專利名稱：(+)－2－[1－(3－乙氧基－4－甲氧基苯基)－2－甲磺酰基乙基]－4－乙酰氨基異吲哚 ...的制作方法
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體的使用方法和包含該化合物的組合物。
2.發(fā)明背景腫瘤壞死因子-α(TNF-α)是一種主要由單核噬菌細(xì)胞應(yīng)答免疫刺激物時(shí)釋放的細(xì)胞因子。TNF-α能夠促進(jìn)例如分化、募集、增殖和蛋白質(zhì)降解等大多數(shù)細(xì)胞過程。在低水平下，TNF-α具有防止傳染物、腫瘤和組織損傷的保護(hù)作用。但TNF-α還在許多疾病中起作用。當(dāng)給予哺乳動(dòng)物或人TNF-α?xí)r，TNF-α?xí)鸹蚣又匮装Y、發(fā)燒、心血管作用、出血、凝固以及與急性感染和休克期出現(xiàn)的那些反應(yīng)相類似的急性期反應(yīng)。在許多疾病和病癥都涉及到提高的或無調(diào)節(jié)的TNF-α生成，例如癌，如實(shí)體瘤和血液性腫瘤；心臟病，如充血性心力衰竭；以及病毒感染、遺傳疾病、炎性疾病、變應(yīng)性疾病和自身免疫疾病。
環(huán)腺苷酸(cAMP)也在許多疾病和病癥中起作用，例如但不限于哮喘、炎癥以及其它病癥(Lowe和Cheng，Drugs of the Future，17(9)期799-807頁，1992年)。已表明，炎性白細(xì)胞中cAMP水平的提高抑制了它們的活化以及隨后包括TNF-α和NF-κB的炎癥介質(zhì)的釋放。cAMP水平提高也會(huì)導(dǎo)致呼吸道平滑肌的松弛。
認(rèn)為cAMP失活的主要細(xì)胞機(jī)制是由于被稱為環(huán)核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的一族同功酶破壞了cAMP(Beavo和Reitsnyder，Trends inPharm.，11期150-155頁，1990年)。已知有11個(gè)PDE家族成員?，F(xiàn)已證實(shí)，例如抑制PDEⅣ型對(duì)抑制炎癥介質(zhì)的釋放和呼吸道平滑肌松弛都特別有效(Verghese等，Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics，272(3)期1313-1320頁，1995年)。因此，特異性抑制PDE4(PDE IV)的化合物，可抑制炎癥，促進(jìn)呼吸道平滑肌松弛，而且具有很少的不需要的例如心血管或抗血小板作用等副作用。在可接受的治療劑量下，目前使用的PDE4抑制劑缺乏選擇性。
癌是一種特別具有破壞性的疾病，并且血液中TNF-α水平的提高，預(yù)示存在患有癌癥以及癌癥擴(kuò)散的危險(xiǎn)。通常，癌細(xì)胞不能在健康主體的循環(huán)系統(tǒng)中存活，其中一個(gè)原因在于血管內(nèi)壁充當(dāng)了瘤細(xì)胞外滲的屏障。但是體外實(shí)驗(yàn)已表明，細(xì)胞因子水平提高可充分地促進(jìn)癌細(xì)胞粘附在內(nèi)皮上。一種解釋是，例如TNF-α等細(xì)胞因子刺激被稱為ELAM-1的細(xì)胞表面受體(內(nèi)皮細(xì)胞-白細(xì)胞粘著分子)的生物合成和表達(dá)。ELAM-1是被稱為L(zhǎng)EC-CAMs(包括LECAM-1和GMP-140)的鈣-依賴性細(xì)胞粘著受體家族中的一員。在炎癥反應(yīng)過程中，內(nèi)皮細(xì)胞上的ELAM-1起白細(xì)胞“歸巢受體”的作用。近來研究表明，內(nèi)皮細(xì)胞上的ELAM-1能介導(dǎo)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞粘附在用細(xì)胞因子處理的內(nèi)皮上(Rice.等，1989年，Science，246期1303-1306頁)。
例如關(guān)節(jié)炎、相關(guān)的關(guān)節(jié)炎病癥(例如骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、腸炎(例如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎)、膿毒病、銀屑病、特異性皮炎、接觸性皮炎和慢性阻塞性肺病、慢性肺炎等炎性疾病也是普遍的疑難疾病。在炎癥反應(yīng)中，TNF-α起關(guān)鍵作用，將它們的拮抗劑給予炎性疾病動(dòng)物模型，可阻斷慢性和急性反應(yīng)。
病毒感染、遺傳性疾病、炎性疾病、變應(yīng)性疾病以及自身免疫疾病都涉及到提高或無調(diào)節(jié)的TNF-α生成。這些疾病實(shí)例包括但不限于HIV(人體免疫缺陷病毒)；肝炎；成人呼吸窘迫綜合征；骨吸收病；慢性阻塞性肺??；慢性肺炎；哮喘，皮炎；囊樣纖維化；敗血癥性休克；膿毒病；內(nèi)毒素性休克；血液動(dòng)力性休克；膿毒病綜合征；局部缺血后再灌注損傷；腦膜炎；銀屑病；纖維變性疾?。粣翰≠|(zhì)；移植排斥；自身免疫疾??；類風(fēng)濕性脊椎炎；關(guān)節(jié)炎病癥，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎；骨質(zhì)疏松癥；節(jié)段性回腸炎；潰瘍性結(jié)腸炎；腸炎；多發(fā)性硬化；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；麻風(fēng)病的ENL；輻射損傷；哮喘；含氧量高的肺泡損傷。Tracey等，1987年，Nature，330期662-664頁和Hinshaw等，1990年，Circ.Shock，.30期279-292頁(內(nèi)毒素性休克)；Dezube等，1990年，Lancet，335期662頁(惡病質(zhì))；Millar等，1989年，Lancet，2期712-714頁和Ferrai-Baliviera等，1989年，Arch.Surg.，124期1400-1405頁(成人呼吸窘迫綜合征)；Bertolini等，1986年，Nature，319期516-518頁，Johnson等，1989年，Endocrinology 124期1424-1427頁，Holler等，1990年，Blood，75期1011-1016頁，和Grau等，1989年，N.Engl.J.Med.，320期1586-1591頁(骨吸收病)；Pignet等，1990年，Nature，344期245-247頁，Bissonnette等，1989年，Inflammation，13期329-339頁和Baughman等，1990年，J.Lab.Clin.Med.，115期36-42頁(慢性肺炎)；EHiot等，1995年，Int.J.Pharmac.，17期141-145頁(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)；von Dullemen等，1995年，Gastroenterology，109期129-135頁(節(jié)段性回腸炎)；Duh等，1989年，Proc.Nat.Acad.Sci.，86期5974-5978頁，Poll等，1990年，Proc.Nat.Acad.Sci.，87期782-785頁，Monto等，1990年，Blood，79期2670頁，Clouse等，1989年，J.Immunol，142期431-438頁，Poll等，1992年，AIDSRes.Hum.Retrovirus，191-197頁，Poli等，1990年，Proc.Natl.Acad.Sci.，87期782-784頁，F(xiàn)olks等，1989年，PNAS，86期2365-2368頁(HIV和HIV引起的機(jī)會(huì)感染)。
可阻斷包括TNF-α的某些細(xì)胞因子的活性或抑制其生成的藥物，將是有用的治療劑。已經(jīng)證明，許多小分子抑制劑能夠治療或預(yù)防涉及TNF-α的炎性疾病(參見Lowe的綜述，1998年，Exp.Opin.Ther.Patents，8期1309-1332頁)。這一類分子是美國(guó)專利6,020,358號(hào)描述的取代的苯乙基砜類化合物。
3.發(fā)明概述本發(fā)明涉及使用取代的苯乙基砜化合物的對(duì)映異構(gòu)體及其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、溶劑合物、籠形包合物、前藥和多晶型物治療疾病和病癥的方法，以及降低哺乳動(dòng)物的細(xì)胞因子及其前體水平的方法。本發(fā)明也涉及包含2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的一種對(duì)映異構(gòu)體和藥學(xué)可接受的載體的藥用組合物。本發(fā)明還涉及基本上不含其它對(duì)映異構(gòu)體的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的一種對(duì)映異構(gòu)體。
本發(fā)明特別涉及2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體。與其消旋體2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮相比，認(rèn)為該化合物具有提高的效能和其它優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體在治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物的可通過抑制TNF-α的生成而改善的疾病或病癥中的用途。在某個(gè)實(shí)施方案中，所述治療包括降低或消除副作用。這些病癥包括但不限于癌，包括但不限于頭部癌、甲狀腺癌、頸癌、眼癌、皮膚癌、口腔癌、咽喉癌、食道癌、胸癌、骨癌、血癌、骨髓癌、肺癌、結(jié)腸癌、乙狀結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌、前列腺癌、乳癌、卵巢癌、腎癌、肝癌、胰腺癌、腦癌、腸癌、心臟癌、腎上腺癌、皮下組織癌、淋巴結(jié)癌、心臟癌，及其組合?？捎盟龇椒ㄖ委煹木唧w癌有多發(fā)性骨髓瘤、惡性黑素瘤、惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤、白血病和實(shí)體瘤。
本發(fā)明也包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體治療或預(yù)防以下心臟病的用途，所述心臟病包括但不限于充血性心力衰竭、心肌病、肺水腫、內(nèi)毒素介導(dǎo)的膿毒性休克、急性病毒性心肌炎、心臟移值排斥和心肌梗塞。
本發(fā)明也包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體在治療可通過抑制PDE4而改善的疾病或病癥中的用途。例如，本發(fā)明的化合物和組合物可用于治療或預(yù)防病毒感染、遺傳疾病、炎性疾病、變應(yīng)性疾病和自身免疫疾病。這些疾病實(shí)例包括但不限于HIV；肝炎；成人呼吸窘迫綜合征；骨吸收??；慢性阻塞性肺?。宦苑窝?；皮炎；炎性皮膚病，特異性皮炎，囊性纖維變性；敗血癥性休克；膿毒癥；內(nèi)毒素性休克；血液動(dòng)力性休克；膿毒病綜合征；局部缺血后的再灌注損傷；腦膜炎；銀屑病；纖維變性疾?。粣翰≠|(zhì)；包括移植物抗宿主疾病的移值排斥；自身免疫??；類風(fēng)濕性脊椎炎；關(guān)節(jié)炎病癥，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎；骨質(zhì)疏松癥；節(jié)段性回腸炎；潰瘍性結(jié)腸炎；腸炎；多發(fā)性硬化??；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；麻風(fēng)病中的麻風(fēng)性結(jié)節(jié)性紅斑(ENL)；輻射損傷；哮喘和含氧量高的肺泡損傷。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的立體異構(gòu)體純(+)對(duì)映異構(gòu)體也可用于治療或預(yù)防微生物感染或微生物感染綜合征(包括但不限于細(xì)菌感染、真菌感染、瘧疾、分支桿菌感染和HIV引起的機(jī)會(huì)感染)。
本發(fā)明還包括包含2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的一種對(duì)映異構(gòu)體及其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、水合物、籠形包合物和溶劑合物的藥用組合物和單位劑型。
在一單獨(dú)的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體。
在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種制備2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的立體異構(gòu)體純對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述方法包括以下步驟將1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺?；?乙胺與手性氨基酸反應(yīng)，然后將第一步的反應(yīng)產(chǎn)物與N-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異苯并呋喃-4-基)-乙酰胺反應(yīng)。在一個(gè)相關(guān)的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙胺的手性鹽。
3.1.附圖簡(jiǎn)述

圖1.舉例說明2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體的制備。
圖2.舉例說明本發(fā)明的對(duì)映異構(gòu)體對(duì)在有知覺的白鼬的肺上LPS-誘導(dǎo)的中性白細(xì)胞增多癥的效果。
3.2.定義本文使用的術(shù)語“化合物A”是指當(dāng)使用色譜柱為150mm×4.6mm Ultron Chira1 ES-OVS手性HPLC柱(Agilent Technology)，洗脫液為15∶85的乙醇∶20mM KH2PO4(pH為3.5)，觀測(cè)波長(zhǎng)為240nm時(shí)，HPLC柱在約25.4分鐘洗脫出的立體異構(gòu)體純的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮。化合物A的1HNMR波譜數(shù)據(jù)基本如下δ(CDCl3)1.47(t，3H)，2.26(s，3H)，2.87(s，3H)，3.68-3.75(dd，1H)，3.85(s，3H)，4.07-4.15(q，2H)，4.51-4.61(dd，1H)，5.84-5.90(dd，1H)，6.82-8.77(m，6H)，9.46(s，1H).
化合物A的13C NMR波譜數(shù)據(jù)基本如下δ(DMSO-d6)14.66，24.92，41.61，48.53，54.46，55.91，64.51，111.44，112.40，115.10，118.20，120.28，124.94，129.22，131.02，136.09，137.60，148.62，149.74，167.46，169.14，169.48.
溶于甲醇的化合物A也使平面偏振光向(+)方向偏轉(zhuǎn)。
不受理論限制，認(rèn)為化合物A為S-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮}，其結(jié)構(gòu)如下
本文使用的術(shù)語“患者”，是指哺乳動(dòng)物，特別是指人。
本文使用的術(shù)語“藥學(xué)可接受的鹽”，是指由藥學(xué)可接受的無毒的酸或堿(包括無機(jī)酸和堿以及有機(jī)酸和堿)制備的鹽。適合的本發(fā)明的化合物的藥學(xué)可接受的堿加成鹽包括由鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅制備的金屬鹽或由以下有機(jī)堿制備的有機(jī)鹽賴氨酸、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡萄糖胺)和普魯卡因。合適的無毒酸包括但不限于以下無機(jī)酸和有機(jī)酸例如乙酸、藻酸、鄰氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙烯磺酸、甲酸、富馬酸、糠酸、半乳糖醛酸、葡糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、撲酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、丙酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、對(duì)氨基苯磺酸、硫酸、酒石酸和對(duì)甲苯磺酸。特別是鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和甲磺酸等無毒酸。因此，特別的鹽的實(shí)例有鹽酸鹽和甲磺酸鹽。
除非另外說明，否則本文使用的術(shù)語“前藥”意指通過水解、氧化或生物環(huán)境(體內(nèi)或體外)下的其它反應(yīng)，能夠提供該化合物的化合物衍生物。前藥的實(shí)例包括但不限于化合物A的衍生物和代謝物，該物質(zhì)包括可生物水解部分，例如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯類似物。前藥一般可通過例如1 Burger′sMedicinal Chemistry and Drug Discovery(Manfred E.Wolff編輯，第5版，1995年)第172-178頁、949-982頁中描述的那些熟知方法制備。
除非另外說明，否則本文使用的術(shù)語“可生物水解的酰胺”、“可生物水解的酯”、“可生物水解的氨基甲酸酯”、“可生物水解的碳酸酯”、“可生物水解的酰脲”、“可生物水解的磷酸酯”各指某一化合物的酰胺、酯、氨基甲酸酯、碳酸酯、酰脲或磷酸酯，這些可生物水解部分1)不影響所述化合物的生物活性，但可賦予化合物有利的體內(nèi)特性，例如吸收、持續(xù)作用或發(fā)揮作用；或2)沒有生物活性，但在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為生物活性?？缮锼獾孽サ膶?shí)例包括但不限于，低級(jí)烷基酯、烷氧基酸酯、烷基酰氨基烷基酯和膽堿酯。可生物水解的酰胺的實(shí)例包括但不限于，低級(jí)烷基酰胺、α-氨基酸酰胺、烷氧基酰胺和烷氨基烷羰基酰胺?？缮锼獾陌被姿狨サ膶?shí)例包括但不限于低級(jí)烷基胺、取代的乙二胺、氨基酸、羥基烷基胺、雜環(huán)胺和雜芳胺以及聚醚胺。
除非另外說明，否則本文使用的術(shù)語“立體異構(gòu)體純”意指包含化合物的一種立體異構(gòu)體并且基本上不含該化合物的其它立體異構(gòu)體的組合物。例如，具有一個(gè)手性中心的化合物的立體異構(gòu)體純的組合物基本上不含所述化合物的相反對(duì)映異構(gòu)體。具有兩個(gè)手性中心的化合物的立體異構(gòu)體純的組合物基本上不含所述化合物的其它非對(duì)映異構(gòu)體。立體異構(gòu)體純的化合物一般包含約大于80％重量的所述化合物的一種立體異構(gòu)體和約少于20％重量的所述化合物的其它立體異構(gòu)體，更優(yōu)選約大于90％重量的所述化合物的一種立體異構(gòu)體和約少于10％重量的所述化合物的其它立體異構(gòu)體，甚至更優(yōu)選約大于95％重量的所述化合物的一種立體異構(gòu)體和約少于5％重量的所述化合物的其它立體異構(gòu)體，最優(yōu)選約大于97％重量的所述化合物的一種立體異構(gòu)體和約少于3％重量的所述化合物的其它立體異構(gòu)體。
除非另外說明，否則本文使用的術(shù)語“對(duì)映異構(gòu)體純”意指具有一個(gè)手性中心的化合物的立體異構(gòu)體純組合物。
本文使用的術(shù)語“副作用”包括但不限于胃腸、腎和肝毒性，白血球減少，由于例如血小板減少導(dǎo)致的出血時(shí)間延長(zhǎng)，妊娠延長(zhǎng)，惡心，嘔吐，嗜睡，無力，頭暈，致畸，錐體束外癥狀，靜坐不能，包括心血管功能失調(diào)的心臟毒性，炎癥，男性性功能障礙和血清肝酶水平的提高。術(shù)語“胃腸毒性”包括但不限于胃腸潰瘍和糜爛。術(shù)語“腎毒性”包括但不限于例如乳頭狀壞死和慢性間質(zhì)性腎炎的病癥。
除非另外說明，否則本文使用的術(shù)語“減少或消除副反應(yīng)”意指降低一種或多種本文中定義的副反應(yīng)的嚴(yán)重性。
應(yīng)該注意，如果描述的結(jié)構(gòu)和給出該結(jié)構(gòu)的名稱之間存在偏差，描述的結(jié)構(gòu)具有更大的權(quán)重。另外，如果沒有用例如粗線或虛線說明結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)部分的立體化學(xué)特性，所述結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)部分被解釋為包括其所有的立體異構(gòu)體。
4.發(fā)明詳述本發(fā)明涉及立體異構(gòu)體純的化合物A，化合物A為2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的一種對(duì)映異構(gòu)體，基本上不含其它的異構(gòu)體，本發(fā)明還涉及立體異構(gòu)體純的化合物A的新使用方法和包含立體異構(gòu)體純的化合物A的組合物。例如，本發(fā)明包括化合物A在體內(nèi)和體外的用途以及將化合物A加至用于治療和預(yù)防多種疾病和病癥的藥用組合物和單位劑型中。通過降低TNF-α的水平或抑制PDE4而得以改善的疾病和病癥，為本領(lǐng)域所熟知，并在本文中進(jìn)行了描述。本發(fā)明的具體方法降低或消除與作為TNF-α抑制劑使用的化合物有關(guān)的副反應(yīng)。本發(fā)明的其它具體方法降低或消除與外消旋的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的使用有關(guān)的副反應(yīng)。
本發(fā)明的具體方法包括治療或預(yù)防包括但不限于實(shí)體瘤癌、血液衍生的癌及炎性疾病等疾病和病癥的方法。
本發(fā)明的包含化合物A或其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、籠形包合物、溶劑合物或水合物的藥物和劑型可用于本發(fā)明的方法中。
不受理論限制，相信化合物A可抑制TNF-α生成。因此，本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案涉及一種抑制NF-α生成的方法，所述方法包括以下步驟將有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物與表現(xiàn)出TNF-α生成反常的細(xì)胞接觸。在一個(gè)特別的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抑制TNF-α生成的方法，所述方法包括以下步驟將有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物與表現(xiàn)出TNF-α生成反常的哺乳動(dòng)物細(xì)胞接觸。
本發(fā)明也涉及一種治療或預(yù)防患者的可通過降低TNF-α水平而改善的病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種治療或預(yù)防患者的癌(包括但不限于實(shí)體瘤、血液性腫瘤、白血病，特別是多發(fā)性骨髓瘤)的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物；特別是其中所述患者為哺乳動(dòng)物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種抑制PDE4的方法，所述方法包括以下步驟將有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物與PDE4接觸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種控制細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的方法，所述方法包括以下步驟將有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物與細(xì)胞接觸。本文使用的術(shù)語“控制cAMP水平”包括防止或降低細(xì)胞內(nèi)的環(huán)腺苷酸(cAMP)破壞率或提高細(xì)胞內(nèi)的環(huán)腺苷酸水平，其中所述細(xì)胞優(yōu)選為哺乳動(dòng)物細(xì)胞，更優(yōu)選人細(xì)胞。在一種特別的方法中，同沒有與本發(fā)明的化合物接觸的對(duì)照細(xì)胞的破壞率相比，cAMP破壞率降低約10、25、50、100、200或500％。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種治療或預(yù)防患者的可通過抑制PDE4而改善的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。通過抑制PDE4而改善的病癥包括但不限于哮喘、炎癥(例如由于再灌注導(dǎo)致的炎癥)、慢性或急性阻塞性肺病、慢性或急性肺炎、腸炎、節(jié)段性回腸炎、白塞病(Bechet′s)或結(jié)腸炎。
本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案涉及一種治療或預(yù)防患者的以下疾病或病癥的方法抑郁癥、哮喘、炎癥(例如接觸性皮炎、特異性皮炎、銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、炎性皮膚病、由于再灌注導(dǎo)致的炎癥)、慢性或急性阻塞性肺病、慢性或急性肺炎、腸炎、節(jié)段性回腸炎、白塞病或結(jié)腸炎，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物；特別是其中所述患者為哺乳動(dòng)物。
本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)的實(shí)施方案包括治療或預(yù)防骨髓增生異常綜合征(MDS)的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、籠形包合物或前藥。MDS意指不同種類的造血干細(xì)胞病癥。MDS的特征在于由于無效的血細(xì)胞生成，導(dǎo)致形態(tài)和成熟缺陷(骨髓細(xì)胞生成障礙)的細(xì)胞骨髓、外周血液中血細(xì)胞減少和不確定的轉(zhuǎn)化為急性白血病的危險(xiǎn)。參見The Merck Manual，953頁(17版，1999年)和List等，1990年，J.Clin.Oncol.，8期1424頁，MDS。
本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)的實(shí)施方案包括治療或預(yù)防骨髓增殖性疾病(MPD)的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、籠形包合物或前藥。骨髓增殖性疾病(MPD)是指以造血干細(xì)胞系異常為特征的一類病癥。參見，例如CurrentMedical Diagnosis&Treatment，499頁(37版，Tierney等編著，Appleton&Lange，1998年)。
本發(fā)明也包括一種治療、預(yù)防或處理復(fù)合性區(qū)域性疼痛綜合征的方法，所述方法包括給予需要這些治療、預(yù)防或處理的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、籠形包合物或前藥。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，在可直接降低或消除患者的復(fù)合性區(qū)域性疼痛綜合征的癥狀的手術(shù)或理療前、期間或后給藥。
在本發(fā)明的特別方法中，立體異構(gòu)體純的化合物A或其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物與至少一種其它治療劑聯(lián)合給藥。其它治療劑實(shí)例包括但不限于抗癌藥、抗炎藥、抗組胺藥和解充血藥。
4.1.合成和制備采用美國(guó)專利第6,020,358號(hào)描述的方法，可容易地制備外消旋的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，該專利通過引用而結(jié)合至本文中。
通過本領(lǐng)域已有技術(shù)，可自其外消旋化合物中分離出化合物A。實(shí)例包括但不限于手性鹽的形成、手性以及高效液相色譜“HPLC”的使用和手性鹽的形成和結(jié)晶。參見，例如Jacques，J.等，Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley-Interscience，紐約，1981年)；Wilen，S.H.等，Tetrahedron，33期2725頁(1977年)；Eliel，E.L，Stereochemistryof Carbon Compounds(McGraw-Hill，紐約，1962年)，和Wilen，S.H.，Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions，268頁(E.L.Eliel編著，Notre Dame大學(xué)出版社，Notre Dame，IN，1972年)。
在一個(gè)具體的方法中，化合物A可由3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐和(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺酰基)-乙-2-基胺合成。(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺酰基)-乙-2-基胺的手性氨基酸鹽包括但不限于與以下氨基酸的L異構(gòu)體成的鹽丙氨酸，精氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，半胱氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，甘氨酸，組氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、鳥氨酸、4-氨基丁酸、2-氨基異丁酸、3-氨基丙酸、鳥氨酸、正亮氨酸、正纈氨酸、羥基脯氨酸，肌氨酸，瓜氨酸，磺基丙氨酸，叔丁基甘氨酸、叔丁基丙氨酸，苯基甘氨酸，環(huán)己基丙氨酸和N-乙?；?亮氨酸。一種具體的手性氨基酸鹽為(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺-N-乙?；?L-亮氨酸鹽，其在甲醇中分解為2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺和N-乙?；?L-亮氨酸。
4.2.治療方法本發(fā)明包括治療和預(yù)防患者的可通過降低TNF-α水平而改善的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
通過抑制TNF-α而改善的病癥包括但不限于心臟病，例如充血性心力衰竭，心肌病，肺水腫，內(nèi)毒素-調(diào)節(jié)的敗血癥性休克，急性病毒性心肌炎，心臟移植排斥，和心肌梗塞；實(shí)體瘤，包括但不限于肉瘤，癌，纖維肉瘤，粘液肉瘤，脂肪瘤，軟骨肉瘤，骨原性肉瘤，脊索瘤，血管肉瘤，內(nèi)皮肉瘤，淋巴管肉瘤，淋巴管內(nèi)皮肉瘤，滑膜瘤，間皮瘤，尤因瘤，平滑肌肉瘤，橫紋肌肉瘤，結(jié)腸癌，胰腺癌，乳癌，卵巢癌，前列腺癌，鱗狀上皮細(xì)胞癌，基底細(xì)胞癌，腺癌，汗腺癌，皮脂腺癌，乳頭狀癌，乳頭狀腺癌，囊腺癌，髓樣癌，支氣管癌，腎細(xì)胞癌，肝細(xì)胞瘤，膽管癌，絨毛膜癌，精原細(xì)胞瘤，胚胎性癌，維爾姆斯瘤，宮頸癌，睪丸瘤，肺癌，小細(xì)胞肺癌，膀胱癌，上皮癌，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，星形細(xì)胞瘤，成神經(jīng)管細(xì)胞瘤，顱咽管瘤，室管膜瘤，卡波濟(jì)肉瘤，松果體瘤，成血管細(xì)胞瘤，聽神經(jīng)瘤，少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤，menangioma，黑瘤，成神經(jīng)細(xì)胞瘤和成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤；和血液性腫瘤，包括但不限于急性成淋巴細(xì)胞性白血病“ALL”，B-細(xì)胞急性成淋巴細(xì)胞性白血病，T-細(xì)胞急性成淋巴細(xì)胞性白血病，急性髓細(xì)胞性白血病“AML”，急性早幼粒細(xì)胞性白血病“APL”，急性單核細(xì)胞性白血病，急性紅白血病(erythroleukemic leukemia)，急性成巨核細(xì)胞性白血病，急性骨髓單核細(xì)胞性白血病，急性非淋巴細(xì)胞性白血病，急性未分化性白血病，慢性粒細(xì)胞性白血病“CML”，慢性淋巴細(xì)胞性白血病“CLL”，毛細(xì)胞白血病，多發(fā)性骨髓瘤以及急性和慢性白血病，例如成淋巴細(xì)胞性、骨髓性、淋巴細(xì)胞性和髓細(xì)胞性白血病。
本發(fā)明具體的方法還包括給予其它治療劑(即除化合物A外的治療劑)。其它治療劑實(shí)例包括但不限于抗癌藥，例如但不限于烷基化劑、氮芥、氮丙啶、甲基蜜胺、磺酸烷基酯、亞硝基脲、三氮烯、葉酸類似物、嘧啶類似物、嘌呤類似物、長(zhǎng)春花生物堿、表鬼臼毒素、抗生素、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑和抗癌疫苗。
具體的其它治療劑包括但不限于阿西維辛；阿柔比星；鹽酸阿考達(dá)唑；阿克羅寧；阿多來新；阿地白介素；六甲蜜胺；安波霉素；醋酸阿美蒽醌；氨魯米特；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；門冬酰胺酶；曲林霉素；阿扎胞苷；阿扎替哌；阿佐霉素；巴馬司他；苯佐替派；比卡魯胺；鹽酸比生群；甲磺酸雙萘法德；比折來新；硫酸博來霉素；布喹那鈉；溴匹立明；白消安；放線菌素C；卡普睪酮；卡醋胺；卡貝替姆；卡鉑；卡莫司??；鹽酸卡柔比星；卡折來新；西地芬戈；苯丁酸氮芥；西羅霉素；錫鉑；克拉屈濱；甲磺酸克立那托；環(huán)磷酰胺；阿糖胞苷；達(dá)卡巴嗪；放線菌素D；鹽酸柔紅霉素；地西他濱；右奧馬鉑；地扎呱寧；甲磺酸地扎呱寧；地吖醌；多西他塞；多柔比星；鹽酸多柔比星；屈洛昔芬；檸檬酸屈洛昔芬；丙酸屈他雄酮；達(dá)佐偉霉素；依達(dá)曲沙；鹽酸依氟鳥氨酸；依沙蘆星；恩洛鉑；恩普氨脂；依匹哌啶；鹽酸表柔比星；尼布洛唑；鹽酸依索比星；雌莫司汀；雌莫司汀磷酸酯鈉；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺；鹽酸法倔唑；法扎拉濱；芬維A胺；氟尿苷；磷酸氟達(dá)拉濱；氟尿嘧啶；氟西他濱；磷喹酮；福司曲星鈉；吉西他濱；鹽酸吉西他濱；羥基脲；鹽酸依達(dá)比星；異環(huán)磷酰胺；伊莫福新；白介素II(包括重組白介素II、或rIL2)，干擾素α-2a；干擾素α-2b；干擾素α-n1；干擾素α-n3；干擾素β-Ia；干擾素γ-Ib；異丙鉑；鹽酸依立替康；醋酸蘭瑞肽；來曲唑；醋酸亮丙瑞林；鹽酸利阿唑；洛美曲索鈉；洛莫司??；鹽酸洛索蒽醌；馬索羅酚；美坦生；鹽酸氮芥；醋酸甲地孕酮；醋酸美侖孕酮；美法侖；美諾立爾；巰嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤鈉；氯苯氨啶；美妥替哌；米丁度胺；米托卡星；絲裂紅素；米托潔林；米托馬星；絲裂霉素；米托司培；米托坦；鹽酸米托蒽酮；麥考酚酸；諾考達(dá)唑；諾加霉素；奧馬鉑；奧昔舒侖；紫杉醇；培門冬酶；培利霉素；奈莫司??；硫酸培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；鹽酸吡羅蒽酮；普卡霉素；普洛美坦；卟吩姆鈉；泊非霉素；潑尼莫司汀；鹽酸丙卡巴肼；嘌羅霉素；鹽酸嘌羅霉素；吡唑呋林；利波腺苷；羅谷亞胺；沙芬戈；鹽酸沙芬戈；司莫司??；辛曲秦；磷乙酰天冬氨酸鈉；司帕霉素；鹽酸鍺螺胺；螺莫司??；螺鉑；鏈黑霉素；鏈佐星；磺氯苯脲；他利霉素；替可加蘭鈉；替加氟；鹽酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；替羅昔隆；睪內(nèi)酯；硫咪嘌呤；硫鳥嘌呤；塞替派；噻唑呋林；替拉扎明；枸櫞酸托瑞米芬；醋酸曲托龍；磷酸曲西立濱；三甲曲沙；三甲曲沙葡萄糖醛酸酯；曲普瑞林；鹽酸妥布氯唑；烏拉莫司?。粸跞鹛孢?；伐普肽；維替泊芬；硫酸長(zhǎng)春堿；硫酸長(zhǎng)春新堿；長(zhǎng)春地辛；硫酸長(zhǎng)春地辛；硫酸長(zhǎng)春匹定；硫酸長(zhǎng)春甘酯；硫酸長(zhǎng)春羅辛；酒石酸長(zhǎng)春瑞濱；硫酸長(zhǎng)春羅定；硫酸長(zhǎng)春利定；伏氯唑；折尼鉑；凈司他汀；鹽酸佐柔比星。其它抗癌藥包括但不限于20-表-1，25-二羥基維生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龍；阿柔比星；?；幌?；adecypenol；阿多來新；阿地白介素；ALL-TK拮抗劑；六甲蜜胺；氨莫司汀；amidox；氨磷??；氨基乙酰丙酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心蓮內(nèi)酯；血管生成抑制劑；拮抗劑D；拮抗劑G；antarelix；anti-dorsalizing形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)-1；抗雄激素藥，前列腺癌藥；抗雌激素藥；抗瘤酮；反義寡核苷酸；甘氨酸阿非迪霉素；凋亡基因調(diào)節(jié)劑；凋亡調(diào)節(jié)劑；脫嘌呤核酸；阿拉伯-CDP-DL-PTBA；精氨酸脫氨酶；asulacrine；阿他美坦；阿莫司?。籥xinastatin 1；axinastatin 2；axinastatin3；阿扎司瓊；阿扎霉素；重氮酪氨酸；漿果赤霉素III衍生物；balanol；巴馬司他；BCR/ABL拮抗劑；benzochlorins；benzoylstaurosporine；β-內(nèi)酰胺衍生物；β-alethine；β-clamycin B；樺木酸；bFGF抑制劑；比卡魯胺；比生群；二吖丙啶基精胺；雙萘法德；bistratene A；比折來新；breflate；溴匹立明；布度鈦；丁基硫堇硫氧胺(buthioninesulfoximine)；卡泊三醇；鈣磷酸蛋白C(calphostin C)；喜樹堿衍生物；金絲雀痘IL-2(canarypox IL-2)；卡培他濱；carboxamide-amino-triazole；carboxyamidotriazole；CaRest M3；CARN 700；軟骨衍生的抑制劑；卡折來新；酪蛋白激酶抑制劑(ICOS)；粟精胺；殺菌肽B；西曲瑞克；chlorlns；氯代喹喔啉類磺胺藥物；西卡前列素；順式-卟啉；克拉曲濱；氯米芬類似物；克霉唑；collismycin A；collismycin B；考布他汀A4；combretastatin類似物；conagenin；crambescidin 816；克立那托；克來普拓索8(cryptophycin 8)；克來普拓索A衍生物；curacin A；cyclopentanthraquinones；cycloplatam；cypemycin；阿糖胞苷昔萘酸酯；溶細(xì)胞因子；cytostatin；達(dá)昔單抗；地西他濱；dehydrodidemnin B；地洛瑞林；地塞米松；右異環(huán)磷酰胺(dexifosfamide)；右雷佐生；右維拉帕米；地吖醌；didemnin B；didox；diethylnorspermine；二氫-5-氮雜胞嘧啶核苷；二氫紫松醇注射液，9-；dioxamycin；聯(lián)苯螺莫司汀；多西他賽；二十二烷醇；多拉司瓊；去氧氟尿苷；屈洛昔芬；屈大麻酚；duocarmycin SA；依布硒；依考莫司?。灰赖馗Ｐ?；依決洛單抗；依氟鳥氨酸；欖香烯；乙嘧替氟；表柔比星；依立雄胺；雌莫司汀類似物；雌激素激動(dòng)劑；雌激素拮抗劑；依他硝唑；磷酸依托泊苷；依西美坦；法倔唑；法扎拉濱；芬維A胺；非格司亭；非那雄胺；flavopiridol；氟卓斯??；fluasterone；氟達(dá)拉濱；fluorodaunorunicin hydrochloride；福酚美克；福美坦；福司曲星；福莫司汀；釓替沙林；硝酸鎵；加洛他濱；加尼瑞克；明膠酶抑制劑；吉西他濱；谷胱甘肽抑制劑；hepsulfam；heregulin；環(huán)六亞甲基二乙酰胺；金絲桃素；伊班膦酸；伊達(dá)比星；艾多昔芬；伊決孟酮；伊莫福新；伊洛馬司他；咪唑吖啶酮(imidazoacridones)；咪喹莫特；免疫刺激肽；胰島素樣生長(zhǎng)激素-1受體抑制劑；干擾素激動(dòng)劑；干擾素；白介素；碘芐胍；碘代阿霉素；依波米醇，4-；伊羅普拉；伊索拉定；isobengazole；isohomohalicondrinB；依他司瓊；jasplakinolide；kahalalide F；lamellarin-N triacetate；蘭瑞肽；leinamycin；米格司亭；硫酸香菇多糖；leptolstatin；來曲唑；白血病抑制因子；白細(xì)胞α干擾素；亮丙立德+雌激素+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；線形聚胺類似物；親脂性雙糖肽；親脂性鉑化合物；lissoclinamide 7；洛鉑；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼達(dá)明；洛索蒽醌；洛伐他汀；洛索立賓；勒托替康；lutetium texapliyrin；lysofylline；溶菌肽；美坦新；mannostatin A；馬立馬司他；馬索羅酚；maspin；基質(zhì)裂解蛋白抑制劑；間質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；美諾立爾；麥爾巴隆(merbarone)；美替瑞林；蛋氨酶；甲氧氯普胺；MIF抑制劑；米非司酮；米替福新；米立司亭；錯(cuò)配的雙鏈RNA；米托胍腙；二溴衛(wèi)矛醇；絲裂霉素類似物；米托萘胺；mitotoxin成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-saporin；米托蒽酮；莫法羅汀；莫法司亭；單克隆抗體，人絨促性素；單磷酰脂質(zhì)A+分枝桿菌細(xì)胞壁sk；莫哌達(dá)醇；多發(fā)性抗藥基因抑制劑；基于多發(fā)性腫瘤抑制劑1的治療劑；芥子抗癌藥；印度洋海綿B；分枝桿菌細(xì)胞壁提取液；myriaporone；N-乙酰基地那林；N-取代的苯甲酰胺；那法瑞林；nagrestip；納洛酮+噴他佐辛；napavin；naphterpin；那托司亭；萘達(dá)鉑；奈莫柔比星；奈立膦酸；中性肽鏈內(nèi)切酶；尼魯米特；nisamycin；氧化氮調(diào)節(jié)劑；氧化氮抗氧劑；nitrullyn；O6-芐基鳥嘌呤；奧曲肽；okicenone；低聚核苷酸；奧那司酮；昂丹司瓊；昂丹司瓊；oracin；口服細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑；奧馬鉑；奧沙特??；奧沙利鉑；oxaunomycin；紫杉醇；紫杉醇類似物；紫杉醇衍生物；palauamine；palmitoylrhizoxin；帕米膦酸；人參炔三醇；帕諾米芬；parabactin；帕折普?。慌嚅T冬酶；培得星；戊聚糖多硫酸鈉；噴司他??；pentrozole；全氟溴烷；培磷酰胺；紫蘇子醇；phenazinomycin；乙酸苯脂；磷酸酶抑制劑；picibanil；鹽酸毛果蕓香堿；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A；placetin B；纖溶酶原激活物抑制劑；鉑絡(luò)合物；鉑化合物；鉑-三胺絡(luò)合物；卟吩姆鈉；泊非霉素；潑尼松；丙基二吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶體抑制劑；基于蛋白質(zhì)A的免疫調(diào)節(jié)劑；蛋白激酶C抑制劑；蛋白激酶C抑制劑，microalgal；蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶抑制劑；嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑；紅紫素；吡唑啉吖啶；吡啶氧化的(pyridoxylated)血紅蛋白聚氧化乙烯軛合物；raf原癌基因拮抗劑；雷替曲塞；雷莫司瓊；ras原癌基因法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑；ras原癌基因抑制劑；ras原癌基因-GAP抑制劑；脫甲基瑞替普?。诲nRe 186依替膦酸；根霉素；核酶；RII維胺酯(retinamide)；羅谷亞胺；rohitukine；羅莫肽；羅喹美克；rubiginone Bl；ruboxyl；沙芬戈；saintopin；SarCNU；sarcophytol A；沙格司亭；Sdi 1類似物；司莫司??；衰老衍生的抑制劑1；有意義低聚核苷酸；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑；單鏈抗原結(jié)合蛋白質(zhì)；西佐喃；索布佐生；硼卡鈉；苯乙酸鈉；solverol；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素結(jié)合蛋白質(zhì)；索納明；膦門冬酸；spicamycinD；螺莫司汀；splenopentin；海綿素1(spongistatin)；角沙胺；干細(xì)胞抑制劑；干細(xì)胞分裂抑制劑；stipiamide；基質(zhì)裂解素抑制劑；sulfinosine；超活性的血管活性腸肽拮抗劑；suradista；蘇拉明；八氫吲嗪三醇；合成的糖胺聚糖；他莫司?。患椎饣舴?；?；悄就?；他扎羅汀；替可加蘭鈉；替加氟；telluraprylium；端粒末端轉(zhuǎn)移酶抑制劑；替莫泊芬；替莫唑胺；替尼泊苷；tetrachlorodecaoxide；tetrazomine；thaliblastine；噻可拉林；血小板生成素；血小板生成素類似物；胸腺法新；胸腺生成素受體激動(dòng)劑；胸腺曲南；促甲狀腺激素；tin ethyl etiopurpurin；替拉扎明；二氯二茂鈦；topsentin；托瑞米芬；全能干細(xì)胞因子；翻譯抑制劑；維A酸；三乙酰基尿嘧啶核苷；曲西立濱；三甲曲沙；曲普瑞林；托烷司瓊；妥羅雄脲；酪氨酸激酶抑制劑；tyrphostins；UBC抑制劑；烏苯美司；尿生殖竇衍生的生長(zhǎng)抑制因子；尿激酶受體拮抗劑；伐普肽；variolin B；載體系統(tǒng)，紅細(xì)胞基因治療藥；維拉雷瑣；veramine；verdins；維替泊芬；長(zhǎng)春瑞濱；vinxaltine；vitaxin；伏氯唑；扎諾特??；折尼鉑；亞芐維C；和凈司他汀斯酯。
本發(fā)明進(jìn)一步包括一種治療或預(yù)防患者的可通過抑制PDE4而改善的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療有效量的立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。通過抑制PDE4而改善的病癥包括但不限于哮喘，炎癥，慢性或急性阻塞性肺病，慢性或急性阻塞性肺炎，腸炎，節(jié)段性回腸炎，白塞病，結(jié)腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎和關(guān)節(jié)炎或由于再灌注引起的炎癥。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，待治療或預(yù)防的疾病或病癥為慢性阻塞性肺病。
本發(fā)明的具體方法可包括給予一種例如但不限于抗炎藥、抗組胺藥和解充血藥的其它治療劑。這些其它治療劑的實(shí)例包括但不限于抗組胺藥，包括但不限于氨基乙醇、乙二胺、哌嗪和吩噻嗪；抗炎藥；非甾體抗炎藥(NSAIDS)，包括但不限于阿司匹林、水楊酸鹽(酯)、乙酰氨基酚、吲哚美辛、舒林酸、依托度酸、fenamates、托美丁、酮咯酸、雙氯芬酸、布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮洛芬、氟比洛芬、噁丙嗪、吡羅昔康、美洛昔康、吡唑啉酮衍生物；和甾體化合物，包括但不限于皮質(zhì)類固醇和腎上腺皮質(zhì)類固醇。
本發(fā)明的具體方法消除或降低藥物-藥物相互作用和其它與用于治療這些病癥的治療劑(包括外消旋的取代苯乙基砜)有關(guān)的副作用。不受任何理論的限制，相比外消旋的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，立體異構(gòu)體純的化合物A可進(jìn)一步提供全面提高的治療有效性或治療指數(shù)。例如在某些情況下，給予較少量的所述藥物可獲得相同的治療效果。
如上所述，本發(fā)明的活性化合物(即化合物A)可用于治療或預(yù)防寬范圍的疾病和病癥。但是，在對(duì)疾病或病癥進(jìn)行急性或長(zhǎng)期治療時(shí)，根據(jù)所述疾病或病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性，以及活性組分的給藥途徑，本發(fā)明的特定活性組分的治療或預(yù)防劑量大小將發(fā)生變化。根據(jù)年齡、體重和個(gè)體患者反應(yīng)的不同，劑量、或許給藥次數(shù)也將變化。對(duì)這些因素進(jìn)行充分的考慮后，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可容易地選擇合適的給藥方法。對(duì)于本文描述的病癥，一般推薦每日劑量范圍約為1mg-1000mg，單劑量給藥，每天1次，優(yōu)選每日分次給藥。更具體地講，將每日劑量平均分開，分兩次給藥。具體地講，每日劑量范圍應(yīng)約為5mg-500mg，更具體地講，每天約為10mg-200mg。具體地講，每日劑量可給予5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、50mg或100mg的劑型。在治療患者時(shí)，應(yīng)從較低的劑量開始治療，或許每天約1mg-25mg，如果需要，可增加至每天約達(dá)200mg-1000mg，根據(jù)患者的全身反應(yīng)，可以單劑量給藥也可分次給藥。同樣，每日劑量可為0.01mg/kg-100mg/kg。
在某些病例中，可能需要使用超出本文公開的劑量范圍的活性組分，這對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，是顯而易見的。此外應(yīng)注意，在結(jié)合個(gè)體患者的反應(yīng)后，臨床醫(yī)師或主治醫(yī)師將知道如何和何時(shí)中止、調(diào)節(jié)或終止治療。
本文使用的術(shù)語“治療有效量”、“預(yù)防有效量”和“治療或預(yù)防有效量”包括上述劑量和給藥次數(shù)安排。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將容易得知，不同的治療有效量可適用于不同的疾病和病癥。同樣，上述劑量和給藥次數(shù)安排也包括足夠治療或預(yù)防這些病癥，但不足以引起或足以降低與外消旋的2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮有關(guān)的副反應(yīng)的劑量。
4.3.藥用組合物本發(fā)明包括包含化合物A或其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物的藥用組合物和單位劑型。本發(fā)明的單個(gè)劑型可適用于經(jīng)口服、粘膜(包括直腸、鼻或陰道)、胃腸外(包括皮下、肌肉、一次性大劑量注射、動(dòng)脈或靜脈)、舌下、經(jīng)皮、口頰或局部給藥。
本發(fā)明的藥用組合物和劑型包含立體異構(gòu)體純的化合物A或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。本發(fā)明的藥用組合物和劑型一般也包含一種或多種藥學(xué)可接受的賦形劑。
該實(shí)施方案包括的一種特殊藥用組合物包含立體異構(gòu)體純的化合物A，或其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物，和至少一種其它治療劑。其它治療劑的實(shí)例包括但不限于上述4.2.部分列出的那些抗癌藥物和抗炎藥物。
本發(fā)明的單位劑型適用于經(jīng)口、粘膜(例如鼻、舌下、陰道、口頰或直腸)、胃腸外(例如皮下、靜脈、一次性大劑量注射、肌肉或動(dòng)脈)或經(jīng)皮給予患者。劑型的實(shí)例包括但不限于片劑；膠囊形片劑；膠囊劑，例如軟的彈性明膠膠囊劑；扁囊劑；錠劑(troches)；錠劑(lozenges)；分散劑；栓劑；軟膏劑；糊劑(泥敷劑)；泥膏劑；散劑；敷料；乳膏劑；膏藥；溶液劑；貼劑；氣霧劑(例如鼻噴霧劑或吸入劑)；凝膠劑；適用于經(jīng)口或經(jīng)粘膜給予患者的液體劑型，包括混懸劑(例如水性或非水性混懸劑、水包油型乳劑或油包水型液體乳劑)，溶液劑，和酏劑；適用于經(jīng)胃腸外給予患者的液體劑型；和可重新構(gòu)建以提供適用于經(jīng)胃腸外給予患者的液體劑型的無菌固體劑型(例如結(jié)晶或無定形固體)。
本發(fā)明的劑型的組成、形狀和類型一般將根據(jù)它們的用途而變化。例如，用于炎癥或相關(guān)病癥的治療時(shí)，相比長(zhǎng)期治療的劑型，急性治療的劑型可包含更多的一種或多種所述活性組分。類似的，用于治療同樣的疾病或病癥時(shí)，經(jīng)胃腸外給藥的劑型比口服劑型包含的一種或多種所述活性組分的量少。本發(fā)明包括的具體劑型的各個(gè)方面均不相同，這對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是顯而易見的。參見，例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，18版，Mack出版，Easton PA(1990年)。
藥用組合物和劑型一般包括一種或多種賦形劑。藥劑學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員熟知合適的賦形劑，本文所提供的合適的賦形劑的實(shí)例并不限于此。一種特殊的賦形劑是否適合加至藥用組合物或劑型中，將根據(jù)本領(lǐng)域熟知的多種因素，包括但不限于將所述劑型給予患者的途徑等確定。例如，口服劑型如片劑可包含不適用于胃腸外給藥劑型的賦形劑。特殊賦形劑的適用性也可根據(jù)所述劑型中的具體活性組分確定。
本發(fā)明的不含乳糖的組合物可包含本領(lǐng)域熟知的各種賦形劑，以及列在例如美國(guó)藥典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)中的賦形劑。不含乳糖的組合物一般包括活性組分、藥學(xué)相容并且藥學(xué)可接受量的粘合劑/填充劑和潤(rùn)滑劑。優(yōu)選的不含乳糖的劑型包含活性組分、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉和硬脂酸鎂。
本發(fā)明進(jìn)一步包括包含活性組分的無水藥用組合物和劑型，因?yàn)樗墒挂恍┗衔锶菀追纸?。例如，為了確定例如有效期或制劑的長(zhǎng)期穩(wěn)定性的性質(zhì)，在藥學(xué)領(lǐng)域廣泛接受加入水(例如5％)作為模擬長(zhǎng)期儲(chǔ)存的方法。參見，例如Jens T.Carstensen，Drug StabilityPrinciples&Practice，2版，Marcel Dekker，紐約，紐約，1995年，379-80頁。實(shí)際上，水和熱可加速一些化合物的分解。由于在制劑生產(chǎn)、處理、包裝、儲(chǔ)存、運(yùn)輸以及使用的過程中，經(jīng)常遇到水分和/或濕度問題，因此，水分對(duì)于制劑的影響非常顯著。
使用無水或含水量低的組分并在低水分或低濕度的環(huán)境中，可制備本發(fā)明的無水藥用組合物和劑型。如果在生產(chǎn)、包裝和/或儲(chǔ)存過程需要經(jīng)常接觸水分和/或濕度，則優(yōu)選包含乳糖和至少一種活性組分(包括伯胺或仲胺)的藥用組合物和劑型是無水的。
無水藥用組合物的制備和儲(chǔ)存應(yīng)該保持其無水性質(zhì)。相應(yīng)地，優(yōu)選無水組合物使用已知可防水的材料包裝，以便它們可用合適的規(guī)定的藥劑盒包裝。合適的包裝實(shí)例包括但不限于密封箔、塑料、單劑量容器(例如管瓶)、泡罩包裝和對(duì)開包裝。
本發(fā)明進(jìn)一步包括含有一種或多種可降低活性組分分解速率的化合物的藥用組合物和劑型。本文中稱為“穩(wěn)定劑”的這些化合物包括但不限于抗氧化劑，如抗壞血酸、pH緩沖劑或鹽緩沖劑。
同賦形劑的量和種類一樣，劑型中活性組分的量和具體種類可根據(jù)例如但不限于給予患者的途徑等因素的不同而變化。但是本發(fā)明的代表性劑型包含化合物A，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、籠形包合物、水合物、多晶型物或前藥，每日劑量范圍約為1mg-1000mg，在早晨單劑量給藥，每天一次，但優(yōu)選每天分次給藥，與食物一起給藥。更具體地講，將每日劑量平均分開，每天兩分次給藥。具體地講，每日劑量范圍應(yīng)約為5mg-500mg；更具體地講，每天約為10mg-200mg。在治療患者時(shí)，應(yīng)自每天約1mg-25mg的較低劑量開始治療，并且如果需要，可將每日劑量增加至最高約200mg-1000mg，根據(jù)患者的全身反應(yīng)，可單劑量給藥，也可以分次給藥。
4.3.1.口服劑型適用于口服給藥的本發(fā)明的藥用組合物可以為離散的劑型，例如但不限于片劑(例如咀嚼片)、膠囊形片劑、膠囊劑和液體制劑(例如調(diào)味的糖漿劑)。這些劑型包含預(yù)先確定量的活性組分，并且可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的藥劑學(xué)方法制備。主要參見Remington′sPharmaceutical Sciences，18版，Mack出版，Easton PA(1990年)。
按照常規(guī)藥學(xué)配混技術(shù)，將活性組分與至少一種賦形劑充分混勻，制備本發(fā)明的代表性口服劑型。根據(jù)給藥需要的制劑形式，賦形劑可為各種各樣的形式。例如，適用于液體口服劑型或氣霧劑的賦形劑包括但不限于水、二元醇、油、醇、矯味劑、防腐劑和著色劑。適用于固體口服劑型(例如散劑、片劑、膠囊劑和膠囊形片劑)的賦形劑實(shí)例包括但不限于淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、造粒劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑和崩解劑。
由于給藥方便，片劑和膠囊劑為最常用的其中使用固體賦形劑的口服劑型。如果需要，可通過標(biāo)準(zhǔn)的水或非水技術(shù)對(duì)片劑包衣?？赏ㄟ^任何藥劑學(xué)方法制備這些劑型。藥用組合物和劑型一般按以下方法制備將活性組分與液體載體、細(xì)粒固體載體或兩者充分混勻，然后在需要時(shí)可將產(chǎn)品制成所需要的形狀。
例如，可通過壓縮和模壓制備片劑。壓縮片可通過將自由流動(dòng)形式(如粉末或顆粒形式)的活性組分(任選與賦形劑混合)在合適的機(jī)器中壓縮制備。模壓片可通過將惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉狀化合物的混合物在合適的機(jī)器中模壓制備。
可用于本發(fā)明的口服劑型的賦形劑的實(shí)例包括但不限于粘合劑、填充劑、崩解劑和潤(rùn)滑劑。適用于藥用組合物和劑型的粘合劑包括但不限于玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或其它淀粉，明膠，天然和合成的樹膠(如阿拉伯膠)，藻酸鈉、藻酸、其他藻酸鹽，粉狀黃芪膠，瓜爾膠，纖維素及其衍生物(例如乙基纖維素、醋酸纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉)，聚乙烯吡咯烷酮，甲基纖維素，預(yù)膠化淀粉，羥丙基甲基纖維素(例如2208號(hào)、2906號(hào)、2910號(hào))，微晶纖維素，及其混合物。
適用于本文公開的藥用組合物和劑型的填充劑的實(shí)例包括但不限于滑石粉，碳酸鈣(例如顆粒或粉末)，微晶纖維素，粉狀纖維素，葡萄糖結(jié)合劑，高嶺土，甘露醇，硅酸，山梨醇，淀粉，預(yù)膠化淀粉，及其混合物。本發(fā)明的藥用組合物中的粘合劑或填充劑一般占所述藥用組合物或劑型的約50％-99％重量。
適合形式的微晶纖維素包括但不限于以AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(來自FMCCorporation，American Viscose Division，Avicel Sales，Marcus Hook，PA)出售的商品，及其混合物。具體的粘合劑為以AVICEL RC-581出售的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的混合物。合適的無水或低含水量的賦形劑或添加劑包括AVICEL-PH-103Tm和Starch 1500LM。
當(dāng)暴露在含水環(huán)境中時(shí)，用于本發(fā)明的組合物的崩解劑可使片劑崩解。含有太多崩解劑的片會(huì)在儲(chǔ)存時(shí)崩解，而含有太少崩解劑的那些片則不能以需要的速率崩解或不能在需要的條件下崩解。因此，應(yīng)該使用足量(既不太多也不太少，不會(huì)改變所述活性組分的釋放)的崩解劑制備本發(fā)明的固體口服劑型。崩解劑的用量根據(jù)劑型不同而變化，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，這很容易理解。藥用組合物一般包含約0.5-15％重量、具體為約1％-5％重量的崩解劑。
可用于本發(fā)明的藥用組合物和劑型的崩解劑包括但不限于瓊脂，藻酸，碳酸鈣，微晶纖維素，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉，交聚維酮，聚克立林鉀，淀粉羥乙酸納，馬鈴薯或木薯淀粉、預(yù)膠化淀粉，其他淀粉，粘土，其它藻膠，其他纖維素，樹膠，及其混合物。
可用于本發(fā)明的藥用組合物和劑型的潤(rùn)滑劑包括但不限于硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，礦物油，輕質(zhì)礦物油，甘油，山梨醇，甘露醇，聚乙二醇，其它二元醇，硬脂酸，十二烷基硫酸鈉，滑石粉，氫化植物油(例如花生油、棉仔油、向日葵油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油)，硬脂酸鋅，油酸乙酯，月桂酸乙酯，瓊脂，及其混合物。另外的潤(rùn)滑劑包括例如硅酸鹽硅膠(AEROSIL 200，W.R.Grace Co.ofBaltimore，MD生產(chǎn))，合成二氧化硅的凝固氣溶膠(Plano，TX的DegussaCo.銷售)，CAB-O-SIL(Cabot Co.of Boston MA出售的一種熱性二氧化硅產(chǎn)品)，及其混合物。如果使用，潤(rùn)滑劑的量一般約少于它們所加入的藥用組合物或劑型的1％重量。
4.3.2.緩釋劑型本發(fā)明的活性組分可按照本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的控釋方法或釋放裝置給藥。實(shí)例包括但不限于以下美國(guó)專利描述的那些方法或裝置3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；和4,008,719，5,674,533，5,059,595，5,591,767，5,120,548，5,073,543，5,639,476，5,354,556以及5,733,566，這些專利通過引用而結(jié)合至本文中。這些劑型可用以使一種或多種活性組分緩慢或受控地釋放，其中采用例如羥丙基甲基纖維素、其它聚合物骨架、凝膠、滲透膜、滲透系統(tǒng)、多層包衣、微丸、脂質(zhì)體、微球或其組合來提供符合需要的可變比例的釋放曲線。對(duì)于本發(fā)明的活性組分，可容易地選擇使用合適的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的控釋制劑(包括本文所描述的那些制劑)。因此，本發(fā)明包括適用于口服給藥的單位劑型，例如但不限于適用于控釋的片劑、膠囊劑、軟膠囊和膠囊形片劑。
所有控釋藥物的一個(gè)共同目的是相對(duì)其非控釋制劑具有更好的治療效果。最佳設(shè)計(jì)的控釋制劑在治療中的應(yīng)用應(yīng)達(dá)到的理想效果是，在最短的時(shí)間內(nèi)，使用最少量的藥物治愈或控制病癥。控釋制劑的優(yōu)點(diǎn)有延長(zhǎng)藥物活性、減少給藥次數(shù)以及提高患者的依從性。另外，控釋制劑可用來影響起效時(shí)間或例如血藥濃度等其他性質(zhì)，并因此影響副(不良)作用的發(fā)生。
大多數(shù)的控釋制劑被設(shè)計(jì)成為具有如下的釋放特征開始釋放能迅速產(chǎn)生所希望的治療效果的藥量(活性組分)，然后在延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)，逐漸并連續(xù)釋放其它藥量來維持預(yù)防或治療作用。為維持體內(nèi)的藥物濃度穩(wěn)定，藥物必須以一定的速率從劑型中釋放出來，以彌補(bǔ)被代謝并從機(jī)體排泄出的藥量?；钚越M分的控釋可受到包括但不限于pH、溫度、酶、水或其它生理?xiàng)l件或化合物等各種條件的刺激。
4.3.3.胃腸外劑型可經(jīng)包括但不限于皮下、靜脈(包括一次性大劑量注射)、肌肉和動(dòng)脈的各種途徑，將胃腸外劑型給予患者。由于它們的給藥一般避開了患者對(duì)污染物的自然防御，因此優(yōu)選胃腸外劑型為無菌或給予患者前可進(jìn)行滅菌。胃腸外劑型的實(shí)例包括但不限于注射液、溶于或懸浮在藥學(xué)可接受的載體中的注射用干品、注射混懸劑和乳劑。
本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知可適用于本發(fā)明的胃腸外劑型的合適的載體。實(shí)例包括但不限于注射用水(USP)；水載體，例如但不限于氯化鈉注射液，林格氏注射液，葡萄糖注射液，葡萄糖和氯化鈉注射液和乳酸林格氏注射液；水可混溶的載體，例如但不限于乙醇，聚乙二醇和聚丙二醇；和非水載體，例如但不限于玉米油，棉籽油，花生油，芝麻油，油酸乙酯，肉豆蔻酸異丙酯，和苯甲酸芐酯。
也可將能提高本文公開的一種或多種活性組分的溶解度的化合物加至本發(fā)明的胃腸外劑型中。
4.3.4經(jīng)皮、局部和粘膜劑型本發(fā)明的經(jīng)皮、局部和粘膜劑型，包括但不限于眼用溶液劑、噴霧劑、氣霧劑、乳膏劑、洗劑、軟膏劑、凝膠劑、溶液劑、乳劑、混懸劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其它劑型。參見，例如Remington′sPharmaceutical Sciences，16版和18版，Mack出版，Easton PA(1980年&1990年)；和Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms，4版，Lea&Febiger，費(fèi)城(1985年)。適用于治療口腔粘膜組織的劑型可配制成漱口劑或口凝膠劑。此外，經(jīng)皮劑型包括“貯藏庫型”或“骨架型”貼劑，可施用于皮膚并可使用一段具體時(shí)間，以便使需要量的活性組分滲入皮膚。
可用于提供本發(fā)明所包括的經(jīng)皮、局部和粘膜劑型的合適的賦形劑(例如載體和稀釋劑)和其他材料為藥學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，并依據(jù)給定藥用組合物或劑型將要施用的特定組織而定?？紤]到該因素，使用無毒并且藥學(xué)可接受的代表性賦形劑(包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、1，3-丁二醇、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、礦物油及其混合物)制備洗劑、酊劑、乳膏劑、乳劑、凝膠劑或軟膏劑。如果需要，也可將增濕劑或保濕劑加至藥用組合物和劑型中。這些加助組分的實(shí)例在本領(lǐng)域是熟知的。參見，例如Remington′sPharmaceutical Sciences，16版和18版，Mack出版，Easton PA(1980年和1990年)。
根據(jù)待治療的具體組織，輔加組分可在使用本發(fā)明的活性組分治療前、后或聯(lián)合使用。例如，滲透增強(qiáng)劑可用于幫助將活性組分釋放至組織中。合適的滲透增強(qiáng)劑包括但不限于丙酮；各種醇，例如乙醇，油醇和四氫糠醇；烷基亞砜，例如二甲亞砜；二甲基乙酰胺；二甲基甲酰胺；聚乙二醇；吡咯烷酮，例如聚乙烯吡咯烷酮；Kollidon級(jí)(聚乙烯吡咯烷酮(Povidone)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvidone))；尿素；和各種水溶性或水不溶性糖酯，例如吐溫80(聚山梨醇酯80)和司盤60(脫水山梨醇單硬脂酸酯)。
調(diào)節(jié)藥用組合物、劑型或藥用組合物或劑型施用的組織的pH，可提高一種或多種活性組分的釋放度。類似的，調(diào)節(jié)溶劑載體的極性、其離子強(qiáng)度或張力，可以提高釋放度。也可將如硬脂酸酯(鹽)的化合物加至藥用組合物或劑型中，改善一種或多種活性組分的親水性或親脂性，從而提高釋放度。在這方面，硬脂酸鹽可用作所述制劑的類脂載體、乳化劑或表面活性劑，并用作釋放增強(qiáng)劑或滲透增強(qiáng)劑。所述活性組分的各種鹽、水合物或溶劑合物可用于進(jìn)一步調(diào)節(jié)最終組合物的性質(zhì)。
4.3.5.藥劑盒通常優(yōu)選本發(fā)明的活性組分不同時(shí)或不通過相同的途徑給予患者。因此，本發(fā)明包括藥劑盒，當(dāng)臨床醫(yī)師使用時(shí)，所述藥劑盒可使適當(dāng)量的活性組分對(duì)患者的給藥簡(jiǎn)單化。
本發(fā)明的代表性藥劑盒包含化合物A，或其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑合物、水合物、籠形包合物、多晶型物或前藥的單位劑型，以及第二種活性組分的單位劑型。第二種活性組分的實(shí)例包括但不限于上述4.2部分列舉的那些組分。
本發(fā)明的藥劑盒可進(jìn)一步包含用于活性組分給藥的裝置。這些裝置的實(shí)例包括但不限于注射器、點(diǎn)滴袋、眼罩和吸入器。
本發(fā)明的藥劑盒可進(jìn)一步包含可用于給予一種或多種活性組分的藥學(xué)可接受的載體。例如，如果活性組分為固體形式，需必須重新構(gòu)建以便經(jīng)胃腸外給藥，則所述藥劑盒可包括適當(dāng)載體的密封容器，其中所述活性組分可溶解形成適用于經(jīng)胃腸外給藥的無顆粒的無菌溶液。藥學(xué)可接受載體的實(shí)例包括但不限于注射用水(USP)；水載體，例如但不限于氯化鈉注射液，林格氏注射液，葡萄糖注射液，葡萄糖和氯化鈉注射液，和乳酸林格氏注射液；水可混溶的載體，例如但不限于乙醇，聚乙二醇和聚丙二醇；和非水載體，例如但不限于玉米油，棉籽油，花生油，芝麻油，油酸乙酯，肉豆蔻酸異丙酯和苯甲酸芐酯。
5.實(shí)施例5.1實(shí)施例12-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉1，3-二酮的合成將攪拌下的1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；野?1.0g，3.7毫摩爾)和3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐(751mg，3.66毫摩爾)的乙酸(20ml)溶液加熱回流15小時(shí)。真空下除去溶劑，得到油狀物。通過色譜法分離得到的油，得到產(chǎn)物(1.0g，收率59％)，呈黃色固體，mp144℃。
1H NMR(CDCl3)δ1.47(t，J＝7.0Hz，3H，CH3)，2.26(s，3H，CH3)，2.88(s，3H，CH3)，3.75(dd，J＝4.4，14.3Hz，1H，CHH)，3.85(s，3H，CH3)，4.11(q，J=7Hz，2H，CH2)，5.87(dd，J＝4.3，10.5Hz，1H，NCH)，6.82-6.86(m，1H，Ar)，7.09-7.11(m，2H，Ar)，7.47(d，J=7Hz，1H.，Ar)，7.64(t，J＝8 Hz，1H，Ar)，8.74(d，J=8Hz，1H，Ar)，9.49(brs，1H，NH)；13C NMR(CDCl3)δ14.61，24.85，41.54，48.44，54.34，55.85，64.43，111.37，112.34，115.04，118.11，120.21，124.85，129.17，130.96，136.01，137.52，148.54，149.65，167.38，169.09，169.40；
C22H24NO7S計(jì)算值C，57.38；H，5.25；N，6.08。實(shí)測(cè)值C，57.31；H，5.34；N，5.83。
5.2實(shí)施例2(+)2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉1，3-二酮的合成3-氨基鄰苯二甲酸的制備在氮?dú)夥障?，將披鈀碳(10％，2.5g)、3-硝基鄰苯二甲酸(75.0g，355毫摩爾)和乙醇(1.5L)加至2.5L的帕爾氫化器中。將氫氣通入反應(yīng)容器內(nèi)，至壓力達(dá)到55psi。振蕩該混合物13小時(shí)，并維持氫氣壓力在50-55psi之間。排除氫氣，并用氮?dú)馇逑椿旌衔?次。通過Celite硅藻土床過濾懸浮液，并用甲醇洗滌。真空下濃縮濾液。將得到的固體再用乙醚打漿，并通過真空過濾進(jìn)行分離。將固體真空干燥至恒重，得到54g(收率84％)的3-氨基鄰苯二甲酸，呈黃色固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.17(s，2H)，6.67(d，1H)，6.82(d，1H)，7.17(t，1H)，8-10(brs，2H)。
13C-NMR(DMSO-d6)δ112.00，115.32，118.20，131.28，135.86，148.82，169.15，170.09。
3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐的制備向裝有機(jī)械攪拌器、溫度計(jì)和冷凝器的1L三頸圓底燒瓶中加入3-氨基鄰苯二甲酸(108g，596毫摩爾)和乙酸酐(550mL)。將反應(yīng)混合物加熱回流3小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度，再于0-5℃下冷卻1小時(shí)。真空過濾收集結(jié)晶固體，并用乙醚洗滌。在環(huán)境溫度下將固體真空干燥至恒重，得到75g(收率61％)的3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐，呈白色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ2.21(s，3H)，7.76(d，1H)，7.94(t，1H)，8.42(d，1H)，9.84(s，1H)。
2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺的拆分向裝有機(jī)械攪拌器、溫度計(jì)和冷凝器的3L三頸圓底燒瓶中加入2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺(137.0g，500毫摩爾)、N-乙酰基-L-亮氨酸(52g，300毫摩爾)和甲醇(1.0L)。攪拌下將漿狀物加熱回流1小時(shí)。然后在攪拌下，將漿狀物冷卻至環(huán)境溫度，并在環(huán)境溫度下繼續(xù)攪拌3小時(shí)。過濾漿狀物并用甲醇(250mL)洗滌。將固體晾干，然后在環(huán)境溫度下真空干燥至恒重，得到109.5g粗品(85.8％ee(對(duì)映異構(gòu)體過量)，收率98％)。將粗品固體(55.0g)和甲醇(440mL)一起回流1小時(shí)，然后冷卻至室溫，并在環(huán)境溫度下再攪拌3小時(shí)。過濾漿狀物，用甲醇(200mL)洗滌濾餅。將固體晾干，然后在30℃下真空干燥至恒重，得到49.6g(回收率90％)的(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺-N-乙酰基-L-亮氨酸鹽(98.4％ee)。
手性HPLC(乙醇∶20mM KH2PO4＝1∶99，pH為7.0，安捷倫公司的Ultron ES-OVS手性柱，150mm×4.6mm，流速為0.5mL/min.，檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm)18.4分鐘(S型異構(gòu)體，99.2％)，25.5分鐘(R型異構(gòu)體，0.8％)。
化合物A的制備向裝有機(jī)械攪拌器、溫度計(jì)和冷凝器的500ml三頸圓底燒瓶中加入(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺酰基)-乙-2-基胺-N-乙?；?L-亮氨酸鹽(25g，56毫摩爾，98％ee)、3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐(12.1g，58.8毫摩爾)和冰醋酸(250ml)。將反應(yīng)混合物回流過夜，然后冷卻至50℃以下。真空下除去溶劑，然后將殘余物溶于乙酸乙酯。用水(250ml×2)、飽和碳酸氫鈉水溶液(250ml×2)、鹽水(250ml×2)洗滌得到的溶液，并用硫酸鈉干燥。真空下蒸發(fā)除去溶劑，殘余物用含有乙醇(150ml)和丙酮(75ml)的二元溶劑重結(jié)晶。真空過濾分離出固體，并用乙醇(100ml×2)洗滌。60℃下將產(chǎn)品真空干燥至恒重，得到19.4g(收率75％)的S-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-氨基異吲哚啉-1，3-二酮(98％ee)。
手性HPLC(乙醇∶20mM KH2PO4＝15∶85，pH為3.5，安捷倫公司的Ultron ES-OVS手性柱，150mm×4.6mm，流速為0.4mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm)25.4分鐘(S型異構(gòu)體，98.7％)，29.5分鐘(R型異構(gòu)體，1.2％)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.47(t，3H)，2.26(s，3H)，2.87(s，3H)，3.68-3.75(dd，1H)，3.85(s，3H)，4.07-4.15(q，2H)，4.51-4.61(dd，1H)，5.84-5.90(dd，1H)，6.82-8.77(m，6H)，9.46(s，1H).13C-NMR(DMSO-d6)δ14.66，24.92，41.61，48.53，54.46，55.91，64.51，111.44，112.40，115.10，118.20，120.28，124.94，129.22，131.02，136.09，137.60，148.62，149.74，167.46，169.14，169.48.
5.3.實(shí)施例3TNF-α抑制人全血LPS-誘導(dǎo)TNF-α的測(cè)定化合物抑制LPS-誘導(dǎo)人全血TNF-α生成的能力主要通過下述測(cè)定人PBMC中脂多糖(LPS)-誘導(dǎo)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)，但使用新鮮提取的全血代替PBMC(George Muller等，1999年，Bioorganic&Medicinal Clemistry Letters，9期1625-1630頁)。人全血LPS-誘導(dǎo)TNF-α的IC50為294nM。
小鼠LPS-誘導(dǎo)血清TNF-α的抑制按照以前描述的方法(Corral等，1996年，Mol.Med，2期506-515頁)，用所述動(dòng)物模型測(cè)試化合物。小鼠LPS-誘導(dǎo)血清TNF-α的抑制(ED50，mg/kg，p.o.)＝0.05。
LPS-誘導(dǎo)TNF-α的生成脂多糖(LPS)是一種由如大腸桿菌(E.coli)的格蘭氏陰性菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素，LPS可誘導(dǎo)產(chǎn)生包括TNF-α在內(nèi)的多種促炎細(xì)胞因子。在外周血單核細(xì)胞(PBMC)中，應(yīng)答LPS產(chǎn)生的TNF-α起源于單核細(xì)胞，約占總PBMC的5-20％。按照前述方法(Muller等，1996年，J.MedChem.，39期3238頁)，測(cè)定化合物抑制LPS-誘導(dǎo)人PBMC的TNF-α生成的能力。通過Ficoll Hypaque(Pharmacia，Piscataway，NJ，USA)密度離心法，從正常供血者獲得PBMC。將細(xì)胞置于RPMI(LifeTechnologies，Grand Island，美國(guó)紐約)中培養(yǎng)，補(bǔ)加10％AB±型人血清(Gemini Bio-products，Woodland，CA，USA)、2mML-谷酰胺、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素(Life Technologies)。
PBMC(2×105細(xì)胞)平鋪于96-孔平底Costar組織培養(yǎng)板(Corning，紐約，USA)，一式三份。用加或不加化合物的100ng/ml的LPS(Sigma，St.Louis，MO，USA)刺激細(xì)胞。將化合物(Celgene Corp.，Warren，NJ，USA)溶于DMSO(Sigma)中，臨用前，在培養(yǎng)基中立即進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。在全部樣品中，DMSO終濃度均為0.25％。在LPS刺激1小時(shí)前，將化合物加至細(xì)胞中。在37℃、5％的二氧化碳條件下培養(yǎng)細(xì)胞18-20小時(shí)，然后收集上清液，用培養(yǎng)基稀釋，并通過ELISA(Endogen，Boston，MA，USA)測(cè)定TNF-α濃度。LPS-誘導(dǎo)TNF-α的IC50＝77nM。
IL-1β-誘導(dǎo)TNF-α的生成在炎性疾病的過程中，通常是細(xì)胞因子IL-1β而不是細(xì)菌衍生的LPS刺激TNF-α生成。按照上述LPS-誘導(dǎo)TNF-α生成的方法，測(cè)定化合物抑制IL-1β-誘導(dǎo)人PBMC TNF-α的生成的能力，但PBMC是通過Ficoll-Paque Plus(Amersham Pharmacia，Piscataway，NJ，USA)離心，從源白細(xì)胞單位(Source leukocyte unit)(Sera-Tec Biologicals，NorthBrunswick，NJ，USA)中分離得到，以3×105細(xì)胞/孔的密度，將PBMC平鋪于96-孔組織培養(yǎng)板中的包含10％的熱滅活的胎牛血清(Hyclone)、2mML-谷酰胺、100U/ml青霉素和100mg/ml鏈霉素(完全培養(yǎng)基)的RPMI-1640培養(yǎng)基(Bio Whittaker，Walkersville，美國(guó)馬里蘭州)中，在37℃、5％的二氧化碳條件下，在濕潤(rùn)的培養(yǎng)箱中，分別用濃度為10、2、0.4、0.08、0.016、0.0032、0.00064和0μM的化合物(DMSO終濃度為0.1％)，一式兩份預(yù)處理1小時(shí)，然后用50ng/ml的重組人IL-1β(Endogen)刺激18小時(shí)。IL-1β-誘導(dǎo)TNF-α的IC50＝83nM。
5.4.實(shí)施例4PDE選擇性PDE1、2、3、5和6酶的測(cè)定通過測(cè)定單一濃度(10μM)的化合物抗牛PDE1、來自人血小板的人PDE2、PDE3和PDE5(Hidaka和Asano，1976年，Biochem.Biophys.Acta，429期485頁，和Nicholsen等，1991年，Trends Pharmaco.Sci.，12期19頁)以及來自牛視桿外節(jié)的PDE6(Baehr等，1979年，J.Biol.Chem.，254期11669頁，和Gillespie等，1989年，Mol.Pharm.，36期773頁)的活性，來評(píng)價(jià)化合物對(duì)PDE4的選擇特異性。結(jié)果列在表1中。
PDE7酶的測(cè)定PDE7是一種主要在T細(xì)胞表達(dá)并存在于骨骼肌中的cAMP-選擇性PDE。通過PDE7抑制，可調(diào)節(jié)T細(xì)胞衍生的例如IL-2和IFN-γ的細(xì)胞因子。采用先前描述的陰離子交換色譜法(Bloom和Beavo，1996年，Proc.Natl.Acad Sci.USA，93期14188-14192頁)，將Hut78人T細(xì)胞純化得到PDE7，同下表1中對(duì)PDE4的描述，在10nM的cAMP存在下，測(cè)試化合物抗PDE7制備的活性。
表1.
*化合物B為化合物A的對(duì)映異構(gòu)體。
5.5.實(shí)施例5PDE4抑制PDE4(由U937細(xì)胞衍生)酶的測(cè)定按照前述凝膠過濾層析法(Muller等，1998年，Bioorg.&Med ChemLett，8期2669-2674頁)，將U937人單核細(xì)胞純化得到PDE4酶。30℃下在的50mM Tris-HCl(pH為7.5)、5 mM MgCl2、1μM cAMP、10nM[3H]-cAMP中，進(jìn)行磷酸二酯酶反應(yīng)30分鐘，然后通過煮沸終止，用1mg/ml的蛇毒處理，并按照前述方法(Muller等，1998年，Bioorg.&MedChem Lett，8期2669-2674頁)，用AG-1XS離子交換樹脂(BioRad)分離。
反應(yīng)消耗的有效底物在15％以下。結(jié)果列在表1中。
5.6.實(shí)施例6人T細(xì)胞的測(cè)定SEB誘導(dǎo)IL-2和IFN-γ的生成葡萄球菌腸毒素B(SEB)是革蘭氏陽性菌-金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)衍生的超級(jí)抗原。SEB提供了一種對(duì)T細(xì)胞表達(dá)的特殊T細(xì)胞受體Vβ鏈具有特異性的方便的生理刺激。按照上述方法，將人PBMC(由約50％的T細(xì)胞組成)從源白細(xì)胞單位分離，并以3×105細(xì)胞/孔的濃度，平鋪在96孔組織培養(yǎng)板的完全培養(yǎng)基中，在37℃、5％的二氧化碳條件下，在濕潤(rùn)的培養(yǎng)箱中，分別用濃度為10、2、0.4、0.08、0.016、0.0032、0.00064和0μM的化合物(DMSO終濃度為0.1％)，一式兩份預(yù)處理1小時(shí)，然后用100ng/ml的SEB(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO，USA)刺激18小時(shí)。通過ELISA(R&D Systems，Minneapolis，MN，USA)測(cè)定IL-2和IFN-γ的濃度。IL-2的IC50＝291nM，IFN-γ的IC50＝46nM。
5.7.實(shí)施例6cAMP升高的測(cè)定PGE2-誘導(dǎo)cAMP升高將前列腺素E2(PGE2)結(jié)合至單核細(xì)胞、T細(xì)胞和其他白細(xì)胞上的前列腺素受體上，隨后提高了細(xì)胞內(nèi)cAMP的水平，導(dǎo)致抑制了細(xì)胞應(yīng)答。PGE2和PDE4抑制劑的結(jié)合協(xié)同升高了這些類型的細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平，而且在PGE2存在下，PDE4抑制劑引起的PBMC內(nèi)的cAMP水平升高與這些PDE4抑制劑的抑制活性成正比。通過以下方法測(cè)定人PBMC的細(xì)胞內(nèi)的cAMP按上述方法分離PBMC，并以1×106細(xì)胞/孔的濃度平鋪在96孔培養(yǎng)板的RPMI-1640培養(yǎng)基中。在37℃、5％的二氧化碳條件下，在濕潤(rùn)的培養(yǎng)箱中，分別用濃度為100、10、1、0.1、0.01和0μM的化合物(DMSO終濃度為2％)，一式兩份預(yù)處理細(xì)胞1小時(shí)。然后用PGE2(10μM)(Sigma)刺激1小時(shí)。用HCl(終濃度為0.1N)溶解細(xì)胞，以便抑制磷酸二酯酶的活性，然后將培養(yǎng)板置于-20℃下冷凍。使用cAMP(低pH)免疫測(cè)定試劑盒(R&DSystems)測(cè)定生成的cAMP。消旋體的PBMC cAMP EC50為3.09μM，化合物A的PBMC cAMP EC50為1.58μM。
按以下方法測(cè)定人嗜中性粒細(xì)胞內(nèi)的cAMP的升高通過Ficoll-Paque Plus(Amersham Pharmaca)離心，將PBMC從源白細(xì)胞(Sera-TecBiologicals)中分離。將得到的紅細(xì)胞/多形核細(xì)胞(PMN)粒狀沉淀物再懸浮在Hank′s平衡鹽溶液(Bio Whittaker)中，并與相同體積的溶于0.9％生理鹽水的3％的右旋糖酐T-500(Amersham Pharmacia)混合。
將紅細(xì)胞沉降20分鐘，然后分離PMN，并在4℃下以120rpm的轉(zhuǎn)速離心8分鐘。將剩余的紅細(xì)胞溶解在冷的0.2％的生理鹽水中30秒，并加入相同體積的1.6％的生理鹽水，將這些細(xì)胞復(fù)原至等滲。在4℃下以1200rpm的轉(zhuǎn)速離心PMN8分鐘，然后再懸浮在RPMI-1640中，并按照上述PBMC測(cè)定方法，測(cè)定cAMP的升高。使用FACSCalibur(Becton Dickinson，San Jose，CA，USA)的流式細(xì)胞計(jì)測(cè)定，結(jié)果表明PMN約為74％CD18/CD11b+、71％CD16+CD9+的嗜中性粒細(xì)胞。結(jié)果列入表2中。
fMLF-誘導(dǎo)LTB4的生成N-甲?；?蛋氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸(fMLF)是一種細(xì)菌衍生肽，其激活嗜中性粒細(xì)胞迅速地脫粒、遷移、粘附至內(nèi)皮細(xì)胞上，并釋放白三烯LTB4(一種花生四烯酸的代謝產(chǎn)物并且其自身為一種嗜中性粒細(xì)胞化學(xué)誘引劑)。按照前述方法(Hatzelmann和Schudt，2001年，J.Pharm.Exp.ther.，297期267-279頁)和下面的改進(jìn)方法，測(cè)試化合物阻斷fMLF-誘導(dǎo)的嗜中性LTB4的生成的能力。按照上述方法分離嗜中性粒細(xì)胞，并再懸浮在無鈣或鎂的含有10mM HEPES(pH為7.2)的磷酸鹽緩沖鹽水(Bio Whittaker)中，然后以1.7×106細(xì)胞/孔的濃度，平鋪在96孔培養(yǎng)板中。在37℃、5％的二氧化碳條件下，用50μm的硫柳汞(Sigma)/lmM CaCl2/mM MgCl2處理細(xì)胞15分鐘，然后分別用濃度為1000、200、40、8、1.6、0.32、0.064和0nM的化合物(DMSO終濃度為0.01％)一式兩份處理10分鐘。用1μm的fMLF刺激嗜中性粒細(xì)胞30分鐘，然后加入甲醇(終濃度為20％)溶解，并在干冰/異丙醇浴中冷凍10分鐘。在-70℃保存溶胞產(chǎn)物，直至通過競(jìng)爭(zhēng)性LTB4 ELISA(R&D Systems)測(cè)定LTB4的含量。結(jié)果如表2所示。
酵母聚煻-誘導(dǎo)IL-8的生成將酵母聚糖A或熱滅活的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)結(jié)合至嗜中性粒細(xì)胞表面的Mac-1粘著分子上，并引發(fā)吞噬、細(xì)胞活化和IL-8生成。按照前述方法(Au等，1998年，Brit.J.Pharm.123期1260-1266頁)和下面的改進(jìn)方法測(cè)定酵母聚糖誘導(dǎo)的IL-8生成。按上述方法純化人嗜中性粒細(xì)胞，以3×105細(xì)胞/孔的濃度，平鋪在96孔組織培養(yǎng)板的完全培養(yǎng)基中，在37℃、5％的二氧化碳條件下，用濃度分別為10、2、0.4、0.08、0.016、0.0032、0.00064和0μM的化合物(DMSO終濃度為0.1％)，一式兩份處理1小時(shí)。然后用未調(diào)理的、煮沸過的酵母聚糖A(Sigma)以2.5×105顆粒/孔的濃度刺激嗜中性粒細(xì)胞18小時(shí)。收獲上清液，并通過ELISA(R&D Systems)測(cè)試IL-8。結(jié)果如表2所示。
fMLF-誘導(dǎo)CD18/CD11b的表達(dá)按照前述方法(Derian等，1995年，J.Immunol.，154期308-317頁)并作如下改動(dòng)，測(cè)定在嗜中性粒細(xì)胞上表達(dá)的CD18/CD11b(Mac-1)。按上述方法分離嗜中性粒細(xì)胞，然后以1×106細(xì)胞/ml的濃度重懸浮在完全培養(yǎng)基中，并在37℃、5％的二氧化碳條件下，用濃度分別為10、1、0.1、0.01和0μM的化合物(DMSO終濃度為0.1％)，一式兩份預(yù)處理10分鐘。然后用30nM fMLF刺激細(xì)胞30分鐘，并冷卻至4℃。用兔IgG(Jackson Immuno Research Labs，West Grove，PA，USA)(10μg/1×106細(xì)胞)處理細(xì)胞以阻斷Fc受體，用CD18-FITC和CD11b-PE(Becton Dickinson)染色，并通過FACSCalibur上的流式細(xì)胞計(jì)進(jìn)行分析。從全部樣品中扣除無刺激存在時(shí)的CD18/CD11b表達(dá)(平均熒光)，得到抑制曲線，并計(jì)算IC50值。結(jié)果如表2所示。
fMLF-誘導(dǎo)在HUVEC上的粘著按照前述方法(Derian等，1995年，J.Immunol.，154期308-317頁)并作如下改動(dòng)，將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)用作嗜中性粒細(xì)胞粘著的底物。HUVEC細(xì)胞來自Anthrogenesis(Cedar Knolls，NJ，USA)，并且嗜中性粒細(xì)胞不經(jīng)過細(xì)胞分裂抑素B處理。用濃度分別為10、1、0.1、0.01、0.001和0μM的化合物(DMSO終濃度為0.1％)，一式兩份處理細(xì)胞10分鐘，然后用500nMfMLF刺激30分鐘，并在用FLX800板式閱讀器(Bio-Tek Instruments，Winooski，VT，USA)測(cè)定熒光前，用PBS洗滌兩次。結(jié)果如表2所示。
表2
5.8.實(shí)施例8水溶解性在pH為7.4的緩沖水溶液中測(cè)定平衡溶解度。pH為7.4的緩沖溶液通過用10N的NaOH將0.07M的NaH2PO4溶液的pH調(diào)節(jié)至7.4制備。該溶液的離子強(qiáng)度為0.15。將至少1mg的粉末與1ml的緩沖液混合，制備濃度大于1mg/ml的混合物。將這些樣品搖蕩超過2小時(shí)，并在室溫下放置過夜。然后通過先用樣品飽和的0.45μm的尼龍注射器過濾器過濾樣品。從濾液中連續(xù)取樣兩次。以在50％甲醇中制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比，通過HPLC測(cè)定濾液?；衔顰的水溶解度比外消旋混合物大3.5倍。測(cè)定的溶解度結(jié)果為化合物A＝0.012mg/ml；外消旋混合物＝0.0034mg/ml。
5.9.實(shí)施例8LPS誘導(dǎo)的肺中性白細(xì)胞增多癥的白鼬模型當(dāng)通過口服途徑給藥時(shí)，有意識(shí)的白鼬模型用于研究PDE4抑制劑的抗炎、催吐和行為作用。根據(jù)這些實(shí)驗(yàn)，可確定各PDE4抑制劑的治療指數(shù)(TI)。TI值通過引起催吐發(fā)作和行為改變的閾劑量除以抗炎劑量(抑制LPS-誘導(dǎo)的中性白細(xì)胞增多癥50％的劑量)計(jì)算。
動(dòng)物飼養(yǎng)雄白鼬(Mustela Pulorius Euro，體重1-2 kg)。白鼬由Bury GreenFarm或Misay Consultancy提供。白鼬運(yùn)來后，先在飼養(yǎng)室適應(yīng)環(huán)境至少7天時(shí)間。食物包括可隨意喂的粒狀SDS飼料C，以及每周喂3次的Whiskers貓食物。水為用巴氏法滅菌的動(dòng)物級(jí)飲用水，并且每天更換。
PDE4抑制劑給藥PDE4抑制劑經(jīng)口服給藥，初始劑量為1-10mg/kg，但以后增加至30mg/kg，以便確定TI是否為10或更高，和/或以較低的劑量確定抑制中性白細(xì)胞增多癥50％的最小劑量。晚上禁止喂白鼬，但允許自由飲水。通過經(jīng)喉的后面進(jìn)入食管的15cm的定量針筒，將PDE4抑制劑或載體經(jīng)口途徑給予該動(dòng)物。給藥后，將白鼬送回配有Perspex有機(jī)玻璃門的飼養(yǎng)籠中，以便觀察，并且白鼬可自由飲水。給藥后，連續(xù)觀察白鼬，并記錄任何嘔吐或行為的改變?？诜o藥60-90分鐘后，允許白鼬進(jìn)食。
暴露在LPS中口服化合物或?qū)φ蛰d體30分鐘后，將白鼬置于密封的Perspex有機(jī)玻璃容器中，并暴露在LPS(100μm/ml)氣霧中10分鐘。通過噴霧器(De Vilbiss，USA)產(chǎn)生LPS氣霧，并直接噴入所述Perspex有機(jī)玻璃暴露室中。暴露10分鐘后，將白鼬送回飼養(yǎng)籠，并允許自由進(jìn)水，并在稍后階段，允許進(jìn)食。口服給藥后，連續(xù)觀察至少2.5小時(shí)，并記錄催吐發(fā)作和行為改變。
支氣管肺泡灌洗暴露在LPS中6小時(shí)后，經(jīng)腹腔給予過量的戊巴比妥鈉，將白鼬處死。然后在氣管插聚丙烯管，并用20ml肝素化(10單位/ml)的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)灌洗肺兩次。
血樣/組織切除經(jīng)胸心臟穿刺，將末端血樣(10ml)切除。以2500rpm的轉(zhuǎn)速將血樣離心15分鐘，除去血漿并置于-20℃下保存。為分析化合物含量，也將腦切除，并置于-20℃下冷凍。
細(xì)胞計(jì)數(shù)以1500rpm的轉(zhuǎn)速，將支氣管肺泡灌洗(BAL)的樣品離心15分鐘。然后除去上清液，并將得到的細(xì)胞顆粒狀物重懸浮在1ml的PBS中。制備重懸浮液的細(xì)胞涂片，并用Leishmans著色劑染色，以便細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。通過余下的重懸浮樣品確定細(xì)胞總數(shù)?；诖?，可確定BAL中嗜中性粒細(xì)胞的總數(shù)。
參數(shù)測(cè)定1.LPS誘導(dǎo)的肺中性白細(xì)胞增多癥的抑制％。
2.催吐發(fā)作-記錄的嘔吐和干嘔次數(shù)。
3.行為改變-記錄以下行為結(jié)果流誕，氣促，抓嘴，體位變平，協(xié)調(diào)不能，拱背和倒行。通過應(yīng)用嚴(yán)重度級(jí)別(輕度、中度和嚴(yán)重)對(duì)其中任一行為改變進(jìn)行半數(shù)定量。
4.用發(fā)現(xiàn)的未引起催吐發(fā)作的最大劑量，除以抑制肺中性白細(xì)胞增多癥50％或以上的最低劑量計(jì)算TI。
化合物A對(duì)LPS-在有意識(shí)的白鼬的肺中誘導(dǎo)的中性白細(xì)胞增多癥的作用，如圖1所示。
嘔吐和行為改變白鼬經(jīng)口服給予PDE4后，觀察至少2小時(shí)，并記錄催吐發(fā)作(嘔吐和干嘔)和行為變化。
預(yù)先口服給予相應(yīng)載體(丙酮/cremophor/蒸餾水)的白鼬，沒有觀察到催吐發(fā)作(嘔吐和干嘔)。發(fā)現(xiàn)有少數(shù)對(duì)照處理的白鼬(7/22)出現(xiàn)輕度的行為改變(舔唇和倒行)。
化合物A(0.1-3 mg/kg，口服)沒有引起催吐發(fā)作(嘔吐和干嘔)。只觀察到一些分級(jí)為輕度的行為改變(體位變平、舔唇和倒行)。當(dāng)劑量為10mg/kg時(shí)，發(fā)現(xiàn)有2/6的白鼬出現(xiàn)干嘔(不是直接嘔吐)，同時(shí)觀察到流誕和行為改變(記分為輕度或中度)。在實(shí)驗(yàn)的最高劑量(30mg/kg)時(shí)，觀察到3/4的白鼬有中度到顯著的嘔吐，并有顯著的行為改變。表III中總結(jié)了這些數(shù)據(jù)。
下面列表示出噪聲容限。存在輕微的下降，但是其增量小于仿真的精度。
通過在P+擴(kuò)散和PC的相交處植入一P+溝道可消除該接地電阻。
類似的概念可在一PFET通閘單元的另一可選擇實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)，在該情況中，將是N+擴(kuò)散與VDD相交。圖7是一PFET通閘單元的示意圖，該P(yáng)FET通閘單元在概念上與圖6的示意圖類似，但是其中所有的N裝置都換成P裝置，所有的P裝置都換成N裝置，并且VDD和GND已對(duì)換。
盡管這里詳細(xì)說明了涉及一種具有阱接觸和與地相交的P+擴(kuò)散或與VDD相交的N+擴(kuò)散的SRAM單元的本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例和變型，但是對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員很明顯，本發(fā)明的公開和教導(dǎo)意味著可進(jìn)行許多可選擇的設(shè)計(jì)。
表IV.抑制LPS-誘導(dǎo)的肺中性白細(xì)胞增多癥的有效劑量(ED50)、誘導(dǎo)嘔吐以及根據(jù)這些數(shù)據(jù)計(jì)算的治療指數(shù)的總結(jié)。
5.10.實(shí)施例9200mg劑量的膠囊表V舉例說明了200mg化合物A的單位劑量的批處方和單劑量處方，即約40％重量，0號(hào)膠囊填充。
表V.200mg膠囊處方
將預(yù)膠化淀粉(SPRESS B-820)和化合物A組分過710μm篩，然后放于帶有插入擋板的擴(kuò)散式混合器中，混合15分鐘。將硬脂酸鎂過210μm篩，并加至所述擴(kuò)散式混合器中。使用Dosator型膠囊填充機(jī)，用0號(hào)膠囊充填混合物，每粒膠囊為500mg(每批8400粒膠囊)。
5.11.實(shí)施例10100mg口服劑型表VI舉例說明了包含100mg化合物A的批處方和單位劑量處萬。
表VI.100mg片處方
將微晶纖維素、交聯(lián)羧甲纖維素鈉和化合物A組分過30目篩(約430μ-655μ)。將Pluronic F-68(KS.Lenexa的RH Biosciences，Inc.生產(chǎn))表面活性劑過20目篩(約457μ-1041μ)。將Pluronic F-68表面活性劑和0.5kg交聯(lián)羧甲纖維素鈉加至16夸脫的雙錐滾動(dòng)式混合機(jī)中，并混合約5分鐘。將混合物轉(zhuǎn)移到3立方英尺的雙錐滾動(dòng)式混合機(jī)中，加入微晶纖維素，并混合約5分鐘。加入沙利度胺，再混合25分鐘。該預(yù)混物經(jīng)在出料口掛接錘式粉碎機(jī)的干式壓輥造粒機(jī)制粒，然后再返回所述搖擺式混合機(jī)中。將剩余的交聯(lián)羧甲纖維素鈉和硬脂酸鎂加至滾動(dòng)式混合機(jī)中，并混合約3分鐘。最終混合物用旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)壓片，片重為250mg/片(每批200,000片)。
5.12.實(shí)施例11氣霧劑劑型將化合物A和12.6kg的三氯一氟甲烷在配備高剪切混合機(jī)的密封不銹鋼容器中混合，制備濃縮液?；旌线M(jìn)行約20分鐘。將所述濃縮液與平衡量的拋射劑，在溫度控制在21℃-27℃、壓力控制在2.8-4.0bar的批量生產(chǎn)罐中，混合制備批量懸浮液。使用具有一計(jì)量閥的17ml氣霧劑容器，其被設(shè)計(jì)為可提供100次本發(fā)明的組合物的吸入量。每只容器含有以下組分化合物A 0.0120g三氯一氟甲烷1.6939g二氯二氟甲烷3.7175g二氯四氟乙烷1.5766g總共7.0000g雖然已采用具體的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作出描述，但是對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，各種可能的變更和修改是顯而易見的，沒有偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的的宗旨和范圍。這些修改也將落入附加的權(quán)利要求書的范圍。
權(quán)利要求
1.一種抑制TNF-α生成的方法，所述方法包括將產(chǎn)生TNF-α的細(xì)胞與有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物接觸。
2.一種抑制PDE4活性的方法，所述方法包括將PDE4與有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物接觸。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述接觸是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述細(xì)胞是人細(xì)胞。
5.一種治療或預(yù)防患者的可通過降低TNF-α水平而改善的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
6.一種治療或預(yù)防癌的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
7.權(quán)利要求5或6的方法，所述方法還包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的烷基化劑、氮芥、JNK抑制劑、抗生素、抗腫瘤藥、氮丙啶、甲基蜜胺、磺酸烷基酯、亞硝基脲、三氮烯、葉酸類似物、嘧啶類似物、嘌呤類似物、長(zhǎng)春花生物堿、表鬼臼毒素、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑或抗癌疫苗。
8.權(quán)利要求6的方法，其中所述癌為實(shí)體瘤。
9.權(quán)利要求6的方法，其中所述癌為血液性腫瘤。
10.權(quán)利要求6的方法，其中所述癌為多發(fā)性骨髓瘤、急性白血病、成淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓性白血病、淋巴細(xì)胞性白血病或髓細(xì)胞性白血病。
11.權(quán)利要求8的方法，其中所述實(shí)體瘤為乳瘤、結(jié)腸瘤、直腸瘤、結(jié)腸直腸瘤、腎瘤或神經(jīng)膠質(zhì)瘤。
12.權(quán)利要求5或6的方法，其中所述患者為哺乳動(dòng)物。
13.權(quán)利要求5或6的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮是經(jīng)胃腸外、經(jīng)皮、粘膜、鼻、口頰、舌下或口給藥。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮是經(jīng)口給藥。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮是以片劑或膠囊劑形式經(jīng)口給藥。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天1mg-1000mg。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天5mg-500mg。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天10mg-200mg。
19.一種治療或預(yù)防患者的可通過抑制PDE4而改善的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
20.一種治療或預(yù)防抑郁癥、哮喘、炎癥、皮炎、銀屑病、特異性皮炎、接觸性皮炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、慢性阻塞性肺病、慢性肺炎、腸炎、節(jié)段性回腸炎、白塞病或結(jié)腸炎的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
21.一種控制細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的方法，所述方法包括將細(xì)胞與有效量的立體異構(gòu)體純的(-)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物接觸。
22.一種治療或預(yù)防患者M(jìn)DS的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
23.一種治療或預(yù)防患者M(jìn)PD的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
24.一種治療或預(yù)防患者的復(fù)合性區(qū)域性疼痛綜合征的方法，所述方法包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
25.權(quán)利要求19或20的方法，所述方法還包括給予需要這些治療或預(yù)防的患者治療或預(yù)防有效量的抗組胺藥、抗炎藥、非甾體抗炎藥或甾體藥物。
26.權(quán)利要求19的方法，其中所述疾病或病癥為哮喘、過敏性鼻炎、炎癥或慢性肺炎。
27.權(quán)利要求19的方法，其中所述疾病或病癥為慢性阻塞性肺病。
28.權(quán)利要求19或20的方法，其中所述患者為哺乳動(dòng)物。
29.權(quán)利要求19或20的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮經(jīng)胃腸外、經(jīng)皮、粘膜、鼻、口頰、舌下或口給藥。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮是經(jīng)口給藥。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮是以片劑或膠囊劑形式經(jīng)口給藥。
32.權(quán)利要求19或20的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天1mg-1000mg。
33.權(quán)利要求32的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天5mg-500mg。
34.權(quán)利要求33的方法，其中所述治療或預(yù)防有效量約為每天10mg-200mg。
35.一種藥用組合物，所述組合物包含立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的多晶型物、前藥、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物，以及藥學(xué)可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
36.權(quán)利要求35的藥用組合物，所述藥用組合物適合經(jīng)胃腸外、經(jīng)皮、粘膜、鼻、口頰、舌下或口給予患者。
37.權(quán)利要求36的藥用組合物，所述藥用組合物適合經(jīng)口給予患者。
38.權(quán)利要求30的藥用組合物，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量為1mg-1000mg。
39.權(quán)利要求38的藥用組合物，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量為5mg-500mg。
40.權(quán)利要求39的藥用組合物，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量為10mg-200mg。
41.一種單位劑型，所述劑型包含立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物；以及藥學(xué)可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
42.權(quán)利要求41的劑型，所述劑型適合經(jīng)胃腸外、經(jīng)皮、粘膜、鼻、口頰、舌下或口給予患者。
43.權(quán)利要求42的劑型，所述劑型為膠囊劑或片劑。
44.權(quán)利要求43的劑型，所述劑型為氣霧劑。
45.權(quán)利要求41的劑型，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量約為1mg-1000mg。
46.權(quán)利要求45的劑型，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量約為5mg-500mg。
47.權(quán)利要求46的劑型，其中所述立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的量約為10mg-200mg。
48.基本不含其(-)異構(gòu)體的立體異構(gòu)體純的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學(xué)可接受的前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物或籠形包合物。
49.一種制備2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮的立體異構(gòu)體純的對(duì)映異構(gòu)體的方法，所述方法包括以下步驟(a)將1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙胺與手性氨基酸在足以生成1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺?；?乙胺手性氨基酸鹽的條件下反應(yīng)；并(b)將1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺?；?乙胺手性氨基酸鹽與N-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異苯并呋喃-4-基)-乙酰胺在足以生成終產(chǎn)物的條件下反應(yīng)。
50.權(quán)利要求49的方法，其中所述手性氨基酸為以下各氨基酸的L異構(gòu)體丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、鳥氨酸、4-氨基丁酸、2-氨基異丁酸、3-氨基丙酸、鳥氨酸、正亮氨酸、正纈氨酸、羥基脯氨酸、肌氨酸、瓜氨酸、磺基丙氨酸、叔丁基甘氨酸、叔丁基丙氨酸、苯基甘氨酸、環(huán)己基丙氨酸或N-乙酰基-亮氨酸。
51.權(quán)利要求50的方法，其中所述手性氨基酸為N-乙?；?L-亮氨酸。
52.一種(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺?；?-乙-2-基胺的立體異構(gòu)體純的鹽。
53.權(quán)利要求52的立體異構(gòu)體純的鹽，所述鹽為手性氨基酸鹽。
54.權(quán)利要求53的立體異構(gòu)體純的鹽，所述鹽為以下各氨基酸的L異構(gòu)體的鹽丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、鳥氨酸、4-氨基丁酸、2-氨基異丁酸、3-氨基丙酸、鳥氨酸、正亮氨酸、正纈氨酸、羥基脯氨酸、肌氨酸、瓜氨酸、磺基丙氨酸、叔丁基甘氨酸、叔丁基丙氨酸、苯基甘氨酸、環(huán)己基丙氨酸或N-乙?；?亮氨酸。
55.權(quán)利要求54的立體異構(gòu)體純的鹽，所述鹽為(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲磺酰基)-乙-2-基胺N-乙?；?L-亮氨酸鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及立體異構(gòu)體純的(+)－2－[1－(3－乙氧基－4－甲氧基苯基)－2－甲磺?；一鵠－4－乙酰氨基異吲哚啉－1，3－二酮(基本上不含其(－)異構(gòu)體)及其前藥、代謝物、多晶型物、鹽、溶劑合物、水合物和籠形包合物。本發(fā)明也涉及2－[1－(3－乙氧基－4－甲氧基苯基)－2－甲磺?；一鵠－4－乙酰氨基異吲哚啉－1，3－二酮的(+)對(duì)映異構(gòu)體的使用方法和包含該化合物的藥用組合物。所述方法包括治療和/或預(yù)防可通過降低TNF－α水平或抑制PDE4而改善的病癥的方法。
文檔編號(hào)A61P35/02GK1652772SQ03811093
公開日2005年8月10日 申請(qǐng)日期2003年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月20日
發(fā)明者P·H·謝菲爾, G·W·穆勒, H·-W·滿, C·葛 申請(qǐng)人:細(xì)胞基因公司