專利名稱：一種調(diào)節(jié)免疫的組合物藥物及其制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種具有免疫作用、并抗腫瘤的中藥，尤其是一種免疫調(diào)節(jié)劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
消化道惡性腫瘤為我國的高發(fā)腫瘤。由于難于及時發(fā)現(xiàn)，故早診率較低，這不僅使該人群失去了寶貴的手術(shù)機會，而且由于機體邪盛正衰，氣虛血瘀而致使機體免疫功能低下，不能耐受有效的化學藥物治療，近年來已成為臨床上非常棘手的問題。
目前，惡性腫瘤的治療方法有許多種，但概括而言都采用中西醫(yī)結(jié)合的方法。眾所周知，由于西藥的治療如環(huán)磷酰胺、氨甲喋呤、5-氟尿嘧啶、順鉑或阿霉素等主要通過抑制腫瘤細胞的核酸或蛋白質(zhì)的合成而抑制腫瘤細胞的生長，因此對正常機體細胞也有明顯的毒副作用，從而導致機體出現(xiàn)一些癥狀如惡心、嘔吐、骨髓抑制等等，使很多病人不能耐受化療而中斷治療，嚴重者甚至會危及生命。另外，由于腫瘤的發(fā)生與發(fā)展與人體的免疫功能有十分密切的關系，尤其是細胞免疫功能有著明顯的關系，因此，在臨床醫(yī)學上一直有需要尋找一種理想的免疫調(diào)節(jié)劑，用來提高全身的應激能力，維護化療過程中機體的免疫活性，減少毒副作用，延長患者的生存期。
目前也有關于中藥免疫調(diào)節(jié)劑的研究。如謝巖等在ZL94101456.8中報道了一種含有人參和黃芪成分的注射液，用于提高人體免疫功能，抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。但在該專利中沒有提供任何能夠證明藥物效果的實驗數(shù)據(jù)，而且人參作為藥物成份價格昂貴，長期服用對腫瘤病人來說負擔較重，也容易造成病人因經(jīng)濟原因放棄治療。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明人經(jīng)過反復研究，并通過動物和臨床實驗的反復驗證，終于找到了適用于腫瘤化療病人長期使用的、能增強機體免疫力、減輕腫瘤病人化療引起的骨髓抑制、降低死亡率的中藥制劑，并且從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的一個目的是提供一種從中藥黨參、黃芪中提取出的具有藥用價值的組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種該藥物組合物的制備方法。
根據(jù)本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑，主要是由黨參和黃芪為原料制成。
所述的黨參和黃芪的重量比范圍優(yōu)選為0.5∶1至1∶0.5，更優(yōu)選為1∶1。
根據(jù)本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑的原料藥中還可以含有補氣、補血類中藥，如當歸、熟地、何首烏、白術(shù)、山藥等。
本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑的制備方法包括下列步驟a)將黨參、黃芪除雜質(zhì)，加工成飲片；b)按一定重量比稱取黨參和黃芪，用去離子水將其沖洗干凈；c)根據(jù)稱取的黨參和黃芪的重量分次加入一定量的去離子水，加熱提取1～3次，得到藥物提取物；d)將藥物提取物濃縮，得濃縮液；e)加入適量乙醇，常規(guī)沉淀，過濾，回收濾液中的乙醇并濃縮至干，即得黨參、黃芪提取組合物。
在步驟c)中將藥物加水提取時，優(yōu)選第一次加水8倍量，煎煮1小時，第二次加水6倍量，煎煮0.5小時。
在步驟e)中將藥物加乙醇沉淀時，優(yōu)選第一次乙醇含量占總重量的65％-80％，第二次乙醇含量不少于總重量的80％。
本發(fā)明所述的中藥黨參Codonopsis Pilosula(Franch.)Nannf為桔?？浦参锏母稍锔?；中藥黃芪(膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.或蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao)的干燥根。
本發(fā)明提供的免疫調(diào)節(jié)劑中，每1克中含總固體物不少于0.325克，其主要成分為糖類物質(zhì)(包括多糖、單糖)、有機酸、皂苷、香豆精(少量)、黃酮苷、生物堿、甾醇類、烷烴類物質(zhì)等。其中主要活性成分為皂苷類、香豆精類以及黃酮類物質(zhì)。
在應用時，本發(fā)明的藥物可以根據(jù)需要加入一種或多種藥學上可以接受的載體，如稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等，制備成需要的劑型。
本發(fā)明提供的藥物，根據(jù)實際需要，可進一步加工制成口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑以及注射劑等多種劑型。上述劑型均可按照藥學領域的常規(guī)方法制備。
經(jīng)動物試驗和臨床試驗表明，本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑具有以下作用1.可以補脾益腎，治療一切氣虛、氣損病人。
2.改善臨床癥狀，延長腫瘤患者生存期，具有扶正固本作用。
3.維護造血功能，減輕放療及化療藥物的毒副作用，減少放、化療過程中白細胞下降。
4.增加巨噬細胞吞噬功能，提高淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力等，是一種理想的免疫調(diào)節(jié)劑。
5.有一定的抑瘤作用。
本發(fā)明對傳統(tǒng)的中藥黨參、黃芪進行了全面的、系統(tǒng)的研究，明確了它們的有效部位，闡明了該藥物的作用機制。并且有針對性地設計提取工藝，在保證藥物有效性的同時，盡可能地去除雜質(zhì)，以降低使用劑量，減小毒副作用。方法簡單，實用性強，并且很有創(chuàng)造性和啟發(fā)性，為中藥現(xiàn)代化奠定了堅實的基礎。


圖1為中藥黨參、黃芪的提取工藝。
具體實施例方式
以下通過實施例來進一步闡述本發(fā)明的免疫調(diào)節(jié)劑及其制備方法。
實施例1黨參、黃芪的提取與分離，以獲得黨參和黃芪的組合物。
分別將黨參、黃芪除雜質(zhì)，加工成飲片。準確稱定黨參與黃芪各400克用去離子水沖洗干凈，加入3200ml去離子水，加熱提取1小時后，放出提取液；再加入2400ml去離子水，加熱提取1小時后，放出提取液；再加入2400ml去離子水，加熱提取0.5小時后，放出提取液。三次提取液過濾后合并，濃縮至600ml，再加入濃度為95％的乙醇使含醇量為60％，沉淀24小時，過濾；濾液回收至400ml，加入濃度為95％的乙醇使含醇量為80％，沉淀，過濾，回收乙醇并濃縮至400g，即得黨參和黃芪提取組合物。
對本發(fā)明的藥物可加適量乙醇冷藏保存，也可烘干后室溫保存。在本發(fā)明的藥物中，每1克中含總固體物不少于0.325克，其主要成分為糖類物質(zhì)(包括多糖、單糖)、有機酸、皂苷、香豆精(少量)、黃酮苷、生物堿、甾醇類、烷烴類物質(zhì)等。其中主要活性成分為皂苷類、香豆精類以及黃酮類物質(zhì)。
以下通過試驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗例包括本發(fā)明免疫調(diào)節(jié)劑組合物的動物實驗和臨床療效觀察實驗。
試驗例1黨參、黃芪提取組合物的抗腫瘤作用及對氨甲喋呤致死作用的影響1實驗藥物黨參、黃芪提取組合物按上述實施例1制備的黨參、黃芪提取組合物，其中每20ml中含等量黨參、黃芪提取物3.25g，實驗時將之水浴濃縮2ml至1ml，流通蒸汽消毒40分鐘滅菌。
氨甲喋呤上海第二制藥廠，批號為870615。實驗時配成1mg/ml水溶液。
2實驗動物昆明雜種小鼠，雌性，體重18～22g，由中研院動物房提供。
3實驗方法1)將小鼠隨機分為大劑量組、小劑量組和對照組。瘤株選用小鼠肉瘤180，選取新鮮瘤組織在無菌條件下制成細胞勻漿，以1∶4稀釋，每只小鼠右腋皮下接種0.15ml，于接種后24小時開始給藥。大劑量組給黨參、黃芪提取組合物濃縮液0.4ml/只；小劑量組0.2ml/只，對照組給生理鹽水0.4ml/只，均為腹腔注射，每日一次，連續(xù)給藥14天，第15天處死動物，稱取瘤重，求瘤重抑制率，用t檢驗法進行統(tǒng)計學處理。
2)小鼠分為兩組，接種瘤細胞方法同前，于接種前三天開始給藥組與對照組分別腹腔注射黨參、黃芪提取物組合物和生理鹽水0.2ml/只，每日一次，連續(xù)八次，于給藥第四天接種瘤細胞，接種六小時后，腹腔內(nèi)一次注射氨甲喋呤水溶液22mg/kg，觀察給氨甲喋呤后10天內(nèi)動物死亡情況，比較兩組動物生存率。
4實驗結(jié)果1)黨參、黃芪提取組合物對小鼠肉瘤180的影響，結(jié)果見表1、表2。
表1黨參、黃芪提取組合物(大劑量組)對小鼠肉瘤180的影響

表2 黨參、黃芪提取組合物(小劑量組)對小鼠肉瘤180的影響

從表1、表2中可以看出，給藥14天后兩用藥組平均瘤重均小于對照組，提取物6.50g/kg組抑瘤率三次實驗分別為36.7％、55.28％、33.84％，經(jīng)統(tǒng)計學處理與對照組具有顯著性差異。提取物3.25g/kg抑瘤率三次實驗分別為20.86％、23.40％、19.69％，說明黨參、黃芪提取組合物對小鼠肉瘤180有抑制作用。
2)黨參、黃芪提取組合物對氨甲喋呤致死作用的影響，結(jié)果見表3。
表3黨參、黃芪提取組合物對氨甲喋呤致死作用的影響


※經(jīng)直接計算概率法檢驗0.01＜P＜0.05從表3可以看出，參芪組十天生存率明顯高于對照組。經(jīng)卡方檢驗P＜0.05，統(tǒng)計學處理有顯著差異。實驗提示黨參、黃芪提取組合物對氨甲喋呤的致死作用具有保護性減毒作用，即可延長生存期。
上述兩項實驗表明黨參、黃芪提取組合物對小鼠180有抑制作用，能夠降低氨甲喋呤對小鼠的死亡率，延長動物生存期。
試驗例2參芪注射液對造血系統(tǒng)的影響1實驗藥物參芪注射液溶液，每支20ml，含等量黨參、黃芪提取物3.25g，實驗時每只小鼠腹腔注射0.2ml(合每公斤體重10ml)。
2實驗動物昆明種小鼠，體重18-22g，接種s180瘤株，接種瘤細胞24小時后，實驗組腹腔注入?yún)④巫⑸湟?.2ml(約含生藥0.2g)，對照組注射同量水直至實驗結(jié)束。實驗中分兩次腹腔注入環(huán)磷酰胺，每只1.5mg。
3實驗結(jié)果1)參芪注射液對小鼠骨髓細胞總數(shù)的影響表4 參芪注射液對小鼠骨髓細胞總數(shù)的影響

表4結(jié)果說明環(huán)磷酰胺可造成小鼠骨髓細胞總數(shù)下降，合并參芪注射液后，骨髓細胞總細胞總數(shù)比對照組升高。
2)參芪注射液對小鼠骨髓有核細胞的影響表5 參芪注射液對小鼠骨髓有核細胞的影響

骨髓有核細胞代表有造血功能的細胞。表5結(jié)果說明，合并參芪注射液，骨髓有核細胞計數(shù)明顯高于單純環(huán)磷酰胺對照組。
3)參芪注射液對小鼠骨髓細胞體積的影響表6參芪注射液對小鼠骨髓細胞體積的影響

骨髓細胞體積大小反映細胞的成熟程度，越幼稚，細胞體積越大，幼稚多代表造血母細胞。表6的結(jié)果說明合并參芪注射液比單純環(huán)磷酰胺對照組平均體積大。(P＜0.01)4)參芪注射液對小鼠骨髓細胞壓積的影響表7 參芪注射液對小鼠骨髓細胞壓積的影響

骨髓細胞壓積的高低代表細胞的大小和多少，表7結(jié)果說明合并參芪注射液比單純環(huán)磷酰胺對照組壓積增多。(P＜0.01)試驗例3參芪注射液具有協(xié)同的抑瘤作用本試驗例所用的實驗藥物與實驗動物同試驗例2。
實驗結(jié)果參芪注射液合并環(huán)磷酰胺對瘤體的影響參芪注射液能減輕化療藥對小鼠骨髓的抑制，但是否破壞化療藥的抗癌效果。關于這一點，以下實驗進行了驗證。
表8 參芪注射液合并化療藥對瘤體的影響

△環(huán)磷酰胺對照組與空白組對照比較※環(huán)磷酰胺對照組與環(huán)磷酰胺+參芪組比較表8的結(jié)果說明本發(fā)明的黨參、黃芪免疫調(diào)節(jié)劑組合物不但沒有破壞化療藥的抗癌效果，相反，合并后參芪注射液比單純化療提高抑瘤率。參芪一組為人用量4倍，參芪二組為人用量2倍。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于它主要是由黨參和黃芪為原料制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的黨參和黃芪的重量比范圍為0.5∶1至1∶0.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一項所述的藥物組合物，其特征在于所述的黨參和黃芪的重量比為1∶1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的原料藥還可以含有補氣、補血類中藥。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述的補氣、補血類中藥是當歸、熟地、何首烏、白術(shù)、山藥或其結(jié)合。
6.一種含有權(quán)利要求1所述的藥物組合物的制備方法，它包括下列步驟a)將黨參、黃芪除雜質(zhì)，加工成飲片；b)按一定重量比稱取黨參和黃芪，用去離子水將其沖洗干凈；c)根據(jù)稱取的黨參和黃芪的重量分次加入一定量的去離子水，加熱提取1～3次，得到藥物提取物；d)將藥物提取物濃縮，得濃縮液；e)加入適量乙醇，常規(guī)沉淀，過濾，回收濾液中的乙醇并濃縮至干，即得黨參、黃芪提取組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中在步驟c)中將藥物加水提取時，第一次加水8倍量，煎煮1小時，第二次加水6倍量，煎煮0.5小時。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中在步驟e)中將藥物加乙醇沉淀時，第一次乙醇含量應占總重量的65％-80％，第二次乙醇含量不少于總重量的80％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種調(diào)節(jié)免疫的藥物組合物，其主要成分由黨參、黃芪按一定重量配比而成，其配比比例大致為0.5∶1至1∶0.5，優(yōu)選1∶1。它可以制備成任何一種常用劑型，如口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑以及注射劑等。本發(fā)明藥物具有補脾益腎、扶正固本、維護造血功能、減輕放療及化療藥物的毒副作用，能減少放、化療過程中白細胞下降、增加巨噬細胞吞噬功能，提高淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力等，是一種理想的免疫調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明藥物組合物還具有一定的抑瘤作用。本發(fā)明還公開了所述藥物組合物的制備方法。
文檔編號A61P37/00GK1513497SQ0312304
公開日2004年7月21日 申請日期2003年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月29日
發(fā)明者謝偉宏, 李乃卿, 屠鵬飛 申請人:麗珠集團利民制藥廠