專利名稱：一種低毒性的鴉膽子油乳注射液及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低毒性的鴉膽子油乳注射液及制備方法發(fā)明背景鴉膽子油乳注射液臨床上主要用于治療肺癌、消化道腫瘤，主要活性成分為油酸。七十年代始，國內(nèi)專家就注意到了中藥鴉膽子的抗癌作用，進(jìn)行藥學(xué)、藥理及臨床等多方面的研究，在治療肺癌、肺癌腦轉(zhuǎn)移、消化道腫瘤、癌性胸腹水等方面都有較好的療效，但是在產(chǎn)品安全性方面也存在諸多問題，不良反應(yīng)較多，公開的文獻(xiàn)報(bào)道表明，鴉膽子油乳注射液主要不良反應(yīng)有惡心、厭食、嘔吐、心律和呼吸加快、紫紺，嚴(yán)重者可導(dǎo)致心律失常而死亡。在藥學(xué)方面，由于早期的制備工藝不合理，貯存過程中易產(chǎn)生油水分層現(xiàn)象，穩(wěn)定性較差，限制了該產(chǎn)品的臨床推廣。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決鴉膽子油乳注射液毒性大，安全性差，不良反應(yīng)多的問題，我們進(jìn)行了一系列的研究，發(fā)現(xiàn)鴉膽子中水溶性成分毒性大，盡管原工藝在提取過程中選擇性地提取了鴉膽子油，將絕大部分水溶性毒性成分去除，但得到的鴉膽子油中仍含有微量水溶性成分。為此，本發(fā)明采用了水洗工藝對鴉膽子油進(jìn)行了精制，方法是將鴉膽子油加熱至100℃，緩緩加入適量溫?zé)岬淖⑸溆盟校瑥?qiáng)力攪拌10分鐘，靜置分層，棄去水層，即得精制鴉膽子油。
在研究中我們還發(fā)現(xiàn)，制備工藝對鴉膽子油乳注射液質(zhì)量影響較大，原工藝制備初乳是先將甘油與大豆磷脂混合，然后加入鴉膽子油高速攪拌制成初乳；初乳再采用40Mpa壓力在均質(zhì)機(jī)中勻化三次，制成乳劑。但研究表明，此工藝制備的乳劑乳粒直徑大(大多在5μm以上，甚至到15μm)，因此，該產(chǎn)品部頒標(biāo)準(zhǔn)中顆粒細(xì)度訂為最大顆粒不超過15μm。但乳粒在此范圍乳劑不穩(wěn)定，常發(fā)生油水分層等現(xiàn)象，且乳粒直徑過大會引起靜脈炎、靜脈栓塞等副作用，影響用藥安全。為此，本發(fā)明改進(jìn)了初乳的制備方法并采用了二步乳化技術(shù)，使乳粒更均勻，更細(xì)膩，乳粒直徑可達(dá)到1μm，且95％的乳粒直徑小于0.4μm，最大顆粒不超過5μm，并且整個(gè)工藝過程避免乳劑長時(shí)間受熱產(chǎn)生毒性降解產(chǎn)物。
本發(fā)明使用的鴉膽子油可以是市售的鴉膽子油，也可以是通過本領(lǐng)域已知的提取鴉膽子油的常規(guī)方法制備，例如，取鴉膽子，粉碎，加入浸提劑浸提，合并浸提液，回收浸提溶劑等步驟制得。
因此，本發(fā)明提供一種鴉膽子油水包油乳針劑。根據(jù)本發(fā)明，具有優(yōu)點(diǎn)的是，所述針劑中含有5-30％(ml/ml)鴉膽子油，1-10％(g/ml)精制豆磷脂，1-10％(ml/l)甘油，制得的針劑乳粒直徑≤5μm。
根據(jù)本發(fā)明，具有優(yōu)點(diǎn)的是，鴉膽子油優(yōu)選精制鴉膽子油。
根據(jù)本發(fā)明，有利的是，針劑乳粒直徑優(yōu)選范圍是0.4μm-1μm。
根據(jù)本發(fā)明，有利的是，精制豆磷脂百分含量的優(yōu)選范圍是1-5％(g/ml)，甘油百分含量的優(yōu)選范圍是1-5％(m/ml)。
根據(jù)本發(fā)明，有利的是，精制豆磷脂更優(yōu)選的百分含量范圍是1-1.5％(g/ml)，甘油更優(yōu)選的百分含量范圍是1-2.5％(ml/ml)。
本發(fā)明的鴉膽子油乳針劑的生產(chǎn)方法包括以下步驟，取鴉膽子油加熱，加入豆磷脂剪切混合均勻；然后取注射用水、甘油加熱混合，緩緩加入已剪切混合均勻的鴉膽子油與豆磷脂的混合物，采用二步乳化的方法，連續(xù)循環(huán)，即成乳劑。
作為具體說明，本發(fā)明針劑的生產(chǎn)方法是首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至60-90℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓10-30MPa，高壓30-50Mpa，連續(xù)循環(huán)3-6遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
根據(jù)本發(fā)明，另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，針劑中的精制鴉膽子油是通過包括以下步驟的方法制得的將常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至80-100℃，緩慢注入溫?zé)岬倪m量注射用水中，加熱攪拌5-60分鐘，靜置使分層，棄去水層。
根據(jù)本發(fā)明，有利的是，經(jīng)安全性試驗(yàn)，本發(fā)明制備的產(chǎn)品毒性大大降低，原產(chǎn)品急性毒性試驗(yàn)LD50為6.25g/kg，而本發(fā)明產(chǎn)品小鼠靜脈給藥243g/kg(最大耐受量)也未見有動物死亡，毒性差異非常顯著。
根據(jù)本發(fā)明，有利的是，本發(fā)明所制得的鴉膽子油乳注射液經(jīng)指紋圖譜檢測，保留時(shí)間0-6分鐘之間非共有峰面積與主峰面積比值均小于1.5％，而采用原工藝制備的產(chǎn)品保留時(shí)間0-6分鐘之間非共有峰面積與主峰面積比值均大于2.0％，而且產(chǎn)品毒性大。
本發(fā)明所得到的鴉膽子油乳注射液經(jīng)動物試驗(yàn)，證明對血管無刺激性，也未出現(xiàn)過敏反應(yīng)；經(jīng)急性動物試驗(yàn)，小鼠靜脈給藥243g/kg(最大耐受量)未見有動物死亡。經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所、山東中醫(yī)藥研究所藥效學(xué)研究，證明本發(fā)明產(chǎn)品能抑制腫瘤的拓?fù)洚悩?gòu)酶的復(fù)制、重現(xiàn)及基因表達(dá)，抑制癌細(xì)胞內(nèi)DNA的生物合成；對小鼠S180、S37、U14肉瘤、EAC腹水癌、大鼠W206有明顯的抑制作用。經(jīng)647例臨床驗(yàn)證，證明本發(fā)明產(chǎn)品臨床應(yīng)用安全有效，未見有不良反應(yīng)發(fā)生。經(jīng)穩(wěn)定性考察，本發(fā)明所制得的產(chǎn)品1年半內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定，乳粒均勻，未見有油水分層現(xiàn)象。
本發(fā)明產(chǎn)品與現(xiàn)有技術(shù)產(chǎn)品主要特征比較見表1表1 本發(fā)明技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)的比較

*沈陽藥學(xué)院學(xué)報(bào)，蘇興仁等，1979，1019**中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，齊學(xué)東等，1996，16(3)137實(shí)用腫瘤雜志，蘇守元等，1989，3(3)2具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述鴉膽子油乳注射液的制備實(shí)施例1 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂15g甘油 25ml注射用水加至 1000ml制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至80℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓10MPa，高壓32Mpa，連續(xù)循環(huán)5遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
實(shí)施例2 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂10g甘油 10ml注射用水加至 1000ml
制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至60℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓30MPa，高壓50Mpa，連續(xù)循環(huán)5遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。。
實(shí)施例3 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂100g甘油 100ml注射用水加至 1000ml制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至80℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓10MPa，高壓32Mpa，連續(xù)循環(huán)5遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
實(shí)施例4 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂20g甘油 25ml注射用水加至 1000ml
制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至90℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓20MPa，高壓40Mpa，連續(xù)循環(huán)3遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
實(shí)施例5 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂30g甘油 25ml注射用水加至 1000ml制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至80℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓10MPa，高壓32Mpa，連續(xù)循環(huán)6遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
實(shí)施例6 處方精制鴉膽子油 100ml精制豆磷脂80g甘油 80ml注射用水加至 1000ml
制法首先將精制鴉膽子油倒入攪拌罐內(nèi)加熱至80℃，然后加入豆磷脂，剪切混合均勻。
將注射用水加入高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)罐中，再加入甘油，加熱至75℃混合，開啟均質(zhì)機(jī)，從加油孔中緩緩加入已剪切混合均勻的精制鴉膽子油與豆磷脂的混合物，加入完畢后關(guān)閉加油孔，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，使低壓10MPa，高壓32Mpa，連續(xù)循環(huán)4遍，取樣檢驗(yàn)，灌封滅菌即得。
精制鴉膽子油的制備實(shí)施例1 常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至100℃，緩慢注入溫?zé)岬牡攘孔⑸溆盟校訜釘嚢?0分鐘，靜置使分層，棄去水層。
實(shí)施例2 常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至100℃，緩慢注入溫?zé)岬?.5倍量注射用水中，加熱攪拌60分鐘，靜置使分層，棄去水層。
實(shí)施例3 常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至100℃，緩慢注入溫?zé)岬?倍量注射用水中，加熱攪拌5分鐘，靜置使分層，棄去水層。
權(quán)利要求
1.一種鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，該針劑中含有5-30％(ml/ml)鴉膽子油，1-10％(g/ml)精制豆磷脂，1-10％(ml/ml)甘油，制得的針劑乳粒直徑≤5μm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，其中的鴉膽子油優(yōu)選精制鴉膽子油。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，精制鴉膽子油是通過包括以下步驟的方法制得的將常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至80-100℃，緩慢注入溫?zé)岬倪m量注射用水中，加熱攪拌5-60分鐘，靜置使分層，棄去水層。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，針劑乳粒直徑的優(yōu)選范圍是0.4μm-1μm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，精制豆磷脂百分含量的優(yōu)選范圍是1-5％(g/ml)，甘油百分含量的優(yōu)選范圍是1-5％(ml/ml)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鴉膽子油水包油乳針劑，其特征在于，精制豆磷脂更優(yōu)選的百分含量范圍是1-1.5％(g/ml)，甘油更優(yōu)選的百分含量范圍是1-2.5％(ml/ml)。
7.一種權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的鴉膽子油水包油乳針劑的生產(chǎn)方法，其特征在于，該針劑的生產(chǎn)方法包括以下步驟，取鴉膽子油加熱，加入豆磷脂剪切混合均勻；然后取注射用水、甘油加熱混合，開啟均質(zhì)機(jī)，緩緩加入已剪切混合均勻的鴉膽子油與豆磷脂的混合物，調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機(jī)壓力，采用二步乳化的方法，連續(xù)循環(huán)3-6遍，即成乳劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的鴉膽子油水包油乳針劑生產(chǎn)方法，其特征在于，所采用的二步乳化的方法優(yōu)選壓力范圍是低壓10-30MPa，高壓30-50Mpa。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的鴉膽子油水包油乳針劑生產(chǎn)方法，其特征在于，所采用的二步乳化的方法更優(yōu)選的壓力范圍是低壓10-20MPa，高壓30-40Mpa。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的鴉膽子油水包油乳針劑生產(chǎn)方法，其特征在于，所采用的二步乳化方法的優(yōu)選循環(huán)次數(shù)為5遍。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低毒性的鴉膽子油乳注射液及制備方法。該注射液可由下述方法制備取鴉膽子油或精制鴉膽子油加熱，再加入豆磷脂混合；另取注射用水、甘油混合，加熱至75℃，緩緩加入已混合均勻的鴉膽子油與豆磷脂的混合物，用高壓均質(zhì)機(jī)循環(huán)乳化3－6遍，取樣、化驗(yàn)、灌封、滅菌即得。精制鴉膽子油是由常規(guī)提取的鴉膽子油加熱至80－100℃，緩慢注入溫?zé)岬淖⑸溆盟?，加熱攪拌，靜置使分層，棄去水層而得。本發(fā)明制備的鴉膽子油乳注射液具有良好的抗腫瘤作用，且毒性低、乳粒均勻、細(xì)膩、穩(wěn)定性好。
文檔編號A61K9/113GK1488395SQ0315602
公開日2004年4月14日 申請日期2003年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月28日
發(fā)明者李宏, 朱德領(lǐng), 于自勛, 李 宏 申請人:李宏, 朱德領(lǐng), 于自勛, 李 宏