專利名稱：蜂毒的可生物降解微球注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說它是一種蜂毒的可生物降解微球注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及的是用可降解的高分子材料為載體，包裹或吸附蜂毒而制成的球形微粒。蜜蜂毒(Bee Venom，簡稱蜂毒)是由蜜蜂毒腺產(chǎn)生后貯存于毒囊中，當(dāng)蜜蜂受刺激時從其尾部蟄針排出的一種毒液，可以從三條途徑得到化學(xué)合成、利用基因工程表達(dá)以及從蜂毒中提取純化。其中有蜂毒素、蜂毒明肽、MCD肽、組胺、磷脂酶A2及透明質(zhì)酸酶，是含有多種化學(xué)成分的生物活性物質(zhì)，在我國已有悠久的臨床應(yīng)用歷史。蜂毒能治病的偶然，開創(chuàng)了人類利用蜂毒治病的悠久歷史，它的主要成分—蜂毒素是由26個氨基酸組成的多肽，占蜂毒干重的50％，具抗菌、消炎、抗輻射、抗關(guān)節(jié)炎等作用，對風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肩周炎等疾病有確實(shí)可靠的療效。雖然蜂毒是經(jīng)受了千百年長期考驗(yàn)，古今中外對蜂毒醫(yī)療應(yīng)用積有豐富的經(jīng)驗(yàn)，而且蜂毒資源豐富，現(xiàn)代關(guān)于蜂毒的基礎(chǔ)和臨床研究也相當(dāng)活躍，但到目前為止，臨床應(yīng)用仍非常有限，究其原因，主要是以下幾個方面一方面蜂毒純度不夠，易導(dǎo)致過敏；另一方面由于它的分子量大(約3000)，穩(wěn)定性又差，口服吸收非常差且容易被破壞，目前臨床一般用蜂毒注射液，主要包括蜂毒水針劑、油針劑和凍干粉針劑，治療關(guān)節(jié)炎的用法的臨床用法一般為每日一次關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，每日一次，連續(xù)20到30天一個療程，需反復(fù)應(yīng)用幾個療程。如此頻繁地注射給藥無疑給患者的身心帶來了巨大的痛苦，由于順應(yīng)性差，極容易導(dǎo)致中途治療的失敗。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種蜂毒的可生物降解微球注射劑及其制備方法，它是通過形成水包油包水型復(fù)乳后在固化的液中干燥法制備的，將可生物降解的高分子材料用二氯甲烷或乙酸乙酯溶解，與蜂毒的水溶液用超聲波高度分散成油包水型初乳，用冰水將體系溫度降至5℃后，將初乳滴加到聚乙烯醇的水溶液中，在攪拌的作用下分散成水包油包水型(W/O/W)復(fù)乳，繼續(xù)攪拌，二氯甲烷(或乙酸乙酯)揮發(fā)，微球隨之固化，待固化完全后，過濾，洗滌，真空干燥，收集。微球的粒徑可以通過改變處方和工藝參數(shù)來控制。根據(jù)選擇的高分子材料的種類和分子量的差別，可以使微球的降解時間控制在一個月、二個月或三個月。
可降解微球注射劑是近年來發(fā)展起來的高技術(shù)含量的新型給藥體系，是以生物可降解、可注射、安全無毒的高分子材料為基質(zhì)用適宜的方法將多肽包裹或吸附而成的粒徑小于75μm的微球。微球可經(jīng)皮下、肌肉或特殊部位(如關(guān)節(jié)腔等部位)注射，注射后在給藥部位形成儲庫，藥物隨著高分子的緩慢降解而持續(xù)釋放。高分子的種類、分子量不同，高分子的降解速度不同，可根據(jù)需要進(jìn)行選擇。
在大量的可降解微球中可用于蜂毒微球注射劑的有PLA(聚乳酸)、PLGA(乳酸-羥基乙酸共聚物)、PCL(聚-己內(nèi)酸)、聚愿酸酯、聚氨基酸類等以及各種嵌段共聚物。如PLA-PEG-PLA、PLLA-g-oligoEG、PVAL-g-PLGA、PELA等。蜂毒可降解微球可用于制備治療關(guān)節(jié)炎、癌癥的藥物。蜂毒可降解微球中所包含的藥物為經(jīng)純化后的蜂毒素、蜂毒明肽以及基本不含過敏物質(zhì)的天然蜂毒的其余主要成份的混合物。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是蜂毒的可降解微球可以很好地克服蜂毒應(yīng)用的瓶頸，使古老的蜂針療法重新煥發(fā)新的活力，有助于推廣蜂毒的臨床使用。蜂毒可降解微球是使微球在一個月、二個月、三個月內(nèi)降解，藥物在特定時間內(nèi)平穩(wěn)釋放，藥效一直持續(xù)。微球制劑一次注射就能達(dá)到幾個月內(nèi)連續(xù)每天注射的效果，且血藥濃度更平穩(wěn)、波動小、生物利用度更高。這樣，不僅減少了患者的痛苦，提高病人順應(yīng)性和生活質(zhì)量，還節(jié)省了大量的人力和物力。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1.蜂毒聚乳酸微球的制備將120mg蜂毒(吉林洮南制藥廠)用2ml蒸餾水溶解，1.6gPLA(分子量10627)溶解在35ml二氯甲烷中，用細(xì)胞超聲波粉碎機(jī)乳化成油包水型乳劑，用冰水浴降溫后，滴加到800ml1％聚乙烯醇(日本和光純藥工業(yè)株氏會社)溶液中，在800轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速攪拌下，形成復(fù)乳。繼續(xù)攪拌，隨著二氯甲烷的揮發(fā)。PLA從乳滴中固化，形成包裹蜂毒的PLA微球。蜂毒的包封率可達(dá)80％以上。
將20mg真空干燥后的蜂毒聚乳酸微球放置于4ml醋酸鹽緩沖液中，于SHA-B型恒溫水平振蕩器中振蕩(37℃，100rpm)，分別與第一天、第三天、一周、二周、三周、四周取樣，測定釋放介質(zhì)中蜂毒的量。突釋量小于20％，在一個月內(nèi)持續(xù)釋放。
實(shí)施例2.蜂毒乳酸-羥基乙酸共聚物微球的制備將20mg蜂毒(吉林洮南制藥廠)用0.3ml蒸餾水溶解，200gPLGA(分子量10627)溶解在6ml二氯甲烷中，用細(xì)胞超聲波粉碎機(jī)乳化成油包水型乳劑，用冰水浴降溫后，滴加到100ml1％聚乙烯醇(日本和光純藥工業(yè)株氏會社)溶液中，在800轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速攪拌下，形成復(fù)乳。繼續(xù)攪拌，隨著二氯甲烷的揮發(fā)。PLA從乳滴中固化，形成包裹蜂毒的PLGA微球。蜂毒的包封率可達(dá)85％以上。
將20mg真空干燥后的蜂毒聚乳酸微球放置于4ml醋酸鹽緩沖液中，于SHA-B型恒溫水平振蕩器中振蕩(37℃，100rpm)，分別與第一天、第三天、一周、二周、三周、四周取樣，測定釋放介質(zhì)中蜂毒的量。突釋量小于20％，在一個月內(nèi)持續(xù)釋放。
權(quán)利要求
1.蜂毒的可生物降解微球注射劑及其制備方法，其特征在于采用可生物降解的高分子材料為基質(zhì)，用液中干燥法制備的粒徑在75μm以下的蜂毒的體內(nèi)注射微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂毒的可生物降解微球注射劑，其特征在于可降解的高分子材料包括PLA(聚乳酸)、PLGA(乳酸-羥基乙酸共聚物)、PCL(聚-己內(nèi)酸)、聚愿酸酯、聚氨基酸類等以及各種嵌段共聚物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂毒的可生物降解微球注射劑，其特征在于蜂毒可降解微球可用于制備治療關(guān)節(jié)炎、癌癥的藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂毒的可生物降解微球注射劑，其特征在于蜂毒可降解微球可根據(jù)需求制備成1、2、3個月內(nèi)降解完全的蜂毒可降解微球。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂毒的可生物降解微球注射劑，其特征在于蜂毒可降解微球中所包含的藥物為經(jīng)純化后的蜂毒素、蜂毒明肽以及基本不含過敏物質(zhì)的天然蜂毒的其余主要成份的混合物。
6.一種如權(quán)利要求1所述的蜂毒的可生物降解微球注射劑的制備方法，其特征在于該注射劑是通過形成水包油包水型復(fù)乳后在固化的液中干燥法制備的，將可生物降解的高分子材料用二氯甲烷或乙酸乙酯溶解，與蜂毒的水溶液用超聲波高度分散成油包水型初乳，用冰水將體系溫度降至5℃后，將初乳滴加到聚乙烯醇的水溶液中，在攪拌的作用下分散成水包油包水型復(fù)乳，繼續(xù)攪拌，二氯甲烷或乙酸乙酯揮發(fā)，微球隨之固化，待固化完全后，過濾，洗滌，真空干燥，收集。
全文摘要
本發(fā)明是一種蜂毒的可生物降解微球注射劑及其制備方法，它可使微球在一個月、二個月、三個月內(nèi)降解，藥物平穩(wěn)釋放，藥效一直持續(xù)。采用可生物降解的高分子材料為基質(zhì)，用液中干燥法制備的粒徑在75μm以下的蜂毒的體內(nèi)注射微球。該注射劑是通過形成水包油包水型復(fù)乳后在固化的液中干燥法制備的，將可生物降解的高分子材料用二氯甲烷或乙酸乙酯溶解，與蜂毒的水溶液用超聲波高度分散成油包水型初乳，用冰水將體系溫度降至5℃后，將初乳滴加到聚乙烯醇的水溶液中，在攪拌的作用下分散成水包油包水型復(fù)乳，繼續(xù)攪拌，二氯甲烷或乙酸乙酯揮發(fā)，微球隨之固化，待固化完全后，過濾，洗滌，真空干燥，收集。
文檔編號A61P19/00GK1439380SQ0311087
公開日2003年9月3日 申請日期2003年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月16日
發(fā)明者崔福德, 寸冬梅 申請人:沈陽藥科大學(xué)