專利名稱：鹽酸左旋咪唑搽劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，更具體地說，涉及鹽酸左旋咪唑搽劑。
然而，現(xiàn)有的鹽酸左旋咪唑制劑產品只有口服片劑一種，而口服的副反應率一般為30％左右，主要是惡心、嘔吐、胃腸不適、腹痛等胃腸反應及頭暈、頭痛等。因而不能堅持長期用藥，從而影響療效。有人曾試圖將鹽酸左旋咪唑制成針劑，但在動物實驗階段就連續(xù)多次發(fā)生導致動物(狗)死亡的案例。因此，人們迫切需要一種既安全，又沒有副反應而且使用方便的鹽酸左旋咪唑制劑產品。
本發(fā)明人為了達到上述目的而進行了深入研究，結果發(fā)現(xiàn)，只要將鹽酸左旋咪唑溶解于由異丙醇、丙二醇、氮酮和蒸餾水按一定比例組成的混合溶劑中，就可將所獲的鹽酸左旋咪唑溶液作為通過皮膚給藥的搽劑使用，并且這種鹽酸左旋咪唑搽劑能夠保證安全、見效快、沒有副作用、使用方便而且價格低廉，由于這一研究成果，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的技術方案如下(1)一種鹽酸左旋咪唑搽劑，其特征在于，該搽劑由鹽酸左旋咪唑按20-200mg/ml的最終濃度溶解于由異丙醇10-40體積％、丙二醇5-30體積％、氮酮0.5-5體積％、其余不足100體積％的部分為純水組成的混合溶劑中而構成。
(2)如上述第(1)項所述的鹽酸左旋咪唑搽劑，其特征在于，該搽劑由鹽酸左旋咪唑按50-150mg/ml的最終濃度溶解于由異丙醇20-30體積％、丙二醇10-20體積％、氮酮1-3體積％、其余不足100體積％的部分為蒸餾水組成的混合溶劑中而構成。
下面詳細地說明本發(fā)明的技術方案。上述技術方案(1)中所說的最終濃度是指在配制成鹽酸左旋咪唑搽劑成品時的濃度。例如，如果最終成品為1ml，則鹽酸左旋咪唑的用量應在20-200mg的范圍內。例如，對于成年人來說，其正常劑量為每次500mg，如果鹽酸左旋咪唑的濃度低于20mg/ml，則每次需涂搽的藥液量就大于25ml，這樣，患者在涂搽25ml以上的藥液時就會感到費時費事。另外，由于溶劑的增加而導致成本的增加，在經(jīng)濟上不利。故將鹽酸左旋咪唑濃度的下限值定為20mg/ml。另一方面，如果鹽酸左旋咪唑的濃度大于200mg/ml，則每次需涂搽的藥液量就小于2.5ml，這樣所能搽到的皮膚的面積就過小，從而影響皮膚對有效成分的吸收率。因此將鹽酸左旋咪唑濃度的上限值定為200mg/ml。
氮酮(Azone)又名月桂氮酮(Laurocapramum)，是一種高效、無毒的透皮吸收促進劑，能改變皮膚角質層的結構，促進藥物吸收。氮酮的含量如果小于0.5體積％，其促進藥物透皮吸收的作用就過小。另外，氮酮的含量如果大于5體積％，則可能產生一定的刺激性，因此將氮酮的含量范圍選定為0.5-5體積％。
異丙醇主要起到促進鹽酸左旋咪唑透皮吸收的作用。如果異丙醇的含量低于10體積％，則其所起的作用過小。另一方面，如果其含量大于40體積％，則在經(jīng)濟上不利，因此將其含量范圍選定為10-40體積％。
丙二醇具有兩個羥基，故其沸點(188.2℃)明顯高于異丙醇(沸點82.5℃)，其揮發(fā)速度也比異丙醇慢，因此它可延長氮酮和異丙醇在皮膚角質層的滯留時間，延長其對藥物的促滲作用。同時，丙二醇還有保護皮膚的作用，故被廣泛地用于化妝品中。如果丙二醇的含量小于5體積％，則其作用過小。相反，如果其含量大于30體積％，則會導致成本增加，同時還會導致溶劑的揮發(fā)過慢，從而使患者感到使用不方便。故將丙二醇的含量范圍選定為5-30體積％。
本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑的適應癥基本上與鹽酸左旋咪唑片劑相同，但卻沒有象服用片劑時所出現(xiàn)的各種副反應。本品通過皮膚吸收即可達到全身免疫治療的目的。而且本品使用方便，用藥時只需開啟藥瓶封口，輕輕擠壓藥液，邊滴邊涂于雙腿或前臂等部位，成人按標準用量為每次5ml(內含鹽酸左旋咪唑500mg)，每周只需間隔用藥2次即可，兒童最佳劑量為10毫克/公斤體重。與此相對照，鹽酸左旋咪唑片劑必須按每天口服三次連續(xù)服藥。而且鹽酸左旋咪唑的口感非常苦，常常引起患者對服藥的反感，尤其是兒童甚至少年因感到該藥物太苦而拒絕服藥。另外，由于在通過口服給藥時，鹽酸左旋咪唑必須通過食道、胃腸道、肝、脾、腎等器官，因此常常引起對這些器官的副反應。而本發(fā)明的搽劑就不存在這些缺點。
由此上的對比可以看出，與相同的領域的現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑具有下述有益效果1.沒有任何副反應；2.不會引起患者象通過口服時所感到的痛苦；3.用藥次數(shù)要比口服藥少得多；4.使用方便；5.用量省，可以減少患者的經(jīng)濟負擔。
具體實施例方式
下面舉出實驗例和應用例來具體地說明本發(fā)明。
實驗例1 透皮實驗本實驗例的目的是要確定能使作為有效成分的鹽酸左旋咪唑更快地透過皮膚的化學成分配比。本實驗采用鼠皮代替人的皮膚進行試驗。
(1) 用于篩選試驗的處方組成示于表1中。
表1用于篩選試驗的四種處方組成

下面對表中各成分的比例進行說明。由于最后用蒸餾水補足至100ml，因此，對于作為液體的異丙醇、丙二醇和氮酮，其毫升數(shù)即為它的體積％數(shù)，而對于作為固體的鹽酸左旋咪唑，由于在最后成品100ml中的總量為10g，故換算成毫升體積中的含量時為100mg/ml。由此看出，這些成分的配合比例皆落入上述本發(fā)明技術方案1所限定的范圍內。
下面說明該搽劑的配制方法。即，按表1中的比例將鹽酸左旋咪唑溶解于適量水中，獲得鹽酸左旋咪唑水溶液。另外，將氮酮溶解于丙二醇和異丙醇中，再將上述兩溶液混合均勻后，過濾，向濾液中加水補足至100ml，即獲得了表1中示出的四種處方的試驗用鹽酸左旋咪唑搽劑。
(2)左旋咪唑的定量分析按照《中國藥典》1995年版二部附錄第17頁記載的分光光度法，用751紫外線分光光度計在215±1nm波長處測定溶液的吸收度來定量分析鹽酸左旋咪唑的濃度。
(3)體鼠皮的制備將小白鼠背部皮毛用脫毛劑脫凈后處死，取背部無毛皮剝離皮下脂肪，用生理鹽水洗凈，再用消毒的生理鹽水紗布包住，凡士林紗布保溫，在4℃下保存?zhèn)溆谩?br> (4)透皮實驗實驗裝置用改進的Franz擴散室，由上、下兩個杯狀玻璃組件對合而成。將離體鼠皮夾在中間以形成上、下兩室(皮膚角質朝向供應室)，上室為供給室，下室為接受室；在接受室一側連接有一個上傾管道，供采樣、補充pH緩沖液或排除氣泡用。接受室外有恒溫水夾套層，實驗時通入37℃的恒溫水以控制接受液的溫度。在接受室底部設置磁棒攪拌。裝置上下兩部分用橡皮條拉緊，向供應室中加入預熱至37℃的供給液(即樣品)，接收室中加入預熱至37℃的pH7.3的PBS液；調整電磁攪拌速度。在預定時間從接收室取樣，每次1ml，取樣后立即補充1ml新鮮PBS液以保持體積。將不同時間取出的樣品移入10ml的容量瓶中，用水稀釋至刻度搖勻。用濾紙過濾，初濾液棄去，取續(xù)濾液作為供測樣品。然后按照上述(2)中所述的分光光度法，將供測樣品在751紫外分光光度計上215±1nm處，以水為空白，測定吸收度(A1)；每一處方用6個小鼠皮，共做6次，每一個處方基質用上述相同方法。釋放池內不含鹽酸左旋咪唑搽劑的該處方基質(溶媒液)用3個小鼠皮，共做3次，分別測出其吸收度(A2)，作為空白對照。然后根據(jù)A1-A2＝AS并結合標準曲線計算出各時間總的接收液濃度和累積釋藥百分率。下面將每次實驗獲得的鹽酸左旋咪唑累積釋放率(％)及其標準偏差示于表2中。
表2 四個處方中鹽酸左旋咪唑累積釋放率(％)(n＝6)

從表2的結果可以看出，處方2(見表1)可以獲得最大的透皮釋放率。并且處方2在配制時顯現(xiàn)的透明度最好，涂用后油膩感適中，較易為患者接受。所以在后續(xù)的實驗中皆采用處方2進行。
下面舉出動物實驗例來說明本發(fā)明的效果。
動物實驗例1本實驗例是研究本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑對溶血素形成的影響。
使用雄性小鼠40只，小鼠體重為20±2g。隨機分為5組，每組8只。每鼠通過腹腔注射3∶5稀釋的綿羊紅細胞0.2ml，以引起小鼠的溶血反應。于致敏當天開始通過皮膚給藥，也就是分別在小鼠背脫毛皮膚(2×2cm)上涂布濃度為100mg/ml(表1中的處方2，下同)的鹽酸左旋咪唑搽劑0.625、1.25、2.5ml/kg，以溶媒10ml/kg作為對照，另外以銀耳多糖10ml/kg(1ml含銀耳多糖20mg)口服作為正性對照。每天給藥一次，共6天。于末次給藥后的次日，摘除眼球取血，分離血清，用生理鹽水1∶200稀釋，并于56℃水浴中放置30分鐘以滅活補體，取此血清1ml置冰浴中，加入10％的綿羊紅細胞0.5ml及1∶10的豚鼠血清1ml。然后以200rpm的轉速離心10分鐘，取上清夜1ml，向其中加入都氏試劑3ml，混勻后放置10分鐘，用722型光柵分光光度計(540nm)進行比色，按徐學瑛等(徐學瑛等，“一種改進的體液免疫測定方法—溶血素測定法”，藥學學報，1997，14(7)443)的方法計算其半數(shù)溶血值(HC50)，所獲結果示于表3中。
表3 本發(fā)明搽劑*對小鼠溶血素形成的影響(每組動物數(shù)8只)

注*本發(fā)明搽劑指表1中的處方2，其中的鹽酸左旋咪唑含量為100mg/ml，下同。
從表3可以看出，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑0.625-2.5ml/kg(62.5-250mg/kg)能明顯增加小鼠溶血素的形成，升高CH50值，特別是當鹽酸左旋咪唑的劑量為250mg/kg時，其效果要比作為正性對照的銀耳多糖好得多。該結果表明，鹽酸左旋咪唑搽劑局部皮膚給藥具有機體體液免疫功能的作用。
動物實驗例2本實驗例是研究本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑對小鼠網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)(RES)吞噬功能的影響。
使用ICR小鼠50只，雌雄各半，體重20±2g，隨機分為5組，每組10只。分別在背部脫毛皮膚(2×2cm)上涂布鹽酸左旋咪唑搽劑0.65、1.25、2.5ml/kg，溶媒10ml/kg作為對照，以銀耳多糖10ml/kg(1ml含銀耳多糖20ml)口服作為正性對照。每天給藥1次，共4天。于末次給藥后1小時，靜脈注射膠體碳懸液10ml/kg(膠體碳懸液的濃度為16mg/ml)，然后每隔3分鐘用吸管(預先用肝素濕潤)從眼眶靜脈叢取血25ml。連續(xù)5次。然后將小鼠脫頸椎處死，分別稱取肝脾重量。將血液加入盛有1ml蒸餾水的試管內，搖勻，用722型光柵分光光度計(600nm)測定OD值，計算吞噬指數(shù)(K)及吞噬系數(shù)(α)值，(徐叔云等主編《藥理實驗方法學》，小鼠碳粒廓清實驗法，第一版；1982934)。結果示于表4中。
表4 本發(fā)明搽劑*對小鼠網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)吞噬功能的影響(每組動物數(shù)10只)

注*同表3從表4可以看出，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑0.625-2.5ml/kg(62.5-250mg/kg)能夠明顯提高小鼠靜注碳粒的廓清能力，吞噬指數(shù)(K)值和吞噬系數(shù)(α)顯著增高。特別是當鹽酸左旋咪唑的劑量為250mg/kg時，其效果明顯好于銀耳多糖。這一事實表明，鹽酸左旋咪唑搽劑局部皮膚給藥對小鼠網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)功能具有明顯的增強作用。
動物實驗例3本實驗例是研究本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑對小鼠免疫器官重量的影響。
使用雄性ICR小鼠50只，小鼠體重為13±1g，隨機分為5組，每組10只。分別在小鼠背部脫毛皮膚(2×2cm)上涂布濃度為100mg/ml(表1中的處方2)的鹽酸左旋咪唑搽劑0.625、1.25、2.5ml/kg，以溶媒10ml/kg作為對照，另外以銀耳多糖10ml/kg(1ml含銀耳多糖20mg)口服作為正性對照。每天給藥一次，共6天。于末次給藥后次日，眼眶放血處死，解剖取胸腺和脾臟，用精密扭力天平稱重，并比較各組差異。所獲結果示于表5中。
表5 本發(fā)明搽劑*對小鼠免疫器官的影響(每組動物數(shù)10只)

注*同表3從表5可以看出，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑0.625-2.5ml/kg(62.5-250mg/kg)經(jīng)皮膚給藥后能夠使小鼠胸腺和脾臟重量增加，特別是當鹽酸左旋咪唑劑量為250mg/kg時，其效果要比銀耳多糖好得多。該結果表明，鹽酸左旋咪唑搽劑局部皮膚給藥對非特異性免疫功能具有明顯的增強作用。
動物實驗例4本實驗例是研究本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑對豚鼠實驗性過敏性腦脊髓膜炎的防治作用。
使用雄性白色豚鼠40只，每只豚鼠體重350±50g，隨機分為5組，每組8只。第1組給予溶媒，每次劑量1.5ml/kg，隔日一次(qod)。第2、3、4組給予濃度為100mg/ml(表1中的處方2)的鹽酸左旋咪唑搽劑，每次劑量1.5ml/kg(150mg/kg)，給藥時間分別為每天一次(qd)、隔日一次(qod)及三日一次(q3d)。第5組給予氟輕松軟膏，每次劑量1.5mg/kg，每天一次(qd)。各組給藥皆為背部皮膚(用8％硫化鈉溶液預先脫毛，面積4×4cm)涂擦，給藥一周后，給豚鼠兩后足跖皮內注射抗原-佐劑乳化液各0.05ml致敏，于致敏后第9天強化致敏，強化后第6天停藥繼續(xù)觀察2天，記錄動物的一般表現(xiàn)和死亡數(shù)，并取部分動物腦脊髓作病理切片觀察。所獲結果示于表6中。
表6 本發(fā)明搽劑*對豚鼠實驗性過敏性腦脊髓膜炎的防治作用(每組動物數(shù)8只)

注*同表3死亡動物反應的表現(xiàn)有食欲減退，體重減輕，后肢拖行，死前有陣發(fā)性抽搐，角弓反張，大小便失禁等現(xiàn)象。各組死亡動物腦脊髓病理切片檢查均呈腦脊髓膜炎癥，程度無明顯差異。
從表8可以看出，與溶媒對照組相比，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑局部皮膚給藥對豚鼠實驗性過敏性腦脊髓炎有較好的防治效果，死亡率明顯降低，尤其是按較大劑量使用時效果更好。
從以上的動物實驗例1-4可以看出，本發(fā)明的鹽酸左旋咪唑搽劑能夠很好地被動物皮膚吸收，可以明顯地提高動物的免疫力，并且用量省，使用方便，無任何毒副作用。
權利要求
1.一種鹽酸左旋咪唑搽劑，其特征在于，該搽劑由鹽酸左旋咪唑按20～200mg/ml的最終濃度溶解于由異丙醇10～40體積％、丙二醇5～30體積％、氮酮0.5～5體積％，其余不足100體積％的部分為純水組成的混合溶劑中而構成。
2.如權利要求1所述的鹽酸左旋咪唑搽劑，其特征在于，該搽劑由鹽酸左旋咪唑按50～150mg/ml的最終濃度溶解于由異丙醇20～30體積％、丙二醇10～20體積％、氮酮1～3體積％，其余不足100體積％的部分為蒸餾水組成的混合溶劑中而構成。
全文摘要
鹽酸左旋咪唑搽劑，該搽劑由鹽酸左旋咪唑按20～200mg/ml的最終濃度溶解于由異丙醇10～40體積％、丙二醇5～30體積％、氮酮0.5～5體積％，其余不足100體積％的部分為純水組成的混合溶劑中而構成。該鹽酸左旋咪唑搽劑能夠很好地被動物皮膚吸收，可以明顯地提高動物的免疫力，并且用量省，使用方便，無任何毒副作用。
文檔編號A61K47/22GK1430958SQ0310269
公開日2003年7月23日 申請日期2003年2月14日 優(yōu)先權日2003年2月14日
發(fā)明者朱欽文, 朱凱甦 申請人:朱欽文, 朱凱甦