專利名稱：抑制基質(zhì)－金屬蛋白酶治療腫瘤性疾病的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及兒茶素化合物聯(lián)合其它食物成分用于抑制基質(zhì)-金屬蛋白酶的用途。更具體地說，本發(fā)明涉及一種含有兒茶素，抗壞血酸，賴氨酸和脯氨酸的組合物用于治療腫瘤性疾病的用途。
多酚化合物，也稱為兒茶素，存在于綠茶中，并且被提出可提供保護(hù)對(duì)抗包括癌癥在內(nèi)的多種疾病(Mukhtar H.，Ahmed N.Am.J.Clin.Nutr.711698S-1702S(2000))。Sadzuka等人顯示小鼠口服綠茶能增強(qiáng)阿霉素的腫瘤抑制作用。
兒茶素的抗癌活性可能與其對(duì)參與癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的某些因子的作用相關(guān)。已經(jīng)知道兒茶素能導(dǎo)致人類癌細(xì)胞細(xì)胞周期的停滯(Ahmad N.，F(xiàn)eyes D.K.，Nieminen A.L.，Agarwal R.，Mukhtar H.J.Natl.Cancer Inst.891881-1886(1997))。綠茶中的多酚組分顯示出能夠保護(hù)對(duì)抗腫瘤誘發(fā)的炎癥和細(xì)胞因子。
綠茶中的多酚化合物占30％干重。包括黃烷醇，黃烷雙醇，類黃酮和酚酸。黃烷醇是綠茶中最為豐富的多酚物質(zhì)，通常被稱為兒茶素。綠茶中有4種主要的兒茶素1)(-)-表兒茶酸，2)(-)-表兒茶酸-3-沒食子酸鹽，3)(-)-表沒食子兒茶精和4)(-)-表沒食子兒茶精-3-沒食子酸鹽(EGCG)。在這些兒茶素中，EGCG是綠茶中存在的主要多酚成分。
EGCG是一種有效的抗氧化化合物(J.Cell.Biochem.265236-257(1996))，并且可能促成綠茶的抗癌活性。有報(bào)道兒茶素化合物通過阻止血管發(fā)生過程從而發(fā)揮它的抗轉(zhuǎn)移活性(Cao Y.，Cao R.Nature 398381(1999))。EGCG還顯示出干擾尿激酶(u-纖溶酶原激活物)的活性，尿激酶是人類癌癥中最常表達(dá)的酶之一(Jankun J.，Selman S.H.，Swiercz R.，Skrzypczak J.E.Nature387-567(1997))。
然而，已經(jīng)確定人體內(nèi)多酚的生物利用率非常低(Chen L.，Lee M.J.，Yang C.S.Drug Metab.Dispos.251045-1050(1997)；Yang C.S.，Chen L.，Lee M.J.，Balentine D A.，Kuo M.C.，Schantz S.CancerEpidemol.Biomark.Prev.7351-35(1998)；Bell J.R.，Donovan J.L.，Wong R.，Waterhouse H.，German J.B.，Walzem R.L.，Kasim K.Am.J.Clin.Nutr.71103-108(2000)；Sherry Chow H.H.，Cai Y.，Alberts D.S.，Hakim I.，Dorr R.，Shahi F.，Crowell J.A.，Yang S.C.，Hara H.CancerEpidemol.Biomark.Prev.1053-58(2001))。引用的參考文獻(xiàn)全部引入本文作為參考。低的組織濃度大大降低了包括EGCG的多酚物質(zhì)的治療價(jià)值。一直需要尋找一種更好的含有多酚的、能有效治療腫瘤性疾病的組合物。我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，一種含有兒茶酸，抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合物可發(fā)揮有效的對(duì)抗腫瘤性疾病的抗增殖和抗轉(zhuǎn)移活性。
本發(fā)明涉及一種生物化學(xué)物質(zhì)的組合物，含有兒茶素，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸，所述物質(zhì)能有效治療人類疾病。
本發(fā)明涉及一種生物化學(xué)物質(zhì)的組合物，含有兒茶素，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸，所述物質(zhì)能有效抑制基質(zhì)-金屬蛋白酶。
本發(fā)明涉及一種治療與胞外基質(zhì)過度降解有關(guān)的腫瘤性疾病的方法，包括給予有效量的組合物，該組合物含有兒茶素化合物，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸。


圖1顯示的是EGCG對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB 231)細(xì)胞增殖的抑制作用。
圖2顯示的是EGCG，抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB 231)細(xì)胞增殖的協(xié)同抑制作用。
圖3顯示的是EGCG，抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT116)細(xì)胞增殖的協(xié)同抑制作用。
圖4顯示的是EGCG(20μg/ml)抑制乳腺癌細(xì)胞對(duì)基質(zhì)凝膠(Matrigel)侵入作用約25％?？箟难?，脯氨酸和賴氨酸的組合物抑制約65％?？箟难幔彼岷唾嚢彼崤cEGCG(20μg/ml)的組合完全抑制(約100％)基質(zhì)凝膠侵入作用。
圖5顯示的是抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與EGCG(20μg/ml)的組合協(xié)同抑制黑素瘤細(xì)胞(A2058)對(duì)基質(zhì)凝膠侵入作用至100％。
圖6以酶譜表明EGCG降低乳腺癌細(xì)胞分泌的MMP2的活性。
圖7顯示的是在基質(zhì)凝膠侵入試驗(yàn)后，黑素瘤細(xì)胞正常的形態(tài)。
圖8顯示的是抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合誘發(fā)的黑素瘤細(xì)胞形態(tài)的變化。
圖9顯示的是抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與EGCG的組合的凋亡作用。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種含有存在于綠茶提取物、紅酒中的兒茶素與其它食物成分相組合的組合物，該組合物對(duì)于腫瘤性疾病和多種其它疾病有協(xié)同對(duì)抗作用。本申請(qǐng)所涵蓋的食物成分包括但不限于本申請(qǐng)所詳細(xì)描述的那些食物成分。
兒茶素化合物可與其它抗氧化劑例如維生素E，谷胱甘肽，與其它類黃酮，與促進(jìn)劑象葉酸以及與硒等金屬聯(lián)合使用，已知這些物質(zhì)可適當(dāng)?shù)匦揎椈|(zhì)-金屬蛋白酶的活性，將使我們可降低EGCG能發(fā)揮其抗腫瘤活性的有效濃度。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種含有兒茶素的組合物，它能有效減少正常體細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種含有兒茶素的組合物，它能有效阻止癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖并減少消化胞外基質(zhì)(ECM)的多種基質(zhì)-金屬蛋白酶的合成、分泌和/或活性。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療腫瘤性疾病的方法，通過口服給予或局部給予這種含有兒茶素，抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合物。
參照下面的實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明，但不意味著對(duì)本發(fā)明的限制。
一般實(shí)驗(yàn)條件(a)細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中使用下述從ATCC獲得的癌細(xì)胞系(i) 人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB 231(ii) 人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116(iii)人黑素瘤細(xì)胞A 2058(b)細(xì)胞增殖研究為了研究?jī)翰杷睾褪澄锝M合物對(duì)人癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖的影響，根據(jù)ATCC(細(xì)胞系的提供者)指定的培養(yǎng)條件，在24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)各種人癌細(xì)胞系。細(xì)胞通常培養(yǎng)3-4天(在達(dá)到聚結(jié)之前)。用活體染料(MTT)對(duì)細(xì)胞染色，隨后測(cè)定染色溶液的OD值，從而確定培養(yǎng)孔中的細(xì)胞總數(shù)。MTT只能染色死亡的細(xì)胞，并且染料攝取量與培養(yǎng)液中死亡細(xì)胞的數(shù)目相關(guān)。通過比較處理組和對(duì)照組的OD值計(jì)算抑制百分率。
(c)基質(zhì)凝膠侵入研究用基質(zhì)凝膠(Becton Dickinson)插入物在相容的24孔板中進(jìn)行基質(zhì)凝膠侵入研究。該實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蚩煽康卦u(píng)價(jià)癌癥轉(zhuǎn)移。
用含～10％血清的培養(yǎng)基，在24孔板中接種和培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞。當(dāng)成纖維細(xì)胞聚結(jié)時(shí)，傾出含有血清的培養(yǎng)基并用不含血清的新鮮培養(yǎng)基替換。向不含血清的培養(yǎng)基中加入兒茶素化合物和食物組合物的組合，在基質(zhì)凝膠插入物的上表面接種人癌細(xì)胞。
18小時(shí)后，傾除培養(yǎng)基。保留一些培養(yǎng)基用于酶譜研究。用棉簽輕輕擦去插入物上表面的細(xì)胞，對(duì)已穿透了基質(zhì)凝膠膜并遷移到基質(zhì)凝膠下表面中的細(xì)胞用Quick Stain進(jìn)行染色并在顯微鏡下計(jì)數(shù)。
(d)酶譜研究將來自基質(zhì)凝膠侵入研究的培養(yǎng)基(25-30μl)施加于Novex酶譜凝膠(Invitrogen)。按照制造商推薦的方法進(jìn)行凝膠板的展開顯影和染色。根據(jù)其已知的分子量鑒定基質(zhì)-金屬蛋白酶(MMPs)條帶。
(e)形態(tài)學(xué)研究遷移到基質(zhì)凝膠膜下表面中的人癌細(xì)胞的形態(tài)用Quick Stain進(jìn)行染色并在顯微鏡(100X)下照相。
實(shí)施例1表沒食子兒茶精沒食子酸鹽(EGCG)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞(MDA MB231)細(xì)胞增殖的抑制作用在這些研究中，24孔板每孔接種5×104乳腺癌細(xì)胞(MDAMB231)。對(duì)照組的乳腺癌細(xì)胞用添加10％胎牛血清(FBS)的Liebovitz’s培養(yǎng)基培養(yǎng)。處理組乳腺癌細(xì)胞用添加10％胎牛血清(FBS)并加入0，10，20，50，100或200mg/ml的EGCG的Liebovitz’s培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)板在環(huán)境空氣(不補(bǔ)充CO2)中培養(yǎng)4天。
培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，傾除培養(yǎng)基，每孔中的細(xì)胞用MTT染色。洗去多余的MTT染料。將MTT染色的癌細(xì)胞溶于1ml DMSO溶液中。測(cè)定每孔溶液的光密度值(OD)?？椎腛D值與死亡細(xì)胞數(shù)成正比。先前在缺乏EGCGT的條件下培養(yǎng)的MTT染色的癌細(xì)胞的OD值作為參照，定為100。用下面的公式計(jì)算抑制百分率％抑制＝(參照OD-測(cè)試處理OD)/參照OD×100％。
20，50，100和200μg/ml的EGCG對(duì)人癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖分別產(chǎn)生3，34，66和70％的抑制(圖1)。10μg/ml的EGCG不抑制細(xì)胞增殖。
實(shí)施例2抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與各種濃度EGCG的組合對(duì)人乳腺癌細(xì)胞(MDA MB 231)細(xì)胞增殖的抑制作用這些研究的基本步驟與實(shí)施例1相同。
在這些研究中，基本培養(yǎng)基中添加了下述物質(zhì)i)抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)；ii)抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)；iii)抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)+20mg/ml EGCG；iv)抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)+50mg/ml EGCG；或v)抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)+100mg/ml EGCG抗壞血酸+脯氨酸不引起對(duì)細(xì)胞增殖的任何抑制?？箟难?脯氨酸+賴氨酸抑制細(xì)胞增殖約14％(圖2)?？箟难?脯氨酸+賴氨酸+20μg/ml EGCG的組合產(chǎn)生20％抑制(圖2)。20μg/ml EGCG單獨(dú)僅產(chǎn)生3％抑制(實(shí)施例1)。所以抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合與EGCG協(xié)同作用來抑制癌細(xì)胞增殖。
實(shí)施例3抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與各種水平的EGCG的組合對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT116)細(xì)胞增殖的抑制作用本研究中，用含10％胎牛血清的McCoy’s 5A培養(yǎng)基在5％CO2大氣條件下培養(yǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞。基本步驟和所研究的處理方式與實(shí)施例2相同。
抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與EGCG的組合協(xié)同增加對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用，從0％到20μg/ml EGCG的31％抑制，到50μg/ml EGCG的約95％抑制(圖3)。
EGCG與抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合對(duì)癌細(xì)胞侵入基質(zhì)凝膠的抑制作用實(shí)施例4分級(jí)水平的EGCG以及抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與不同水平的EGCG的組合對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA MB 231)侵入穿過基質(zhì)凝膠的抑制作用基質(zhì)凝膠侵入實(shí)驗(yàn)的基本步驟如上文所述。在本實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)插入物上接種5×104人乳腺癌細(xì)胞。Leibovitz’s培養(yǎng)基中加入多種添加物。在不補(bǔ)充CO2的環(huán)境空氣條件下，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
培養(yǎng)基中含20或50μg/ml EGCG的組合物分別抑制乳腺癌細(xì)胞侵入作用約26％和100％。而培養(yǎng)基中抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)產(chǎn)生65％抑制，抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(14μM)+賴氨酸(400μM)+20μg/ml EGCG完全抑制(100％抑制)癌細(xì)胞的侵入(圖4)。
實(shí)施例5分級(jí)水平的EGCG以及抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸與不同水平的EGCG的組合對(duì)人黑素瘤細(xì)胞(A2058)侵入穿過基質(zhì)凝膠的抑制作用基質(zhì)凝膠侵入實(shí)驗(yàn)的基本步驟如上文所述。每個(gè)插入物上接種5×104人黑素瘤細(xì)胞(A2058)。DMEM培養(yǎng)基中加入多種添加物。在5％CO2空氣中，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)的組合僅產(chǎn)生13％抑制，而抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)+20μg/ml EGCG完全阻止黑素瘤細(xì)胞侵入穿過基質(zhì)凝膠(圖5)。
酶譜研究實(shí)施例6分級(jí)水平的EGCG對(duì)人乳腺癌細(xì)胞(MDA MB 231)產(chǎn)生MMP2的影響將來自基質(zhì)凝膠侵入實(shí)驗(yàn)中各處理組的培養(yǎng)基(實(shí)施例4)施加于Novex酶譜凝膠(Invitrogen)。按照制造商推薦的方法進(jìn)行凝膠板的展開顯影和染色。根據(jù)其已知的分子量鑒定基質(zhì)-金屬蛋白酶(MMPs)條帶(圖6)。
來自基質(zhì)凝膠侵入實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基的酶譜表明培養(yǎng)基中20μg/mlEGCG減少M(fèi)MP2的產(chǎn)生，并且完全抑制MMP9的產(chǎn)生(圖6)。當(dāng)EGCG濃度為50μg/ml和100μg/ml時(shí)，MMP2和MMP9的活性都被完全抑制(圖6)。
細(xì)胞形態(tài)實(shí)施例7EGCG和抗壞血酸，脯氨酸和賴氨酸的組合對(duì)人黑素瘤細(xì)胞(A2058)細(xì)胞形態(tài)的影響遷移穿過基質(zhì)凝膠的癌細(xì)胞在基本培養(yǎng)基中的顯微照片如圖7所示。培養(yǎng)基中包含抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)的組合改變了這些細(xì)胞的形態(tài)(圖8)。細(xì)胞膨脹并且核顯著擴(kuò)大很明顯。培養(yǎng)基中添加20μg/ml EGCG到抗壞血酸(100μM)+脯氨酸(140μM)+賴氨酸(400μM)的組合導(dǎo)致廣泛的凋亡變化(圖9)。
實(shí)施例1-7所描述的這些發(fā)現(xiàn)說明，當(dāng)EGCG與抗壞血酸+脯氨酸+賴氨酸的組合一起使用時(shí)，EGCG顯示出很強(qiáng)的協(xié)同效應(yīng)。所以，這些研究顯示了EGCG與抗壞血酸+脯氨酸+賴氨酸的組合的驚人協(xié)同效應(yīng)使得可能以相當(dāng)?shù)退降钠浣M織濃度充分利用EGCG的抗增殖活性和抗轉(zhuǎn)移活性。
因此，這些發(fā)現(xiàn)十分重要，因?yàn)樗鼈兛墒箖翰杷氐挠行礁咏谠诮M織中所能達(dá)到的水平。
已提出癌細(xì)胞的增殖以及癌細(xì)胞中酶的上調(diào)作用是由于活性氧(ROS)濃度增加引起的。在這種情況下，使用各種生物抗氧化劑例如維生素E，類胡蘿卜素，與其它促進(jìn)劑象泛醌醇，生物類黃酮，硫辛酸，肉堿的組合將提供一種治療上述疾病的更加有效的協(xié)同混合物。
本發(fā)明提供了一種驚人發(fā)現(xiàn)，含有兒茶素化合物的組合會(huì)發(fā)揮協(xié)同活性，因此在較低的組織兒茶素水平就可以獲得非常有效的抗癌活性。上述發(fā)現(xiàn)使聯(lián)合應(yīng)用有效水平的不同成分的組合中的各種成分用于預(yù)防和治療腫瘤性疾病成為可能。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知道脯氨酸和賴氨酸并不僅限于脯氨酸和賴氨酸。本發(fā)明的范圍旨在涵蓋賴氨酸衍生物及其前體，脯氨酸衍生物及其前體。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知道抗氧化劑抗壞血酸應(yīng)包括抗壞血酸的衍生物及前體。
其它生物抗氧化劑包括維生素E及相關(guān)化合物，反式視黃酸和相關(guān)化合物，類胡蘿卜素和相關(guān)化合物，谷胱甘肽和相關(guān)化合物，泛醌醇和相關(guān)化合物，葉酸和相關(guān)化合物，生物類黃酮和相關(guān)化合物以及硒的化合物。
臨床應(yīng)用本發(fā)明集中于兒茶素聯(lián)合抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸的預(yù)防和治療用途。聯(lián)合使用兒茶素及抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸增加兒茶素化合物治療人類疾病的效力。
人類疾病包括但不限于腫瘤性疾病，炎性病癥，感染性疾病，心血管疾病以及其他涉及胞外基質(zhì)降解的病理情況，。這些情況包括異常的血管生成，病理性內(nèi)滲，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈粥樣硬化，擴(kuò)張性心肌病，肺氣腫和其它慢性疾病。
本發(fā)明提供了一種治療和預(yù)防涉及胞外基質(zhì)降解的人類疾病的方法，通過給予有效量的本申請(qǐng)所述的組合物，這些疾病諸如i)腫瘤性疾病；ii)炎性病癥(包括但不限于過敏，肺氣腫，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，牙周炎，神經(jīng)性皮炎)；iii)感染性疾病(包括但不限于病毒感染例如普通感冒，流行性感冒，肝炎，皰疹，HIV；細(xì)菌感染例如肺炎，結(jié)核，腦膜炎，淋病，梅毒和/或真菌疾?。籭v)心血管疾病(包括但不限于動(dòng)脈粥樣硬化，心肌病，血管成形術(shù)后的再狹窄)；v)變性疾病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎)；vi)神經(jīng)系統(tǒng)疾病(包括但不限于阿爾茨海默病，多發(fā)性硬化癥)；和vii)自身免疫性疾病(包括但不限于關(guān)節(jié)炎)。
權(quán)利要求
1.生化物質(zhì)的組合物，包含兒茶素化合物，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸，其有效抑制基質(zhì)-金屬蛋白酶。
2.權(quán)利要求1所述的組合物，其中兒茶素化合物選自表兒茶酸，表沒食子兒茶精，表兒茶酸沒食子酸鹽和表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
3.權(quán)利要求1所述的組合物，其中兒茶素化合物是表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
4.權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗氧化劑選自抗壞血酸，維生素E，生育三烯酚類，類胡蘿卜素，谷胱甘肽，α-硫辛酸，泛醌醇，生物類黃酮和肉堿。
5.權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗氧化劑是抗壞血酸。
6.權(quán)利要求5所述的組合物，其中抗壞血酸選自抗壞血酸前體，抗壞血酸代謝物和抗壞血酸鹽。
7.權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗氧化劑還包括葉酸。
8.權(quán)利要求7所述的組合物，其中葉酸是葉酸鹽。
9.權(quán)利要求1所述的組合物，其中該組合物還包含硒。
10.權(quán)利要求9所述的組合物，其中硒選自selinite和甲基selinate。
11.權(quán)利要求1所述的組合物，其中基質(zhì)-金屬蛋白酶選自基質(zhì)-金屬蛋白酶1，基質(zhì)-金屬蛋白酶2，基質(zhì)-金屬蛋白酶3，基質(zhì)-金屬蛋白酶4，基質(zhì)-金屬蛋白酶5，基質(zhì)-金屬蛋白酶6，基質(zhì)-金屬蛋白酶7，基質(zhì)-金屬蛋白酶8，基質(zhì)-金屬蛋白酶9，基質(zhì)-金屬蛋白酶10，基質(zhì)-金屬蛋白酶11，基質(zhì)-金屬蛋白酶12和基質(zhì)-金屬蛋白酶14。
12.權(quán)利要求1所述的組合物，其中基質(zhì)-金屬蛋白酶是基質(zhì)-金屬蛋白酶2。
13.權(quán)利要求1所述的組合物，其中基質(zhì)-金屬蛋白酶是基質(zhì)-金屬蛋白酶9。
14.一種治療與基質(zhì)-金屬蛋白酶活性升高有關(guān)的人類疾病的方法，通過給予有需要的患者一種生化物質(zhì)的組合物，所述組合物含有兒茶素化合物，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸，所述物質(zhì)有效抑制基質(zhì)-金屬蛋白酶。
15.權(quán)利要求14所述的方法，其中兒茶素化合物選自表兒茶酸，表沒食子兒茶精，表兒茶酸沒食子酸鹽和表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
16.權(quán)利要求14所述的方法，其中兒茶素化合物是表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
17.權(quán)利要求14所述的方法，其中抗氧化劑選自抗壞血酸，維生素E，生育三烯酚類，類胡蘿卜素，谷胱甘肽，α-硫辛酸，泛醌醇，生物類黃酮和肉堿。
18.權(quán)利要求14所述的方法，其中抗氧化劑是抗壞血酸。
19.權(quán)利要求14所述的方法，其中抗壞血酸還包括選自抗壞血酸前體，抗壞血酸代謝物和抗壞血酸鹽的抗壞血酸。
20.權(quán)利要求14所述的方法，其中抗氧化劑還包括葉酸。
21.權(quán)利要求20所述的方法，其中葉酸是葉酸鹽。
22.權(quán)利要求14所述的方法，其中組合物還包含硒。
23.權(quán)利要求14所述的方法，其中硒選自selinite和甲基selinate。
24.權(quán)利要求14所述的方法，其中所述人類疾病選自腫瘤性疾病，炎性病癥，感染性疾病，心血管疾病，變性疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病和自身免疫性疾病。
25.一種治療與胞外基質(zhì)過度降解相關(guān)的腫瘤性疾病的方法，包括給予有效量的含有兒茶素化合物，抗氧化劑，脯氨酸和賴氨酸的組合物。
26.權(quán)利要求25所述的方法，其中兒茶素選自表兒茶酸，表沒食子兒茶精，表兒茶酸沒食子酸鹽和表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
27.權(quán)利要求25所述的方法，其中兒茶素是表沒食子兒茶精沒食子酸鹽。
28.權(quán)利要求25所述的方法，其中抗氧化劑選自抗壞血酸，維生素E，生育三烯酚類，類胡蘿卜素，谷胱甘肽，α-硫辛酸，泛醌醇，生物類黃酮和肉堿。
29.權(quán)利要求25所述的方法，其中抗氧化劑是抗壞血酸。
30.權(quán)利要求25所述的方法，其中抗壞血酸還包括抗壞血酸前體，抗壞血酸代謝物和抗壞血酸鹽。
31.權(quán)利要求25所述的方法，其中抗氧化劑還包括葉酸。
32.權(quán)利要求31所述的方法，其中葉酸是葉酸鹽。
33.權(quán)利要求25所述的方法，其中組合物還包含硒。
34.權(quán)利要求33所述的方法，其中硒選自selinite和甲基selinate。
35.如權(quán)利要求1所述的藥物制劑。
36.如權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中該藥物制劑用于口服，非胃腸道給藥或局部應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有兒茶素化合物，抗壞血酸，賴氨酸和脯氨酸的組合物。本發(fā)明還涉及使用含有兒茶素化合物，抗壞血酸，賴氨酸和脯氨酸的組合物治療腫瘤性疾病的方法。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1612731SQ02826954
公開日2005年5月4日 申請(qǐng)日期2002年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月8日
發(fā)明者馬蒂亞斯·拉特, 施里郎·內(nèi)克, 瓦迪姆·伊萬諾夫, 沃希德·魯姆, 亞歷山德拉·尼德茲維克 申請(qǐng)人:馬蒂亞斯·拉特