專利名稱：含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備降血脂的藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于藥物領域。
文獻Walter Karrerr，Birkhauser Verlag，Bassel undstuttgart(1958)，P.652，N01640公開了二氫楊梅素的結構式， 但是沒有對二氫楊梅素的活性進行研究。楊梅素是一種已知的化合物，其結構式是 迄今為止沒有人公開過含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物及其用途。
本發(fā)明的目的是提供一種新的組合物，其含有二氫楊梅素和楊梅素，其中二氫楊梅素含量是20％至98％重量比，楊梅素含量是2％至80％重量比。本發(fā)明組合物中還可以含有一種或幾種選自下面的成分楊梅甙，沒食子酸和/或茶多酚。楊梅甙的含量優(yōu)選占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，沒食子酸的含量優(yōu)選是占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，茶多酚的含量優(yōu)選是占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％。
本申請人令人驚奇地發(fā)現(xiàn)含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制藥領域和保健品領域具有廣泛的用途。
本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物具有降血糖和降血脂作用，可以制備成降血糖藥和降血脂藥。含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物可以直接用作抗病毒藥物，還可以與藥學可接受載體或賦形劑混合制成廣譜抗病毒藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供制備本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的方法。本發(fā)明的組合物可以通過將所述組分單體按比例混合制備，也可以從蛇葡萄屬植物中提取。所述蛇葡萄屬植物包括粵蛇葡萄，棟葉玉葡萄，顯齒蛇葡萄，大葉蛇葡萄，白蘞，東北蛇葡萄和山葡萄。所述提取方法可以是通過各種溶劑(水和/或有機溶劑)煎煮葡萄科植物，煎煮一次或多次，煎煮液經(jīng)濃縮冷卻，靜置過夜，檢測沉淀與上清的藥效成分，取具有活性的沉淀和/或經(jīng)進一步硅膠吸附后得到本發(fā)明組合物。煎煮所用的溶劑優(yōu)選水，醇類，酯類，酮類，醚類和強極性有機溶劑，更優(yōu)選低級鏈烷醇，低級脂肪酸酯，具有3-12個碳原子的酮和醚和/或水，最優(yōu)選甲醇，乙醇，丙醇，異丙醇，正丁醇，異丁醇，仲丁醇，叔丁醇，乙酸乙酯，乙酸甲酯，甲酸乙酯，丙酮，甲基乙基酮，乙醚，甲基乙基醚，甲基叔丁基醚，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，二甲亞砜，N，N-二甲基甲酰胺和/或水等等。分離使用的吸附劑可以是硅膠。
本發(fā)明的原理是通過建立藥理篩選模型追蹤含有二氫楊梅素和楊梅素組合物藥效活性，找到其藥用用途。試驗證明本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物具有降血糖和降血脂作用。
本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物可以通過藥物領域常規(guī)配制技術和載體，配制成藥物組合物，藥物組合物中含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的量可以是2-98％重量比。本發(fā)明組合物可以制備成片劑，顆粒劑，膠囊，外用藥。但是本領域技術人員也可以根據(jù)需要用本領域公知的技術和載體配制成其它劑型。優(yōu)選活性成分對人施用的劑量是0.01-5克/千克體重/天，但是也可以根據(jù)具體情況而定，不局限于此范圍。
通過下面的實施例詳細說明本發(fā)明。但是應該理解這些實施例只是說明本發(fā)明，而不是在任何方面限制本發(fā)明的范圍。實施例1從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素80g，楊梅素20g，上述組分在混合機中混合后得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?8g，楊梅素2g，上述組分在混合機中混合后得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?0g，楊梅素80g，上述組分在混合機中混合后得混合物。實施例2從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素20g，楊梅素80g，楊梅甙2.5g，沒食子酸2.5g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機中混合得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?8g，楊梅素2g，楊梅甙2.5g，沒食子酸2.5g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機中混合得混合物。或者取二氫楊梅素85g，楊梅素15g，楊梅甙25g，沒食子酸2g，上述組分在混合機中混合得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?0g，楊梅素50g，楊梅甙25g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機中混合得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?0g，楊梅素30g，楊梅甙5g，上述組分在混合機中混合得混合物。實施例3從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物分別取實施例1的第一種組合物(或實施例2的第三種組合物)30g，乳糖53g，羧甲基纖維素鈉1.5g，硬脂酸鎂0.5g，50％乙醇5ml，上述組分在混合機中混合后壓制成片。實施例4從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素115g，楊梅素15g，糖粉345g，糊精145g，乙醇5ml，上述組分混合后干燥，得到?jīng)_劑。實施例5從顯齒蛇葡萄植物制備本發(fā)明組合物取顯齒蛇葡萄干燥嫩莖葉2kg，用95％乙醇(醫(yī)用乙醇)回流提取兩次，每次2小時，過濾，合并濾液，蒸發(fā)至干，加入1200毫升85℃熱水，使浸膏充分溶解，濾去黑色不溶物，濾液中加入硅膠(100目)200g，將濾液加熱至60℃，乘熱過濾，將濾液冷卻至室溫，沉淀，靜置過夜，得到黃色沉淀，產(chǎn)率11.2％。其中二氫楊梅素含量74.8％重量比，楊梅素含量21.1％重量比，楊梅甙的含量是2.8％重量比，沒食子酸的含量是1.3％重量比。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.72，Rf楊梅甙＝0.54，Rf二氫楊梅素＝0.50，Rf楊梅素＝0.21。
或者取顯齒蛇葡萄干燥嫩莖葉2kg，用95％乙醇(醫(yī)用乙醇)回流提取兩次，每次2小時，過濾，合并濾液，蒸發(fā)至干，加入1200毫升85℃熱水，使浸膏充分溶解，濾去黑色不溶物，濾液用等體積乙酸乙酯萃取兩次，合并乙酸乙酯溶液，蒸發(fā)至干，得到黃色沉淀，產(chǎn)率10.25％。其中二氫楊梅素含量76％重量比，楊梅素含量18％重量比，楊梅甙的含量是3.0％重量比，沒食子酸的含量是2％重量比，其余為顯齒蛇葡萄植物中Rf5＝0.41的成分。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.72，Rf楊梅甙＝0.54，Rf二氫楊梅素＝0.50，Rf楊梅素＝0.21，Rf5＝0.41。實施例6從東北蛇葡萄植物制備本發(fā)明組合物室溫下，將收集來的東北蛇葡萄1000克洗去塵土，加入4000毫升水，超聲提取0.5小時，過濾，殘渣再加入1000毫升丙醇，再超聲提取0.5小時，再過濾，濾液合并，濃縮至2毫升，加入500毫升100℃熱水，冷卻到60℃，靜置，過濾，。濾液用硅膠(100目)100g吸附，將濾液加熱至70℃，乘熱過濾，將濾液冷卻至室溫，沉淀，靜置過夜，得到黃色沉淀，產(chǎn)率10.3％。其中二氫楊梅素含量58％重量比，楊梅素含量14％重量比，楊梅甙的含量是1.4％重量比，沒食子酸的含量是1.7％重量比，其余為東北蛇葡萄植物中Rf5＝0.43的成分。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.76，Rf楊梅甙＝0.55，Rf二氫楊梅素＝0.54，Rf楊梅素＝0.22，Rf5＝0.43。實例7本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物降血糖的試驗1.材料與方法1.1.受試物實施例5獲得的第一種組合物1.2.試驗動物和檢測條件選用健康清潔級雌性昆明種小鼠，體重24±2g，動物飼料執(zhí)行標準GB14924-94。檢測環(huán)境條件，溫度范圍20-25℃，相對濕度范圍40-70％。1.3.劑量選擇試驗分正常動物和高血糖模型動物兩批進行，各設1個對照組(蒸餾水)和澤生牌血純片0.25、0.50、1.50g/kg劑量組，分別相當于人推薦攝入量的5、10和30倍，灌胃量均為0.1ml/10g。1.4.主要儀器與試劑四氧嘧啶(Alloxan)Sigma公司；50％葡萄糖注射液鹽城新曹制藥廠。SUPER GLUCOCARD II GT-1640型超級血糖測定儀日本京者第一科學株式會社生產(chǎn)GLUCOCARD血糖試紙日本京者第一科學株式會社生產(chǎn)。1.5.實驗方法1.5.1.正常動物禁食5小時后，取小鼠測血糖。篩檢空腹血糖在正常范圍內(nèi)的小鼠40只，按血糖水平隨機分為四組，每組10只，分別為正常對照組和樣品各劑量組(組間差不大于1.1mmol/L)1.5.2.高血糖模型動物嚴格禁食24小時后，小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶50mg/kgBW，6天后禁食5小時，測血糖。篩檢空腹血糖值＞10mmol/L的小鼠40辦，按血糖水平隨機分為四組，每組10只，分別為模型對照組和樣品各劑量組(組間差不大于1.1mmol/L)。1.5.3.空腹血糖和糖耐量的測定按設計劑量對小鼠連續(xù)灌胃給受試物30天，然后禁食5小時，給予葡萄糖1.5g/kgBW灌胃，于0、0.5、2.0小時三時相分別測定血糖值。1.6.統(tǒng)計方法全部實驗數(shù)據(jù)采用SPSS/PC軟件包(單因素方差分析)在微機上處理。2. 結果2.1.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠體重的影響表1各組正常小鼠的初始體重、中期體重、結束體重組別初始體重中期體重結束體重動物數(shù)體重(g) 動物數(shù)體重(g) 動物數(shù) 體重(g)正常對照 10 23.4±1.010 30.5±1.510 32.4±1.6
受 0.25g/kg 1023.7±1.0 1031.3±1.3 1033.0±1.7試 0.50g/Kg 1023.6±1.1 1030.8±1.7 1032.2±1.8物 1.50g/kg 1023.6±1.3 1031.0±1.4 1033.7±1.7F值 0.1150.4750.353P值 0.9510.7010.787注受試物各劑量組小鼠體重在各試驗期和正常對照組比較，差異均無顯著意義(方差分析，P＞0.05)2.2.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠空腹血糖的影響表2含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠空腹血糖的影響動物數(shù) 空腹血糖值(mmol/L)組別差值(只) 試驗前 試驗后正常對照 10 4.7±0.5 4.6±0.70.1±06受 0.25g/Kg 10 4.4±0.7 4.3±0.80.1±1.2試 0.50g/kg 10 4.6±0.9 4.4±0.90.2±1.0物 1.50g/kg 10 4.5±0.8 4.5±0.80.0±0.5F值0.388 0.302 0.099P值0.762 0.820.960注受試物各劑量組空腹血糖值和正常對照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。2.3.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠餐后血糖的影響表3二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠餐后血糖的影響組別 動物數(shù)葡萄糖0h 血糖值(mmol/L)(只) (g/kgBW) 0.5h2h正常對照10 1.54.6±0.710.4±1.25.5±0.7受 0.25g/kg 10 1.54.3±0.810.8±1.05.2±1.0試 0.50g/kg 10 1.54.4±0.910.5±1.65.0±1.2物 1.50g/kg 10 1.54.5±0.810.5±1.45.2±1.9F值 0.302 0.2300.529P值 0.824 0.8750.665注受試物各劑量組餐后血糖值和正常對照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。2.4.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠糖耐量的影響表4二氫楊梅素和楊梅素的組合物對正常小鼠糖耐量的影響組別 動物數(shù) 血糖升高及降低幅度(mmol/L)(只)0.5h-0h 0.5h-2h正常對照 10 5.8±0.9 4.8±0.9受 0.25g/kg 10 6.5±0.6 5.6±1.2試 0.50g/kg 10 6.1±1.0 5.5±1.0物 1.50g/kg 10 6.0±1.4 5.3±1.3F值 0.9981.018P值 0.4050.396注受試物各劑量組糖耐量值和正常對照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。2.5.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對引起的高血糖小鼠體重的影響表5各組高血糖模型小鼠的初始體重、中期體重、結束體重組別初始體重 中期體重 結束體重動物數(shù) 體重(g) 動物數(shù)體重(g) 動物數(shù)體重(g)
正常對照 1024.3±1.3 1030.7±2.0 1031.2±1.9受0.25g/kg1024.5±2.7 1031.8±2.2 1032.4±2.8試0.50g/kg1024.0±1.4 1031.7±2.9 1032.6±2.9物1.50g/kg1023.8±1.5 1030.9±1.9 1030.8±1.7F值 0.271 0.576 1.418P值 0.846 0.634 0.253注受試物各劑量組各階段體重和模型對照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。2.6.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對引起的高血糖小鼠空腹血糖的影響表6二氫楊梅素和楊梅素的組合物對高血糖模型小鼠空腹血糖的影響組別動物數(shù)空腹血糖值(mmol/L)(只) 試驗前 試驗后 差值正常對照 10 2.9±3.3 20.4±5.12.5±4.2受0.25g/kg10 22.9±3.013.2±4.1* 9.7±3.7*試0.50g/kg10 22.4±2.515.3±6.47.2±4.7物1.50g/kg10 22.5±3.517.1±6.35.4±6.1F值 0.0683.0584.137P值 0.9770.0410.0123注與模型對照組比較，*P＞0.05(q檢驗)受試物低劑量組試驗后空腹血糖值及前后空腹血糖差值與模型對照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。2.7.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對引起的高血糖小鼠餐后血糖的影響表7二氫楊梅素和楊梅素的組合物對高血糖型小鼠餐后血糖的影響組別動物數(shù)葡萄糖 0h 血糖值(mmol/L)(只)(g/kgBW) 0.5h 2h正常對照 10 1.520.4±5.131.2±2.724.7±3.7受 0.25g/kg 10 1.513.2±4.1* 26.4±4.216.5±6.6*試 0.50g/kg 10 1.515.3±6.427.1±5.716.9±7.2*物 1.50g/kg 10 1.517.1±6.328.4±4.320.2±7.2F值 3.0582.3933.536P值 0.0410.0850.024注受試物低劑組餐后0h血糖值和低中劑量組餐后2h血糖值與模型對照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。2.8.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對引起的高血糖小鼠糖耐量的影響表8二氫楊梅素和楊梅素的組合物對高血糖模型小鼠糖耐量的影響組別 動物數(shù) 血糖升高及降低幅度(mmol/L)(只)0.5h-0h0.5h-2h正常對照 10 10.8±3.2 6.5±2.9受試 0.25g/kg 10 13.3±1.7 9.9±3.0物 0.50g/kg 10 11.8±3.6 10.1±3.71.50g/kg 10 11.3±2.9 8.3±4.2F值1.301 2.255P值0.289 0.099注受試物各劑量組糖耐量值和模型對照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。實驗結果表明，二氫物梅素和楊梅素的組合物具有調節(jié)血糖作用。
用實施例1的第一種組合物、實施例2的第三種組合物、實施例5的第二種組合物或實施例6的組合物進行相同的試驗，得到了大致相同的結果。實施例8本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物降血脂的試驗將動物隨機分為4組，正常對照組、陽性對照組、模型對照組、提取液組。每組10只小鼠，一日一次，連續(xù)給藥10天，正常對照組不給任何藥。其余各組小鼠均給高脂乳劑0.5ml/只，形成實驗性高血脂，于10天用藥后禁食過夜，次日從小鼠眼眶取靜脈血，按酶法檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。結果表明，模型對照組血清TC、TG值明顯升高，HDL-C值下降，與模型對照比較，實施例5的第一種組合物組能明顯降低血清TC、TG值，還使HDL-C略有升高，說明此提取物能抑制高脂乳劑引起的小鼠血脂升高，具有降脂作用。用實施例1的第一種組合物、實施例2的第三種組合物、實施例5的第二種組合物或實施例6的組合物進行相同的試驗，得到相同的結果。1.材料和方法1.1.受試物實施例5獲得的第一種組合物，將受試物用蒸餾水配制成所需濃度的渾濁液供試驗用。1.2.實驗動物SPF級Wistar大鼠，體重170-190g，雌性，共55只(5只備用)。實驗溫度23-25℃，相對濕度65-70％。1.3.飼料1.3.1.普通基礎飼料配方略。(湖北省預防醫(yī)學科學院實驗動物中心配制的Wistar純鼠料)。1.4.劑量分組實驗分為五個組，即正常對照組、高脂模型對照組和受試物低、中、高三個劑量組，劑量分別為0.5、1.0、1.5g/kg.bw，相當于生產(chǎn)廠家推薦人體日攝入量3g/60kg.bw的10、20、30倍。1.5.實驗方法大鼠適應性飼養(yǎng)3天后開始實驗。取大鼠尾血，測定血清總膽固醇(TC0)、甘油三脂(TG0)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c0)基礎值。根據(jù)TC0水平，將大鼠隨機分成五組，每組10只動物，即低、中、高劑量組，正常對照組和高脂模型對照組。除正常對照組給予基礎飼料外，其余各組均給予高脂飼料。三個受試物劑量組按1.0ml/100g.bw的容量經(jīng)口灌胃給予，正常對照組和高脂模型對照組自由飲水進食。連續(xù)給予30天，于灌胃第30天檢測TC，TG，HDL-C值。1.6.主要儀器與試劑SABA-18型全自動生化分析儀(意大利產(chǎn))，標準質控血清及相應試劑盒均由上海復星長征醫(yī)學科學有限公司生產(chǎn)。1.7.數(shù)據(jù)處理采用STATA統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析2. 結果2.1.第一種組合物對高脂模型動物體重的影響從表9可見，與模型對照組比較，低、中、高劑量組在第四周時大鼠體重均低于模型對照組，低、中、高劑量組與模型對照組比較差異有顯著性(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)。
與正常對照組比較，低、中、高劑量組第四周體重均高于正常對照組，經(jīng)統(tǒng)計學分析，差異無顯著性。
表9 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對高血脂模型大鼠體重的影響(g，x±s)劑量 動物數(shù)體重g/kg.bw(只) 始重 第一周第二周 第三周 終重181.4±202.2±正常對照10219.6±4.7 226.2±3.7 230.7±4.0**2.86.2181.7±208.7±模型對照10224.5±4.4 231.4±3.5 237.6±3.73.52.6182.4±208.1±0.5 10221.7±3.4 227.9±3.4 233.6±3.0**4.1 2.6183.1± 207.0±1.0 10 221.5±2.4 227.7±2.0 233.2±2.1**2.8 2.5182.3± 208.3±1.5 10 220.3±3.2 226.2±3.8 232.7±3.1**2.5 2.8**與模型對照組比較P＜0.012.2.第一種組合物對大鼠總膽固醇含量的影響從表10可見，與模型對照組比較，實驗結束時中、高劑量組總膽固醇含量在實驗期間下降明顯，經(jīng)統(tǒng)計學分析，差異有顯著性(p＜0.05、P＜0.01)。表10含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對大鼠總膽固醇含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動物數(shù) 總膽固醇g/kg.bw(只) 試驗前 P值 試驗后 P值正常對昭10 1.80±0.070.7861.81±0.16 0.000模型對照10 1.81±0.11-3.72±0.34 -0.510 1.83±0.100.8033.35±0.55 0.2691.010 1.82±0.100.9283.10±0.54* 0.0101.510 1.84±0.110.6342.86±0.57** 0.001*與模型對照組比較P＜0.05，**與模型對照組比較P＜0.012.3.第一種組合物對大鼠甘油三酯含量的影響從表11可見，與模型對照組比較，試驗結束時低、中、高劑量組甘油三酯含量下降明顯，經(jīng)統(tǒng)計學分析，差異有顯著性(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)。
表11含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對大鼠甘油三酯含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動物數(shù) 總膽固醇g/kg.bw(只)試驗前 P值試驗后P值正常對照 101.24±0.25 0.828 1.29±0.11 0.000模型對照 101.26±0.27 - 2.30±0.47 -0.5 101.23±0.19 0.788 1.90±0.29* 0.0111.0 101.24±0.18 0.820 1.89±0.24** 0.0091.5 101.21 ±0.15 0.584 1.86±0.12** 0.008*與模型對照組比較P＜0.05，**與模型對照組比較P＜0.012.4.一種組合物對大鼠高密度脂蛋白膽固醇含量的影響從表12可見，與模型對照組比較，低、中、高劑量組對高密度脂蛋白膽固醇有升高作用，經(jīng)統(tǒng)計學分析，差異有顯著性(P＜0.05)。
表12 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對大鼠高密度脂蛋白膽固醇含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動物數(shù) 高密度脂蛋白膽固醇g/kg.bw(只)試驗前P值 試驗后 P值正常對照101.13±0.12 0.872 1.06±0.11 0.000模型對照101.12±0.18 - 0.84±0.11 -0.5 101.10±0.08 0.644 0.94±0.10*0.0271.0 101.13±0.09 0.841 0.93±0.07*0.0421.5 101.14±0.05 0.733 0.95±0.08*0.015*與模型對照組比較P＜0.052.5.第一種組合物對大鼠血脂水平的影響本實驗方法為高脂飼料與受試物同時給予，屬預防性，故TG、TC下降及HDL-c上升值均與高脂模型對照組比較。由表13可見，中、高劑量組總膽固醇含量下降幅度分別為16.7％、23.1％，低、中、高劑量組甘油三酯含量下降幅度分別為17.4％、17.8％、19.1％，低、中、高劑量組高密度脂蛋白膽固醇含量升高值為4.64、5.03、4.26mg/dl。
表13含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對大鼠血脂水平的影響劑量 動物數(shù)TCTG HDL-Cg/kg.bw (只)(％) (％)(mg/dl)0.5 10 10.3 17.4 4.641.0 10 16.7 17.8 5.031.5 10 23.1 19.1 4.26判斷標準 下降＞10％ 下降＞15％ 升高4mg/dl注HDL-c升高值(mg/dl)是mmol/L×38.7＝mg/dl換算結果用實施例1的第一種組合物、實施例2的第三種組合物、實施例5的第二種組合物或實施例6的組合物進行相同的試驗，得到了大致相同的結果。實施例9本發(fā)明的含有含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物增強免疫系統(tǒng)免疫力的功能的試驗1.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響1.1實驗目的觀察含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠吞噬功能的影響。1.2受試藥物名稱含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物溶劑熱雙蒸水用量0.5ml/20g小鼠1.3對照樣品聯(lián)苯雙酯；上海天平制藥廠，滬衛(wèi)藥準字(1995)第3765號-0111.4動物小鼠，昆明種，雄性，19～21g。
雞紅細胞5％濃度1.5方法昆明種小鼠，隨機分為5組，即對照組、含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物75、150、300mg/kg、聯(lián)苯雙酯150mg/kg，對照組給予生理鹽水，給藥組均口服給藥，每日1次，共6次，末次給藥同時腹腔注射0.5％水解乳蛋白1.5ml/只，24小時后腹腔注射5％雞紅細胞0.1ml，30分鐘后斷頭放血，用生理鹽水沖洗腹腔，收集腹腔巨噬細胞37℃孵育半小時，離心，沉淀物涂片，染色，油鏡下計數(shù)細胞，以下列公式計算，并與對照組比較。
1.6結果結果見表14，含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物低、中、高劑量均能促進小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞及增加吞噬指數(shù)，聯(lián)苯雙酯150mg/kg劑量組也能促進小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能。
表14.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響(x±SD)
**P＜0.01與模型對照組比較2.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響2.1實驗目的觀察含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響。2.2受試藥物名稱含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物溶劑熱雙蒸水用量0.5ml/20g小鼠2.3對照樣品聯(lián)苯雙酯；上海天平制藥廠，滬衛(wèi)藥準字(1995)第3765號-0112.4動物小鼠，C57BL/6，♂，19～21g。2.5其他材料刀豆球蛋白(ConA)Sigma產(chǎn)品，50μg/ml濃度3H-TdR上海原子核研究所，放射性濃度1mci/ml培養(yǎng)基RPMI-1640，內(nèi)含15％小牛血清、巰基乙醇、Hepes等2.6方法C57BL/6小鼠，隨機分為5組，即正常對照組、含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物75、150、300mg/kg、聯(lián)苯雙酯150mg/kg，每天口服給藥1次，連續(xù)7天，給藥結束后，處死動物無菌條件下取脾，計數(shù)脾細胞，并調整細胞濃度為1×107/ml，在96孔細胞培養(yǎng)板上每孔加細胞懸液100μl，ConA50μl，和培養(yǎng)液，各組均設三復管，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)48小時，加入3H-TdR0.5μci/孔，繼續(xù)培養(yǎng)18小時，用多頭細胞收集器收集細胞，在液閃儀上測CPM值，并與對照組比較，結果見表15。2.7結果表15.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響
*P＜0.05**P＜0.01與對照組比較結果表明，含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物有明顯的促進小鼠脾淋巴細胞增殖的作用，并以低劑量作用較其它兩組強。
用實施例1、實施例2和實施例6的組合物進行試驗，得到了大致相同的試驗結果，說明這些組合物都有增強免疫力的功能。
權利要求
1.一種降血脂藥物組合物，特征在于其含有降血脂有效量的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物。
2.權利要求1的組合物，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中含有20％至98％重量比的二氫楊梅素和2％至80％重量比的楊梅素。
3.權利要求1或2的組合物，特征在于其中所述組合物還含有一種或幾種選自下面的成分楊梅甙，沒食子酸和/或茶多酚。
4.權利要求3的組合物，特征在于其中楊梅甙的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，沒食子酸的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，茶多酚的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％。
5.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備降血脂的藥物組合物中的用途。
6.權利要求5的用途，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中含有20％至98％重量比的二氫楊梅素和2％至80％重量比的楊梅素。
7.權利要求5-6的任一項的用途，特征在于其中所述組合物還可含有一種或幾種選自下面的成分楊梅甙，沒食子酸和/或茶多酚。
8.權利要求7的用途，特征在于其中楊梅甙的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，沒食子酸的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，茶多酚的含量是二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％。
9.權利要求5-8任一項的用途，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物是從蛇葡萄屬植物中提取的。
10.權利要求7的用途，特征在于其中所述蛇葡萄屬植物包括粵蛇葡萄，棟葉玉葡萄，顯齒蛇葡萄，大葉蛇葡萄，白蘞，東北蛇葡萄和山葡萄。
11.權利要求5-6任一項的用途，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物是所述單體按照所述比例混合得到的。
全文摘要
本發(fā)明公開了含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備降血脂藥物中的用途，其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中二氫楊梅素含量是20％至98％重量比，楊梅素含量是2％至80％重量比。
文檔編號A61K31/353GK1481790SQ03123890
公開日2004年3月17日 申請日期2003年5月30日 優(yōu)先權日2003年5月30日
發(fā)明者任啟生, 宋新榮 申請人:任啟生, 宋新榮