專利名稱：包含腺苷a1/a2激動(dòng)劑和鈉－氫離子交換抑制劑的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物，該藥物組合物在有此需要的患者中顯示了出奇有效的心臟保護(hù)作用。本發(fā)明還涉及一種為患者提供心臟保護(hù)的方法，該方法包括施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
發(fā)明簡述本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物或其藥學(xué)可接受之鹽，以及鈉-氫離子交換抑制化合物或其藥學(xué)可接受之鹽。本發(fā)明還涉及一種為有需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該方法包括施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
發(fā)明詳述除非另有說明，上文所使用的和貫穿本發(fā)明說明書的下列術(shù)語應(yīng)被理解為具有以下含義“患者”包括人和其它哺乳動(dòng)物。
“有效量”是可有效產(chǎn)生期望治療效果的本發(fā)明組合物的量。
“心臟保護(hù)”是指例如在缺血發(fā)作之前、期間或之后、于再灌注期間或于心臟手術(shù)之前、期間或之后防止或減輕對心肌的損傷。
“腺苷A1/A2激動(dòng)劑”或“具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物”指A1和A2亞型腺苷受體的激動(dòng)劑，例如AMP 579。
“鈉-氫離子交換抑制化合物”或“NHE抑制劑”是鈉-氫離子交換體系，即調(diào)節(jié)pH的細(xì)胞離子轉(zhuǎn)運(yùn)體系的抑制劑。鈉-氫離子交換抑制化合物的例子包括cariporide(Aventis)、eniporide(Merck KGAA)、zoniporide(Pfizer)、BMS-284640(Bristol-Myers Squibb)、BIIB-513(Boehringer Ingelheim)、BIIB-722CI(Boehringer Ingelheim)、EMD-85131(Merck KGAA)、KB-R9032(Kanebo)、MS-31-038(Mitsui)、SL-59.1227(Sanofi)、SM20550(Sumitomo)、SMP-300(Fukushima MedicalCollege)、T-559(Takeda)和TY-12533(Toa Eiyo)。
“AMP 579”是[1S-[1α，2β，3β，4α(S*)]-4-[7-[[3-氯-2-噻吩基]甲基]丙基]氨基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基]-N-乙基-2，3-二羥基環(huán)戊烷甲酰胺，或 “Cariporide”是4-異丙基-3-甲磺酰基苯甲酰胍甲磺酸鹽，或 AMP 579，一種新型腺苷A1/A2受體激動(dòng)劑，當(dāng)于再灌注時(shí)施用時(shí)已顯示具有心臟保護(hù)機(jī)能。用鈉-氫離子交換抑制劑cariporide進(jìn)行預(yù)處理或進(jìn)行缺血性預(yù)處理(PC)也已證實(shí)具可減小梗死的大小。在本研究中，我們對再灌注時(shí)施用AMP 579是否可加強(qiáng)cariporide或PC的保護(hù)作用進(jìn)行了調(diào)查。使開胸兔心局部缺血45分鐘后再灌注3小時(shí)。對照組的梗死大小為55.8±3.9％。5分鐘缺血+10分鐘再灌注的缺血預(yù)處理使梗死大小明顯降至26.0±6.7％。于再灌注發(fā)生前夕，團(tuán)注AMP 579(30ug/kg)，隨后輸注70分鐘(3ug/kg/min)。單獨(dú)的AMP 579也使梗死大小明顯降低(32.1±1.8％)。與單獨(dú)的缺血預(yù)處理或AMP 579相比，AMP 579和缺血預(yù)處理聯(lián)合使用使梗死大小減小得更加顯著(5.5±2.7％)。在第二系列研究中，使所述兔心局部缺血60分鐘后再灌注3小時(shí)。對照組的梗死大小為66.0±4.9％。于缺血開始前5分鐘團(tuán)注cariporide(0.5mg/kg)，梗死大小明顯降至41.5±7.7％。當(dāng)Cariporide與AMP579聯(lián)合使用時(shí)，梗死被進(jìn)一步減小至明顯更小的尺寸(14.2±4.5％)。盡管單獨(dú)使用AMP 579僅顯示出心臟保護(hù)趨勢(45.3±5.4％)，但這并不足以暗示AMP 579對缺血損傷的保護(hù)作用有限。然而，于再灌注發(fā)生前夕施用AMP 579外加團(tuán)注cariporide，梗死大小的確明顯降低(31.3±7.0％)。這些結(jié)果表明于再灌注時(shí)施用AMP579的作用與cariporide或缺血預(yù)處理所產(chǎn)生的保護(hù)作用具有協(xié)同效應(yīng)。
當(dāng)于再灌注前夕施用時(shí)，該新型腺苷A1/A2受體激動(dòng)劑AMP 579可保護(hù)多種動(dòng)物的心臟免受局部缺血/再灌注損傷。(Smits GJ、McVey M、CoxBF、Perrone MH、Clark KLCardioprotective effects of the novel adenosineA1/A2 receptor agonist AMP 579 in a porcine model of myocardialinfarction[一種新型腺苷A1/A2受體激動(dòng)劑AMP 579在豬的心肌梗死模型中之心臟保護(hù)效應(yīng)].J Pharmacol Exp Ther 1998；286611-618(下文中稱作“Smits”)；McVey MJ、Smits GJ、Cox BF、Kitzen JM、Clark KL、PerroneMHCardiovascular pharmacology of the adenosine A1/A2-receptoragonist AMP 579coronary hemodynamic and cardioprotective effects inthe canine myocardium[腺苷A1/A2受體激動(dòng)劑AMP 579的心血管藥理學(xué)犬的心肌層冠狀動(dòng)脈血液動(dòng)力學(xué)和心肌保護(hù)效應(yīng).J Cardiovasc Phamacol1999；33703-710(下文中稱作“McVey”)；Budde JM、Velez DA、Zhao Z-Q、Clark KL、Morris CD、Muraki S、Guyton RA、Vinten-JohansenJComparative study of AMP 579 and adenosine in inhibition ofneutrophil-mediated vascular and myocardial injury during 24h ofreperfusion[對比研究AMP 579和腺苷在24小時(shí)的再灌注期間對由嗜中性粒細(xì)胞調(diào)節(jié)的血管和心肌損傷之抑制作用]。Cardiovasc Res2000；47294-305(下文中稱作“Budd”)；以及Xu Z、Yang X-M、Cohen MV、Neumann T、Heusch G、Downey JMLimitation of infarct size in rabbithearts by the novel adenosine receptor agonist AMP 579 administered atreperfusion[一種新型腺苷受體激動(dòng)劑AMP 579于再灌注時(shí)施用使兔心梗死減小]。J Mol Cell Cardiol 2000；322339-2347(下文中稱作“Xu”)。AMP579于再灌注時(shí)的保護(hù)作用可歸功于對心肌攣縮的緩解(Xu Z、DowneyJM、Cohen MVAMP 579 reduces contracture and limits infarction inrabbit heart by activating adenosine A2receptors[AMP 579通過激動(dòng)腺苷A2受體而緩解兔心攣縮并減小梗死范圍].J Cardiovasc Pharmacol 2001、在印刷之中(下文中稱作“Xu II”))和很可能是降低再灌注時(shí)自由基的生成(XuZ、Cohen MV、Downey JM、Vanden Hoek TL、Yao ZAttenuation ofoxidant stress during reoxygenation by AMP 579 in cardiomyocytes[AMP579減小心肌細(xì)胞于再氧合期間的氧化劑應(yīng)力].Am J Physiol 2001；已交稿(下文中稱作Xu III))。鑒于AMP 579可于再灌注前夕施用以保護(hù)心臟，我們可以合理地推測AMP 579的保護(hù)機(jī)制從根本上有別于那些必須作為預(yù)處理的干預(yù)方法，如cariporide或缺血性預(yù)處理。
經(jīng)各種試驗(yàn)?zāi)Ｐ妥C明，cariporide，一種選擇性1亞型鈉-氫離子交換(NHE-1)抑制劑，具有保護(hù)心臟免受局部缺血/再灌注損傷的功效(Miura T、Ogawa T、Suzuki K、Goto M、Shimamoto KInfarct size limitation by anew Na+-H+exchange inhibitor，Hoe 642difference from preconditioningin the role of protein kinase C[一種新型鈉-氫離子交換抑制劑HOE-642減小心肌梗死大小與涉及蛋白激肽酶C的預(yù)處理之區(qū)別].J Am Col Cardiol1997；29693-701(下文中稱作“Miura”)；Scholz W、Albus U、CounillonL、Ggelein H、Lang H-J、Linz W、Weichert A、Schlkens BAProtectiveeffects of HOE642，a selective sodium-hydrogen exchange subtype 1inhibitor，on cardiac ischaemia and reperfusion[一種選擇性1亞型鈉-氫離子交換抑制劑HOE642對心肌缺血和再灌注的保護(hù)效應(yīng)]。Cardiovasc Res1995；29260-268(下文中稱作“Scholz”)；Klein HH、Bohle RM、Pich S、Lindert-Heimberg S、Wollenweber J、Schade-Brittinger C、Nebendahl KTime-dependent protection by Na+/H+exchange inhibition in a regionallyischemic，reperfused porcine heart preparation with low residual bloodflow[鈉-氫離子交換抑制對局部缺血后以低殘余血流灌注的豬心之時(shí)間依賴型保護(hù)作用]。J Mol Cell Cardiol 1998；30795-801(下文中稱作“Klein”)；Ito Y、Imai S、Ui G、Nakano M、Imai K、Kamiyama H、Naganuma F、Matsui K、Ohashi N、Nagai RA Na+-H+ exchange inhibitor(SM-20550)protects from microvascular deterioration and myocardial injury afterreperfusion[一種鈉-氫離子交換抑制劑SM-20550對再灌注后的微血管和心肌損傷有保護(hù)作用].Eur J Pharm 1999；374355-366(以下被稱作“Ito”))。Cariporide通過在心肌缺血/再灌注狀況下抑制細(xì)胞內(nèi)鈉離子的累積以及繼后的細(xì)胞內(nèi)鈣離子的超載來保護(hù)心臟，盡管該化合物是在缺血期間還是在再灌注時(shí)對心臟予以保護(hù)還未明確，但絕大多數(shù)研究表明作為預(yù)處理時(shí)，它具有最佳保護(hù)作用(Gumina RJ、Buerger E、Eickmeier C、Moore J、Daemmgen J、Gross GJInhibition of the Na+/H+ exchanger confersgreater cardioprotection against 90 minutes of myocardial ischemia thanischemic preconditioning in dogs.[對于心肌局部缺血90分鐘的犬，抑制鈉-氫離子交換的心臟保護(hù)作用強(qiáng)于缺血性預(yù)處理].Circulation.1999；1002519-2526(以下被稱作“Gumino”)；Klein HH、Pich S、Bohle RM、Wollenweber J、Nebendahl KMyocardial protection by Na+-H+exchangeinhibition in ischemic，reperfused porcine hearts[抑制鈉-氫離子交換對缺血后再灌注豬心的心肌保護(hù)作用].Circulation.1995；92912-917(下文中稱作“Klein II”)；Rohmann S、Weygandt H、Minck K-OPreischaemic aswell as postischaemic application of a Na+/H+exchange inhibitor reducesinfarct size in pigs[在缺血前后施用Na+/H+交換抑制劑可減小豬的梗死大小].Cardiovasc Res 1995；30945-951(下文中稱作“Rohmann”))。
缺血性預(yù)處理(PC)是通過心肌短時(shí)缺血和再灌注而使繼后長時(shí)間缺血所造成的組織壞死明顯降低的過程(Murry CE、Jennings RB、Reimer KAPreconditioning with ischemiaa delay of lethal cell injury in ischemicmyocardium[缺血性預(yù)處理延遲缺血心肌中的致命細(xì)胞損傷]。Circulation.1986；741124-1136)。缺血預(yù)處理為短時(shí)缺血期間釋放的物質(zhì)所觸發(fā)，包括腺苷(Liu GS、Thornton J、Van Winkle DM、Stanley AWH、Olsson RA、Downey JMProtection against infarction afforded by preconditioning ismediated by A1 adenosine receptors in rabbit heart[預(yù)處理對兔心梗死的防范作用以腺苷A1受體為中介]。Circulation.1991；84350-356(下文中稱作“Liu”))、緩激肽(Goto M、Liu Y、Yang X-M、Ardell JL、Cohen MV、Downey JMRole of bradykinin in protection of ischemic preconditioningin rabbit hearts[緩激肽在兔心缺血性預(yù)處理中所起的作用].Circ Res1995；77611-621(下文中稱作“Goto”))和類鴉片(Schultz JEJ、Rose E、YaoZ、Gross GJEvidence for involvement of opioid receptors in ischemicpreconditioning in rat hearts[大鼠心缺血性預(yù)處理涉及類鴉片受體之證據(jù)].Am J Physiol 1995；268H2157-H2161)。據(jù)察，這些物質(zhì)在持續(xù)缺血期間將激活蛋白激酶C(PKC)(Ytrehus K、Liu Y、Downey JMPreconditioningprotects ischemic rabbit heart by protein kinase C activation[預(yù)處理通過激活蛋白激酶C保護(hù)缺血兔心].Am.J.Physiol.1994；266H1145-H1152(在下文中稱作“Ytrehus”)；Weinbrenner C、Liu G-S、Cohen MV、Downey JMPhosphorylation of tyrosine 182 of p38 mitogen-activated protein kinasecorrelates with the protection of preconditioning in the rabbit heart[兔心中的p38有絲分裂原激活蛋白激酶的酪氨酸182之磷酸化與預(yù)處理的保護(hù)作用相關(guān)]，J Mol Cell Cardiol 1997；292383-2391)。PKC之后的連鎖反應(yīng)至今尚未明確。根據(jù)定義，缺血預(yù)處理只有在作為預(yù)處理時(shí)才具有保護(hù)作用。
以上三種干預(yù)方法(AMP 579、cariporide和PC)的機(jī)制可能各異。若的確如此，那么，將這些藥物聯(lián)合使用應(yīng)可能取得協(xié)同效應(yīng)。因此，本研究的目標(biāo)是調(diào)查AMP 579于再灌注時(shí)的作用是否對cariporide或PC的保護(hù)作用具有協(xié)同效應(yīng)。
組成本發(fā)明藥物組合物的一些具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性或鈉-氫離子交換抑制活性的化合物屬堿性物質(zhì)，這些化合物的有用形式為游離堿或其藥學(xué)可接受之酸加成鹽。
可用以制備酸加成鹽的酸優(yōu)選是那些與游離堿結(jié)合而生成藥學(xué)可接受之鹽的酸，亦即，當(dāng)以藥學(xué)可接受之劑量施用時(shí)，該鹽的陰離子于患者無毒，從而游離堿所固有的有益作用不為陰離子的副作用所降低。本發(fā)明范疇內(nèi)的藥學(xué)可接受之鹽包括自無機(jī)酸和有機(jī)酸衍生的鹽，并包括氫鹵化物(例如氫氯化物和氫溴化物)、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、氨基磺酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、丙二酸鹽、草酸鹽、水楊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、亞甲基-二-b-羥基萘甲酸鹽、龍膽酸鹽、羥乙基璜酸鹽、二-對-甲苯酰酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、環(huán)己基氨基磺酸鹽和奎尼酸鹽。
材料與方法本研究按照Guide for the Care and Use of Laboratory Animals《實(shí)驗(yàn)室用動(dòng)物的喂養(yǎng)和使用指南》(National Academy Press，Washington，DC，1996)進(jìn)行。
手術(shù)準(zhǔn)備用戊基巴比妥(30mg/kg靜脈注射)麻醉體重2.0-2.5千克的新西蘭雌、雄白兔，以氣管造口術(shù)插管并通過正壓呼吸器(MD industries，Mobile，AL)通100％的氧氣。調(diào)節(jié)輸氧率和換氣量，將動(dòng)脈血?dú)饩S持在生理范疇。使體溫保持在38至39℃。將一條導(dǎo)管插入左頸動(dòng)脈以便監(jiān)測血壓。將另一條導(dǎo)管插入右頸靜脈以便藥物灌輸。在第四肋間處實(shí)施左胸切開術(shù)，打開心包，暴露心臟。用錐形彎針走帶2-0絲制縫合線穿過心肌并纏繞于左冠狀動(dòng)脈的主干。線頭穿過一小段軟聚氯乙烯管形成套索。拉套索，然后用一個(gè)小止血鉗緊固套索，造成局部缺血。青紫出現(xiàn)則表示局部缺血發(fā)生。松開套索再灌注，心室表面可見充血?jiǎng)t肯定再灌注的進(jìn)行。
再灌注3小時(shí)后，給兔子注射過量的戊基巴比妥并迅速將心臟取出胸腔并置于Langendoff儀上，用鹽水灌注以沖出血液。然后重新封閉冠狀動(dòng)脈，并將1ml 0.25％的熒光聚合物微球體(直徑2-9μm，Duke Scientific Corp，Palo Alto，CA)注入灌注液，將無熒光的組織區(qū)域劃分為危險(xiǎn)區(qū)。稱重、冷凍心臟并將其切成2.5mm厚的切片。將切片放入37℃的1％氯化三苯基四唑(TTC)的磷酸鈉緩沖液中恒溫處理20分鐘。然后將切片浸入10％的甲醛水溶液以突顯染色(活)和無染色(壞死)組織，并將切片擠入間距整2mm的玻璃板間。用紫外燈照射切片以鑒別心肌危險(xiǎn)區(qū)。用透明的醋酸纖維紙繪出梗死區(qū)和危險(xiǎn)區(qū)，然后由不明本研究的研究人員采用測面儀進(jìn)行定量。將所得面積乘以切片厚度而換算成體積。梗死大小以危險(xiǎn)區(qū)的百分比表示。試驗(yàn)方案45分鐘缺血模型使7組兔子局部缺血45分鐘后再灌注3小時(shí)(圖1)。缺血性預(yù)處理的引發(fā)方式是在持續(xù)缺血前讓兔心局部缺血5分鐘后再灌注10分鐘。對接受AMP 579治療的各組進(jìn)行靜脈團(tuán)注(30μg/kg)然后以3μg/kg/min輸注70分鐘。對于PC+AMP(L)組，心臟經(jīng)缺血性預(yù)處理并于再灌注時(shí)接受70分鐘的AMP 579治療。對于AMP(L)組，于再灌注時(shí)施以70分鐘的單獨(dú)AMP579治療。對于AMP(E&L)組，在缺血前5分鐘開始對心臟施用AMP 579，施用期為120分鐘。Cariporide靜脈團(tuán)注在缺血發(fā)作前5分鐘(Cariporide(E))或再灌注發(fā)生前5分鐘(Cariporide(L))進(jìn)行。
60分鐘缺血模型對于45分鐘的缺血發(fā)作，cariporide預(yù)處理的療效是如此卓著以至于其它保護(hù)作用可能會(huì)失之以察。因此，在本研究系列中，我們選擇了60分鐘的缺血模型。如圖2所示，五組兔子經(jīng)60分鐘的局部缺血后再灌注3小時(shí)。對照組未接受藥物治療。對接受AMP 579治療的各組進(jìn)行靜脈團(tuán)注30μg/kg，然后以3μg/kg/min輸注70分鐘。對于Cariporide(E)組，心臟在缺血發(fā)作前5分鐘接受0.5mg/kg cariporide團(tuán)注。對于cariporide(E)+AMP(L)組，除了cariporide預(yù)處理之外，心臟于再灌注開始時(shí)還接受AMP 579治療。對于cariporide(L)+AMP(L)組，心臟于再灌注開始時(shí)接受cariporide(0.5mg團(tuán)注)和AMP 597兩項(xiàng)處理。對于AMP(L)組，于再灌注開始時(shí)施用單獨(dú)的AMP 579。
化學(xué)品將來自Aventis Pharma的AMP 579和cariporide溶解于少量的二甲亞砜(DMSO)中，二甲亞砜對梗死沒有單獨(dú)的影響。
統(tǒng)計(jì)分析所有數(shù)據(jù)均以平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(S.E.M)表示。單向ANOVA和Scheffé事后檢定法聯(lián)合使用以檢定各組間基線血液動(dòng)力學(xué)和梗死大小的差異。重復(fù)進(jìn)行ANOVA檢驗(yàn)以檢定試驗(yàn)期間各組內(nèi)血液動(dòng)力學(xué)之變化。若p值小于0.05，則表示有顯著差異。
結(jié)果45分鐘缺血模型在此模型中，我們的試驗(yàn)?zāi)康氖谴_定AMP 579是否對缺血性預(yù)處理的保護(hù)作用有加合效應(yīng)。圖3顯示一次缺血性預(yù)處理可將梗死大小從對照組的危險(xiǎn)區(qū)的55.8±3.9％明顯降至危險(xiǎn)區(qū)的26.0±6.7％。自再灌注開始單獨(dú)施用AMP 579也將梗塞大小明顯降至危險(xiǎn)區(qū)的32.1±1.8％。若缺血預(yù)處理和于再灌注時(shí)施用AMP 579聯(lián)合，梗死大小則進(jìn)一步降至危險(xiǎn)區(qū)的5.5±2.7％，這比單獨(dú)使用缺血預(yù)處理或AMP 579的都要小得多。由此可見，AMP 579和缺血預(yù)處理具有加合效應(yīng)。我們還評估了cariporid在45分鐘的缺血模型中對梗死大小的影響。Cariporide預(yù)處理將梗死大小明顯降至危險(xiǎn)區(qū)的8.5±3.7％，也小于在對照組心臟中所觀察到的梗死大小。然而，當(dāng)于再灌注前夕施用cariporide時(shí)，其未能表現(xiàn)出心臟保護(hù)作用(梗死大小為危險(xiǎn)區(qū)的53.4±3.5％)。5組間的基線心率和平均動(dòng)脈壓無差異(表1)。各組間兔子的體重、心重和危險(xiǎn)區(qū)大小也無顯著差異(表1)。
60分鐘缺血模型鑒于在45分鐘模型中，單獨(dú)的cariporide表現(xiàn)出如此顯著的保護(hù)效應(yīng)，因此，我們在cariporide+AMP 579的試驗(yàn)方案中選用了60分鐘缺血模型。5組間的基線心率和平均動(dòng)脈壓無差異(表3)。各組間兔子的體重、心重和危險(xiǎn)區(qū)大小也無顯著差異(表4)。對照組的梗死大小為危險(xiǎn)區(qū)的66.0±4.9％(圖4)。用cariporide進(jìn)行早期治療使梗死大小明顯降至危險(xiǎn)區(qū)的41.5±7.7％。當(dāng)早期施用cariporide和再灌注發(fā)生時(shí)施用AMP 579聯(lián)合時(shí)，梗塞大小則進(jìn)一步降至危險(xiǎn)區(qū)的14.2±4.5％，表明cariporide和AMP579對心肌梗死的保護(hù)作用具有協(xié)同效應(yīng)。于再灌注時(shí)單獨(dú)施用AMP 579也顯示減小梗塞大小的趨勢(危險(xiǎn)區(qū)的45.3±5.4％)，然而統(tǒng)計(jì)分析顯示當(dāng)與對照組對比時(shí)，該差異并不顯著。引人注意的是當(dāng)于再灌注發(fā)生前夕聯(lián)合施用AMP 579和cariporide時(shí)，梗死大小的確明顯降至危險(xiǎn)區(qū)的31.3±7.0％，這又意味著甚至于再灌注時(shí)聯(lián)合施用cariporide和AMP 579也具有協(xié)同效應(yīng)。
討論本研究的主要發(fā)現(xiàn)是于再灌注時(shí)施用AMP 579所起到的保護(hù)作用可與缺血發(fā)作前施用的cariporide的保護(hù)作用有協(xié)同效應(yīng)，以致保護(hù)效應(yīng)明顯加強(qiáng)。當(dāng)AMP 579與缺血性預(yù)處理聯(lián)合使用也具有協(xié)同效應(yīng)。這些發(fā)現(xiàn)暗示AMP 579的作用機(jī)制有別于cariporide或缺血性預(yù)處理。另外，這些藥物的聯(lián)用似乎在臨床條件下對心肌梗死可提供高度保護(hù)作用，且在心臟手術(shù)中尤其有用。
經(jīng)驗(yàn)證，于再灌注時(shí)施用AMP 579可保護(hù)心臟免受缺血和再灌注損傷(Smits；McVey；Budde；Xu)，這暗示了AMP 579可防止再灌注損傷。在這些研究中，使心臟缺血30分鐘，并于3小時(shí)的再灌注發(fā)生前10分鐘或發(fā)生時(shí)施用AMP 579。在本研究中，單獨(dú)施用AMP在45分鐘模型中具有保護(hù)作用，但在60分鐘的模型中，這種保護(hù)作用卻未得到證實(shí)，這暗示了AMP的保護(hù)作用受缺血嚴(yán)重程度的限制。盡管于再灌注時(shí)施用AMP 579所起到的保護(hù)作用明顯小于cariporide預(yù)處理的保護(hù)作用，但二者聯(lián)合使用所產(chǎn)生的效果卻非常顯著，由此可見它們之間具有協(xié)同效應(yīng)。
在本研究的45分鐘缺血模型中，晚期單獨(dú)施用cariporide(于再灌注時(shí))對心臟沒有任何保護(hù)作用(圖4)。這肯定了其它人對再灌注時(shí)施用cariporide不具保護(hù)作用的觀察(Klein II；Klein HH、Pich S、Bohle RM、Lindert-Heimberg S、Nebendahl KNa(+)/H(+)exchange inhibitorcariporide attenuates cell injury predominantly during ischemia and not atonset of reperfusion in porcine hearts with low residual blood flow[Na(+)/H(+)交換抑制劑在豬心缺血期間可顯著減少細(xì)胞損傷，但于低殘余血再灌注開始時(shí)卻無此效果]。Circulation.2000；1021977-1982(在下文中稱作“Klein III”)。值得注意的是，當(dāng)于再灌注時(shí)聯(lián)合施用cariporide和AMP579時(shí)，觀察到梗死大小與對照組相比顯著降低。盡管這種保護(hù)作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及cariporide作為預(yù)處理施用時(shí)觀察到的效果，但卻暗示了于再灌注時(shí)施用cariporide確實(shí)產(chǎn)生了較小的保護(hù)效應(yīng)。然而，cariporide和AMP 579聯(lián)合使用所獲得的保護(hù)作用究竟是“相互促進(jìn)”還是加合效應(yīng)，則尚不明確。
盡管AMP 579和cariporide具有協(xié)同效應(yīng)的確鑿原因還不明確，但我們推測，這種協(xié)同效應(yīng)的原因可能在于這兩種藥物具有完全不同的作用機(jī)制。于再灌注時(shí)施用AMP 579所產(chǎn)生的保護(hù)作用似乎是通過激活腺苷A2受體而介導(dǎo)的(McVey；Xu II；Nakamura M、Zhao Z-Q、Clark KL、VelezDV、Guyton RA、Vinten-Johansen JA novel adenosine analog、AMP579，inhibits neutrophil activation，adherence and neutrophil-mediated injuryto coronary vascular endothelium[一種新型腺苷類似物抑制嗜中性粒細(xì)胞的活化和粘附于冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮以及以嗜中性粒細(xì)胞為介導(dǎo)的冠脈血管內(nèi)皮損傷]。Eur J Pharmacol 2000；397197-205(下文中稱作“Nakamura”))。我們最近的資料也表明AMP 579是通過減輕心肌攣縮(Xu II)并抑制再灌注時(shí)自由基的生成來保護(hù)心臟免受再灌注損傷(Xu III)。Nakamura等(Nakamura)提出AMP 579的作用涉及對嗜中性粒細(xì)胞活化的抑制。然而，我們發(fā)現(xiàn)AMP 579對經(jīng)緩沖液灌注而無嗜中性粒細(xì)胞的兔心也一樣具有保護(hù)作用(Xu)。因此，AMP 579的保護(hù)作用的確切機(jī)制仍不明確。Cariporide是一種選擇性NHE-1抑制劑(Scholz)。在缺血期間，質(zhì)子積累將Na+/H+交換系統(tǒng)激活，Na+/H+交換系統(tǒng)隨后以質(zhì)子來換取Na+。在缺血期間，Na+的積累會(huì)干擾容量調(diào)節(jié)而Na+于再灌注時(shí)與Ca++交換使細(xì)胞溶質(zhì)內(nèi)的鈣離子超載。再灌注時(shí)，若pH得到校正，NHE-1則應(yīng)尤其有活性。盡管抑制NHE-1是一種廣為認(rèn)可的心臟保護(hù)方法(Gumina；Klein III；Rupprecht HJ、Dahl JV、Terres W、Seyfarth KM、Richardt G、SchultheibHP、Buerke M、Sheehan FH、Drexler HCardioprotective effects of theNa(+)/H(+)xchange inhibitor cariporide in patients with acute anteriormyocardial infarction undergoing direct PTCA[Na(+)/H(+)交換抑制劑Cariporide對急性心肌梗死患者在進(jìn)行直接冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張術(shù)期間的心臟保護(hù)作用]。Circulation.2000；1012902-2908；Stromer H、de Groot M、HornM、Faul C、Leupold A、Morgan JP、Scholz W、Neubauer SNa+/H+exchange inhibition with HOE642 improves postischemic recoverydue to attenuation of Ca2+overload and prolonged acidosis onreperfusion[用HOE642抑制Na+/H+交換由于緩解了Ca2+超載和再灌注時(shí)長時(shí)間的酸中毒而促進(jìn)缺血后的恢復(fù)]。Circulation 2000；1012749-2755)，但仍不清楚這種保護(hù)究竟是在缺血期間(Miura；Klein；Klein II)還是在再灌注時(shí)發(fā)揮(Rohmann；Linz W、Albus U、Crause P、Jung W、WeichertA、Scholkens BA、Scholz WDose-dependent reduction of myocardialinfarct mass in rabbits by the NHE-1 inhibitor cariporide(HOE642)[NHE-1抑制劑Cariporide(HOE)可劑量依賴型地降低兔心肌梗死大小]。Clin Exp Hypertens 1998；20733-749)。在最近的一份報(bào)告中，Klein等已指出cariporide的心肌保護(hù)作用主要通過于缺血期間而非再灌注期間抑制NHE-1而發(fā)揮(Klein III)。于此同見，我們也發(fā)現(xiàn)在45分鐘的缺血模型中，于再灌注時(shí)施用cariporide不能保護(hù)心臟免受缺血/再灌注損傷。因此，可以合理地假設(shè)AMP 579和cariporide具有不同的作用機(jī)制。而兩種藥物機(jī)制上的差異很可能就是其協(xié)同效應(yīng)的基礎(chǔ)。
在本研究的45分鐘缺血模型中，AMP 579的保護(hù)作用對PC的作用也具有協(xié)同效應(yīng)。缺血性預(yù)處理由短期缺血期間所釋放的物質(zhì)引發(fā)，包括腺苷、緩激肽和類阿片(Liu；Goto)，據(jù)信這些物質(zhì)繼而在持續(xù)缺血期間激活蛋白激酶C(PKC)(Ytrehus)。據(jù)證明，使用一些特定的拮抗藥物已充分證實(shí)A1和A3而非A2腺苷受體能夠引發(fā)缺血性預(yù)處理的保護(hù)作用(Thornton JD、Liu GS、Olsson RA、Downey JMIntravenous pretreatmentwith A1-selective adenosine ahalogues protects the heart againstinfarction[選擇性A1腺苷類似物的靜脈施用預(yù)處理防止心肌梗死]。Circulation.1992；85659-665；Liu GS、Richards SC、Olsson RA、MullaneK、Walsh RS、Downey JMEvidence that the adenosine A3receptor maymediate the protection afforded by preconditioning in the isolated rabbitheart[預(yù)處理對兔心的保護(hù)作用是通過腺苷A3受體而發(fā)生的證據(jù)]。Cardiovasc Res 1994；281057-1061)。當(dāng)于再灌注時(shí)施用時(shí)，AMP 579是通過激活A(yù)2而非A1受體來保護(hù)心臟免受缺血/再灌注損傷(Xu；Nakamura)，這表明AMP 579和PC具有不同的作用機(jī)制。因此，于再灌注時(shí)施用AMP579所提供的保護(hù)作用與PC的保護(hù)作用具有協(xié)同效應(yīng)也不足為怪了。
若在缺血前給予AMP 579，我們曾推測其可能是通過激活腺苷A1受體并引發(fā)PC機(jī)制而發(fā)揮其保護(hù)作用(McVey)。若的確如此，那么自缺血發(fā)作前開始施用AMP 579直到再灌注后70分鐘所產(chǎn)生的保護(hù)效果應(yīng)預(yù)期相當(dāng)于PC加AMP 579的保護(hù)效果。然而，在45分鐘的缺血模型中，我們沒有觀察到此“預(yù)期”效果(圖4)。這也許是因?yàn)锳MP 579的施用濃度不夠高，不足以激活足夠的腺苷A1受體以對心臟進(jìn)行預(yù)處理。
總之，我們已證明新型腺苷A1/A2受體激動(dòng)劑AMP 579與cariporide或缺血性預(yù)處理聯(lián)合作用可顯著減少開胸兔心的心肌梗死范圍。上述三種治療途徑在機(jī)制上的區(qū)別也許是其協(xié)同效應(yīng)的原因所在。另外，在可選用預(yù)處理的心臟手術(shù)期間，本研究的發(fā)現(xiàn)可提供一種高效的心臟保護(hù)途徑。


圖1 45分鐘缺血模型的試驗(yàn)方案。
圖2 60分鐘缺血模型的試驗(yàn)方案。
圖3 缺血性預(yù)處理和AMP 579對心肌梗死大小的影響，梗死大小以危險(xiǎn)區(qū)的百分比表示。梗死大小經(jīng)三苯基四唑(TTC)染色以定量?？招娜Υ韱为?dú)試驗(yàn)，實(shí)心圈代表具有S.E.M.的組平均值。*與對照組相比，p＜0.05；#與PC加AMP(L)相比，p＜0.05。
圖4 60分鐘缺血模型中Cariporide和AMP 579對心肌梗死大小的影響，梗死大小以危險(xiǎn)區(qū)的百分比表示。梗死大小經(jīng)三苯基四唑(TTC)染色以定量。空心圈代表單獨(dú)試驗(yàn)，實(shí)心圈代表具有S.E.M.的組平均值?？s寫見表1。*與對照組相比，p＜0.05；#與cariporide(E)組相比，p＜0.05。
表1 45分鐘缺血模型的血液動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)基線 缺血 重復(fù)30次 重復(fù)90次 重復(fù)180次HR(跳動(dòng)次數(shù)/分鐘)對照 260±10 265±13 253±10 247±14 248±15PC 278±10 280±10 273±9 275±10 270±11PC+AMP(L) 276±9 269±8 240±12 233±5 246±10AMP(L) 267±6 265±6 230±7 247±13 247±8AMP(E&L) 288±8 247±11 238±12 233±10 257±11Cariporide(E) 290±9 275±9 273±8 267±8 260±7Cariporide(L) 277±10 263±11 258±9 257±8 248±6MAP(mmHg)對照 96.3±4.581.4±5.079.1±4.978.6±4.878.0±3.1PC 100±3.9 88.1±2.588.1±2.786.9±3.480.0±2.5PC+AMP(L) 101±3.9 87.9±3.070.5±7.773.3±7.282.2±7.9AMP(L) 92.8±5.672.2±2.658.9±4.667.8±6.267.3±4.9AMP(E&L) 93.9±4.665.8±4.962.8±4.367.2±3.877.2±4.9Cariporide(E) 95.6±3.784.2±5.783.9±4.383.4±4.678.2±5.3Cariporide(L) 93.9±2.775.5±4.173.6±3.277.5±2.371.9±4.5平均值±S.E.M.。
縮寫PC＝缺血性預(yù)處理；PC+AMP(L)＝缺血性預(yù)處理+于再灌注時(shí)開始施用AMP 579持續(xù)70分鐘；AMP(L)＝于再灌注時(shí)開始施用AMP 579持續(xù)70分鐘；AMP(E&L)＝于缺血前5分鐘開始施用AMP 579持續(xù)120分鐘；Cariporide(E)＝于缺血前5分鐘團(tuán)注Cariporide；Cariporide(L)＝于再灌注前5分鐘團(tuán)注cariporide；HR＝心率；MAP＝平均動(dòng)脈壓。
表2 45分鐘局部缺血模型的梗死大小數(shù)據(jù)n體重心重危險(xiǎn)區(qū)大小 梗塞大小(kg)(g) (cm3) (cm3)對照組 62.3±0.17.2±0.30.97±0.04 0.54±0.06PC 62.3±0.17.4±0.11.02±0.24 0.32±0.14*PC+AMP(L)72.1±0.06.9±0.31.13±0.08 0.07±0.04*#AMP(L) 62.1±0.07.1±0.11.1 5±0.110.37±0.03*AMP(E&L) 62.2±0.17.4±0.11.17±0.12 0.26±0.05*、 62.3±0.17.2±0.21.35±0.15 0.13±0.07*Cariporide(L)62.1±0.06.9±0.21.13±0.14 0.60±0.08平均值±S.E.M.。
*與對照組相比，p＜0.05；#與PC+AMP組相比，p＜0.05縮寫見表2和表3。
表3 60分鐘局部缺血模型的血液動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)基線 局部缺血 重復(fù)30次重復(fù)90次 重復(fù)180次HR(跳動(dòng)次數(shù)/分鐘)對照組 275±6 2273±9 260±9 263±9 258±8Cariporide(E) 286±8 267±26 274±11 272±7 263±11Cariporide(E)+AMP(L)277±12 269±12 238±12 239±13 246±15Cariporide(L)+AMP(L)272±11 260±12 235±9 240±10 243±10AMP(L) 289±12 274±11 235±10 253±12 268±10平均動(dòng)脈壓(mmHg)對照組 94.3±2.383.5±3.778.2±4.177.7±4.375.3±4.6Cariporide(E) 94.2±1.586.7±2.182.8±2.279.7±2.279.0±3.3Cariporide(E)+AMP(L)93.8±2.182.6±2.268.6±5.173.0±2.774.8±3.0Cariporide(L)+AMP(L)93.9±2.380.0±3.563.9±4.867.8±2.572.8±3.8AMP(L) 102.1±2.5 93.4±2.973.3±2.883.6±4.085.0±2.9平均值±S.E.M.。
縮寫cariporide(E)＝在缺血前5分鐘團(tuán)注cariporide；Cariporide(E)+AMP(L)＝在缺血前5分鐘團(tuán)注cariporide，隨后自再灌注開始施用AMP 579持續(xù)70分鐘；Cariporide(L)+AMP(L)＝于再灌注前5分鐘團(tuán)注cariporide，隨后于再灌注時(shí)開始施用AMP 579持續(xù)70分鐘；AMP(L)＝自再灌注開始施用AMP 579持續(xù)70分鐘；HR＝心率；MAP＝平均動(dòng)脈壓。
表4 60分鐘缺血模型的梗死大小數(shù)據(jù)n體重心重危險(xiǎn)區(qū)大小梗死大小(kg)(g) (cm3)(cm3)對照組 10 2.3±0.07.9±0.21.14±0.130.77±0.11Cariporide(E)62.4±0.07.6±0.31.17±0.110.47±0.08*Cariporide(E)+AMP72.3±0.07.4±0.11.03±0.110.15±0.05*#Cariporide(L)+AMP62.4±0.07.5±0.21.09±0.080.36±0.09*AMP 82.3±0.07.5±0.21.25±0.120.59±0.09平均值±S.E.M.。
*與對照組相比，p＜0.05；#與Cariporide(E)組和cariporide(L)+AMP組相比，p＜0.05。
縮寫見表1；n＝各組兔子的數(shù)目。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和具有鈉-氫離子交換抑制活性的化合物在制備為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥物中的用途。
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案是一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體以及藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物，其中的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物是AMP 579或其藥學(xué)可接受之鹽。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案是一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體以及藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物，其中的鈉-氫離子交換抑制化合物是cariporide、eniporide、zoniporide、BMS-284640、BIIB-513、BIIB-722CI、EMD-85131、KB-R9032、MS-31-038、SL-59.1227、SM20550、SMP-300、T-559和TY-12533。
本發(fā)明的一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案是一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體以及藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物，其中的鈉-氫離子交換抑制性化合物是cariporide。
本發(fā)明的一個(gè)特殊實(shí)施方案是一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體、AMP 579或其藥學(xué)可接受之鹽以及cariporide。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案提供了保護(hù)有此需要的患者免受再灌注損傷的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案提供了保護(hù)有此需要的患者免受缺血損傷的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案提供了心臟手術(shù)之前、期間或之后為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該保護(hù)方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案提供了在缺血發(fā)作之前、期間或之后為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該保護(hù)方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
在本發(fā)明的心臟保護(hù)方法中，腺苷A1/A2激動(dòng)化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物可以以不同的方式施用，諸如在任選采用醫(yī)療手術(shù)的組合治療中。例如，可同時(shí)或不同時(shí)向患者施用腺苷A1/A2激動(dòng)化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物，條件是它們的施用使得在某些時(shí)段內(nèi)患者體內(nèi)存有藥學(xué)有效量的這兩種化合物以達(dá)本發(fā)明的療效。
本發(fā)明的進(jìn)一步目標(biāo)是提供用于為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥箱，該藥箱包含多個(gè)獨(dú)立的容器，其中至少一個(gè)所述容器含有具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物，且至少另一個(gè)所述容器含有鈉-氫離子交換抑制劑，且所述容器任選含有藥物載體，該藥箱可有效地用以實(shí)施本發(fā)明的組合治療。有關(guān)藥箱的進(jìn)一步的實(shí)施方案是所述容器中至少有一個(gè)所述容器應(yīng)含有具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物但不含鈉-氫離子交換抑制化合物，且至少另一個(gè)所述容器應(yīng)含有鈉-氫離子交換抑制化合物但不含具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物。
在實(shí)際應(yīng)用中，腺苷A1/A2激動(dòng)化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物可經(jīng)胃腸外、局部、直腸、經(jīng)皮、肺內(nèi)或口服施用。但優(yōu)選經(jīng)胃腸外和/或經(jīng)口服施用。
含有本發(fā)明所使用的化合物的適宜的藥物組合物可按照常規(guī)方法配制。例如，可將本發(fā)明所使用的化合物溶解或混懸于適宜的載體中。
本發(fā)明所使用的化合物之存在形式應(yīng)能實(shí)現(xiàn)最恰當(dāng)?shù)氖┯梅绞?。本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，其含有適用于作為人藥或獸藥中的、本發(fā)明所使用的化合物。該組合物可使用一種或多種藥學(xué)可接受的、包含佐劑或賦形劑的載體以常規(guī)方法配制。該佐劑尤其包括稀釋劑、無菌水介質(zhì)和各種無毒有機(jī)溶劑。該組合物可被制成片劑、丸劑、膠囊、錠劑(Loaenge，troch)、硬糖、顆粒劑、粉劑、水溶液或混懸液、注射液、酏劑或糖漿、適于肺內(nèi)施用的粉劑、溶液或混懸液，并可含有一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑或穩(wěn)定劑的物質(zhì)以獲得藥學(xué)可接受的制劑。
載體以及所述載體中本發(fā)明所使用的化合物的含量一般是根據(jù)這些化合物的溶解性和化學(xué)性質(zhì)、具體的施用方式以及藥學(xué)實(shí)踐中應(yīng)遵守的原則來選擇。例如，制備片劑可使用賦形劑，諸如無菌水、林格氏溶液、乳糖、檸檬酸鈉、等滲鹽溶液(磷酸二氫鈉或磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣或氯化鎂，或這些鹽的混合物)、碳酸鈣以及崩解劑，諸如淀粉、海藻酸和某些復(fù)雜硅酸鹽，以及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石。乳糖和高分子量的聚乙二醇有助于制備膠囊。當(dāng)使用水性混懸液時(shí)，其可含乳化劑或促懸浮劑。還可使用稀釋劑，諸如蔗糖、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油和氯仿或這些物質(zhì)的混合物。
對于胃腸外施用，可采用本發(fā)明所使用的化合物于植物油(例如芝麻油、花生油或橄欖油)或水-有機(jī)溶液(諸如水和丙二醇)、可注射有機(jī)酯(諸如油酸乙酯)中的乳化液、混懸液或溶液以及其藥學(xué)可接受之鹽的無菌溶液。本發(fā)明所使用的化合物之鹽溶液尤其可用于肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或皮下注射或輸注技術(shù)施用。水溶液、還包括所述鹽在純蒸餾水中的溶液可用于靜脈內(nèi)施用，條件是其pH得到適當(dāng)調(diào)節(jié)、合理緩沖并經(jīng)足量的葡萄糖或氯化鈉配成等滲，并經(jīng)加熱、輻射或微濾滅菌。
本發(fā)明的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物也可以以一定方式配制，所述方式可對抗因?qū)α骷?或擴(kuò)散而導(dǎo)致的透過血管(動(dòng)脈或靜脈)壁的快速清除，從而增加藥物組合物在希望作用點(diǎn)的停留時(shí)間。根據(jù)本發(fā)明的有用貯庫(Depot)可被納入共聚物基質(zhì)，諸如乙烯-乙酸乙烯酯中或由硅橡膠外殼包圍的聚乙烯醇凝膠之中。另外一種方式是自植入外膜的硅氧烷聚合物來局部輸送具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
減小具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物在經(jīng)皮、經(jīng)血管輸送過程中流失的另一個(gè)方法包括使用非擴(kuò)散性藥物涂層(drug-eluting)微粒。該微?？砂鞣N合成聚合物諸如聚交酯，或天然物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)或多糖。這樣的微?？墒沟媚軌?qū)ψ兞窟M(jìn)行有策略的操縱，所述變量包括藥物的總劑量和該藥物的釋放動(dòng)力學(xué)。該微?？赏ㄟ^帶孔隙球囊導(dǎo)管或球囊支片被有效地注進(jìn)血管壁并在動(dòng)脈或靜脈壁和外膜周圍的組織內(nèi)至少保留約兩周。用于局部、血管內(nèi)定位輸送治療劑的制劑和方法在例如Reissen等人的撰文(J.Am.Coll.Cardiol.1994；231234-1244)中述及，該文獻(xiàn)的全部內(nèi)容特此引入本文作為參考。
用于具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物的介質(zhì)還可以是水凝膠，該水凝膠可由任何生物兼容的或無胞毒(均相或異相)的聚合物諸如可作為藥物吸收海綿的親水性聚丙烯酸聚合物制成。此聚合物已例如在專利申請WO93/08845中述及，該文獻(xiàn)的全部內(nèi)容特此引入本文作為參考。它們中的一些如特別是自環(huán)氧乙烷和/或環(huán)氧丙烷制備的那些在市面有售。
另外，具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物可以借助涂有親水性薄膜(例如水凝膠)的血管成形術(shù)球囊，或借助帶有所述化合物輸注腔的任何其它導(dǎo)管直接施用于血管壁，由此可以以精確方式施用于待治療部位。
本發(fā)明所使用的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制性化合物的百分比可以不同。這些化合物所占有的比例應(yīng)當(dāng)可獲得適當(dāng)?shù)膭┝俊ｏ@然，也可施用幾個(gè)單位劑量形式。所施用的劑量由醫(yī)生根據(jù)期望的治療效果、施用途徑和療程以及患者的狀況而定。在各個(gè)特定的情況下，劑量將根據(jù)待治療對象的特定因素，諸如年齡、體重、總體健康狀況和其它可影響藥物療效的因素決定。
對于成年人，腺苷A1/A2激動(dòng)化合物的劑量，若經(jīng)吸入則一般為每天約0.00001至約0.5、優(yōu)選約0.0001至約0.05mg/kg體重；若經(jīng)口服則一般為每天約0.0001至約1、優(yōu)選0.001至0.5mg/kg體重；若經(jīng)靜脈施用則一般為每天約0.00001至約0.1、優(yōu)選0.0001至0.01mg/kg體重。鈉-氫離子交換抑制化合物的劑量，若經(jīng)吸入則一般為每天約0.0001至約5、優(yōu)選約0.001至約0.5mg/kg體重；若經(jīng)口服則一般為每天約0.001至約10、優(yōu)選0.01至5mg/kg體重；若經(jīng)靜脈施用則一般為每天約0.0001至約1、優(yōu)選0.001至0.1mg/kg體重。
具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物之施用劑量可以是各化合物的藥學(xué)有效劑量，或亞臨床劑量，即低于各化合物的藥學(xué)有效劑量，或這些情況的組合，只要經(jīng)組合的劑量是藥學(xué)有效的即可。
本發(fā)明所使用的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物的施用頻率可根據(jù)期望療效所需而定。實(shí)施本發(fā)明方法的劑量方案是保障最大的治療響應(yīng)直到達(dá)到病情緩解，然后采用可減輕病情的最低有效劑量。一些患者可能對較高或較低的劑量反應(yīng)迅速，因此，可發(fā)現(xiàn)用低得多的維持劑量就足夠了。本發(fā)明對長期和短期的治療方案均予以了策劃。根據(jù)特定患者的生理需求而實(shí)施的每天約1至約4劑的治療方案也在本發(fā)明的策劃之中，當(dāng)然也考慮到在任何具體情況下選擇適當(dāng)劑量時(shí)必須參考患者的體重、總體健康狀況、年齡和其他可影響藥物響應(yīng)的因素。連續(xù)進(jìn)行胃腸外輸注以使血液中保持治療有效水平的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制性化合物，也在本發(fā)明的策劃范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的化合物可于再狹窄治療的血管成形術(shù)(采用任何裝置如球囊、切除或激光技術(shù))期間使用，以減小或防止再灌注損傷。
本發(fā)明的化合物可在再狹窄治療期間與任何抗凝血?jiǎng)?、抗血小板劑、抗血栓形成劑或血纖蛋白溶酶原劑聯(lián)合使用以減輕或避免再灌注損傷。這類活性劑往往于干涉性手術(shù)之前、期間或之后與本發(fā)明的化合物并用對患者進(jìn)行治療，以使干涉性手術(shù)安全實(shí)施或避免血栓形成所產(chǎn)生的有害影響。已知的這類抗血凝劑、抗血小板劑、抗血栓形成劑或血纖蛋白溶酶原劑的一些實(shí)例包括凝血酶抑制劑或VIIa因子抑制劑的任何制劑。已知的這類抗血凝劑、抗血小板劑、抗血栓形成劑或血纖蛋白溶酶原劑的一些實(shí)例包括阿斯匹林、凝血酶直接抑制劑、Xa因子直接抑制劑或VIIa因子抑制劑的任何制劑。
本發(fā)明可以以其它形式實(shí)施，只要不違背本發(fā)明的要領(lǐng)和基本屬性即可。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體以及藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物是以下通式的化合物或其藥學(xué)可接受之鹽。
3.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中的鈉-氫離子交換抑制化合物選自cariporide、eniporide、zoniporide、BMS-284640、BIIB-513、BIIB-722CI、EMD-85131、KB-R9032、MS-31-038、SL-59.1227、SM20550、SMP-300、T-559和TY-12533。
4.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中的鈉-氫離子交換抑制化合物是cariporide。
5.權(quán)利要求1的藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體和藥學(xué)有效量的AMP579和cariporide。
6.一種為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
7.一種保護(hù)有此需要的患者免受再灌注損傷的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
8.一種保護(hù)有此需要的患者免受缺血損傷的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效劑的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
9.一種在心臟手術(shù)之前、期間或之后為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
10.一種在缺血發(fā)作之前、期間或之后為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物。
11.藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉-氫離子交換抑制化合物在制備用于為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥物中的用途。
12.一種為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥箱，所述藥箱包含多個(gè)獨(dú)立的容器，其中至少一個(gè)所述容器含有具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物，且至少另一個(gè)所述容器含有鈉-氫離子交換抑制化合物，且所述容器任選含有藥物載體。
13.權(quán)利要求12的藥箱，其中所述容器中至少有一個(gè)所述容器應(yīng)含有具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物但不含鈉-氫離子交換抑制性化合物，且至少另一個(gè)所述容器應(yīng)含有鈉-氫離子交換抑制化合物但不含具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物。
14.一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體和藥學(xué)有效量或低于藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物以及藥學(xué)有效量或低于藥學(xué)有效量的鈉-氫離子交換抑制化合物，條件是所述組合物在藥學(xué)上是有效的。
15.一種藥物組合物，其包含藥學(xué)可接受之載體和藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物或其藥學(xué)可接受之鹽，以及鈉-氫離子交換抑制化合物或其藥學(xué)可接受之鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，該藥物組合物包含具有A1/A2腺苷激動(dòng)活性的化合物、鈉－氫離子交換抑制化合物以及藥學(xué)可接受之載體。本發(fā)明還涉及在有需要的患者中進(jìn)行心臟保護(hù)的方法，該方法包括向所述患者施用藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉－氫離子交換抑制化合物。本發(fā)明還涉及藥學(xué)有效量的具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物和鈉－氫離子交換抑制化合物在制備用于向有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及為有此需要的患者提供心臟保護(hù)的藥箱，所述藥箱包含多個(gè)獨(dú)立的容器，其中至少一個(gè)所述容器含有具有腺苷A1/A2激動(dòng)活性的化合物，且至少另一個(gè)所述容器含有鈉－氫離子交換抑制化合物，所述容器任選含有藥物載體。
文檔編號A61P31/10GK1585634SQ02821422
公開日2005年2月23日 申請日期2002年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月2日
發(fā)明者J·M·唐尼, 徐哲龍, U·舒克拉 申請人:安萬特藥物公司