專利名稱：一種治療抑郁癥的中藥復(fù)方制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑及其制備工藝，具體的說是以太子參、葛根、淫羊藿為原料按照特定的工藝制備的中成藥，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抑郁癥是一種以持久的情緒低落狀態(tài)，伴焦慮、軀體不適，睡眠障礙為主要表現(xiàn)的神經(jīng)癥。隨著社會(huì)的老齡化及不斷增加的社會(huì)壓力，抑郁癥的發(fā)病率逐年升高，美國(guó)的一份流行病學(xué)研究表明社區(qū)中有15％的人出現(xiàn)抑郁癥狀(Blazer，D.，Burcherr，B.，Service，C.，George，L.K.The association of age and depression aming the elderlyan epidemiologic exploration.J.Gerontol，1991，46，210-215)。歐洲的一份研究得出了相同的結(jié)論(Dufouil，C.，Dartigues，J.F.，F(xiàn)uhrer，R.Smptomes depressifs chez les personnes ageesconparison entre despopulations rurales et urbaines.Rev.Epidemiol.Sante Publique，1995，43，308-315)。近年來越來越多的研究資料表明，我國(guó)抑郁癥的發(fā)病率和就診率呈上升趨勢(shì)。近十幾年以來，抗抑郁藥的研究發(fā)展很快，許多新型抗抑郁藥層出不窮。首先發(fā)現(xiàn)的抗抑郁藥是50年代開發(fā)的單胺氧化酶抑制劑，稍后是三環(huán)類抗抑郁藥，后者迄今仍是主要的臨床用藥。繼上述二類藥物之后，又開發(fā)了四環(huán)類抗抑郁藥。80年代后第二代三環(huán)類藥物，尤其是5-羥色胺攝取抑制劑發(fā)展迅速。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同，抗抑郁藥大致分為三類三環(huán)類抗抑郁劑，雜環(huán)類抗抑郁劑，單胺氧化酶抑制劑等。抑郁癥屬于慢性病，西藥多數(shù)具有副作用，長(zhǎng)期服用上述抗抑郁藥，不僅需要昂貴的費(fèi)用，也給患者帶來了極大的毒副反應(yīng)。
目前尚有較少的專門抗抑郁中藥問世，而祖國(guó)醫(yī)學(xué)千百年來的臨床積累，有許多對(duì)抑郁癥行之有效的方藥，將其研究并開發(fā)出來，已是必然。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種可以治療抑郁癥或抑郁狀態(tài)的復(fù)方中藥制劑。
本發(fā)明的另一目的是提供治療抑郁癥或抑郁狀態(tài)的復(fù)方中藥制劑的制備方法。
本發(fā)明的解決方案是基于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)抑郁證發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)及治療原則，參考現(xiàn)代藥理、藥學(xué)研究成就，以藥理試驗(yàn)為基礎(chǔ)，篩選并確定以太子參多糖為主，以葛根黃酮和淫羊藿黃酮為輔的組方。最終可以保護(hù)神經(jīng)原，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，改善腦部供血，使腦內(nèi)神經(jīng)原功能保持正常，維持其神經(jīng)遞質(zhì)的正常分泌和代謝，最終改善抑郁狀態(tài)，治療抑郁癥。
本發(fā)明提供的一種治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑，其特征在于它由下列組份或下列組份的水或乙醇提取物作為活性成分的原料制成
太子參1000～2000重量份葛 根500～1500重量份淫羊藿100～900重量份本發(fā)明原料的重量?jī)?yōu)選配比為太子參1200～1800重量份葛 根700～1300重量份淫羊藿300～700重量份本發(fā)明原料的重量最佳配比為太子參1500重量份葛 根1000重量份淫羊藿500重量份本發(fā)明提供的治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑，其特征在于該復(fù)方中藥制劑含總多糖以葡萄糖計(jì)含量在8.0％～30.0％，總黃酮以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，含量在15.0％～60.0％。葛根素含量在6％～32％，淫羊藿苷含量在0.13％～3.04％。
本發(fā)明中所說的太子參為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria heterophylla(Mig.)Paxex Pax et Hoffm.的干燥塊根。葛根系豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根。淫羊藿為小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.的干燥地上部分。上述全部組分在《中華人民共和國(guó)藥典2000年版(一部)》中均有記載。
上述所用原料，可以按照常規(guī)的藥劑學(xué)方法制備成各種常規(guī)制劑。例如，膠囊劑，片劑，顆粒劑，丸劑，口服液，散劑，丹劑，膏劑等。
本發(fā)明提供了一種上述治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑的制備方法，該方法包括如下步驟(1)首先選取下列中藥為原料太子參1000～2000重量份葛 根500～1500重量份淫羊藿100～900重量份(2)取太子參，加入8～12倍量的水，提取，提取液濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.18～1.19；加入乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，去上清；沉淀加水溶解至密度為1.060～1.065，再加入乙醇至終濃度為70％，靜置至不再析出沉淀，去上清；沉淀冷凍干燥，得總多糖；(3)取葛根和淫羊藿，加入生藥重量的8～16倍的50～80％乙醇回流提取，提取液濾過，合并濾液，減壓回收乙醇濃縮至相對(duì)密度約為1.02～1.03；將溶液離心后，取上清通過大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，水液棄去；再用70～80％乙醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至浸膏狀，真空干燥，粉碎，得總黃酮；
(4)將步驟(2)中提取的總多糖與步驟(3)中提取的總黃酮粉碎，過篩，混合均勻后，作為復(fù)方制劑的原料藥；(5)將原料藥裝膠囊、壓片、制顆?；蛑瞥善渌幬飫┬?。
本發(fā)明具有益氣養(yǎng)陰、健脾益腎養(yǎng)心的功能。主治氣陰不足、心脾兩虛所致抑郁癥。癥見情緒低落，多思善慮，言語動(dòng)作減少，郁郁寡歡。心悸膽怯，少寐多夢(mèng)健忘，面色不華，頭暈神疲，食少倦怠乏力，目光遲滯，或心煩，舌質(zhì)淡，苔白，脈細(xì)弱。
方中以太子參為君藥，以益氣補(bǔ)陰，氣血足，心脾腎得養(yǎng)，精神愉快，情緒健康?，F(xiàn)代藥理研究，太子參主要活性成分是其多糖部分。它對(duì)小鼠抗疲勞，耐缺氧，耐低溫具有明顯的增強(qiáng)作用。還能增強(qiáng)小鼠免疫器官的重量，能夠激活小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能，提高小鼠免疫后血清溶血素含量。太子參臨床具有改善心氣虛患者心臟功能的作用，它能夠降低心肌耗氧指數(shù)，提高心肌血液供耗率。
方中以葛根、淫羊藿為臣；助太子參益氣，補(bǔ)脾益腎，同時(shí)以其葛根辛涼清散，促進(jìn)腦血流，改善微循環(huán)。葛根甘辛涼，歸脾胃經(jīng)，具有解肌退熱，生津透疹的作用。近代用于高血壓，痙項(xiàng)強(qiáng)痛[《中華人民共和國(guó)藥典2000年版(一部)》，第273頁]。李時(shí)珍的《本草綱目》記載葛根能“散郁火”。現(xiàn)代藥理研究，葛根黃酮為葛根的主要有效部分。葛根黃酮具有擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)，抗心肌缺血，抗腦缺血，改善腦功能，促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的作用。淫羊藿辛甘溫，歸肝腎經(jīng)。具有補(bǔ)腎壯陽，祛風(fēng)除濕的作用?！侗静輦湟分^淫羊藿“補(bǔ)命門，益精氣，堅(jiān)筋骨，利小便”?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》謂淫羊藿“益氣力，強(qiáng)志”?！度杖A子本草》謂淫羊藿主“丈夫絕陽無子，女人絕陰無子，老人昏耄，中所健忘，一切冷風(fēng)勞氣，筋骨攣急，四肢不仁，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力”?，F(xiàn)代藥理研究表明，淫羊藿具有明顯增強(qiáng)小鼠耐缺氧的能力，能夠明顯提高腎上腺皮質(zhì)功能的作用。增強(qiáng)下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸，性腺軸和胸腺軸的內(nèi)分泌系統(tǒng)功能作用。
上述三藥合用，氣陰并補(bǔ)，心神得養(yǎng)，脾氣健運(yùn)。則抑郁癥得以消除。對(duì)該方提取的有效部位群藥理研究表明，該藥對(duì)多種抑郁模型均有特異性地抑制作用，并能顯著升高抑郁動(dòng)物腦內(nèi)的5-羥色胺水平，對(duì)抗利血平所致單胺類遞質(zhì)耗竭。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1處方組成太子參2000重量份葛 根500重量份淫羊藿100重量份制備工藝取太子參，加入12倍量的水(相當(dāng)于生藥重量)，于95℃溫浸提取1次，每次2小時(shí)，提取液用紗布濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.19。加入乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，去上清。沉淀加水溶解至密度為1.060，再加入乙醇至終濃度為70％，靜置至不再析出沉淀，去上清。沉淀冷凍干燥，即得總多糖；取葛根和淫羊藿，加入8倍量(相當(dāng)于生藥重量)的70％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液濾過，合并濾液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.03(相當(dāng)于每1ml溶液含0.5g生藥)。將溶液離心后，取上清通過大孔吸附樹脂柱，先用4倍干樹脂重量(W/W)的水洗脫，水液棄去。再用4倍干樹脂重量的80％乙醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至浸膏狀，真空干燥，粉碎，即得總黃酮；將以上提取的總多糖與總黃酮粉碎，過60目篩，混合均勻后，作為復(fù)方制劑的原料藥。裝入膠囊即得本發(fā)明膠囊劑。
原料藥中，含總多糖以葡萄糖(C6H12O6)計(jì)含量在45.0％，總黃酮以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，含量在14.0％。葛根素(C21H20O9)含量在3.68％，淫羊藿苷含量在0.26％。
實(shí)施例2處方組成太子參1500重量份葛 根1000重量份淫羊藿500重量份制備工藝取太子參，加入10倍量的水(相當(dāng)于生藥重量)，于90℃溫浸提取3次，每次3小時(shí)，提取液用紗布濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.18。加入乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，去上清。沉淀加水溶解至密度為1.065，再加入乙醇至終濃度為70％，靜置至不再析出沉淀，去上清。沉淀冷凍干燥，即得總多糖；取葛根和淫羊藿葉，加入10倍量(相當(dāng)于生藥重量)的80％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液趁熱濾過，合并濾液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度約為1.03(相當(dāng)于每1ml溶液含0.5g生藥)。將溶液離心后，取上清通過大孔吸附樹脂柱，先用6倍干樹脂重量(W/W)的水洗脫，水液棄去。再用6倍干樹脂重量的80％乙醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至浸膏狀，真空干燥，粉碎，即得總黃酮；將以上提取的總多糖與總黃酮粉碎，過60目篩，混合均勻后，作為復(fù)方制劑的原料藥。裝入膠囊即得本發(fā)明膠囊劑。
原料藥中，含總多糖以葡萄糖(C6H12O6)計(jì)含量在34.56％，總黃酮以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，含量在17.54％。葛根素(C21H20O9)含量在6.59％，淫羊藿苷含量在0.65％。
實(shí)施例3處方組成
太子參1000重量份葛 根1500重量份淫羊藿900重量份制備工藝取太子參，加入8倍量的水(相當(dāng)于生藥重量)，于90℃溫浸提取3次，每次2小時(shí)，提取液用紗布濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.19。加入乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，去上清。沉淀加水溶解至密度為1.065，再加入乙醇至終濃度為70％，靜置至不再析出沉淀，去上清。沉淀冷凍干燥，即得總多糖；取葛根和淫羊藿，加入14倍量(相當(dāng)于生藥重量)的80％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液趁熱濾過，合并濾液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度約為1.02(相當(dāng)于每1ml溶液含0.5g生藥)。將溶液離心后，取上清通過大孔吸附樹脂柱，先用8倍干樹脂重量(W/W)的水洗脫，水液棄去。再用10倍干樹脂重量的80％乙醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至浸膏狀，真空干燥，粉碎，即得總黃酮；將以上提取的總多糖與總黃酮粉碎，過60目篩，混合均勻后，作為復(fù)方制劑的原料藥。裝入膠囊即得本發(fā)明膠囊劑。每粒膠囊裝0.37g。
原料藥中，含總多糖以葡萄糖(C6H12O6)計(jì)含量在12.0％，總黃酮以淫羊藿苷(C33H40O15)計(jì)，含量在27.0％。葛根素(C21H20O9)含量在12.0％，淫羊藿苷含量在1.24％。
含量測(cè)定方法(1)總多糖測(cè)定方法苯酚試液的配制稱取苯酚99.8g，鋁片0.1g，碳酸氫鈉0.05g，進(jìn)行蒸餾，收集82oC度餾分10g，加入蒸餾水190ml，即得。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱105oC干燥的葡萄糖98.4mg，用蒸餾水配置成100ml溶液。取出10ml，用蒸餾水稀釋到100ml待用。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備用移液管精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分別置10ml具塞試管中，依次加入蒸餾水使最終體積為2.0ml，另取2.0ml蒸餾水作空白對(duì)照。各管加入1.0ml苯酚試液，搖勻，迅速滴加濃硫酸各5ml，搖勻后放置5min，置沸水浴中加熱15min(要求準(zhǔn)確記時(shí))，取出至冷水中冷卻10min。于UV-1800PC紫外分光光度計(jì)490nm處測(cè)定各管吸收度，并吸收度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。
樣品的測(cè)定取原料藥粉末，精密稱定20mg，置100ml容量瓶中，各加入蒸餾水溶解并定容至至刻度，搖勻。再精密吸取0.5ml，置10ml具塞試管中。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，測(cè)定吸收度，根據(jù)回歸方程計(jì)算供試品溶液中多糖的含量，即得。
(2)總黃酮的測(cè)定方法對(duì)照品溶液的制備精稱葛根素對(duì)照品適量，置25ml容量瓶中，用無水乙醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得1ml中含葛根素0.1mg的溶液。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取葛根素對(duì)照溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分別置于10ml容量瓶中，用無水乙醇溶解并定容至刻度，搖勻。以無水乙醇作為空白，在TV-1800PC紫外分光光度計(jì)250nm處測(cè)定吸收度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。
樣品的測(cè)定取原料藥粉末，精密稱定10mg，置50ml容量瓶中，各加入80％乙醇溶解并定容至至刻度，搖勻。再精密吸取1ml，置25ml容量瓶中，加80％乙醇稀釋至刻度，搖勻。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，測(cè)定吸收度，根據(jù)回歸方程計(jì)算供試品溶液中總黃酮的含量，即得。
(3)淫羊藿苷的測(cè)定方法照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。乙腈-水(27∶73)為流動(dòng)相；紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm；柱溫30℃。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，置10ml量瓶中加甲醇至刻度，搖勻配制成濃度為每1ml含0.77mg的溶液，精密吸取1ml，置5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻配制成濃度為0.154mg/ml的淫羊藿苷溶液。
供試品溶液的制備取原料藥粉末，精密稱定64mg，置10ml量瓶中，加入80％乙醇超聲處理5-10分鐘，搖勻并定容至刻度，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，濾液備用。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
(4)葛根素測(cè)定方法照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。乙腈-0.5％磷酸(10∶90)為流動(dòng)相；紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm；柱溫30℃。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，置25ml量瓶中，加甲醇溶解，搖勻并定容至刻度，制成濃度為每1ml含400ug的溶液，精密吸取2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻制成每ml含80ug的葛根素溶液。
供試品溶液的制備取原料藥粉末，精密稱定32mg，置100ml量瓶中，加80％乙醇，超聲處理2-5分鐘，搖勻并定容至刻度。用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)例1
對(duì)小鼠抑郁模型的治療作用觀察本發(fā)明膠囊劑對(duì)小鼠抑郁模型的治療作用。本發(fā)明膠囊0.37g/粒，批號(hào)020813，用時(shí)以蒸餾水配至所需濃度。其它試劑藥品有利血平注射液，1mg/mL，批號(hào)20000401，上海醫(yī)科大學(xué)制藥有限公司生產(chǎn)。
試驗(yàn)動(dòng)物雄性KM小鼠，非近交系封閉群，體重(19.04±0.98)g，共60只。由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，合格證號(hào)SCXK11-00-0006。實(shí)驗(yàn)室室溫23-25℃，相對(duì)濕度50％～65％，換氣扇通氣，自然光源12小時(shí)/日，籠養(yǎng)，每籠10只，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠隨機(jī)分成5組，每組12只，實(shí)驗(yàn)第1天每鼠預(yù)先進(jìn)行懸尾試驗(yàn)與強(qiáng)迫性游泳試驗(yàn)，以誘導(dǎo)抑郁模型。于誘導(dǎo)的第2天開始灌胃給藥，在第1次藥后1h測(cè)定小鼠自主活動(dòng)，然后重復(fù)懸尾和游泳試驗(yàn)，連續(xù)7天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，每鼠皮下注射利血平注射液(3mg/kg)，同時(shí)給予相應(yīng)藥物，1.5小時(shí)后分別測(cè)定上眼瞼下垂、運(yùn)動(dòng)不能的動(dòng)物個(gè)數(shù)及7d內(nèi)小鼠死亡數(shù)。
1.小鼠自主活動(dòng)觀測(cè)5min內(nèi)跨線數(shù)(米字線為準(zhǔn))、直立探究數(shù)(以小鼠兩前肢抬起為準(zhǔn))及二者間比值。
2.小鼠懸尾試驗(yàn)將小鼠尾端2cm的部位用木夾子固定，倒懸于12×27×27(cm)箱內(nèi)，其頭部離底面約5cm，懸掛6min，記錄其后4min內(nèi)累積不動(dòng)時(shí)間。
3.小鼠強(qiáng)迫性游泳試驗(yàn)將小鼠放入高20cm，直徑12cm的圓柱型玻璃缸中，水深12cm，水溫25℃，觀察6min，記錄其后4min內(nèi)累積不動(dòng)時(shí)間。不動(dòng)時(shí)間是指小鼠在水中停止掙扎，或呈漂浮狀態(tài)，僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面的持續(xù)時(shí)間。
4.利血平拮抗試驗(yàn)4.1上瞼下垂觀察30sec內(nèi)眼瞼至少閉合一半的動(dòng)物個(gè)數(shù)。
4.2運(yùn)動(dòng)不能將小鼠放入直徑7.5cm的圓形白紙中央，觀察15sec內(nèi)仍呆在圈內(nèi)的動(dòng)物個(gè)數(shù)。
經(jīng)預(yù)試確定下列給藥方案，本發(fā)明膠囊800、400、200mg/kg。阿米替林，70mg/kg。分別給小鼠口服灌胃，0.2mL/10g。
本試驗(yàn)的空白對(duì)照為蒸餾水，陽性藥對(duì)照為阿米替林片，25mg/片，它是一種抗抑郁藥，可以治療各種類型的抑郁癥。湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)020214，批準(zhǔn)文號(hào)湘衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1996)第021160號(hào)。
本試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以EXCEL軟件處理。
表1本發(fā)明膠囊對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響(x±s)組別劑量 探究次數(shù) 跨線次數(shù) 探究/跨線mg/kg 次/5分鐘 次/5分鐘對(duì)照組 20.25±16.71 48.75±18.91 0.37±0.22
阿米替林70 21.33±18.02 54±19.99 0.36±0.23本發(fā)明 80023.33±17.70 50.83±28.21 0.44±0.27本發(fā)明 40020.67±14.30 47.5±23.110.42±0.42本發(fā)明 20017.5±15.89 39±20.09 0.35±0.24與對(duì)照組相比，P＞0.05。n＝12表2本發(fā)明膠囊對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響(x±s)組別 劑量 累積不動(dòng)時(shí)間(s)mg/kg給藥前第3天 第4天 第5天 第6天 第7天對(duì)照組 99.05 79.95 ± 128.82 ±135.95 139.42150.49±42.41 37.09 31.81 ±27.38 ±40.19 ±42.32阿米替70 106.4845.09 ± 48.45 ±30.19 ± 34.83±32.16 ±林 ±38.16 36.81* 29.6** 23.03** 27.21** 30.58**本發(fā)明800 88.67 110.88 91.52 ±89.52 ± 87.59± 98.15 ±±40.99 ±36.8838.98* 53.01* 35.55** 33.54**本發(fā)明400 108.66115.52 97.06 117.4 ± 105.6± 98.09 ±±41.58 ±25.53±45.32 49.999 35.84*30.33**本發(fā)明200 103.16113.19 97.88 107.29 127.04131.37±42.53 ±52.39±58.87 ±59.31 ±39.46 ±46.69與對(duì)照組相比*P＜0.05，**P＜0.01。n＝12表3本發(fā)明膠囊對(duì)小鼠強(qiáng)迫性游泳的影響(x±s)組別 劑量累積不動(dòng)時(shí)間(s)mg/kg給藥前 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天對(duì)照組 73.5± 83.28 ± 84.04 ± 121.03 ± 134.29 122.5520.12 40.69 46.97 41.54 ±40.05 ±38.75阿米替70 71.19 ±44.64 ± 34.11 ± 46.33 ± 44.15 ± 41.34±林 21.45 26.65* 18.46**38.13** 38.3** 31.92**本發(fā)明800 77.16 ±92.25 ± 59.33 85.34 ± 95.14 ± 91.2 ±19.03 43.9 ±42.3340.16* 42.27* 27.59*本發(fā)明400 88.26 ±111.18 81.59 104.02 ± 111.69 84.6436.39 ±41.93±48.9735.34 ±33.69 ±40.02*本發(fā)明200 82.52 87.89 ± 72.97 105.69 106.24 82.97
±37.99 36.34 ±46.92±32.89 ±40.06 ±45.65*與對(duì)照組相比*P＜0.05，**P＜0.01。n＝12表4本發(fā)明膠囊對(duì)利血平所致眼瞼下垂、運(yùn)動(dòng)不能作用的影響(x±s)組別劑量 眼瞼下垂對(duì)抗百分率運(yùn)動(dòng)不能對(duì)抗百分率mg/kg(只)(％) (只)(％)對(duì)照組 12/12 0 11/12 0阿米替林70 5/1258.33*2/1283.33**本發(fā)明 800 3/1275.0* 3/1275.0*本發(fā)明 400 5/1258.33*5/1258.33*本發(fā)明 200 7/1241.67*6/1250*x2檢驗(yàn)，與對(duì)照組相比，**P＜0.01，*P＜0.05。n＝12注對(duì)抗百分率＝(對(duì)照組-給藥組)/對(duì)照組×100％實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明膠囊在所測(cè)的劑量范圍內(nèi)對(duì)小鼠自主活動(dòng)無明顯影響。在“行為失望”造模后，本發(fā)明膠囊200-800mg/kg可使小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間與強(qiáng)迫性游泳的不動(dòng)時(shí)間明顯減少，與對(duì)照組比較有顯著性差異(p＜0.05或p＜0.01)。在拮抗利血平實(shí)驗(yàn)中，隨著本發(fā)明膠囊劑量增大，出現(xiàn)眼瞼下垂、運(yùn)動(dòng)不能的動(dòng)物個(gè)數(shù)也隨之減少，對(duì)抗率分別達(dá)到75％、58.33％，41.67％、經(jīng)X2檢驗(yàn)有顯著性差異，由此說明，本發(fā)明膠囊能對(duì)抗利血平引起小鼠眼瞼下垂，且有良好的量效關(guān)系。提示本發(fā)明膠囊具有一定抗抑郁作用。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)例2對(duì)5-羥色胺酸誘導(dǎo)小鼠甩頭行為及腦內(nèi)單胺遞質(zhì)的影響觀察本發(fā)明膠囊劑對(duì)5-羥色胺酸(5-HTP)誘發(fā)小鼠甩頭行為及腦內(nèi)單胺遞質(zhì)的影響。本發(fā)明膠囊0.370g/粒，批號(hào)020813，用時(shí)以蒸餾水配至所需濃度。其它試劑藥品有5-羥色胺(5-HT)，Sigma公司，批號(hào)67H0791；5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)，Sigma公司，批號(hào)26H0362；5-羥色胺酸(5-HTP)，Sigma公司，批號(hào)89H0698；鄰苯二甲醛(OPT)，北京科華特種試劑聯(lián)合開發(fā)中心生產(chǎn)，批號(hào)981012；高碘酸鈉(A.R)，北京化工廠生產(chǎn)，批號(hào)840823；L-半胱氨酸，上?？颠_(dá)氨基酸廠產(chǎn)品，批號(hào)940904；克郁(嗎氯貝胺片)，0.1g/片，湖南制藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào)000611-1，該藥為選擇性MAO-A抑制劑。其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。試驗(yàn)儀器為850型熒光分光光度計(jì)(HITACHI，Japan)。
試驗(yàn)動(dòng)物雄性ICR小鼠，非近交系封閉群，體重(19.42±0.68)g。由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003。實(shí)驗(yàn)室室溫22-25℃，相對(duì)濕度45％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠10只，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠隨機(jī)分成5組，每組12只，每天1次給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)7d，第7天于測(cè)試前1h灌胃克郁膠囊(100mg/kg)，然后灌胃受試藥物，給藥劑量同前。陽性藥帕羅西汀給臨床等效量(4.67mg/kg)。1h后再ip 5-HTP 20mg/kg，注射后即開始觀察小鼠甩頭潛伏期及注射5-HTP后第25-35分鐘內(nèi)的甩頭次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即處死小鼠，迅速取出大腦，-30℃冰箱保存，用OPT縮合反應(yīng)熒光分光光度法測(cè)定腦組織中5-HT、5-HIAA含量。
經(jīng)預(yù)試確定下列給藥方案，本發(fā)明膠囊800、400、200mg/kg。阿米替林70mg/kg，分別給小鼠口服灌胃，0.2mL/10g。
本試驗(yàn)測(cè)試指標(biāo)為小鼠10min內(nèi)的甩頭次數(shù)、腦組織中5-HT、5-HIAA測(cè)定。
本試驗(yàn)的空白對(duì)照為蒸餾水，陽性藥對(duì)照為阿米替林片，25mg/片，它是一種抗抑郁藥，可以治療各種類型的抑郁癥。湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)020214，批準(zhǔn)文號(hào)湘衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1996)第021160號(hào)。
本試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以EXCEL軟件處理。
表5本發(fā)明膠囊對(duì)對(duì)5-羥色胺酸誘發(fā)小鼠甩頭行為的影響(x±s)組別 劑量甩頭潛伏期 甩頭次數(shù)mg/kg (s) (10min)對(duì)照組1303.7±354.87 9.92±8.52阿米替林 70 784.92±331.14**26.75±18.06**本發(fā)明膠囊800 658.67±388.79**37.58±26.61**本發(fā)明膠囊400 733.25±526.58**17.67±10.23*本發(fā)明膠囊200 1129.0±552.7 12.0±9.67與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。n＝1權(quán)利要求
1. 一種治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑，其特征在于它由下列組份或下列組份的水或/和乙醇提取物作為活性成分的原料制成太子參1000～2000重量份葛 根500～1500重量份淫羊藿100～900重量份。
2.按照權(quán)利要求1所述的復(fù)方中藥制劑，其特征在于它由下列組份或下列組份的水或/和乙醇提取物作為活性成分的原料制成太子參1200～1800重量份葛 根700～1300重量份淫羊藿300～700重量份。
3.按照權(quán)利要求1的所述復(fù)方中藥制劑，其特征在于它由下列組份或下列組份的下列組份的水或/和乙醇提取物作為活性成分的原料制成太子參1500重量份葛 根1000重量份淫羊藿500重量份。
4.按照權(quán)利要求1、2或3所述的治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑，其特征在于該復(fù)方中藥制劑含總多糖以葡萄糖計(jì)含量在8.0％～50.0％，總黃酮以淫羊藿苷計(jì)，含量在10.0％～30.0％，葛根素含量在3％～15％，淫羊藿苷含量在0.13％～1.4％。
5.按照權(quán)利要求4所述的復(fù)方中藥制劑，其特征在于所述中藥制劑是任何一種藥物學(xué)上所說的劑型。
6.按照權(quán)利要求5所述的復(fù)方中藥制劑，其特征在于所述劑型為膠囊劑，片劑，顆粒劑，丸劑，口服液，散劑，丹劑，膏劑中的任一種藥物劑型。
7. 一種治療抑郁癥的復(fù)方中藥制劑的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟(1)首先選取下列中藥為原料太子參1000～2000重量份葛 根500～1500重量份淫羊藿100～900重量份；(2)取太子參，加入8～12倍量的水，提取，提取液濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.18～1.19；加入乙醇至終濃度為80％，靜置過夜，去上清；沉淀加水溶解至密度為1.060～1.065，再加入乙醇至終濃度為70％，靜置至不再析出沉淀，去上清；沉淀冷凍干燥，得總多糖；(3)取葛根和淫羊藿，加入生藥重量的8～16倍的50～80％乙醇回流提取，提取液濾過，合并濾液，減壓回收乙醇濃縮至相對(duì)密度約為1.02～1.03；將溶液離心后，取上清通過大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，水液棄去；再用50～80％7醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮至浸膏狀，真空干燥，粉碎，得總黃酮；(4)將步驟(2)中提取的總多糖與步驟(3)中提取的總黃酮粉碎，過篩，混合均勻后，作為復(fù)方制劑的原料藥；(5)將原料藥裝膠囊、壓片、制顆?；蛑瞥善渌幬飫┬?。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于步驟(2)中使用相當(dāng)于生藥重量8～12倍量的水，于80～95℃溫浸提取1～3次，每次2～3小時(shí)；步驟(3)中所使用的乙醇濃度80％，乙醇量為生藥重量的12倍，回流提取1～3次，每次1～3小時(shí)。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中濾液通過大孔吸附樹脂柱，先用2～8倍干樹脂重量的水洗脫，水液棄去；再用4～12倍干樹脂重量的80％乙醇洗脫。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于所述水洗脫的量為干樹脂重量4倍，用乙醇洗脫的量為干樹脂重量8倍。
全文摘要
一種治療抑郁癥的中藥復(fù)方制劑及其制備方法，它是以太子參、葛根和淫羊藿為原料，經(jīng)過水或/和乙醇提取分離，篩選出以太子參多糖為主，以葛根黃酮和淫羊藿黃酮為輔的復(fù)方制劑，制成一定的劑型，本發(fā)明具有益氣養(yǎng)陰、健脾益腎養(yǎng)心的功能；主治氣陰不足、心脾兩虛所致抑郁癥。對(duì)該方提取的有效部位群藥理研究表明，該藥對(duì)多種抑郁模型均有特異性地抑制作用，并能顯著升高抑郁動(dòng)物腦內(nèi)的5－羥色胺水平，對(duì)抗利血平所致單胺類遞質(zhì)耗竭。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1589865SQ0315636
公開日2005年3月9日 申請(qǐng)日期2003年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月5日
發(fā)明者邢東明, 杜力軍, 王偉, 張陸軍, 王進(jìn)玲 申請(qǐng)人:清華大學(xué), 北京清大英華生物技術(shù)有限公司