專利名稱：稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物及其合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)合成藥物及其合成方法，涉及到稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類化學(xué)藥物及其合成方法。
背景技術(shù)：
流行性感冒是由流感病毒引起的急性上呼吸道傳染性疾病，具有傳染性高，傳播迅速，易發(fā)生流行等特點(diǎn)。若控制不及時(shí)將給人們的健康帶來嚴(yán)重的損害。目前FDA批準(zhǔn)用于防治流感的藥物只有金剛烷胺(amantadine)和金剛烷乙胺(rimantadine)，但由于它們抗病毒作用譜相對較窄，且易很快產(chǎn)生耐藥株，毒副作用較大，而使其應(yīng)用受到限制。因此對現(xiàn)有的抗流感病毒藥物進(jìn)行化學(xué)修飾，以希開發(fā)高效、廣譜、低毒的抗流感病毒藥物已成為研究者十分關(guān)注的研究課題。
雜多(同多)化合物的藥物化學(xué)研究自七十年代初就有報(bào)導(dǎo)，八十年代相繼發(fā)現(xiàn)具有Keggin結(jié)構(gòu)的中心原子為鍺或硼的含鎢系列雜多化合物體外對流感病毒有較強(qiáng)的抑制作用。九十年代末發(fā)現(xiàn)含稀土元素的雜多鎢酸鹽具有干擾病毒DNA及RNA轉(zhuǎn)錄酶的活性。近年來，日本的Shuichi Mori等報(bào)道雜多化合物[PriNH3]6H[PTi2W10O38(O2)]·H2O和抗流感病毒藥物病毒唑聯(lián)合用藥可縮短治療時(shí)間，且減少各自副作用，表明二者間具有協(xié)同作用。
本發(fā)明是利用多金屬氧酸鹽的特性，采用有機(jī)-無機(jī)雜化方法，對現(xiàn)有的抗流感病毒藥物進(jìn)行化學(xué)修飾，合成了叁類在現(xiàn)有報(bào)道中沒有的含有通式AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)的化合物作為抗流感病毒藥物。


附圖1-3為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物合成工藝流程圖。
附圖4為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于提供叁類抗流感毒活性高、毒性低、價(jià)格低廉的藥物。
本發(fā)明的目的之二在于提供叁種制備上述藥物的方法。
本發(fā)明的抗流感病毒藥物是以通式AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)所表示，具有Keggin和Lindqvist等結(jié)構(gòu)的多酸化合物，(A氨基酸離子，金剛烷胺，病毒唑等；B堿金屬；X為周期表中IIIA-VA族或d區(qū)過渡元素中的一種，M為Mo，W；Ln為鑭系元素中的一種，通常下，x＝0-5，y＝0-5，z＝0-1，m＝0-1，g＝1-2，p＝2-8，j＝6-8，q＝19-26，n＝2-15)，其中結(jié)構(gòu)中X為雜原子，通常以四面體構(gòu)型(XO4)與四個(gè)氧原子連接，M是配原子以八面體配位與周圍六個(gè)氧原子連接，結(jié)構(gòu)中共有四組三金屬簇(M3O13)，它們之間共頂點(diǎn)連接。
本化合物易溶于有機(jī)溶液中，本發(fā)明的抗流感病毒藥物溶液在pH＝3-8時(shí)化學(xué)性質(zhì)是穩(wěn)定的。
制備方法一將二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)103g(0.31mol)溶于250g水中，攪拌溶解。將含IIIA-VA族的化合物(例如氧化鍺、硼酸、硅酸鈉等)27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L26mL的NaOH溶液中，稀釋至135mL后加入到鎢酸鈉的容液中。將混合液加熱至80℃，反應(yīng)1h，萃取過濾，放置，得無色晶體。將此晶體溶于100ml蒸餾水中并向其中加入一定量氨基酸鹽或金剛烷胺鹽等，在35-70℃下攪拌1-3h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗滌得一定質(zhì)量白色固體AxBy[[LnzXM12O40]·n(H2O)。
制備方法二將二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)50g(0.207mol)溶解在200g蒸餾水中，向溶液中加入一定量氨基酸鹽或金剛烷胺鹽等(0.104mol)，在35-70℃下攪拌1-2h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗滌，得一定質(zhì)量白色固體Ap[MjOq]·n(H2O)。
制備方法三將二水合鎢酸鈉100g(0.303mol)，含IIIA-VA族化合物或d區(qū)過渡元素的化合物0.16mol(例如硼酸，硅酸鈉等)溶解在500g水中。加熱攪拌下滴加3M HCL，反應(yīng)1h，加入Ln(NO3)3溶液繼續(xù)攪拌30min，用KAC調(diào)pH再繼續(xù)攪拌20min，加入一定量的堿金屬鹽或金剛烷胺鹽等，攪拌，濾去不溶物。0-5℃放置，析出晶體。60℃溫水重結(jié)晶得純品。
一、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)(一)體外實(shí)驗(yàn)1、細(xì)胞病變法檢測藥物抗流感病毒的活性(1)實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞MDCK(狗腎細(xì)胞)病毒流感病毒A(H3N2/京科/30/95)培養(yǎng)液含10％胎牛血清的E-MEM培養(yǎng)液
(2)實(shí)驗(yàn)步驟I)CPE法測定病毒對MDCK細(xì)胞半數(shù)毒性濃度(TCID50)II)CPE法結(jié)合MTT法確定藥物對細(xì)胞的無毒濃度III)CPE法測定藥物抗流感病毒活性(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果I)病毒TCID50為7×10-5II)藥物取5個(gè)濃度既1600、800、400、200、100μg/ml進(jìn)行細(xì)胞毒性測定，每個(gè)濃度做4個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)細(xì)胞對照。結(jié)果顯示半數(shù)毒性濃度TC50為1064μg/mlIII)藥物取8個(gè)濃度既800、400、200、100、50、25、12.5、6.25μg/ml進(jìn)行抗病毒活性測定，每個(gè)濃度做4個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)病毒對照，陽性對照，及細(xì)胞對照。結(jié)果顯示半數(shù)抑制濃度IC50為11.5μg/ml。抗病毒指數(shù)TI為92.52、雞胚實(shí)驗(yàn)法測定藥物抗流感病毒的活性(1)實(shí)驗(yàn)材料雞胚來源于長春生物制品研究所病毒流感病毒A(H3N2)京科30/95(2)實(shí)驗(yàn)步驟I)化合物對雞胚半數(shù)致死量LD50II)病毒致雞胚半數(shù)感染劑量EID50的測定III)抗流感病毒活性實(shí)驗(yàn)將20 EID50的流感病毒接種于10日齡雞胚尿囊腔，每胚0.2ml，33℃溫箱中孵育1h，化合物配制成濃度為2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg/mL，每一濃度接種10只10日齡雞胚，每胚0.2ml，設(shè)病毒對照，溶劑對照及陽性對照，置33-35℃溫箱孵育，72h將雞胚放置4℃冰箱內(nèi)過夜，次日收集雞胚尿囊液，檢查雞胚尿囊液的血凝性，如不出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，說明化合物對病毒具有抑制作用。
(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果I)化合物對雞胚半數(shù)致死量LD50為12mg/mLII)病毒致雞胚半數(shù)感染計(jì)量EID50為10-5III)化合物抗流感病毒半數(shù)有效濃度ED50為0.17mg/mL(二)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)材料受試藥物POMS-1
實(shí)驗(yàn)動物吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部提供，昆明小鼠，體重18±2g，雌雄各半。
采用隨機(jī)分組方式，每組10只。
病毒流感病毒FM1，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物技術(shù)研究所病毒室提供。
2、實(shí)驗(yàn)步驟(1)病毒FM1致小鼠的半數(shù)致死量LD50(2)藥物對FM1型流感病毒感染小鼠治療效果小鼠用乙醚麻醉，滴鼻感染4LD50的FM1病毒，每只0.04ml，感染后立刻給藥，口服給藥物劑量每次0.5ml。實(shí)驗(yàn)分三個(gè)劑量組，即200，100，50mg/kg，同時(shí)設(shè)陽性對照，病毒對照，正常對照。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)病毒FM1致小鼠半數(shù)致死量LD50為2.5×10-5(2)藥物對FM1型病毒感染小鼠治療效果表1.藥物對FM1型感染小鼠死亡的治療結(jié)果劑量 死亡數(shù) 生存數(shù) 死亡率 死亡保護(hù)率 平均生活日 延長生命率藥物 mg/kg ％％ d ％POMS 200 010 0 100 14 105.9100 282080 13 94.150 464060 12 91.2病毒唑200 373070 12.888.2病毒對照 91906.8POMS對照 200 010正常對照 010 0 100EC50＝26.4mg/kg二、急性毒性實(shí)驗(yàn)昆明小鼠，體重18-22g，分6個(gè)劑量組，每組10只雌雄各半，采用完全隨機(jī)法分組，最高劑量10000mg/kg，最低劑量1000mg/kg，公比為1.58。各劑量組等比稀釋，按0.2mL/20g體重經(jīng)口灌胃給藥，實(shí)驗(yàn)前禁食12h，給藥后觀察小鼠中毒反應(yīng)，記錄小鼠死亡時(shí)間，并作尸體解剖，連續(xù)觀察一周，采用改良寇氏法計(jì)算LD50結(jié)果見表。
表1雜多化合物的LD50統(tǒng)計(jì)計(jì)算方法組別劑量(mg/kg) 劑量對數(shù) 動物數(shù) 死亡數(shù)p q＝1-p pq610000.00 4.00 10 10 1.0 0.0 0.00
5 6309.57 3.80.10 9 0.9 0.1 0.094 3981.07 3.60 10 6 0.6 0.4 0.243 2511.89 3.40 10 5 0.5 0.5 0.252 1584.89 3.20 10 1 0.1 0.9 0.091 1000.00 3.00 10 0 0.0 1.0 0.00合計(jì) 3.1 2.9 0.67LD503044.33mg/kgLD5095％可信限2219.69～4141.90mg/kg四、結(jié)論藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)體外(1)CPE法測得半數(shù)毒性濃度TC50為1064μg/ml，半數(shù)抑制濃度IC50為11.5μg/ml，抗病毒指數(shù)TI為92.5。(2)雞胚實(shí)驗(yàn)法測得半數(shù)致死量LD50為12mg/mL，病毒致雞胚半數(shù)感染計(jì)量EID50為10-5，藥物抗流感病毒半數(shù)有效濃度ED50為0.17mg/mL，抗病毒指數(shù)TI為70.6。體內(nèi)(1)病毒FM1致小鼠半數(shù)致死量LD50為2.5×10-5(2)藥物對FM1型病毒感染小鼠治療效果EC50＝26.4mg/kg。
急性毒性實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)急性毒性實(shí)驗(yàn)，半數(shù)致死量LD50為3375mg/kg。本發(fā)明對流感病毒抑制活性較高，毒性較低，價(jià)格低廉，如若順利完成必將產(chǎn)生較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

附圖1為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物合成工藝流程圖。
附圖2為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物合成工藝流程圖。
附圖3為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物合成工藝流程圖。
附圖4為稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施方式1將二水合鎢酸鈉103g(0.312mol)溶于250g水中，攪拌溶解。將氧化鍺27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀釋至135mL后加入到鎢酸鈉的容液中。將混合液加熱至80℃，反應(yīng)1h，萃取過濾，放置，得無色晶體。將此晶體溶于100ml蒸餾水中并向其中加入金剛烷胺鹽酸鹽19g(0.101mol)，在35-70℃下攪拌1-3h，得白色沉淀物。沉淀物用少量水洗滌得一定質(zhì)量白色固體(C10H18N)4[GeW12O40]·n(H2O)。
實(shí)施方式2將鉬酸鈉50g(0.207mol)溶解在200g蒸餾水中，用6.0M HCl酸化，向溶液中加入金剛烷胺鹽3g(0.016mol)，在40℃下攪拌1-2h，得一定質(zhì)量白色固體(C10H18N)4Mo8O26·n(H2O)。
實(shí)施方式3將二水合鎢酸鈉100g(0.303mol)，硼酸10g(0.16mol)溶解在500g水中。加熱90°C在不斷攪拌下滴加3M HCL調(diào)pH＝6.5，然后加入Ce(NO3)3溶液繼續(xù)攪拌30min，用KAC調(diào)pH＝6再繼續(xù)攪拌20min，加入一定量的堿金屬鹽或金剛烷胺鹽等，攪拌，濾去不溶物。0-5℃放置，得K15[Ce(BW11O39)2]·n(H2O)。
權(quán)利要求
1.一種稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物，其特征是通式以AxBy[Lnz(XM12-mO40-m)g]·n(H2O)和Ap[MjOq]·n(H2O)所表示，具有Keggin和Lindqvist等結(jié)構(gòu)的多酸化合物，(A氨基酸離子，金剛烷胺，病毒唑等；B堿金屬；X為周期表中IIIA-VA族或d區(qū)過渡元素中的一種，M為Mo，W；Ln為鑭系元素中的一種，通常下，x＝0-5，y＝0-5，z＝0-1，m＝0-1，g＝1-2，p＝2-8，j＝6-8，q＝19-26，n＝2-15)，其中結(jié)構(gòu)中X為雜原子，通常以四面體構(gòu)型(XO4)與四個(gè)氧原子連接，M是配原子以八面體配位與周圍六個(gè)氧原子連接，結(jié)構(gòu)中共有四組三金屬簇(M3O13)，它們之間共頂點(diǎn)連接。
2.一種稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是將二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)103g(0.31mol)溶于250g水中，攪拌溶解，將含IIIA-VA族的化合物(例如氧化鍺、硼酸、硅酸鈉等)27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀釋至135mL后加入到鎢酸鈉的容液中，將混合液加熱至80℃，反應(yīng)1h，萃取過濾，放置，得無色晶體，將此晶體溶于100ml蒸餾水中并向其中加入一定量氨基酸鹽或金剛烷胺鹽等，在35-70℃下攪拌1-3h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗滌得一定質(zhì)量白色固體AxBy[[LnzXM12O40]·n(H2O)。
3.一種稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是將二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)50g(0.207mol)溶解在200g蒸餾水中，向溶液中加入一定量氨基酸鹽或金剛烷胺鹽等(0.104mol)，在35-70℃下攪拌1-2h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗滌，得一定質(zhì)量白色固體Ap[MjOq]·n(H2O)。
4.一種稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是將二水合鎢酸鈉100g(0.303mol)，含IIIA-VA族化合物或d區(qū)過渡元素的化合物0.16mol(例如硼酸，硅酸鈉等)溶解在500g水中，加熱攪拌下滴加3M HCL，反應(yīng)1h，加入Ln(NO3)3溶液繼續(xù)攪拌30min，用KAC調(diào)pH再繼續(xù)攪拌20min，加入一定量的堿金屬鹽或金剛烷胺鹽等，攪拌，濾去不溶物，0-5℃放置，析出晶體，60℃溫水重結(jié)晶得純品。
5.按照權(quán)利要求1所述的稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是液加熱至80℃，反應(yīng)1h，萃取過濾，放置，得無色晶體，將此晶體溶于100ml蒸餾水中并向其中加入金剛烷胺鹽酸鹽19g(0.101mol)，在35-70℃下攪拌1-3h，得白色沉淀物，沉淀物用少量水洗滌得一定質(zhì)將二水合鎢酸鈉103g(0.312mol)溶于250g水中，攪拌溶解，將氧化鍺27.24g(0.26mol)溶解在2mol/L 26mL的NaOH溶液中，稀釋至135mL后加入到鎢酸鈉的容液中，將混合量白色固體(C10H18N)4[GeW12O40]·n(H2O)。
6.按照權(quán)利要求2所述的稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是將鉬酸鈉50g(0.207mol)溶解在200g蒸餾水中，用6.0M HCl酸化，向溶液中加入金剛烷胺鹽3g(0.016mol)，在40℃下攪拌1-2h，得一定質(zhì)量白色固體(C10H18N)4Mo8O26·n(H2O)。
7.按照權(quán)利要求3所述的稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類抗流感病毒藥物的合成方法，其特征是將二水合鎢酸鈉100g(0.303mol)，硼酸10g(0.16mol)溶解在500g水中，加熱90℃在不斷攪拌下滴加3M HCL調(diào)pH＝6.5，然后加入Ce(NO3)3溶液繼續(xù)攪拌30min，用KAC調(diào)pH＝6再繼續(xù)攪拌20min，加入一定量的堿金屬鹽或金剛烷胺鹽等，攪拌，濾去不溶物，0-5℃放置，得K15[Ce(BW11O39)2]·n(H2O)。
全文摘要
本發(fā)明屬于化學(xué)合成藥物及其合成方法，涉及到稀土雜多(同多)酸鹽(藍(lán))類化學(xué)藥物及其合成方法。流行性感冒是由流感病毒引起的急性上呼吸道傳染性疾病，具有傳染性高，傳播迅速，易發(fā)生流行等特點(diǎn)。若控制不及時(shí)將給人們的健康帶來嚴(yán)重的損害。本發(fā)明是利用多金屬氧酸鹽的特性，采用有機(jī)－無機(jī)雜化方法，對現(xiàn)有的抗流感病毒藥物進(jìn)行化學(xué)修飾，合成了叁類含有通式A
文檔編號A61K31/28GK1493277SQ03127148
公開日2004年5月5日 申請日期2003年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月9日
發(fā)明者王恩波, 李娟 , 李靜, 齊燕飛, 王宏芳, 許林, 吳新宇 申請人:東北師范大學(xué)