專利名稱：紅車軸草提取物及其制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于紅車軸草的提取物及其制劑，其中紅車軸草的提取物可以通過離心、乙酸乙酯萃取得析晶，母液及余渣進(jìn)一步醇提，通過調(diào)PH值，上大孔吸附樹脂得到進(jìn)一步的精制分離，而得到紅車軸草總異黃酮提取物。
背景技術(shù)：
紅車軸草又名紅三葉、紅菽草、紅花苜蓿、紅花車子、三葉草、金花菜等。紅車軸草全草含多種黃酮類成分化合物鷹咀豆芽素B(即芝柄花素(formononetin)和A(biochaninA)、染料木素(genistein)、大豆素(daidzein)、紅車軸草素、三葉紫檀甙、柳穿魚甙，全草中尚含有a和β-胡蘿卜素、維生素D、E、糖類及淀粉，目前還發(fā)現(xiàn)含有三種黃酮醇類化合物。
實際上，人們早在40年以前研究者就發(fā)現(xiàn)澳大利亞某些牧場中的綿羊生殖力強，研究者發(fā)現(xiàn)這是因為牧場中含有特殊的三葉草植物，其中富含芝柄花素即鷹咀豆芽素B，它是少數(shù)幾種含4種異黃酮(植物雌激素)的植物之一。異黃酮類雌激素主要包括染料木素異黃酮和大豆苷元。染料木素異黃酮由其前體鷹咀豆芽素A轉(zhuǎn)化而來，代謝為無雌激素活性的對乙基酚，大豆苷原的前體為芒柄花素、大豆苷，代謝為雌馬酚和氧-去甲基安哥拉紫檀素(0-DMA)。植物中的異黃酮大多為結(jié)合形式的糖苷，在腸道菌作用下，去掉糖苷為有生物活性非結(jié)合形式的糖苷配基，經(jīng)過不同的活化代謝途徑，產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，吸收后經(jīng)過腸肝循環(huán)。大部分在肝臟和葡萄糖醛酸結(jié)合，少部分以硫酸鹽、硫酸葡萄苷酸的形式排出。
現(xiàn)代研究證實，紅車軸草總異黃酮有以下作用(1)類似女性雌激素作用及抗激素的作用；
(2)抑制與癌相關(guān)酶活性的作用，特別是酪蛋酸激酶；(3)在癌細(xì)胞增殖的促進(jìn)階段具有抑制血管增生作用；(4)消除活性氧，從而具有抗氧化作用；(5)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期；(6)此外染料木素異黃酮具有抑制一些與DNA切斷有酶活性的作用。
總之，紅車軸草異黃酮通過不同的配制起到一定的預(yù)防癌癥效果，特別是弱雌激素作用。雌激素不足時可起到類雌激素效果，而雌激素過剩時，又起到抗雌激素作用，即雙向調(diào)節(jié)作用。對于預(yù)防乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、改善骨質(zhì)疏松和改善婦女更年期癥狀等有一定的作用，并且越來越廣泛地應(yīng)用于臨床。

發(fā)明內(nèi)容
目前市售的紅車軸草提取物含量大多10％左右，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定的，特別是具有活性的紅車軸草總異酮提取物，它含有對藥理活性起作用的主要化合物，具體是鷹咀豆芽素A和B、染料木素、大豆素、大豆苷等，它可以通過這樣的方法制得，該方法包括下列步驟(1)用甲醇或乙醇提取紅車軸草全草；(2)過濾該提取液并濃縮；(3)將濃縮液離心取渣；(4)將藥渣用油性溶劑脫脂干燥；(5)用脂肪族的酯類萃取濃縮后，析晶得到提取物a；(6)將步驟(5)中不溶于酯類的藥渣用50-90％的醇提取，并將提取液濃縮；(7)將步驟(5)中析晶后的母液及步驟(6)中濃縮液調(diào)PH值＝8-10以內(nèi)，過聚苯乙烯大孔吸附樹脂分離，得提取物b；
(8)將所得提取物a和b合并，用醇再精制。
具體實施例方式
優(yōu)選實現(xiàn)本發(fā)明的方法是用甲醇或乙醇進(jìn)行第一次提取(步驟(1))藥材與溶劑的重體積比在1∶2到1∶20的范圍內(nèi)，優(yōu)選為1∶2到1∶10的范圍內(nèi)，溫度在室溫到溶劑的回流范圍內(nèi)，優(yōu)選在50-80℃。
用于步驟(4)所得藥渣為離心所得或自然沉降所得。
用于步驟(4)所述脫脂溶劑為200#溶劑汽油、石油醚、正已烷之間優(yōu)選，正已烷為最佳。
用于步驟(5)的脂肪族的酯類為乙酸乙酯、乙酸甲酯或乙酸丁酯之間優(yōu)選，乙酸乙酯為最佳。
所述脫脂溶劑比例為1∶2到1∶10范圍之內(nèi)優(yōu)選，最佳為1∶4。
所述酯類溶劑用體積比1∶2到1∶10范圍內(nèi)優(yōu)選，最佳為1∶10。最好用新的等份溶劑重復(fù)進(jìn)行提取，一般至少3次，所得提取液將其濃縮至相對密度為1.02-1.15，充分靜置而實現(xiàn)本步驟所得總異黃酮含量為30-60％之間。
進(jìn)行步驟(6)的提取是為了充分將其渣里面的總異黃酮充分提取完全，所用的甲醇或乙醇濃度優(yōu)選為5-95％之間，最佳為50-80％之間。
進(jìn)行步驟(7)是將步驟(5)所得母液及步驟(6)所得濃縮液合并，再精制除雜，由于紅車軸草活性物質(zhì)不溶于水，故須將其調(diào)PH值＝8-10，以讓其充分溶解，PH值優(yōu)選范圍為PH值＝8-11之間，最佳為PH值＝9。
實現(xiàn)此步驟所選用樹脂范圍為硅膠、聚酰胺、離子交換樹脂、大孔吸附樹脂，優(yōu)選為大孔樹脂為最佳。
實現(xiàn)步驟(8)是為了所得提取物含量進(jìn)一步提高，所選用溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮，以乙醇為最佳。
影響本提取精制工藝的因素有原料的質(zhì)量及加工過程中的實際操作情況、原料中總異黃酮的含量應(yīng)不低于0.6％，這種含量的較大差異取決于收集該植物的時間及處理干燥的方式和該生藥材中莖所占的比例。
與總提取物相比，在各種用來防治更年期綜合癥、骨質(zhì)疏松藥理模型中該提取物出人意料地具有高活性，并且不需要進(jìn)一步的特殊處理，隨著時間的推移活性是穩(wěn)定的。
本發(fā)明提供了一種應(yīng)用淫羊藿、維生素B1、B6及含維生素為組合與紅車軸草配伍，在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，補腎、補充植物雌激素，使其得到充分發(fā)揮，從而能更好地預(yù)防乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和防治骨質(zhì)疏松、更年期綜合癥。
下面以實施例說明該發(fā)明的應(yīng)用，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。
紅車軸草提取物與其他藥物成分的組成配比如下紅車軸草提取物30g淫羊藿提取物60g微晶纖維素120g淀粉105g將以上成分混勻，壓片，制得的片劑主要用于補充雌激素，預(yù)防乳腺癌。
上述配比中紅車軸草提取物按照發(fā)明內(nèi)容的制備方法制備，其中含紅車軸草總異黃酮50-70％，淫羊藿提取物為自己制備或購買，其中所含的淫羊藿總黃酮為50-60％，微晶纖維素和淀粉為本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員所熟知的制藥輔料，主要用作填充劑和崩解劑。
權(quán)利要求
1.制備紅車軸草提取物的方法，它包括(1)用甲醇或乙醇提取紅車軸草全草；(2)過濾該提取液并濃縮；(3)將濃縮液離心取渣；(4)將藥渣用油性溶劑脫脂干燥；(5)用脂肪族的酯類萃取濃縮后，析晶得到提取物a；(6)將步驟(5)中析晶后的母液調(diào)PH值＝8-10以內(nèi)，過樹脂分離，得提取物b；(7)將所得提取物a和b合并，用醇再精制。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(5)中不溶于酯類的渣用50-90％的醇提取，回收醇得到濃縮液，該濃縮液與步驟(5)析晶后的母液混合。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，用甲醇或乙醇進(jìn)行步驟(1)的提取。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中用200#溶劑汽油、石油醚或正已烷進(jìn)行步驟(4)的脫脂，正已烷為最佳。
5.如權(quán)利要求1中所述的方法，其中步驟(5)中所用的脂肪族的酯類選自于乙酸乙酯、乙酸甲酯或乙酸丁酯，乙酸乙酯為最佳。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(6)樹脂范圍為硅膠、聚酰胺、離子交換樹脂、大孔吸附樹脂，大孔吸附樹脂為最佳。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(7)的重結(jié)晶選自于95％的甲醇、乙醇或丙酮，乙醇為最佳。
8.按照權(quán)利要求1-7的方法得高含量紅車軸草提取物。
9.按照權(quán)利要求8所述的提取物，它含有10-85％(重量)的總異黃酮。
10.權(quán)利要求8或9的提取物在制備補充雌激素，防治更年期綜合癥、骨質(zhì)疏松癥的藥物的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及紅車軸草的提取物及其制劑，它可以通過這樣的方法制得，該方法包括下列步驟用甲醇或乙醇提取紅車軸草全草；過濾該提取液并濃縮；將濃縮液離心取渣；將藥渣用石油醚或正己烷脫脂干燥；用乙酸乙酯萃取濃縮后，析晶得到提取物a；將萃取后渣用50－90％的醇提取、回收醇，得濃縮液；將所得析晶后母液及濃縮液調(diào)pH值＝8－10以內(nèi)，過聚苯乙烯骨架大孔吸附樹脂分離，得提取物b，將提取物a和b合并，用醇再精制，得高含量提取物。本發(fā)明提供了一種應(yīng)用淫羊藿、維生素B
文檔編號A61K31/7048GK1439367SQ0311884
公開日2003年9月3日 申請日期2003年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月27日
發(fā)明者李崇明, 熊富良, 黃志軍, 瞿麗, 曾慶恢, 徐紹新, 許沛虎 申請人:武漢健民中藥工程有限責(zé)任公司