專利名稱：止癢劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及預(yù)防或治療搔癢性癥狀的藥劑(以下也叫做止癢劑)，特別涉及具有消除由特應(yīng)性癥狀而產(chǎn)生的搔癢感效果的止癢劑。
背景技術(shù)：
近年，特應(yīng)性皮炎、特應(yīng)性結(jié)膜炎、老年性皮膚干燥癥等搔癢性癥狀的患者數(shù)目急劇增加。這些疾病伴有不明原因的強烈的搔癢感，人們認(rèn)為因搔癢行為(搔癢引發(fā)的抓、搔行為)可引發(fā)粘膜或皮膚的炎癥。因此，解除搔癢感對這些癥狀的消除非常重要。
以往，使用外用甾體類藥劑、免疫抑制劑、抗組胺劑、抗過敏劑等藥劑治療搔癢性癥狀。但長期使用甾體類藥劑、免疫抑制劑會產(chǎn)生副作用，所以限制了其使用；從治療效果這一點講，還未獲得十分滿意的抗組胺劑、抗過敏劑。
到目前為止，止癢劑的評價是將組胺、5-羥色胺等誘發(fā)搔癢的物質(zhì)施用到動物皮膚內(nèi)，測定搔癢行為。但，近年有報道由特應(yīng)性皮炎等的搔癢性癥狀產(chǎn)生的搔癢，不單單是由肥大細(xì)胞釋放的組胺等引起的反應(yīng)(J.Dermatological Science 25，20-28，2001)。
因此，期望開發(fā)出基于新的作用機制的預(yù)防和治療特應(yīng)性皮炎等搔癢性癥狀的止癢劑。
另一方面，雖然有前列腺素類是誘發(fā)搔癢的成分這樣的報道，但還沒有作為止癢劑使用的(J.Am.Acad.Dermatol.47，28-32，2002)。
發(fā)明公開本發(fā)明的目的是提供副作用少、基于新的作用機制的預(yù)防或治療搔癢性癥狀的藥劑，特別提供預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀的藥劑。
為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明者們建立了后述的評價方法，應(yīng)用該方法進(jìn)行了檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)前列腺素類副作用少，具有良好的止癢效果，特別能有效抑制伴隨特應(yīng)性癥狀的搔癢感，從而完成了本發(fā)明。
也就是說，本發(fā)明的一實施方案是提供以前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽為有效成分的預(yù)防或治療搔癢性癥狀的藥劑。
本發(fā)明的另一實施方案提供以前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽為有效成分的預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀的藥劑。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為前列腺素激動劑。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素激動劑為前列腺素DP受體激動劑、前列腺素EP受體激動劑或前列腺素IP受體激動劑。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為前列腺素E類。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自BW245C、ZK110841、RS93520、15-甲基PGD2或其光學(xué)異構(gòu)體、及前列腺素D2中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素D2、BW245C、ZK110841、R893520、15-甲基PGD2中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素E2、恩前列醇(enprostil)、硫前列酮(sulprostone)、AH13205、GR63799、M&B28767、米索前列醇(misoprostol)、11-脫氧PGE1、ONO-AE-248、TEI3356、16，16-二甲基-PGE2、1-羥基-PGE1、前列腺素E1和利馬前列腺素(limaprost)中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素E1、前列腺素E2、硫前列酮、恩前列醇和利馬前列腺素中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素E類為選自前列腺素E1、前列腺素E2和利馬前列腺素中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自西卡前列腺素(cicaprost)、貝前列腺素(beraprost)、伊洛前列腺素(iloprost)、ONO-1301、卡巴前列腺素(carbaprostacycline)、前列腺素I2和克林前列腺素(clinprost)中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素I2、西卡前列腺素(cicaprost)、貝前列腺素(beraprost)、伊洛前列腺素和克林前列腺素中的1種或更多。
本發(fā)明的另一實施方案提供上述藥劑，其中特應(yīng)性癥狀為特應(yīng)性皮炎或特應(yīng)性結(jié)膜炎。
本發(fā)明的另一實施方案提供作為外用劑的上述藥劑。
本發(fā)明的另一實施方案提供預(yù)防或治療搔癢性癥狀的方法，包括給哺乳動物施用有效量的對癥狀進(jìn)行預(yù)防或治療的前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽。
本發(fā)明的另一實施方案提供預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀的方法，包括給哺乳動物施用有效量的對癥狀進(jìn)行預(yù)防或治療的前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽。
本發(fā)明的另一實施方案提供前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽在制備預(yù)防或治療搔癢性癥狀藥劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一實施方案提供前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽在制備預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀藥劑中的應(yīng)用。
附圖簡述

圖1表示施用藥物后4周觀察到的皮膚炎分?jǐn)?shù)。
圖2表示施用藥物后第4周觀察到的皮膚炎分?jǐn)?shù)。
實施發(fā)明的最佳狀態(tài)以下，對本發(fā)明的止癢劑進(jìn)行說明。
本發(fā)明的特征為包含前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽。
這里，“前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽”還包含所有的異構(gòu)體(幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體)、水合物、溶劑合物、結(jié)晶體。
這里，“藥學(xué)上允許的鹽”指，例如與鈉、鉀等堿金屬形成的鹽，與鈣、鎂等堿土金屬形成的鹽，與氨、甲基胺、二甲基胺、環(huán)戊基胺、芐胺、哌啶、單乙醇胺、二乙醇胺、單甲基單乙醇胺、緩血酸胺、賴氨酸、四烷基銨、三(羥甲基)氨甲烷等形成的鹽，與硫酸、鹽酸、磷酸等礦酸形成的鹽，與醋酸、草酸、乳酸、酒石酸、延胡索酸、馬來酸、甲烷磺酸、苯磺酸等有機酸形成的鹽等。
本發(fā)明的有效成分“前列腺素類”是指以前列腺烷酸為基本結(jié)構(gòu)，根據(jù)與五員環(huán)部分連接的氧原子和雙鍵的不同分為A、B、C、D、E、F、G、H、I、J類，根據(jù)側(cè)鏈雙鍵的數(shù)目又進(jìn)一步分為1，2，3類。
例如，前列腺素D類是指具有9α-羥基和11-氧基的前列腺烷酸。
例如，前列腺素E類是指具有9-氧基和11-羥基的前列腺烷酸。
例如，前列腺素I類是指具有11-羥基和6，9-環(huán)氧基的雙環(huán)前列腺烷酸。
優(yōu)選的前列腺素類是前列腺素激動劑。
“前列腺素激動劑”是指對前列腺素受體有激動作用的物質(zhì)，即便是作為前列腺素拮抗劑而知的化合物，只要其呈現(xiàn)劑量依賴的激動作用，也屬于本發(fā)明的前列腺素激動劑的范疇。
這類所講“前列腺素受體”是指各種前列腺素特異的受體，其與G蛋白偶聯(lián)，可觸發(fā)以cAMP和肌醇1，4，5，-三磷酸作為第二信使的信號傳遞系統(tǒng)。
優(yōu)選的前列腺素激動劑的例子是前列腺素DP受體、EP受體或IP受體的各激動劑。
前列腺素DP受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠DP受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與DP受體有親和性；且可活化腺苷酸環(huán)化酶使cAMP的產(chǎn)生呈現(xiàn)化合物濃度依賴性上升(參照Proc Natl Acad SciUSA.1994 Nov 8；91(23)11192-6，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
根據(jù)受體種類的不同，前列腺素EP受體激動劑可分為EP1、EP2、EP3、EP4 4種亞型的受體激動劑。EP1受體是與Ca2+募集系統(tǒng)偶聯(lián)的受體，EP2、EP4受體是與腺苷酸環(huán)化酶的活化相偶聯(lián)的受體，EP3受體是與腺苷酸環(huán)化酶的抑制相偶聯(lián)的受體。
前列腺素EP1受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠EP1受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與EP1受體有親和性；且在同一細(xì)胞中可使因Ca2+從細(xì)胞外的內(nèi)流而引起的細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]的上升呈現(xiàn)化合物濃度依賴性(J Biol Chem 1993 Sep25；268(27)20175-8；BiochimBiophys Acta 1995 May 11；1244(1)41-8；這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
前列腺素EP2受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠EP2受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與EP2受體有親和性；且在同一細(xì)胞中可活化腺苷酸環(huán)化酶系使cAMP的產(chǎn)生呈現(xiàn)化合物濃度依賴性上升(參照Br J Pharmacol 1986 Jan；87(1)45-56；Mol Pharmacol 1994Aug；46(2)213-20，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
前列腺素EP3受體激動劑根據(jù)受體種類的不同而分為α、β或γ，EP3α受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠EP3α受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與EP3α受體有親和性；且在同一細(xì)胞中可抑制腺苷酸環(huán)化酶系的活化，使cAMP的產(chǎn)生呈現(xiàn)化合物濃度依賴性地減少。或通過在同一細(xì)胞中可使因Ca2+從細(xì)胞外的內(nèi)流而引起的細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]的上升呈現(xiàn)化合物濃度依賴性進(jìn)行判斷(J Biol Chem 1992 Apr 5，267(10)6463-6；Biochim Biophys Acta 1993 Feb 17，1175(3)343-50；Biochim Biophys Res Commun1994 Oct 14；204(1)303-9，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
前列腺素EP4受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠EP4受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與EP4受體有親和性；且在同一細(xì)胞中可活化腺苷酸環(huán)化酶系使cAMP的產(chǎn)生呈現(xiàn)化合物濃度依賴性地上升(JBiol Chem 1993 Apr 15，268(11)7759-62；FEBS Lett 1995 May15，364(3)339-41，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
前列腺素IP受體激動劑的判斷可通過應(yīng)用表達(dá)鼠IP受體的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合試驗，可看到與IP受體有親和性；且在同一細(xì)胞中可活化腺苷酸環(huán)化酶系使cAMP的產(chǎn)生呈現(xiàn)化合物濃度依賴性上升?；蛘咄ㄟ^在同一細(xì)胞中引起PI(磷脂酰肌醇)代謝的亢進(jìn)呈現(xiàn)化合物濃度依賴性來判斷(J Biol Chem 1994 Apr 1，269(13)9986-92；FEBS Lett1994 May 9，344(1)74-8，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在本說明書中作為引用)。
具體而言，前列腺素DP、EP及IP受體激動劑包括前列腺素E1、前列腺素E2、前列腺素E3、依克拉前列腺素(Ecraprost)、克林前列腺素(Clinprost)、匹米前列腺素(Pimilprost)、利馬前列腺素(Limaprost)、奧扎格雷(Ozagrel)、愛布迪拉西特(Ibudilast)、奧諾前列腺素(Ornoprostil)、前列地爾(Alprostadil)、恩前列醇(Enprostil)、前列腺素I1、前列腺素I2、前列腺素I3、貝前列腺素(Beraprost)、伊洛前列腺素(Iloprost)、BW245C、ZK110841、RS93520、硫前列酮(sulprostone)、AH13205、GR63799、M&B28767、氟前列醇(Fluprostenol)、氯前列醇(Cloprostenol)、前列烯(Prostalene)、西卡前列腺素(Cicaprost)、奧克提米巴特(Octimibata)、米索前列醇(Misoprostol)、利奧前列素(Rioprostil)、依前列醇(Epoprostenol)、地諾前列酮(Dinoprostone)、Treprostinil、Treprostinol、異丙基烏諾前列酮(Isopropyl Unoprostone)、吉美前列腺素(Gemeprost)、羅沙前列醇(Rosaprostol)、ONO-1608、ONO-8815、ONO-4819、DE-085、ecraprost(AS-013)、11-脫氧-PGE1(11-deoxy-PGE1)、AY23626、ONO-1301、ONO-AE-248、TEI3356、13，14-脫氫-15-環(huán)己基卡巴前列腺素(cyclohexylcarbaprostacycline)、前列腺素D1、前列腺素D2、前列腺素D3、15-甲基PGD2(15-methyl PGD2)及其光學(xué)異構(gòu)體(例如，15(S)-15-甲基PGD2)、16，16-二甲基-PGE2(16，16-dimethyl-PGE2)、卡巴前列腺素(carbaprostacycline)、異卡巴前列素(isocarbacycline)、1-羥基PGE1(1-hydroxy PGE1)及它們的鹽(例如，鈉、鈣、賴氨酸、三(羥甲基)氨甲烷等)、衍生物(例如，羧酸的酯化體等)。
代表性的DP受體激動劑包括BW245C、ZK110841、RS93520、15-甲基PGD2及其光學(xué)異構(gòu)體(特別是15(S)-15-甲基PGD2)、前列腺素D2。
代表性的EP受體激動劑包括前列腺素E2、恩前列醇、硫前列酮、AH13205、GR63799、M&B28767、米索前列醇、11-脫氧-PGE1、ONO-AE-248、TEI3356、16，16-二甲基-PGE2、1-羥基PGE1、前列腺素E1和利馬前列腺素。
代表性的IP受體激動劑包括西卡前列腺素、貝前列腺素、伊洛前列腺素、ONO-1301、卡巴前列腺素、前列腺素I2和克林前列腺素。
需要指出的是上面用縮略符號表示的化合物分別具有以下普通名稱。
BW245C3-[(3R)-3-環(huán)己基-3-羥丙基]-2，5-二氧-(4S)-咪唑烷庚酸；ZK1108417-[(1R，2R，3R，5R)-5-氯-2-[(1E，3S)-3-環(huán)己基-3-羥基-1-丙烯基]-3-羥基環(huán)戊基]-(5Z)-5-庚烯酸；
RS935204-[(1R，2R，3R，6R)-2-[(3S)-3-環(huán)己基-羥基-1-丙烯基]-3-羥基二環(huán)[4.2.0]辛-7-亞基(イリデン)-(4z)-丁酸；ONO-8815L-賴氨酸(Z)-7-[(1R，2R，3R，5R)-5-氯-3-羥基-2-[(E)-(S)-4-(1-乙基環(huán)丁基)-4-羥基-1-丁烯基]-環(huán)戊基]-5-庚烯酸酯；ONO-1301[7，8-二氫-5-[(E)-[[α-(3-吡啶基)-苯亞甲基]氨基-氧]乙基]-1-萘基-氧]醋酸；AH13205反式-2-[4-(1-羥己基)苯基]-5-氧-環(huán)戊烷-庚酸GR63799(-)-[1(R)-[1α(z)，2β(R*)，3α]-7-[-3-羥基-2-(2-羥基-3-苯氧基丙氧基)-5-氧環(huán)戊基]-4-庚烯酸4-(苯甲酰氨)苯基酯；TEI3356(16S)-15-脫氧-16-羥基-甲基-9-(0)-甲撐-6(9α)-前列腺素I1。
對本發(fā)明的止癢劑無限定，只要其能減輕、消除搔癢感即可，但本發(fā)明的止癢劑尤其對特應(yīng)性(由IgE抗體介導(dǎo)的抗原特異性免疫應(yīng)答)引發(fā)的搔癢有效。從這一點而言，本發(fā)明的止癢劑包含預(yù)防或治療特異性癥狀的藥劑。
本發(fā)明中的“搔癢癥狀”指皮膚和粘膜上存在局部乃至廣泛性搔癢以及與此相關(guān)的炎癥。例如，可舉出疥瘡、蕁麻疹、濕疹、干燥病(老年性干燥病、皮脂缺乏性濕疹等)、銀屑病、皮膚搔癢癥、癢疹等。
本發(fā)明中的“特應(yīng)性癥狀”指特應(yīng)性為原因引發(fā)的皮膚和粘膜上存在局部乃至廣泛性搔癢以及與此相關(guān)的炎癥，即特應(yīng)性為原因而引發(fā)的搔癢性癥狀。例如，可舉出特應(yīng)性皮炎和特應(yīng)性結(jié)膜炎等。
本發(fā)明中的“特應(yīng)性皮炎”指反復(fù)加重、緩解，以搔癢性濕疹為主要病變的疾病，在特應(yīng)性體質(zhì)(易于產(chǎn)生IgE抗體的體質(zhì))的個體中易于產(chǎn)生。
(評價方法)為了評價本發(fā)明的止癢劑，通過下面的例1和2進(jìn)行檢測后確立了評價方法。對其評價方法進(jìn)行說明。
本評價方法著眼于與其它品系的鼠相比，發(fā)生特應(yīng)性皮炎的NC/Nga鼠的搔癢行為持續(xù)時間延長。
總之，該評價方法是對特應(yīng)性皮炎有止癢效果的藥物的評價方法，其特征在于，在一定時間以上測定發(fā)生特應(yīng)性皮炎的NC/Nga鼠的自發(fā)性搔癢行為。
在評價方法中所用的NC/Nga鼠是發(fā)生特應(yīng)性皮炎的病態(tài)鼠。該鼠自然發(fā)生強烈的搔癢行為和皮膚病變，出現(xiàn)炎性細(xì)胞向病變部位的顯著浸潤和血中IgE值的上升等特應(yīng)性皮膚炎類似的癥狀(H.Matsuda，et al.，Int Immunol.9(3)，461-466(1997)；H.Suto，et al.，Int Arch Allergy Immunol.120(suppl 1)，70-75(1999))。
對NC/Nga系鼠無特殊限制，只要發(fā)生特應(yīng)性皮膚炎即可，但優(yōu)選出生后約8周齡以后的鼠，特別優(yōu)選15-20周齡的鼠。
待檢藥物及對照藥物可經(jīng)口、涂布、皮內(nèi)、腹腔內(nèi)等施用，但優(yōu)選涂布施用。
搔癢行為的測定通過檢測動物重復(fù)行為的裝置進(jìn)行。以下具體顯示1例檢測動物重復(fù)行為的裝置。
將磁石裝到出現(xiàn)特應(yīng)性皮膚炎的NC/Nga鼠的兩后肢，將鼠收到卷成環(huán)狀圈的空間中。當(dāng)鼠運動時，磁石也隨之運動，線圈中產(chǎn)生電流。磁石的運動產(chǎn)生電流的變化，可對其進(jìn)行檢測、計算和分析。該裝置作為搔癢測定系統(tǒng)(Neuroscience)有商品化的。
根據(jù)搔癢時間的長短對所檢測出的搔癢行為進(jìn)行分類，總結(jié)計算其頻率，進(jìn)行統(tǒng)計分析。抽出搔癢時間為1.0秒或以上的。還優(yōu)選抽出1.5秒或以上的。因為抽出1.5秒或以上的行為時，誤差較少。
通過該評價方法，可在高精度水平進(jìn)行對特應(yīng)性皮膚炎有止癢效果的藥物的評價。總之，該方法通過區(qū)別測定造成誤差原因的步行等搔癢行為以外的動作和動物自然進(jìn)行的作為一般癥狀的搔癢行為與特應(yīng)性皮膚炎模型鼠特有的強烈的搔癢行為，可在高精度水平進(jìn)行藥物止癢效果的評價。
(例1)[每一次持續(xù)時間內(nèi)ICR、BALB/c、皮膚炎發(fā)病和未發(fā)病的NC/Nga鼠自發(fā)性搔癢行為數(shù)的比較]應(yīng)用的實驗動物是產(chǎn)生特應(yīng)性皮膚炎樣癥狀的NC/Nga系雄性鼠(14周齡)，和作為對照的ICR鼠(7周齡)、BALB/c鼠(5周齡)、未產(chǎn)生皮膚炎的NC/Nga鼠(8周齡)，所有鼠的體重約30g，每組6只。
將測定搔抓用的磁鐵插入到上述動物的后肢，1天后進(jìn)行試驗。將每只實驗動物放到鼠籠中，馴化1小時后，用24小時搔癢測定系統(tǒng)(Neuroscience)測定搔癢行為。根據(jù)記錄的波形，將0.3-0.5秒、0.5-1.0秒、1.0-1.5秒和1.5秒以上的足部運動作為1次搔癢行為，用搔抓計測、解析軟件(Neuroscience)進(jìn)行數(shù)值化，然后進(jìn)行統(tǒng)計分析處理，測定鼠系統(tǒng)間的顯著性差異。
(實驗結(jié)果)結(jié)果如下表所示。
ICR、BALB/c、皮膚炎發(fā)病和未發(fā)病的NC/Nga鼠自發(fā)性搔癢行為數(shù)持續(xù)時間(秒) ICR BALB/c NC/Nga(未發(fā)病) NC/Nga(發(fā)病)0.3-0.5 1570±1601050±224781±81 1419±1850.5-1.0 967±110 634±110 500±58 976±1491.0-1.5 180±22 120±29 96±14 358±66*1.5以上 85±11 55±12 42±8600±64***p＜0.05、**p＜0.01(Tukey檢驗)測定了各組自發(fā)性搔癢行為數(shù)，0.3-0.5秒和0.5-1.0秒的搔癢行為無差異，但發(fā)生皮膚炎的NC/Nga鼠中1.0秒以上的搔癢行為比其它組顯著性增加，特別是1.5秒以上的搔抓行為數(shù)顯著性增加。
在上例的基礎(chǔ)上確立了有止癢效果的藥物的評價方法，它包括抽取測定特應(yīng)性皮膚炎發(fā)病NC/Nga鼠的1.0秒以上的搔癢行為，優(yōu)選抽取測定1.5秒以上的搔癢行為。
(例2)tacrolimus(FK506)、地塞米松外用對NC/Nga鼠自發(fā)性搔癢行為的作用用止癢效果已為眾所周知的藥物，通過上面確立的評價方法檢測其止癢效果。
實驗動物應(yīng)用體重約30g、14周齡的產(chǎn)生特應(yīng)性皮膚炎的NC/Nga系雄性鼠，每組6只。
進(jìn)行本試驗時，應(yīng)用市售的搔癢測定系統(tǒng)(Neuroscience)。將測定搔抓用的磁鐵插入到上述動物的后肢，每只鼠放到測定用的鼠籠中，24小時測定搔癢行為數(shù)(用藥前的值)。其后，將100％乙醇溶解的0.1％的tacrolimus(藤澤藥品工業(yè))及地塞米松(和光純藥)各200μl涂布于鼠的頸部和背部皮膚，再記錄24小時的搔癢行為數(shù)(用藥后的值)。對照組涂布100％乙醇。將所得結(jié)果中足部運動1.5秒以上的作為1次搔癢行為，將其數(shù)值化，進(jìn)行統(tǒng)計分析處理，測定用藥前的值與用藥后的值間的顯著性差異。
結(jié)果如下表所示。
Tacrolimus、地塞米松外用的作用涂布組 用藥前的值 用藥后的值對照組 392±104 352±1230.1％tacrolimus 600±64267±45**0.1％地塞米松567±77286±52****P＜0.01(配對t檢驗)該結(jié)果提示，上述評價方法可測定出tacrolimus(FK506)、地塞米松抑制自發(fā)性搔癢行為數(shù)的作用。
用上述評價方法進(jìn)行以下試驗例的實驗，應(yīng)用自然發(fā)病的特應(yīng)性皮膚炎樣皮膚疾病的NC/Nga鼠進(jìn)行實驗，結(jié)果表明許多前列腺素類能有效抑制自然發(fā)病所引起的搔癢行為。
前列腺素類抑制以往的抗組胺劑及抗過敏劑無效的搔癢行為。因此，我們認(rèn)為前列腺素類以與這些藥物不同的作用機制抑制搔癢。
另外提示，前列腺素類外用時具有與因其副作用而限制了長期連續(xù)應(yīng)用的甾類制劑、免疫抑制劑同等及其以上的止癢效果。因此，從外用時副作用小、適于長期連用這一點來講，前列腺素類優(yōu)于這些藥。
本發(fā)明的止癢劑可經(jīng)口、非經(jīng)口或局部任一途徑施用。
本發(fā)明的止癢劑中前列腺素類預(yù)防或治療癥狀的有效量可根據(jù)患者的體重、年齡、性別等適當(dāng)增減，但通常1次施用0.1-100μg，1天可以施用1次-數(shù)次。
另外，本發(fā)明的止癢劑可與抗組胺劑(例如，苯海拉明、吡氯芐氧胺、撲爾敏、雷尼替丁及其鹽等)聯(lián)合作為有效成分施用。
本發(fā)明的止癢劑可制備成醫(yī)藥組合物，在有效成分中添加制劑化中常規(guī)應(yīng)用的載體、賦形劑、其它的添加劑。
制劑用的載體和賦形劑包括，例如水、乙醇、乳糖、微晶性纖維素、液體石蠟、硬化油、蜂蠟、角鯊?fù)?、硬脂醇、乙二醇等及其它常用的試劑?br> 添加劑包括，例如崩解劑(淀粉等)、結(jié)合劑(羥丙基纖維素、低取代羥丙基纖維素)、潤滑劑(滑石、硬脂酸甘油等)、抗氧化劑、保護(hù)劑(對羥基苯甲酸酯等)、包衣劑(明膠、羥丙基纖維素等)、著色料、調(diào)味矯臭劑、美白劑(鞣花酸鈉等)、表面活性劑(脫水山梨糖醇脂肪酸酯)、增塑劑、保濕劑(甘油、丙二醇、聚乙二醇、透明質(zhì)酸等)等常用的成分。
本發(fā)明的止癢劑可以片劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑、液體劑、膠體劑、硬膏劑、軟膏劑、乳膏劑、貼劑、氣溶膠劑等劑型作為內(nèi)服劑、注射劑、外用劑(包括點眼劑、點鼻劑)等施用。
從能直接施用到患部、施用容易、降低全身副作用發(fā)生的可能性等點出發(fā)，優(yōu)選的劑型是外用劑。
這里所講的“外用劑”包括外用的液體劑、氣溶膠劑、外用散劑、軟膏劑、乳膏劑、膠體劑、硬膏劑、貼劑等。
通過以下實施例和試驗例進(jìn)一步對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不限定于此。在本發(fā)明敘述的基礎(chǔ)上本領(lǐng)域技術(shù)人員可對其進(jìn)行各種改變、修飾，這些變化、修飾也包含在本發(fā)明內(nèi)。
實施例實施例1稱量下面的各成分，混合均一后通過直接打片法對所得混合粉末進(jìn)行打片，得到每片重300mg的片劑。
利馬前列腺素 0.6g撲爾敏 100g乳糖 1700g微結(jié)晶纖維素 500g低取代羥丙基纖維素L-HPC(信越化學(xué)) 500g
滑石 49.4g硬化蓖麻油 50g實施例2稱量下面的成分，混合均一后，加入下面體積的凈化水和乙醇，得到1000ml液體劑。
利馬前列腺素 0.1g乙醇 200ml凈化水 800ml實施例3將下列各成分混合均一，乳化，再加入適量的香料，得到500g乳劑。
硫前列酮 0.5g馬來酸吡氯芐氧胺 5g鞣花酸鈉 5g透明質(zhì)酸鈉 3g對羥基苯甲酸甲酯 2g凈化水 218.5g液體石蠟(#70) 50g角鯊?fù)? 100g十六醇十八醇混合物 60g蜂蠟 20g單硬脂酸甘油 15g脫水山梨糖醇單月桂酸酯 20g對羥基苯甲酸丙酯 1g實施例4稱量下面各成分，混合均一后，將所得混合粉末填充到2號硬膠囊，每個填充250mg，獲得膠囊劑。
利馬前列腺素 0.5g鹽酸苯海拉明 100g
乳糖 360g微結(jié)晶纖維素 500g滑石 39.5g實施例5將下列各成分混合均一，乳化，再加入適量的香料，得到500g乳劑。
前列腺素E2 0.5g馬來酸吡氯芐氧胺 5g鞣花酸鈉 5g透明質(zhì)酸鈉 3g對羥基苯甲酸甲酯 2g凈化水 218.5g液體石蠟(#70) 50g角鯊?fù)? 100g十六醇十八醇混合物 60g蜂蠟 20g單硬脂酸甘油 15g脫水山梨糖醇單月桂酸酯 20g對羥基苯甲酸丙酯 1g試驗例試驗例1對NC鼠自發(fā)搔癢行為的作用將磁石植入到體重約30g、20周齡的發(fā)生特應(yīng)性皮膚炎的NC/Nga鼠(購自SLC)的兩足，應(yīng)用搔癢測定系統(tǒng)(Neuroscience)通過對磁力的感知來測定鼠足部的運動。搔抓行為中1.5秒以上的作為搔癢行為，連續(xù)測定其次數(shù)。由于搔癢行為有晝間的節(jié)律，所以測定實驗前24小時各動物的晝間搔癢節(jié)律，然后將經(jīng)10％乙醇溶解的0.1％前列腺素E2(PGE2)(Cayman Chemical)以0.2ml/只的比例涂到鼠的背部皮膚。測定其后24小時的搔癢行為，比較用藥前后的搔癢行為數(shù)。由于各動物間的差異比較大，所以將用藥前的初期值作為100％將實驗數(shù)據(jù)數(shù)值化。用100％乙醇作為對照，用地塞米松(和光純藥)(甾類制劑)、tacrolimus(藤澤藥品工業(yè))(免疫抑制劑)作為比較藥物，進(jìn)行同樣地試驗。結(jié)果如表1所示。
表1

**P＜0.01(配對t檢驗)N＝6通過外用0.1％的前列腺素E2可減少NC鼠的自發(fā)性搔癢行為，與止癢效果已知的地塞米松和tacrolimus具有同等強度的止癢效果。
實施例2對NC鼠自發(fā)搔癢行為的作用將磁石植入到體重約30g、20周齡的發(fā)生特應(yīng)性皮膚炎的NC/Nga鼠(購自SLC)的兩足，應(yīng)用搔癢測定系統(tǒng)(Neuroscience)通過對磁力的感知來測定鼠足部的運動。搔抓行為中1.5秒以上的作為搔癢行為，連續(xù)測定其次數(shù)。由于搔癢行為有晝間的節(jié)律，所以測定實驗前24小時各動物的晝間搔癢節(jié)律，然后將10％乙醇溶解的各藥物以0.2ml/只的比例涂到鼠的背部皮膚。應(yīng)用前列腺素E2(PGE2)(CaymanChemical)、前列腺素D2(PGD2)(Cayman Chemical)、利馬前列腺素(合成品)、硫前列酮(合成品)及貝前列腺素(合成品)作為本發(fā)明的藥物。測定其后24小時的搔癢行為，比較用藥前后的搔癢行為數(shù)。從涂藥前后24小時的總搔癢次數(shù)算出搔癢抑制率，實驗數(shù)據(jù)示于表2中。
搔癢抑制率(％)＝(涂布前搔癢次數(shù)-涂布后搔癢次數(shù))×100/涂布前搔癢次數(shù)與各藥物濃度涂布組的各個動物對應(yīng)的藥物涂布前后的搔癢次數(shù)用t檢驗(paired t-test)進(jìn)行處理，進(jìn)行顯著性差異的檢驗。顯著性差異在0.5％以下的判斷為“有效”。
用100％乙醇作為對照，用表2所示濃度的地塞米松(和光純藥)(甾類制劑)、tacrolimus(FK-506)(藤澤藥品工業(yè))(免疫抑制劑)、撲爾敏(金剛化學(xué))(抗組胺藥)作為比較藥物，進(jìn)行同樣地試驗。但撲爾敏是經(jīng)口施用。結(jié)果如表2所示。
表2

*P＜0.05、**P＜0.01 N＝8通過外用0.1％的前列腺素E2可減少NC鼠的自發(fā)性搔癢行為，與作為特應(yīng)性皮膚炎治療藥而知的地塞米松和tacrolimus具有同等強度的止癢效果。另外，前列腺素G2、利馬前列腺素、硫前列酮和貝前列腺素顯示高于傳統(tǒng)的特應(yīng)性皮膚炎治療藥10-100倍的止癢效果?？菇M胺藥撲爾敏不能抑制自發(fā)性搔癢行為。
實施例3對NC鼠皮膚炎模型的作用應(yīng)用本領(lǐng)域人員眾所周知的方法(參照J(rèn)pn.J.Pharmacol.76，175-183(1998)Jun Hiroi，et al.Effects of TacrolimusHydrate(FK-506)Ointment on Spontaneous Dermatitis in NC/NgaMice)進(jìn)行如下實驗以確認(rèn)前列腺素類的止癢效果。
(實驗方法)動物從日本SLC購入4周齡的SPF NC鼠(雄性)，到達(dá)后直接與發(fā)生了皮膚炎的雄性NC鼠(20周齡以上)一起居住2周以下，以誘發(fā)搔癢行為。每籠皮膚炎發(fā)病鼠和皮膚炎未發(fā)病鼠各4只，放到有鋸屑的鼠籠(34×17×39cm)中，于室溫23±3℃、濕度55±15％、照明12小時(am 7:00-pm 19:00)的動物房中飼養(yǎng)。
同居2周后取出購入的鼠，以每籠8只放到其它籠中，再繼續(xù)飼養(yǎng)14周直到實驗開始。在藥物涂布之前將鼠分開，每籠4只飼養(yǎng)，以使各籠鼠的皮膚炎分?jǐn)?shù)均等。
皮膚炎分?jǐn)?shù)分為毛皮光滑、脫發(fā)、出血、痂皮形成4項，分別按無癥狀0；輕度1；中度2；重度3計分(合計最小0；合計最大12)。
藥物施用給因與皮膚炎發(fā)病NC鼠同居而發(fā)生皮膚炎的20周齡的NC鼠背部皮膚涂布100％乙醇、溶于100％乙醇的各種0.01％的利馬前列腺素或貝前列腺素(各合成品)，用Eppendorf移液管各涂200μl，7次/周，涂布4周。
未處理組未實施任何處理。各組均是每組8只進(jìn)行試驗，通過上述皮膚炎分?jǐn)?shù)進(jìn)行皮膚炎癥狀的觀察，1次/周，觀察4周。
從各組的皮膚炎分?jǐn)?shù)求出平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差，用t檢驗(t-test)統(tǒng)計處理各用藥組對乙醇施用組的顯著性差異。
(實驗結(jié)果)皮膚炎癥狀的觀察結(jié)果如圖1和圖2所示(圖中*p＜0.05)。
如圖1和圖2所示，與乙醇施用組相比，利馬前列腺素和貝前列腺素施用組具有顯著性皮膚炎分?jǐn)?shù)抑制作用。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性本發(fā)明的止癢劑可特異性抑制可引發(fā)皮膚炎等炎癥的搔癢性癥狀，尤其對特應(yīng)性癥狀有效。另外，本發(fā)明的止癢劑有良好的止癢效果而沒有傳統(tǒng)的甾類制劑、免疫抑制劑所出現(xiàn)的副作用，所以即便長期使用其安全性高。另外，本發(fā)明的止癢劑可抑制傳統(tǒng)的抗組胺藥及抗過敏藥無效的搔癢。
權(quán)利要求
1.預(yù)防或治療搔癢性癥狀的藥劑，它以前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽為有效成分。
2.預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀的藥劑，它以前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽為有效成分。
3.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為前列腺素激動劑。
4.權(quán)利要求3的藥劑，其中前列腺素激動劑為前列腺素DP受體激動劑、前列腺素EP受體激動劑或前列腺素IP受體激動劑。
5.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為前列腺素E類。
6.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為選自BW245C、ZK110841、RS93520、15-甲基PGD2或其光學(xué)異構(gòu)體、及前列腺素D2中的1種或更多。
7.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素D2、BW245C、ZK110841、RS93520、15-甲基PGD2中的1種或更多。
8.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素E2、恩前列醇、硫前列酮、AH13205、GR63799、M&B28767、米索前列醇、11-脫氧PGE1、ONO-AE-248、TEI3356、16，16-二甲基-PGE2、1-羥基-PGE1、前列腺素E1和利馬前列腺素中的1種或更多。
9.權(quán)利要求8的藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素E1、前列腺素E2、硫前列酮、恩前列醇和利馬前列腺素中的1種或更多。
10.權(quán)利要求9的藥劑，其中前列腺素E類為選自前列腺素E1、前列腺素E2和利馬前列腺素中的1種或更多。
11.權(quán)利要求1或2的藥劑，其中前列腺素類為選自西卡前列腺素、貝前列腺素、伊洛前列腺素、ONO-1301、卡巴前列腺素、前列腺素I2和克林前列腺素中的1種或更多。
12.權(quán)利要求11的藥劑，其中前列腺素類為選自前列腺素I2、西卡前列腺素、貝前列腺素、伊洛前列腺素和克林前列腺素中的1種或更多。
13.權(quán)利要求2-12任一項的藥劑，其中特應(yīng)性癥狀為特應(yīng)性皮炎或特應(yīng)性結(jié)膜炎。
14.權(quán)利要求1-13任一項的藥劑，其為外用劑。
15.預(yù)防或治療搔癢性癥狀的方法，包括給哺乳動物施用對癥狀的預(yù)防或治療有效量的前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽。
16.預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀的方法，包括給哺乳動物施用對癥狀的預(yù)防或治療有效量的前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽。
17.前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽在制備預(yù)防或治療搔癢性癥狀藥劑中的應(yīng)用。
18.前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽在制備預(yù)防或治療特應(yīng)性癥狀藥劑中的應(yīng)用。
全文摘要
以前列腺素類或其藥學(xué)上允許的鹽為有效成分的本發(fā)明的藥劑，其副作用小，具有止癢效果，特別是能有效抑制伴隨特應(yīng)性癥狀的搔癢感。
文檔編號A61K31/5575GK1610552SQ0380182
公開日2005年4月27日 申請日期2003年2月21日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月22日
發(fā)明者佐藤史衛(wèi), 新井嚴(yán), 高野憲一, 田名見亨, 八木慎 申請人:大正制藥株式會社, 佐藤史衛(wèi)