專利名稱：具有提高生物利用度/生物功效活性的枯茗植物及其提取物和提取物的精餾產(chǎn)物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種含有以枯茗(Cuminum cyminum)植物的提取物和/或枯茗(Cuminum cyminum)植物的生物活性精餾產(chǎn)物作為生物利用度提高劑的組合物。本發(fā)明還涉及一種以含有枯茗(Cuminum cyminum)的提取物和/或枯茗(Cuminum cyminum)的生物活性精餾產(chǎn)物及作為生物利用度提高劑的胡椒堿的組合物。本發(fā)明進一步涉及生物利用度和/或生物功效提高劑的應用及它們的制備方法，這種提高劑又被稱為生物提高劑或BE，它們的制備是指從它們的天然原料中分離出來并最終得到它們的化學特性產(chǎn)品或指紋圖譜形式產(chǎn)品。
背景技術：
過去的研究已經(jīng)采取了一些措施以最大的提高口服藥物的生物利用度，比如(a)減少粒徑(微粉化，納米化，等)，(b)多形態(tài)的或晶體尺寸和形態(tài)的選擇，(c)通過化學修飾、配位和使用助溶劑/表面活性劑實現(xiàn)對微溶藥物的增溶，(d)在作用位點定向給藥，(e)通過薄膜包衣達到可控制給藥或利用高分子聚合物實現(xiàn)藥物的持續(xù)釋放，(f)前藥物方法，和(g)利用脂質(zhì)體實現(xiàn)微膠囊化。
但是，基于對印度草藥學的研究，為我們提供了一種新的提高藥物生物利用度的方法，這種方法涉及的藥物原本被位于查謨的申請機構Regional Research Laboratory(RRL)認為是缺乏生物有效性的藥物。在印度草藥處方中有一組被稱為“Trikatu”的草藥其被記錄的頻率非常高，幾乎有大約70％的處方都將其作為重要組份使用，它包含三種辛辣物，即等比例的長胡椒、黑胡椒和干姜。來自胡椒的單一生物堿成分(胡椒堿)被發(fā)現(xiàn)具有提高生物利用度的作用。姜的作用是調(diào)節(jié)腸道功能以利于吸收。在抗結核藥物開發(fā)中對胡椒堿的作用進行了深入的研究。一般認為，通過與胡椒堿的結合，利福平在保證抗結核藥物療效的情況下可以將其標準劑量(450mg)減少大約50％?；谶@些發(fā)現(xiàn)，進而評價了其它幾種植物的提高生物利用度/生物功效的活性。利用幾種植物如干姜(Zingiber officinale)和葛蔞子(Carum carvi)的局部得到的極性提取物和非極性提取物可以顯著地提高(25～300％)[見共同提交的專利申請]許多種類藥物的生物利用度，這些藥物為例如抗生素，抗真菌藥，抗病毒藥，抗癌藥，心血管藥，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，消炎藥/治風濕藥，抗結核藥/抗麻風藥，抗組胺劑/呼吸道疾病藥物，皮質(zhì)甾類，免疫抑制劑，治潰瘍藥，但是不僅限于以上藥物。這些提取物無論是否含有胡椒堿都在其提高生物利用度/生物功效的作用中表現(xiàn)出明顯的選擇性。
枯茗(Cuminum cyminum)(屬)(傘形植物)是一種矮小、纖細的一年生草藥，主要分布于歐洲東南部，北非地中海沿岸，印度和中國。在印度幾乎所有的邦都有它的種植。其中主要區(qū)域包括烏塔邦，旁遮普邦，拉賈斯坦邦，古吉拉特邦和馬哈拉斯特拉邦。這種植物喜歡溫和氣候，從海平面到海拔10,000尺都可以生長。
它的種子通常被用作一種重要的調(diào)味品。在印度草藥學中它被記載為katu，ushna和平復躁狂等作用。它是一種有效的胃刺激物，有助于治療腹腔內(nèi)的腫塊，胃漲氣，腹瀉，口炎性腹瀉并且是一種強力驅蟲劑。它具有相應療效并已經(jīng)將其用作抗腹瀉藥，催奶劑，利尿劑同時還發(fā)現(xiàn)其有助于治療聲音嘶啞。它還被用作收斂劑，驅風劑。用它種子做成的糊外敷可以減輕由于腸胃內(nèi)的寄生蟲產(chǎn)生的疼痛和刺激。它的油可用于治療濕疹。
已知這些植物除了被我們食用的部位以外的其他部位同樣具有藥效，根據(jù)我們過去將胡椒堿作為生物有效度提高劑得到的經(jīng)驗，我們?nèi)绻芯窟@種植物以測定它對生物有效度的提高效果，那么應該基于這種植物的那些與不同胡椒堿來源植物所共同具有的若干相似特性進行研究。
枯茗(Cuminum cyminum)的化學成分對枯茗(Cuminum cyminum)的種子進行了分析并列出了分析結果，分析得到的種子成分是(百分比)水分11.9；蛋白18.7；醚提取物15.0；碳水化合物36.6；纖維12.0；礦物質(zhì)5.8；鈣1.08；磷0.49％；鐵31.0mg/100g；以維生素A統(tǒng)計的胡羅卜素870I.U./100gm；維生素C3.0mg/100g(Hlth Bull.，No.23,1941,36)。
將種子進行蒸餾可以得到一種氣味不好的，辛辣的并有一點苦的可揮發(fā)性油(2.0-4.0％)。這種油新制得的時候是無色或黃色的，保存一段時間后顏色變暗。印度油類分析參數(shù)為d15°，0.8945；nD15°1.490；[α]D15°，+3.60；醛類16％；在20℃的溫度下，這種油可以溶解在11倍體積的80％乙醇中。由Parry報道的參數(shù)范圍是sp.gr.0.900-0.930；n＝1.494-1.507；[α]+3.0至+8.0°)；醛類25-35％(Rao et al，J.Indian Inst.Sci.，1925，8A，182，Parry，E.J.“The Chemistry of Essential Oils and ArtificialPrfumes”(Scott，Greenwood&Son Ltd.，London)Vol.1，P.311)。
這種可揮發(fā)性油的主要成分是枯茗醛(C10H12O，對異丙基苯甲醛，b.p.235°，)，它占了油成分的20-40％。除了該醛，油中還含有對繖花烴，蒎烯，二戊烯，異丙基苯，枯茗醇，β-水芹烯和α-松油醇。提取完可揮發(fā)性油后剩下的剩余物含有17.2％的蛋白和30.0％的脂肪。剩余物可以用作牛飼料(Finnemore，H.“The Essential Oils”(Ernest Benn.Ltd.，London)P.641)。種子中除了含有可揮發(fā)性油外還含有10％的混合油，其顏色為棕綠色并且具有很濃的芳香氣味。
其他報道的化學成分為芹菜苷配基-7-葡萄糖苷，芹菜苷-7-二葡萄糖苷，芹菜苷-7，4’-二葡萄糖苷，芹菜苷-7-二半乳糖醛酸酐，芹菜苷-7-半乳糖苷葡萄糖苷，芹菜苷-7-半乳糖醛酸酐-4’-葡萄糖苷，芹菜苷-6，8-二-C-葡萄糖苷，藤黃菌素葡萄糖苷，藤黃菌素-7-二葡萄糖苷，藤黃菌素-7，3’-二葡萄糖苷，藤黃菌素-7，4’-二葡萄糖苷和藤黃菌素-7-半乳糖醛酸酐-4’-葡萄糖苷和柯伊利素糖苷(E1-Negoumy，S.I.et al.Grasas Aceites(Seville)1989，40(2)87-9)。
對于提高眾多藥物的生物有效度存在極大興趣和醫(yī)學需要，這些藥物是指(a)生物可用性低，(b)服用期長，(c)有毒性和(d)價格昂貴的藥物。因為該藥物生物利用度的程度直接影響藥物在血漿中的濃度從而關系到治療的效果和口服給藥后引起的毒性作用相關的劑量，所以最大化口服生物利用度在治療方面是非常重要的。生物利用度低的藥物都用作輔助治療，因為劑量的主要部分無法達到血漿或發(fā)揮其藥理作用，除非且直至給予將導致嚴重副作用的極大劑量。任何藥物生物利用度的明顯改善將導致降低該特定藥物的劑量或使用頻率。除此以外，物間可變性又反過來與生物利用度的程度有關。因此，口服藥的低生物利用度導致了高的可變性和血漿中藥物濃度和治療效果的難控制性。物間可變性特別涉及那些安全范圍比較窄的藥物。
不完全的口服生物利用度是由不同原因造成的。這些原因包括溶解性差或者水中的溶解度低，對腸壁的透過性差，在胃液中或腸道液中降解和前于全身的腸道內(nèi)或肝臟的代謝。為了解決這些問題以前公開的一些試驗采取了加大用量的措施，導致了患者難以承受的毒副作用。
許多治療措施在治療過程中缺少必要的營養(yǎng)藥物。本發(fā)明通過提高不同營養(yǎng)藥物的生物利用度/生物功效而改善了營養(yǎng)狀態(tài)，這些營養(yǎng)藥物還包括礦物質(zhì)和維生素。本發(fā)明的生物提高劑由于眾多的原因使其能夠在不影響其在血漿濃度的情況下提高藥物的生物功效，部分原因在本發(fā)明中接下來的“生物利用度/生物提高活性”部分中進行了闡述，但并不僅限于這些原因。
生物利用度/生物功效的提高活性在本發(fā)明中，術語生物利用度或生物提高(BE)活性是指“一種產(chǎn)品當其以比較低的用量與藥物或營養(yǎng)素一起使用時，能夠提高該藥物的功效以降低該藥物或營養(yǎng)素的消費量從而使這種藥物功效提高。”在本發(fā)明中，將植物各部位的水，水-醇，酮，醚，鹵化溶劑提取物與不同治療類型的藥物和營養(yǎng)藥物(必需的氨基酸，礦物質(zhì)，抗氧化劑，維生素)和中草藥單獨或混合使用以評價其作用。提取物的用量從2.0mg到100mg其生物有效度提高(BE)活性是一致的，這與制劑中藥物的用量無關。提取物的進一步精餾產(chǎn)物也與同類的藥物一起使用以評價其效果。精餾產(chǎn)物的生物有效度提高活性隨其在原提取物中所占的比例加大而提高。精餾產(chǎn)物的有效生物利用度提高活性的使用劑量為0.5到25.0mg。兩種精餾產(chǎn)物被發(fā)現(xiàn)在上述范圍內(nèi)其活性是相同的。無論是將原提取物和其精餾產(chǎn)物混合使用還是單獨使用，在它們與不同種類藥物一起使用時都具有活性。精餾產(chǎn)物的用量從0.5mg到25.0mg其生物提高活性是一致的，這與制劑中藥物的用量無關。精餾產(chǎn)物與原提取物相比具有更高的生物利用度提高活性。
研究發(fā)現(xiàn)將提取物或其精餾產(chǎn)物單獨與胡椒堿(1-胡椒基哌啶)(1-piperoyl哌啶)一起使用，提取物或其精餾產(chǎn)物可以提高50％的活性。而當將原提取物和其精餾產(chǎn)物以不同比例混合再與胡椒堿混合使用時其活性提高60％。這些制劑中的胡椒堿用量為3-20mg。
提取物或其精餾產(chǎn)物無論是單獨使用時還是與胡椒堿一起使用時都發(fā)現(xiàn)其生物利用度提高活性具有高度的選擇性。這可以從這些提取物/精餾產(chǎn)物對生物利用度的提高程度很明顯的看出。這種提高的程度從零到接近顯著的程度(25％)進而到非常顯著的程度(435％)。
這種選擇性的原因可能是由于以下一種或多種原因造成的(a)提高胃腸傳輸試驗(GIT)中的藥物吸收，(b)抑制或降低在肝臟中或腸中藥物的生物轉化率，(c)以某種方式修飾免疫系統(tǒng)以盡量減少藥物的總需要量，(d)提高其穿透或進入病原體的能力，盡管這些病原體例如結核桿菌或其他微生物已經(jīng)在巨噬細胞中變成了持久態(tài)。從而最終保證活性藥物在另外不能夠到達的范圍內(nèi)提高對微生物的殺死能力，(e)抑制病原體或異常組織的抗藥性，舉例來說這種抗藥性由于抗瘧疾藥，抗癌藥和抗菌藥的外排到自然界而經(jīng)常出現(xiàn)，(f)修飾宿主和病原菌的信號處理過程以確保提高藥物對病原體的可及度提高，(g)提高藥物與病原體內(nèi)例如受體，蛋白，DNA，RNA等目標位點的結合，從而加強和延長藥效以提高抗生素的抗病原體活性，(h)除了以上所述的可能的作用形式，生物提高劑還可能用于提高營養(yǎng)物的運輸和藥物通過血腦屏障的能力，這些作用對控制象大腦感染，癲癇癥和其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(CNS)具有非常大的幫助。
本發(fā)明的主要作用是提高藥物載體介導的進入組織和在組織中利用被動擴散和主動運輸途徑加強其運送的能力，從而將例如營養(yǎng)物等生理學物質(zhì)運送到它們的目標位點，但也不排除其它作用。對于任何適用的作用機理，本發(fā)明產(chǎn)品的作用是一種協(xié)同和/或附加的作用，以致許多藥物或營養(yǎng)藥物當本發(fā)明所涉及的這種產(chǎn)品存在時由于以上所提到的一種或多種機理其生物實用性和生物有效性得到了提高。藥物和營養(yǎng)藥物的生物有效度和/或生物功效除了對人類十分重要外對動物的健康也有作用。因此本發(fā)明同樣涉及在獸類醫(yī)藥領域的應用。
發(fā)明目的本發(fā)明的主要目的是提供一種來自于枯茗(Cuminum cyminum)的活性提取物和生物活性精餾產(chǎn)物。
本發(fā)明的另一個目的是評估枯茗(Cuminum cyminum)的提取物或生物活性精餾產(chǎn)物與藥物，營養(yǎng)物，營養(yǎng)藥物，微量營養(yǎng)物和草藥/產(chǎn)品一起使用時的生物增強作用和生物有效度。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種生物提高劑組合物，其包含來自于枯茗(Cuminum cyminum)的活性成分與藥物，營養(yǎng)物，營養(yǎng)藥物，微量營養(yǎng)物和草藥/產(chǎn)品一起使用。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種生物提高劑組合物，其包含來自于枯茗(Cuminum cyminum)的提取物和/或生物活性精餾產(chǎn)物，胡椒堿和一種或多種以下這組物質(zhì)藥物，營養(yǎng)物，營養(yǎng)藥物，微量營養(yǎng)物和草藥/產(chǎn)品。
另外，本發(fā)明的另一個目的是提供一種從枯茗(Cuminum cyminum)中分離生物活性精餾產(chǎn)物的方法，該精餾產(chǎn)物可以用作生物提高劑。
另外，本發(fā)明的另一個目的是一種用含水和/或醇性溶劑從枯茗(Cuminum cyminum)中分離生物活性精餾產(chǎn)物的方法。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明涉及來自枯茗(Cuminum cyminum)植物的包括其化學特性和指紋圖譜特征的活性提取物/精餾產(chǎn)物的制備和將這種產(chǎn)品用于提高藥物、天然產(chǎn)品和必需營養(yǎng)藥物生物利用度和/或生物功效的方法。本發(fā)明涉及生物提高劑組和物的制備，該組合物包含枯茗(Cuminumcyminum)各部位的極性或非極性提取物和/或胡椒堿(EX胡椒和蓽拔)，該組合可以顯著(25％-435％)提高許多種類藥物的生物利用度，比如抗生素，抗真菌藥，抗病毒藥，抗癌藥，心血管藥，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物(CNS)，消炎藥/治風濕藥，抗結核(TB)藥/抗麻風藥，抗組胺劑/呼吸道疾病藥物，皮質(zhì)甾類，免疫抑制劑，治潰瘍藥，但不限于這些藥物。這些來自枯茗(Cuminum cyminum)的提取物/精餾產(chǎn)物無論是否與胡椒堿(Ex胡椒和蓽拔)一起使用都在其提高生物利用度/生物功效的作用中表現(xiàn)出高度的選擇性。
附圖簡要說明

圖1枯茗(Cuminum cyminum)的水提取物的HPLC色譜2枯茗(Cuminum cyminum)的50％水和醇混合溶劑提取物的HPLC色譜3枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物1的HPLC色譜4枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物2的HPLC色譜5枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物3的HPLC色譜6枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物4的HPLC色譜7枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物5的HPLC色譜圖發(fā)明的詳細說明因此，本發(fā)明提供一種生物提高劑/生物有效度促進劑的組合物，該組合物包含i.有效劑量的來自枯茗(Cuminum cyminum)的提取物和/或至少一種生物活性精餾產(chǎn)物；ii.一種或多種添加劑，其選自藥物，營養(yǎng)物，維生素，營養(yǎng)藥物，草藥/產(chǎn)品，微量營養(yǎng)物，抗氧化劑和藥理學可接受的添加劑/賦形劑，和iii.任選地，有效劑量的胡椒堿或胡椒或篳拔的提取物/精餾產(chǎn)物。
本發(fā)明的一個實施方式中枯茗(Cuminum cyminum)提取物的用量在約1.0到250mg的范圍，優(yōu)選2.0到100mg的范圍。
本發(fā)明的另一個實施方式中在不考慮藥物，營養(yǎng)物，維生素，營養(yǎng)藥物，草藥/產(chǎn)品，微量營養(yǎng)物和抗氧化劑等添加劑用量的情況下，枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物的用量在約0.5到75.0mg的范圍，優(yōu)選1.0到30mg范圍。所用枯茗(Cuminum cyminum)的精餾產(chǎn)物選自被標記為1-5的精餾產(chǎn)物。
胡椒堿的用量在約3mg到50mg的范圍，更確切地在3mg到20mg之間，其中胡椒堿分離自胡椒，篳拔或其樹脂油。
本發(fā)明的另一個實施方式提供了一種組合物，其中藥物成分選自以下這組藥物抗生素，抗真菌藥，抗病毒藥，抗癌藥，心血管藥，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物(CNS)，消炎藥/治風濕藥，抗結核(TB)藥/抗麻風藥，抗組胺劑/呼吸道疾病藥物，皮質(zhì)甾類，免疫抑制劑，治潰瘍藥和草藥。
本發(fā)明的另一個實施方式中所用抗生素選自喹諾酮，大環(huán)內(nèi)酯物，頭孢菌素，青霉素和氨基糖苷這組物質(zhì)；其中喹諾酮選自環(huán)丙沙星，培氟沙星，氧氟沙星和諾氟沙星這組物質(zhì)；其中大環(huán)內(nèi)酯物選自紅霉素，羅紅霉素和阿奇霉素這組物質(zhì)；其中頭孢霉素選自頭孢氨芐，頭孢曲松(cefatrioxone)，頭孢克肟，頭孢匹羅，頭孢地尼和頭孢羥氨芐這組物質(zhì)；其中青霉素選自阿莫西林和氯唑西林這組物質(zhì)；和其中氨基糖苷選自阿米卡星和卡那霉素這組物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個實施方式中抗真菌藥選自氟康唑，兩性霉素B，灰黃霉素和酮康唑這組物質(zhì)；抗病毒藥選自阿昔洛韋和疊氮胸苷這組物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個實施方式中抗癌藥物選自甲氨蝶呤，5-氟尿嘧啶，阿霉素，紫杉醇和順鉑這組物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個實施方式中心血管藥物選自氨氯地平，賴諾普利，普萘洛爾和阿替洛爾這組物質(zhì)；中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物選自阿譜唑侖和氟哌啶醇這組物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個實施方式中消炎藥/治風濕藥選自雙氯芬酸鈉，吡羅昔康，尼美舒利和羅非克西這組物質(zhì)；抗結核(TB)藥/抗麻風藥選自利福平，乙硫異煙胺，異煙肼，環(huán)絲氨酸，吡嗪酰胺，乙胺丁醇和氨苯砜這組物質(zhì)。
抗組胺劑/呼吸道疾病藥物選自沙丁胺醇，茶堿，溴己新和氯雷替定這組物質(zhì)；皮質(zhì)甾類選自強的松龍，地塞米松和倍他米松這組物質(zhì)；免疫抑制劑選自環(huán)孢霉素A，他克莫司和霉酚酸酯這組物質(zhì)；治潰瘍化合物選自雷尼替丁，西咪替丁和奧美拉唑這組物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個實施方式中草藥產(chǎn)品和草藥選自海膽(Echinacea)，雪蘭莪草(Tinospora cordifolia)，胡雪蓮(Picrorrhiza kurroa)，木橘(Aegles marmelos)，穿心蓮(Andrographis paniculata)，白花酸藤果(Emblica ribes)，總序天冬(Asparagus racemosus)，絨毛訶子(Terminalia chebula)，催眠睡茄(Withania somnifera)，積雪草(Centellaasiatica)和/或其混合物。
本發(fā)明的另一個實施方式涉及的組合物中營養(yǎng)物選自糖，碳水化合物，脂肪和蛋白這組物質(zhì)；維生素選自維生素A，維生素E，維生素B1，維生素B6，維生素B12，維生素C和葉酸；抗氧化劑選自β-胡蘿卜素，水飛薊素，硒，番茄紅素和Ellagiogallotannins。
本發(fā)明的另一個實施方式天然草藥產(chǎn)品選自姜黃素，乳香酸和蕓香苷這組物質(zhì)；必需微量營養(yǎng)物選自蛋氨酸，賴氨酸，亮氨酸，纈氨酸，異亮氨酸，鋅，鈣，葡萄糖，鉀，銅和鐵。
本發(fā)明的另一個實施方式涉及的枯茗(Cuminum cyminum)植物提取物或枯茗(Cuminum cyminum)植物提取物的生物活性精餾產(chǎn)物提取自枯茗(Cuminum cyminum)植物的任意部位。
本發(fā)明的另一個實施方式中以上所提到的組合物是通過口服，腸道外，鼻腔，吸入包括霧化，直腸，陰道，透皮作用和其他任意適合途徑給藥的。
本發(fā)明的另一個實施方式中當將來自于枯茗(Cuminum cyminum)的植物提取物或生物活性精餾產(chǎn)物單獨使用或與胡椒堿一起用于提高藥物，營養(yǎng)藥物，和草藥/制劑的生物利用度/生物功效的時，發(fā)現(xiàn)其生物提高作用具有選擇性。
本發(fā)明的另一個實施方式提供了包含枯茗(Cuminum cyminum)植物的提取物或精餾產(chǎn)物的組合物，他們提供生物利用度/生物提高活性為25-335％。
本發(fā)明的另一個實施方式中將一種來自枯茗(Cuminum cyminum)成分和胡椒堿的組合物顯示生物提高/生物利用度活性從接近顯著的即約25％到非常顯著的即約435％。
本發(fā)明的另一個實施方式中所述含枯茗(Cuminum cyminum)和胡椒堿提供對生物利用度/生物提高活性比單獨使用來自枯茗(Cuminumcyminum)生物提高活性可以提高10％到85％。
本發(fā)明的一個實施方式中涉及含枯茗(Cuminum cyminum)的提取物的組合物用量為10-30mg/kg/體重，含枯茗(Cuminum cyminum)的生物活性精餾產(chǎn)物的組合物為2-20mg/kg/體重。
本發(fā)明的另一個實施方式涉及將含枯茗(Cuminum cyminum)的提取物或生物活性精餾產(chǎn)物和胡椒堿組合物，其中胡椒堿的用量為0-12mg/kg/體重。
本發(fā)明的另一個實施方式涉及一種從枯茗(Cuminum cyminum)植物制備其水提取物，含水醇提取物和生物活性精餾產(chǎn)物的方法，所述方法包括如下步驟a)粉碎植物，將其用水或50％的醇水溶液在95-100℃進行萃取，分別得到水提取物或醇水提取物，b)將步驟(a)得到的一部分水提取物用正丁醇(n-BuOH)進行萃取，并分離正丁醇層和水層，c)將步驟(b)得到的正丁醇層進行蒸發(fā)和冷凍干燥處理得到精餾產(chǎn)物1，d)將步驟(b)得到的水層進行蒸發(fā)和冷凍干燥處理得到精餾產(chǎn)物2，e)將步驟(a)得到的另一部分水層用醇進行回流，匯聚醇提取物并分離剩余的物質(zhì)備用，f)將步驟(e)匯聚得到的醇提取物進行蒸發(fā)，得到精餾產(chǎn)物3，g)將步驟(e)的剩余物用50％的醇水溶劑進行提取，得到50％的醇水可溶部分，剩余物作為精餾產(chǎn)物5，h)將步驟(g)得到的醇水可溶部分進行蒸發(fā)，得到精餾產(chǎn)物4。
本發(fā)明的另一個實施方式提供了得到的來自植物枯茗(Cuminumcyminum)的提取物和生物活性精餾產(chǎn)物的HPLC色譜。
本發(fā)明的另一個實施方式中HPLC色譜是利用RP18柱，體積比為83∶17的水∶乙腈溶液，溶液中含有2％的醋酸；流速為1ml/min，使用紫外(UV)檢測器得到的。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的水提取物具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為2.16，2.44，4.40，6.56，8.27，14.34和15.24。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的50％醇水提取物具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為4.38，6.53，8.25，10.43，14.29和15.17。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的精餾產(chǎn)物1具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為2.52，3.59，6.25，11.01和14.46。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的精餾產(chǎn)物2具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為2.43，4.38和6.52。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的精餾產(chǎn)物3具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為3.11，7.75，10.37，13.80和17.95。本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminumcyminum)得到的精餾產(chǎn)物4具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為2.31，3.14，5.25，7.71，9.63，13.82和17.92。
本發(fā)明的另一個實施方式中從植物枯茗(Cuminum cyminum)得到的精餾產(chǎn)物5具有的HPLC色譜主吸收峰的保留時間為2.25，3.01，5.21和7.69。
實施例接下來的實施例是為了對本發(fā)明的部分優(yōu)選實施方式進行說明，但是這些說明并不對本發(fā)明的保護范圍進行任何限定。本領域普通技術人員可以對發(fā)明進行進一步的開發(fā)，這些內(nèi)容也包含在本發(fā)明保護范圍之內(nèi)。
實施例1利用IP 1726890中所描述的新方法制備無色的，沒有辛辣氣味的胡椒堿，并利用以下方法對其進行進一步的修飾將可以進行商購的胡椒或篳拔或它們的樹脂油作為原料；將20kg長胡椒樹脂油用例如CHCl3，CH2Cl2，C2H4Cl2等鹵代溶劑(25升)提取6小時或將20kg黑胡椒粉用甲苯進行索氏萃取8小時；將提取物進行減壓濃縮干燥并在78℃溶解于乙醇中；將乙醇溶液用裝在玻璃柱中的天然Al2O3進行吸收；利用CHCl3∶EtOH(9∶1)的混合溶劑進行洗脫，將洗脫液進行濃縮干燥并溶解于最小量的乙醇中；將溶液用活性炭進行處理，并通過硅藻土床進行過濾；將過濾產(chǎn)物進行濃縮到飽和點，冷卻，得到無色的晶體沉淀物；將沉淀物利用吸氣過濾和干燥進行分離。
實施例2有關優(yōu)選材料的說明如下胡椒堿顏色無色的，單斜(晶系)的棱狀結晶體；熔點129℃-130℃分析最少99.1％(液相色譜/質(zhì)譜(LC/MS))得自枯茗(Cuminum cyminum)的生物提高劑該申請說明書附圖提供了產(chǎn)品的制備和全指紋圖譜(HPLC)。
實施例3下面列出了典型實驗的劑量，模式/實驗設計和評價方法一個典型的實驗設計方案和不同生物提高劑的用量1.將來自枯茗(Cuminum cyminum)的水提取物，50％的醇提取物或精餾產(chǎn)物1-5作為生物提高劑(BEs)。
2.將具有本發(fā)明實施例2中所述特性的胡椒堿分子作為生物提高劑(BE)，該成分取自胡椒種類的植物。
3.在不抵抗枯茗(Cuminum cyminum)的提取物或其精餾產(chǎn)物劑量不同的情況下，由于所使用的精餾產(chǎn)物與其在提取物中的濃度是成比例的，所以與它們聯(lián)合的藥物生物利用度所致的提高作用是幾乎相同的。
4.甚至當將生物提高劑(BEs)相互聯(lián)合使用時，其使用劑量可以保持不變或減少50％的劑量。
實施例4劑量(i)得自枯茗(Cuminum cyminum)的生物提高劑(BE)提取物 16mg/kg體重(大鼠)精餾產(chǎn)物102-5mg/kg體重(大鼠)精餾產(chǎn)物213-mg/kg體重(大鼠)精餾產(chǎn)物38mg/kg體重(大鼠)精餾產(chǎn)物45mg/kg體重(大鼠)精餾產(chǎn)物52.5-5mg/kg體重(大鼠)(ii)胡椒堿8mg/kg體重(大鼠)大鼠(被禁食)實驗中的一個實施例藥物利福平，40mg/kg生物提高劑(枯茗(Cuminum cyminum))采用該實施例中上面所述的精餾產(chǎn)物5的劑量生物提高劑(枯茗(Cuminum cyminum))+胡椒堿采用該實施例中上面所述的精餾產(chǎn)物5的劑量試驗步驟按照下面的設計方案對大鼠進行單獨給藥或與BE聯(lián)合給藥第1組對照第2組單獨使用利福平第3組單獨使用生物提高劑第4組利福平+生物提高劑(枯茗(Cuminum cyminum))第5組利福平+生物提高劑(枯茗(Cuminum cyminum)+胡椒堿)按照預定的時間間隔(0-24小時)從對照/實驗動物身上取血(總共14次)。利用二氯甲烷作為提取劑從血(血漿)中提取利福平。樣品中的利福平濃度利用HPLC(型號Shimadizu1080 BP)進行檢測；PDA檢測器；流動相磷酸鹽緩沖液∶丙酮(40∶60)；流速1.0ml/min；RP18柱。
進行對照組和單獨使用生物提高劑組的實驗從而研究血漿成分和所用的生物提高劑成分的干擾情況。
實施例5上述方法也可以用于評價其它藥物，微量營養(yǎng)物，營養(yǎng)藥物，營養(yǎng)物和其它草藥產(chǎn)品的提高活性，其提高效果見下列各表。下面列舉的標題分別為藥物，營養(yǎng)藥物，草藥制劑的表格僅僅是本發(fā)明發(fā)明目的的一部分實施例A.藥物
A.藥物種類I.抗生素(a)氟代喹諾酮
(b)大環(huán)內(nèi)酯類
(c)頭孢菌素
(d)青霉素
(e)
(f)氨基糖苷
II.抗真菌藥
III.抗病毒藥
IV.中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物
V.抗癌藥
VI.心血管藥
VII.消炎藥/治風濕藥
VIII.抗結核(TB)藥/抗麻風藥
IX.抗組胺劑/呼吸道疾病藥物
X.皮質(zhì)甾類
XI.免疫抑制劑
XII.治潰瘍藥
B.營養(yǎng)藥物種類
*劑量相當于基本濃度，利用原子吸收光譜測定得到的
C.中藥組合物(原文中缺少標號C.)
枯茗(Cuminum cyminum)植物提取物的制備流程圖 枯茗(Cuminum cyminum)植物水提取物的精餾產(chǎn)物流程圖具有生物活性的水提取物的精餾產(chǎn)物是利用正丁醇和水按照典型實施例的方案進行分離得到的(流程圖1)，并對另一部分用95％的乙醇和50％的醇水溶液提取物進行研制(流程圖2)。
流程圖1 剩余物 13.0grams 剩余物 82.0gm基于提取物％13.68 基于提取物％86.31基于植物％ 2.3基于植物％ 14.6(精餾產(chǎn)物1) (精餾產(chǎn)物2)利用50％醇水溶液得到的植物原料的原始提取物也可以利用上述的相同流程進行精餾。
流程圖2 利用50％醇水溶液得到的植物原料的原始提取物也可以利用上述相同的流程進行精餾。
權利要求
1.一種生物提高劑/生物利用度促進劑的組合物，其組分包括i.有效量的來自枯茗的提取物和/或至少一種生物活性精餾產(chǎn)物；ii.一種或多種添加劑，其選自藥物、營養(yǎng)物、維生素、營養(yǎng)藥物、草藥/產(chǎn)品、微量營養(yǎng)物、抗氧化劑和藥學可接受的添加劑/賦形劑，和iii.任選地，有效量的胡椒堿或胡椒或篳拔的提取物/精餾產(chǎn)物。
2.權利要求1所述的組合物，其中所用的枯茗提取物的用量為約1.0mg到250mg范圍。
3.權利要求2所述的組合物，其中所用的枯茗提取物的用量為2.0mg到100mg之間。
4.權利要求1所述的組合物，其中在不考慮藥物、營養(yǎng)物、維生素、營養(yǎng)藥物、草藥/產(chǎn)品、微量營養(yǎng)物和抗氧化劑等添加劑用量的情況下，來自枯茗的精餾產(chǎn)物的用量為約0.5mg到75.0mg范圍。
5.權利要求1所述的組合物，其中來自枯茗的精餾產(chǎn)物的用量為約1.0mg到30mg范圍。
6.權利要求1所述的組合物，其中來自枯茗的精餾產(chǎn)物選自精餾產(chǎn)物1-5。
7.權利要求1所述的組合物，其中胡椒堿的用量為約2mg到50mg范圍，更具體為5mg到20mg之間。
8.權利要求1所述的組合物，其中胡椒堿分離自胡椒、篳拔或他們的樹脂油。
9.權利要求1所述的組合物，其中藥物選自以下這組藥物抗生素、抗真菌藥、抗病毒藥、抗癌藥、心血管藥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物、消炎藥/治風濕藥、抗結核藥/抗麻風藥、抗組胺劑/呼吸道疾病藥物、皮質(zhì)甾類、免疫抑制劑、治潰瘍藥和草藥。
10.權利要求9所述的組合物，其中抗生素選自喹諾酮、大環(huán)內(nèi)酯物、頭孢菌素、青霉素和氨基糖苷這組物質(zhì)。
11.權利要求10所述的組合物，其中喹諾酮選自環(huán)丙沙星、培氟沙星、氧氟沙星和諾氟沙星這組物質(zhì)。
12.權利要求10所述的組合物，其中大環(huán)內(nèi)酯物選自紅霉素、羅紅霉素和阿奇霉素這組物質(zhì)。
13.權利要求10所述的組合物，其中頭孢霉素選自頭孢氨芐、頭孢曲松、頭孢克肟、頭孢匹羅、頭孢地尼和頭孢羥氨芐這組物質(zhì)。
14.權利要求10所述的組合物，其中青霉素選自阿莫西林和氯唑西林這組物質(zhì)。
15.權利要求10所述的組合物，其中氨基糖苷選自阿米卡星和卡那霉素這組物質(zhì)。
16.權利要求9所述的組合物，其中抗真菌藥選自氟康唑、兩性霉素B、灰黃霉素和酮康唑這組物質(zhì)。
17.權利要求9所述的組合物，其中抗病毒藥選擇阿昔洛韋和疊氮胸苷這組物質(zhì)。
18.權利要求9所述的組合物，其中抗癌藥物選自甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿霉素、紫杉醇和順鉑這組物質(zhì)。
19.權利要求9所述的組合物，其中心血管藥物選自氨氯地平、賴諾普利、普萘洛爾和阿替洛爾這組物質(zhì)。
20.權利要求9所述的組合物，其中中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物選自阿譜唑侖和氟哌啶醇這組物質(zhì)。
21.權利要求9所述的組合物，其中消炎藥/治風濕藥選自雙氯芬酸鈉、吡羅昔康、尼美舒利和羅非克西這組物質(zhì)。
22.權利要求9所述的組合物，其中抗結核藥/抗麻風藥選自利福平、乙硫異煙胺、異煙肼、環(huán)絲氨酸、吡嗪酰胺、乙胺丁醇和氨苯砜這組物質(zhì)。
23.權利要求9所述的組合物，其中抗組胺劑/呼吸道疾病藥物選自沙丁胺醇、茶堿、溴己新和氯雷替定這組物質(zhì)。
24.權利要求9所述的組合物，其中皮質(zhì)甾類選自強的松龍、地塞米松和倍他米松這組物質(zhì)。
25.權利要求9所述的組合物，其中免疫抑制劑選自環(huán)孢霉素A、他克莫司和霉酚酸酯這組物質(zhì)。
26.權利要求9所述的組合物，其中治潰瘍藥化合物選自雷尼替丁、西咪替丁和奧美拉唑這組物質(zhì)。
27.權利要求1所述的組合物，其中草藥產(chǎn)品和草藥材選自海膽、雪蘭莪草、胡雪蓮、木橘、穿心蓮、白花酸藤果、總序天冬、絨毛訶子、催眠睡茄、積雪草和/或他們的混合物。
28.權利要求1所述的組合物，其中營養(yǎng)物選自糖、碳水化合物、脂肪和蛋白這組物質(zhì)。
29.權利要求1所述的組合物，其中維生素選自維生素A、維生素E、維生素B1、維生素B6、維生素B12、維生素C和葉酸。
30.權利要求1所述的組合物，其中抗氧化劑選自β-胡蘿卜素、水飛薊素、硒、番茄紅素和Ellagiogallotannins。
31.權利要求1所述的組合物，其中天然草藥產(chǎn)品選自姜黃素、乳香酸和蕓香苷這組物質(zhì)。
32.權利要求1所述的組合物，其中必需微量營養(yǎng)物選自蛋氨酸、賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、鋅、鈣、葡萄糖、鉀、銅和鐵。
33.權利要求1所述的組合物，其中枯茗植物提取物或枯茗植物提取物的生物活性精餾產(chǎn)物提取自枯茗植物的任意部位。
34.權利要求1所述的組合物，其中以上所提到的組合物是通過口服、注射、鼻腔、吸入包括霧化、直腸、陰道、透皮作用和其他任意適合途徑實現(xiàn)的。
35.權利要求1所述的組合物，其中將來自枯茗的植物提取物或生物活性精餾產(chǎn)物單獨使用或與胡椒堿聯(lián)合使用的生物提高作用在提高藥物、營養(yǎng)藥物、和草藥/制劑的生物利用度/生物功效方面具有選擇性。
36.權利要求1所述的組合物，其中單獨含枯茗植物提取物或生物活性精餾產(chǎn)物的組合物提供生物利用度/生物提高活性為25-335％。
37.權利要求1所述的組合物，其中含枯茗的成分和胡椒堿的該組合物顯示生物提高/生物利用度活性從接近顯著的即約25％到非常顯著的即約435％。
38.權利要求1所述的組合物，其中所述含胡椒堿和枯茗的組合物對生物利用度/生物提高活性比單獨使用枯茗的生物提高活性高10％到85％。
39.權利要求1所述的組合物，其中枯茗的提取物的用量為10-75mg/kg/體重。
40.權利要求1所述的組合物，其中枯茗的生物活性精餾產(chǎn)物的用量為2-30mg/kg/體重。
41.權利要求1所述的組合物，其中胡椒堿的用量為0-12mg/kg/體重。
42.一種從枯茗植物制備其水提取物、含水醇提取物和生物活性精餾產(chǎn)物的方法，所述方法包括如下步驟a)粉碎植物，將其用水或50％的醇水溶液在95-100℃進行萃取，分別得到水提取物或醇水提取物，b)將步驟(a)得到的一部分水提取物用正丁醇(n-BuOH)進行萃取，并分離正丁醇層和水層，c)將步驟(b)得到的正丁醇層進行蒸發(fā)和冷凍干燥處理得到精餾產(chǎn)物1，d)將步驟(b)得到的水層進行蒸發(fā)和冷凍干燥處理得到精餾產(chǎn)物2，e)將步驟(a)得到的另一部分水層用醇進行回流，匯聚醇提取物并分離剩余的物質(zhì)備用，f)將步驟(e)匯聚得到的醇提取物進行蒸發(fā)，得到精餾產(chǎn)物3，g)將步驟(e)的剩余物用50％的醇水溶劑進行提取，得到50％的醇水可溶部分，剩余物作為精餾產(chǎn)物5，和h)將步驟(g)得到的醇水可溶部分進行蒸發(fā)，得到精餾產(chǎn)物4。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物提高劑/生物有效度促進劑的組合物，其包括有效量的來自枯茗(Cuminum cyminum)的提取物和/或至少一種生物活性精餾產(chǎn)物；一種或多種添加劑，其選自藥物、營養(yǎng)物、維生素、營養(yǎng)藥物、草藥/草藥產(chǎn)品、微量營養(yǎng)物、抗氧化劑和藥理學可接受的添加劑/賦形劑、和任選地，有效量的胡椒堿或有效量的胡椒或篳拔的提取物/精餾產(chǎn)物；本發(fā)明還涉及一種從枯茗植物制備這類水提取物、醇提取物和生物活性精餾產(chǎn)物的方法。
文檔編號A61P31/04GK1649513SQ03809661
公開日2005年8月3日 申請日期2003年3月10日 優(yōu)先權日2002年3月12日
發(fā)明者G·N·卡基, K·L·貝迪, R·K·約里, M·K·提庫奧, Ak·提庫奧, S·C·沙爾瑪, S·T·阿卜杜拉, O·P·蘇里, B·D·古普塔, K·A·蘇里, N·K·薩蒂, R·K·卡珠里亞, S·辛格, A·卡珠里亞, B·K·卡帕伊 申請人:科學與工業(yè)研究會