專(zhuān)利名稱(chēng)：皂角苷配基及其衍生物的治療方法和用途的制作方法
發(fā)明的領(lǐng)域本發(fā)明有涉及皂角苷配基、相關(guān)的化合物及其衍生物的治療方法和用途。
皂角苷配基，相關(guān)的化合物及其衍生物的用途是在治療非認(rèn)知的神經(jīng)變性，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性、運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性，或受體功能障礙或丟失方面。在另外方面，本發(fā)明涉及在這樣的治療中使用的組合物。
發(fā)明的背景認(rèn)知功能障礙是癡呆狀況和綜合征的特征，如阿耳茨海默疾病(AD)，阿耳茨海默型老年性疾呆，Lewy body疾呆和血管性疾呆。輕度認(rèn)知功能障礙也是一些非癡呆狀況和綜合癥的特征，如輕微的認(rèn)知損傷(MCI)，年齡相關(guān)的記憶損傷(AAMI)，孤獨(dú)癖和神經(jīng)損傷。
非認(rèn)知的神經(jīng)變性(即，不存在認(rèn)知功能障礙的神經(jīng)變性)，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性(即，不存在認(rèn)知功能障礙的神經(jīng)肌肉變性)和運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性是以下?tīng)顩r和綜合癥的特征諸如帕金森氏病，肌肉營(yíng)養(yǎng)不良包括面肩肱的肌肉營(yíng)養(yǎng)不良(FSH)，裘馨氏(Duchenne)肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，貝克氏(Beck)肌肉營(yíng)養(yǎng)不良和布魯士氏(Bruce)肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，富克司(Fuchs)營(yíng)養(yǎng)不良，肌強(qiáng)直病的營(yíng)養(yǎng)不良，角膜營(yíng)養(yǎng)不良，反身交感神經(jīng)性營(yíng)養(yǎng)不良綜合癥(RSDSA)，神經(jīng)血管營(yíng)養(yǎng)不良，重癥肌無(wú)力，蘭伯特伊頓(Lamlerteaton)病，亨丁頓(Huntington)氏病，肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)和多發(fā)性硬化。
受體功能障礙或丟失——特別是煙酸和/或蠅蕈堿乙酰膽堿受體和/或多巴胺受體和/或腎上腺受體的功能障礙或丟失——是某些或所有的以上狀況和綜合癥的特征。不存在認(rèn)知的神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或喪失也是以下?tīng)顩r和綜合癥的特征如姿勢(shì)性的低血壓，慢性疲勞綜合癥，哮喘，易感心臟衰竭和斑狀變性。
以上狀況和綜合癥在整個(gè)的社會(huì)中是重大的和日益增長(zhǎng)的問(wèn)題，因?yàn)樯谕档脑黾雍蛯?duì)外來(lái)疾病的控制，人口統(tǒng)計(jì)的分布圖正在大大延伸到更多的老年人口。迫切需要能夠治療、或有助于控制或預(yù)防這些的病癥的藥物。
DE-A-4303214(其公開(kāi)的內(nèi)容結(jié)合在此引為參考)提出皂角苷和皂角苷配基在治療病毒疾病方面的用途，但是沒(méi)有資料使在該領(lǐng)域的熟練人員可以選擇具體的化合物類(lèi)型用來(lái)對(duì)付具體病毒疾病。
WO-A-99/16786(其公開(kāi)的內(nèi)容結(jié)合在此引為參考)提出某些皂角苷和皂角苷配基在治療疾呆癥方面的用途。
WO-A-99/48482，WO-A-99/48507，WO-A-01/23406，WO-A-01,23407，WO-A-01/23408(其公開(kāi)的內(nèi)容結(jié)合在此引為參考)涉及某些皂角苷、皂角苷配基及衍生物在治療認(rèn)知功能障礙和同類(lèi)狀況方面的用途。
中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)書(shū)NO.CN-A-1096031(其公開(kāi)的內(nèi)容結(jié)合在此引為參考)提出螺甾烷皂角苷配基，薩灑皂角苷配基在β-腎上腺素能的和M-膽堿能的受體的雙向調(diào)節(jié)作用中的生物活性。但未指出具體的藥物活性。可是，在“Synthesis and applications ofIsotopically Labelled Compounds”，1998，第315-320頁(yè)Yi等描述了薩灑皂角苷配基在治療老年性癡呆癥方面的用途。
存在著許多所謂的“譜系”病癥，其中自身出現(xiàn)各種各樣的癥狀組合，各式各樣的相對(duì)嚴(yán)重性。每一個(gè)癥狀的嚴(yán)重性和癥狀的特殊組合將隨個(gè)體到個(gè)體之間和依照病癥進(jìn)展的階段而改變。例如，在帕金森氏病、重癥肌無(wú)力、蘭伯特伊頓病、姿勢(shì)性的低血壓和慢性疲勞綜合癥情況下，認(rèn)知功能障礙不是原發(fā)的癥狀，雖然它可以表現(xiàn)為許多可能的繼發(fā)癥狀之一。而且，這些狀況不是病毒病或疾呆癥。許多這些病癥是所謂的“譜系”病癥，因此，在很多情況下，對(duì)認(rèn)知功能障礙(例如癡呆癥)的治療是不必要的。
本發(fā)明是建立在我們發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上的，就是某些皂角苷配基及其衍生物，包括皂角苷，具有對(duì)非認(rèn)知的神經(jīng)變性，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)的神經(jīng)變性以及對(duì)不存在認(rèn)知、神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙的令人驚奇的改善疾病的活性，因此可積極地阻止和逆轉(zhuǎn)狀況。這一發(fā)現(xiàn)使得認(rèn)知功能障礙不是原發(fā)癥狀的某些非病毒、譜系或非譜系病癥的治療有了改進(jìn)的可能。
發(fā)明的簡(jiǎn)要說(shuō)明按照本發(fā)明的一方面，提供在人類(lèi)和非人動(dòng)物患有或?qū)ζ涿舾械?i)非認(rèn)知的神經(jīng)變性，(ii)非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，(iii)運(yùn)動(dòng)感覺(jué)的神經(jīng)變性，(iv)不存在認(rèn)知、神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙的治療或預(yù)防上，或在組合物(例如，藥物，食品，食品添加劑和飲料)的制備中，活性劑(在此處所規(guī)定的)的用途。
術(shù)語(yǔ)“活性劑”指的是有以下通式I、II、III的化合物，皂角苷配基衍生物，如以下定義的通過(guò)參照至少帶有一個(gè)限定的X基取代基，如以下限定的這樣化合物的糖取代的衍生物，所有它們的立體異構(gòu)體和外消旋混合物，所有它們藥學(xué)上可接受的前體藥和鹽類(lèi)，和所有的混合物和它們的組合。
通式I 在通式(I)中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)，或者是OR，其中R＝烷基或?；?；-R9，R11，R12，R14， R15，R16，R17，R25，R33可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH2-，烷基或無(wú)基團(tuán)，或者是OR，其中R＝烷基或?；?表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基；通式II
在通式(II)中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R34彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；?，或無(wú)；-R9，R11，R12，R14，R15，R16，R17，R25，R33，R35可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；?，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)-R33或R14＝烷基；通式(III)
在通式(III)中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R33，R34，R35，R36，R37彼此獨(dú)立是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR其中R＝烷基或?；?，或無(wú)；-R9，R11，R12，R15，R16，R17，R25各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR其中R＝烷基或?；?，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外，-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；皂角苷配基衍生物，具體是指但并非僅指螺甾烷皂角配基衍生物，至少帶有一個(gè)X基取代基，其中X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，-N3-，NH2-，MeSO2NH-，和-烷基；和上述任一化合物的衍生物形式，其中在3-位的碳原子(即與在R3連接的碳，或以上定義的沒(méi)有結(jié)構(gòu)式的皂角苷配基衍生物中相應(yīng)的位置)或在式II和III的情況下，3-位碳原子，26-位(即與R34連接的碳)或在3-位和26-位上的各個(gè)碳原子，帶有O-糖部分，其中糖基是單，雙，或三糖。
皂角苷配基活性劑的帶糖衍生物一般在本領(lǐng)域被稱(chēng)為是皂角苷。該術(shù)語(yǔ)在此處所用的“碳水化合物”特別包括這樣的糖基。
在本發(fā)明所用的活性劑優(yōu)選的是非雌激素甾族的皂角苷配基，皂角苷，和在以上定義的范圍內(nèi)的其衍生物，包括所有生理上認(rèn)可的前體藥和其鹽類(lèi)。
活性劑可以是天然存在的或非天然存在的。非天然存在的活性劑可以適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)修飾天然存在化合物的側(cè)基和/或側(cè)原子，如以下說(shuō)明的和本領(lǐng)域知曉的。
本發(fā)明也提供為治療人類(lèi)和非人動(dòng)物的相應(yīng)方法，和使用在上述治療方法中包含該活性劑的組合物。
本發(fā)明的活性劑如有要求的話(huà)可以，與一種或更多種的另外的活性劑共同給藥，例如，一種或更多種的活性劑選自，但不限于，膽堿酯酶抑制劑，多巴胺激動(dòng)劑(如L-多巴)，COMT抑制劑，MAO-B抑制劑，抗膽堿能劑，乙酰膽堿激動(dòng)劑，5-羥色胺激動(dòng)劑，AMPA受體激動(dòng)劑，GABA受體激動(dòng)劑，NMDA受體激動(dòng)劑，β-腎上腺素受體激動(dòng)劑，地高辛，多巴酚丁胺，抗炎劑，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，斯特訂，腺苷A2a受體拮抗劑，醛糖還原酶抑制劑，免疫調(diào)節(jié)劑，大麻類(lèi)激動(dòng)劑，干擾素B或三環(huán)抗抑郁劑。
活性劑可以在治療上或預(yù)防上應(yīng)用于患有或?qū)ζ錉顩r和疾病敏感的人類(lèi)和非人動(dòng)物，其狀況和疾病是以非認(rèn)知的神經(jīng)變性，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性，或受體功能障礙或喪失為特征的。這樣的狀況和疾病的例子提供如下。
因此本發(fā)明還提供在人類(lèi)和非人動(dòng)物患有或?qū)ζ涿舾械囊环N或更多的上述狀況和疾病的治療或預(yù)防上，或在組合物(例如，藥物組合物，食品，食品添加劑和飲料)的制備中，活性劑(如在此定義的)的用途。
本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明活性劑的實(shí)施例特別提到活性劑的以下分類(lèi)1.上面通式I的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)，或OR，其中R＝烷基或酰基；
-R9，R11，R12，R14，R15，R16，R17，R25，R33各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR其中R＝烷基或?；?； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；2.上面通式I的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，彼此獨(dú)立是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR其中R＝烷基或酰基；-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R11，R14，R25，R33各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，或無(wú)或OR其中R＝烷基或?；?表示任選的雙鍵其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；3.上面通式I的化合物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，或R33或R14＝CH3， 表示單鍵，-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中的任一個(gè)-R25的立體化學(xué)是β-取向的，和其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23中至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基或酰基的取代基或無(wú)，和X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH-
-烷基；4.上面通式I的化合物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝H，-R14＝R33＝CH3， 表示單鍵，-R25的立體化學(xué)是β取向的，和其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23中至少一個(gè)是X基，可保留的取代基是H，OH，＝O，和OR其中R＝烷基或酰基的取代基或無(wú)，和X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；5.上面通式II的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R34彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-， NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)；-R9，R11，R12，R14，R15，R16，R17，R25，R33，R35各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；6.上面通式II的化合物及其碳水化合物衍生物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)；-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R34＝H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基，或?；蛘咛妓衔?，-R11，R14，R25，R33，R35各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或者無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基和R25的立體化學(xué)是β-取向的；7.上面通式II的化合物和其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，-R14＝CH3，-R34＝OH或OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔铮蚏35＝H或是無(wú) 表示任選的雙鍵，和-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中的任一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的，其中除了以上的基團(tuán)外，R3或R23中至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基或酰基或無(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH-，-烷基；8.上面通式II的化合物及其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R30＝R31＝R32＝H，-R14＝R33＝CH3，-R34＝-OH或OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔?，
R35＝H或是無(wú) 表示任選的雙鍵，和R25的立體化學(xué)是β取向的，其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23中至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，Me-SO2NH-，-烷基；9.上面通式III的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R34，R35，R36，R37彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；?，或無(wú)；-R9，R11，R12，R15，R16，R17，R25各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；?，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；10.上面通式III的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R33，R35，R36，R37彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)；-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R34＝H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR其中R＝烷基或?；?，或無(wú)；-R11，R25各可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基因外或R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；11.上面通式III的化合物和其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，-R14＝CH3，-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，酰基或碳水化合物，R35＝H或是無(wú)，R37＝H，-OH或＝OR36＝H或-OH 表示單鍵，-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中的任何一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的，其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23中至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(MeSO2)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；12.上面通式III的化合物和其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R19＝R20＝H，-R14＝R33＝CH3，-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔?，R35＝H或是無(wú)，R37＝H，-OH或＝O，
R36＝H或-OH， 表示單鍵，和-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中的任一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的；其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23中至少一個(gè)是X基，可能保留的以代基是H，OH，＝O，和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；13.取代的皂角苷配基，具體是但并非唯一是甾族的螺甾烷皂角苷配基，其中皂角苷配基的至少一個(gè)OH-基被X基取代，X基選自-鹵原子-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；14.以上限定的皂角苷配基，具體是但并非唯一是甾族的螺甾烷皂角苷配基，其中，X定義中的鹵原子是氟原子；15.取代的皂角苷配基，選自(3β-氟-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3，3-二氟-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-甲基磺?；被?5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-疊氮基-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-氨基-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，和它們的立體異構(gòu)體和外消旋混合物，它們藥學(xué)上可接受的前藥和鹽類(lèi)。
16.取代的皂角苷配基，其中，然后被如上面定義的至少一個(gè)X基取代的母體皂角苷配基是選自薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基，葜配基，表葜配基，和anzurogenin-D；17.通式Ia的化合物
式中R基團(tuán)選自氫；烷基羰基；烷氧基羰基；烷基氨基甲?；换蚍蓟驶?；或磺基(HO3S)；膦酰基((HO)2P(O)-)；或單-，雙-或三-糖；其中任何烷基可任選地被芳基，氨基，單-或雙-烷基氨基，羧酸殘基(-COOH)，或它們的任何組合取代；18.如1至17項(xiàng)所定義的上述化合物的衍生物形式，其中3-位碳原子，或在結(jié)構(gòu)式II和III的情況下，3-位碳原子，26-位碳原子或在3-位和26-位的每一個(gè)碳原子帶有O-糖部分，其中糖基是單-，雙-或三-糖，例如，有5或6碳原子的單醛糖或酮糖，優(yōu)選地以環(huán)化的呋喃糖或吡喃糖形式，作為α或β端基異構(gòu)體和有D或L光學(xué)的異構(gòu)現(xiàn)象，或者任何它們的二或三寡糖組合；糖殘基的酰化形式也包括在術(shù)語(yǔ)“糖”之內(nèi)；合適糖的例子包括葡萄糖，甘露糖，果糖，半乳糖，麥芽糖，纖維二糖，蔗糖，鼠李糖，木糖，阿拉伯糖，巖藻糖，異鼠李糖，芹菜糖，乳糖，半乳糖-葡萄糖，葡萄糖-阿拉伯糖，巖藻糖-葡萄糖，鼠李糖-葡萄糖，葡萄糖-葡萄糖-葡萄糖，葡萄糖-鼠李糖，甘露糖-葡萄糖，葡萄糖-(鼠李糖)-葡萄糖，葡萄糖-(鼠李糖)-鼠李糖，葡萄糖-(葡萄糖)-葡萄糖，半乳糖-(鼠李糖)-半乳糖和它們的酰化(如乙?；?衍生物。
在以上化合物定義中當(dāng)存在烷基的任選的氨基，單烷基-氨基和二烷基-氨基取代基時(shí)，優(yōu)選地是在烷基的α位上的單取代基。
當(dāng)存在烷基的任選的-COOH取代基時(shí)，它可以是在烷基的未端或任何其他部位。
“烷基”意指脂肪族烴基，它可以是直鏈或支鏈，鏈長(zhǎng)約1至20個(gè)碳原子。優(yōu)選的烷基有1至約12個(gè)鏈碳原子。支鍵意指一個(gè)或更多的低級(jí)烷基如甲基，乙基或丙基連接到烷基直鏈上?！暗图?jí)烷基”意指鏈長(zhǎng)約1至4個(gè)碳原子可以是直鏈或支鏈。實(shí)施例烷基包括甲基，乙基，正-丙基，異-丙基，正-丁基，叔-丁基，仲-丁基，正-戊基，3-戊基。
“芳基”意指任何包括芳環(huán)或稠環(huán)系統(tǒng)的基團(tuán)，優(yōu)選地包含最多12個(gè)碳原子。實(shí)施例芳基是苯基。芳基可以任選地是單或多取代的，例如取代基獨(dú)立選自鹵素(如氯或溴)，烷基，環(huán)烷基，羥基，烷氧基，氨基，硝基，酰氨基，羧基和烷氧基羰基。
“羧酸殘基”意指-COOH基團(tuán)。
“酰基”意指H-CO-或烷基-CO-基團(tuán)，其中烷基定義如上。優(yōu)選的?；图?jí)烷基。酰基的例子包括甲?；?，乙酰基，丙?；?propanoyl)，2-甲基丙酰基，丁?；妥貦磅；?；“任選取代的”意指所述的基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，它們可以是相同的或不同的，優(yōu)選的一個(gè)或多個(gè)取代基各自相對(duì)于被取代的母體基團(tuán)是小尺寸的(如小于最大的分子尺寸的約20％)；合適的取代基包括鹵素(如氯或溴)，烷基，環(huán)烷基，烷氧基，氨基，酰氨基，芳基，芳酰氨基，羧基，烷氧基羰基，芳烷氧基羰基，雜芳烷氧基羰基，和任選取代的氨甲?；?，優(yōu)選地服從上述提出的尺寸限制；“藥學(xué)上可接受的”意指在正確的醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，它適合用于與人類(lèi)和較低等動(dòng)物細(xì)胞接觸沒(méi)有過(guò)分的毒性，刺激，變態(tài)反應(yīng)和其他類(lèi)似反應(yīng)，和有相稱(chēng)的合理利益/風(fēng)險(xiǎn)比率。“藥學(xué)上可接受的前藥”意指那些化合物的前藥在正確的醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合用于與人類(lèi)和較低動(dòng)物的組織接觸沒(méi)有過(guò)分的毒性，刺激，變態(tài)反應(yīng)，和其他類(lèi)似反應(yīng)，和有相稱(chēng)的合理利益/風(fēng)險(xiǎn)比率，和對(duì)預(yù)計(jì)的用途有效，以及化合物可能的兩性離子形式。術(shù)語(yǔ)“前藥”意指化合物能迅速地在體內(nèi)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生以上結(jié)構(gòu)式的母體化合物，例如通過(guò)血液中的水解作用。功能團(tuán)可以通過(guò)代謝裂解迅速轉(zhuǎn)化，在體內(nèi)形成帶有羧基一類(lèi)反應(yīng)基團(tuán)。由于化合物的可代謝裂解基團(tuán)很容易在體內(nèi)裂解，因此，帶有這樣基團(tuán)的化合物作為前藥。以下提供了前藥的詳盡的討論“前藥的設(shè)計(jì)”，H.Bundgarrd，ed，Elsevier，1985；“藥物設(shè)計(jì)和發(fā)展教科書(shū)”，Krogsgaard-Larsen and H，Burnd gaard，ed.，Chapter 5；“前藥的設(shè)計(jì)和應(yīng)用”P(pán)113-191；“高等藥物傳送綜述”，H.Bundgard，8，P.1-38，1992；Journal of PharmaceuticalSciencls 77，P.285，1988；Chem，Pharm.Bull N.Nalzeya et al，32，P.692，1984；“前藥作為新的傳送系統(tǒng)”，T.Higuch；和V.Stella，Vol 14，AC.S Sympsium Series，和“在藥物設(shè)計(jì)中的生物可逆載體”，Edward B.Boche，ed.，American PharmacentalAssociation and Pergamon 1987，在此作為參考引入。
“藥學(xué)上可接受的鹽”意指本發(fā)明化合物的相對(duì)無(wú)毒的無(wú)機(jī)和有機(jī)酸加成鹽，和堿加成鹽。這些鹽類(lèi)能夠在化合物最后的分離和純化期間就地制備。特別是，酸加成鹽能夠通過(guò)純化的化合物以其游離堿形式分別與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或無(wú)機(jī)酸反應(yīng)并分離出這樣生成的鹽。例如，參見(jiàn)S.M.Berge，et al.，“藥物鹽類(lèi)”，J.Pharm，Sci.，66P.1-19(1977)在此處作為參照引入。堿加成鹽也能夠通過(guò)純化的化合物以其酸形式分別與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或無(wú)機(jī)堿反應(yīng)并分離出這樣生成的鹽。堿加成鹽包括藥學(xué)上可接受的金屬和胺鹽。合適的酸加成鹽的例子是與酸生成的鹽，酸選自鹽酸，硫酸，磷酸和硝酸。合適的堿加成鹽的例子是與堿生成的鹽，堿選自氫氧化鈉，氫氧化鉀和氫氧化銨?；钚詣┨貏e優(yōu)選的類(lèi)別是通式Ia的化合物。在一些結(jié)構(gòu)式Ia的化合物中，C25甲基是S構(gòu)型的；本發(fā)明的這些化合物是薩灑皂角苷配基和表薩灑皂角苷配基或它的衍生物。在另一些結(jié)構(gòu)式Ia的化合物中，C25甲基是R構(gòu)型的；本發(fā)明的這些化合物是葜配基和表葜配基或它的衍生物。
在以上結(jié)構(gòu)式Ia中，OR例如可以選自以下基團(tuán)(除非由附帶條件排除外)羥基，Cathylate(乙氧基羰氧基)，醋酸酯，琥珀酸酯，肉桂酸酯，阿魏酸酯，丙酸酯，丁酸酯，戊酸酯，異戊酸酯，己酸酯，異己酸酯，二乙基醋酸酯，辛酸酯，癸酸酯，月桂酸酯，肉豆蔻酸酯，棕櫚酸酯，硬脂酸酯，苯甲酸酯，苯基醋酸酯，苯基丙酸酯，肉桂酸酯，對(duì)-硝基苯甲酸基，3，5-二硝基苯甲酸基，對(duì)-氯苯甲酸基，2，4-二氯苯甲酸基，對(duì)-溴苯甲酸基，間-溴苯甲酸基，對(duì)-甲氧基苯甲酸基，鄰苯二甲酰，甘氨酸酯，丙氨酸酯，纈氨酸酯，苯丙氨酸酯，異亮氨酸，甲硫氨酸酯，精氨酸酯，天冬酰胺酸酯，天冬氨酸酯，半胱氨酸酯，谷氨酸酯，組氨酸酯，賴(lài)氨酸酯，脯氨酸酯，絲氨酸酯，蘇氨酸酯，色氨酸酯，酪氨酸酯，延胡索酸酯或馬來(lái)酸酯。
通式Ia的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽類(lèi)中特別優(yōu)選的是以下的化合物薩灑皂角苷配基，薩灑皂角苷配基Cathylate，薩灑皂角苷配基醋酸酯，薩灑皂角苷配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基甲硫酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，
表薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate，表薩灑皂角苷配基醋酸酯，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基，菝葜配基Cathylate，菝葜配基醋酸酯，菝葜配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基，表菝葜配基Cathylate，表菝葜配基醋酸酯，表菝葜配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，通式Ia的皂角苷(R＝糖)化合物中特別優(yōu)選的是以下的化合物薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基，菝葜配基和表菝葜配基，其中在所有情況下3-位碳原子帶有O-糖部分此處糖基選自葡萄糖、甘露糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、纖維二糖、蔗糖，鼠李糖，木糖，阿拉伯糖，巖藻糖，異鼠李糖，芹菜糖，乳糖，半乳糖-葡萄糖，葡萄糖-阿拉伯糖，巖藻糖-葡萄糖，鼠李糖-葡萄糖，葡萄糖-葡萄糖-葡萄糖，葡萄糖-鼠李糖，甘露糖-葡萄糖，葡萄糖-(鼠李糖)-葡萄糖，葡萄糖(鼠李糖)-鼠李糖，葡萄糖-(葡萄糖)-葡萄糖，半乳糖-(鼠李糖)-半乳糖和它們?；?如乙酰化的)衍生物。
合適的活性劑另外的例子包括16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜精酮，糞甾醇和其藥學(xué)上可接受的前藥和鹽類(lèi)。
組合物和用途本發(fā)明這樣實(shí)現(xiàn)了并提供了治療或預(yù)防有此需要的人類(lèi)或非人動(dòng)物的非認(rèn)知神經(jīng)變性，非認(rèn)知神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性或不存在認(rèn)知、神經(jīng)或神經(jīng)與肌肉損傷時(shí)受體功能障礙或喪失(特別是但不排除有關(guān)于上述提到的疾病狀態(tài))的方法，其中包括對(duì)上述的人類(lèi)或非人動(dòng)物給予有效劑量的活性劑(如此處所規(guī)定的)或其藥學(xué)上可接受的鹽。
活性劑可以以包含活性劑和任何適當(dāng)?shù)母郊映煞值慕M合物的形式給予。例如組合物可以是藥物組合物(藥物)，食品，食品添加劑或飲料。這樣的組合物可以包括規(guī)定的化合物，和/或它們藥學(xué)上可接受的鹽類(lèi)。
按照本發(fā)明的另一方面，將對(duì)人類(lèi)或非人動(dòng)物提供具有對(duì)抗，和用于治療，非認(rèn)知神經(jīng)變性，非認(rèn)知神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性或不存在認(rèn)知、神經(jīng)或神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或喪失的活性的組合物，其中包括活性劑的有效劑量的化合物。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”意指包括活性劑和附加的藥學(xué)上可接受的載體，稀釋劑，輔助劑，賦形劑，或載色劑，如防腐劑，填充劑，崩解劑，濕潤(rùn)劑，乳化劑，懸浮劑，調(diào)味劑，香味劑，抗菌劑，抗真菌劑，潤(rùn)滑劑和分散劑的組合物，取決于給藥方式的性質(zhì)和劑量形式。
此處所用的術(shù)語(yǔ)“食品”，“食品添加劑”和“飲料”有這些術(shù)語(yǔ)的正常意義，并不限于藥物制劑。
活性劑的劑量根據(jù)所要治療或預(yù)防的癥狀的嚴(yán)重性在廣范圍內(nèi)變化。選擇合適的劑量是在本技術(shù)一般熟練人員的能力之內(nèi)，沒(méi)有過(guò)分的負(fù)擔(dān)?；钚詣┑膭┝浚缈梢源笥诩s0.1mg/kg，優(yōu)選每天一次給藥，優(yōu)選地例如大于約0.3mg/kg。更典型的是劑量在約1和25mg/kg之間，如優(yōu)選每天一次給藥在約1和10mg/kg之間。對(duì)于人類(lèi)使用，劑量合適地可在每天約70和700mg/kg之間。
“藥學(xué)上可接受的劑型”意指本發(fā)明的化合物或組合物的劑型，包括，例如，片劑，糖衣錠(dragees)，粉劑，酏劑，糖漿，液體制劑，包括懸浮劑，噴霧劑，吸入劑，片劑，錠劑，乳劑，溶劑，顆粒劑，膠囊和栓劑，以及為注射用的液體制劑，包括脂質(zhì)體制劑。工藝和配方一般可在Remington，Pharmacential Sciences，MackPublishing Co.，Easton，PA，最新版上找到。
一般說(shuō)來(lái)，此處所說(shuō)的存在一組特定的化合物其范圍包括存在該化合物的2個(gè)或多個(gè)這種化合物的混合物。
本發(fā)明為患有或易感以下疾病的人或非人動(dòng)物提供治療方法(i)非認(rèn)知的神經(jīng)變性，(ii)非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，(iii)運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性，(iv)不存在認(rèn)知、神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或喪失，帕金森氏病，腦尖后的帕金森氏癥候群，抑郁癥，精神分裂癥，肌肉營(yíng)養(yǎng)不良包括筋膜肩胛與肱骨的肌肉營(yíng)養(yǎng)不良(FSH)，裘馨氏肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，貝克氏肌肉營(yíng)養(yǎng)不良和布魯士肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，富克氏營(yíng)養(yǎng)不良，肌強(qiáng)直病的營(yíng)養(yǎng)不良，角膜營(yíng)養(yǎng)不良，反射交感神經(jīng)性營(yíng)養(yǎng)不良綜合征(RSDSA)，神經(jīng)與血管營(yíng)養(yǎng)不良，重癥肌無(wú)力，蘭伯特伊頓氏病，亨丁頓氏病，運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病包括肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)，多發(fā)性硬化，位置性低血壓，外傷的神經(jīng)變性，如以下的發(fā)作或以下的意外事故(例如，外傷性的頭部損傷或脊髓損傷)，巴頓氏(Batten’s)病，Cockayne氏綜合征，Dwon氏綜合癥，皮質(zhì)基底神經(jīng)節(jié)變性，多發(fā)性系統(tǒng)萎縮，腦萎縮，下橄欖體橋腦小腦萎縮，牙齒椎……(dentatorubral)萎縮，Pallidoluysian萎縮，脊髓與延髓萎縮，視神經(jīng)萎縮，硬化的全腦炎(SSPE)，注意缺陷病癥，病毒腦炎后，脊髓灰質(zhì)炎后綜合征，華氏綜合征，Joubert氏綜合征，Guillain-Barre氏綜合征，腦回發(fā)育不全，Moyamoya氏病，神經(jīng)元游走病癥，孤獨(dú)癖綜合征，多谷氨酰胺病，Niemann-Pick氏病，進(jìn)行性的多病灶白腦病，假腫瘤腦，Refsum氏病，Zellweger氏綜合征，核上的麻痹，F(xiàn)riedreich氏運(yùn)動(dòng)失調(diào)，脊髓與小腦的運(yùn)動(dòng)失調(diào)2型，Rhett氏綜合征，Shy-Drager氏綜合征，神經(jīng)病包括遺傳性的神經(jīng)病，糖尿病的神經(jīng)病和絲狀分裂的神經(jīng)病，Prion-ased神經(jīng)變性，包括Creutzfeldt-Jakol氏病(CJD)，變體CJD，新變體的CJD，牛海綿狀的腦病(BSE)，GSS，F(xiàn)FI，Kuru(慢性有族遺傳性神經(jīng)變性疾病)和Alper氏綜合癥，Jerseph氏病，急性播散的腦脊髓炎，珠網(wǎng)膜炎，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的血管損害，肢端神經(jīng)元功能喪失，Charcot-Marie-Tooth病，對(duì)心力衰竭，哮喘，和斑狀的變性的敏感性。
因此，本發(fā)明包括治療或預(yù)防在人類(lèi)或非人動(dòng)物患有或?qū)ζ涿舾械囊陨霞膊『蜖顩r的方法，它包括對(duì)上述的人類(lèi)或非人動(dòng)物給予此處所規(guī)定的活性劑的有效劑量，以及用于上述的治療或預(yù)防的組合物制備中活性劑的用途。
在帕金森氏病，腦炎后帕金森氏癥候群，位置性的低血壓，孤獨(dú)癖綜合征，慢性疲勞綜合征，重癥肌無(wú)力，和蘭伯特伊頓氏病的情況下，以及在與本發(fā)明所揭示的，或者明顯從治療得到的或者在先前上面確認(rèn)的技術(shù)上所揭示的有關(guān)疾病狀態(tài)的任何其他狀況，本發(fā)明可以服從附帶條件即或者認(rèn)知功能障礙癥狀缺乏，或者要治療的受試者所表現(xiàn)的任何認(rèn)知功能障礙癥狀是次要的或附屬于非認(rèn)知的神經(jīng)變性，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性或不存在認(rèn)知，神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或喪失的癥狀。
制備本發(fā)明使用的化合物菝葜配基，表菝葜配基和薩灑皂角苷配基是商業(yè)上可得到的材料。供應(yīng)商包括，例如，Sigma Aldrich，Research Plus Inc.和Steraloids Inc.對(duì)這些材料的制備方法也可在文獻(xiàn)中找到(如表薩灑皂角苷的制備是在JACS P5225(1959)得到)。表薩灑皂角苷配基可以通過(guò)使用金屬氫化物還原劑還原薩灑皂角苷配基酮(sarasapogenone)來(lái)制備。薩灑皂角苷配基酮可以使用Lajisetal，steroids，1993，58，387-389的方法制備。
同樣，作為起始材料，未取代的皂角苷和皂角苷配基可以天然存在于各種植物物種，值得注意的植物有菝葜(smilax)屬，天門(mén)冬(asparagns)，Anemarrhens，絲蘭(Yucca)，龍舌蘭屬(agave)。根據(jù)本發(fā)明此處使用菝葜配基或薩灑皂角苷配基，它可以來(lái)自植物菝葜屬，天門(mén)冬，Anemarrhena，絲蘭或龍舌蘭屬，以植物提取液，或干粉的植物材料形式存在。
制備活性劑的方法對(duì)本領(lǐng)域一般熟練人員是眾所周知的。例如，實(shí)施例顯示在WO-A-02/079221(其中實(shí)施例5至16描述制備薩灑皂角苷配基Cathylate表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯，表菝葜配基cathylate，表薩灑皂角苷配基甘氨酸酯鹽酸鹽，薩灑皂角苷配基甘氨酸酯鹽酸鹽，表菝葜配基甘氨酸酯鹽酸鹽，表菝葜配基L-丙氨酸酯鹽酸鹽，表菝葜配基L-纈氨酸酯鹽酸鹽，表菝葜配基L-異亮氨酸酯鹽酸鹽，表菝葜配基L-苯丙氨酸酯鹽酸鹽和表菝葜配基L-甲硫氨酸酯鹽酸鹽)。結(jié)構(gòu)式Ia的化合物，帶R＝H的化合物以外的化合物可以使用常規(guī)的技術(shù)從R＝H的化合物制備。
優(yōu)選的反應(yīng)是親核取代反應(yīng)，其中在3-位上有OH的化合物與結(jié)構(gòu)式L-R的化合物反應(yīng)，式中R選自烷基羰基；烷氧基羰基；烷基氨基甲?；蚍蓟驶?；或此處任何烷基是任選地被芳基，氨基，單烷基-氨基，二烷基-氨基，羧酸殘基(-COOH)，或任何它的組合取代的和L是在適合于親核取代的條件下的離去基團(tuán)。
化合物L(fēng)-R例如可以是羧酸，或如果合適的話(huà)，是酸酐，或?；u化物(如酰基氯化物)。例如當(dāng)R是cathylate(乙氧基羰基)部分時(shí)，化合物L(fēng)-R可相適配的是氯甲酸乙酯。
反應(yīng)是適合于在堿如吡啶中，任選在酸如鹽酸存在下進(jìn)行。
對(duì)親核取代反應(yīng)的反應(yīng)詳情是眾所周知的。例如，參見(jiàn)RC Larock inComprehensive Organic Transformations，VCH Pulishers，1989。
二氫薩灑皂角苷配可以使用按Marker和Rohrman(1939)，在Sterols LIII上描述的方法來(lái)制備；薩灑皂角苷配基的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)，J.Am.Chem.Soc.61，PP846-851。16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇可以使用按Scheer et al.菝葜配基和薩灑皂角苷配基C25的異構(gòu)化；J/Am.Chem.Soc.77，PP641-646上描述的方法來(lái)制造。
在此處所描述的反應(yīng)中，當(dāng)這樣的基團(tuán)是最終產(chǎn)物中所要求的時(shí)，可能有必要保護(hù)反應(yīng)性官能團(tuán)，例如，羥基，羧基或氨基，以避免它們不必要的參與反應(yīng)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施可以使用常規(guī)的保護(hù)基因。例如，參見(jiàn)TW Green和PGM Wuts，in“Protective Groups in Organic Chemistry”，John Wiley&Sons，1991；JFW McOmic in“Protective Groups in Organic Chemistry”，Plenum Press，1973.在結(jié)構(gòu)式L-R其中R是氨基取代的化合物為保護(hù)氨基取代基，優(yōu)先地使用烷氧基羰基保護(hù)基，借此，氨基官能基在合成步驟中作為烷氧基羰基氨基(優(yōu)選的是叔-丁氧基羰基氨基)存在的，直至在無(wú)水的溶劑中酸性條件下去保護(hù)。
這樣制備的化合物可以通過(guò)常規(guī)的方法從反應(yīng)混合物中回收。例如，化合物可以通過(guò)蒸餾溶劑從反應(yīng)混合物中回收，或者如有必要在溶劑從反應(yīng)混合物蒸餾出之后，將殘留物倒入水中，接著用與水互溶的溶劑提取和從提取物中蒸餾出溶劑。另外，如有需要，產(chǎn)品可以通過(guò)各種眾所周知的技術(shù)進(jìn)一步純化，如重結(jié)晶，再沉淀，或各種色層技術(shù)，特別是柱層析或制備性的薄層層析。
對(duì)活性基礎(chǔ)的討論構(gòu)成本發(fā)明基礎(chǔ)的治療應(yīng)用是由于若干在以下實(shí)施例中詳細(xì)記錄的新的觀察結(jié)果產(chǎn)生的。要理解本發(fā)明的基本原理，摘錄觀察結(jié)果并說(shuō)明他們?cè)鯓宇A(yù)測(cè)在本發(fā)明以上規(guī)定的范圍內(nèi)的活性劑的權(quán)利要求的治療活性會(huì)是有用的。
菝葜配基，表菝葜配基，薩灑皂角苷配基和表薩灑皂角苷配基在體外表達(dá)這樣的受體的細(xì)胞中可恢復(fù)蠅蕈堿的乙酰膽堿受體和腎上腺素受體的丟失。這些結(jié)果表明這些化合物對(duì)正常細(xì)胞受體丟失的恢復(fù)(實(shí)施例1)。
薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cattylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基在體外大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元中防止化學(xué)誘導(dǎo)的神經(jīng)變性。這些結(jié)果表明這些化合物是神經(jīng)保護(hù)劑防止體外神經(jīng)變性和神經(jīng)損傷(實(shí)施例2)。
薩灑皂角苷配基，菝葜配基，16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜?；?，菝葜配基甘氨酸酯鹽酸鹽和糞甾醇在體外大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元中逆轉(zhuǎn)化學(xué)誘導(dǎo)的神經(jīng)變性。這些結(jié)果表明化合物體外逆轉(zhuǎn)感覺(jué)神經(jīng)變性和神經(jīng)損傷(實(shí)施例3)。
菝葜配基逆轉(zhuǎn)了神經(jīng)元化學(xué)誘發(fā)的凋亡，表明這種化合物在體外是抗凋亡劑和神經(jīng)保護(hù)劑(實(shí)施例4)。
菝葜配基和薩灑皂角苷配基在體外大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元中增加軸突的生長(zhǎng)(軸突的數(shù)量和軸突的分支)，表明它們?cè)隗w外神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)的作用(實(shí)施例5)。
菝葜配基和薩酒皂角苷配基在體外中腦的多巴胺能神經(jīng)元中防止和逆轉(zhuǎn)神經(jīng)毒素誘發(fā)的神經(jīng)變性(神經(jīng)毒素1-甲基-4-苯基吡啶鎓(MPP+))。這些結(jié)果表明這些化合物在體外防止和逆?zhèn)魃窠?jīng)變性和神經(jīng)損傷(實(shí)施例6和7)。
薩灑皂角苷配基和菝葜配基在體外大鼠脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中逆轉(zhuǎn)化學(xué)誘發(fā)的神經(jīng)變性。這些結(jié)果表明化合物在體外逆轉(zhuǎn)了運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的神經(jīng)變性和神經(jīng)損傷(實(shí)施例8)。
薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate和菝葜配基在體內(nèi)老年大鼠的認(rèn)知能力試驗(yàn)中減少錯(cuò)誤應(yīng)答的數(shù)目，這與用試驗(yàn)化合物治療后老年大鼠腦中蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度的增加相關(guān)。這些結(jié)果表明化合物在體內(nèi)逆轉(zhuǎn)神經(jīng)損傷(實(shí)施例9)。
菝葜配基和薩灑皂角配基在老年動(dòng)物中逆轉(zhuǎn)了蠅蕈堿的乙酰膽堿和多巴胺受體的下降和大腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)的下降。這些結(jié)果表明化合物在體內(nèi)逆轉(zhuǎn)了運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性和神經(jīng)損傷并且是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑(實(shí)施例9)。
表薩灑皂角苷配基Cathylate，薩灑皂角苷配基Cathylate，表薩灑皂角苷配基和表菝葜配基在體內(nèi)減少了暴露于神經(jīng)毒劑(鵝膏蕈氨酸和淀粉樣蛋白)的年輕大鼠的認(rèn)知能力試驗(yàn)中的錯(cuò)誤應(yīng)答的數(shù)目和增加大腦中蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。這些結(jié)果表明化合物在體內(nèi)逆轉(zhuǎn)了神經(jīng)損傷(實(shí)施例10)。
菝葜配基和薩灑皂角苷配基在小鼠淀粉營(yíng)養(yǎng)的脊髓側(cè)索硬化(ALS)和夏柯-馬利-托斯氏病模型中改善了存活和運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性和神經(jīng)損傷(實(shí)施例11)。
總之，已發(fā)現(xiàn)這些化合物減慢或逆轉(zhuǎn)了某些方面的神經(jīng)元變性。這些包括逆轉(zhuǎn)細(xì)胞體中的不利變化，神經(jīng)元延伸(軸突)的萎縮，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子如神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素(neurotrophins)(例如BDNF，NGF，NT3，NT4/5)的減少，TGF-β超家族神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(如GDNF)和神經(jīng)因子(如CNTF，LIF)的減少，和神經(jīng)元的毒性或死亡(凋亡)。這些化合物是有力的神經(jīng)保護(hù)劑，軸突生長(zhǎng)物的刺激劑，和神經(jīng)毒性的預(yù)防劑。還發(fā)現(xiàn)這些化合物減慢或逆轉(zhuǎn)膽堿能和多巴胺能功能的下降，例如，蠅蕈堿的乙酰膽堿和多巴胺受體密度的下降。而且，我們發(fā)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)和受體丟失作用的逆轉(zhuǎn)是主動(dòng)的調(diào)節(jié)作用，其中過(guò)去的惡化朝著正常狀態(tài)或具有對(duì)抗持續(xù)惡化保護(hù)作用的年輕狀態(tài)逆轉(zhuǎn)。另外，我們還發(fā)現(xiàn)化合物凋亡作用的逆轉(zhuǎn)看來(lái)是在細(xì)胞生命的非新生域中受到調(diào)節(jié)的并似乎不可能引發(fā)新生物形成。
以上的資料，匯總在一起表明對(duì)在這申請(qǐng)書(shū)中已列的疾病狀態(tài)的活性。而且，以的資料表明看來(lái)不存在嚴(yán)重的或威脅生命的副作用如癌癥。該活性劑是典型的非雌激素的。
以上確認(rèn)先前的技術(shù)顯示出對(duì)以上觀察結(jié)果延伸預(yù)測(cè)的合理基礎(chǔ)和對(duì)本發(fā)明中術(shù)語(yǔ)“活性劑”所包括的相關(guān)化學(xué)結(jié)構(gòu)和衍生物的治療活性的充分預(yù)測(cè)。
在本領(lǐng)域和藥理學(xué)中都眾所周知的是在甾類(lèi)分子上的適當(dāng)位置，特別是在3-和/或26-位上的糖，酯和其他基團(tuán)能夠很容易在體內(nèi)通過(guò)水解作用被斷裂，同樣的作用預(yù)期在分子的其他碳原子上也能觀察到。而且，在本領(lǐng)域和藥理學(xué)中眾所周知的是這里所用的在詞語(yǔ)“活性劑”的限度內(nèi)的鹽，游離酸和游離堿在體內(nèi)根據(jù)活性劑存在的體液pH彼此之間很容易轉(zhuǎn)化。再有，眾所周知的是側(cè)鏈基團(tuán)取代基，在形式上有很大的范圍，能夠以復(fù)雜的碳骨架存在，對(duì)結(jié)構(gòu)的藥理活性沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的不利影響，特別是當(dāng)側(cè)鏈基團(tuán)與分子整個(gè)大小相比較是較小時(shí)。
因?yàn)樗械倪@些理由，在本申請(qǐng)書(shū)中作出的有益的藥理活性的權(quán)利要求看出是合理的并且由這里收集和提供的試驗(yàn)資料建立在充分可靠的預(yù)測(cè)基礎(chǔ)上。
不愿受理論的束縛，相信活性劑的生理作用是增加神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的合成，或釋放的能力，或者減少神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子降解速率的能力，例如大腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和/或神經(jīng)生長(zhǎng)因子或它們的受體。這些對(duì)生長(zhǎng)因子的作用可能是由于化合物對(duì)細(xì)胞溶質(zhì)的或核的受體的作用，或者化合物與啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合其結(jié)果直接對(duì)生長(zhǎng)因子mRNA產(chǎn)生的速率起作用，或者是由于增加另一種物質(zhì)因子產(chǎn)生的結(jié)果。
另外，這些化合物看來(lái)還調(diào)節(jié)受體。例如，發(fā)現(xiàn)這些化合物中一些能阻止或逆轉(zhuǎn)大腦中蠅蕈堿的乙酰膽堿或多巴胺受體的丟失。相信這些化合物是通過(guò)修正在受體數(shù)量或功能或周轉(zhuǎn)上的缺失起作用。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明為了用非限制的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，現(xiàn)在參閱附圖和以下的實(shí)施例。
在附圖

圖1表示表菝葜配基醋酸酯在CHO-β2/m3共轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株上5天時(shí)對(duì)m3和β2腎上腺素受體的作用；圖2表示薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate和菝葜配基在大鼠原發(fā)皮質(zhì)神經(jīng)元中對(duì)谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性的作用；圖3表示薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate和菝葜對(duì)老年大鼠的學(xué)習(xí)能力和記憶的作用；圖4表示薩灑皂角苷配基，表薩酒皂角苷配基Cathylate和菝葜配基對(duì)蠅蕈堿的受體數(shù)量的作用；圖5表示SOD-1小鼠在口服給藥菝葜配基后存活分布圖；和圖6表示pmn小鼠在口服給藥灑皂角苷配基后的存活分布圖。
附圖和實(shí)施例的詳細(xì)說(shuō)明實(shí)施例1在體內(nèi)受體丟失的恢復(fù)研究了表菝葜配基Cathylate，薩灑皂角苷Cathylate，表薩灑皂角苷配基Cathylate，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯，表菝葜配基醋酸醋酸酯和薩灑皂角苷配基在CHO細(xì)胞中對(duì)蠅蕈堿的乙酰膽堿受體(m)的作用，或者在經(jīng)m受體的載體轉(zhuǎn)染的或經(jīng)β2和m3受體的載體共轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞中對(duì)β2和m3受體的作用。
結(jié)果在以下的表1和附圖1中說(shuō)明。經(jīng)m受體的載體轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞培養(yǎng)期間時(shí)，用表菝葜配基cathylate，薩灑皂角配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基琥珀酯和薩酒皂角苷配基治療，每一個(gè)都阻止受體數(shù)量的下降。經(jīng)β2和m3受體的載體共轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞培養(yǎng)期間時(shí)，m3受體的密度不改變，而β2腎上腺素受體的密度減少。用表菝葜配基醋酸酯培育沒(méi)有明顯改變m3受體的密度；但顯著地阻止β2腎上腺素受體的減少。
表1表菝葜配基Cathylate，薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯和薩灑皂角配基對(duì)M乙酰膽堿受體密度恢復(fù)的作用。
這樣，實(shí)驗(yàn)表明表菝葜配基cathylate，薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯，表菝葜配基醋酸酯和薩灑皂角苷配基每一個(gè)都能夠阻止隨著時(shí)間受體數(shù)量的下降并且當(dāng)給予受體水平受抑制的細(xì)胞時(shí)，也有趨勢(shì)將受體數(shù)量恢復(fù)至正常水平。
實(shí)施例2薩酒皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基在神經(jīng)元中的神經(jīng)保護(hù)作用本研究的目標(biāo)是檢驗(yàn)薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基對(duì)暴露給已知誘導(dǎo)神經(jīng)變性的谷氨酸鹽的大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元的存活作用。
大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)10天；在第10天時(shí)培養(yǎng)基改變?yōu)闊o(wú)血清限定的培養(yǎng)基。在第12天，暴露給谷氨酸鹽之前24小時(shí)，洗滌培養(yǎng)物并且培養(yǎng)基用新鮮的培養(yǎng)基包含陽(yáng)性對(duì)照(β-雌甾二醇)，試驗(yàn)化合物(薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基)或載體對(duì)照(DMSO，0.25％)或薯蕷皂苷配基作為陰性對(duì)照來(lái)代替。
在第13天，培養(yǎng)物暴露給谷氨酸鹽。在培育期之后，培養(yǎng)物用新鮮培養(yǎng)基洗滌并放置于新鮮培養(yǎng)基中，添加有關(guān)的化合物或載體以評(píng)價(jià)在谷氨酸暴露后24小時(shí)它們的保護(hù)作用。
神經(jīng)元細(xì)胞的存活是在試驗(yàn)化合物處理或谷氨酸鹽+試驗(yàn)化合物暴露后24小時(shí)通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)基中釋放出的乳酸脫氫酶(LDH)活性來(lái)評(píng)價(jià)，使用Cytotox96孔非放射活性試劑盒并通過(guò)測(cè)量在450nm處波長(zhǎng)吸收度來(lái)定量。
大鼠原代皮質(zhì)培養(yǎng)物對(duì)谷氨酸酯暴露后，在處理后24小時(shí)，皮質(zhì)神經(jīng)元有顯著的變性，通過(guò)乳酸脫氫酶釋放到培養(yǎng)物培養(yǎng)基的增加表現(xiàn)出來(lái)。
在原代皮質(zhì)培養(yǎng)物用化合物預(yù)處理24小時(shí)，在谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性上也有明顯的減少(圖2；表2)。
表2薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基對(duì)阻止谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性的作用
薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和菝葜配基在體外大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元中對(duì)谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性所有的都表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)保護(hù)作用。
實(shí)施例3在神經(jīng)元上用薩灑皂角配基，菝葜配基，16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜配基酮，菝葜配基甘氨酸酯鹽酸鹽和糞甾醇對(duì)神經(jīng)變性的逆轉(zhuǎn)。
如上所述，大鼠原代皮質(zhì)培養(yǎng)物暴露給谷氨酸鹽(100μm；10分鐘)引起24小時(shí)后測(cè)定的乳酸脫氫酶(LDH)活性的增加，表明3顯著的神經(jīng)變性。在谷氨酸鹽暴露后用17-β-雌甾二醇處理，與神經(jīng)元暴露給谷氨酸鹽相比較在LDH活性上產(chǎn)生明顯的下降，提示顯著的神經(jīng)保護(hù)作用。同樣地，用薩灑皂角苷配基，菝葜配基，16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜配基酮，菝葜配基甘氨酸酯鹽酸鹽和糞甾醇處理，與神經(jīng)元暴露給谷氨酸鹽相比較在LDH活性上產(chǎn)生明顯的下降，提示顯著的神經(jīng)保護(hù)作用(表3)。
表3不同化合物對(duì)先前暴露給谷氨酸鹽的皮質(zhì)神經(jīng)元的作用
總之，在大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元上，薩灑皂角苷配基，菝葜配基，16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜配基酮，菝葜配基甘氨酸酯鹽酸和糞甾醇逆轉(zhuǎn)由谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性，提示在神經(jīng)變性的病癥上的治療潛力。
實(shí)施例4菝葜配基在神經(jīng)元中的抗凋亡作用本研究的目的是在暴露給谷氨酸鹽的大鼠原代皮質(zhì)培養(yǎng)物中檢驗(yàn)菝葜配基對(duì)半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性，凋亡的標(biāo)記物的抗凋亡作用皮質(zhì)神經(jīng)元的原代培養(yǎng)物大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元培養(yǎng)6天。在第6天加入谷氨酸鹽(100microM，10分鐘)。然后洗滌培養(yǎng)物并且培養(yǎng)基用新鮮的包含菝葜配基或載體對(duì)照(DMSO，0.25％)的培養(yǎng)基代替6小時(shí)。在6小時(shí)處理后，凋亡通過(guò)測(cè)定半胱氨酸蛋白酶-3的活性來(lái)評(píng)價(jià)。半胱氨酸蛋白酶-3活性是通過(guò)由比色半胱氨酸蛋白酶-3底物，乙酰-Asp-Glu-Val-Asp對(duì)-硝基酰苯胺裂解出對(duì)-硝基苯胺來(lái)檢測(cè)。對(duì)-硝基苯胺在405nm處有高吸收度。半胱氨酸蛋白酶-3的相對(duì)活性作為光密度來(lái)測(cè)定。另外，半胱氨酸蛋白酸-3相對(duì)活性被標(biāo)準(zhǔn)化為樣品的蛋白質(zhì)濃度，它也作為光密度測(cè)定(Du，et al；J.Neurochem，69，1382-1388，1997；Sawada.Et al，F(xiàn)asel J.14，1202-1214，2000)。
菝葜配基在大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元中逆轉(zhuǎn)了谷氨酸鹽誘發(fā)的半胱氨酸蛋白酶-3活性的增加，表明了菝葜配基的抗凋亡作用(表4)。
表4菝葜配基在皮質(zhì)神經(jīng)元上對(duì)谷氨酸鹽誘發(fā)的半胱氨酸蛋白酶3活性的作用
實(shí)施例5神經(jīng)退化病癥是以神經(jīng)元進(jìn)行性的丟失和神經(jīng)元過(guò)程(軸實(shí))的降解為特征的。誘發(fā)軸突生長(zhǎng)的藥劑可以促進(jìn)神經(jīng)元之間新連結(jié)的形成和改善神經(jīng)退化狀況的癥狀(Katzman et al，F(xiàn)asel J.5，278-286(1991)
在大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元中暴露給17β-雌甾二醇(0.3，3，30PM)顯著增加現(xiàn)存的軸突長(zhǎng)度(表5)。在大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元中暴露給17β-雌甾二醇(3，30pM)顯著增加表現(xiàn)出軸突的神經(jīng)元的百分?jǐn)?shù)(表6)。在大鼠原發(fā)皮質(zhì)神經(jīng)元中暴露給菝葜配基和薩灑皂角苷配基(0.3，3，30pm)顯著增加現(xiàn)存的軸突長(zhǎng)度和表現(xiàn)出軸突的神經(jīng)元的百分?jǐn)?shù)(表5和6)。
總之，菝葜配基和薩灑皂角苷配基在體外有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用表5.17β-雌甾二醇，菝葜配基和薩灑皂角配基對(duì)軸突長(zhǎng)度的作用，使用光學(xué)測(cè)微計(jì)測(cè)定
表6.17β-雌甾二醇，菝葜配基和薩灑皂角苷配基對(duì)表現(xiàn)出軸突的神經(jīng)元數(shù)量的作用
實(shí)施例6在體外帕金森氏病模型，在大鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元中菝葜配基和薩灑皂角苷配基阻止由于暴露給神經(jīng)毒素，1-甲基-4-苯基吡啶鎓(MPP+)所引起的神經(jīng)變性。
由神經(jīng)毒素MPP+，1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)的代謝物所引起的損害模擬在神經(jīng)退化病癥如帕金森氏病所見(jiàn)到的黑紋狀體的多巴胺能神經(jīng)元的變性(Mytinlineau et al，Science，225，529-531，1984)。由這種毒素誘發(fā)的最突出的生化變化包括多巴胺的水平下降和在黑質(zhì)致密部分和在尾核中的代謝產(chǎn)物(Burn et al，Proc.NatlAcad Sei U.S.A.，80，4546-4550，1983)和在黑紋狀體的突觸體制備時(shí)多巴胺攝取的減少(Heikkila et al，J.Neurochem.，44，310-313，1985)。
用菝葜配基和薩灑皂角苷配基對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的預(yù)處理在暴露給多巴胺能特異性的神經(jīng)毒素MPP+(2μm)，與單獨(dú)用MPP+比較，顯著減少神經(jīng)元的死亡。
神經(jīng)膠質(zhì)的細(xì)胞株衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)和大腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)，它們都是涉及到神經(jīng)元生長(zhǎng)的分子，用作為陽(yáng)性對(duì)照。用菝葜配基和薩灑皂角苷配基的預(yù)處理，與單獨(dú)暴露給MPP+的神經(jīng)元相比較，在神經(jīng)元的存活上產(chǎn)生顯著的增加，提示明顯的神經(jīng)保護(hù)作用(表7)。
表7用BDNF和GDNF，菝葜配基和薩灑皂角苷配基的預(yù)處理對(duì)MPP+(2μm)暴露后的多巴胺能神經(jīng)元的作用
在該體外帕金森氏病模型中，用菝葜配基和薩灑皂角配基預(yù)處理明顯阻止暴露給多巴胺能特異性神經(jīng)毒素MPP+后的神經(jīng)元變性，顯示了神經(jīng)保護(hù)作用。
實(shí)施例7菝葜配基和薩灑皂角苷配基在體外帕金森氏病模型，大鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元中也逆轉(zhuǎn)了由于暴露給神經(jīng)毒素1-甲基-4-苯基吡啶鎓(MPP+)所引起的神經(jīng)變性。
用菝葜配基和薩灑皂角苷配基對(duì)多巴胺能神經(jīng)元處理在暴露給多巴胺能特異性的神經(jīng)毒素MPP+(2μm)后當(dāng)與單獨(dú)MPP+比較，顯著減少神經(jīng)元死亡。膠質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞株衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)和大腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)，它們都是涉及到神經(jīng)元長(zhǎng)的分子，和17β-雌甾二醇都用作為陽(yáng)性對(duì)照。用菝葜配基和薩灑皂角苷配基處理，與單獨(dú)暴露給MPP+的神經(jīng)元相比較，在神經(jīng)元的存活上產(chǎn)生顯著的增加(表8)。
表8用BDNF和GDNF，菝葜配基，薩灑皂角苷配基和17β-雌甾二醇的處理對(duì)MPP+(2μ)暴露后多巴胺能神經(jīng)元的作用
暴露給MPP+不僅在多巴胺能數(shù)量上而且在軸突的百分?jǐn)?shù)上引起顯著的減少。本研究表明菝葜配基和薩灑皂角苷配基體外顯著增加神經(jīng)元軸突的數(shù)量(表9)。這些結(jié)果表明化合物逆轉(zhuǎn)了運(yùn)動(dòng)神經(jīng)變性。
表9菝葜配基和薩灑皂角苷配基在多巴胺能神經(jīng)對(duì)MPP+(2μm)暴露后對(duì)軸突百分?jǐn)?shù)的作用
實(shí)施例8薩灑皂角苷配基和菝葜配基在脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中的神經(jīng)保護(hù)作用本研究的目標(biāo)是檢驗(yàn)薩灑皂角苷配基和菝葜配基對(duì)暴露給谷氨酸鹽的大鼠原發(fā)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活的作用，已知谷氨酸鹽在這種運(yùn)動(dòng)神經(jīng)變性模型中誘發(fā)神經(jīng)變性。17β-雌甾二醇和BDNF用作為陽(yáng)性對(duì)照。
脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的原代培養(yǎng)物大鼠運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元按照(Martion etal.Neuron，8，737-744，1992)描述的方法制備。在第10天時(shí)，移去培養(yǎng)基和培養(yǎng)物在限定的培養(yǎng)基中暴露給谷氨酸鹽(4microM)在37℃，10分鐘。在谷氨酸鹽暴露后，培養(yǎng)物在37℃用Dulfecco修改的Eagle培養(yǎng)基洗滌然后放置在包含試驗(yàn)化合物的新鮮培養(yǎng)基中。48小時(shí)后，脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性的程度是通過(guò)測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)釋放到以上培養(yǎng)物培養(yǎng)基中的數(shù)量來(lái)決定。
結(jié)果谷氨酸鹽暴露后，大鼠原代脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元在處理48小時(shí)后有顯著的變性，通過(guò)乳酸脫氫酶釋放到培養(yǎng)物培養(yǎng)基中的增量顯示出來(lái)。
在用薩灑皂角苷配基或菝葜配基處理的大鼠原代脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元經(jīng)過(guò)48小時(shí)，谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性有顯著下降。
表10薩灑皂角苷配基和菝葜配基在脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元上對(duì)谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性的作用
薩灑皂角苷配基和菝葜配基在這種運(yùn)動(dòng)神經(jīng)變性體外模型中在大鼠脊椎運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中逆轉(zhuǎn)了谷氨酸鹽誘發(fā)的神經(jīng)變性。
實(shí)施例9在生命的第二個(gè)一半(人類(lèi)年齡在40歲以后)大腦中的神經(jīng)元密度下降(Selkoe，DJ，Sci，267，134-142，1992)。皮質(zhì)功能上的改變可能是由于神經(jīng)元數(shù)量，它們相互連結(jié)的數(shù)量減少，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素如大腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF；Bothwell，M，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素受體的功能相互作用，Annu，Rev，Neurosd.，18，223-253，1995)的減少，乙酰膽堿受體(蠅蕈堿的和煙堿的)密度下降和/或在皮質(zhì)區(qū)域它們偶聯(lián)功能的下降(Rinne etal，Brain Res.，336，19-25，1985；Selkoc，DJ.Sci.Am.267，134-142，1992)。而且，在年齡增長(zhǎng)期間，蠅蕈堿的乙酰膽堿受體結(jié)合在海馬中(Narang，N，Mech，HgeingDev.，78，221-239，1995)和老年大鼠(Biegon etal，Neuroliol，Aging，10)和人類(lèi)紋狀體中(Rinne etal，Brain Res.，336，19-25，1985)都顯著減少。此外，在阿爾茨海默氏病中，膽堿能活性下降是與淀粉樣β斑塊沉著有關(guān)(Von der Kammer etal，Biochem.Soc，Symp.131-140，2001)。其他神經(jīng)退化性的病癥，如帕金森氏病，表現(xiàn)出多巴胺能活性的特征性的下降(Drukarch etal，Expert，Opin.Investig Drug，10，1855-1868，2001)。
薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate或菝葜配基對(duì)老年大鼠(Sprague-Dawley大鼠20個(gè)月齡)的口服給藥2或3個(gè)月逆轉(zhuǎn)了學(xué)習(xí)和記憶能力上的損傷，蠅蕈堿乙酰膽堿和多巴胺受體的下降和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素BDNF的下降，這些都是老年進(jìn)程特征性的改變。
老年的Spragne-Dawley大鼠分成不同組，一個(gè)對(duì)照組和用薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基Calhylate或菝葜配基(18mg kg-1天-1n＝10)治療的組，給藥2-3個(gè)月。未治療年輕大鼠的對(duì)照組(n＝4)也包括在本研究中。藥物的每日劑量是與最小量的食物混合和每天早晨分別給藥于每一個(gè)大鼠。
Y-迷宮裝置用于學(xué)習(xí)和記憶試驗(yàn)。在Y-迷宮每一個(gè)分路的底極上有銅棒排列，每當(dāng)需要時(shí)，用可調(diào)節(jié)的電壓，將電流施加在銅棒上。每一個(gè)分路是45cm長(zhǎng)和在其未端有一個(gè)15W燈，當(dāng)需要時(shí)，開(kāi)燈。在給藥三個(gè)月后，每一個(gè)大鼠連續(xù)訓(xùn)練7天如下。對(duì)每一個(gè)訓(xùn)練期間，大鼠放入Y-迷宮的一個(gè)分路，休息2分鐘后，電流施加在銅棒上和點(diǎn)亮順時(shí)針?lè)较蚍致返臒粢员砻鞣谴碳^(qū)域。如果大鼠走進(jìn)那個(gè)分路，記錄一次正確的應(yīng)答，否則，記錄一次錯(cuò)誤的應(yīng)答。這種刺激一應(yīng)答試驗(yàn)每天重復(fù)20次，每?jī)纱芜B續(xù)試驗(yàn)之間停頓5秒。在第7天20次試驗(yàn)后正確的應(yīng)答數(shù)字用來(lái)表達(dá)學(xué)習(xí)能力，(數(shù)字越大學(xué)習(xí)能力越好)。然后讓大鼠休息30天和步驟再重復(fù)一次。在30天休息期間之后20次試驗(yàn)的正確應(yīng)答數(shù)字用來(lái)表示記憶能力。
測(cè)定大腦中蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。制備組織如下在斷頭術(shù)后迅速取出大腦，在干冰中冷凍和轉(zhuǎn)移至冷凍箱。將腦勻漿，小顆粒最后懸浮在緩沖液中。
雙位競(jìng)爭(zhēng)性配位體結(jié)合檢定法用于測(cè)定蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。
結(jié)果顯示在附圖的圖3和4。Y-迷宮實(shí)驗(yàn)揭示學(xué)習(xí)能力和記憶在老年大鼠都受到損害。薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate和菝葜配基在老年大鼠給藥后恢復(fù)學(xué)習(xí)和記憶能力。蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度在老年大鼠上明顯下降。薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基cathylate和菝葜配基顯著地恢復(fù)蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。
年輕大鼠與老年大鼠相比較(129.2±36.8；153.8±40.5fmol/mg蛋白，分別為D1和D2)顯示出明顯更高的多巴胺(D)1和2受體密度(分別為157.5±33.2；200.6±50.9fmol/mg蛋白)。相比之下，菝葜配基和薩灑皂角苷配基對(duì)老年大鼠治療3個(gè)月恢復(fù)D1和D2受體密度(分別為菝葜配基177±10.9；217±45.7fmol/mg蛋白；薩灑皂角苷配基172.0±44.0；206.460.5)。
年輕大鼠與老年大鼠(1.205±0.219ng/g組織)相比較顯示出明顯更高的BDNF水平(1.647±0.277ng/g組織)。相比之下，菝葜配基和薩灑皂角苷配基對(duì)老年大鼠治療3個(gè)月部分地恢復(fù)BDNF水平(分別為1.342±0.07；1.410±0.232ng/g組織)。
這樣，化合物逆轉(zhuǎn)了發(fā)生在老年大鼠上的神經(jīng)損傷，BDNF水平下降，和蠅蕈堿的乙酰膽堿和多巴胺受體密度下降。
實(shí)施例10阿爾茨海默氏疾病模型作為神經(jīng)變性的模型阿爾茨海默氏病的體內(nèi)模型用于神經(jīng)變性模型。在這模型中神經(jīng)毒藥劑(淀粉樣蛋白β和鵝膏蕈氨酸)注射到大鼠的大腦中。這導(dǎo)致神經(jīng)元丟失，受體丟失和認(rèn)知損傷。以前的研究表明在大鼠大腦的核脈管組織(Vasalis)局部注射淀粉樣蛋白β引起膽堿能功能低下和行為的損傷直至外科手術(shù)后2個(gè)月(Giovannell；etal.，1995Neuroscience 66，781-792)。另外，淀粉樣蛋白β與小量鵝膏蕈氨酸共同注射到大鼠海馬中協(xié)同產(chǎn)生具有膠質(zhì)神細(xì)胞浸潤(rùn)的神經(jīng)元丟失，不僅鄰近部位而且遠(yuǎn)離注射部分也如此(Morimoto etal.，1998Newroscience 84，479-487)。
我們研究使用Morimoto的方法(Morimoto et al.，1998Neyroscience 84，479-487)帶有一些修改(單側(cè)代替雙側(cè)注射)。三月齡的Spragne Dawley大鼠隨機(jī)地分成不同組。注射淀粉樣蛋白β1-40和鵝膏蕈氨酸(均來(lái)自Sigma)是借助于定向性的儀器完成的(Stoetting Co.)和坐標(biāo)是AP＝-0.5mm(右至內(nèi)側(cè)線(xiàn))，L＝-2.8(從前囪向后)，H＝-7.0mm(腹面至硬膜)。每只大鼠的劑量是淀粉樣蛋白β1-40(4μg)和鵝膏蕈氨酸(1μg)溶于1μl生理鹽水。注射在20分鐘內(nèi)完成和針頭在10分鐘后取出。然后皮膚縫合。
8組是手術(shù)對(duì)照用正常生理鹽水注射(對(duì)照)模型(對(duì)照用淀粉樣蛋白β+鵝膏蕈氨酸)模型+表薩灑皂角苷配基Cathylate(18mg/kg/day)*模型+薩灑皂角苷配基Cathylate(18mg/kg/day)*模型+表灑皂角苷配基乙基琥珀酸酯(18mg/kg/day)(比較)模型+表薩灑皂角苷配基Cathylate(18mg/kg/day)*模型+薩灑皂角苷配基Cathylate(18mg/kg/day)*模型+薯蕷皂苷配基(即陰性對(duì)照，18mg/kg/day)*化合物是按照本發(fā)明的表薩灑皂角苷配基Cathylate，薩灑皂角苷配基Cathylate，表薩灑皂角苷配基乙基琥珀酸酯(比較化合物)，表薩灑皂角苷配基，表菝葜配基和薯蕷皂苷配基(所有的都是18mg/kg/day劑量)作為在CM-Na(0.5％)中穩(wěn)定的懸浮液通過(guò)胃管每天一次給藥。對(duì)照和模型組每天一次給予同樣體積的CM-Na(0.5％)。在手術(shù)開(kāi)始前20天，藥物和載體給予2個(gè)月時(shí)期。
評(píng)價(jià)蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。大腦樣品勻漿，離心，和在27000Xg下離心的小顆粒再勻漿和用作測(cè)定。3H-QNB的濃度選擇在飽和范圍。在培育和分離之后，結(jié)合的部分用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定。
逐步通過(guò)試驗(yàn)學(xué)習(xí)和記憶。試驗(yàn)化合物對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的作用使用逐步-通過(guò)試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)。一個(gè)60×15×15cm箱子分成2個(gè)相同大小的房間，一個(gè)暗間帶有銅棒電極，當(dāng)需要使用時(shí)，通電流(40Vac)，而另一個(gè)亮間但不通電。在兩個(gè)房間之間為大鼠通過(guò)有一個(gè)開(kāi)口(洞)。對(duì)每個(gè)大鼠連續(xù)2天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。第一天是訓(xùn)練；這時(shí)大鼠在箱內(nèi)先適應(yīng)3分鐘，然后放在亮間，它的背向著洞，和暗間的銅棒充電5分鐘。第二天是試驗(yàn)，這時(shí)記錄在5分鐘內(nèi)穿越的數(shù)字。記憶的改善是通過(guò)穿越數(shù)字的減少來(lái)報(bào)告的。
在神經(jīng)變性模型腦中的蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度是顯著地低于對(duì)照。表薩灑皂角苷配基Cathylate，薩灑皂角苷配基Cathylate，表薩灑皂角苷配基和表菝葜配基在腦蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度上產(chǎn)生明顯的上升，而鵝膏蕈氨酸和表薩灑皂角苷配基乙基琥珀酸酯沒(méi)有明顯改變蠅蕈堿的乙酰膽堿受體密度。這樣，實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的化合物對(duì)使受體數(shù)量正?；鹱饔?，即當(dāng)給藥于受體水平壓抑的動(dòng)物時(shí)，它們傾向于恢復(fù)受體數(shù)量至正常水平。
在5分鐘內(nèi)錯(cuò)誤應(yīng)答數(shù)字(錯(cuò)誤數(shù))在神經(jīng)變性模型組是明顯高于對(duì)照組，表明記憶的損傷(見(jiàn)表11)。表菝葜配基，表薩灑皂角苷配基Cathylate表薩灑皂角苷配基和薩灑皂角苷配基cathylate每一個(gè)都顯著減少錯(cuò)誤應(yīng)答數(shù)量，而鵝膏蕈氨酸和表薩灑皂角苷配基乙基琥珀酸酯在減少錯(cuò)誤應(yīng)答數(shù)量上都無(wú)效。
表11
統(tǒng)計(jì)分析使用未配對(duì)的Student試驗(yàn)。*表示P＜0.05實(shí)施例11肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)是一種進(jìn)行性致命的神經(jīng)退化的病癥，它引起運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性，骨骼萎縮，癱瘓和死亡。這種疾病的原因是復(fù)雜的在Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD-1)基因上的突變是引起某些形式的人類(lèi)ALS的原因。這種疾病的動(dòng)物模型包括過(guò)度表達(dá)SOD-1基因的SOD-1轉(zhuǎn)基因小鼠和進(jìn)行性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病(pmn，Charcot-Marie-Tooth模型)小鼠。菝葜配基和薩灑皂角苷配基增加生命期和改善超氧化物歧化酶(SOD)小鼠(圖5)和pmn小鼠(圖6)的行為缺陷，肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)和Charcot-Marie-Tooth病的兩種模型。
上述的內(nèi)容沒(méi)有限制地說(shuō)明本發(fā)明。變化和修改對(duì)在本技術(shù)一般熟悉的人們將是很容易明的，都確定在本專(zhuān)利申請(qǐng)書(shū)和隨后所有的專(zhuān)利的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種或多種選自以下化合物的活性劑的用途A.結(jié)構(gòu)式I的化合物 在式(I)中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR其中R＝烷基或酰基；-R9，R11，R12，R14，R15，R16，R17，R25，R33，可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR，其中R＝烷基或?；?表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基；B.通式II的化合物 在通式(II)中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R34，彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)；-R9，R11，R12，R14，R15，R16，R17，R25，R33，R35可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR其中R＝烷基或酰基，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基；C.通式III的化合物 在通式(III)式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R33，R34，R35，R36，R37彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)；-R9，R11，R12，R15，R16，R17，R25可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；D.皂角苷配基衍生物，帶有至少一個(gè)X基團(tuán)取代基，其中X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，-N3-，NH2-，MeSO2NH-，和-烷基；和E.上述任一化合物的衍生物形式，其中在3-位上的碳原子或，在式II和III情況下，3-位碳原子，26-位或在3-位和26-位上的每個(gè)碳原子，帶有O-糖部分，其中糖基是單-，雙或三-糖；所有它們的立體異構(gòu)體和外混旋混合物，所有它們藥學(xué)上可接受的前藥和鹽類(lèi)，和它們的所有混合物和組合；所述用途是在治療或預(yù)防有以下病況或?qū)ζ涿舾械娜祟?lèi)和非人動(dòng)物中的應(yīng)用，或在制備用于治療和預(yù)防下述病況的組合物中的應(yīng)用(i)非認(rèn)知的神經(jīng)變性，(ii)非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，(iii)運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性，或(iv)不存在認(rèn)知，神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或丟失。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述活性劑，或至少一種活性劑選自a.上面通式I的化合物，其中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR，其中R＝烷基或酰基；-R9，R11，R12，R14， R15，R16，R17，R25，R33可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR，其中R＝烷基或酰基； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基和R25的立體化學(xué)是β取向的；b.上面通式I的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR，其中R＝烷基或?；?；OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R11，R14，R25，R33可以是H，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基或無(wú)或OR其中R＝烷基或酰基； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；c.上面通式I的化合物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，-R33或R14＝CH3 表示單鍵，-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中任何一個(gè)，-R25的立體化學(xué)是β取向的，和其中除了以上基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；d.上面通式I的化合物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝H，-R14＝R33＝CH3 表示單鍵，-R25的立體化學(xué)是β取向的，和其中除了以上基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；e.上面通式II的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R34彼此獨(dú)立，是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)， 表示任選的雙鍵，式中除以上基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，-R25的立體化學(xué)是β取向的；f.上面通式II的化合物或其碳水化合物衍生物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；换驘o(wú)；-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R34＝H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基，?；?，或碳水化合物，-R11，R14，R25，R33，R35可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外，-R33或R34＝烷基，R25的立體化學(xué)是β取向的；g.上面通式II的化合物或其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，-R14＝CH3-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔铮?R35＝H或無(wú)， 表示任選的雙鍵，和-在C25上的甲基可以是R或S構(gòu)型中任何一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的，其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；h.上面通式II的化合物或其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝H，-R14＝R33＝CH3，-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔?，-R35＝H或無(wú)， 表示任選的雙鍵，-R25的立體化學(xué)是β取向的，其中除了以上的基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留的取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，和X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)和-N3-，NH2-，MeSO2NH--烷基；i.上面通式III的化合物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R33，R34，R35，R36，R37彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；换驘o(wú)；-R9，R11，R12，R15，R16，R17，R25可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上的基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；j.上面通式III的化合物或其碳水化合物衍生物，式中-R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R10，R13，R14，R18，R19，R20，R21，R22，R23，R24，R26，R27，R28，R29，R30，R31，R32，R33，R35，R36，R37彼此獨(dú)立，是H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或?；换驘o(wú)；-R9，R12，R15，R16，R17＝H，-R34＝H，OH，＝O，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH2-，烷基，OR，其中R＝烷基，酰基或碳水化合物，或無(wú)；-R11，R25可以是H，OH，鹵原子，(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，N3-，NH2-，MeSO2NH-，烷基，OR，其中R＝烷基或酰基，或無(wú)； 表示任選的雙鍵，其中除了以上基團(tuán)外-R33或R14＝烷基，和R25的立體化學(xué)是β取向的；k.上面通式III的化合物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R33＝H，-R14＝CH3，-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，酰基或碳水化合物，R35＝H或無(wú)，R37＝H，-OH或＝OR36＝H或-OH 表示單鍵，和-在C25上的甲基可以是在R或S構(gòu)型中的任何一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的；其中除了以上基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或酰基或無(wú)；和X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2，MeSO2NH-，-烷基；l.上面通式III的化合物或其碳水化合物衍生物，式中-R1＝R2＝R4＝R5＝R6＝R7＝R8＝R10＝R11＝R9＝R12＝R13＝R15＝R16＝R17＝R18＝R19＝R20＝R21＝R22＝R23＝R24＝R25＝R26＝R27＝R28＝R29＝R30＝R31＝R32＝R19＝R20＝H，-R14＝R33＝CH3，-R34＝-OH或-OR，其中R＝烷基，?；蛱妓衔锖蚏35＝H或無(wú)R37＝H，-OH或＝OR36＝H或-OH 表示單鍵，和-在C25上的甲基可以是在R或S構(gòu)型中任何一個(gè)，R25的立體化學(xué)是β取向的；其中除了以上基團(tuán)外R3或R23至少一個(gè)是X基，可能保留取代基是H，OH，＝O和OR，其中R＝烷基或?；驘o(wú)，和X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，和-N3-，NH2，MeSO2NH--烷基；m.取代的皂角苷配基，其中皂角苷配基的至少一個(gè)OH基團(tuán)是被X取代的，X選自-鹵原子，-(Me-S-)，(Me-SO-)，(Me-SO2-)，-N3-，NH2，MeSO2NH-，和-烷基；n.以上定義的皂角苷配基，其中，X定義中的鹵原子是氟原子；o.取代的皂角苷配基，選自(3β-氟-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3，3-二氟-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-甲基磺酰基氨基-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-疊氮基-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，(3α-氨基-5β，20α，22α，25R-螺甾烷)，和它們的立體異構(gòu)體和外消旋混合物，它們的藥學(xué)上可接受的前藥和鹽類(lèi)；p.取代的皂角苷配基，其中，然后被如上面定義的至少一個(gè)X基取代的母體皂角苷配基選自薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基，菝葜配基，表菝葜配基，和anzurogenin-D；q.通式Ia的化合物 式中，R基團(tuán)選自氫；烷基羰基；烷氧基羰基；烷基氨基甲?；?；或芳基羰基；或磺基(HO3S)；膦酰基((OH)2P(O)-)；或單-，雙-或三-糖；其中，任何烷基可任選地被芳基，氨基，單-或雙-烷基氨基，羧酸殘基(-COOH)或它們的任何組合所取代；r.如a至q項(xiàng)所定義的上述化合物的衍生物形式，其中，3-位碳原子，或在式II和III的情況，3-位碳原子，26-位碳原子或在3-位和26-位的每一個(gè)碳原子帶有O-糖部分，其中的糖基是單-，雙-或三-糖，和其?；苌?。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述活性劑，或至少一種活性劑是選自通式Ia的化合物。
4.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述活性劑，或至少一種活性劑是選自薩灑皂角苷配基，薩灑皂角苷配基cathylate，薩灑皂角苷配基醋酸酯，薩灑皂角苷配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基caltylate，表薩灑皂角苷配基醋酸酯，表薩灑皂角苷配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表薩灑皂角苷配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基，菝葜配基calhylate，菝葜配基醋酸酯，菝葜配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，菝葜配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基，表菝葜配基calhylate，表菝葜配基醋酸酯，表菝葜配基琥珀酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基甘氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基纈氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基苯丙氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基異亮氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，表菝葜配基甲硫氨酸酯和其藥學(xué)上可接受的鹽，薩灑皂角苷配基，表薩灑皂角苷配基，菝葜配基和表菝葜配基的皂角苷衍生物，其中，在所有情況下，3-位碳原子帶有O-糖部分，其中的糖基選自葡萄糖，甘露糖，果糖，半乳糖，麥芽糖，纖維二糖，蔗糖，鼠李糖，木糖，阿拉伯糖，巖藻糖，異鼠李糖，芹菜糖，乳糖，半乳糖-葡萄糖，葡萄糖-阿拉伯糖，巖藻糖-葡萄糖，鼠李糖-葡萄糖，葡萄糖-葡萄糖-葡萄糖，葡萄糖-鼠李糖，甘露糖-葡萄糖，葡萄糖-(鼠李糖)-葡萄糖，葡萄糖-(鼠李糖)-鼠李糖，葡萄糖-(葡萄糖)-葡萄糖，半乳糖-(鼠李糖)-半乳糖，葡萄糖-(葡萄糖)-葡萄糖，半乳糖-(鼠李糖)-半乳糖，和它們?；难苌?；16，22-環(huán)氧糞甾烷-3β-醇，菝葜精酮，糞甾醇，和其藥學(xué)上可接受的前藥和鹽類(lèi)。
5.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述活性劑是存在于一種選自藥物組合物，食品，食品添加劑和飲料的組合物中。
6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述活性劑與一種或多種其它活性劑共同存在。
7.如權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述的一種或多種其它活性劑選自但不限于膽堿酯酶抑制劑，多巴胺激動(dòng)劑，COMT抑制劑，MAO-B抑制劑，抗膽堿能劑，乙酰膽堿激動(dòng)劑，5-羥色胺激動(dòng)劑，AMPA受體激動(dòng)劑，GABA受體激動(dòng)劑，NMDA受體激動(dòng)劑，β-腎上腺素受體激動(dòng)劑，地高辛，多巴酚丁胺，抗炎劑，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，斯特汀，腺苷A2a受體拮抗劑，醛糖還原酶抑制劑，免疫調(diào)節(jié)劑，大麻類(lèi)激動(dòng)劑，干擾素β或三環(huán)抗抑郁劑。
8.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述人類(lèi)或非人動(dòng)物患有，或?qū)σ韵氯魏渭膊∶舾械呐两鹕喜?，腦炎后的帕金森氏癥候群，抑郁癥，精神分裂癥，肌肉營(yíng)養(yǎng)不良包括筋膜肩胛與肱骨的肌肉營(yíng)養(yǎng)不良(FSH)，裘馨氏肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，貝克氏肌肉營(yíng)養(yǎng)不良和布魯士肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，角膜營(yíng)養(yǎng)不良，反射交感神經(jīng)性營(yíng)養(yǎng)不良綜合征(RSDSA)，神經(jīng)與血管營(yíng)養(yǎng)不良，重癥肌無(wú)力，蘭伯特伊頓氏病，亨丁頓氏病，運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾癥包括肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)，多發(fā)性硬化，位置性低血壓，外傷的神經(jīng)變性，如以下的發(fā)作或以下的意外事故(例如，外傷性的頭部損傷或脊髓損傷)，巴頓氏病，Cockayne氏綜合征，Down氏綜合征，皮質(zhì)基底神經(jīng)節(jié)變性，多發(fā)性系統(tǒng)萎縮，腦萎縮，下橄欖體橋腦小腦萎縮，牙齒椎(dentatorubral)萎縮，Pallidoluysian氏萎縮，脊髓與延髓萎縮，視神經(jīng)萎縮，硬化的全腦炎(SSPE)，注意缺陷病癥，病毒后腦炎，脊髓灰質(zhì)炎后綜合征，華氏綜合征，Joubert氏綜合征，Guillain-Barre氏綜合征，腦回發(fā)育不全，Moyamoya氏病，神經(jīng)元游走病癥，孤獨(dú)癖綜合平，多谷氨酰胺病，Niemann-Pick氏病，進(jìn)行性的多病灶白腦病，假腫瘤腦，Refsum氏病，Zellweger氏綜合征，核上的麻痹，F(xiàn)riedveich氏運(yùn)動(dòng)失調(diào)，脊髓與小腦的運(yùn)動(dòng)失調(diào)2型，Rhett氏綜合征，Shy-Drager氏綜合征，結(jié)節(jié)狀的硬化，畢克氏病，慢性疲勞綜合征，神經(jīng)病包括遺傳性的神經(jīng)病，Prion-based神經(jīng)變性，包括Greutzfeldt-Jakel氏病(CJD)，變異CJD，新變異CJD，牛海綿狀的腦病(BSE)，GSS，F(xiàn)FI，Kuru(慢性家族性遺傳性神經(jīng)變性疾病)和Alper氏綜合征，Joseph氏病，急性播散的腦脊髓炎，珠網(wǎng)膜炎，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的血管損害，肢端神經(jīng)元功能喪失，Charcit-Marie-Tooth氏病，對(duì)心力衰竭，哮喘，和斑狀的變性的敏感性。
全文摘要
本發(fā)明揭示某些甾族的皂角苷配基，相關(guān)的化合物及其衍生物，在非認(rèn)知的神經(jīng)變性，非認(rèn)知的神經(jīng)肌肉變性，運(yùn)動(dòng)感覺(jué)神經(jīng)變性或不存在認(rèn)知的神經(jīng)和神經(jīng)肌肉損傷的受體功能障礙或丟失的治療中的治療方法和用途。
文檔編號(hào)A61P25/08GK1642558SQ03807188
公開(kāi)日2005年7月20日 申請(qǐng)日期2003年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月27日
發(fā)明者D·里斯, P·岡寧, A·奧希, Z·夏, Y·胡 申請(qǐng)人:菲特法姆股份有限公司