專利名稱：含有當(dāng)歸抽提物的食品以及藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有當(dāng)歸(Angelica gigas，Nakai)抽提物的食品以及藥物組合物，更詳細(xì)地說從當(dāng)歸抽提紫花前胡素(Decursin)以及紫花前胡素肉桂酯(Decursin angelate)后，把這些加工成食品以及藥物組合物而改善腎毒性減輕以及糖尿病并發(fā)癥的腎衰竭癥的抑制效果，糖尿性高血壓的含有當(dāng)歸抽提物的食品以及藥物組合物。
背景技術(shù)：
一般，蛋白激酶C(PKC)是為了開發(fā)包括最近抗癌物(carcinostatissubstance)的幾種生理活性物質(zhì)而成為主要目標(biāo)的酶。PKC是在動物里有10幾種的isoezymes，參與把荷爾蒙或生長因子等的第一次外部信號傳達(dá)到細(xì)胞內(nèi)的一系列信號傳遞過程里擔(dān)當(dāng)制造并調(diào)整細(xì)胞內(nèi)第二次信號的重要任務(wù)。同時PKC非正常地活性化在許多癌細(xì)胞里，披露強(qiáng)烈的致癌物質(zhì)佛波醇化合物在細(xì)胞內(nèi)的收容體為PKC的事實(shí)后，活躍了通過調(diào)整PKC的抗癌物開發(fā)。
美國的BMS公司在開發(fā)的bryostatin是被公開為活性化PKC的物質(zhì)，這些物質(zhì)極少量地含有在叫苔蘚蟲的原生動物里，并存在從海洋采取等的缺點(diǎn)，至今為止還沒有化學(xué)合成而產(chǎn)業(yè)活用困難的狀態(tài)。本研究者等在G7課題的第二階段研究期間通過3年的研究發(fā)現(xiàn)了具有跟bryostatin類似活性的物質(zhì)紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯，曾經(jīng)闡明過這些的性質(zhì)與bryostatin類似(科學(xué)技術(shù)部課題編號M1-98-08-00-0021有用PKC激動劑(紫花前胡素類))。這些物質(zhì)與bryostatin比較有從植物體抽提的優(yōu)點(diǎn)，植物體內(nèi)的含量為3-7％而相當(dāng)高的優(yōu)點(diǎn)，分子量小且可化學(xué)合成的優(yōu)點(diǎn)，而且相對地毒性小的優(yōu)點(diǎn)等由此判斷為比bryostatin優(yōu)秀。為了這些物質(zhì)的早期產(chǎn)業(yè)化應(yīng)盡快地進(jìn)行為大量生產(chǎn)工程的開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化的基礎(chǔ)技術(shù)開發(fā)。
本研究者等披露的與bryostatin類似性質(zhì)的紫花前胡素類是雖然性質(zhì)上與bryostatin類似，但具有毒性很少、分子量小而可化學(xué)合成、從植物抽提的情況下也充分地能生產(chǎn)等的好多優(yōu)點(diǎn)。而且根據(jù)研究結(jié)果紫花前胡素類是作為白血病治療劑以及腎毒性減輕劑的效能非常優(yōu)秀，特別是對因糖尿病的腎損傷和重金屬或藥物的濫用的腎毒性的減輕效果優(yōu)秀。這些腎保護(hù)效果是在先進(jìn)國家也還沒有報告出來的新的結(jié)果，而目前為止還沒有形成世界性的市場，但作為今后的世界性的腎保護(hù)劑其市場性非常大。
如果作為紫花前胡素類的白血病治療劑以及腎毒性減輕劑的效能成為產(chǎn)業(yè)化時白血病的治療效果是會給癌患者帶來新的希望，考慮患腎衰竭癥的許多患者一生因腎透析而受苦以及因透析而所需的許多社會、個人的費(fèi)用時紫花前胡素的腎保護(hù)效果是增進(jìn)糖尿病患者的健康，預(yù)防因重金屬污染以及藥物濫用的腎損傷，并通過這些可大大地貢獻(xiàn)于福利社會。
本發(fā)明是有關(guān)原產(chǎn)地為韓國的當(dāng)歸抽提物的內(nèi)容，具有腎毒性抑制和對糖尿并發(fā)癥的腎衰竭癥的預(yù)防效果為特點(diǎn)的當(dāng)歸抽提物單獨(dú)或者包括許可的帶菌者的組合物的內(nèi)容。
當(dāng)歸的原產(chǎn)地是韓國，其使用范圍是補(bǔ)血劑而以韓方藥劑來利用，最近報告為韓國產(chǎn)特有物質(zhì)的紫花前胡素和主要成分Decursinol具有改善血流作用和Helicobacter作用。本發(fā)明者等闡明的純粹精制的紫花前胡素具有腎毒性抑制和對糖尿并發(fā)癥的腎衰竭癥的預(yù)防效果通過動物實(shí)驗(yàn)證明了(PCT/KR99/00632)。而且比現(xiàn)有的方法簡單并可大量確保抽提量的濃縮方法來制造，制造成液體后給實(shí)驗(yàn)動物以口服服用時能確認(rèn)在腸內(nèi)容易地吸收。目前為止紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯是結(jié)構(gòu)異構(gòu)體來被廣知，本研究者等一直研究了其作用并確立了其分析法。紫花前胡素是在室溫里以固體狀態(tài)存在而紫花前胡素肉桂酯是在零下20度也以液體狀態(tài)存在，本研究者等的分析結(jié)果是確認(rèn)了在當(dāng)歸里紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的比率為約3∶2。
而且，口服服用后經(jīng)過吸收代謝成紫花前胡素在血液內(nèi)存在，所以用口服服用的結(jié)果是這些成分容易吸收在活體內(nèi)。用現(xiàn)有的酒精抽提方法或70％酒精抽提方法抽提的當(dāng)歸紫花前胡素是占濃縮液的35％左右其量不超過50％，但本研究者的結(jié)果是當(dāng)使用99％以上的乙醇以及藥典酒精時其濃縮的含有量高而達(dá)到最大含有75％以上的結(jié)果，特別是開發(fā)其含有量中把紫花前胡素肉桂酯和紫花前胡素分離確定的方法而就知道準(zhǔn)確的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于利用當(dāng)歸抽提濃縮物上存在的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯經(jīng)過口服服用后容易吸收到活體上的事實(shí)，提供具有腎毒性抑制效能和對糖尿并發(fā)癥的腎衰竭癥的抑制效能以及對糖尿的高血壓有效果的可口服服用的含有當(dāng)歸抽提物的食品以及藥物組合物。
此外，本發(fā)明的目的在于制造大量含有主要成分的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯并使用在口服服用的目的上。
為了達(dá)成如上述的目的，本發(fā)明的含有當(dāng)歸抽提物的食品以及藥物組合物是抽提濃縮當(dāng)歸(Angelica gigas，Nakai)里含有的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯對糖尿性高血壓以及腎毒性減輕上有效能以藥片、膠囊劑、水劑(液體劑)以及粉末形態(tài)單獨(dú)或復(fù)合可服用的賦形劑等添加劑的形態(tài)制造并口服服用為特點(diǎn)。
此外，抽提濃縮當(dāng)歸里含有的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯，使對糖尿性高血壓以及腎毒性減輕上有效能而成人一日服用量為包含100mg至500mg紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯為特點(diǎn)。


圖1是從當(dāng)歸抽提物里分析的紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯的結(jié)果用色譜圖表示的示意圖。RT＝29.34是指紫花前胡素，RT＝30.84是指紫花前胡素肉桂酯，其比例為3∶2。
圖2是紫花前胡素的含量檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果，DecursinRT＝7.84。
圖3是紫花前胡素的含量檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果，DecursinolRT＝1.87。
圖4是標(biāo)準(zhǔn)Decursinol的HPLC圖。
圖5是對照組在0hr的HPLC圖。
圖6是服用1小時后的HPLC圖。
圖7是服用2小時后的HPLC圖。
圖8是服用4小時后的HPLC圖。
圖9是服用8小時后的HPLC圖。
圖10顯示了紫花前胡素對LLC-PK1細(xì)胞的cisplatin毒性的抑制效果。
圖11顯示了不同PKC激活劑對cisplatin引起的腎損傷的效果。
圖12顯示了紫花前胡素對cisplatin引起的LLC-PK1細(xì)胞凋零的抑制效果，A)是對照組，B)是Cispiatin(CDDP)處理組，C)是紫花前胡素處理組D)是把Cispiatin和紫花前胡素同時處理的組。
具體實(shí)施例方式
下面，根據(jù)附圖詳細(xì)地說明本發(fā)明的內(nèi)容。
在以下的實(shí)驗(yàn)例子里，例證了從當(dāng)歸抽提紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的方法和分析結(jié)果。另外例證了以口服服用為目的制藥抽提濃縮物并吸收后分析血液的結(jié)果。還例證了有關(guān)抽提濃縮物的效能。
實(shí)施例1高含量的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯濃縮物的制造方法1)、利用溫度差的抽提方法從當(dāng)歸分離濃縮紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的方法，且利用韓國產(chǎn)以及北朝鮮產(chǎn)的當(dāng)歸實(shí)施實(shí)驗(yàn)。為制備食品用料，使用了藥典酒精以及酒精乙醇并使用精制水。把當(dāng)歸原料以40目以下細(xì)地粉碎并干燥成水分含量為5％以下后，用藥典酒精或酒精乙醇(以下為乙醇)浸泡，添加當(dāng)歸的2倍到4倍后在搖動的狀態(tài)下常溫里抽提12小時并過濾。這種情況的濃縮物里含有的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的含量為37.7％。而且紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯作為當(dāng)歸原料顯示了3.92％。把這些乙醇分離物在-20℃放置20小時以上，并利用溫度差對乙醇溶解性低的物質(zhì)沉淀過濾。把這些分離物紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯濃縮到38.1％。濃縮這些分離物并在溫度為80℃以上蒸發(fā)乙醇回收剩下的固體物。分析這些回收物的結(jié)果是，紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯為64.24％，而具備了相當(dāng)高的高含量。
2)、例證利用溶解度差的抽提方法從當(dāng)歸分離濃縮紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的方法，且利用韓國產(chǎn)以及北朝鮮產(chǎn)的當(dāng)歸實(shí)施實(shí)驗(yàn)。為食品用而使用了藥典酒精以及酒精乙醇并使用水時使用了精制水。把當(dāng)歸原料以40mesh以下細(xì)地粉碎并干燥成水分含量為5％以下后用藥典酒精或酒精乙醇(以下為乙醇)浸泡，并添加當(dāng)歸的2倍到4倍在搖動的狀態(tài)下而且常溫抽提12小時并過濾。把過濾的乙醇在溫度為80度以上蒸發(fā)并回收剩下的固體物。向回收物放入2倍左右的乙醇后，溶解并超聲波處理來補(bǔ)充溶解。把這些過濾后取得乙醇層添加大量(約乙醇的20倍)的水溶液(0.05％tween 80)而收取沉淀的物質(zhì)。這是利用了目的主成分紫花前胡素或紫花前胡素肉桂酯對乙醇溶解而對水不溶解的性質(zhì)。把這些收取物干燥并消除水分后分析含量的結(jié)果是，含有了76.71％的紫花前胡素或紫花前胡素肉桂酯。這是與一般的抽提里含有30％左右的紫花前胡素或紫花前胡素肉桂酯比較時判斷為相當(dāng)?shù)臐饪s物。
3)、例證利用超聲波的方法從當(dāng)歸分離濃縮紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的方法，且利用韓國產(chǎn)以及北朝鮮產(chǎn)的當(dāng)歸實(shí)施實(shí)驗(yàn)。為使用為食品用而使用了藥典酒精以及酒精乙醇。把當(dāng)歸原料以40mesh以下細(xì)地粉碎并干燥成水分含量為5％以下后，把乙醇添加到當(dāng)歸的2倍到4倍并搖動的狀態(tài)下在常溫里抽提12小時，在這操作過程中利用超聲波以10分鐘2次以上進(jìn)行超聲波處理。把這些過濾后過濾的乙醇層在溫度為80度以上蒸發(fā)并回收剩下的固體物。把這收取物的含量分析的結(jié)果是，從當(dāng)歸里可抽提9％以上的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯。這是比現(xiàn)有的當(dāng)歸里不處理超聲波的抽提方法抽提2倍左右多的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的結(jié)果而濃縮物里顯示了88％。
4)、例證利用冷浸的抽提方法從當(dāng)歸分離濃縮紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的方法，且利用韓國產(chǎn)以及北朝鮮產(chǎn)的當(dāng)歸實(shí)施實(shí)驗(yàn)。為使用為食品用而使用了藥典酒精以及酒精乙醇。把當(dāng)歸原料以40mesh以下細(xì)地粉碎并干燥成水分含量為5％以下后把乙醇添加到當(dāng)歸的2倍到4倍并搖動的狀態(tài)下四天冷浸后抽提。此外為利用為比較數(shù)據(jù)實(shí)施了用加熱抽提的方法。把這抽提物過濾后收取乙醇層并把這乙醇層在80度的溫度里揮發(fā)乙醇且收取剩下的半固體狀態(tài)的殘留物，分析的結(jié)果是經(jīng)過加熱抽提的情況是紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的含量為38％而四天冷浸的情況是收取了59.39％。
實(shí)施例2以液體劑制藥后在溶液里的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)和口服服用后的分析血液實(shí)驗(yàn)1)、溶解(乳化液形態(tài))紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的抽提物是不溶解在水里并在60％乙醇里的溶解度為6.6mg/ml左右，所以引進(jìn)了高容量來液體化時析出并使溶解的制藥技術(shù)而均勻化。為了均勻的含量(含量的均勻性)用乙醇一次性地完全溶解后用液體劑來溶解。把100mg紫花前胡素在1ml的酒精里溶解后制藥的水溶液里使乳化，這制藥的水溶液的組成與如下的例示一樣。把這些以口服服用的目的稀釋水溶液(3.3gram tween80，120gram HPMC，D-sorbitol 1.2kg，檸檬酸30gram，Sucrarose 2.4gram，木糖醇2.4kg)制成液體劑。其中檸檬酸是為維持酸性條件，也可使用其它的酸性物質(zhì)。本研究者等曾經(jīng)研究過紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯在堿性里分解的性質(zhì)和酸性條件里穩(wěn)定的性質(zhì)，而最終把酸度維持到pH3.5左右。
2)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)的條件是在40℃，70％相對濕度里按時間檢查了含量實(shí)驗(yàn)，用分析法使用了高速液體色譜法(HPLC)。分析結(jié)果是在加速條件里可維持穩(wěn)定性。
紫花前胡素RT＝7.84，如圖2所示。
DecursinolRT＝1.87，如圖3所示。
結(jié)果如表1所示。
表1穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3)動物實(shí)驗(yàn)(1)紫花前胡素服用量(口服服用)50mg/kg鼠(2)用組數(shù)以及采取時間如表2所示。
表2用組數(shù)以及采取時間

*非服用對照組5條服用試驗(yàn)組20條(3)紫花前胡素溶液紫花前胡素100mg/ml(乙醇)(4)服用把100mg/ml(乙醇)制藥化的水溶液里稀釋10倍使懸浮，每200g鼠服用1ml。
(5)分析采取血液分離血漿后用HPLC分析。
利用實(shí)驗(yàn)用鼠按時間采取并確認(rèn)口服服用的狀態(tài)。
這是為開發(fā)成可口服服用的液體形態(tài)，口服服用溶解的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的執(zhí)行是在KYUNGSUNG大學(xué)校藥學(xué)大學(xué)的藥理實(shí)驗(yàn)室里執(zhí)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析是在BINEX研究室里進(jìn)行。一次性地口服服用紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯后，確認(rèn)是否吸收為分析易于分析的Decursinol分離血清后處理M乙醇1ml取得溶解的上等液并確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。
服用量以及服用數(shù)如表3所示。
表3服用量以及服用數(shù)

結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)液的制造是把Decursinol 50mg溶解在甲醇里并制造50ml。
HPLC分析條件是使用Hitachi HPLC，圓柱是使用COSMOSILC18，移動相是使用MeOH∶H2O＝60∶40，流速為1.0ml/min，檢出器波長為280nm。注射體積為20ul。
標(biāo)準(zhǔn)Decursinol如圖4所示。
對照組在0hr的結(jié)果如圖5所示。
服用1小時后的結(jié)果如圖6所示。
服用2小時后的結(jié)果如圖7所示。
服用4小時后的結(jié)果如圖8所示。
服用8小時后的結(jié)果如圖9所示。
結(jié)果是在RT 3.24里分離Decursinol。吸收紫花前胡素以后在活體內(nèi)里分解而確認(rèn)Decursinol的分解，Decursinol自己也幾乎無毒性的物質(zhì)可認(rèn)為不存在因代謝產(chǎn)物的毒性問題。由此確認(rèn)口服服用后的吸收。
紫花前胡素的結(jié)構(gòu)如式I所示。
式I紫花前胡素肉桂酯的結(jié)構(gòu)如式II所示。
式II實(shí)施例3紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯的對糖尿性疾病的效能實(shí)驗(yàn)糖尿的血管疾病的病因非常復(fù)雜，糖尿病的許多代謝變化里高血糖成了引起血管疾病的最重要的因素。高血糖導(dǎo)致的血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)成長的增加引發(fā)動脈硬化或高血壓。但是與高血糖和血管疾病有聯(lián)系的信號傳達(dá)機(jī)理還不清楚。高血糖增加甘油二酯(DAG)，DAG的增加而活性化蛋白激酶C(PKC)途徑，報告為高血糖發(fā)生血管疾病。由此認(rèn)為尋找抑制PKC信號途徑的物質(zhì)是治療或預(yù)防糖尿并發(fā)癥的好方法中的之一。所以在這期間用PKC抑制劑研究了許多，但是PKC抑制劑其自己的毒性和無特異性成了問題。
紫花前胡素是作為當(dāng)歸抽提物的PKC激動劑，阻止癌細(xì)胞的增殖，與強(qiáng)力的PKC激動劑的佛波酯不同地報告為把活性化的PKC更快地下控。所以本實(shí)驗(yàn)里對是否被紫花前胡素阻止與其導(dǎo)致體內(nèi)高葡萄糖導(dǎo)致的VSMC的增殖以及其阻止機(jī)理進(jìn)行了研究。
確認(rèn)根據(jù)葡萄糖濃度是否增加血管平滑肌細(xì)胞中的A10細(xì)胞的生長，為了最佳化高血糖的狀態(tài)在不同的葡萄糖濃度里培養(yǎng)A10細(xì)胞。用1×103細(xì)胞/ml接種到96孔平板里，16小時后用5、10、20、30、40、50mM D-葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，更換72小時后用MTT assay測定存活細(xì)胞數(shù)。72小時后A10細(xì)胞的增殖是根據(jù)葡萄糖濃度的增加而明顯地增加。在50mM D-葡萄糖里的細(xì)胞增殖比5.5mM D-葡萄糖約增加為15％。
一般普通葡萄糖是5.5mM D-葡萄糖而高葡萄糖是使用了25mMD-葡萄糖為較多，可是為了加大普通葡萄糖與高葡萄糖的差異在本實(shí)驗(yàn)里高葡萄糖使用30mM D-葡萄糖。用3×103把A10細(xì)胞接種到6孔平板里，16小時以后用5.5mM D-葡萄糖和30mM D-葡萄糖更換培養(yǎng)基。細(xì)胞培養(yǎng)五天，每天用臺盼藍(lán)(trypan blue)染色計(jì)算存活細(xì)胞數(shù)。在高葡萄糖里培養(yǎng)的細(xì)胞比在普通葡萄糖里培養(yǎng)的細(xì)胞更長地顯示，結(jié)果是在高葡萄糖里的細(xì)胞比在普通葡萄糖里的細(xì)胞更長為約20％左右。
為調(diào)查在被高葡萄糖導(dǎo)致的A10細(xì)胞增殖里的紫花前胡素的效果，A10細(xì)胞里處理不同濃度的紫花前胡素(1、5、10、25mM)，三天后計(jì)算。把紫花前胡素25mM在普通葡萄糖與高葡萄糖里處理的情況是都比沒有處理紫花前胡素的對照組約20％左右阻止細(xì)胞的增殖。可是高葡萄糖里處理5、25mM紫花前胡素的時候無細(xì)胞毒性的控制水平來阻止增殖。為了確認(rèn)紫花前胡素是否有細(xì)胞毒性還是阻止細(xì)胞的增殖，分別測定活細(xì)胞和死細(xì)胞的數(shù)量。其結(jié)果是處理紫花前胡素時候活細(xì)胞為98％以上。總的來說，在普通葡萄糖里處理紫花前胡素時候不影響細(xì)胞的生長，而在高葡萄糖里處理的時候無細(xì)胞毒性地根據(jù)濃度阻止細(xì)胞增殖。顯示紫花前胡素肉桂酯和Decursinoltiglate比紫花前胡素的效果更好。為了再一次確認(rèn)其效果，在A10細(xì)胞里處理1、5、10、25mM的紫花前胡素肉桂酯和Decursinol tiglate后，經(jīng)三天以后用臺盼藍(lán)計(jì)算。紫花前胡素肉桂酯和Decursinol tiglate在普通葡萄糖里不影響細(xì)胞的生長，而在高葡萄糖里根據(jù)濃度阻止細(xì)胞增殖。紫花前胡素肉桂酯25mM是在普通葡萄糖，高葡萄糖里都阻止約20％左右的細(xì)胞增殖，但5和10mM是在高葡萄糖里無細(xì)胞毒性地阻止細(xì)胞增殖。Decursinol tiglate是在普通葡萄糖里物細(xì)胞毒性地根據(jù)濃度阻止被高葡萄糖導(dǎo)致的細(xì)胞增殖。
實(shí)施例4紫花前胡素的ciplatin的腎毒性減輕效果為了調(diào)查根據(jù)紫花前胡素的ciplatin的腎毒性減輕效果，和50uM的ciplatin一起處理不同濃度的紫花前胡素。24小時以后調(diào)查LDH的放出量和確認(rèn)流動細(xì)胞的數(shù)量而調(diào)查細(xì)胞的死亡。如圖10所示，根據(jù)紫花前胡素濃度的增加而增加生存細(xì)胞數(shù)量。這是通過放出的LDH量減少和流動細(xì)胞的數(shù)量減少來可確認(rèn)。
為確認(rèn)這些紫花前胡素的保護(hù)效果是否為PKC激動劑的效果，使用不同的PKC激動劑來確認(rèn)cisplatin的毒性減輕效果。與以腫瘤啟動子來認(rèn)知的PMA合成的DAG，還使用以獨(dú)特的PKC激動劑來認(rèn)知的bryostatin來實(shí)驗(yàn)的結(jié)果沒有觀察到cispiatin(CDDP)的毒性減輕效果。從這些結(jié)果可知根據(jù)紫花前胡素的cispiatin毒性減輕效果是具有與PKC激動劑無關(guān)的。PKC是細(xì)胞生長上起重要作用的蛋白質(zhì)而這些結(jié)果是提示cispiatin的細(xì)胞毒性與一般細(xì)胞的信號傳達(dá)過程不同，如圖11所示。
為確認(rèn)紫花前胡素的腎細(xì)胞保護(hù)效果與FACS實(shí)施電泳現(xiàn)象。利用DNA上奇特地結(jié)合的propidium碘化物實(shí)施FACS的結(jié)果是，得到了抑制被cisplatin發(fā)生的細(xì)胞死亡的結(jié)果，電泳細(xì)胞內(nèi)的DNA的結(jié)果是減小作為凋零標(biāo)記的DNA梯度，如圖12所示，由此看到紫花前胡素防止Apotosis的結(jié)果。
通過如上述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)紫花前胡素具有抑制cisplatin引起的細(xì)胞毒性的效果。而且這些紫花前胡素的活性是跟以PKC激動劑來認(rèn)知的紫花前胡素有所不同的作用引起的。
實(shí)施例5
利用當(dāng)歸濃縮抽提物制藥成液體劑而每人一天把300mg的紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯一日一回或者一日三回分量服用的結(jié)果是得到患者狀態(tài)的變化里小便的顏色變?yōu)榍逦倚”愕某粑断У慕Y(jié)果。還有一日300mg服用為一日兩回或者三回的結(jié)果是導(dǎo)致下瀉的現(xiàn)象而得到服用量較多的推測結(jié)果。由此判斷為一日300mg一回或者一日兩回150mg為好。
發(fā)明是利用原產(chǎn)地為韓國的當(dāng)歸以主成分來顯示效果的紫花前胡素和紫花前胡素肉桂酯且含有其一定量并制造的口服用形態(tài)的具有對腎毒性減輕以及糖尿并發(fā)癥的腎衰竭癥的抑制效果，糖尿性高血壓上有效果為特點(diǎn)的組合物的內(nèi)容。對慢性疾病糖尿和因服用抗癌物等而擔(dān)心腎毒性的患者可服用。
權(quán)利要求
1.一種含有當(dāng)歸抽提物的食品或藥物組合物，其特征在于，所述的當(dāng)歸抽提物里含有紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品或藥物組合物，其特征在于，所述的紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯對糖尿性高血壓以及腎毒性減輕有效能，并且制成藥片、膠囊劑、水劑、粉末形態(tài)、單獨(dú)或復(fù)合服用的賦形劑等添加劑等口服形態(tài)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品或藥物組合物，其特征在于，所述的紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯針對糖尿性高血壓以及腎毒性減輕有效能，成人一日服用量為100mg至500mg的紫花前胡素或紫花前胡素肉桂酯。
全文摘要
本發(fā)明是有關(guān)利用原產(chǎn)地為韓國的當(dāng)歸(Angelica gigas，Nakai)根據(jù)腎毒性減輕以及糖尿并發(fā)癥的腎衰竭癥的抑制效果，對糖尿性高血壓有效果為特點(diǎn)的含有當(dāng)歸抽提物的食品以及藥物組合物的內(nèi)容。而且本發(fā)明是作為腎毒性抑制成分，當(dāng)歸抽提物中包括紫花前胡素以及紫花前胡素肉桂酯為特點(diǎn)，提供在食品(健康食品以及功能性食品)以及藥物組合物上使用的當(dāng)歸抽提物單獨(dú)以及包括人體上許可的帶菌者的組合物。
文檔編號A61K31/365GK1530100SQ0313642
公開日2004年9月22日 申請日期2003年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月14日
發(fā)明者姜在璿, 金益煥, 丁世榮, 孫哲勛, 金源順, 樸裕壽, 姜在 申請人:佰內(nèi)恩株式會社, 李白天, 姜在璿