專利名稱：一種治療大腸濕熱證的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物，特別涉及用于治療大腸濕熱證的中藥組合物，同時(shí)涉及該組合物的制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
痢疾、泄瀉為臨床常見(jiàn)病，發(fā)生于夏秋季節(jié)最常見(jiàn)的為“大腸濕熱證”。本發(fā)明系在清道光年間粵東老字號(hào)“通天濟(jì)藥房”秘傳方(未曾公開(kāi)過(guò))基礎(chǔ)上，依據(jù)現(xiàn)代臨床與實(shí)驗(yàn)研究加以提高。
臨床經(jīng)與加味香連丸(同仁堂集團(tuán)中藥二廠生產(chǎn))對(duì)比(300例∶100例)P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)本發(fā)明具有清熱、止瀉、鎮(zhèn)痛，對(duì)大腸桿菌、金葡萄球菌、綠膿桿菌、白色念珠菌有抑制作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于公開(kāi)一種新的治療大腸濕熱證的中藥組合物；本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開(kāi)制備一種新的治療大腸濕熱證的中藥組合物的方法。本發(fā)明目的還在于公開(kāi)一種新的中藥組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)大 黃 300-400重量份槐 花 20-50重量份蒼 術(shù) 220-280重量份側(cè)柏葉 20-50重量份羌 活 140-200重量份金銀花 50-110重量份制川烏 140-200重量份赤石脂 50-110重量份苦杏仁 35-90重量份 檳 榔 40-90重量份。
槐花優(yōu)選槐花炒炭；蒼術(shù)優(yōu)選蒼術(shù)泡制；側(cè)柏葉優(yōu)選側(cè)柏葉炒炭；赤石脂優(yōu)選制赤石脂；檳榔優(yōu)選炒檳榔。
本發(fā)明組合物的制備方法如下以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各15-25重量份，赤石脂(制)、苦杏仁各3-8重量份，川烏10-25重量份、槐花5-15重量份、側(cè)柏葉3-10重量份，粉碎成細(xì)粉，備用；剩余大黃用50-70％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成相對(duì)密度為1.30-1.50(50-80℃)的稠膏，備用；剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮2-4次每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成相對(duì)密度為1.30-1.50(50-80℃)的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，經(jīng)過(guò)常規(guī)工序直接或加入藥學(xué)上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、口服液體制劑、膠囊、顆粒劑、注射劑等。
本發(fā)明組合物制成藥劑的質(zhì)量控制方法包括含量測(cè)定和/或鑒別和/或檢查含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物片劑20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)過(guò)三號(hào)篩，精密稱取適量約相當(dāng)于1片的重量，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1-2小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸以8-12∶1-2比例的混合溶液15ml，加熱回流1-2小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明組合物制劑每單位量含大黃以大黃素(C15H10O5)和大黃酚(C15H10O4)的總量計(jì)，不得少于0.10-0.20mg；鑒別方法包括下列方法中的一種和/或幾種a.取含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10-20∶4-6∶1-2石油醚(60-90℃)-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；b.取本發(fā)明組合物片劑10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處15-30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液；另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以55-65∶1-2石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照鑒別b項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液；另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取照鑒別b項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-12∶1-3苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以6-12∶1-3石油醚(30-60℃)-丁酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；檢查烏頭堿限量，取本發(fā)明組合物片劑8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理10-25分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶5-8∶1-2環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
所述每單位量是指相當(dāng)原藥材1.3g的成品藥劑量。
本發(fā)明組合物制劑具有清熱燥濕，澀腸止痢的作用，對(duì)用于腸炎腹痛，水泄，血痢服用方便，起效迅速，效果明顯，毒性低。下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。以下實(shí)驗(yàn)用本發(fā)明組合物制劑為濕熱片。
實(shí)驗(yàn)例1 臨床資料觀察病例400例，其中泄瀉130例，治療組100例，愈顯率為64.00％，總有效率為92.00％，對(duì)照組30例，愈顯率50.00％，總有效率73.33％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組療效比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
痢疾270例，治療組200例，愈顯率為63.50％，總有效率為89.50％，對(duì)照組70例，愈顯率為57.14％，總有效率為85.71％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組療效比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。治療組臨床觀察未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)，詳細(xì)如下一、一般資料病例來(lái)源400例病人，選自門(mén)診及住院部病人，全部病例均符合病例選擇標(biāo)準(zhǔn)。
(一)性別見(jiàn)(表1-1、表1-2)表1-1 痢疾(濕熱證)兩組患者性別比較組別 例數(shù)男 (％) 女 (％)P治療組200 113(56.50)87(43.50)＞0.05對(duì)照組70 41 (58.57)29(41.43)＞0.05經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者性別比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表1-2 泄瀉(濕熱證)兩組患者性別比較組別 例數(shù)男 (％) 女 (％)P治療組100 59 (59.00)41(41.00)＞0.05對(duì)照組30 17 (56.67)13(43.33)＞0.05
經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者性別比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(二) 年齡見(jiàn)(表2-1、表2-2)表2-1 痢疾(濕熱證)兩組患者年齡分布比較例年齡分布(歲) 平均年齡(歲)組別 P數(shù) 18～30(％)31～50(％)51～65(％) X±SD治療組 20095 (47.50)72 (36.00)33 (16.50) 35.55±1.82 ＞0.05對(duì)照組 70 31 (44.29)26 (37.14)13 (18.57) 36.44±3.04 ＞0.05治療組最小年齡18歲，最大年齡65歲，平均年齡35.55歲；對(duì)照組最小年齡18歲，最大年齡65歲，平均年齡36.44歲。
經(jīng)t檢驗(yàn)，兩組患者年齡分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表2-2 泄瀉(濕熱證)兩組患者年齡分布比較例 年齡分布(歲)平均年齡(歲)組別 P數(shù) 18～30(％)31～50(％)51～65(％) X±SD治療組 10050 (50.00)31 (31.00)19 (19.00) 36.00±2.55 ＞0.
對(duì)照組 30 13 (43.33)10 (33.33)7 (23.33) 37.00±4.50 05治療組最小年齡18歲，最大年齡65歲，平均年齡36歲；對(duì)照組最小年齡19歲，最大年齡65歲，平均年齡37歲。
經(jīng)t檢驗(yàn)，兩組患者年齡分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(三) 病程見(jiàn)(表3-1、表3-2)表3-1 痢疾(濕熱證)兩組患者病程比較≤3日 3日～1周 ＞1周組別 例數(shù)例數(shù)(％) 例數(shù)(％) 例數(shù)(％)治療組200124(62.00)61(30.5) 15(％)對(duì)照組70 37(52.86) 26(37.14)7(10.00)經(jīng)Ridit分析，兩組患者病程分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表3-2 泄瀉(濕熱證)兩組患者病程比較≤3日 3日～1周 ＞1周組別 例數(shù)例數(shù)(％) 例數(shù)(％) 例數(shù)(％)治療組10068(68.00) 24(24.00)8(8.00)對(duì)照組30 16(53.33) 9(30.00) 5(16.67)經(jīng)Ridit分析，兩組患者病程分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(四) 中醫(yī)癥狀見(jiàn)(表4-1、表4-2)表4-1 痢疾(濕熱證)兩組患者中醫(yī)癥狀比較癥狀治療組(％)對(duì)照組(％)P泄瀉急迫 49 (24.50)14(20.00)＞0.05泄而不爽 148(74.00)53(75.71)＞0.05里急后重 193(96.50)67(95.71)＞0.05肛門(mén)灼熱 167(83.50)63(90.00)＞0.05腹痛 200(100.00) 70(100.00) ＞0.05煩熱口渴 174(87.00)60(85.71)＞0.05小便短赤 163(81.50)56(80.00)＞0.05大便黃褐而臭 26 (13.00)10(14.29)＞0.05下痢赤白 180(90.00)61(87.14)＞0.05粘液便192(96.00)67(95.71)＞0.05稀水便22 (11.00)7 (10.00)＞0.05經(jīng)x2分析，兩組患者癥狀分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表4-2 泄瀉(濕熱證)兩組患者中醫(yī)癥狀比較癥狀治療組(％)對(duì)照組(％)P泄瀉急迫 85 (85.00)24(80.00)＞0.05泄而不爽 86 (86.00)26(86.67)＞0.05里急后重 2 (2.00) 0 (0)＞0.05肛門(mén)灼熱 88 (88.00)28(93.33)＞0.05腹痛 100(100.00) 30(100.00) ＞0.05煩熱口渴 91 (91.00)24(80.00)＞0.05小便短赤 65 (65.00)16(53.33)＞0.05大便黃褐而臭 59 (59.00)21(70.00)＞0.05下痢赤白 0 (0)0 (0)＞0.05粘液便0 (0)0 (0)＞0.05稀水便41 (41.00)9 (30.00)＞0.05經(jīng)x2分析，兩組患者癥狀分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(五) 舌、脈象見(jiàn)(表5-1、表5-2)表5-1痢疾(濕熱證)兩組患者舌、脈象比較舌象 脈象組別 例數(shù) 例數(shù) P異常正常 異常正常治療組200194 6 200200 0＞0.05對(duì)照組70 67 3 70 70 0＞0.05
經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者舌、脈象分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表5-2 泄瀉(濕熱證)兩組患者舌、脈象分布比較舌象 脈象組別 例數(shù) 例數(shù) P異常正常 異常正常治療組10090 10 100100 0 ＞0.05對(duì)照組30 28 2 30 30 0 ＞0.05經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者舌、脈象分布比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(六)血象及大便常規(guī)見(jiàn)(表6-1、表6-2)表6-1 痢疾(濕熱證)兩組白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、大便常規(guī)檢查情況治療組對(duì)照組項(xiàng)目例數(shù) 例數(shù)P異常正常 異常正常白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 20075 125 70220 48＞0.05大便常規(guī)200200 0 7070 0 ＞0.05經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、大便常規(guī)檢查情況比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表6-2 泄瀉(濕熱證)兩組白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、大便常規(guī)檢查情況治療組對(duì)照組項(xiàng)目例數(shù) 例數(shù)P異常正常 異常正常白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 10029 71 3010 20＞0.05大便常規(guī)100100 0 3030 0 ＞0.05經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組患者白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、大便常規(guī)檢查情況比較較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
二、診斷及辨證標(biāo)準(zhǔn)(一)中醫(yī)診斷(依據(jù)高等中醫(yī)藥院校教材《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》痢疾、泄瀉有關(guān)章節(jié))。
痢疾是以腹痛、里急后重，下痢赤白膿血為主癥，多發(fā)于夏秋季節(jié)。本病多由外受濕熱、疫毒之氣，內(nèi)傷飲食生冷，損傷脾胃與臟腑而形成。
泄瀉是指排便次數(shù)增多，糞便稀薄，甚至瀉出如水樣而言。一年四季皆可發(fā)生，夏秋季節(jié)多見(jiàn)。
(二)中醫(yī)辨證濕熱證
1、泄瀉急迫或?yàn)a而不爽，大便黃褐而臭。
2、里急后重，下痢赤白相雜。
3、肛門(mén)灼熱。
4、煩熱口渴。
5、腹痛。
6、小便短赤。
7、舌苔黃膩。
8、脈濡數(shù)或滑數(shù)。
(三)納入病例標(biāo)準(zhǔn)符合泄瀉、痢疾診斷及中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)的患者，可納入試驗(yàn)病例。
(四)排除病例標(biāo)準(zhǔn)(包括不適應(yīng)癥或剔除標(biāo)準(zhǔn))1、年齡在18歲以下或65歲以上，妊娠或哺乳期婦女，對(duì)本藥過(guò)敏者。
2、合并有肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病，精神病患者。
3、凡不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定用藥，無(wú)法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。
三、觀察方法(一)本觀察采取隨機(jī)單盲法對(duì)照試驗(yàn)，對(duì)照組與治療組病例數(shù)之比不少于1∶3，病例分組采用簡(jiǎn)單隨機(jī)分組的方法，將合格受試對(duì)象按1∶1或1∶3的比例分配到對(duì)照組和治療組中，受試病例要求有一部分住院病例，門(mén)診病例要嚴(yán)格控制可變因素。
(二)臨床治療組(1組)濕熱片，內(nèi)服，每次5片，每天3次，連用1周。
(三)對(duì)照組(2組)加味香連丸，每次6克，每天3次，連服1周。
四、觀測(cè)指標(biāo)(一)安全性觀測(cè)1、一般體檢項(xiàng)目。
2、血、尿、便常規(guī)化驗(yàn)。
3、肝功能。
(二)療效性觀測(cè)
1、大便性狀膿血便、粘液便、稀水便。
2、大便常規(guī)檢查大便中紅細(xì)胞、白細(xì)胞及膿球數(shù)量、不消化食纖維。
3、主癥、體征變化。
(三)不良反應(yīng)重點(diǎn)觀察是否引起血壓降低、眩暈、皮疹及是否有過(guò)敏反應(yīng)等。并將其反應(yīng)程度、出現(xiàn)時(shí)間、處理措施等詳細(xì)記錄在觀察病歷中，并就不良反應(yīng)與藥物之間的關(guān)系做出判斷(如有關(guān)、可能有關(guān)、無(wú)關(guān)、不能肯定)，并對(duì)不良反應(yīng)而中止的病例應(yīng)作跟蹤調(diào)查，詳細(xì)記錄結(jié)果。
(四)觀察要求嚴(yán)格按照計(jì)劃要求，如實(shí)記錄，在治療前(就診時(shí))，治療第4天、第7天分別觀察記錄一次。三大常規(guī)、胸透、肝、腎功能、心電圖檢測(cè)原則上治療前后各進(jìn)行一次，如有必要可隨時(shí)檢測(cè)，觀察期間不得加用其他治療藥物或其他治療手段。雖服用藥有效，但加用其它相關(guān)藥物，無(wú)法判定療效者，作病例剔除處理。服藥4天以上無(wú)效停藥或改用其它藥物者按無(wú)效處理，不得剔除。
五、療效判定標(biāo)準(zhǔn)臨床痊愈中醫(yī)證侯主癥、次癥消失，大便化驗(yàn)正常。
顯效主癥消失、次癥大部分改善，大便化驗(yàn)基本正常。
有效主癥、次癥改善，大便化驗(yàn)有所好轉(zhuǎn)。
無(wú)效主癥、次癥無(wú)改善，或加重，大便化驗(yàn)未改善。
六、結(jié)果(一) 總療效見(jiàn)(表7-1、表7-2)表7-1 痢疾(濕熱證)兩組總療效比較組別例數(shù) 臨床痊愈(％) 顯效(％) 有效(％) 無(wú)效(％) 總有效率(％)治療組 200 80(40.00) 47(23.50) 52(26.00) 21(10.50) (89.50)對(duì)照組 7018(25.71) 22(31.43) 20(28.57) 10(14.29) (85.71)治療組愈顯率63.50％，總有效率89.50％，對(duì)照組愈顯率57.14％，總有效率85.71％。
經(jīng)Ridit分析，兩組治療后療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表7-2 泄瀉(濕熱證)兩組總療效比較組別例數(shù) 臨床痊愈(％) 顯效(％) 有效(％) 無(wú)效(％) 總有效率(％)治療組 120 33(33.00) 31(31.00) 28(28.00) 8(8.000) (92.00)對(duì)照組 306(20.00) 9(30.00) 7(23.33) 8(26.67) (73.33)治療組愈顯率64.00％，總有效率92.00％，對(duì)照組愈顯率50.00％，總有效率73.33％。
經(jīng)Ridit分析，兩組治療后療效比較，治療組優(yōu)于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
(二) 不同病程療效見(jiàn)(表8-1、表8-2)表8-1 痢疾(濕熱證)兩組不同病程療效比較治療組對(duì)照組例總有效率 例 總有效率病程臨床 臨床數(shù) 顯效 有效 無(wú)效(％)數(shù) 顯效 有效 無(wú)效(％)痊愈 痊愈≤3日 12449303411(91.13) 37101210 5(86.49)3日～1周 61 2612167 (88.52) 267 8 8 3(88.46)＞1周 15 5 5 2 3 (80.00) 7 1 2 2 2(71.43)經(jīng)Ridit分析，治療組各不同病程之間療效比較，及兩組不同病程療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表8-2 泄瀉(濕熱證)兩組不同病程療效比較治療組對(duì)照組例總有效率 例 總有效率病程臨床 臨床數(shù) 顯效 有效 無(wú)效(％)數(shù) 顯效 有效 無(wú)效(％)痊愈 痊愈≤3日 68 2224184 (94.12) 164 5 3 4 (75.00)3日～1周 24 105 7 2 (91.67 9 1 3 2 3 (66.67)＞1周 8 1 2 3 2 (75.00) 5 1 1 2 1 (80.00)經(jīng)Ridit分析，兩組之間及各組內(nèi)不同病程之間療效比較，及兩組不同病程療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(三) 癥狀療效見(jiàn)(表9-1、表9-2)
表9-1 痢疾(濕熱證)兩組癥狀療效比較治療組 總有效率例 對(duì)照組 總有效率癥狀 例數(shù) P消失顯效有效無(wú)效(％) 數(shù)消失顯效有效無(wú)效 (％)泄瀉急迫 49 24 14 6 5 (89.80)145 2 4 3 (78.57)＞0.05泄而不爽 14841 50 43 14 (90.54)5314 13 14 12(77.36)＞0.05里急后重 193101 45 30 17 (91.19)6726 20 11 10(85.07)＞0.05肛門(mén)灼熱 16743 42 63 19 (88.62)6324 14 17 8 (87.30)＞0.05腹痛 200118 57 17 8 (96.00)7016 18 24 12(82.86)＞0.05煩熱口渴 17436 36 62 140(77.01)6017 17 15 11(81.67)＞0.05小便短赤 16333 37 68 25 (84.66)5619 15 11 11(80.36)＞0.05大便黃褐而臭 26 5 9 7 5 (80.77)104 3 1 2 (80.00)＞0.05下痢赤白 18076 60 37 7 (96.11)6119 17 14 11(81.97)＞0.05粘液便19289 53 39 11 (94.27)6720 15 22 10(85.07)＞0.05稀水便22 7 6 7 2 (90.91)7 2 2 1 2 (71.43)＞0.05經(jīng)Ridit分析，治療組對(duì)腹痛、下痢赤白、粘液便癥狀療效優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；對(duì)其余癥狀兩組療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表9-2 泄瀉(濕熱證)兩組癥狀療效比較治療組總有效 對(duì)照組總有效率癥狀 例數(shù)例數(shù) P消失顯效有效無(wú)效率(％) 消失顯效有效無(wú)效 (％)泄瀉急迫 85 31 19 27 8 (90.59)2445 6 3 11(54.17)＜0.05泄而不爽 86 33 17 30 6 (93.02)266 9 4 7 (73.08)＞0.05里急后重 2 0 0 1 1 (50.00)0 0 0 0 0 (0)＞0.05肛門(mén)灼熱 88 32 33 15 8 (90.91)286 10 7 5 (82.14)＞0.05腹痛 10051 17 28 4 (96.00)305 7 8 10(66.67)＜0.05煩熱口渴 91 24 30 29 8 (91.21)240 3 10 6 5 (79.17)＞0.05小便短赤 65 13 21 22 9 (86.15)162 2 4 8 (50.00)＜0.05大便黃褐而臭 59 13 31 12 3 (94.92)213 7 3 8 (61.90)＜0.05下痢赤白 0 0 0 0 0 (0)0 0 0 0 0 (0)＞0.05粘液便0 0 0 0 0 (0)0 0 0 0 0 (0)＞0.05稀水便41 12 17 10 2 (95.12)9 2 3 2 2 (77.78)＞0.05經(jīng)Ridit分析，治療組對(duì)泄瀉急迫、腹痛、小便短赤、大便黃褐而臭，的癥狀療效優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；對(duì)其余癥狀療效兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(四) 舌、脈象變化見(jiàn)(表10-1、表10-2)表10-1 痢疾(濕熱證)兩組舌、脈象變化舌象 脈象組別療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)治療組194 89(45.88) 48(24.74) 200 69(34.50) 43(21.50)對(duì)照組67 25(37.31) 15(22.39) 1717(24.29) 12(17.14)經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組治療后舌、脈象變化比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表10-2 泄瀉(濕熱證)兩組舌、脈象變化舌象 脈象組別療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)治療組194 89(45.88) 48(24.74) 200 69(34.50) 43(21.50)對(duì)照組67 25(37.31) 15(22.39) 1717(24.29) 12(17.14)經(jīng)x2檢驗(yàn)，兩組治療后舌、脈象變化比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(五) 血象、大便常規(guī)檢查變化見(jiàn)(表11-1、表11-2)表11-1 痢疾(濕熱證)兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類、大便常規(guī)檢查變化舌象 脈象組別療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)治療組75 33(44.00) 25(33.33) 200 92(46.00) 94(47.00)對(duì)照組22 9(40.91) 15(27.27) 7029(41.43) 20(28.57)經(jīng)x2檢驗(yàn)，治療組治療后白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類的改善率及轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；治療組治療后大便常規(guī)的轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
表11-2 泄瀉(濕熱證)兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類、大便常規(guī)檢查變化舌象 脈象組別療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)療前異常療前改善(％)療后轉(zhuǎn)常(％)治療 29 89(45.88) 48(24.74) 200 69(34.50) 43(21.50)對(duì)照組67 25(37.31) 15(22.39) 1717(24.29) 12(17.14)經(jīng)x2檢驗(yàn)，治療組治療后白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類的改善率及轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；治療組治療后大便常規(guī)的改善率及轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
(六) 年齡與療效見(jiàn)(表12-1、表12-2)表12-1痢疾(濕熱證)治療組年齡與療效關(guān)系年齡(歲)例數(shù)痊愈顯效有效無(wú)效總有效率(％)P18～30 95 43 20 22 10 89.4731～50 72 24 20 21 790.28 ＞0.0551～65 33 13 7 9 487.88經(jīng)Ridit分析，治療組治療后對(duì)不同年齡段患者療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
表12-2泄瀉(濕熱證)治療組年齡與療效關(guān)系年齡(歲)例數(shù)痊愈顯效有效無(wú)效總有效率(％)P18～30 50 20 15 13 296.0031～50 31 7 11 10 390.32 ＞0.0551～65 19 6 5 5 384.21經(jīng)Ridit分析，治療組治療后對(duì)不同年齡段患者療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(七) 兩種疾病療效見(jiàn)(表13)表13 兩種疾病療效比較疾病例數(shù)痊愈顯效有效無(wú)效總有效率(％)泄瀉100 33 31 28 8 (92.00)痢疾200 80 47 52 21 (89.50)經(jīng)Ridit分析，兩種疾病療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
(八) 安全性觀察1、不良反應(yīng)在臨床觀察期間治療組未發(fā)現(xiàn)副作用及過(guò)敏反應(yīng)。
2、實(shí)驗(yàn)室檢查治療前后除血常規(guī)、便常規(guī)符合痢疾的異常改變外，未發(fā)現(xiàn)其它異常變化。尿常規(guī)、肝功能及心電圖檢查均未見(jiàn)異常改變。
七、典型病例例一張X，男，21歲，個(gè)體，石家莊市平山縣人，于1998年7月26日初診?；颊咭蚋篂a、腹痛、大便呈水樣便，日瀉7-8次，曾在當(dāng)?shù)匦l(wèi)生室診治，給予口服“藿香正氣水”治療，病情不見(jiàn)好轉(zhuǎn)，來(lái)我院就診?；颊?日前暴飲冷飲，胃脘部不適，出現(xiàn)泄瀉腹痛，瀉下急迫，瀉而不爽，瀉后痛減，肛門(mén)灼熱，小便短黃。舌質(zhì)紅，苔黃膩，脈濡數(shù)。
查體T 37.2℃，P 82次/分，BP110/80mmHg；心肺(一)，腹軟，胃脘部壓痛(+)，無(wú)反跳痛，腸鳴音亢進(jìn)；實(shí)驗(yàn)室檢查血常規(guī)RBC 4.3×1012/L，WBC10.0×109/L，N56％；便常規(guī)稀便，鏡下偶見(jiàn)白細(xì)胞。中醫(yī)診斷泄瀉(大腸濕熱證)。用于口服濕熱片，每次5片，每日3次，連服1周。藥后3天，患者腹瀉次數(shù)減少，每日3-4次，胃脘部不適消失，腹痛明顯減輕。服藥7天，食欲增加，大便成形為軟便，諸癥消失，舌質(zhì)淡，苔薄白，脈象弦而有力。查便常規(guī)鏡檢(一)；臨床屬治愈。
例二趙××，男，28歲，主因腹痛、腹瀉、大便膿血、里急后重2天，發(fā)熱1天，于1998年8月9日就診?；颊哂?天前過(guò)飲冷啤酒及進(jìn)食生冷油膩后出現(xiàn)腹痛、腹瀉、大便8-10次/日，并有少量粘液及膿血，伴有低熱，自服痢特靈、氟哌酸等藥物，癥狀稍有緩解。查T(mén)38.1℃，P92次/分。心肺(一)腹軟，臍周及左下腹壓痛(++)，腸鳴亢進(jìn)。血常規(guī)檢查WBC11.2×109，N78％。大便鏡檢可見(jiàn)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、膿球。患者自覺(jué)煩熱口渴，小便短赤，大便不爽，舌質(zhì)紅，舌苔黃膩，脈滑數(shù)。西醫(yī)診斷細(xì)菌性痢疾。中醫(yī)診斷痢疾(濕熱證)。給予濕熱片5片，口服，每日三次。服藥1天，患者自覺(jué)腹痛減輕。服藥第3天，大便粘液、膿血明顯減少，大便次數(shù)減少至3-4次/日，體溫降至37.4℃。服藥7天，患者腹痛、腹瀉、里急后重、大便膿血粘液均消失，體溫正常。查血常規(guī)正常，大便常規(guī)化驗(yàn)，僅見(jiàn)少量白細(xì)胞，未見(jiàn)膿球、紅細(xì)胞。病屬臨床痊愈。
八、結(jié)論濕熱片用于治療泄瀉(濕熱證)，痢疾(濕熱證)的大腸濕熱證，以加味香連丸(北京同仁堂集團(tuán)中藥二廠生產(chǎn))為對(duì)照藥，由河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院、山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院，從1998年6-11月對(duì)其進(jìn)行了臨床驗(yàn)證，采用隨機(jī)單盲對(duì)照的方法考察其療效和不良反應(yīng)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，現(xiàn)將兩院臨床驗(yàn)證結(jié)果報(bào)告如下(一)痢疾(濕熱證)觀察結(jié)果1、臨床觀察270例，其中治療組200例，愈顯率63.50％，總有效率89.50％，對(duì)照組70例，愈顯率57.14％，總有效率85.71％，兩組療效比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組療效相似(P＞0.05)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2、治療組對(duì)于腹痛、下痢赤白、粘液便癥狀療效比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
3、治療組對(duì)于大便常規(guī)轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
(二)泄瀉(濕熱證)觀察結(jié)果1、臨床觀察130例，其中治療組100例，愈顯率64.00％，總有效率92.00％，對(duì)照組30例，愈顯率50.00％，總有效率73.33％，兩組療效比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(P＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
2、治療組對(duì)于泄瀉急迫、腹痛、小便短赤、大便黃褐而臭癥狀療效比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
3、治療組對(duì)于大便常規(guī)改善率及轉(zhuǎn)常率與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
(三)經(jīng)臨床觀察與驗(yàn)證，濕熱片治療泄瀉與痢疾均未發(fā)現(xiàn)毒副作用及過(guò)敏等不良反應(yīng)。
臨床驗(yàn)證結(jié)果表明濕熱片對(duì)泄瀉與痢疾的大腸濕熱證療效確切，安全，可靠。
實(shí)驗(yàn)例2 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)1、試驗(yàn)?zāi)康挠^察濕熱片的清熱、止瀉、鎮(zhèn)痛及抑菌作用，為臨床應(yīng)用提供參考。
2、藥物與儀器濕熱片(內(nèi)含大黃、蒼術(shù)、川烏、羌活、檳榔、赤石脂等，批號(hào)為0111011，成人用量為每天口服2-3次，每次4片，每片重為434mg)由廣東省興寧市明珠藥業(yè)有限公司提供；日夜百服嚀片(批號(hào)0203561，每片含對(duì)乙酰氨基酚500mg)由上海施貴寶制藥有限公司生產(chǎn)；干酵母(批號(hào)為011013)由廣東丹寶利酵母有限公司出品；阿斯匹林片(批號(hào)為20020101)由哈爾濱格拉雷藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；思密達(dá)(批號(hào)為H33Y，3g/袋)由法國(guó)益普生制藥公司生產(chǎn)；藥用蓖麻油(批號(hào)為001201)由湖北天門(mén)科田藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；其余試劑為市售分析純。
歐姆龍溫度計(jì)(精密度為0.05℃)由日本歐姆龍株式會(huì)社生產(chǎn)。
3、試驗(yàn)動(dòng)物健康無(wú)孕的NIH小鼠(合格證號(hào)為2001A044)和SD大鼠(合格證號(hào)為2001A046)及其標(biāo)準(zhǔn)飼料均由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
4、方法與結(jié)果4.1 對(duì)干酵母所致大鼠發(fā)熱的清熱作用[1]取體重180-220g的SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，均雌雄各半。其中3個(gè)組為濕熱片高、中、低劑量組，劑量見(jiàn)表1，分別相當(dāng)于成人日用量72.3mg/kg的20倍、10倍和5倍(本實(shí)驗(yàn)按成人每天口服10片，成人體重按60kg計(jì))；模型組和空白組給予等體積的生理鹽水，上述5組每天灌胃1次，連續(xù)3天；陽(yáng)性對(duì)照組給予日夜百服嚀(按對(duì)乙酰氨基酚計(jì)算為250mg/kg)，灌胃1次。末次灌胃后除空白組外各組大鼠均立即于背部皮下注射干酵母蒸餾水混懸液(20g/100ml，1ml/100g鼠重)，記錄給藥后1h、2h、3h、4h、5h、6h后各組大鼠的體溫升幅(℃)，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 濕熱片對(duì)干酵母引起大鼠發(fā)熱的清熱作用(X±SD，n＝10)劑量大鼠皮下注射干酵母后的體溫升幅(℃)組別(g/kg) 1h 2h 3h4h5h6h空白組 - 0.28±0.12 0.32±0.06* 0.40±0.10** 0.54±0.19* 0.34±0.11** 0.33±0.12**模型組 - 0.33±0.14 0.45±0.15 0.91±0.380.74±0.161.90±0.332.20±0.42對(duì)乙酰氨基酚組 0.25 0.24±0.11 0.29±0.10* 0.40±0.21** 0.27±0.09** 0.58±0.13** 0.41±0.13**濕熱片組 0.362 0.31±0.17 0.44±0.08 0.94±0.230.61±0.221.58±0.581.89±0.410.723 0.32±0.16 0.39±0.15 0.57±0.27* 0.60±0.171.52±0.481.88±0.311.45 0.22±0.13 0.33±0.14 0.55±0.18* 0.44±0.12** 1.26±0.28** 1.37±0.34**與模型組相比*P＜0.05 **P＜0.01，下同表1結(jié)果顯示，百服嚀及高劑量組濕熱片對(duì)皮下注射干酵母引起的大鼠發(fā)熱有明顯的對(duì)抗作用，中劑量組濕熱片在3h后也有明顯的對(duì)抗作用，表明百服嚀及濕熱片具有清熱功效。
4.2 對(duì)蓖麻油所致小鼠腹瀉的對(duì)抗作用[2]
取體重為18-22g的NIH小鼠60只，分組及劑量同前，陽(yáng)性對(duì)照組給予思密達(dá)2g/kg一次；末次灌胃半小時(shí)后，除空白組灌胃生理鹽水外，其余5組均灌胃給予藥用蓖麻油0.2ml/只。將動(dòng)物分別置于墊有直徑15cm濾紙的透明觀察籠內(nèi)，每間隔1小時(shí)換墊紙并計(jì)數(shù)小鼠腹瀉次數(shù)，比較組間不同時(shí)間的累積腹瀉次數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 濕熱片對(duì)蓖麻油引起小鼠腹瀉的對(duì)抗作用(X±SD，n＝10)組別劑量(g/kg) 小鼠累積腹瀉次數(shù)(次)1h2h 3h 4h空白組 -5.20±1.818.90±1.97**14.10±4.04**16.00±4.32**模型組 -7.40±4.6725.40±7.75 33.20±7.21 36.00±6.82思密達(dá)組 2.0 4.30±2.3612.40±2.17** 17.70±3.74**19.30±4.00**濕熱片組 0.3624.60±1.2622.10±4.01 29.2±8.36 32.60±8.780.7235.30±1.6418.70±2.45*26.60±4.40* 28.5±6.38*1.45 4.80±2.6214.60±4.38** 19.50±3.89**21.60±5.36**表2結(jié)果顯示，思密達(dá)及濕熱片的高、中劑量對(duì)蓖麻油引起的小鼠腹瀉均有明顯的對(duì)抗作用，表明思密達(dá)和濕熱片具有止瀉功效。
4.3 對(duì)醋酸引起小鼠疼痛扭體的影響[3]取18-22g的NIH小鼠50只，隨機(jī)分為5組，雌雄各半，濕熱片高、中、低劑量組灌胃給予濕熱片(劑量同前)，空白對(duì)照組給予生理鹽水，以上各組每天給藥1次，連續(xù)三天；陽(yáng)性對(duì)照組給予阿斯匹林片0.01g/kg一次；末次灌胃給藥1h后，小鼠腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/20g，觀察并記錄15分鐘內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 濕熱片對(duì)醋酸引起小鼠疼痛扭體的影響(X±SD，n＝10)組別 劑量(g/kg)小鼠疼痛扭體的次數(shù)(次)空白組 - 12.90±4.93阿司匹林組 0.014.70±1.57**熱濕片組0.362 10.90±2.960.723 8.20±2.53*1.456.70±1.83**表3可看出，阿斯匹林及濕熱片的中高劑量對(duì)醋酸引起的小鼠疼痛扭體均有明顯的對(duì)抗作用。提示阿斯匹林和濕熱片具有鎮(zhèn)痛的功效。
4.4 抑菌試驗(yàn)(液體試管抑菌法)[4]
4.4.1 細(xì)菌抑菌試驗(yàn)取滅菌濕熱片，以滅菌營(yíng)養(yǎng)肉湯配制成0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125g/ml等濃度，每個(gè)濃度平行做4管，每管1ml，各管中分別加入相應(yīng)菌株(見(jiàn)表4)的新鮮活菌約50-100個(gè)，置37℃培養(yǎng)18-24h，于各個(gè)菌株相應(yīng)的分離培養(yǎng)基平板上劃線，再置37℃培養(yǎng)18-24h觀察是否有菌生長(zhǎng)，各細(xì)菌不生長(zhǎng)的最高藥物稀釋度即為該藥物的最低抑菌濃度(MIC)，同時(shí)設(shè)立陰性和陽(yáng)性對(duì)照。上述試驗(yàn)采用的各種菌株及相應(yīng)的培養(yǎng)基均為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，結(jié)果見(jiàn)表4。
4.4.2 真菌抑菌的試驗(yàn)取滅菌濕熱片，以滅菌真菌培養(yǎng)基稀釋成上述濃度，基本方法同前，所用菌株為白色念株菌，兩次培養(yǎng)溫度均為25-28℃，同時(shí)設(shè)立陰性和陽(yáng)性對(duì)照。上述菌株及相應(yīng)的培養(yǎng)基均為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 濕熱片的抑菌試驗(yàn)結(jié)果濕熱片濃度(g/kg)菌種 陰性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照0.2 0.1 0.05 0.025 0.0125大腸桿菌(44102) -++ + + - +綠膿桿菌(10104) -++ + + - +沙門(mén)氏菌(50094) --+ + + - +金葡菌(26003)--+ + + - +白色念珠菌(98001)--- + + - +表4結(jié)果顯示濕熱片在0.2g/ml時(shí)對(duì)5種試驗(yàn)菌均有一定的抑制作用，尤其是對(duì)白色念珠菌，其MTC為0.05g/ml，表明濕熱片具有一定的抑菌作用。
5、結(jié)論濕熱片具有較明顯的清熱、止瀉、鎮(zhèn)痛作用，對(duì)大腸桿菌、金葡萄、綠膿桿菌、沙門(mén)氏菌及白色念珠菌也有一定的抑菌作用。
下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。
實(shí)施例1片劑大 黃340g 槐花(炒炭)34g蒼術(shù)(泡)255g側(cè)柏葉(炒炭)34g羌 活170g 金銀花85g
制川烏170g 赤石脂(制)84g 苦杏仁60g檳榔(炒)68g以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各20g，赤石脂(制)、苦杏仁各5g，川烏15g、槐花10g、側(cè)柏葉6g，粉碎成細(xì)粉，備用。剩余大黃照流浸膏劑與浸膏劑(中國(guó)藥典2000年版一部附錄I O)項(xiàng)下方法，用60％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，備用。剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，制成顆粒，干燥，噴入揮發(fā)油，混勻，密閉，壓片，包糖衣，即得，制成1000片。功能主治清熱燥濕，澀腸止痢。用于腹痛、泄瀉、血痢，屬大腸濕熱證。用法用量口服，一次4片，一日2-3次。禁忌孕婦忌服。規(guī)格基片重0.25g實(shí)施例2膠囊劑大 黃380g 槐花(炒炭)40g 蒼術(shù)(泡)270g側(cè)柏葉(炒炭)45g羌 活190g金銀花100g制川烏190g 赤石脂(制)100g苦杏仁80g檳榔(炒)85g以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各20g，赤石脂(制)、苦杏仁各5g，川烏15g、槐花10g、側(cè)柏葉6g，粉碎成細(xì)粉，備用。剩余大黃照流浸膏劑與浸膏劑(中國(guó)藥典2000年版一部附錄I O)項(xiàng)下方法，用60％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，備用。剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次2小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，制成顆粒，干燥，噴入揮發(fā)油，混勻，密閉，制成膠囊1000粒。
實(shí)施例3顆粒劑大 黃310g 槐花(炒炭)30g蒼術(shù)(泡)235g側(cè)柏葉(炒炭)25g羌 活150g 金銀花65g制川烏180g 赤石脂(制)70g苦杏仁50g檳榔(炒)50g以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各20g，赤石脂(制)、苦杏仁各5g，川烏15g、槐花10g、側(cè)柏葉6g，粉碎成細(xì)粉，備用。剩余大黃照流浸膏劑與浸膏劑(中國(guó)藥典2000年版一部附錄I O)項(xiàng)下方法，用60％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，備用。剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成相對(duì)密度為1.35-1.45(50-80℃)的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，制成顆粒，干燥，噴入揮發(fā)油，混勻，密閉，即得。
實(shí)施例4片劑的質(zhì)量控制方法含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑甲醇-0.1％磷酸溶液(85∶15)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加無(wú)水乙醇-醋酸乙酯(2∶1)的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)(過(guò)三號(hào)篩)，精密稱取適量(約相當(dāng)于1片的重量)，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸(10∶1)的混合溶液15ml，加熱回流1小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇-醋酸乙酯(2∶1)的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加無(wú)水乙醇-醋酸乙酯(2∶1)的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，即得。測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每片含大黃以大黃素(C15H10O5)和大黃酚(C15H10O4)的總量計(jì)，不得少于0.15mg。
鑒別a.取[含量測(cè)定]項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。b.取本品10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處20分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯(50∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照[鑒別](2)項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液。另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取[鑒別](2)項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(8∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以石油醚(30-60℃)-丁酮(8∶2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
檢查烏頭堿限量，取本品8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺(8∶6∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種治療大腸濕熱癥的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物主要是由下述原料藥制成的大黃300-400重量份 槐花20-50重量份 蒼術(shù)220-280重量份側(cè)柏葉20-50重量份 羌活140-200重量份 金銀花50-110重量份制川烏140-200重量份赤石脂50-110重量份 苦杏仁35-90重量份檳榔40-90重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物主要是由下述原料藥制成的大黃340重量份 槐花34重量份 蒼術(shù)255重量份側(cè)柏葉34重量份 羌活170重量份 金銀花85重量份制川烏170重量份 赤石脂84重量份苦杏仁60重量份檳榔68重量份。
3.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物主要是由下述原料藥制成的大黃380重量份 槐花40重量份 蒼術(shù)270重量份側(cè)柏葉45重量份 羌活190重量份 金銀花100重量份制川烏190重量份 赤石脂100重量份 苦杏仁80重量份檳榔85重量份。
4.如權(quán)利要求1-3所述的中藥組合物，其特征在于槐花優(yōu)選槐花炒炭；蒼術(shù)優(yōu)選蒼術(shù)泡制；側(cè)柏葉優(yōu)選側(cè)柏葉炒炭；赤石脂優(yōu)選制赤石脂；檳榔優(yōu)選炒檳榔。
5.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法為以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各15-25重量份，赤石脂、苦杏仁各3-8重量份，川烏10-25重量份、槐花5-15重量份、側(cè)柏葉3-10重量份，粉碎成細(xì)粉，備用；剩余大黃用50-70％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成50-80℃相對(duì)密度為1.30-1.50的稠膏，備用；剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮2-4次每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成50-80℃相對(duì)密度為1.30-1.50的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，經(jīng)過(guò)常規(guī)工序直接或加入藥學(xué)上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、口服液體制劑、膠囊、顆粒劑、注射劑中的任一劑型。
6.如權(quán)利要求5所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于片劑的制備方法為以上十味，取大黃、蒼術(shù)、羌活各20重量份，赤石脂、苦杏仁各5重量份，川烏15重量份、槐花10重量份、側(cè)柏葉6重量份，粉碎成細(xì)粉，備用；剩余大黃用60％乙醇作溶劑，緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收至無(wú)醇味并濃縮成50-80℃相對(duì)密度為1.35-1.45的稠膏，備用；剩余蒼術(shù)、羌活加金銀花用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用；蒸餾后的水溶液另器保存；藥渣與檳榔及剩余的川烏、苦杏仁、赤石脂、側(cè)柏葉、槐花合并，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液加入蒸餾后的水溶液，濃縮成50-80℃相對(duì)密度為1.35-1.45的稠膏，加入上述細(xì)粉及稠膏，混勻，制成顆粒，干燥，噴入揮發(fā)油，混勻，密閉，壓片，包糖衣，即得。
7.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的含量測(cè)定方法為照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物片劑20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)過(guò)三號(hào)篩，精密稱取適量約相當(dāng)于1片的重量，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1-2小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸以8-12∶1-2比例的混合溶液15ml，加熱回流1-2小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明組合物制劑每單位量含大黃以大黃素和大黃酚的總量計(jì)，不得少于0.10-0.20mg。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于片劑的含量測(cè)定方法為照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑85∶15甲醇-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加2∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)過(guò)三號(hào)篩，精密稱取適量約相當(dāng)于1片的重量，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸以10∶1比例的混合溶液15ml，加熱回流1小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加2∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每片含大黃以大黃素和大黃酚的總量計(jì)，不得少于0.15mg。
9.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法包括如下鑒別中的一種或幾種a.取權(quán)利要求7所述含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10-20∶4-6∶1-2石油醚60-90℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；b.取本發(fā)明組合物片劑10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處15-30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液；另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以55-65∶1-2石油醚60-90℃-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照鑒別b項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液；另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取照鑒別b項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-12∶1-3苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以6-12∶1-3石油醚30-60℃-丁酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
10.如權(quán)利要求9所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于片劑的鑒別方法包括如下鑒別中的一種或幾種a.取權(quán)利要求8所述的含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15∶5∶1石油醚60-90℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；b.取本品10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處20分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液；另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以50∶1石油醚60-90℃-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照鑒別b項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液；另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取照鑒別b項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶2苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以8∶2石油醚30-60℃-丁酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
11.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的檢查方法為烏頭堿限量，取本發(fā)明組合物片劑8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理10-25分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶5-8∶1-2環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
12.如權(quán)利要求11所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的片劑的檢查方法為烏頭堿限量，取本品8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶6∶1環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
13.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括以下步驟含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑80-90∶10-20甲醇-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物片劑20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)過(guò)三號(hào)篩，精密稱取適量約相當(dāng)于1片的重量，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1-2小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸以8-12∶1-2比例的混合溶液15ml，加熱回流1-2小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加1-3∶1-2無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明組合物制劑每單位量含大黃以大黃素和大黃酚的總量計(jì)，不得少于0.10-0.20mg；鑒別a.取含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10-20∶4-6∶1-2石油醚60-90℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；b.取本發(fā)明組合物片劑10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處15-30分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液；另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以55-65∶1-2石油醚60-90℃-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照鑒別b項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液；另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取照鑒別b項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-12∶1-3苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以6-12∶1-3石油醚30-60℃-丁酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；檢查烏頭堿限量，取本發(fā)明組合物片劑8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理10-25分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至11.5-12.5，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶5-8∶1-2環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
14.如權(quán)利要求13所述的中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于片劑的方法包括以下步驟含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑85∶15甲醇-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；對(duì)照品溶液的制備，精密稱取大黃素和大黃酚對(duì)照品適量，分別加2∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液制成每1ml中含大黃素1μg、大黃酚2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)過(guò)三號(hào)篩，精密稱取適量約相當(dāng)于1片的重量，置錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置錐形瓶中，蒸干，殘?jiān)?0％乙醇-鹽酸以10∶1比例的混合溶液15ml，加熱回流1小時(shí)，迅速冷卻，移置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)?∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液適量使溶解，移置25ml量瓶中，加2∶1無(wú)水乙醇-醋酸乙酯的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每片含大黃以大黃素和大黃酚的總量計(jì)，不得少于0.15mg；鑒別a.取含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液20ml，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取大黃素、大黃酚對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含大黃素0.5mg、大黃酚1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl、分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15∶5∶1石油醚60-90℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)；b.取本品10片，除去糖衣；研細(xì)，加乙醚10ml，超聲處20分鐘，濾過(guò)，濾液揮至1ml，作為供試品溶液；另取蒼術(shù)對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以50∶1石油醚60-90℃-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；c.取羌活對(duì)照藥材0.5g，照鑒別b項(xiàng)下的對(duì)照藥材溶液的制備方法制成對(duì)照藥材溶液；另取異歐前胡素對(duì)照品，加乙醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取照鑒別b項(xiàng)下的供試品溶液10μl及上述對(duì)照藥材與對(duì)照品溶液各1μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶2苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約5cm，取出，晾干，再以8∶2石油醚30-60℃-丁酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展距約10cm，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；檢查烏頭堿限量，取本品8片，除去糖衣，研細(xì)，用10％碳酸鈉溶液潤(rùn)濕后，加乙醚50ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，用2％鹽酸溶液振搖提取2次，每次30ml，合并酸水液，用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至12，用乙醚振搖提取2次，每次30ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解并移至2ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取烏頭堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，精密吸取上述供試品溶液10μl、對(duì)照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶6∶1環(huán)己烷-醋酸乙酯-二乙胺為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)應(yīng)小于對(duì)照品的斑點(diǎn)或不出現(xiàn)斑點(diǎn)。
15.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物在制備治療大腸濕熱證藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療大腸濕熱癥的中藥組合物及其制備方法。該組合物主要由大黃、槐花、蒼術(shù)、側(cè)柏葉、羌活、金銀花、制川烏、赤石脂、苦杏仁、檳榔組成。本發(fā)明組合物制備時(shí)對(duì)不同組份采用煎煮、乙醇提取、蒸餾方法，達(dá)到有效成分的充分發(fā)揮；同時(shí)本發(fā)明還提供了對(duì)該組合物進(jìn)行成分鑒別、含量測(cè)定、檢查的質(zhì)量控制方法。本組合物治療泄瀉與痢疾具有很好的效果。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1579455SQ0314998
公開(kāi)日2005年2月16日 申請(qǐng)日期2003年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月1日
發(fā)明者張堅(jiān)力 申請(qǐng)人:張堅(jiān)力, 陳均耀