專利名稱：一種含有桑葉總堿浸膏的制劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種含有桑葉總堿浸膏，含有它的制劑及其制備方法，該制劑具有明顯的降血糖及改善糖耐量作用。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏經(jīng)藥理研究證明具有明顯的降血糖及改善糖耐量作用。
本發(fā)明的另一目的是提供本發(fā)明所述的高含量桑葉總堿浸膏的制備方法。
高含量桑葉總堿的制備方法未見文獻報道，本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏的制備方法中一些步驟是在研究總堿化學成分時運用過的，本發(fā)明除了運用這些步驟外還采用一些重要的步驟來提高浸膏中總堿的含量，具體的步驟是將桑葉粗粉用水或含水親水性溶劑提取，經(jīng)濃縮、絮凝、柱色譜分離精制、干燥后制得高含量桑葉總堿浸膏，其中絮凝步驟具有重要作用。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏是通過以下方法制備的將桑葉(50kg)粉成粗粉，過20目篩，用500L的水或含水親水性溶劑加熱回流提取，或冷浸滲漉法提取，熱提2-3次，每次1-3小時，或冷提1次，48-96小時，然后提取液減壓濃縮為比重1.12-1.20，加入原生藥量的1-5倍量水溶解，靜置，調(diào)節(jié)pH3～5，加入絮凝劑殼聚糖4L，靜置12h，上清夜通過強酸型離子交換樹脂為載體的柱色譜，用水洗脫至無色，倒出樹脂，加入堿溶液悶置4h后，將樹脂用親水性溶劑甲醇回流提取2次，每次2h，收集提取液，于低于60C的條件下減壓濃縮、干燥后得高含量桑葉總堿浸膏182g。所述制備方法可用以下步驟描述a.將干桑葉粉碎成粗粉，用水或含水親水性溶劑提取，b.提取液濃縮，加水溶解，靜置，調(diào)節(jié)pH到3～5，加入絮凝劑，靜置，c.上清液通過離子交換樹脂為載體的柱色譜，用水洗脫至無色，倒出樹脂，加入堿溶液悶置4h后，將樹脂用親水性溶劑回流提取(2h×2)，收集提取液，d.減壓濃縮、得浸膏。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏的制備方法中所述的親水性溶劑為脂肪族低級醇或低級酮。
其中所述的絮凝劑為明膠、海藻酸鈉、瓊脂、殼聚糖及其衍生物，ZTC1+1等，優(yōu)選殼聚糖。
其中所述的堿水溶液中的堿為揮發(fā)性的堿，可以為二乙氨、三乙氨、吡啶等，優(yōu)選為氨水，水和堿的混合比例為水∶氨＝99-1∶1-99(體積比)的任意比例。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏的制備方法操作簡便，無苛刻的設備要求，宜于規(guī)模型工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏，在制備成藥劑時可加入藥物可接受的載體，所述藥物可接受的載體可以是甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的高含量桑葉總堿浸膏可通過常規(guī)方法制成中藥制劑，該制劑可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑。本發(fā)明的制劑，優(yōu)選的是口服劑型，如膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等，優(yōu)選的是膠囊劑。
本發(fā)明的制劑每劑中可含有桑葉總堿浸膏10-600mg，所述每劑指，每一制劑單位，或每次服用劑量，若為每一制劑單位可指每粒膠囊，或每片、每袋、每丸、每一安瓶等。
在使用時根據(jù)病人的情況確定用法用量，如可每日服三次，每次1-20劑，如1-20粒或片。
對本發(fā)明的浸膏進行了以下藥效學實驗證明其有益效果。一、對正常小鼠血糖的影響試驗材料1、藥物桑葉總堿，用實施例1方法制備，試驗前用蒸餾水配制成所需要的濃度。
2、動物NIH小鼠，18-22g，♀、♂各半。
3、血糖測定試劑盒，由四川邁克生物技術有限公司生產(chǎn)，批號20020306。
試驗方法與結果1、單次給藥對血糖的影響小鼠，30只，空腹12h后，按動物性別均衡隨機分為3組，每組10只，♀、♂各半，分別灌胃給予下列藥物(1)正常對照組(蒸餾水)；(2)桑葉總堿低劑量組(40mg/kg)；(3)桑葉總堿高劑量組(100mg/kg)。給藥體積按20ml/kg，給藥1h后動物眼球取血，用葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖值。結果見表1。
表1桑葉總堿(單次給藥)對正常小鼠血糖值的影響(n＝10，X±SD)劑量 血糖值組別(mg/kg)(mmol/L)正常對照組 - 1.797±0.566桑葉總堿40 0.655±0.536**桑葉總堿100 0.929±0.904*
與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01(t檢驗)2、多次給藥對血糖的影響小鼠，20只，♀、♂各半，空腹12h后，測定血糖，根據(jù)血糖值及動物性別均衡隨機分為2組，分別灌胃給予下列藥物(1)正常對照組(蒸餾水)；(2)桑葉總堿(80mg/kg)。連續(xù)給藥7天，給藥體積按20ml/kg，第7天給藥前空腹12h，給藥后1h動物取血，用怡成血糖測試儀測定動物血糖值。結果見表2。
表2桑葉總堿(多次給藥)對正常小鼠血糖值的影響(n＝10，X±SD)劑量 藥前血糖值 藥后血糖值變化率組別(mg/kg) (mmol/L)(mmol/L) (％)正常對照組- 4.74±0.89 4.95±0.85 +6.9±22.4桑葉總堿 804.67±1.05 3.56±1.17** -22.9±21.4與正常對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01(t檢驗)。
結論1、單次給藥，桑葉總堿(40，100mg/kg)，具有明顯的降低血糖的作用。
2、多次給藥，桑葉總堿(80mg/kg)，具有降低血糖的作用。二、對自發(fā)性高血糖小鼠血糖的影響試驗材料1、藥物桑葉總堿，用實施例1方法制備。試驗前用蒸餾水配制成所需要的濃度。
2、動物NOD小鼠，體重20-30g，24只，♀、♂各半，由北京大學醫(yī)學部實驗動物中心提供，許可證編號SCXK11-00-0004。
3、測定儀器怡成血糖測試儀及測定試紙，由北京怡成生物電子技術有限公司研制。
試驗方法與結果小鼠，24只，空腹12h后，測定血糖值，根據(jù)血糖水平和性別，將動物均衡隨機分為3組，每組8只，♀、♂各半，分別灌胃給予下列藥物(1)對照組(蒸餾水)，(2)桑葉總堿低劑量組(50mg/kg)，(3)桑葉總堿高劑量組(150mg/kg)，給藥體積按20ml/kg，給藥1h后，動物取血，用怡成血糖測試儀測定空腹血糖值。結果見表3。
表3桑葉總堿對自發(fā)性高血糖小鼠血糖的影響(n＝8，X±SD)劑量 藥前血糖 藥后血糖 變化率組別(mg/kg)(mmol/L) (mmol/L)(％)對照組- 8.61±1.51 8.99±1.42 +5.0±9.5桑葉總堿 50 8.48±1.38 7.83±1.41 -7.1±12.5桑葉總堿 150 8.79±1.76 8.20±1.20 -5.6±8.3藥物組與對照組比較，差異無顯著性意義P＞0.05(t檢驗)。
結論桑葉總堿，對自發(fā)性高血糖小鼠血糖無明顯影響。三、對鏈脲霉素誘發(fā)小鼠高血糖的影響試驗材料1、藥物桑葉總堿，用實施例1方法制備，試驗前用蒸餾水配制成所需要的濃度。
2、動物NIH小鼠，體重18-22g，♀、♂各半。
3、主要試劑鏈脲霉素，美國Sigma公司產(chǎn)品。造模前用檸檬酸緩沖液(PH＝4.0)，于低溫下配制。
4、儀器怡成血糖測試儀及測定試紙，由北京怡成生物電子技術有限公司研制。
試驗方法與結果小鼠，40只，隨機分42組，每組10只，♀、♂各半，(1)對照組(蒸餾水)；(2)高血糖模型組(蒸餾水)；(3)桑葉總堿低劑量組(50mg/kg)；(4)桑葉總堿高劑量組(150mg/kg)。除正常對照組外，其余各組腹腔注射鏈脲霉素(200mg/kg)，72h后測血糖(空腹12h)，然后將(2)-(4)組，根據(jù)血糖值均衡調(diào)整組別。同時按以上劑量灌胃給予試驗藥物，連續(xù)7天，第7天給藥前空腹12h，于末次給藥后1h測定血糖。結果見表4。
表4桑葉總堿對鏈脲霉素誘發(fā)小鼠高血糖的影響(n＝10，X±SD)
劑量 藥前血糖 藥后血糖變化率組別(mg/kg) (mmol/L) (mmol/L) (％)正常對照組-4.73±1.01 4.86±1.02 +3.1±7.8高血糖模型組 -9.34±2.23##9.49±2.04##+2.1±5.8桑葉總堿 50 9.60±2.68 7.59±2.41 -21.3±5.5桑葉總堿 150 9.76±2.60 7.39±1.80*-23.8±7.8與正常對照組比較##P＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01(t檢驗)。
結論小鼠腹腔注射鏈脲霉素，可使血糖升高，而給予桑葉總堿后，具有降血糖的作用。其中劑量為(150mg/kg)與模型組比較，差異具有顯著性意義。四、對小鼠口服蔗糖的糖耐量試驗試驗材料1、藥物桑葉總堿，用實施例1方法制備，試驗前用蒸餾水配制成所需要的濃度。
2、動物NIH小鼠，18-22g，♀、♂各半。
3、主要試劑蔗糖，分析純，廣州化學試劑廠生產(chǎn)，批號960202。
4、儀器怡成血糖測試儀及測定試紙，由北京怡成生物電子技術有限公司研制。
試驗方法與結果小鼠，20只，隨機分為2組，每組10只，♀、♂各半，分別灌胃給予下列藥物(1)對照組(蒸餾水)；(2)桑葉總堿組(80mg/kg)，給藥體積為20ml/kg，動物空腹12h后，測定血糖，然后按以上劑量給藥，且藥物中含蔗糖0.25g/ml。用怡成血糖測試儀測定給蔗糖后0.5h，1h，2h血糖值。試驗結果見表5。
表5桑葉總堿對糖耐量試驗結果(n＝10，X±SD)劑量 血糖值(mmol/L)變化率(％)組別(mg/kg) 0h 0.5h1h2h 0.5h 1h 2h正常對照 4.66± 7.72± 8.10± 5.08±69.0±78.0± 11.3±-組 1.01 1.05 0.97 0.79 18.4 23.0 16.7
4.50±6.73± 7.18±4.68±56.2±69.2±桑葉總堿80 5.6±9.31.18 1.01*0.75*1.08 31.7 43.1與正常對照組比較*P＜0.05(t檢驗)。
結論桑葉總堿，劑量為80mg/kg能抑制小鼠口服蔗糖后血糖值的升高。
口服液[處方]桑葉總堿浸膏100g制成口服液1000支[制法]將桑葉總堿浸膏100g，溶解于水，加入適量矯味劑，滅菌，灌裝即可。
權利要求
1.一種桑葉總堿浸膏，其特征在于，含有藥物有效成分脫氧野尻霉素，
2.權利要求1的浸膏，其特征在于，在該浸膏中桑葉總堿的含量不少于70％，脫氧野尻霉素的含量不少于50％。
3.權利要求2的浸膏的制備方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟，a.將干桑葉粉碎成粗粉，用水或含水親水性溶劑提取，b.提取液濃縮，加水溶解，靜置，調(diào)節(jié)pH到3～5，加入絮凝劑，靜置，c.上清液通過離子交換樹脂為載體的柱色譜，用水洗脫至無色，倒出樹脂，加入堿溶液悶置4h后，將樹脂用親水性溶劑回流提取(2h×2)，收集提取液，d.減壓濃縮、得浸膏。
4.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的親水性溶劑為脂肪族低級醇或低級酮。
5.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的絮凝劑選自明膠、海藻酸鈉、瓊脂、甲殼素及其衍生物，ZTCl+1、殼聚糖。
6.根據(jù)權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的堿溶液中的堿為揮發(fā)性的堿，選自二乙氨、三乙氨、吡啶，氨水，水和堿的混合比例為水∶氨＝99-1∶1-99(體積比)的任意比例。
7.用權利要求2的浸膏制備的藥物制劑。
8.權利要求7的藥物制劑是任何可藥用的劑型。
9.權利要求8的藥物制劑是片劑、膠囊劑、口服液、口含片、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、滴劑、滴丸劑。
10.用權利要求3的浸膏制備一種治療糖尿病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有桑葉總堿浸膏的制劑及其制備方法，該浸膏中的桑葉總堿含量不少于70％，脫氧野尻霉素的含量不少于50％，該制劑具有明顯的降血糖及改善糖耐量作用。
文檔編號A61P3/00GK1430964SQ03101988
公開日2003年7月23日 申請日期2003年1月30日 優(yōu)先權日2003年1月30日
發(fā)明者洪春力 申請人:洪春力