專利名稱：一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑及其制備方法，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)中，“小金丸”屬《中國(guó)藥典》1995版收載品種，為“小金丹”的改劑型，是由麝香、木鱉子去殼去油、制草烏、楓香脂、制乳香、制沒藥、醋炒五靈脂、地龍、酒炒當(dāng)歸、香墨為原料制成，首載于清.王維德《外科證治全生集》，能治“一應(yīng)流注，痰核，乳巖，橫痃，貼骨疽等癥。”臨床運(yùn)用較為廣泛，后世醫(yī)家每每用之以療外科諸疾，并取得較好效果?，F(xiàn)在醫(yī)家在運(yùn)用小金丹治療外科疾患上積累了豐富經(jīng)驗(yàn)，并對(duì)其基本功能主治有所發(fā)展，以小金丹原方制成的丸劑被《中國(guó)藥典》所收載。
但是由于本品為散結(jié)消腫、化瘀止痛的方藥，需選擇易于保管、攜帶、吞服方便的固體制劑，但“小金丸”屬傳統(tǒng)劑型，每丸重0.6g，病人不易吞服，而且需要打碎后服用，病人服用極不方便，且不衛(wèi)生，藥量有很大損失；由于大部分藥材中含有水不溶性成份，制備復(fù)雜，原工藝采用麝香與其余九味配研，過篩，制水泛丸，干燥(溫度在50℃～70℃)，有效成份損失較多，鑒別方法單一，只對(duì)丸劑作定性鑒別，無指標(biāo)性成份，質(zhì)量控制不易。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明屬于“小金丸”的改劑型，其目的就是克服上述丸劑的缺點(diǎn)，提高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提供一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑。
本發(fā)明還提供了該膠囊劑的制備方法，通過將原料麝香與其它藥材分開制粒，有效成分損失較少，且提供較高的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
本發(fā)明提供一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑，該膠囊劑中含有麝香酮，其中每單位制劑中麝香酮含量不低于0.1mg。
本發(fā)明還提供了該膠囊劑的制備過程，包括下列步驟
a、稱取下列中藥材為原料麝香6.76～8.26份、木鱉子去殼去油33.8～41.3份、制草烏33.8～41.3份、楓香脂33.8～41.3份、制乳香16.85～20.37份、制沒藥16.85～20.37份、醋炒五靈脂33.8～41.3份、地龍33.8～41.3份、酒炒當(dāng)歸16.85～20.37份、香墨2.7～3.304份；b、將麝香以外的九味中藥材打粉，過篩；c、取總藥含量的5％～6.4％的淀粉，其中50％制成淀粉糊；d、將b步驟所得到的細(xì)粉80％與c步驟剩余的淀粉混合，加入c步驟所得的淀粉糊，制軟材，制顆粒，干燥；e、將麝香與剩余藥粉，加入95％乙醇，混合，制軟材，制顆粒，干燥；f、將d步驟與e步驟制得的顆?；旌?，裝膠囊，包裝，即得。
其中步驟d中干燥溫度為49℃～55℃。步驟e中干燥溫度為28℃～30℃。
步驟a中稱取下列中藥材為原料，其重量配比為麝香6.76～8.26份、木鱉子去殼去油33.8～41.3份、制草烏33.8～41.3份、楓香脂33.8～41.3份、制乳香16.85～20.37份、制沒藥16.85～20.37份、醋炒五靈脂33.8～41.3份、地龍33.8～41.3份、酒炒當(dāng)歸16.85～20.37份、香墨2.7～3.30份。
具體地，其重量配比為麝香7.5份、木鱉子去殼去油37.5份、制草烏37.5份、楓香脂37.5份、制乳香18.7份、制沒藥18.7份、醋炒五靈脂37.5份、地龍37.5份、酒炒當(dāng)歸18.7份、香墨3.0份。
本發(fā)明方法的原料中藥材組方主治病證，其病因、部位、病狀雖各有所異，而全方面針對(duì)以寒凝、氣滯、血瘀、痰結(jié)為主要病機(jī)關(guān)鍵者而設(shè)，故以散結(jié)消腫，化瘀止痛為治。
麝香辛溫，走竄經(jīng)絡(luò)而行血分之滯，活血散結(jié)，消腫止痛之功卓著，前人謂之“其性芳烈，上達(dá)肌膚，內(nèi)入骨髓”《醫(yī)學(xué)入門》；“蓋香麝香走竄，能通諸竅之不利，開經(jīng)絡(luò)之壅遏，若諸風(fēng)、諸氣、諸血、諸痛、驚癇、徵瘕諸病，經(jīng)絡(luò)壅閉，孔竅不利者，安得不用為引導(dǎo)，以開之通之耶？”(《本草綱目》)，說明本品作用部位廣泛，是為方中君藥。木鱉子去殼去油長(zhǎng)于散結(jié)消腫，且有祛痰素毒之功；制草烏溫經(jīng)散寒止痛；醋炒五靈脂、制乳香、制沒藥活血祛瘀、消腫止痛；地龍通絡(luò)，楓香脂活血止痛解毒。以上七味是方中臣藥。佐以酒炒當(dāng)歸溫潤(rùn)，養(yǎng)血活血；香墨消腫化痰，是為方中佐藥。諸藥相配，溫通、活血、消腫、散結(jié)之力甚強(qiáng)，可使寒散絡(luò)通，痰消瘀化，結(jié)塊漸消，癰腫自平。
本發(fā)明膠囊劑可治療乳質(zhì)增生，濃瘍，術(shù)后不生肌，傷口不愈合，子宮肌瘤，前列腺肥大，乳腺癌等，藥理研究有顯著抗炎、抗菌、鎮(zhèn)痛作用，有顯著免疫增強(qiáng)作用，有改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和腫瘤患者血液流變性的作用，且作用明顯優(yōu)于普通工藝制備的丸劑。
本發(fā)明膠囊劑不僅具有保管、攜帶、服用方便等特點(diǎn)，且利用亦優(yōu)于丸劑，而且能掩蓋木鱉子的不良?xì)馕?；防止揮發(fā)性成份在貯存過程中的損失，質(zhì)量穩(wěn)定；在制備工藝中，采用低溫干燥，濃乙醇制粒等方法，將麝香與其它藥材分開制粒，并在30℃以下干燥，能防止有效成份揮發(fā)，保證了較高的有效成分的含量；在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，由定性改為定量，有利于控制本發(fā)明膠囊劑的質(zhì)量。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實(shí)施例方式
實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明膠囊劑的制備a、稱取下列中藥材為原料麝香1.50kg、木鱉子去殼去油7.50kg、制草烏7.50kg、楓香脂7.50kg、制乳香3.74kg、制沒藥3.74kg、醋炒五靈脂7.50kg、地龍7.50kg、酒炒當(dāng)歸3.74kg、香墨0.60kg，95％乙醇400ml，淀粉3.26kg，純化水14.0kg；b、將麝香以外的九味中藥材打粉，過篩；c、粘合劑的配制稱取2kg純化水，倒入潔凈的不銹鋼配液桶中，加入1.74kg淀粉不斷攪拌，將12kg煮沸的純化水倒入配液桶中攪拌成半透明狀；d、混合制軟材將剩余1.52kg淀粉同40kg藥粉加入槽形混合機(jī)中，開啟混合機(jī)混合10分鐘，緩慢加入適量的淀粉漿，當(dāng)制得的軟材捏之成團(tuán)，輕壓即散時(shí)即停止攪拌。制軟材后，制顆粒，干燥，即將制得的顆粒用烘盤盛裝，(烘盤上應(yīng)先鋪烘布再加藥)厚度不超過3.5cm為宜，烘盤應(yīng)從上往下依次放上烘車，放滿后將烘車推進(jìn)烘房進(jìn)行干燥，干燥溫度不超過55℃為宜。
e、將剩余藥粉同麝香加入槽形混合機(jī)內(nèi)攪拌混合10分鐘，加入適量的95％乙醇混合10分鐘，當(dāng)制得的軟材捏之成團(tuán)，輕壓即散時(shí)即停止攪拌，制得軟材后，制顆粒，干燥即將制得的顆粒用烘盤盛裝，(烘盤上應(yīng)先鋪烘布再加藥)厚度不超過3.0cm為宜，烘盤應(yīng)從上往下依次放上烘車，推進(jìn)另一烘房?jī)?nèi)，在28℃干燥2小時(shí)，至水分為7％(水分快速測(cè)定儀檢測(cè))后收料。
f、將d與e步驟所得的顆?；旌?，整粒，裝膠囊，包裝，即得。
選用不同劑量的原料藥，不同工藝條件，可制得單位制劑含量不同且有效成分含量較高的膠囊劑。
實(shí)驗(yàn)例2 本發(fā)明膠囊劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)方法1、性狀本發(fā)明膠囊劑。外觀應(yīng)整潔、不得有粘結(jié)、變形或破裂現(xiàn)象，應(yīng)無異臭。內(nèi)容物為黃褐色粉末；氣香，味微苦。
2、鑒別2.1鑒別1取本品，研細(xì)，置顯微鏡下觀察石細(xì)胞長(zhǎng)方形或類方形，壁稍厚。子葉細(xì)胞長(zhǎng)方形或多角形，含糊粉粒及脂肪油塊。薄壁細(xì)胞紡錘形，壁略厚，有極微細(xì)的斜向交錯(cuò)紋理。無定形團(tuán)塊淡黃棕色，埋有細(xì)小方形結(jié)晶。肌纖維成層，無色、微黃色或淡棕色，微波狀彎曲，有時(shí)呈垂直交錯(cuò)排列。
2.2鑒別2取本品5g，研細(xì)，加乙醚30ml，浸泡過夜，濾過，濾液揮至約3ml，作為供試溶液。另取楓香脂對(duì)照藥材0.5g，加乙醚10ml，浸泡3小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約5ml，作為對(duì)照藥材溶液。照《薄層色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl，對(duì)照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-正己烷(19∶1)為展開劑，展開(20℃以下)，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色的斑點(diǎn)。
2.3鑒別3取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g，加醋酸乙酯5ml，浸泡2小時(shí)，濾過，濾液作為對(duì)照藥材溶液。照《薄層色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》試驗(yàn)，吸取鑒別(3)項(xiàng)下的供試品溶液10μl，及上述對(duì)照藥材5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯(7∶3)為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
3、含量測(cè)定照《氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》測(cè)定。
3.1系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以苯基(50％)甲基硅酮(OV-17)為固定相，涂布濃度為2％；柱溫170±5℃；理論板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算，應(yīng)不低于1500。
3.2對(duì)照品溶液的制備取麝香酮對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照溶液。
3.3供試品溶液制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，研勻，取約5g，精密稱定，置揮發(fā)油提取器中，加水300ml，氫氧化鈉試液1.5ml，正己烷1ml，緩緩加熱到沸，在保持刻度部分正己烷層約1ml的情況下(不足時(shí)可從冷凝管頂部加入)，保持沸騰3小時(shí)(冷凝管口應(yīng)有明顯的冷凝液體滴下，但燒瓶中的液體不能暴沸)；停止加熱，放冷到室溫，分取正己烷層，水層用正己烷洗滌，合并正己烷并定容至2.0ml，離心，取上清液作為供試品溶液。
3.4測(cè)定法分別精密量取對(duì)照溶液與供試品溶液各10μl，注入氣相色譜儀，測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算即得。
3.5本品每粒含麝香按麝香酮(C16H30O)計(jì)，結(jié)果得含量范圍為不低于0.1mg。
以下通過試驗(yàn)來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，包括藥效試驗(yàn)和毒理試驗(yàn)。
試驗(yàn)例1本發(fā)明膠囊劑的抗炎試驗(yàn)一、本發(fā)明膠囊劑對(duì)急性炎癥模型的影響(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)-3169號(hào)；阿斯匹林，陽(yáng)性對(duì)照品，西北第二合成藥廠生產(chǎn)，陜衛(wèi)藥準(zhǔn)字(82)00503號(hào)；配液后備用。生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物SD大鼠，150-175g，雄性，一級(jí)動(dòng)物，由四川省抗菌素研究所提供，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管第92號(hào)。檢疫后備用。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用大鼠足跖浮腫法[1]，取大鼠50只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(N＝10)、阿斯匹林組(N＝10)、小金丸組(N＝10)，本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)，本發(fā)明膠囊劑大劑量組(N＝10)。各組動(dòng)物于致炎前30分鐘，右后足跖腱膜下注射10％蛋清液0.05ml。按組分別灌胃生理鹽水2ml/kg、15％阿斯匹林藥液2ml/kg、25％小金丸藥液2ml/kg、25％本發(fā)明膠囊劑藥液2ml/kg和8ml/kg。用微量吸管法測(cè)定致炎前和致炎后30、60、120、240、360min大鼠右后足容積，計(jì)算腫脹度。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果大鼠灌胃阿斯匹林、小金丸、本發(fā)明膠囊劑藥液后，均能明顯抑制蛋清性足跖腫脹與空白對(duì)照組比較，有極顯著性差異。但本發(fā)明膠囊劑小劑量組的作用較阿斯匹林為差。詳見表1。
表1.本發(fā)明膠囊劑對(duì)急性炎癥大鼠足跖腫脹度(ml)的影響(X±SD)組別 動(dòng)物劑量 30min60min 120min 240min 360min(只)(g/kg)空白對(duì)照 10 0.85±0.18 0.71±0.170.59±0.20 0.53±0.170.39±0.17阿斯匹林 10 0.30 0.33±0.50**031±0.05**0.29±0.02**0.21±0.04**0.061±0.04**小金丸10 0.50 0.43±0.14**0.33±0.16**0.25±0.12**0.19±0.10**0.08±0.06**小劑量10 0.50 0.44±0.07**△△0.33±0.07**0.32±0.06**0.15±0.10**0.07±0.06**大劑量10 2.00 0.35±0.07**0.31±0.07**0.30±0.06**0.16±0.08**0.07±0.06**注與空白對(duì)照組比較**P＜0.01；
與阿斯匹林比較△△P＜0.01。
二、本發(fā)明膠囊劑對(duì)慢性炎癥模型的影響(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例2制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)；阿斯匹林，陽(yáng)性對(duì)照品，西北第二合成藥廠生產(chǎn)，陜衛(wèi)藥準(zhǔn)字(82)00503號(hào)；配液后備用。生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物SD大鼠，185-215g，雄性，一級(jí)動(dòng)物，由四川省抗菌素研究所提供，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管第92號(hào)。檢疫后備用。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用巴豆油氣囊法[2]，取大鼠50只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(N＝10)、阿斯匹林組(N＝10)、小金丸組(N＝10)，本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)，本發(fā)明膠囊劑大劑量組(N＝10)。各組動(dòng)物乙醚淺麻醉，局部消毒后，于背部肩胛間區(qū)皮下注射20ml空氣形成氣囊，隨機(jī)向氣囊注入1％巴豆油1ml，立即將鼠背朝下，徐徐轉(zhuǎn)動(dòng)，使巴豆油均勻地與囊壁組織接觸。24h后抽去囊內(nèi)空氣。致炎當(dāng)日開始給藥，給藥方法同前。每日一次，連續(xù)7d。末次給藥24h后，處死動(dòng)物，測(cè)定囊內(nèi)滲出液，剝離囊壁肉芽腫，稱濕重。比較各組滲出液量和囊壁重量。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組，阿斯匹林組抑制炎癥性滲出物的作用，明顯優(yōu)于空白對(duì)照和小金丸組。本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組，阿斯匹林組，小金丸組抑制炎性肉芽腫的作用，明顯優(yōu)于空白對(duì)照組；小金丸組、本發(fā)明膠囊劑小劑量組抑制炎性肉芽腫的作用，較阿斯匹林為弱；本發(fā)明膠囊劑大劑量組抑制炎性肉芽腫的作用明顯優(yōu)于小金丸組。詳見表2。
表2.本發(fā)明膠囊劑對(duì)大鼠慢性炎癥的影響(X±SD)

注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與阿斯匹林組比較；△△P＜0.01；與小金丸組比較○P＜0.05，○○P＜0.01。
(四)結(jié)論本發(fā)明膠囊劑能明顯抑制大鼠足跖腫脹，抗炎性滲出和肉芽增生。本發(fā)明膠囊劑大劑量組的作用與阿斯林相當(dāng)，且抗炎性滲出和肉芽增生的作用明顯優(yōu)于小金丸。
試驗(yàn)例2本發(fā)明膠囊劑的鎮(zhèn)痛試驗(yàn)一、本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠熱刺激痛閾值的影響。
(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)-3169號(hào)；哌替啶，陽(yáng)性對(duì)照品，宜昌制藥廠生產(chǎn)；配液后備用；配液后備用。生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。2、動(dòng)物昆明種小鼠，18-22g，雌性，一級(jí)動(dòng)物，由四川抗菌素研究所提供，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第85號(hào)。檢疫后備用。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用熱板法[3]，取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(N＝50)、哌替啶組(N＝10)、小金丸(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑大劑量(N＝10)。各組動(dòng)物給藥前測(cè)定痛閾值。將小鼠放于55±0.5℃恒溫水浴中的金屬板上，以踢腿、添后足、跳躍作為痛反應(yīng)指示。選擇痛反應(yīng)潛伏期不超過30s的小鼠，作為實(shí)驗(yàn)用。給藥前先測(cè)定痛閾2次，起平均值不超過為該小鼠給藥前的痛閾值。按組分別灌胃生理鹽水2ml/kg、10％哌替啶4ml/kg、5％小金丸藥液2ml/kg\25％本發(fā)明膠囊劑藥液2ml/kg和8ml/kg.給藥后，測(cè)定30、60、90、120min各組動(dòng)物的痛閾值，如果超過60s者，即停止試驗(yàn)，以60s計(jì)。比較各組不同時(shí)間的痛閾值。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組，哌替啶組，小金丸組均能明顯提高小鼠的痛閾值，與空白對(duì)照組比較有顯著性或極顯著性差異。但各組不同時(shí)間作用強(qiáng)度不同，給藥后30min，哌替啶組鎮(zhèn)痛作用較強(qiáng)，本發(fā)明膠囊劑作用較弱，本發(fā)明膠囊劑小劑量組、小金丸組作用較弱；給藥后120min，哌替啶組作用較弱，本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組作用較強(qiáng)，與空白對(duì)照組比較有顯著性或極顯著性差異。詳見表3。
表3本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠熱刺激痛閾值(S)的影響(X±SD)組別 動(dòng) 物 劑 量 給藥前 給藥后(只) (g/kg) 30min60min 90min 120min空白對(duì)照 1018.90±4.56 21.70±4.83 22.40±4.4321.90±6.7120.70±6.63哌替啶100.0219.40±2.80 46.40±8.75**38.80±9.47**35.50±9.44**24.40±3.50小金丸100.5 20.30±1.55 34.50±13.79*△34.10±12.15*28.10±5.11*24.40±5.93小劑量100.5 18.75±3.08 29.30±12.52△△30.80±6.56**28.80±5.22*26.90±2.88*△△大劑量102 19.95±3.24 38.30±9.56**34.40±7.72**30.80±9.93*26.90±8.81*△注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與哌替啶組比較△P＜0.05，△△P＜0.01；二、本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠化學(xué)刺激性疼痛的影響(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)-3169號(hào)；哌替啶，陽(yáng)性對(duì)照品，宜昌制藥廠生產(chǎn)；配液后備用；配液后備用。生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物昆明種小鼠，18-22g，雌性，一級(jí)動(dòng)物，由四川抗菌素研究所提供，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第85號(hào)。檢疫后備用。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用小鼠扭體法[4]，取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(N＝50)、哌替啶組(N＝10)、小金丸組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑大劑量(N＝10)。按組分別灌胃給藥，給藥劑量同前。給藥30min后，每只小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸10ml/kg，觀察記錄出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期和扭體反應(yīng)的次數(shù)。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊劑大、小計(jì)量組，哌替啶組，小金丸組均能明顯延長(zhǎng)扭體反映的潛伏期和減少反應(yīng)的次數(shù)。其中哌替啶組明顯優(yōu)于小金丸組和本發(fā)明膠囊劑小劑量組；本發(fā)明膠囊劑大劑量組明顯優(yōu)于小金丸組，詳見表4。
表4.本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠扭體反映的影響(X±SD)組別 動(dòng)物(只)劑量(g/kg)潛伏期(min) 扭體次數(shù)(次/15min)空白對(duì)照10 2.45±0.99 35.30±16.73哌替啶 10 0.0210.31±4.32**11.80±10.11**小金丸 10 0.5 4.48±1.07**△△20.90±4.09*△小劑量 10 0.5 5.47±2.96**△△21.23±9.56*△大劑量 10 2.007.06±4.50**13.10±9.99**△△
注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與阿斯匹林組比較；△P＜0.05，△△P＜0.01；與小金丸組比較○P＜0.05；(四)結(jié)論本發(fā)明膠囊劑具有明顯的鎮(zhèn)痛效果，其作用較小金丸略強(qiáng)，尤其是止痛效力較好。
試驗(yàn)例3本發(fā)明膠囊劑活血化瘀試驗(yàn)通過本試驗(yàn)觀察本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠腸系膜微動(dòng)脈、微靜脈、毛細(xì)血管的影響，以評(píng)價(jià)本發(fā)明膠囊劑的活血化瘀作用。
(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)-3169號(hào)；生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重20～24g，由四川省抗菌素研究所提供，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第92號(hào)。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用小鼠腸系膜循環(huán)觀察法[5]，取昆明種小鼠40只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(N＝10)、小金丸組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑大劑量組(N＝10)。按組分別灌胃生理鹽水2ml/kg、25％小金丸藥液2ml/kg、25％本發(fā)明膠囊劑藥液2ml/kg和8ml/kg，連續(xù)給藥7d。第7d給藥30min后，腹腔注射1％戊巴比妥鈉5ml/kg，麻醉后仰臥，剖腹，從腹腔輕輕拉出腸系膜，置38℃左右臺(tái)氏液腸系膜灌流盒中，WX-6型多部位微循環(huán)儀觀察腸系膜微血管A3、V3管徑和毛細(xì)血管開放數(shù)。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊劑小劑量組和大劑量組、小金丸組均能擴(kuò)張腸系膜微血管A3、V3管徑，增加毛細(xì)血管開放數(shù)，與龍百對(duì)照組比較有顯著性或極顯著性差異。其中，本發(fā)明膠囊劑大劑量組擴(kuò)張微血管A3管徑的作用明顯優(yōu)于小金丸組。結(jié)果詳見表5。
表5.本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠腸系膜微循環(huán)的影響(X±SD)組別 動(dòng)物(只)劑量(g.kg)微血管口徑(ug) 毛細(xì)血管開放A3V3 數(shù)(根/mm2)空白對(duì)照10 45.56±3.82 65.39±6.44 4.00±0.67小金丸 10 0.50 49.83±4.71* 71.75±6.77*8.40±2.22**小劑量 10 0.50 50.74±5.84* 74.16±7.38*7.80±1.40**大劑量 10 2.00 55.60±4.13**△△75.97±9.34** 8.60±1.71**注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與哌替啶組比較△△P＜0.01。
(四)結(jié)論本發(fā)明膠囊劑能明顯擴(kuò)張微血管A3、V3的管徑，增加毛細(xì)血管開放數(shù)。提示本發(fā)明膠囊劑具有活血化瘀作用。
試驗(yàn)例4本發(fā)明膠囊劑的抗癌試驗(yàn)一、本發(fā)明膠囊劑抗動(dòng)物移植性乳腺癌試驗(yàn)(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)--3169號(hào)；生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物BALB/C-nu/nu小鼠，雌性，體重19±1g，由華西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，檢疫后備用。乳腺癌SCC891 BALB/C荷瘤小鼠，由第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所提供。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用實(shí)體瘤法[6]，選擇腫瘤生長(zhǎng)旺盛，且無破潰，健康的乳腺癌SCC891BALB/C荷瘤小鼠，脫臼處死，固定于手術(shù)板上，消毒，層流架內(nèi)無菌條件下切開皮膚，剝離腫瘤，并切成直徑為2mm的小塊，用套管針在BALB/C小鼠右前腋皮下接種。接種后次日隨機(jī)分為空白對(duì)照組(N＝10)、小金丸組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑小劑量組(N＝10)、本發(fā)明膠囊劑大劑量組(N＝10)。按組分別灌胃生理鹽水2ml/kg、25％小金丸藥液2.5ml/kg、25％本發(fā)明膠囊劑藥液2.5ml/kg、5ml/kg、10ml/kg，連續(xù)給藥12d。停藥24h后，處死動(dòng)物，稱體重，剝離瘤塊，稱瘤塊濕重。同法，重復(fù)試驗(yàn)2次。
(三)試驗(yàn)結(jié)果小金丸、本發(fā)明膠囊劑大中小劑量組對(duì)BALB/C小鼠SCC891乳腺癌的生長(zhǎng)均有抑制作用，其抑制率分別為28.28％、48％、33％、31％，其中本發(fā)明膠囊劑大劑量組抗乳腺癌的作用明顯優(yōu)于空白對(duì)照組，結(jié)果詳見表6。
表6本發(fā)明膠囊劑對(duì)動(dòng)物移植性乳腺癌的影響(X±SD)組別 動(dòng)物(只) 劑量(g/kg)瘤重(g)抑制率(％)空白對(duì)照10 1.45±0.69小金丸 10 0.625 1.04±0.6028.28小劑量 10 0.625 1.00±0.4931.00中劑量 10 1.250.97±0.4633.00大劑量 10 2.500.75±0.58*48.00注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05重復(fù)試驗(yàn)表明，小金丸、本發(fā)明膠囊劑大小劑量組對(duì)BALB/C小鼠SCC891乳腺癌的生長(zhǎng)具有相同的抑制作用。結(jié)果詳見表7。表7本發(fā)明膠囊劑對(duì)動(dòng)物移植性乳腺癌重復(fù)試驗(yàn)的影響(X±SD)瘤重(g) 抑制率(％)組別 動(dòng)物(只) 劑量(g./kg)第一批 第二批 第一批第二批空白對(duì)照81.47±0.551.41±0.62小金丸 80.625 1.06±0.441.00±0.3427.8929.08小劑量 80.625 1.01±0.361.02±0.7031.2927.66中劑量 81.250.85±0.46* 0.86±0.4142.1839.01大劑量 82.500.75±0.63* 0.75±0.49* 48.9846.81注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05(四)結(jié)論本發(fā)明膠囊劑對(duì)動(dòng)物移植性乳腺癌有抑制作用，且具量效關(guān)系。
二、本發(fā)明膠囊劑抗裸鼠移植性人胃癌試驗(yàn)(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品本發(fā)明膠囊劑，由實(shí)驗(yàn)例1制備；小金丸，陽(yáng)性對(duì)照品，阿壩州制藥廠生產(chǎn)，川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(85)--3169號(hào)；生理鹽水，陰性對(duì)照品，自配。
2、動(dòng)物BALB/C-nu/nu小鼠，雌雄各半，體重19±1g，由國(guó)家醫(yī)藥管理局四川省抗菌素研究所提供，SPF級(jí)動(dòng)物，合格證號(hào)川實(shí)動(dòng)管第90號(hào)。BALB/C-nu/nu人胃癌GAD荷瘤小鼠，由中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所提供。
(二)實(shí)驗(yàn)方法采用實(shí)體瘤法[6]，選擇腫瘤生長(zhǎng)旺盛，且無破潰，健康的人胃癌GAGAIIBALB/C-nu/nu荷瘤小鼠，脫臼處死，固定于手術(shù)板上，消毒，層流架內(nèi)無菌條件下切成直徑為2mm的小塊，用套管針在BALB/C小鼠右前腋皮下接種。接種后次日隨機(jī)分為空白對(duì)照組(N＝6)、本發(fā)明膠囊劑大劑量組(N＝6)。按組分別灌胃生理鹽水2ml/kg、25％小金丸藥液2ml/kg、25％本發(fā)明膠囊劑藥液2ml/kg、10ml/kg，連續(xù)給藥30d。停藥24h后，處死動(dòng)物，稱體重，剝離瘤塊，稱瘤塊濕重。同法，重復(fù)試驗(yàn)2次。
(三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果小金丸、本發(fā)明膠囊劑大小劑量組對(duì)BALB/C-nu/nu小鼠人胃癌GAII的生長(zhǎng)均有一定的抑制作用，其中本發(fā)明膠囊劑大劑量組抗人胃癌GAII的作用明顯優(yōu)于空白對(duì)照組，結(jié)果詳見表8。
表8本發(fā)明膠囊劑對(duì)裸鼠人胃癌的影響(X±SD)組別 動(dòng)物(只) 劑量(g/kg)瘤重(g) 抑制率(％)空白對(duì)照61.03±0.41小金丸 6 0.50.88±0.41 14.56小劑量 6 0.50.78±0.53 24.27大劑量 6 2.00.61±0.17*40.78注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05重復(fù)試驗(yàn)表明，小金丸、本發(fā)明膠囊劑大小劑量組對(duì)BALB/C-nu/nu小鼠人胃癌GAII的生長(zhǎng)同樣具有抑制作用。結(jié)果詳見表9。
表9本發(fā)明膠囊劑對(duì)裸鼠人胃癌重復(fù)試驗(yàn)的影響(X±SD)瘤重(g) 抑制率(％)組別 動(dòng)物(只) 劑量(g./kg)第一批第二批 第一批第二批空白對(duì)照 6 1.03±0.391.03±0.37小金丸6 0.5 0.90±0.640.90±0.6412.6212.62小劑量6 0.5 0.68±0.290.62±0.2633.9839.81大劑量6 2.0 0.52±0.230.57±0.22* 49.5144.66注與空白對(duì)照組比較*P＜0.05三、結(jié)論本發(fā)明膠囊劑對(duì)動(dòng)物移植性乳腺癌SCC891和裸鼠人胃癌GAII有抑制作用，且具量效關(guān)系。提示，本發(fā)明膠囊劑具有抗乳腺癌和胃癌的作用。
通過對(duì)本發(fā)明膠囊劑的藥效學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果表明本發(fā)明膠囊劑能明顯抑制大鼠蛋清性足趾浮腫，抗大鼠巴豆所致炎性滲出和肉芽增生；能緩解熱刺激所致小鼠足痛和化學(xué)刺激所致小鼠腹痛；能明顯擴(kuò)張小鼠腸系膜微動(dòng)脈、微靜脈，增加毛細(xì)血管開放數(shù)；抑制BALA/C小鼠移植性乳腺癌SCC891和裸鼠人胃癌GAII。結(jié)果顯示，本發(fā)明膠囊劑具有抗炎、鎮(zhèn)痛、活血、抗乳腺癌和胃癌的作用，且明顯優(yōu)于丸劑，此外保管、攜帶、服用方便，其制備方法對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員并非顯而易見，充分說明，通過本發(fā)明方法制備得到的膠囊劑，與丸劑比較有顯著的優(yōu)越性和突出的特點(diǎn)。
試驗(yàn)例5 毒理學(xué)研究1、急性毒性試驗(yàn)經(jīng)預(yù)試無法測(cè)出本發(fā)明膠囊劑的LD50，其最大耐受量為30g/kg，達(dá)到成人口服劑量的300倍，未見動(dòng)物死亡和發(fā)生毒性反應(yīng)，表明本品在有效劑量下口服安全。
2、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)大鼠灌胃本發(fā)明藥物0.5g/Kg、2.5g/kg、5g/kg(分別相當(dāng)于臨床用量的5倍，25倍，50倍)，連續(xù)35天，結(jié)果表明本品對(duì)大鼠的一般狀態(tài)，血液學(xué)指標(biāo)無明顯影響，說明本發(fā)明藥物在有效劑量，有效療程應(yīng)用安全。
下面通過實(shí)施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明藥物的制備方法，但并非對(duì)權(quán)利要求的限制。
實(shí)施例1本發(fā)明膠囊劑的制備方法a、稱取下列中藥材為原料麝香6.76g、木鱉子去殼去油33.8g、制草烏33.8g、楓香脂33.8g、制乳香16.85g、制沒藥16.85g、醋炒五靈脂33.8g、地龍33.8g、酒炒當(dāng)歸16.85g、香墨2.7g；b、將麝香以外的九味中藥材打粉，過篩；c、取總藥含量的5％～6.4％的淀粉，其中50％制成淀粉糊；d、將b步驟所得到的細(xì)粉80％與c步驟剩余的淀粉混合，加入c步驟所得的淀粉糊，制軟材，制顆料，干燥溫度為45℃；e、將麝香與剩余藥粉，加入95％乙醇，混合，制軟材，制顆粒，干燥，溫度為28℃；f、將d與e步驟所得的顆?；旌?，整粒，裝膠囊，包裝，即得。
實(shí)施例2本發(fā)明膠囊劑的制備方法a、稱取下列中藥材為原料
麝香8.26g、木鱉子去殼去油41.3g、制草烏41.3g、楓香脂41.3g、制乳香20.37g、制沒藥20.37g、醋炒五靈脂41.3g、地龍41.3g、酒炒當(dāng)歸20.37g、香墨3.30g；步驟b至f同實(shí)施例1，d步驟干燥溫度為50℃，e步驟干燥溫度為30℃。
實(shí)施例2本發(fā)明膠囊劑的制備方法a、稱取下列中藥材為原料麝香7.5g、木鱉子去殼去油37.5g、制草烏37.5g、楓香脂37.5g、制乳香18.7g、制沒藥18.7g、醋炒五靈脂37.5g、地龍37.5g、酒炒當(dāng)歸18.7g、香墨3.0g；步驟b至f同實(shí)施例1，d步驟干燥溫度為49℃，e步驟干燥溫度為29℃。
參考文獻(xiàn)1、李儀奎主編.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).上海上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.1991年版.2992、衛(wèi)生部藥政局.新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編.1993年.1233、徐叔云等主編.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).北京人民衛(wèi)生出版社.1991年版.6934、阿奇主編.中藥藥理學(xué)研究方法學(xué).北京人民衛(wèi)生出版社.1993年版.3605、田牛主編.微循環(huán)方法學(xué).北京原子能出版社.1987年.1176、衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南.1994年.10權(quán)利要求
1.一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑，其特征在于含有麝香酮，其中每單位制劑中麝香酮含量不低于0.1mg。
2.權(quán)利要求1所述具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑的制備方法，包括下列步驟a、稱取下列中藥材為原料麝香6.76～8.26份、木鱉子去殼去油33.8～41.3份、制草烏33.8～41.3份、楓香脂33.8～41.3份、制乳香16.85～20.37份、制沒藥16.85～20.37份、醋炒五靈脂33.8～41.3份、地龍33.8～41.3份、酒炒當(dāng)歸16.85～20.37份、香墨2.7～3.3份；b、將麝香以外的九味中藥材打粉，過篩；c、取總藥含量的5％～6.4％的淀粉，其中50％制成淀粉糊；d、將b步驟所得到的細(xì)粉80％與c步驟剩余的淀粉混合，加入c步驟所得的淀粉糊，制軟材，制顆粒，干燥；e、將麝香與剩余藥粉，加入95％乙醇，混合，制軟材，制顆粒，干燥；f、將d步驟與e步驟制得的顆粒混合，裝膠囊，包裝，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑的制備方法，其特征在于步驟d中干燥溫度為49℃～55℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑的制備方法，其特征在于步驟e中干燥溫度為28℃～30℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑的制備方法，其特征在于步驟a中稱取下列中藥材為原料，其重量配比為麝香7.5份、木鱉子去殼去油37.5份、制草烏37.5份、楓香脂37.5份、制乳香18.7份、制沒藥18.7份、醋炒五靈脂37.5份、地龍37.5份、酒炒當(dāng)歸18.7份、香墨3.0份。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗癌的膠囊劑及其制備方法，所述膠囊劑中含有麝香酮，其中每單位制劑中麝香酮含量不低于0.1mg。將原料藥麝香、木鱉子去殼去油、制草烏、楓香脂、制乳香、制沒藥、醋炒五靈脂、地龍、酒炒當(dāng)歸、香墨，通過麝香與其它藥物分開制粒，濃乙醇制粒，常溫干燥等方法，使本發(fā)明膠囊劑的單位制劑中麝香酮含量不低于0.1mg，且質(zhì)量穩(wěn)定，服用方便，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)高。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1478469SQ0313534
公開日2004年3月3日 申請(qǐng)日期2003年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月4日
發(fā)明者陳輝明, 劉曉亮, 李可引 申請(qǐng)人:四川省天基生物藥業(yè)有限公司