冷卻至0℃。在0℃將甲基溴化鎂(15mL 3.0M乙醚溶液)加入以上溶液中。將溶液升至室溫，在此溫度攪拌16h。冷卻溶液至0℃，用1N NaOH(aq.)猝滅。將混合物通過硅藻土墊過濾。用EtOAc沖洗硅藻土。水層用EtOAc萃取。合并的EtOAc層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。通過硅藻土過濾，濃縮獲得油狀醇(2.5g，90％)。
步驟3將DMSO(0.9mL，12.6mmol)溶于二氯甲烷，冷卻至-40℃(CO2/CH3CN)。在-40℃將乙二酰氯(1.1mL，12.6mmol)滴加到溶液。將溶液在此溫度攪拌20min。步驟2的醇(2.5g，8.39mmol)的二氯甲烷溶液在-40℃加入以上溶液中。將所得溶液在此溫度攪拌30min。將三乙胺(3.5mL，25.2mmol)在-40℃加入溶液中，將所得漿狀物升至室溫。在30min后，溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH(aq.)洗滌。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。通過快速色譜法(2/1 EtOAc/己烷，SiO2)提純獲得2.15g(87％)油狀酮，緩慢固化。
步驟4將Boc-哌啶(2.0g，6.7mmol)溶于二氯甲烷，加入TFA(7mL)。將溶液在室溫下攪拌1h。濃縮溶液。將所得鹽溶于H2O，用NaOH堿化。溶液用二氯甲烷萃取。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮獲得1.1g(85％)脫去保護(hù)的哌啶。
將脫去保護(hù)的哌啶1.1g(5.6mmol)、EDCI鹽酸鹽(1.6g)、HOBT(1.2g)、二異丙基乙胺(1.8g)和4，6-二甲基-3-嘧啶羧酸(1.1g)溶于二氯甲烷，在室溫下攪拌16h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH水溶液洗滌。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。通過硅藻土過濾，濃縮獲得0.94g(51％)泡沫狀酰胺。
步驟5將步驟4的酰胺(0.94g，2.8mmol)、4-氨基-N-芐基哌啶(0.5g)、Na(AcO)3BH(0.84g)和HOAc(0.26g)溶于二氯甲烷，在室溫下攪拌2h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH(aq)洗滌。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。通過硅藻土過濾和濃縮獲得油狀物。通過快速色譜法(梯度二氯甲烷-2％[7N NH3的MeOH溶液]的二氯甲烷溶液-4％[7N NH3的MeOH溶液]的二氯甲烷溶液，SiO2)提純獲得1.2g(84％)油狀胺。MS(FAB)505.4(MH+)步驟6將步驟5的胺(0.10g，0.20mmol)、苯甲醛(0.06g)和Na(AcO)3BH(0.12g)溶于二氯甲烷，在室溫下攪拌15h。將苯甲醛(0.06g)和Na(AcO)3BH(0.12g)加入以上反應(yīng)物中。將反應(yīng)物再攪拌15h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH(aq.)洗滌。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。通過硅藻土過濾，濃縮獲得油狀物。通過制備型層色譜法提純(7％[7N NH3的MeOH溶液]于二氯甲烷中，SiO2)獲得0.025g(21％)本實施例中以上圖示的產(chǎn)物。MS(FAB)595.5(MH+)。
下表2所示化合物按照上述類似的方法制備。
下表2所示化合物按照上述用于實施例1的類似方法制備。
表2
此系列集中為M＝芳基或雜芳基的化合物。最優(yōu)選的化合物為R2為芐基、苯基和環(huán)丙基甲基的化合物。
實施例2 化合物8步驟1將4-溴代苯胺(8.3g，48mmol)、N-Boc-4-哌啶酮(8.0g，40mmol)、Na(AcO)3BH(12.7g，60mmol)和AcOH(3.5mL，60mmol)溶于二氯甲烷，在25℃攪拌(17h)。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH猝滅。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾后濃縮。通過重結(jié)晶(二氯甲烷/己烷)提純獲得10.2g(72％)胺產(chǎn)物。
步驟2將以上的胺(1.5g，4.22mmol)、芐基溴(0.74mL，6.3mmol)、NaH(250mg，60wt％分散于油中)和KI(350mg，2.11)溶于DME，在100℃攪拌(18h)。冷卻溶液，在EtOAc和水間分配。水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。過濾，濃縮后通過快速色譜法(4/1 己烷/Et2O，SiO2)提純獲得528mg(28％)芐基胺產(chǎn)物。
步驟3將步驟2的芐基胺產(chǎn)物和4.0M HCl的二噁烷(5mL)溶于MeOH，將溶液在25℃下攪拌18h。濃縮溶液。殘余物在二氯甲烷和1N NaOH間分配。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾、濃縮獲得314mg(77％)游離胺產(chǎn)物。
步驟4將步驟3的游離胺產(chǎn)物依次如下處理1)N-Boc-4-哌啶酮(181mg，0.91mmol)/Ti(OiPr)4(0.32mL，1.1mmol)；2)EtAlCN(1.1mL 1.0M的甲苯溶液)，按照上述實施例1步驟1的條件進(jìn)行。在后續(xù)步驟后，獲得500mg(定量)氰基-胺。
步驟5按照上述實施例1步驟2的條件將步驟4的氰基-胺用MeMgBr(1.5mL 3.0M的Et2O溶液)處理。通過制備型薄層色譜法(2/1己烷/EtOAc，SiO2)提純獲得344mg(70％)無色油狀胺。
步驟6將步驟5的胺和4.0M HCl的二噁烷(4mL)溶于MeOH，在25℃攪拌17h。濃縮溶液。脫去保護(hù)的胺的鹽酸鹽直接用于下一步驟。
步驟7將步驟6的鹽酸鹽、EDCI鹽酸鹽(169mg，0.88mmol)、HOBT(119mg，0.88mmol)和iPr2NEt(1.5mL，8.8mmol)和4，6-二甲基-3-嘧啶羧酸(134mg，0.88mmol)溶于CH3CN，在25℃攪拌20h。濃縮溶液。殘余物在EtOAc和1N NaOH間分配。水層用EtOAc萃取。合并的EtOAc層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，隨后通過制備型薄層色譜法(30/1 二氯甲烷/7N NH3，SiO2)提純獲得172mg(68％)化合物8。將酰胺溶于EtOAc，在加入2.0M HCl的Et2O溶液后沉淀為鹽酸鹽。m.p.(鹽酸鹽)168-170℃。HRMS(MH+)計算值576.2338；實測值576.2331。
以下的化合物通過類似的方法制備
表3









實施例3 化合物69步驟1將3-氨基-6(三氟甲基)吡啶(1.0g，6.2mmol)、N-Boc-4-哌啶酮(1.5g，7.4mmol)、Na(AcO)3BH(2.0g，9.3mmol)和AcOH(0.35mL，6.2mmol)溶于1，2-二氯乙烷，在55℃攪拌17h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1NNaOH猝滅。水層用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮獲得黃色油狀物。將殘余物重新置于所述反應(yīng)條件20h。經(jīng)過逐步處理后，獲得黃色油狀物。通過重結(jié)晶(二氯甲烷/己烷)提純胺產(chǎn)物獲得1.6g(75％)胺。
步驟2將步驟1的胺(500mg，1.45mmol)、Ph3Bi(1.28g，2.9mmol)、Cu(OAc)2(530mg，2.9mmol)和Et3N(0.40mL，2.9mmol)溶于甲苯，在90℃加熱18h。再加入Ph3Bi、Cu(OAc)2和Et3N，將反應(yīng)物在90℃攪拌(48h)。使溶液通過硅藻土過濾，然后濃縮。通過快速色譜法(3/1己烷/EtOAc，SiO2)提純獲得352mg(58％)無色油狀二苯基胺。
步驟3、4、5、6和7將步驟2的Boc胺轉(zhuǎn)化為嘧啶酰胺，然后按照上述實施例2AD的步驟3-7進(jìn)行處理。通過制備型薄層色譜法(3/1己烷/丙酮，SiO2)提純獲得49mg化合物69。HRMS(MH+)計算值553.2903實測值，553.2907。m.p.(HCl)189-193℃。IC50＝0.11nm以下化合物按照類似的方法制備表4






實施例4 化合物108步驟1將酮5(5.0g，16.9mmol)、芐基胺(1.67mL，15.3mmol)、Na(AcO)3BH(3.89g，18.4mmol)和AcOH(1.1mL，18.4mL)溶于二氯甲烷，在25℃攪拌18h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH猝滅。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，然后通過快速色譜法(20/1 二氯甲烷/7N NH3的MeOH溶液，SiO2)提純獲得5.79g(97％)胺產(chǎn)物。
步驟2將步驟1的胺(200mg，0.52mmol)、4-溴-吡啶HCl(202mg，1.04mmol)、Pd(OAc)2(23mg，0.1mmol)，P(tBu)3(84mg，0.42mmol)和NaOtBu(200mg，2.1mmol)溶于甲苯，在110℃加熱17h。冷卻溶液，在EtOAc和水間分配。水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，然后通過制備型薄層色譜法(30/1 二氯甲烷/7N NH3的MeOH溶液，SiO2)提純獲得129mg(54％)氨基-吡啶產(chǎn)物。
步驟3和4按照上述實施例2步驟6和7的方法將步驟2的Boc胺處理。通過制備型薄層色譜法(30/1 二氯甲烷/7N NH3的MeOH溶液，SiO2)提純獲得95mg(68％)酰胺產(chǎn)物(化合物108)。將所述酰胺溶于EtOAc，加入2.0M HCl的Et2O溶液后沉淀為鹽酸鹽。m.p.(鹽酸鹽)182-189℃。HRMS(MH+)計算值499.3185；實測值499.3181。IC50＝0.8nm以下化合物按照類似的方法制備表5
實施例5 化合物110步驟1將8-氨基喹啉(1.0g，6.9mmol)、酮5(3.08g，10.4mmol)、AcOH(1.11mL，19.3mmol)和Na(AcO)3BH(2.9g，10.4mmol)溶于30mLClCH2CH2Cl，在25℃攪拌16h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1M NaOH猝滅。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮。粗制產(chǎn)物通過快速色譜法提純(梯度2∶1-1∶1 己烷/EtOAc)獲得2.66g(91％)苯胺產(chǎn)物。
步驟2將苯胺(85mg，0.20mmol)、丙醛(23mg，0.4mmol)和Na(AcO)3BH溶于二氯甲烷(2mL)。溶液在25℃攪拌16h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1M NaOH猝滅。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮獲得100mg叔胺。將上述產(chǎn)物直接使用無需再提純。
步驟3將Boc氨基甲酸酯和4.0M HCl的二噁烷(2mL)溶于MeOH(4mL)，溶液在25℃下攪拌3h。濃縮溶液。在此產(chǎn)生的脫去保護(hù)的胺的鹽酸鹽直接用于下一步驟。
步驟4將步驟3的鹽酸鹽、EDCI鹽酸鹽(61mg，0.032mmol)、HOBt(43mg，0.032mmol)、iPr2Net(0.365mL，2.1mmol)和4，6-二甲基-3-嘧啶羧酸(49mg，0.32mmol)溶于MeCN(2mL)，在25℃攪拌24h。濃縮溶液。殘余物在EtOAc和1N NaOH間分配。水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。通過制備型薄層色譜法(95/5二氯甲烷/MeOH)提純獲得60mg(57％)酰胺產(chǎn)物(化合物110)。將酰胺溶于EtOAc，在加入2.0M HCl的Et2O溶液后沉淀為鹽酸鹽。m.p.(鹽酸鹽)181℃(分解)。HRMS(MH+)計算值501.3342；實測值501.3349。IC50＝23nm實施例6 化合物111步驟1在60℃，將8-氨基喹啉(4.5g，31.3mmol)、N-氯丁二酰亞胺(4.80g，36mmol)溶于iPrOH(50mL)。將混合物加熱至回流，攪拌20min。冷卻溶液至25℃，濃縮至原體積的1/3。將混合物在二氯甲烷和水間分配。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮。粗制產(chǎn)物通過快速色譜法提純(5∶1己烷/EtOAc)獲得1.90g(34％)8-氨基-4-氯-喹啉產(chǎn)物。
步驟2將以上喹啉(1.28g，7.2mmol)(3.18g，10.7mmol)、AcOH(1.16mL，20.1mmol)和Na(AcO)3BH(3.05g，14.4mmol)溶于30mLClCH2CH2Cl，在25℃攪拌16h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1M NaOH猝滅。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮。粗制產(chǎn)物通過快速色譜法(2∶1己烷/EtOAc)提純獲得2.0g(61％)黃色油狀/泡沫狀喹啉。
步驟3將步驟2的喹啉(144mg，031mmol)、甲基碘(67mg，0.47mmol)和碳酸銫(153mg，0.47mmol)在封閉管中溶于DMF(3mL)，加熱至100℃ 24h。將混合物冷卻至25℃，用EtOAc稀釋。有機(jī)層依次用水、鹽水洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，然后濃縮。粗制產(chǎn)物通過制備型薄層色譜法(2∶1己烷/EtOAc)提純獲得14mg(10％)甲基化胺產(chǎn)物。
步驟4將步驟3的產(chǎn)物按照上述實施例5(步驟3和4)的方法處理獲得粗制嘧啶酰胺。通過制備型薄層色譜法(99∶1 95/5 二氯甲烷/MeOH7NNH3的MeOH溶液)提純獲得8mg(53％)化合物111。將酰胺溶于EtOAc，加入2.0M HCl的Et2O溶液后沉淀為鹽酸鹽。m.p.(鹽酸鹽)164-167℃(分解)。HRMS(MH+)計算值507.2639；實測值507.2634。
實施例7 化合物112
步驟1將化合物108(10.5g)和TFA(20mL)溶于二氯甲烷，在25℃攪拌12h。濃縮溶液，殘余物在二氯甲烷和1N NaOH間分配。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾后濃縮獲得胺產(chǎn)物。
步驟2將步驟1的胺、4，6-二甲基-3-嘧啶羧酸(6g)、EDCI(8.6g)和iPr2NEt(7.8g)溶于CH3CN，在25℃攪拌10h。濃縮溶液，殘余物在EtOAc和1N NaOH間分配。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。通過快速色譜法(3％-5％MeOH的二氯甲烷溶液，SiO2)提純獲得4.9g嘧啶-酮產(chǎn)物。
步驟3將步驟2的酮(1.65g，4.99mmol)、Na(OAc)3BH(2.1g)、AcOH(1g)和(+/-)-3-氨基-N-Boc-哌啶(1g)溶于二氯甲烷，在25℃攪拌48h。溶液用二氯甲烷稀釋，用1N NaOH洗滌。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，然后通過快速色譜法提純(3％-10％7N NH3的MeOH溶液/二氯甲烷，SiO2)獲得1.7g(66％)胺產(chǎn)物。
步驟4將步驟3的胺(400mg)、芐基溴(0.2mL)、Cs2CO3(1g)和KI(10mg)在DMF中于100℃加熱12h。溶液在EtOAc和水間分配。水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，然后通過快速色譜法提純(3％MeOH的二氯甲烷溶液，SiO2)獲得300mg芐基胺產(chǎn)物。
步驟5將步驟4的胺(300mg)和4.0M HCl的二噁烷(10mL)溶于MeOH，在25℃攪拌10h。濃縮溶液。殘余物在二氯甲烷間分配。水層用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾后濃縮獲得200mg脫去保護(hù)的胺產(chǎn)物。
步驟6將步驟5的胺(100mg)和環(huán)丙基磺酰基氯(50mg)在二氯甲烷和1N NaOH間分配。將混合物于25℃下劇烈攪拌2h。分離出各層，水層用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾，濃縮，然后通過制備型薄層色譜法(9％MeOH的二氯甲烷溶液，SiO2)提純獲得50mg酰胺產(chǎn)物(化合物112)。將酰胺溶于EtOAc，加入2.0M HCl的Et2O溶液后沉淀為鹽酸鹽。m.p.(鹽酸鹽)190-195℃。HRMS(MH+)計算值609.3587；實測值609.3578。IC50＝30nm以下化合物按照類似的方法制備表6 雖然本發(fā)明已經(jīng)聯(lián)系上述的具體實施方案進(jìn)行了闡述，但是它們的很多備選方案、修改和變化對于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說是顯而易見的。所有這樣的備選方案、修改和變化都已包括在本發(fā)明的實質(zhì)性范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種以下結(jié)構(gòu)式I表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物 其中R1為 或 R2選自以下基團(tuán)H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、烷基酮、芳基酮、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、烷氧基烷基或酰胺；R3選自以下基團(tuán)芳基、6-元雜芳基、芴基；二苯基甲基、6元雜芳基-N-氧化物、 和 其中所述芳基、芴基、二苯基或雜芳基任選被1-4個取代基取代，所述取代基可以相同或不同并且獨立選自R11、R12、R13、R14和R15；R4為選自以下基團(tuán)的1-3個取代基H、鹵基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、酰胺、CF3、OCF3、芳基、雜芳基、-XR7、-C(O)C3-C8環(huán)烷基、-C(O)C3-C8雜環(huán)烷基、-(C1-C6)烷基-N(R21)SO2R22、-(C1-C6)烷基-C(O)NR20R21、-CN、-CO2H、-CO2R22、R8-芳基(C1-C6)烷基-、R8-雜芳基(C1-C6)烷基-、-C(O)-(C1-C6)烷基、R8-芳基-C(O)-、-C(O)NR21R22、-C(O)NH2、-C(O)N(H)OH、-(C1-C6)烷基-N(R21)C(O)R22、-(C1-C6)烷基-N(R21)CO2R22、-(C1-C6)烷基-N(R21)C(O)NR21R22、-(C1-C6)烷基-NR21R22、-(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基SO2NR21R22和-SO2NR21R22，其中當(dāng)存在一個以上R4時，R4可以相同或不同并且獨立選定；R5選自以下基團(tuán)H、芳基烷基、(C1-C6)烷基、R8-芳基(C1-C6)烷基-、R8-雜芳基(C1-C6)烷基-、-SO2-(C1-C6)烷基、-SO2-(C3-C6)環(huán)烷基、-SO2-芳基、R8-芳基-SO2-、-C(O)-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C4-C6)環(huán)烷基、R8-芳基-C(O)-、-C(O)NR21R22和-SO2NR21R22；R6為H、-(C1-C6)烷基或-(C1-C6)鹵代烷基；R7選自以下基團(tuán)芳基、取代的芳基、雜芳基、烷基、鹵代烷基和環(huán)烷基；R8為1、2或3個選自以下的取代基H、鹵基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-CF3、-OCF3、CH3C(O)-、-CN、CH3SO2-、CF3SO2-和-NH2，其中當(dāng)存在一個以上R8時，R8可以相同或不同并且獨立選定；R9、R10和B可以相同或不同并且各自獨立選自氫、(C1-C6)烷基和-(C1-C6)鹵代烷基；R11和R12可以相同或不同并且各自獨立選自以下基團(tuán)(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、鹵素、-NR19R20、-OH、CF3、-OCH3、-O-?；?OCF3；R13選自以下基團(tuán)氫、R11、H、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR19、吡啶基-N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、N(R20)CONR20R21、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-環(huán)烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、(C3-C10)環(huán)烷基、-SR22、-SOR22、-SO2R22、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羥基(C1-C6)烷基、-CONR19R20、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R19、-Si(CH3)3和-B(OC(CH3)2)2；R14選自(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基-NH2和R15-苯基；R15為1-3個選自以下的取代基氫、(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、-CF3、-CO2R20、-CN、(C1-C6)烷氧基和鹵素；其中當(dāng)存在一個以上R15時，R15可以相同或不同并且獨立選定；各個R16和R17可以相同或不同并且各自獨立選自氫和(C1-C6)烷基，或者R16和R17一起為C2-C5亞烷基并且與它們所連接碳一起構(gòu)成3-6個碳原子的螺環(huán)；各個R19、R20和R21可以相同或不同并且各自獨立選自H、(C1-C6)烷基和(C3-C6)環(huán)烷基；R22選自以下基團(tuán)(C1-C6)烷基、-(C1-C6)鹵代烷基、(C2-C6)羥基烷基、(C2-C6)亞烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和芳基(C1-C6)烷基-；A選自H、(C1-C6)烷基和(C2-C6)鏈烯基；M為任選被R4取代的芳基或雜芳基；Q為CH或N；X選自以下基團(tuán)CH2、SO2、SO、S和O，并且符合以下條件當(dāng)R1為苯基、吡啶基、噻吩基或萘基時，R2不能為H、-(C1-C6)烷基或-C(O)-(C1-C6)烷基。
2.一種權(quán)利要求1的具有結(jié)構(gòu)式I的化合物，其中R9、R10和B為H，而R1、R2和R3如下表定義
3.一種權(quán)利要求2的化合物，其中R1、R2和R3各自為以下基團(tuán)
4.一種權(quán)利要求3的化合物，所述化合物由以下結(jié)構(gòu)式表示
5.一種藥用組合物，該組合物包含一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
6.一種藥用組合物，該組合物包含一種或多種權(quán)利要求4的化合物。
7.權(quán)利要求5的藥用組合物，該組合物進(jìn)一步包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
8.權(quán)利要求6的藥用組合物，該組合物進(jìn)一步包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
9.權(quán)利要求5的藥用組合物，其中所述藥用組合物包含治療可接受量的所述一種或多種化合物。
10.權(quán)利要求6的藥用組合物，其中所述藥用組合物包含治療可接受量的所述一種或多種化合物。
11.一種治療人免疫缺陷病毒的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
12.一種治療人免疫缺陷病毒的方法，該方法包括給予需要這樣治療的患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求4的化合物。
13.權(quán)利要求12的方法，該方法進(jìn)一步包括給予所述一種或多種化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
14.權(quán)利要求12的方法，該方法進(jìn)一步包括聯(lián)合給予所述一種或多種權(quán)利要求1的化合物和一種或多種用于治療人免疫缺陷病毒的抗病毒藥物或其它藥物。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述抗病毒藥物選自核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和蛋白酶抑制劑。
16.權(quán)利要求14的方法，其中所述抗病毒藥物選自以下藥物齊多夫定、拉米夫定、扎西他濱、去羥肌苷、司他夫定、阿巴卡韋、阿德福韋二匹伏酯、洛布卡韋、BCH-10652、恩曲他濱、β-L-FD4、DAPD、洛德腺苷、奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖、PNU-142721、AG-1549、MKC-442、(+)-calanolide A和B、沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋、奈非那韋、拉西那韋、DMP-450、BMS-2322623、ABT-378、氨普奈韋、羥基脲、利巴韋林、IL-2、IL-12、噴他夫西、Yissum No.11607和AG-1549。
17.一種治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、哮喘、變態(tài)反應(yīng)或多發(fā)性硬化的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
18.權(quán)利要求17的治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病或多發(fā)性硬化的方法，該方法進(jìn)一步包括給予所述一種或多種化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
19.權(quán)利要求17的治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸病或多發(fā)性硬化的方法，該方法進(jìn)一步包括聯(lián)合給予所述一種或多種權(quán)利要求1的化合物和一種或多種用于治療所述疾病的其它藥物。
20.一種藥盒，該藥盒在一個包裝的多個獨立容器中包括聯(lián)合用于治療人免疫缺陷病毒的多種藥用組合物，其包括在一個容器中裝有包含一種或多種權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物，而在獨立的容器中裝有一種或多種包含用于治療人免疫缺陷病毒的一種或多種抗病毒藥物或其它藥物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中R
文檔編號A61P31/18GK1551877SQ02816679
公開日2004年12月1日 申請日期2002年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2001年8月29日
發(fā)明者A·帕拉尼, M·W·米勒, J·D·斯科特, A 帕拉尼, 斯科特, 米勒 申請人:先靈公司