專(zhuān)利名稱：新穎的噻吩脒、其組合物和治療補(bǔ)體－介導(dǎo)疾病與病癥的方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域。確切而言，本發(fā)明涉及新穎的雜環(huán)脒和它們抑制C1s酶的用途，所述酶是經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)途徑中的一種蛋白酶；還涉及這種抑制作用治療或改善哺乳動(dòng)物急性或慢性障礙的用途。
相關(guān)技術(shù)人體免疫系統(tǒng)配備有若干防御機(jī)制，以響應(yīng)于細(xì)菌、病毒或寄生蟲(chóng)感染和損傷。一種這樣的防御機(jī)制牽涉補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體由大約30種血漿與膜蛋白組分的復(fù)雜系列組成，它們很多是蛋白酶。一旦被激活，這種酶系統(tǒng)通過(guò)調(diào)控免疫應(yīng)答、溶解靶細(xì)胞、刺激血管與其他平滑肌細(xì)胞、促進(jìn)免疫復(fù)合物的運(yùn)輸、產(chǎn)生導(dǎo)致肥大細(xì)胞脫粒與組胺釋放的過(guò)敏毒素、刺激白細(xì)胞向補(bǔ)體活動(dòng)區(qū)域的趨化性(移行)、激活B淋巴細(xì)胞與巨噬細(xì)胞和誘導(dǎo)吞噬作用與細(xì)胞溶解，非特異性地補(bǔ)充抗體的免疫學(xué)特異性效果(Eisen，H.N.，Immunolgy，Harper & Row Publishers，Inc.，Hagerstown，Md.，p.512(1974)；Roitt，I.et al.，Immunology，Gower Medical Publishing，London，New York，pp.7.1-7.14(1985)；美國(guó)專(zhuān)利Nos.5,472,939和5,268,363)。
補(bǔ)體系統(tǒng)起到“級(jí)聯(lián)”的作用。當(dāng)無(wú)活性酶前體分子通過(guò)有限的蛋白水解作用被膜-結(jié)合酶激活時(shí)，引發(fā)該酶級(jí)聯(lián)。酶前體失去小的片斷，露出初生的膜結(jié)合位點(diǎn)。主片斷然后與膜結(jié)合成補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的下一功能活性酶。由于每種酶能夠激活很多酶前體，該系統(tǒng)形成不斷擴(kuò)增的級(jí)聯(lián)，類(lèi)似在血液凝固和纖維蛋白溶解中所見(jiàn)到的反應(yīng)(Roitt，I.et al.，Immunology，Gower Medical Publishing，London，New York，pp.7.1-7.14(1985))。
補(bǔ)體系統(tǒng)的蛋白質(zhì)構(gòu)成兩種相關(guān)的酶級(jí)聯(lián)，稱為經(jīng)典的和替代的途徑。經(jīng)典途徑通常被抗原-抗體復(fù)合物引發(fā)，而替代途徑被特異性多糖激活，所述多糖經(jīng)常見(jiàn)于細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)的細(xì)胞表面上。經(jīng)典途徑由組分C1-C9組成，而替代途徑由組分C3-C9(C4除外)和若干因子組成，所述因子例如B因子、D因子和H因子。
構(gòu)成經(jīng)典補(bǔ)體途徑的事件順序由三個(gè)階段組成識(shí)別、酶活化和引起細(xì)胞死亡的膜攻擊。補(bǔ)體活化的第一時(shí)相開(kāi)始于C1。C1由三種不同的蛋白質(zhì)構(gòu)成識(shí)別亞單位C1q和絲氨酸蛋白酶亞組分C1r與C1s，所述亞組分一起結(jié)合在鈣-依賴性四聚復(fù)合物中C1r2s2。完整的C1復(fù)合物是導(dǎo)致C1的生理性活化所必需的。當(dāng)完整的C1復(fù)合物結(jié)合與抗原復(fù)合的免疫球蛋白時(shí)，發(fā)生活化。這種結(jié)合激活C1s，然后裂解C4和C2蛋白質(zhì)，生成C4a和C4b以及C2a和C2b。C4b和C2a片斷聯(lián)合生成C3轉(zhuǎn)化酶，所述酶繼而裂解C3生成C3a和C3b(Makrides，Pharmacol.Rev.5059-87(1998)；美國(guó)專(zhuān)利No.5,268,363)。經(jīng)典與替代途徑都能夠各自誘導(dǎo)C3轉(zhuǎn)化酶的產(chǎn)生，將C3轉(zhuǎn)化為C3b，C3b的生成是補(bǔ)體途徑的中心事件。C3b與存在于嗜中性白細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上的C3b受體結(jié)合，從而激活末端溶解性補(bǔ)體序列C5-C9(Roitt，I.et al.，Immunology，Gower Medical Publishing，London，New York，pp.7.1-7.14(1985))。
補(bǔ)體被設(shè)計(jì)成對(duì)抗感染和損傷；不過(guò)，同一機(jī)制如果被不適當(dāng)?shù)丶せ?，能夠?qū)е麓罅康难装Y和組織損害，是迅速與侵入性酶活性的結(jié)果。補(bǔ)體-誘發(fā)的炎癥和組織損害在大量疾病狀態(tài)中都有牽連，包括克羅恩病的腸部炎癥，它是以單核與多形核白細(xì)胞的淋巴樣浸潤(rùn)為特征的(Ahrenstedt et al.，New Engl.J.Med.3221345-9(1990))；熱損傷(灼傷、凍瘡)(Gelfand et al.，J.Clin.Invest.701170(1982)；Demling et al.，Surgery 10652-9(1989))；血液透析(Deppisch etal.，Kidney Inst.37696-706(1990)；Kojima et al.，Nippon JebzoGakkai Shi 3191-7(1989))；心肺分流術(shù)中的泵后綜合征(Chenowethet al.，Complemen.Inflamm.3152-165(1981)；Chenoweth et al.，Complement 3152-165(1986)；Salama et al.，N.Engl.J.Med.318408-14(1988))；和局部缺血(Huang et al.，Science 285595(1999)；Naka et al.，Transplantation 641248(1997)；Pembertonet al.，J.Immunol.1505104(1993)；Chavez-Cartaya et al.，Transplantation 591047(1995)；Hill et al.，J.Immunol.1491723(1992)；Weisman et al.，Science 249146(1990))。補(bǔ)體和白細(xì)胞據(jù)報(bào)道在成人呼吸窘迫綜合征發(fā)病中都有牽連(Zilow et al.，Clin.Exp.Immunol.79151-57(1990)；Langlois et al.，HeartLung 1871-84(1989))。有人提出補(bǔ)體系統(tǒng)的活化參與致命性膿毒病并發(fā)癥的形成(Hack et al.，Am.J.Med.8620-26(1989))，導(dǎo)致自體免疫疾病動(dòng)物模型的組織損傷，例如免疫復(fù)合物-誘發(fā)的血管炎(Cochrane，Springer Seminar Immunopathol.7263(1984))、腎小球腎炎(Couser et al.，Kidney Inst.29879(1985))、II型膠原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(Watson & Townes，J.Exp.Med. 1621878(1985))和實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性神經(jīng)炎(Feasby et al.，Brain Res.41997(1987))。補(bǔ)體系統(tǒng)還參與超急性同種異體移植與超急性異種移植排斥(Knechtleet al.，J.Heart Transplant 4(5)541(1985)；Guttman，Transplantation 17383(1974)；Adachi et al.，Trans.Proc.19(1)1145(1987))。重組IL-2免疫療法期間的補(bǔ)體活化似乎導(dǎo)致從IL-2治療所觀察到的嚴(yán)重毒性和副作用(Thijs et al.，J.Immunol.1442419(1990))。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)由補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的經(jīng)典部分所生成的補(bǔ)體片斷存在于針對(duì)自體免疫疾病中固有組織生成的免疫復(fù)合物中。這類(lèi)疾病包括但不限于橋本甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的腎小球腎炎與皮膚傷害、其他類(lèi)腎小球腎炎(glomerulonephritides)、大皰性類(lèi)天皰瘡、皰疹樣皮炎、古德帕斯丘綜合征、格雷夫斯病、重癥肌無(wú)力、胰島素抵抗、自體免疫性溶血性貧血、自體免疫性血小板減少性紫癜和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Biesecker et al.J.Exp.Med.1541779(1981)；Biesecker et al.，N.Engl.J.Med.306264(1982)；Falk et al.，Clin.Research 32503A(Abstract) (1984)；Falk et al.，J.Clin.Invest.72560(1983)；Dahl et al.，J.Invest.Dermatol.82132(1984)；Dahlet al.，Arch.Dermatol.12170(1985)；Sanders et al.，Clin.Research 33388A(Abstract) (1985)；美國(guó)專(zhuān)利 Nos.5,268,363和4,722,890)。
有力地選擇性抑制補(bǔ)體的化合物將在若干急性與慢性免疫學(xué)與非免疫學(xué)障礙和多種神經(jīng)變性疾病中具有治療應(yīng)用。來(lái)自人與動(dòng)物研究的證據(jù)顯示，經(jīng)典補(bǔ)體途徑的活化主要參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的神經(jīng)變性疾病。這些補(bǔ)體級(jí)聯(lián)系統(tǒng)抑制劑在其中將有治療應(yīng)用的自體免疫疾病包括重癥肌無(wú)力(MG)、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡。補(bǔ)體級(jí)聯(lián)系統(tǒng)抑制劑在其中將有治療應(yīng)用的神經(jīng)變性疾病包括脫髓鞘癥多發(fā)性硬化(MS)、神經(jīng)病吉-巴綜合征(GBS)與米-費(fèi)綜合征(MFS)、阿爾茨海默氏病(AD)和朊病毒-相關(guān)性疾病(變異型克-雅病)。其他疾病和病癥包括遺傳性與獲得性血管性水腫(其中補(bǔ)體抑制蛋白缺陷引起活性補(bǔ)體消耗和生命-威脅性血管性水腫的反復(fù)發(fā)作)、膿毒性休克、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、器官排斥(移植術(shù))、灼傷(傷口愈合)、腦創(chuàng)傷、軟組織創(chuàng)傷、哮喘、血小板貯存、血液透析、局部缺血-再灌注損傷和心肺分流術(shù)設(shè)備(Makrides，Pharmacol.Rev.5059-87(1998)；Spiegelet al.，Strategies for Inhibition of Complement Activation in theTreatment of Neurodegenerative Diseases inNeuroinflammationMechanisms and Management，Wood(ed.)，Humana Press，Inc.，Totowa，NJ，Chapter 5，pp.129-176；美國(guó)專(zhuān)利No.4,916,219)。
人們已經(jīng)建議大量策略供主要抑制經(jīng)典補(bǔ)體途徑。直接抑制補(bǔ)體活化的努力已經(jīng)集中于抑制補(bǔ)體組分、例如C1r和C1s的化合物。也已經(jīng)描述過(guò)轉(zhuǎn)化酶、例如C3與C5轉(zhuǎn)化酶的小型肽抑制劑(Liszewski andAtkinson，Exp.Opin.Invest.Drugs 7323-332(1998))。迄今研究最為充分的用于CNS障礙治療的“設(shè)計(jì)者”補(bǔ)體抑制劑是可溶性重組人補(bǔ)體受體1型(sCR1)。sCR1已經(jīng)證實(shí)在CNS疾病動(dòng)物模型中有效，正處于人用研究(Fearon，Clin.Exp.Immunol.86(Suppl.1)43-46(1991))。不過(guò)，sCR1在CNS障礙中的應(yīng)用有若干缺點(diǎn)該藥物昂貴，必須被全身給藥，體內(nèi)半衰期短。下一代補(bǔ)體抑制劑有可能克服很多這些缺點(diǎn)(Spiegel et al.，Strategies for Inhibition of ComplementActivation in the Treatment of Neurodegenerative Diseases inNeuroinflammationMechanisms and Management，Wood(ed.)，Humana Press，Inc.，Totowa，NJ，Chapter 5，pp.129-176)。
對(duì)于非肽化合物的需要繼續(xù)存在，它們是補(bǔ)體、具體為C1s的有力抑制劑，并且具備比目前可用的C1s抑制劑更大的生物利用度和更少的副作用。因此，以有力抑制能力為特征的新穎C1s抑制劑是有潛在價(jià)值的多種病癥治療劑。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一類(lèi)新穎的噻吩基脒。式I噻吩基酰胺抑制酶C1s，這是經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)途徑中的一種酶，因而可以用于治療或改善哺乳動(dòng)物中補(bǔ)體-介導(dǎo)的急性或慢性障礙。
因而，本發(fā)明的第一方面涉及新穎的式I化合物。
在第二種實(shí)施方式中，本發(fā)明提供藥物組合物，它包含式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明進(jìn)一步提供治療與經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)途徑活化有關(guān)的急性與慢性障礙的方法，該方法對(duì)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的式I化合物。這些急性與慢性病癥完全或者在部分程度上是由炎癥和組織損害所導(dǎo)致的，而這些又是由異常補(bǔ)體級(jí)聯(lián)活化所導(dǎo)致的。
在一種實(shí)施方式中，式I化合物可以對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以治療補(bǔ)體-介導(dǎo)的炎癥和組織損害?？梢灾委煹牟“Y的實(shí)例包括克羅恩病的腸部炎癥、熱損傷(灼傷、凍瘡)、心肺分流術(shù)中的泵后綜合征和局部缺血(中風(fēng)、心肌梗死、缺血性結(jié)腸炎、失血性休克、創(chuàng)傷、術(shù)后組織損害和移植后器官或移植物功能延遲或減損)。
補(bǔ)體系統(tǒng)在超急性同種異體移植與超急性異種移植排斥中和在由供體-特異性抗體介導(dǎo)的急性體液排斥中被激活。因而，在另一種實(shí)施方式中，式I化合物可以在器官或移植物的移植之前、期間或之后對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以改善哺乳動(dòng)物對(duì)這類(lèi)器官或移植物的排斥。移植物可以包括同種異體移植物或異種移植物。
重組IL-2免疫療法期間的補(bǔ)體活化似乎導(dǎo)致急性血管滲漏綜合征，后者導(dǎo)致從IL-2治療和其他病癥(例如骨髓移植和急性胰腺炎)所觀察到的嚴(yán)重毒性與副作用。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方式中，式I化合物在用IL-2治療哺乳動(dòng)物、骨髓移植或胰腺炎發(fā)作之前、期間或之后對(duì)所述哺乳動(dòng)物給藥，給藥量有效減少導(dǎo)致與治療或障礙有關(guān)的毒性與副作用的血管滲漏綜合征。
在另一種實(shí)施方式中，式I化合物可以對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以治療與自體免疫疾病有關(guān)的補(bǔ)體-介導(dǎo)組織損傷。按照本發(fā)明可治療的自體免疫疾病的實(shí)例包括橋本甲狀腺炎、艾迪生病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的腎小球腎炎與皮膚損害、其他類(lèi)腎小球腎炎、大皰性類(lèi)天皰瘡、天皰瘡、古德帕斯丘綜合征、格雷夫斯病、免疫復(fù)合物-誘發(fā)的血管炎、溶血性貧血、重癥肌無(wú)力、變應(yīng)性神經(jīng)炎、重癥肌無(wú)力、I型糖尿病、自體免疫性溶血性貧血、自體免疫性血小板減少性紫癜、II型膠原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。優(yōu)選為本發(fā)明抑制劑治療的自體免疫疾病包括重癥肌無(wú)力(MG)、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式涉及對(duì)已被診斷患有神經(jīng)變性疾病的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的式I化合物。補(bǔ)體級(jí)聯(lián)系統(tǒng)抑制劑在其中將有治療應(yīng)用的神經(jīng)變性疾病包括脫髓鞘癥多發(fā)性硬化(MS)、神經(jīng)病蘭-巴綜合征(GBS)與米-費(fèi)綜合征(MFS)、阿爾茨海默氏病(AD)和變異型克-雅病。
在另一種實(shí)施方式中，本發(fā)明化合物可以對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以治療補(bǔ)體-介導(dǎo)的膿毒病并發(fā)癥或者成人呼吸窘迫綜合征的癥狀。
其他可以治療的疾病和病癥包括遺傳性與獲得性血管性水腫、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、腦創(chuàng)傷與其他軟組織創(chuàng)傷、哮喘和血液透析。
式I化合物還可以體外用于人類(lèi)器官與移植物貯存以及血小板貯存。
優(yōu)選實(shí)施方式的詳細(xì)說(shuō)明可用于本發(fā)明的化合物具有通式I 或其溶劑化物、水化物或藥學(xué)上可接受的鹽；其中Z是-S(O)-或-S(O2)-；R1是C1-4烷基、鹵代、氨基、C1-6烷硫基、C2-6鏈烯硫基、C1-6烷氧基、三氟甲基、甲磺?；?，或芐硫基；優(yōu)選鹵代、C1-4烷硫基或C2-4鏈烯硫基；Ar是苯基、萘基、吡啶基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻唑基、吡唑基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲哚基、苯并噻吩基或苯并[c]色烯基，它們中任一個(gè)是可選被取代的；R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、C1-4烷基、C6-10芳基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、單(C1-4)烷基氨基(C2-6)烷基、二(C1-4)烷基氨基(C2-6)烷基、羧基(C1-4)烷基、氰基、氨基、硝基、C1-4烷氧基或羥基，或者-CO2Rw，其中Rw是氫、羥基、C1-4烷氧基、氰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基、C3-8環(huán)烷基、苯基、芐基、 或 其中Rd和Re獨(dú)立地是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，Rf是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，Rg是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，和
Rh是C6-10芳基(C1-4)烷基或C1-6烷基；和R7是氫、氯、氟或氨基。
第一組落入本發(fā)明范圍內(nèi)的優(yōu)選化合物包括這樣的式I化合物，其中Ar是萘基或苯基，被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基、氨基或苯氨基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。在這方面發(fā)明中有用的Ar值包括2-苯基苯基、萘-2-基、2-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、4-氯苯基、2-溴苯基、3，4-二甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-溴苯基、4-乙基苯基、4-溴苯基、4-苯基苯基、3，4-二甲氧基苯基、2-異丙基苯基、3，5-二氯苯基、3-羥基苯基、2-甲基-5-叔丁基苯基、4-叔丁基苯基、3-溴-5-叔丁氧基苯基、3-溴-5-羥基苯基、3-溴-5-甲氧基苯基、3-溴-5-乙烯氧基苯基、3-苯氧基苯基、5-溴-3-甲基苯基和2-氨基苯基。
另一組落入本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物包括這樣的式I化合物，其中Ar是苯基，被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基、氨基、苯氨基、羥基四氫吡喃基、(C1-4烷氧基)-四氫吡喃基、羥基哌啶基、羥基-N-(C1-4烷基)-哌啶基、羥基-吡啶基-(C1-4)烷基或(C1-4烷氧基)羰基(C2-6)鏈烯基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。在這方面發(fā)明中另外有用的Ar值包括4-氨基-3-溴苯基、3-(4-羥基四氫吡喃-4-基)-苯基、3-(4-羥基-1-甲基哌啶-4-基)-苯基、3-(4-甲氧基四氫吡喃-4-基)-苯基、3-(羥基-吡啶-2-基-甲基)-苯基、3-(1-乙氧羰基-丙烯-2-基)-苯基、3-氯-4-氟苯基和3-碘苯基。
另一組落入本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物包括這樣的式I化合物，其中Ar是吡啶基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基或苯并[c]色烯基，它們中任一個(gè)可選地被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、氨基、苯基、苯氧基或甲苯基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。在這方面發(fā)明中有用的Ar值包括吡啶-2-基、吡啶-3-基、咪唑-2-基、1-甲基咪唑-2-基、2-甲基呋喃-2-基、噻吩-2-基、噻唑-2-基、4-苯基噻唑-2-基、5-乙氧基苯并噻唑-2-基、苯并咪唑-2-基、7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-2-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-1H-苯并咪唑基、6-溴-苯并咪唑基、吡咯-2-基和哌啶-2-基。在這方面發(fā)明中另外有用的Ar值是6H-苯并[c]色烯-2-基。
這方面發(fā)明中有用的Ar值還包括式IA那些 其中Rx是鹵代或者被C1-6烷基或(C1-4烷基)氧基(C1-4)烷基中的一個(gè)或兩個(gè)取代的苯基，其中C1-4烷基部分之一可選地被羧基取代；Ry是氫、氨基、鹵代、苯氧基或C1-6烷基氨基，其中烷基部分可選地被苯基、吡啶基、四氫呋喃基、咪唑基、嗎啉基、(C1-4鹵代烷基)-吡啶基、氨磺酰基苯基、羥基、(C1-4烷基)-噻吩基或氨基嘧啶基中的一個(gè)取代；和Rz是氫、鹵代或C1-4烷基。
有用的Rx值包括2-甲基苯基、2-羧甲氧基甲基-6-甲基苯基和溴。
有用的Ry值包括氫、氯、氨基、苯氧基、芐氨基、異丙氨基、吡啶-3-基甲氨基、吡啶-4-基甲氨基、吡啶-2-基甲氨基、四氫呋喃-2-基甲氨基、3-(咪唑-1-基)-丙氨基、2-甲基-2-(嗎啉-4-基)-丙氨基、6-三氟甲基-吡啶-3-基甲氨基、2-(3H-咪唑-1-基)-乙氨基、4-氨磺?；S氨基、2，2-二甲基-3-羥基丙氨基、3-甲基噻吩-2-基甲氨基和4-氨基嘧啶-5-基甲氨基。
有用的Rz值包括氫、甲基或乙基。
優(yōu)選的Rx值包括溴。優(yōu)選的Ry值包括可選被取代的C1-6烷基氨基。優(yōu)選的Rz值包括氫。
這方面發(fā)明中有用的Ar值還包括式IB那些
其中R13和R14獨(dú)立地是氫、鹵代或C1-4烷基；R15是氫、鹵代或甲苯基；R17是氫或C1-4烷基；和R17和R18之一是電子對(duì)，另一個(gè)是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、環(huán)丙基甲基、苯基、芐基、1-苯乙基、吡啶基甲基或異噁唑基甲基，可選地被一個(gè)或兩個(gè)甲基取代，其中所述芐基是未取代的或者被鹵代、硝基、氨基或(2-羧乙基)-硫基乙酰氨基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
有用的R13和R14值包括氫、甲基和乙基。
有用的R15值包括氫、溴、氯和鄰-甲苯基。
有用的R17值包括氫、甲基和乙基。
有用的R16和R18值除了電子對(duì)以外包括氫、甲基、環(huán)丙基甲基、烯丙基、3-甲基丁-2-烯基、吡啶-2-基甲基、3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基、苯基、1-苯乙基、芐基、2，6-二氯芐基、2，5-二氟芐基、2，6-二氟芐基、2-氟-5-硝基芐基、2-氟-4-硝基芐基、2-氟-5-氨基芐基和5-[(2-羧乙基)-硫基乙酰氨基]-2-氟芐基。
優(yōu)選的R13包括氫。優(yōu)選的R14包括氫。優(yōu)選的R15包括溴和氯。更優(yōu)選溴。優(yōu)選的R17包括氫。優(yōu)選的R16和R18除了電子對(duì)以外包括氫、苯基、1-苯乙基、芐基和被鹵代、氨基或硝基中的一個(gè)或兩個(gè)、優(yōu)選兩個(gè)取代的芐基。更優(yōu)選芐基和被氟、氯、氨基或硝基中的兩個(gè)取代的芐基。
在另一方面發(fā)明中，Ar是取代的苯基，在該苯基環(huán)3-位具有所需的取代基，在該苯基環(huán)其余位置之一具有可選的取代基。
因而，這方面發(fā)明涉及通式II化合物
或其溶劑化物、水化物或藥學(xué)上可接受的鹽；其中R1、R2、R3、R4、R7和Z是如上所定義的；和R5是苯基、萘基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吡嗪基、哌啶基或哌嗪基，它們中任一個(gè)是可選被取代的；和R6是氫、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、C2-4鏈烯氧基、苯氧基、芐氧基、鹵代、氨基或硝基。
在一種實(shí)施方式中，R5是萘基、苯基或者被一至五個(gè)、優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)基團(tuán)取代的苯基，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、(C1-4烷基)羰基、氰基、氨基、單(C1-4)烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、甲?；?、(C1-4烷氧基)羰基、鹵代(C1-4烷氧基)羰基、苯基、苯氧基、苯氧基苯基、聯(lián)苯基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、硝基、亞甲二氧基(-O-CH2-O-)、亞乙二氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺?；?、C1-4烷硫基、羥基、氨基羰基、單(C1-4烷基)氨基羰基、二(C1-4烷基)氨基羰基和鹵化C1-4羥基烷基組成的組。
這種實(shí)施方式中有用的R5值包括苯基、2-甲氧基苯基、2-甲基苯基、2-乙烯基苯基、2-羥甲基苯基、2-(1-羥基乙基)苯基、2-三氟甲基苯基、2-甲?；交?、2-羥基苯基、2-氯甲基苯基、2-氨基、2-氯苯基、3-甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-甲?；交?、3-羥甲基苯基、3-氨基苯基、3-異丙基苯基、3-乙氧基苯基、3-乙氧羰基苯基、3-甲基羰基苯基、3-羧基苯基、3-羥基苯基、3-硝基苯基、3-二甲氨基羰基苯基、3-三氟甲基苯基、3-三氟甲氧羰基苯基、4-乙烯基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-甲氧羰基苯基、4-甲基苯基、4-羥甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-乙氧基苯基、4-二甲氨基苯基、聯(lián)苯基、4-苯氧基苯基、4-氯甲基、4-甲基磺?；?苯基、4-羥基苯基、4-氟苯基、2，5-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、2，3-二甲基苯基、2，5-二氯苯基、3，5-二氯苯基、3-羥基-4-苯基苯基、3，5-雙-三氟甲基苯基、2-羥基-5-苯基苯基、4-甲基-3-硝基苯基、3，4-亞甲二氧基苯基、3，5-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2-乙氧基-6-甲基苯基、3-異丙氧羰基-2-甲基苯基、3-氟-4-苯基苯基、4-甲?；交?、2-羧基-6-甲基苯基、3-甲酰基-2-甲基苯基、3-羥基-6-甲基苯基、3-甲酰基-6-甲基苯基、3-甲?；?6-羥基苯基、3-甲酰基-6-甲氧基苯基、2-氨基-6-甲基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3-[(2，2，2-三氟-1-羥基)乙基]苯基、4-硝基苯基、2-氟-4-苯基苯基、2，4-二甲氧基苯基、4-羥基-3-甲?；交?-甲苯基-5-嗎啉苯基、4-甲氧基苯基、3-羥氨基甲基苯基、4-苯基-乙酰胺、4-苯甲酰胺、2，6-二甲基苯基、苯氧基苯基、2-甲基-6-羥甲基苯基、2-甲基-5-羥甲基苯基、2-羥基-3-苯基苯基、萘基和4-乙氧羰基苯基。另外有用的R5值是6-甲基-3，4-亞甲二氧基苯基。
在另一種實(shí)施方式中，R5是被一至三個(gè)基團(tuán)取代的苯基，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、(C1-4烷基)羰基、氰基、氨基、單(C1-4)烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、甲酰基、(C1-4烷氧基)羰基、鹵代(C1-4烷氧基)羰基、苯基、苯氧基、苯氧基苯基、聯(lián)苯基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、硝基、亞甲二氧基(-O-CH2-O-)、亞乙二氧基、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺?；1-4烷硫基、羥基、氨基羰基、單(C1-4烷基)氨基羰基、二(C1-4烷基)氨基羰基、鹵化C1-4羥基烷基、羧基(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、羧基(C1-4)烷氧基、C1-4烷硫基(C1-4)烷基(其中C1-4烷硫基的烷基部分可選地被一個(gè)或兩個(gè)羧基取代)、膦酰基(C2-4)鏈烯基、膦酰基(C1-4)烷基氨基、C1-4鹵代烷基磺酰氨基、膦?；?C1-4)烷氧基、C1-4烷基磺酰氨基、羧基(C1-4)烷基氨基、嗎啉基(C1-4)烷基、嗎啉基、嗎啉基(C1-4)烷基氨基羰基、哌嗪基(C1-4)烷基或哌嗪基(其中所述哌嗪基(C1-4)烷基或哌嗪基中任一個(gè)可選地被甲基或乙基N-取代)、甲酰氨基、嗎啉基(C1-4)烷基氨基、可選被取代的烷基羰基氨基、可選被取代的脲基和可選被取代的胍基組成的組。
有用的可選被取代的烷基羰基氨基具有式-N(H)-C(O)-C(H)(W1)-Y1a-X1-Y1b-Z1，其中W1是氫或氨基；Y1a是直接的共價(jià)鍵或者C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基；X1是O或S或者直接的共價(jià)鍵；Y1b是C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基，可選地被羧基或氨基取代；和Z1是氨甲?；?、羧基、C1-6烷基磺?；?C1-6烷氧基)羰基、C2-6烷酰氨基、磺基、膦酰基、苯基、氨基磺?；?、氨基、C1-6鹵代烷基磺酰氨基、甲酰氨基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基氨基磺?；?、C1-6烷基磺酰氨基或2-氧代-六氫噻吩并[3，4-d]咪唑-6-基-(C1-6烷基)羰基氨基；或者，W1是氫且Y1a-X1-Y1b-Z1代表氫、鹵代、氨基或三-(C1-4烷基)銨基；其條件是，如果Y1a是直接的共價(jià)鍵且X是O或S，那么W1是氫。
有用的可選被取代的脲基具有式-N(L1)-C(O)-N(L2)-Y2a-X2-Y2b-Z2，其中L1和L2都是氫，或者L1和L2一起代表亞乙基或三亞甲基；Y2a是直接的共價(jià)鍵或者C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基；X2是O或S或者直接的共價(jià)鍵；Y2b是C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基，可選地被羧基取代；和Z2是羧基、(C1-6烷氧基)羰基、苯氧基、羧基苯氧基、C1-6烷基磺?；⒈交?、芐氧基羰基氨基、氨基、C1-4烷基氨基、鹵代苯基、吲哚基、二苯甲基、苯基磺酰氨基、N′-(羧基(C1-4)烷基)脲基、四唑基、膦?；虮桨被?；或者，Y2a-X2-Y2b-Z2代表C1-4烷基磺酰基或-(CH2CH2-O-)m-(CH2)n-C(O)OR，其中m是整數(shù)2至6，n是整數(shù)2至4，且R是氫或C1-4烷基。
有用的可選被取代的胍基具有式-N(L3)-C(＝NL4)-N(L5)-Z3，其中L3是氫或C1-4烷基；
L4和L5都是氫，或者L4和L5一起代表亞乙基；和Z3是氫、C1-6烷基、苯基(C1-6)烷基、羧基(C1-6)烷基、C1-4烷氧基、(C1-4烷基)羰基或C1-4烷基磺?；?C1-6)烷基。
這種實(shí)施方式中一組優(yōu)選的化合物包括這些，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在4′-位被可選被取代的胍基取代。這種實(shí)施方式中更優(yōu)選的一組化合物包括這些，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在4′-位被可選被取代的胍基取代，在6′-位被可選被取代的烷基羰基氨基或可選被取代的脲基取代。這種實(shí)施方式中另一組優(yōu)選的化合物包括這些，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在6′-位被可選被取代的烷基羰基氨基或可選被取代的脲基取代。在這些優(yōu)選的組內(nèi)，R1優(yōu)選地是甲硫基，R2、R3、R4、R6和R7優(yōu)選地是氫，Z優(yōu)選地是-SO2-。
這種實(shí)施方式中有用的R5值還包括式IIA那些 其中R8是氫或甲基；R9是氫、甲酰氨基或氨甲?；?；R10是甲氧基、羥基、羧甲氧基、膦?；装被⑷谆酋０被?、膦酰基甲氧基、羧甲氨基、氨基、氯、氟、2-(嗎啉-4-基)-乙氨基、羧基、氨甲酰基、(1，2-二羧基乙基)-硫基乙酰氨基、羧甲氧基乙酰氨基、4-氨基-4-羧基丁酰氨基、6-[5-(2-氧代-六氫-噻吩并[3，4-d]咪唑-6-基)-戊酰氨基]-己酰氨基、溴乙酰氨基、2-氨基-4-羧基丁酰氨基、三乙銨基乙酰氨基、2-氨基-4-甲磺?；□０被被阴０被?、氨甲酰基甲硫基乙酰氨基、3-膦?；０被?、脲基、N′-(5-羧基戊基)-脲基、N′-(5-乙氧羰基戊基)-脲基、N′-(3-甲磺?；?-脲基、胍基、N′-(3-苯基丙基)-胍基、N′-(2-苯乙基)-胍基、N′-(3-甲基丁基)-胍基、N′-乙?；一′-(4-甲磺?；』?-胍基、N′-(3-甲磺?；?-胍基、N′-(6-甲磺酰基己基)-胍基、N′-(5-甲磺?；旎?-胍基、N′-甲氧基胍基、N-甲基胍基、N′-己基胍基、N′-(5-羧基戊基)-胍基或4，5-二氫-1H-咪唑-2-基氨基；R11是氫、3-(嗎啉-4-基)-丙氨基羰基或羧甲氧基甲基；和R12是羧甲氧基甲基、2-羧乙氧基甲基、硝基、氨基、甲基、(1，2-二羧基乙基)-硫基甲基、2-膦?；蚁┗?、嗎啉-4-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、嗎啉-4-基、甲酰氨基、甲磺酰氨基、羧甲氨基、3-(嗎啉-4-基)-丙氨基羰基、氯、乙酰氨基、氨甲酰基甲硫基乙酰氨基、(2-羧乙基)-硫基乙酰氨基、4-甲磺?；□０被?、(1，2-二羧基乙基)-硫基乙酰氨基、甲氧羰基甲氧基乙酰氨基、羧甲氧基乙酰氨基、溴乙酰氨基、4-羧基丁酰氨基、氨甲?；籽趸阴０被?2-乙酰氨基-2-羧基-1，1-二甲基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-磺基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-甲氧羰基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-乙酰氨基-2-羧乙基)-硫基乙酰氨基、甲磺?；阴０被?、6-甲磺酰基己酰氨基、3-甲磺?；０被?、2-甲磺酰基丙酰氨基、芐硫基乙酰氨基、4-氨基磺?；□０被?1-氨基十一烷酰氨基、4-三氟甲磺酰氨基丁酰氨基、5-羧基戊酰氨基、羧基乙酰氨基、3-羧基丙酰氨基、11-羧基十一烷酰氨基、5-甲氧羰基戊酰氨基、N′-乙氧羰基甲基脲基、N′-羧甲基脲基、N′-[5-(4-羧基苯氧基)-戊基]-脲基、N′-(2-甲磺?；一?-脲基、N′-(5-羧基戊基)-脲基、N′-(2-[2-{2-(2-羧乙氧基)-乙氧基}-乙氧基]-乙氧基乙基)-脲基、N′-甲磺?；寤?、N′-(4-甲磺?；』?-脲基、N′-(3-苯基丙基)-脲基、N′-芐基脲基、N′-(1-羧基-2-苯乙基)-脲基、N′-(5-芐氧羰基氨基-5-羧基戊基)-脲基、N′-(2-苯乙基)-脲基、N′-(5-氨基-5-羧基戊基)-脲基、N′-[2-(4-溴苯基)-乙基]-脲基、N′-[2-(吲哚-3-基)-乙基]-脲基、N′-(3，3-二苯基丙基)-脲基、N′-(2-苯磺酰氨基乙基)-脲基、N′-(2-甲磺酰氨基乙基)-脲基、N′-[2-(N′-羧甲基脲基)-乙基]-脲基、N′-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基、N′-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基、N′-[5-(2H-四唑-5-基)-戊基]-脲基、N′-(5-膦酰基戊基)-脲基、N′-(5-乙氧羰基戊基)-脲基、N′-(3-甲磺?；?-脲基、N′-(2-苯氨基乙基)-脲基或2-氧代-咪唑烷-1-基。
這種實(shí)施方式中一組優(yōu)選的化合物包括這些，其中R8是甲基，R9和R11都是氫。這種實(shí)施方式中另一組優(yōu)選的化合物包括這些，其中R8是甲基，R9、R11和R12都是氫。這種實(shí)施方式中另一組優(yōu)選的化合物包括這些，其中R8是甲基，R9、R10和R11都是氫。
在另外的實(shí)施方式中，R5是噻吩基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基或吡嗪基，可選地被一個(gè)或兩個(gè)基團(tuán)取代，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、甲酰基、(C1-4烷氧基)羰基、苯基、C1-4烷基苯基、苯氧基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、羥基、硝基、氨基、C1-4烷基磺?；?C1-4烷基)脲基、磺基(C1-4)烷基、三甲代甲硅烷基(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基和C1-4烷氧基(C1-4)烷基組成的組。
當(dāng)R5是雜芳基時(shí)，有用的值包括噻吩-3-基、喹啉-7-基、3，5-二甲基異噁唑-4-基、5-氯噻吩-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-4-基、喹啉-3-基、苯并噻吩-2-基、苯并呋喃-2-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基、4-甲基吡啶-3-基、3-甲基-吡啶-2-基、6-甲基苯并咪唑-5-基、苯并咪唑-6-基、1-甲基-4-(2′-甲基苯基)苯并咪唑-6-基、2-甲基-4-(2′-甲基苯基)苯并咪唑-6-基、二苯并呋喃-2-基、2-甲基咪唑基、6-乙氧基-苯并噻唑基、6-甲基-吡啶-3-基、6-氯-吡啶-3-基和3-氯-吡啶-2-基。
當(dāng)R5是雜芳基時(shí)，有用的值還包括3-甲基-5-硝基吡啶-2-基、5-氨基-3-甲基吡啶-2-基、4-甲基嘧啶-5-基、3-甲基吡啶-2-基、2-氯吡啶-3-基、6-甲?；拎?2-基、3-甲基-5-[N′-(3-甲磺?；?1-基)]-脲基吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-4-基、3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基、3-氯-5-三氟甲基吡啶-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基、3-甲基-3H-咪唑-4-基、1H-咪唑-2-基、1-甲基-1H-咪唑-2-基、1-乙基-1H-苯并咪唑-2-基、2，5-二甲基-1H-咪唑-4-基、1-(3-磺基丙-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基、3-甲基吡嗪-2-基、5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基、5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基、1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基、2-甲氧基甲基-6-甲基-1H-苯并咪唑-5-基、2，6-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基和1，6-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基。
在另外的實(shí)施方式中，R5是-NRaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地是C1-6烷基，或者Ra和Rb與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成一個(gè)環(huán)，選自由哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、咪唑烷基、吡唑烷基和嗎啉基組成的組，其中所述環(huán)可選地被一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基取代。在這種實(shí)施方式中，有用的R5值包括哌啶-1-基和4-甲基哌嗪-1-基。
有用的R6值包括氫、甲基、鹵代、氨基、甲氧基、乙氧基、乙烯氧基、羥基和芐氧基。
就上述每種實(shí)施方式而言，優(yōu)選的R1值包括溴、甲硫基、乙硫基或丙-2-烯-1-基硫基，更優(yōu)選溴或甲硫基，最優(yōu)選甲硫基。
一種有用的Z值是SO2。另外的Z值是SO。
優(yōu)選的R2、R3和R4值獨(dú)立地是氫、C1-6烷基、氨基、氰基、C1-4烷氧基或羥基，優(yōu)選地都是氫。有用的R2、R3和R4值包括氫、甲基、乙基、丙基、正丁基、羥基、甲氧基和乙氧基。
式I中另外優(yōu)選的R2、R3和R4值還包括前體藥物，例如-CO2Rw，其中Rw在每種情形中優(yōu)選地是C1-4烷基、C4-7環(huán)烷基或芐基之一。適合的R2、R3和R4值包括氫、甲基、乙基、丙基、正丁基、羥基、甲氧基、乙氧基、氰基、-CO2CH3、-CO2CH2CH3和-CO2CH2CH2CH3。
適合的R2、R3和R4還有基團(tuán)-CO2Rw，其中Rw是下列之一 其中Rd-Rh是如上所定義的。當(dāng)R2、R3和R4是-CO2Rw時(shí)，其中Rw是這些部分之一，所得化合物是具備所需制劑與生物利用度特征的前體藥物。Rd、Re和Rg中每一個(gè)的優(yōu)選值是氫，優(yōu)選的Rf是甲基，優(yōu)選的Rh值包括芐基和叔丁基。
用在本發(fā)明方法中的具體化合物包括實(shí)施例所述化合物，例如下列4-(4′-羥基-[1，1′；3′，1″]三聯(lián)苯-3″-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1″]三聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯基-3-羧酸異丙基酯三氟乙酸鹽，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯基-2-羧酸三氟乙酸鹽，4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(5′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(5′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(4-甲基-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽，4-[3-(3-甲基-吡啶-2-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽，4-(3-烯丙氧基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-溴-5-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，
4-(5-羥基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(5-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，4-(5-烯丙氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(5-芐氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，4-(2′-氯-5-羥基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-溴-4-(3′-甲?；?聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-溴-4-(2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲酰基-4′-羥基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯，5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-乙?；?-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽，N-羥基-4-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，
4-[2′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[4′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-羥基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-羥基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯基-3-羧酸三氟乙酸鹽，4-(5′-甲?；?2′-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(5′-甲?；?2′-羥基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯-3-基]-甲亞胺酸三氟乙酸鹽，4-(3′-甲酰氨基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4-叔丁基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(1-甲基-1H-咪唑-2-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3，5-二氯-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-溴-4-(2-甲氧基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(萘-2-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′，4′-二甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′，4′-二甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′，5′-二氯-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′，5′-二氯-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′，5′-雙-三氟甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-苯并呋喃-2-基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-苯并[b]噻吩-2-基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-甲基-3′-硝基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-氯-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(4′-三氟甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(4′-三氟甲氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(4′-苯氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-{亞氨基-[4-(4′-甲磺?；?聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁酯，4-(3-苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-喹啉-7-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲酰基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-氨基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3′-三氟甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-羥甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-([1，1′；3′，1″]三聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-二苯并呋喃-4-基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(2′-三氟甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-羥甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-氯-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-吡啶-3-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-嘧啶-5-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-呋喃-3-基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-喹啉-3-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯基-4-羧酸甲基酯，4-(3′，5′-二甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-呋喃-2-基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，
5-甲硫基-4-(3-噻吩-3-基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3′-硝基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-羥基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-甲?；?聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-氟-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-氟-[1，1′；4′，1″]三聯(lián)苯-3″-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-羥甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-氰基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-乙?；?聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-二甲氨基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(2′-乙烯基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(4′-乙氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(3，5-二甲基-異噁唑-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-萘-1-基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(5-氯-噻吩-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，
4-(2′-甲?；?聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(4′-乙烯基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-乙氧基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′，6′-二甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-異丙基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′，3′-二甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2′，3′-二氯-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3′-乙?；?聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯基-3-羧酸乙基酯，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-聯(lián)苯基-3-羧酸二甲基酰胺，3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯基-3-羧酸酰胺，N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯-3-基]-乙酰胺，4-(2′-氨基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-[3-(1H-苯并咪唑-5-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，
4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(3-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(2-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(6-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(2-甲基-呋喃-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，5-甲硫基-4-(4-苯基-噻唑-2-磺酰基)-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，4-(6-乙氧基-苯并噻唑-2-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，4-(6-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，4-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，5-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽，和4-(聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，及其藥學(xué)上可接受的鹽或前體藥物。
定義本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示至多12個(gè)碳的直鏈和支鏈原子團(tuán)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基。
術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”在本文中用于表示2-20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈原子團(tuán)，鏈長(zhǎng)另有限定除外，其中在鏈中兩個(gè)碳原子之間存在至少一條雙鍵，包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。優(yōu)選地，鏈烯基的鏈長(zhǎng)為2至10個(gè)碳原子，更優(yōu)選2至8個(gè)碳原子，最優(yōu)選2至4個(gè)碳原子。
在所有存在鏈烯基部分作為取代基的情形中，不飽和鍵、即亞乙烯基鍵優(yōu)選地不直接與氮、氧或硫部分連接。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷硫基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示鍵合于硫原子的、1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈原子團(tuán)，鏈長(zhǎng)另有限定除外，包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基等。優(yōu)選地，烷硫基的鏈長(zhǎng)為1至10個(gè)碳原子，更優(yōu)選1至8個(gè)碳原子。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示鍵合于氧原子的、1至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈原子團(tuán)，鏈長(zhǎng)另有限定除外，包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基等。優(yōu)選地，烷氧基的鏈長(zhǎng)為1至10個(gè)碳原子，更優(yōu)選1至8個(gè)碳原子。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示含有3至9個(gè)碳原子的環(huán)烷基。典型的實(shí)例有環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基和環(huán)壬基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵代”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示氯、溴、氟或碘，氯是優(yōu)選的。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“單烷基胺”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示這樣一種氨基，它被一個(gè)具有1至6個(gè)碳原子的烷基取代。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“二烷基胺”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示這樣一種氨基，它被兩個(gè)各自具有1至6個(gè)碳原子的烷基取代。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“芳基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示單環(huán)或二環(huán)的芳族基團(tuán)，在環(huán)部分中含有6至14個(gè)碳，優(yōu)選地在環(huán)部分中含有6-10個(gè)碳，例如苯基、萘基或四氫萘基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“芳烷基”或“芳基烷基”本身或者作為另一基團(tuán)的一部分表示具有芳基取代基的上述C1-6烷基，例如芐基、苯乙基或2-萘甲基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)的”、“雜環(huán)并”或“雜環(huán)”本身或者作為更大基團(tuán)的一部分表示飽和或者完全或部分不飽和的3-7元單環(huán)或者7-10元二環(huán)的環(huán)系，它由碳原子和一至四個(gè)雜原子組成，所述雜原子獨(dú)立地選自由O、N和S組成的組，其中氮和硫雜原子可以可選地是氧化的，氮可以可選地是季銨化的，包括任意這樣的二環(huán)基團(tuán)，其中任意如上所定義的雜環(huán)是與苯環(huán)稠合的，和其中雜環(huán)可以是在碳上或在氮原子上被取代的，如果所得化合物是穩(wěn)定的話。尤其有用的是這樣的環(huán)，含有一個(gè)氧或硫、一至三個(gè)氮原子或者一個(gè)氧或硫與一個(gè)或兩個(gè)氮原子的組合。這類(lèi)雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮雜_基、氮雜_基、吡咯基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑基、異噁唑烷基、嗎啉基、噻唑基、噻唑烷基、異噻唑基、奎寧環(huán)基、異噻唑烷基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、硫嗎啉基、硫嗎啉基亞砜、硫嗎啉基砜和噁二唑基。嗎啉代基與嗎啉基相同。
術(shù)語(yǔ)“雜原子”在本文中用于表示氧原子(“O”)、硫原子(“S”)或氮原子(“N”)。將被認(rèn)可的是，當(dāng)雜原子是氮時(shí)，它可以構(gòu)成NRyRz部分，其中Ry和Rz彼此獨(dú)立地是氫或C1至C8烷基，或者與它們所鍵合的氮一起構(gòu)成飽和或不飽和的5-、6-或7-元環(huán)。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”表示這樣的基團(tuán)具有5至14個(gè)環(huán)原子；以環(huán)狀排列共享6、10或14個(gè)π電子；含有碳原子和1、2或3個(gè)氧、氮或硫雜原子(其中雜芳基的實(shí)例有噻吩基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、苯并呋喃基、吡喃基、異苯并呋喃基、苯并噁唑基、色烯基、呫噸基、吩噁噻(phenoxathiinyl)、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吲哚嗪基、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4αH-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、_啶基、菲咯啉基、吩嗪基、異噻唑基、吩噻嗪基、異噁唑基、呋咱基和吩噁嗪基)。
措辭“前體藥物”表示已知直接作用性藥物的衍生物，該衍生物與該藥物相比具有增強(qiáng)了的遞送特征和治療價(jià)值，被酶或化學(xué)過(guò)程轉(zhuǎn)化為活性藥物。有用的前體藥物是其中R2、R3和/或R4是-CO2Rw的那些，其中Rw是如上所定義的。參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.5,466,811和Saulnier et al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.41985-1990(1994)。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“取代”意味著所指定部分的一個(gè)或多個(gè)氫被所示基團(tuán)替換，其條件是沒(méi)有超過(guò)原子的常價(jià)，并且該取代生成穩(wěn)定的化合物。若取代基是酮基(即＝0)，則與該部分一個(gè)原子連接的2個(gè)氫被替換。
“穩(wěn)定的化合物”或“穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)式”在本文中表示這樣一種化合物，它堅(jiān)固得足以經(jīng)受住從反應(yīng)混合物中分離至有用的純度并且配制成有效的治療劑。
當(dāng)任意變量在任意成分或在任意結(jié)構(gòu)式中出現(xiàn)一次以上時(shí)，每次出現(xiàn)時(shí)的定義都獨(dú)立于每一其他出現(xiàn)時(shí)的定義。而且，取代基和/或變量的組合也是可以允許的，但只有當(dāng)這類(lèi)組合生成穩(wěn)定的化合物時(shí)。
使用方法本發(fā)明提供治療與經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)途徑活化有關(guān)的急性與慢性障礙的方法，該方法對(duì)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的式I化合物。
這些急性與慢性病癥包括炎癥和組織損害，它們是補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的迅速與侵入性酶活性的結(jié)果。補(bǔ)體-介導(dǎo)的炎癥和所致組織損害在大量疾病狀態(tài)中都有牽連，包括1)局部缺血再灌注損害，例如發(fā)生在心肌梗死之后、移植之后、手術(shù)之后和失血性休克之中；2)抗體-介導(dǎo)的病癥，例如超急性同種異體移植與異種移植排斥、器官移植排斥和自體免疫疾??；和3)其他疾病狀態(tài)，例如熱損傷、創(chuàng)傷、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、膿毒病和朊病毒疾病。
本發(fā)明化合物據(jù)信抑制C1s蛋白酶活性發(fā)揮功能。這種蛋白酶-抑制活性導(dǎo)致各種補(bǔ)體-介導(dǎo)免疫功能的抑制或阻滯。因此，式I化合物能夠用于改善大量由補(bǔ)體-介導(dǎo)炎癥與組織損害誘發(fā)的疾病狀態(tài)。
術(shù)語(yǔ)“炎癥的治療”或“治療炎癥”打算包括本發(fā)明化合物對(duì)受治療者的給藥，目的可以包括炎性反應(yīng)的預(yù)防、改善、防止或治愈。這類(lèi)治療不必完全改善炎性反應(yīng)。進(jìn)而，這類(lèi)治療可以與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知用于減少炎性病癥的其他傳統(tǒng)治療聯(lián)合使用。
本發(fā)明組合物的“有效水平”表示這樣一種水平，在該水平下為接受治療的患者提供一定的緩解。“異常的”宿主炎性病癥表示受治療者在一定部位的這樣一種炎癥水平，它超過(guò)該受治療者健康狀態(tài)的正常水平或者超過(guò)所需水平?！袄^發(fā)性”組織損害或毒性作用表示由于炎性反應(yīng)的存在，包括作為體內(nèi)另處“原發(fā)性”炎性反應(yīng)的結(jié)果，而發(fā)生在其他健康組織、器官和細(xì)胞中的組織損害或毒性作用。
“動(dòng)物”在本文中優(yōu)選地表示哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選人類(lèi)，不過(guò)本發(fā)明不打算僅限于此。
在一種實(shí)施方式中，式I化合物可以對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以治療補(bǔ)體-介導(dǎo)的炎癥和組織損害，它是局部缺血/再灌注損傷的后果。因而，本發(fā)明的C1s抑制劑可以用于預(yù)防或者至少改善由中風(fēng)、心肌梗死、失血性休克和手術(shù)引起的炎癥和組織損害。確切而言，式I化合物可以用于預(yù)防被移植組織與器官的炎癥。
式I化合物還可以在炎性狀態(tài)的檢測(cè)之前作為“預(yù)防性”治療而被提供，以預(yù)防高?；颊咝纬伤鲅仔誀顟B(tài)，例如移植患者。
式I化合物可以用于治療慢性或急性炎癥，它是抗體-介導(dǎo)反應(yīng)的結(jié)果，例如超急性同種異體移植與異種移植排斥、器官移植排斥和自體免疫疾病，后者包括關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化(MS)、I型糖尿病、克羅恩病的腸部炎癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(狼瘡)、免疫復(fù)合物-誘發(fā)的血管炎、再狹窄和牛皮癬。
補(bǔ)體系統(tǒng)在超急性同種異體移植與超急性異種移植排斥中和在由供體-特異性抗體介導(dǎo)的急性體液性排斥中被激活。在另一種實(shí)施方式中，式I化合物可以在器官或移植物的移植之前、期間或之后對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以改善該哺乳動(dòng)物對(duì)這類(lèi)器官或移植物的排斥。
器官移植和移植患者經(jīng)歷并行的免疫療法。重組IL-2免疫療法期間的補(bǔ)體活化似乎導(dǎo)致急性血管滲漏綜合征，后者導(dǎo)致從IL-2治療和其他病癥(例如骨髓移植和急性胰腺炎)所觀察到的嚴(yán)重毒性與副作用。因而，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，式I化合物在用IL-2治療哺乳動(dòng)物、骨髓移植或胰腺炎發(fā)作之前、期間或之后對(duì)所述哺乳動(dòng)物給藥，給藥量有效減少導(dǎo)致與治療或障礙有關(guān)的毒性與副作用的血管滲漏綜合征。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式涉及對(duì)已被診斷患有自體免疫疾病的哺乳動(dòng)物給以治療上有效的式I化合物。按照本發(fā)明可治療的自體免疫疾病包括艾迪生病、I型糖尿病、橋本甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的腎小球腎炎與皮膚損害、其他類(lèi)腎小球腎炎、大皰性類(lèi)天皰瘡、皰疹樣皮炎、古德帕斯丘綜合征、格雷夫斯病、重癥肌無(wú)力、胰島素抵抗、自體免疫性溶血性貧血、自體免疫性血小板減少性紫癜、免疫復(fù)合物-誘發(fā)的血管炎、腎小球腎炎、II型膠原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和變應(yīng)性神經(jīng)炎。優(yōu)選由本發(fā)明抑制劑治療的自體免疫疾病包括重癥肌無(wú)力(MG)、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式涉及對(duì)已被診斷患有神經(jīng)變性疾病的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的式I化合物。補(bǔ)體級(jí)聯(lián)系統(tǒng)抑制劑在其中將有治療應(yīng)用的神經(jīng)變性疾病包括脫髓鞘癥多發(fā)性硬化(MS)、神經(jīng)病吉-巴綜合征(GBS)與米-費(fèi)氏綜合征(MFS)、阿爾茨海默氏病(AD)和變異型克-雅病(vCJD)。
在另一種實(shí)施方式中，給以有效水平的本發(fā)明Cls抑制劑，以提供對(duì)抗炎癥的繼發(fā)性有害炎性后果的治療益處。
在另外的實(shí)施方式中，本發(fā)明化合物可以對(duì)患有ARDS癥狀的哺乳動(dòng)物給藥。ARDS是一種復(fù)雜的肺部障礙，每年在美國(guó)影響150,000人，死亡率為50％。凝血和補(bǔ)體的白細(xì)胞、血小板與蛋白水解途徑介導(dǎo)了ARDS。ARDS牽涉接觸活化途徑的活化和C1抑制劑的消耗，可能被膿毒病或創(chuàng)傷所誘發(fā)。膿毒病-誘發(fā)的ARDS導(dǎo)致更嚴(yán)重的播散性血管內(nèi)凝血(DIC)和纖維蛋白溶解，與創(chuàng)傷-誘發(fā)的ARDS相比產(chǎn)生更多的纖維蛋白降解產(chǎn)物和更低的ATIII水平(Carvalho et al.，J.Lab.Clin.Med.112270-277(1988))。
在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，式I化合物可以對(duì)處于膿毒性休克的人給藥。膿毒性休克是美國(guó)重癥監(jiān)護(hù)患者死亡的最常見(jiàn)原因(Parillo et al.，Ann.Int.Med.113227-242(1990)；Schmeichel C.J.& McCormickD.，Biotechnol.10264-267(1992))。近年來(lái)，侵入性流體輸注療法已被接受為膿毒性休克治療的主要手段。
膿毒性休克中心輸出量和血管舒張的增加歸因于炎性介質(zhì)的作用。在膿毒性休克中，激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)的組分被消耗，提示有這種系統(tǒng)的活化。這不是心源性休克的情況，提示了激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)是膿毒性休克中的關(guān)鍵因素(Martinez-Brotons F.et al.，Thromb.Haemostas.58709-713(1987))。盡管引起膿毒性休克、DIC和低血壓的實(shí)際事件尚未得到確認(rèn)，不過(guò)在很多生理系統(tǒng)各種組分之間的相互作用提示了接觸途徑的活化可能引起膿毒性休克狀態(tài)、多器官衰竭和死亡(Bone，R.C.，Arch.Intern.Med.1521381-1389(1992)；Colman，R.W.，New Engl.J.Med.3201207-1209(1989))。接觸活化途徑還參與纖維蛋白沉積和溶解，以及激發(fā)嗜中性白細(xì)胞活化、補(bǔ)體的活化和血壓的調(diào)控。
補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的抑制預(yù)期引起與凝血和補(bǔ)體系統(tǒng)的接觸系統(tǒng)有關(guān)的下游應(yīng)用。血小板表面和內(nèi)皮表面上補(bǔ)體與凝血系統(tǒng)組分之間的這種相互作用能夠在血管血栓生成部位上生成炎性與趨化性肽，可能貢獻(xiàn)于改變與免疫疾病狀態(tài)有關(guān)的止血。另外，影響血小板和內(nèi)皮的免疫反應(yīng)能夠引起血小板聚集、血小板貯存顆粒分泌蛋白水解酶與血管作用性胺、和血小板與白細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮襯的粘著性增加。
其他可以用式I化合物治療的疾病和病癥包括遺傳性血管性水腫、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、傷口愈合、腦創(chuàng)傷、哮喘、血液透析、感染、皮膚病、炎性腸疾病、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、熱損傷(灼傷和凍瘡)、溶血性貧血和心肺分流術(shù)中的泵后綜合征。
已經(jīng)證明C3b與C5b-9蛋白質(zhì)的膜-攝取可以自發(fā)地發(fā)生在含檸檬酸鹽血漿中血小板的培育期間。補(bǔ)體活化也可以發(fā)生在血液收集期間，是暴露于承載C3-轉(zhuǎn)化酶反應(yīng)的塑料表面的結(jié)果。盡管補(bǔ)體活化在血液收集和輸液體外貯存期間的意義尚未被直接闡明，不過(guò)仍然已知凝血因子V與VIII的血漿水平在所貯存的血小板濃縮液中迅速下降，速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于它們?cè)跓o(wú)細(xì)胞血漿中的衰變，提示有消耗性損失。進(jìn)而，血小板的收集與貯存與囊狀質(zhì)膜微粒的增加有關(guān)，后者是C5b-9引發(fā)血小板分泌的產(chǎn)物。這些生理學(xué)與酶學(xué)變化大大減少所貯存的血小板的潛在貨價(jià)壽命，特別是用于輸液的富含血小板的血漿濃縮液，一般最多只有72小時(shí)。此外，活化C5b-9、血小板與凝血因子在所貯存的血小板濃縮液中的這種相互作用將不利地影響這些單元在輸注時(shí)的止血有效性。
移植物的體外人器官與組織貯存和存活也受到補(bǔ)體系統(tǒng)的自發(fā)性活化的不利影響，導(dǎo)致C5b-9蛋白向血管內(nèi)皮的膜插入。C5活化為C5a和C5b可以受到塑料和其他合成膜的催化，這些材料是在體外組織與器官貯存期間維持血管床灌注所需的。另外，體內(nèi)C5b-9的膜沉積已經(jīng)在移植組織的急性排斥中有牽連，因?yàn)槭荏w血漿補(bǔ)體系統(tǒng)對(duì)供體器官內(nèi)的內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生免疫活化。
血小板和內(nèi)皮細(xì)胞被C5b-9活化在自體免疫障礙和其他疾病狀態(tài)中也有分布。自發(fā)性補(bǔ)體活化和所致血小板和內(nèi)皮暴露于活化C5b-9對(duì)血管閉塞性疾病進(jìn)展的重要性在于a)內(nèi)皮下膜的白細(xì)胞浸潤(rùn)可能受到粘連性血小板的催化，已知前者出現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣變性區(qū)域，提示在血管壁有C5a的局部化生成；和b)局部血管內(nèi)補(bǔ)體活化導(dǎo)致C5b-9復(fù)合物的膜沉積，伴有冠脈閉塞，可能影響最終與梗塞有關(guān)的心肌損害程度。
因此，本發(fā)明在一方面提供體內(nèi)和體外調(diào)控和抑制補(bǔ)體-介導(dǎo)血小板與內(nèi)皮細(xì)胞活化的手段和方法。
本發(fā)明在進(jìn)一方面提供增加體外收集和貯存的血小板和組織或器官的存活率和治療功效的手段和方法。
優(yōu)選地，本發(fā)明的治療方法通過(guò)使動(dòng)物細(xì)胞與上述Cls抑制劑接觸或者對(duì)動(dòng)物給以上述Cls抑制劑，遞送Cls抑制劑。
抑制劑可以體外或體內(nèi)使用。它們可以借助任意數(shù)量的已知途徑給藥，包括口服、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)、局部、透皮和輸注(Plattet al.，美國(guó)專(zhuān)利No.4,510,130；Badalamente et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.865983-5987(1989)；Staubli et al.，BrainResearch 444153-158(1988))，一般將與生理學(xué)上可接受的載體(例如生理鹽水)或稀釋劑聯(lián)合給藥。所給予的抑制劑的有效量將憑經(jīng)驗(yàn)確定，將基于這樣的考慮因素，例如所使用的確切抑制劑、個(gè)體的條件和個(gè)體的大小與體重。預(yù)期一般終端應(yīng)用劑量范圍將是約0.01至100mg每kg每天，優(yōu)選0.1至75mg每kg每天，就有效的治療效果而言。
本發(fā)明C1s抑制劑和組合物的給藥量與制度可以由治療炎癥-相關(guān)性障礙的臨床領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易地確定，例如關(guān)節(jié)炎、組織損傷和組織排斥。一般而言，本發(fā)明組合物的劑量將因這樣的考慮因素而異，例如所采用的藥物組合物的類(lèi)型；年齡；健康；所治療的醫(yī)學(xué)病癥；并行治療的種類(lèi)，如果有的話；治療的頻率和所需效果的屬性；組織損害的程度；性別；癥狀的持續(xù)時(shí)間；和禁忌癥，如果有的話，和其他受個(gè)別醫(yī)師調(diào)整的變量。所需劑量可以在一次或多次用藥中給予，以獲得所需的結(jié)果?？梢栽趩卧?jiǎng)┬椭刑峁┖斜景l(fā)明Cls抑制劑的藥物組合物。
在一種實(shí)施方式中，服藥將借助靜脈內(nèi)注射或短期輸注。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，本發(fā)明的Cls抑制劑將被口服給藥，劑型為片劑、丸劑、錠劑、糖錠劑或膠囊劑。為了達(dá)到最佳的治療效果，可能需要維持性服藥。這類(lèi)維持性服藥可以在一天之內(nèi)反復(fù)給予，例如反復(fù)個(gè)別注射、反復(fù)口服或者連續(xù)滴注的采用。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員利用常規(guī)試驗(yàn)建立劑量響應(yīng)曲線，可以容易地確定有效劑量。
藥物組合物用于治療補(bǔ)體-介導(dǎo)疾病狀態(tài)的、包含抑制哺乳動(dòng)物Cls蛋白酶功能有效量的式I化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物屬于本發(fā)明的范圍。
包含有效量本發(fā)明Cls抑制劑與任意常規(guī)藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑組合的藥物組合物包括在本發(fā)明中。
就醫(yī)藥用途而言，藥學(xué)上可接受的酸加成鹽是優(yōu)選的，在這些鹽中，陰離子不會(huì)顯著貢獻(xiàn)于有機(jī)陽(yáng)離子的毒性或藥理活性。酸加成鹽是這樣得到的，使式I有機(jī)堿與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸反應(yīng)，優(yōu)選地在溶液中接觸，或者借助文獻(xiàn)所述的任意標(biāo)準(zhǔn)方法，可為本領(lǐng)域任意技術(shù)人員所利用。有用的有機(jī)酸實(shí)例有羧酸，例如馬來(lái)酸、乙酸、酒石酸、丙酸、富馬酸、羥乙磺酸、琥珀酸、環(huán)己氨磺酸、新戊酸等；有用的無(wú)機(jī)酸是氫鹵酸，例如HCl、HBr和HI；硫酸；磷酸等。生成酸加成鹽所優(yōu)選的酸包括HCl和乙酸。
本發(fā)明藥物組合物可以對(duì)任意能夠體驗(yàn)到本發(fā)明化合物有益效果的動(dòng)物給藥。在這類(lèi)動(dòng)物中最重要的是人，不過(guò)本發(fā)明并不打算僅限于此。
本發(fā)明藥物組合物可以借助任意實(shí)現(xiàn)預(yù)期目的的手段給藥。例如，給藥可以借助腸胃外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、透皮、頰或眼部途徑。備選地或者并行地，給藥可以借助口服途徑。給藥劑量將依賴于接受者的年齡、健康與體重、并行治療(如果有的話)的種類(lèi)、治療的頻率和所需效果的屬性。
除了藥理活性化合物以外，新的藥物制備物可以含有適合的藥學(xué)上可接受的載體，包含賦形劑和助劑，它們有利于活性化合物加工為能夠藥用的制備物。
本發(fā)明藥物制備物是按照本身已知的方式制造的，例如借助常規(guī)的混合、造粒、制丸、溶解或凍干過(guò)程。因而，口用藥物制備物可以這樣得到，將活性化合物與固體賦形劑混合，可選地研磨所得混合物，如果需要或必要的話，在加入適合的助劑后，加工顆?；旌衔?，得到片劑或錠劑芯。
適合的賦形劑確切地是填充劑，例如糖類(lèi)，例如乳糖或蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇，纖維素制備物和/或鈣的磷酸鹽，例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣；以及粘合劑，例如淀粉糊，例如玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴薯淀粉，明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要的話，可以加入崩解劑，例如上面提到的淀粉，還有羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、或者藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。助劑首先是流動(dòng)調(diào)節(jié)劑和潤(rùn)滑劑，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇。錠劑芯帶有適合的包衣，如果需要的話，包衣是耐受胃液的。為此，可以使用濃糖溶液，它可以可選地含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和適合的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。為了形成耐受胃液的包衣，使用適合的纖維素制備物的溶液，例如乙酰纖維素鄰苯二甲酸鹽或羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸鹽。可以向片劑或錠劑包衣加入染料或色素，例如用于鑒別或者為了區(qū)分活性化合物劑量的組合。
其他可以口用的藥物制備物包括由明膠制成的推入-配合式膠囊劑、以及由明膠和增塑劑制成的軟密封膠囊劑，所述增塑劑例如甘油或山梨糖醇。推入-配合式膠囊劑可以含有顆粒形式的活性化合物，它們可以與下列成分混合填充劑，例如乳糖；粘合劑，例如淀粉；和/或潤(rùn)滑劑，例如滑石或硬脂酸鎂；和可選的穩(wěn)定劑。在軟膠囊劑中，優(yōu)選地將活性化合物溶解或懸浮在適合的液體中，例如脂肪油或液體石蠟。另外，可以加入穩(wěn)定劑。
適合于腸胃外給藥的制劑包括水溶性形式活性化合物的水溶液，例如水溶性鹽、堿性溶液和環(huán)糊精包合物。尤其優(yōu)選的鹽是鹽酸鹽和乙酸鹽?？梢圆捎靡环N或多種改性或未改性環(huán)糊精，使本發(fā)明化合物穩(wěn)定和增加其水溶解度?？捎糜谶@種目的的環(huán)糊精公開(kāi)在美國(guó)專(zhuān)利Nos.4,727,064、4,764,604和5,024,998中。
另外，可以給以活性化合物的懸液，為適當(dāng)?shù)挠托宰⑸鋺乙?。適合的親脂性溶劑或載體包括脂肪油，例如芝麻油，或合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯或聚乙二醇-400(這些化合物可溶于PEG-400)。水性注射懸液可以含有增加懸液粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇和/或葡聚糖?？蛇x地，懸液還可以含有穩(wěn)定劑。
當(dāng)作為凝血酶抑制劑使用時(shí)，本發(fā)明化合物的給藥有效量可以在約0.1至約500mg/kg的劑量范圍內(nèi)，優(yōu)選在約0.1與約10mg/kg體重之間，每日劑量單次或者分2-4次給予。
制備方法很多用于生成本發(fā)明化合物的合成方法一般牽涉從羧酸衍生物、例如酯生成脒。在該過(guò)程中，在質(zhì)子惰性溶劑中，例如甲苯，在惰性氣氛下(例如在氮或氬氣氛下)，在-15℃與5℃之間的溫度下，優(yōu)選0℃，向一種氨源、例如氯化銨加入一種路易斯酸、例如三甲基鋁。向該混合物加入適當(dāng)?shù)聂人嵫苌铮瑢⒒旌衔镌诨亓飨录訜犷A(yù)定時(shí)間，優(yōu)選在1小時(shí)與24小時(shí)之間，最優(yōu)選在1小時(shí)與4小時(shí)之間。使所得溶液冷卻至室溫，借助已知方法分離脒產(chǎn)物。
流程1 X＝O，SW＝CN，COOH，CONH2，CO2R8L＝Br
流程1闡述制備式I化合物的一般方法，其中X＝O或S，R1＝烷硫基、芳烷硫基、芳硫基、烷氧基、芳烷氧基或芳氧基。開(kāi)始于其中X是被離去基團(tuán)適當(dāng)取代的O或S的雜環(huán)，可以將這些離去基團(tuán)用適當(dāng)?shù)牧虼柬樞虻刂脫Q，生成4-取代的雜環(huán)。在有些情況下，可以使用二硫化物和還原劑，例如三苯膦，用于硫醇的就地生成。離去基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴或碘。將所得硫化物用適當(dāng)?shù)难趸瘎┭趸癁閬嗧炕蝽?，所述氧化劑例如間-氯過(guò)苯甲酸或過(guò)氧化氫的乙酸溶液。當(dāng)4-取代基是砜時(shí)，然后可以將硝基用適當(dāng)?shù)挠H核試劑(優(yōu)選所要取代的基團(tuán)R1的陰離子)置換，生成5-取代的雜環(huán)。優(yōu)選的親核試劑包括硫醇或醇的陰離子，具有堿金屬或堿土金屬作為抗衡離子，例如鈉、鋰、鉀、鎂或銫。
流程2 流程2闡述提供式I化合物脒((R3R4N)CNR2)官能度的方法，其中X＝O或S，R1＝鹵代、烷基、烷硫基、芳烷硫基、芳硫基、烷氧基、芳烷氧基或芳氧基。根據(jù)4中基團(tuán)W的屬性，在W向(R3R4N)CNR2的轉(zhuǎn)化中可以采用若干方法。
當(dāng)4中的W是氰基(CN)、伯酰胺(CONH2)或酯(CO2R9)時(shí)，用一種試劑處理，可以進(jìn)行向未取代脒6(即式I，其中R2、R3、R4＝H)的直接轉(zhuǎn)化，所述試劑由與氨配位化合的路易斯酸組成。這種配合物是這樣生成的，將氨或一種銨鹽、優(yōu)選一種鹵化銨、最優(yōu)選氯化銨或溴化銨用一種適當(dāng)?shù)穆芬姿固幚?，?yōu)選三烷基鋁，最優(yōu)選三甲基-或三乙基-鋁，所用溶劑對(duì)所采用的路易斯酸而言是惰性的。例如，當(dāng)采用三烷基鋁路易斯酸與鹵化銨時(shí)，反應(yīng)消耗一當(dāng)量烷烴，生成氨的二烷基鹵代鋁配合物(例如參見(jiàn)Sidler，D.R.，et al.，J.Org.Chem.，591231(1994))。適合的溶劑的實(shí)例包括不飽和烴，例如苯、甲苯、二甲苯或_，優(yōu)選甲苯，或鹵代烴，例如二氯乙烷、氯苯或二氯苯。脒化反應(yīng)一般是在高溫下進(jìn)行的，優(yōu)選40-200℃，更優(yōu)選80-140℃，最優(yōu)選溶劑的回流溫度，在80-120℃的范圍內(nèi)。當(dāng)W是氰基(CN)時(shí)，向單-或二-取代脒6的直接轉(zhuǎn)化也有可能是用一種試劑處理的，所述試劑由與單-或二-取代的胺H2NR3或HNR3R4配位化合的一種路易斯酸、優(yōu)選三烷基鋁組成(Garigipati，R.，Tetrahedron Lett.311969(1990))。備選地，單-或二-取代的胺的相同加成可以受到一種銅鹽的催化，例如氯化Cu(I)(Rousselet，G.，et al.，Tetrahedron Lett.346395(1993))。
當(dāng)4中的W是羧基(CO2H)時(shí)，可以進(jìn)行向未取代脒6的間接轉(zhuǎn)化，首先進(jìn)行大量熟知的脫水劑中任一種(例如二環(huán)己基碳二亞胺)與一種醇(R8OH)的酯化作用，得到5。更優(yōu)選地，5可以這樣制備，將4用大量的HCl與另一種酸的酸酐中任一種處理，首先生成酰氯，例如亞硫酰氯、POCl3、PCl3、PCl5或者更優(yōu)選草酰氯，加入或者不加入催化劑，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，繼之以醇R8OH處理。用與氨配位化合的路易斯處理，可以進(jìn)行向未取代脒6(R2，R3，R4＝H)的轉(zhuǎn)化。
脒6還可以這樣間接生成，通過(guò)暴露于一種強(qiáng)酸將4(W＝CN)轉(zhuǎn)化為亞氨基醚7，所述強(qiáng)酸例如鹵化氫、HBF4或其他非親核性酸，優(yōu)選氣態(tài)HC1，反應(yīng)在醇R8OH(R8＝烷基、支鏈烷基或環(huán)烷基，優(yōu)選Me或Et)的存在下，最優(yōu)選地以該醇作為溶劑。備選地，當(dāng)W＝CONH2時(shí)，用三烷基氧鎓鹽(Meerwein鹽)處理，可以進(jìn)行向亞氨基酯的轉(zhuǎn)化。在任一情況下，將亞氨基醚用氨(R3，R4＝H)或者單-或二-取代胺(HNR3R4)處理，得到對(duì)應(yīng)的未取代或取代的脒6(即經(jīng)由經(jīng)典的Pinner合成Pinner，A.，Die Iminoaether und ihre Derivate，Verlag R.Oppenheim，Berlin(1892))。
在乙醇中將未取代脒6(R2，R3，R4＝H)、羥胺和一種堿、優(yōu)選三乙胺回流，可以實(shí)現(xiàn)向取代脒6(R2，R3＝H，R4＝OH)的轉(zhuǎn)化。
流程3 流程3闡述一種制備芳基硫醇的方法，當(dāng)這類(lèi)芳基硫醇不能商業(yè)上得到時(shí)可以用在流程1中。開(kāi)始于一種芳基鹵，它對(duì)強(qiáng)親核試劑具有充分的穩(wěn)定性，可以使該芳基鹵與堿土金屬在一種惰性醚溶劑中、例如二乙醚、在回流下反應(yīng)，得到反應(yīng)性有機(jī)金屬物質(zhì)。優(yōu)選的金屬包括鋰、鎂和鈉，而鹵化物可以是芳基碘化物或溴化物。備選地，芳基-金屬物質(zhì)可以通過(guò)與另一種有機(jī)金屬試劑的金屬-鹵素置換作用而生成，反應(yīng)在低溫下、在醚溶劑中進(jìn)行。有用的有機(jī)金屬試劑包括任意異構(gòu)的丁基鋰和異丙基鎂的溴化物或氯化物。在這種情形中，芳基鹵必須是芳基溴化物或碘化物，并且是對(duì)強(qiáng)親核試劑穩(wěn)定的。
然后可以使芳基-金屬試劑與元素硫反應(yīng)，以提供芳基硫醇(12)與二硫化物氧化產(chǎn)物(11)的混合物?？梢允苟蚧锱c一種還原劑反應(yīng)，例如硼氫化鈉、二硫蘇糖醇或三苯膦，得到芳基硫醇(12)。
流程4 流程4闡述另一種制備芳基硫醇的方法，當(dāng)這類(lèi)芳基硫醇不能商業(yè)上得到時(shí)可以用在流程1中?？梢詫⒎蓟?3轉(zhuǎn)化為重氮鹽，與O-乙基黃原酸鉀鹽(Aldrich Chemical Company)反應(yīng)，得到O-乙基-S-芳基二硫代碳酸酯，隨后可以水解得到芳基硫醇15。在有些情況下，水解作用可以提供芳基硫醇(15)與二硫化物氧化產(chǎn)物(14)的混合物?？梢允苟蚧锱c一種還原劑反應(yīng)，例如硼氫化鈉、二硫蘇糖醇或三苯膦，得到芳基硫醇(15)。
流程5 X＝O，SW＝CN，COOH，CONH2，CO2R8Z＝SO，SO2R1＝鹵素流程5闡述制備式I化合物的一般方法，其中X＝O或S，R1＝鹵素。將如流程1所述方式所得硝基雜環(huán)3還原為氨基雜環(huán)16。適合于進(jìn)行硝基官能度還原的試劑包括氫氣，反應(yīng)在一種催化劑的存在下進(jìn)行，例如沉積在碳或硫酸鋇上的鈀或鉑金屬，在任意數(shù)量的溶劑中，例如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、DMF或THF?？梢圆捎寐然a(II)作為還原劑，反應(yīng)在一種溶劑中進(jìn)行，例如甲醇或乙醇。備選地，還可以使用金屬，例如鋅或鐵(Stanetty，P.and Kremslehner，M.，Heterocycles 48259(1998))。更優(yōu)選地，可以使用氯化鈦(III)的HCl溶液(參見(jiàn)Ho，Wong，Synthesis，45(1974))作為還原劑。氨基雜環(huán)16然后可以借助重氮化作用轉(zhuǎn)化為鹵化物17。當(dāng)X＝Cl或Br時(shí)，這種反應(yīng)是這樣進(jìn)行的，將氨基雜環(huán)16用亞硝酸叔丁酯和銅(II)的氯化物或溴化物處理，如Sandmeyer反應(yīng)所述(參見(jiàn)Doyle；Siegfried；Dellaria，J.Org.Chem.422426(1977))。
流程6A E＝B(OR10)2，ZnY，Sn(R10)3Y＝Cl，Br，IR10＝烷基流程6a闡述提供存在于式II化合物中的雙芳基官能度的方法，其中R5可以是被取代的芳族或雜芳族環(huán)(芳基或雜芳基)。開(kāi)始于兩種芳基溴之一，即甲基羧酸酯18或Boc-脒20，使用適當(dāng)取代的芳基代硼酸、芳基鋅酸鹽或芳基甲錫烷，可以發(fā)生過(guò)渡金屬催化的交叉-偶聯(lián)反應(yīng)，分別在Suzuki(Miyaura，N.；Suzuki，A.，Chem.Rev.952457(1995))、Negishi(Negishi，E.et al.，J.Org.Chem.421821(1977))或Stille條件下(Stille，J.K.Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.25508(1986)，和其中所包含的參考文獻(xiàn))。
Stille-型交叉-偶聯(lián)反應(yīng)發(fā)生在惰性氣氛下、芳基甲錫烷與芳基鹵之間，受到一種催化劑的介導(dǎo)，例如四-三苯膦鈀。反應(yīng)通常是這樣進(jìn)行的，在室溫至150℃的溫度下，在具有適當(dāng)沸點(diǎn)的質(zhì)子惰性溶劑中，例如四氫呋喃、甲苯或二甲基甲酰胺。在有些情況下，添加劑能夠促進(jìn)交叉-偶聯(lián)反應(yīng)，例如氯化鋰(Curran，D.P.et al.，J.Org.Chem.616480(1996))或碘化銅(Liebeskind，L. S.；Fengl，R.W.，J.Org.Chem.55359(1990))。
更優(yōu)選的芳基溴18與20的交叉-偶聯(lián)反應(yīng)發(fā)生在Negishi條件下，采用一種芳基鋅試劑。該芳基鋅試劑可以這樣制備，進(jìn)行芳基格利雅試劑或芳基鋰試劑與鹵化鋅鹽的金屬轉(zhuǎn)移作用，或者更優(yōu)選地，直接從芳基鹵和活化鋅制備(Reike，R.D.，Tetrahedron 531925(1997))。交叉-偶聯(lián)反應(yīng)一般發(fā)生在60與100℃之間的溫度下、在THF或THF/極性質(zhì)子惰性助溶劑混合物中。四(三苯膦)鈀是最廣泛使用的催化劑，不過(guò)新型催化劑可以提供更強(qiáng)的反應(yīng)性，例如二叔丁膦鈀(Dai，C.；Fu，G.C.，J.Am.Chem.Soc.1232719(2001))。
最優(yōu)選和廣泛適用的芳基溴18與20的雙芳基-生成反應(yīng)條件發(fā)生在Suzuki條件下?？梢圆捎煤芏嘟M反應(yīng)條件，以促進(jìn)Suzuki-型交叉-偶聯(lián)反應(yīng)。它們包括無(wú)水或含水溶劑、適當(dāng)?shù)膲A與過(guò)渡金屬催化劑的適當(dāng)組合，所述堿例如金屬的碳酸鹽、磷酸鹽和氟化物。就雙芳基砜21和23的合成而言，最普遍的反應(yīng)條件是使芳基溴18或20與芳基代硼酸或芳基代硼酸酯(例如頻哪醇代硼酸酯)在兩相甲苯/乙醇/含水碳酸鈉溶劑系統(tǒng)中反應(yīng)。在這些含水條件下使用四-三苯膦鈀作為催化劑。在無(wú)水條件下，新型催化劑可以在更低的催化劑負(fù)載下提供更強(qiáng)的反應(yīng)性，例如二叔丁膦鈀(Littke，A.F.et al.，J.Am.Chem.Soc.1224020(2000))和雙(鄰-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯)鈀(Wolfe，J.P.et al.，J.Am.Chem.Soc.1219550(1999))。
流程6B E＝B(OR10)2，Sn(R10)3Y＝Cl，Br，IL＝離去基團(tuán)流程6b描述制備式II化合物的替代途徑，其中R5是芳基或雜芳基。將Boc-保護(hù)的脒20轉(zhuǎn)化為有機(jī)硼或有機(jī)錫烷66，然后在鈀催化劑的存在下與適合的鹵化物或三氟甲磺酸酯反應(yīng)，得到21，再如流程6a所述轉(zhuǎn)化為脒22。當(dāng)E是硼或錫時(shí)，66的優(yōu)選合成方法是首先將20用一種堿處理，例如異丙基氯化鎂，繼之以用一種適合的試劑鋰化，例如正丁基鋰，繼之以與一種親電試劑反應(yīng)，例如硼酸三甲酯或三丁基氯化錫。
另一種引入雜芳族的方法是制備67。這是這樣完成的，將如上所述制備的有機(jī)鋰用一種適合的親電試劑處理，例如N，N-二甲基甲酰胺。然后使用二胺試劑完成67向21的轉(zhuǎn)化，例如使用1，2-苯二胺得到2-取代的苯并咪唑，或者使用乙酸銨和乙二醛得到2-取代的咪唑，再如流程6a所述轉(zhuǎn)化為脒22。
流程6C R13，R14＝烷基、芳基、雜芳基、芳烷基流程6c描述向式I苯基環(huán)引入烷基的方法。將化合物20用一種堿處理，例如異丙基氯化鎂，繼之以用一種適合的試劑鋰化，例如正丁基鋰，繼之以與親電試劑反應(yīng)，例如醛和酮，得到68(Wakefield，B.J.The Chemistry of Organolithium Compounds；PergamonOxford，1974；Wakefield，B.J.Organolithium Methods；AcademicSan Diego，1990)，再如流程6a所述轉(zhuǎn)化為脒22。
流程6D R13，R14＝烷基、芳基、雜芳基、芳烷基流程6d描述制備式I化合物的方法，其中Ar殘基在間位被胺取代。利用過(guò)渡金屬催化的溴化物69與胺的偶聯(lián)來(lái)合成芳基胺70。適合的過(guò)渡金屬催化劑的實(shí)例包括鈀(0)或鈀(II)化合物，例如乙酸鈀(II)(Pd(OAc)2)、三(亞芐基丙酮)二鈀(Pd2(dba)3)、四(三苯膦)鈀(0)(Ph3P)3Pd)、雙(1，5-環(huán)辛二烯)鎳(II)(Ni(COD)2)或(1，1′-雙(二苯膦基)二茂鐵基二氯化鎳，并且在有或沒(méi)有配位配體的存在下，在適合的堿和溶劑的存在下。優(yōu)選的催化劑包括Pd(OAc)2和Pd2(dba)3。配位配體的實(shí)例包括三叔丁基膦、2，2′-雙(二苯膦基)-1，1′-聯(lián)萘(BINAP)、2，2′-雙(二甲苯膦基)-1，1′-聯(lián)萘(tol-BINAP)、1，1′-雙(二苯膦基)二茂鐵(DPPF)、雙(2-二苯膦基苯基)醚(DPEphos)、2-(二叔丁膦基)聯(lián)苯(DBPB)、2-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯(DCPB)、2-二環(huán)己膦基-2-(N，N-二甲氨基)聯(lián)苯(DCDMB)。鈀-催化的反應(yīng)所優(yōu)選的配體包括BINAP、DBPB、DCPB和DCDMB。鎳-催化的反應(yīng)所優(yōu)選的配體包括DPPF或1，10-菲咯啉。適合的堿的實(shí)例包括叔丁醇鈉、叔丁醇鉀、碳酸銫、碳酸鉀、磷酸鉀或氟化銫，根據(jù)存在于70中的其他官能度和被偶聯(lián)的胺，叔丁醇鈉、磷酸鉀或碳酸銫是優(yōu)選的。適合的溶劑包括芳族烴，例如苯、甲苯或二甲苯；醚，例如二甲氧基乙烷(DME)或1，4-二噁烷；或酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺或N-甲基吡咯烷酮。優(yōu)選的溶劑包括甲苯、DME和1，4-二噁烷。偶聯(lián)反應(yīng)可以在20-160C的溫度下進(jìn)行，優(yōu)選20-100C，最優(yōu)選能夠提供少于24小時(shí)反應(yīng)時(shí)間的最低可能溫度。就代表性方法、催化劑、條件實(shí)例和這些類(lèi)型鈀-催化偶聯(lián)反應(yīng)的綜述而言，參見(jiàn)J.P.Wolfe，etal.，Acc.Chem.Res.，31805-18(1998)，C.G.Frost，et al.，J.Chem.Soc.，Perkin Trans 1，2615-23(1998)和J.P.Wolfe，J.Org.Chem.，651158-74(1998)。就鎳-催化反應(yīng)的實(shí)例而言，參見(jiàn)J.P.Wolfe and S.L.Buchwald，J.Am.Chem.Soc.，1196054-58(1997)。用鋰化的氨基甲酸叔丁酯(Aldrich Chemical Company，WI，USA)處理，可以將腈70轉(zhuǎn)化為BOC-保護(hù)的脒。將71用TFA處理，得到脒72。
雙芳基完成后，通過(guò)甲基羧酸酯23的脒化作用(流程2)，或者在有機(jī)溶劑、例如二噁烷中將Boc-脒21用三氟乙酸或鹽酸去保護(hù)，完成脒22。
流程7 R10＝烷基，H當(dāng)不是商業(yè)上可得到的時(shí)，可以借助流程7所述方法合成式25和26芳基代硼酸，其中Ar是苯基、萘基或雜環(huán)，它們中任一個(gè)是可選被取代的。當(dāng)Y是Br、I或Cl且Ar耐受于強(qiáng)堿和/或親核條件時(shí)，優(yōu)選的方法牽涉與n-BuLi的鋰/鹵素置換，繼之以硼酸三甲酯、硼酸三異丙酯或硼酸三乙酯處理，得到式26化合物，其中R10是Me、Et、iPr或H。備選地，當(dāng)Y是H且在Ar中存在鄰位定向基團(tuán)時(shí)，利用n-BuLi或t-BuLi可以直接實(shí)現(xiàn)24的區(qū)域選擇性金屬化。在這類(lèi)情況下，將金屬化物用硼酸三甲酯、硼酸三異丙酯或硼酸三乙酯處理，得到式26化合物，其中R10是Me、Et、iPr或H。適合于這種轉(zhuǎn)化作用的鄰位定向基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于OCH2OCH3、SO2NR2、CONR2、CONHR、NHCOR、NHCO2R和CSNHR(Mark，R.，et al，J.Org.Chem.472101(1982)；Townsend，C.，et al.，Tetrahedron Lett.3923(1981))。當(dāng)Ar含有敏感于堿和/或親核試劑的官能團(tuán)時(shí)，利用若干牽涉鈀(0)-介導(dǎo)的芳基鹵的硼化作用的方法之一可以進(jìn)行24向式25芳基代硼酸的轉(zhuǎn)化，24中Y是Br、I、Cl或OTf(Ishiyama，T.，et al.，J.Org.Chem.607508(1995))。這種轉(zhuǎn)化作用的實(shí)例包括但不限于將24用如下物質(zhì)處理1)Pd(PPh3)4、(PPh3)2PdCl2或PdCl2(dppf)、頻哪醇硼烷和Et3N，在二噁烷中，在100℃下(Murata，M.，et al.，J.Org.Chem.65164(2000))；2)Pd(OAc)2、(2′-二環(huán)己磷基-聯(lián)苯-2-基)-二甲基-胺、雙(頻哪醇代)二硼和K3PO4，在甲苯中，在95℃下(Old，D.W.，et al.，J.Am.Chem.Soc.1209722(1998))；3)PdCl2(dppf)、雙(頻哪醇代)二硼和KOAc，在DMSO中(Ishiyama，T.，et al.，J.Org.Chem.607508(1995))。適合于這種轉(zhuǎn)化作用的反應(yīng)時(shí)間為12-24小時(shí)。
流程8 X＝O，SW＝CN，COOH，CONH2，CO2R8L＝Br
流程8闡述制備式I化合物的替代方法，其中X＝O或?yàn)镾，R1＝鹵代、烷硫基、芳烷硫基、芳硫基、烷氧基、芳烷氧基或芳氧基。可以將被離去基團(tuán)L適當(dāng)取代的雜環(huán)27用R1的陰離子取代，得到中間體28。當(dāng)L＝鹵代時(shí)，鹵化物可以被單獨(dú)剩下，得到R1＝鹵代。然后從硝基的還原作用得到胺29。適合于進(jìn)行硝基官能度還原的試劑包括氫氣，在一種催化劑的存在下，例如沉積在碳或硫酸鋇上的鈀或鉑金屬，在任意數(shù)量的溶劑中，例如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、DMF或THF。更優(yōu)選地，可以采用氯化錫(II)作為還原劑，反應(yīng)在一種溶劑中進(jìn)行，例如甲醇或乙醇。備選地，還可以使用金屬，例如鋅或鐵(Stanetty，P.andKremslehner，M.，Heterocycles 48259(1998))。當(dāng)R1是鹵代時(shí)，氯化鈦(III)的HCl溶液(參見(jiàn)Ho，Wong，Synthesis，45(1974))是優(yōu)選的還原劑。然后在二氧化硫和氯化銅(II)的存在下，借助重氮化作用，可以將胺29轉(zhuǎn)化為磺酰氯30(Ramsay，G.C.et al.，J.Am.Chem.Soc.931166-1171(1971)，歐洲專(zhuān)利EP 983982)。然后可以將磺酰氯30用亞硫酸鈉和碳酸氫鈉處理，得到亞磺酸鈉31(Field L.andClark.R.D.，Organic Synthesis Collective Vol.IV，674-677，JohnWiley and Sons，Inc.1963)。然后在一種溶劑中，例如乙醇，使亞磺酸鹽31與被離去基團(tuán)適當(dāng)取代的烷基或芳基反應(yīng)，將亞磺酸鹽31轉(zhuǎn)化為砜32(Field L.and Clark.R.D.，Organic Synthesis CollectiveVol.IV，674-677，John Wiley and Sons，Inc.1963)。
流程9闡述流程8所示方法的具體實(shí)例。亞磺酸鹽33可以這樣得到，按照流程8處理4-硝基-5-溴-噻吩-2-羧酸甲基酯(Dell′Erba，C.andSpinelli，D.，Tetrahedron 211061(1965)；Dell′Erba，C.et al.，J.Chem.Soc.，Perkin Trans 2，1779(1989))。在一種溶劑中，例如含水乙醇，可以將亞磺酸鹽33用34處理(Hazelton，C.J.et al.，Tetrahedron，515597(1995))，以乙酸作為催化劑，得到砜35。在含水乙醇中，將砜35用連二亞硫酸鈉處理，得到36(Hazelton，C.J.et al.，Tetrahedron，515597(1995))，再利用流程6所述方法與芳基殘基交叉-偶聯(lián)，得到式37化合物?？梢詫⒒衔?6和37都用熱甲酸處理，分別得到化合物42和38。然后可以將苯并咪唑38和42烷基化，分別得到39-41和43-44。借助流程2所述方法可以將這些酯轉(zhuǎn)化為它們的脒。
流程9
流程9B 流程9b闡述制備式X化合物的1-烷基-5-磺酰基-苯并咪唑的方法，其中R＝H、鹵代、烷基、烷氧基，R1＝烷基或芳基。按照與流程11所述相似的方式，可以從對(duì)應(yīng)的磺酰氯制備適當(dāng)取代的亞磺酸鹽。適當(dāng)取代的芳基亞磺酸鹽74與溴-硝基-噻吩1反應(yīng)，得到單-與雙-砜加合物的混合物。-78℃下的硫代甲醇化物加成化學(xué)選擇性地發(fā)生在噻吩的5-位，就兩種加合物而言都是如此，得到中間體75。在Sandmeyer重氮化條件下將苯胺75轉(zhuǎn)化為芳基鹵76(Doyle，M.P.et al.J.Org.Chem.42，2426(1977))。在一種堿(NaOAc或DIEA)的存在下，在60-80℃下加熱這種鹵代-硝基芳烴與一種胺或芳基胺，得到取代的苯胺77。還原硝基(例如Fe/AcOH，在乙醇中)，繼之以在甲酸中加熱，得到苯并咪唑78，如流程2所述可以將其轉(zhuǎn)化為脒79。
流程10 流程10描述式48和49化合物的合成，它們?cè)诒交h(huán)上具有兩個(gè)關(guān)于砜而言的間位取代?；衔?5中的叔丁基苯酚醚可以用一種強(qiáng)酸處理脫保護(hù)，分別例如TFA或HCl的DCM或二噁烷溶液?？梢詫⒒衔?6中的游離酚在標(biāo)準(zhǔn)條件下用烷基鹵和一種堿、優(yōu)選Cs2CO3在丙酮中烷基化，得到式47所述化合物。烷基化劑(R11)的實(shí)例包括但不限于烯丙基溴、芐基溴、甲基碘、2-溴乙酸酯和2-溴乙酰胺。式47中的羧酸酯可以直接轉(zhuǎn)化為脒或被屏蔽的脒，如流程2所述，得到式48化合物。備選地，可以將47用各種芳基代硼酸和雜環(huán)代硼酸交叉-偶聯(lián)，如流程6所示，繼之以脒化作用，如前文所述，得到包含在式49中的化合物。
流程11 X＝O，SW＝CN，CONH2，CO2R8L＝Br
流程11闡述另一種制備式I化合物的方法，其中X＝O或S，R1＝鹵代、烷硫基、芳烷硫基、芳硫基、烷氧基、芳烷氧基或芳氧基。將其中Ar是芳基或雜芳基的磺酰氯50用亞硫酸鈉和碳酸氫鈉處理，得到亞磺酸鈉51(Field L.and Clark.R.D.，Organic Synthesis CollectiveVol.IV，pp.674-677，John Wiley and Sons，Inc.(1963))。使亞磺酸鹽51與1反應(yīng)，可以將亞磺酸鹽51轉(zhuǎn)化為砜3。然后可以如流程1所述處理砜3，得到中間體4，再借助流程2所述方法可以轉(zhuǎn)化為脒。
流程12
流程12闡述流程11所示方法的具體實(shí)例。將吡啶基磺酰氯(Aldrich)52轉(zhuǎn)化為亞磺酸，再與噻吩酯54反應(yīng)，得到砜55。然后如流程1所述處理砜(55)，得到中間體56?？梢詫⒅虚g體56用氨或鋅粉在乙酸中處理(Krutosikova，A.；Sleziak，R.Collect.Czech.Chem.Commun.(1996)61，1627-1636)，分別得到化合物58或59。利用流程6所述方法可以將酰胺58轉(zhuǎn)化為雙芳基化合物60。如流程2所述，可以將化合物56、58、59和60分別轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的脒57、61、62和63。
流程13
流程13闡述制備式I化合物和式II化合物的一般途徑，式I中Ar是取代的3-吡啶基(當(dāng)A＝N時(shí))，式II中苯基砜部分在4-位具有氨基(A＝N，C)。如流程12所述制備砜56，然后如流程1所述處理，得到對(duì)應(yīng)的脒，將其進(jìn)行BOC-保護(hù)，得到中間體64。可以將中間體64中的C1基團(tuán)用胺置換，得到取代的氨基吡啶，用三氟乙酸處理后得到化合物65?？梢詫⒅虚g體56用Zn粉處理(Krutosikova，A.；Sleziak，R.Collect.Czech.Chem.Commun.(1996)61，1627-1636)，得到脫鹵化產(chǎn)物59，它也可以轉(zhuǎn)化為脒63。中間體56中的鹵素Y(當(dāng)A＝N或C時(shí))也可以被氨取代，得到58，它可以轉(zhuǎn)化為脒62。備選地，利用流程6所述方法可以將58轉(zhuǎn)化為雙芳基化合物60。
流程14 R19＝H，CH3當(dāng)A＝C，R18＝H，OCH3，NO2，NHCO(CH2)2Si(CH3)3時(shí)當(dāng)A＝N，R18＝孤對(duì)電子時(shí)流程14闡述式II化合物的一般合成方法，其中R5是2-氨基苯基或2-氨基-4-吡啶基，氨基是進(jìn)一步被取代的。雙芳基中間體80可以這樣制備，利用與流程6a所述相似的條件，將20用適當(dāng)取代的芳基代硼酸酯或代硼酸處理，或者利用與流程6b所述相似的條件，將66用適當(dāng)取代的芳基鹵或三氟甲磺酸酯處理。利用這樣的條件可以將中間體2轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的取代的脲81，例如氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯，在一種堿的存在下，例如吡啶，繼之以加入取代的胺，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸。在備選的方法中，可以在一種堿的存在下，例如三乙胺，將中間體80用試劑處理，例如取代的異氰酸酯，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸，得到對(duì)應(yīng)的取代的脲81。中間體2也可以這樣轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺82，使用試劑，例如取代的酸，在偶聯(lián)劑的存在下，例如EDCI和HOBt，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸。中間體80也可以這樣轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺或磺酰胺82，在一種堿的存在下，例如三乙胺，用酰氯、磺酰氯、酸酐或活化酯處理，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸。
流程15
流程15闡述式II化合物的一般合成方法，其中R5是2，4-二氨基苯基，氨基是進(jìn)一步被取代的。按照與流程14所述相似的方式可以合成中間體83。當(dāng)R23是被掩蔽的胺時(shí)，例如硝基，或者氨基甲酸三甲代甲硅烷基乙基酯(Teoc)，可以將鄰-苯胺用各種試劑官能化，例如酰氯、磺酰氯、活化羧酸酯和異氰酸酯，得到化合物84。當(dāng)化合物84的R23是硝基時(shí)，在含水氯化銨的乙醇溶液中，使用鐵粉，在溫和條件下可以將其還原為氨基(R1＝NO2)，進(jìn)一步與試劑反應(yīng)，例如酰氯、磺酰氯、活化羧酸酯、異氰酸酯、胍基化劑、烷基鹵和醛(還原性胺化)，得到化合物86。當(dāng)R23是被保護(hù)的苯胺時(shí)，可以將其去保護(hù)。例如，在THF中用一種氟化物陰離子源處理，例如四丁基氟化銨，除去Teoc基團(tuán)，得到化合物85。按照上述方式可以將其進(jìn)一步官能化。
流程16 流程16闡述提供式II化合物的芳基胍官能度的方法，其中R5是具有4-氨基官能度的取代的苯基。根據(jù)基團(tuán)R的屬性，可以采用若干方法進(jìn)行苯胺87向化合物89、90或92的胍基化作用。當(dāng)R1是H或烷基時(shí)，借助苯胺與二保護(hù)的S-烷基異硫脲(例如雙-Boc-SMe-異硫脲)的反應(yīng)，可以合成未取代的或者N，N′-雙-取代的芳基胍90。下列兩種反應(yīng)條件任一個(gè)一般可以促進(jìn)這種反應(yīng)1)汞鹽(例如HgCl2)與三乙胺，在50℃下[WO-99/206208]；或者2)乙酸，在甲醇中，在40℃下[TetrahedronLett.，43，6563-6566(2000)]。當(dāng)R1是強(qiáng)吸電子基團(tuán)(例如硝基)或者含有其他酸-敏感性官能度時(shí)，汞試劑是優(yōu)選的。當(dāng)R31是或者含有氨基時(shí)，利用乙酸/甲醇條件可以實(shí)現(xiàn)4-氨基處的選擇性胍基化。借助苯胺(R1＝H，烷基)與取代的二保護(hù)的S-烷基異硫脲(例如烷基N(Boc)-C(SMe)＝NBoc)的反應(yīng)，可以合成單取代的N′-芳基胍89。乙酸/甲醇反應(yīng)條件是這種轉(zhuǎn)化作用的方法選擇。經(jīng)由雙-Boc-SMe-異硫脲與氫化物堿/烷基鹵的烷基化作用[J.Med.Chem.，36，2956-2963(1993)]或Mitsunobu反應(yīng)[J.Med.Chem.，43，2362-2370(2000)]，可以合成單烷基異硫脲原料。
備選地，可以從對(duì)應(yīng)的硫脲中間體91和94制備芳基胍。使苯胺骨架與異硫氰酸酯反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)91的制備。備選地，可以將苯胺骨架轉(zhuǎn)化為異硫氰酸酯[J.Org.Chem.，51，2613-2615(1986)]，繼之以與烷基胺、苯胺、酰肼或烷氧基胺反應(yīng)，得到94。然后在過(guò)量胺的存在下(例如氨，甲胺等)，使用氧化汞可以將硫脲轉(zhuǎn)化為胍[J.Chem.Soc，475，479(1949)]。
流程17 流程17闡述由實(shí)施例213-214代表的式II化合物的一般合成方法。在甲磺酰氯和一種堿的存在下，例如三乙胺，在一種溶劑中，例如二氯甲烷，可以將醇95轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的甲磺酸酯98。在一種堿的存在下，例如三乙胺，在一種溶劑中，例如二氯甲烷，可以將甲磺酸酯98用各種取代的親核試劑處理，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸，得到對(duì)應(yīng)的產(chǎn)物99。備選地，在一種氧化劑的存在下，例如二氧化錳，可以將化合物95轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的醛96。然后可以將醛96用各種磷內(nèi)鎓鹽處理，得到對(duì)應(yīng)的烯烴(參見(jiàn)Paterson，I.，et al.，Org.Lett.5(1)35-38(2003))，繼之以用一種酸處理，例如三氟乙酸，得到化合物100。例如，在一種堿的存在下，例如氫化鈉，在一種溶劑中，例如四氫呋喃，將醛96用(二乙氧基-磷酰甲基)-膦酸二乙酯處理，繼之以用三甲代甲硅烷基碘和一種溶劑例如二氯甲烷處理，得到化合物97(參見(jiàn)Ruzziconi，R.et al.，J.Org.Chem.68(3)736-742(2003))。
下列實(shí)施例是本發(fā)明方法和組合物的說(shuō)明而非限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員通常遇到的和顯而易見(jiàn)的各種條件和參數(shù)的其他適合的改進(jìn)和調(diào)整屬于本發(fā)明的精神和范圍。
實(shí)施例實(shí)施例14-(4′-羥基-[1，1′；3 ′，1′]三聯(lián)苯-3′-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯向含有攪拌桿的經(jīng)過(guò)烘箱干燥的燒瓶加入4-羥基聯(lián)苯(1.70g，10mmol)、甲苯磺酸(190mg，1.1mmol)、二氯甲烷(DCM，5mL)和二甲氧基丙烷(5mL)。將溶液在40℃下加熱和攪拌48小時(shí)。加入固體NaHCO3(200mg)，繼之以EtOAc(100mL)和NaOH(1N，20mL)。分離各層，將有機(jī)層進(jìn)一步用NaOH(1N，12×20mL)、鹽水(30mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(385mg，18％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.56(m，4H)，7.44(m，2H)，7.34(m，1H)，7.14(m，2H)，5.24(s，2H)，3.54(s，3H)。
b)4-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯-3-基-代硼酸在0℃下，將丁基鋰(2.5M，1.44mL，3.6mmol)歷經(jīng)5分鐘加入到攪拌著的4-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯(來(lái)自前步，385mg，1.8mmol)的Et2O(18mL)溶液中。使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)。將溶液冷卻至-78℃，快速加入硼酸三甲酯(1.23mL，10.8mmol)的THF(10mL)溶液。使反應(yīng)歷經(jīng)1小時(shí)溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)，在此期間變渾濁，出現(xiàn)明膠樣殘余物。加入EtOAc(70mL)和水(30mL)以及HCl(1N，1mL)。將兩相溶液攪拌10分鐘，分離各層。將有機(jī)層進(jìn)一步用HCl(0.1N，3×20mL)、鹽水(60mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的色譜純化(含20-40％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(135mg，29％)，為淺褐色固體。標(biāo)題化合物以烴基代硼酸與酸酐在CDCl3中的混合物存在，因此所報(bào)道的NMR信號(hào)代表相關(guān)信號(hào)對(duì)或組。
1H-NMR(CDCl3)δ8.07(d，1H，J＝2.6Hz)，7.60(m，3H)，7.42(m，2H)，7.31(m，1H)，7.19(d，1H，J＝8.6Hz)，6.20(s，1H)，5.32(s，2H)，3.77(s，1H)，3.53(s，3H).
c){亞氨基-[4-(4′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯向帶有含隔螺帽的2-英錢(qián)小瓶加入{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、4-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯-3-基-代硼酸(來(lái)自前步，103mg，0.4mmol)、含水Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。加入攪拌桿，蓋上小瓶，向溶液噴射氬達(dá)10分鐘，加入Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)。將兩相溶液在80℃惰性氣氛下劇烈攪拌16小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入EtOAc(20mL)和水(10mL)，分離各層。將有機(jī)層用飽和NaHCO3(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的制備型TLC處理(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(15mg，24％)，為淺黃色玻璃狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.27(t，1H，J＝1.9)，7.99(ddd，1H，J＝1.2，1.6，7.9Hz)，7.96(s，1H)，7.84(dt，1H，J＝1.4，7.9Hz)，7.57(m，5H)，7.45(m，2H)，7.36(m，1H)，7.30(m，1H)，5.18(s，2H)，3.41(s，3H)，2.59(s，3H)，1.52(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H32N2O6S3624.8；實(shí)測(cè)值624.9.
d)4-(4′-羥基-[1，1′；3 ′，1′]三聯(lián)苯-3′-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{亞氨基-[4-(4′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例1步驟c)15mg，0.024mmol)溶于DCM(5mL)，加入水(3滴)，繼之以三氟乙酸(5mL)。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)由HPLC純化(C18-柱，10-70％ CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(11mg，73％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.34(t，1H，J＝1.6Hz)，8.32(s，1H)，7.98(m，2H)，7.66(t，1H，J＝7.9Hz)，7.58(m，2H)，7.53(d，1H，J＝2.1Hz)，7.50(dd，1H，J＝2.3，8.4Hz)，7.41(m，2H)，7.29(m，1H)，7.02(d，1H，J＝8.4Hz)，2.71(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H20N2O3S3481.6(M+H)；實(shí)測(cè)值481.3.
實(shí)施例24-(2′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)2-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯按照實(shí)施例1步驟a所用工藝，使用2-羥基聯(lián)苯(1.70g，10mmol)、對(duì)-甲苯磺酸(190mg，1.1mmol)、DCM(5mL)和二甲氧基丙烷(5mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理，得到標(biāo)題化合物(225mg，11％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.58(m，2H)，7.44(m，2H)，7.36(m，2H)，7.32(m，1H)，7.25(dd，1H，J＝1.2，8.1Hz)，7.12(dt，1H，J＝1.2，7.4Hz)，5.14(s，2H)，3.42(s，3H).
b)4-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯-3-基-代硼酸按照實(shí)施例1步驟b所用工藝，使用2-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯((實(shí)施例2步驟a)225mg，1.05mmol)、丁基鋰(2.5M，1.44mL，3.6mmol)和硼酸三甲酯(1.23mL，10.8mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(123mg，45％)，為淺褐色固體。標(biāo)題化合物以烴基代硼酸與酸酐在CDCl3中的混合物存在，因此所報(bào)道的NMR信號(hào)代表相關(guān)信號(hào)對(duì)或組。1H-NMR(CDCl3)δ7.53(m，1H)，7.23(m，2H)，7.12(m，3H)，7.05(m，1H)，6.94(m，1H)，4.28(s，2H)，3.51(s，1H)，2.96(s，3H).
c){亞氨基-[4-(2′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、2-甲氧基甲氧基-聯(lián)苯-3-基-代硼酸((實(shí)施例2步驟b)103mg，0.4mmol)、Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(18mg，29％)，為淺黃色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ8.24(t，1H，J＝1.7Hz)，8.06(s，1H)，7.95(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.86(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.60(t，1H，J＝7.9Hz)，7.56(m，2H)，7.2-7.45(m，6H)，4.22(s，2H)，2.60(s，3H)，2.47(s，3H)，1.48(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H32N2O6S3624.8；實(shí)測(cè)值624.9.
d)4-(2′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{亞氨基-[4-(2′-甲氧基甲氧基-[1，1′；3′，1′]三聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例2步驟c)18mg，0.029mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(17mg，94％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.27(t，1H，J＝1.7Hz)，7.99(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.92(ddd，1H，J＝1.2，1.6，7.9Hz)，7.66(dt，1H，J＝0.5，7.9Hz)，7.52(m，2H)，7.45(m，2H)，7.36(m，2H)，7.26(ddd，2H，J＝1.7，3.5，7.2Hz)，7.07(t，1H，J＝7.9Hz)，2.71(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H20N2O3S3(M+H)481.6；實(shí)測(cè)值481.2.
實(shí)施例33′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯基-3-羧酸異丙基酯三氟乙酸鹽 a).3-溴-2-甲基-苯甲酸異丙基酯將亞硫酰氯(6mL)歷經(jīng)1分鐘加入到3-溴-2-甲基苯甲酸(2.15g，10mmol)在DCM(10mL)中的0℃懸液中。攪拌30分鐘后，加入THF(5mL)誘發(fā)溶解。將現(xiàn)在均勻的溶液在室溫下攪拌24小時(shí)，在真空中除去揮發(fā)性組分。將一部分粗的酰氯溶于無(wú)水異丙醇(10mL)，加入吡啶(2mL)。在室溫下攪拌4小時(shí)后，在真空中除去揮發(fā)性組分。使殘余物在EtOAc(70mL)與HCl(1M，30mL)之間分配，分離各層。將有機(jī)層用HCl(1M，10mL)、NaHCO3(3×20mL)、水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.69(d，2H，J＝7.7Hz)，7.11(t，1H，J＝7.9Hz)，5.26(七重峰，1H，J＝6.3Hz)，2.63(s，3H)，1.39(d，6H，J＝6.3Hz).
b)2-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酸異丙基酯向帶有含隔螺帽的2-英錢(qián)小瓶加入攪拌桿、3-溴-2-甲基-苯甲酸異丙基酯((實(shí)施例3步驟a)257mg，1mmol)、PdCl2(PPh3)2(42mg，0.06mmol)、二噁烷(4mL)和三乙胺(420μL，3mmol)。溶解后，加入4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(220μL，1.5mmol)，將溶液在100℃下劇烈攪拌16小時(shí)。冷卻至室溫后，加入EtOAc(30mL)和水(10mL)(氣體放出！)，分離各層。將有機(jī)層用NaHCO3(2×10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(130mg，43％)，為淺黃色玻璃狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ7.86(dd，1H，J＝1.4，7.4Hz)，7.80(dd，1H，J＝1.6，7.7Hz)，7.23(t，1H，J＝7.7Hz)，5.26(七重峰，1H，J＝6.3Hz)，2.75(s，3H)，1.37(m，18H).
c)3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯基-3-羧酸異丙基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、2-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酸異丙基酯((實(shí)施例3步驟b)92mg，0.3mmol)、Na2CO3(2M0.4mL，0.8mmol)、Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)、乙醇(0.4mL)和甲苯(0.8mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(29mg，49％)，為無(wú)色玻璃狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ7.98(dt，1H，J＝1.6，7.6Hz)，7.93(m，2H)，7.79(t，1H，J＝1.7Hz)，7.58(t，1H，J＝7.6Hz)，7.53(dt，1H，J＝1.6，7.6Hz)，7.36(s，1H)，7.30(d，1H，J＝4.5Hz)，5.27(七重峰，1H，J＝6.2Hz)，2.58(s，3H)，2.35(s，3H)，1.51(s，9H)，1.39(d，1H，J＝6.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H32N2O6S3588.8；實(shí)測(cè)值588.9.
d)3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯基-3-羧酸異丙基酯三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-甲基-聯(lián)苯基-3-羧酸異丙基酯((實(shí)施例3步驟c)29mg，0.049mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(25mg，83％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.05(dt，1H，J＝1.7，7.7Hz)，7.95(t，1H，J＝1.7Hz)，7.78(m，1H)，7.70(t，1H，J＝7.7Hz)，7.66(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.36(s，1H)，7.35(d，1H，J＝1.2Hz)，5.22(七重峰，1H，J＝6.3Hz)，2.71(s，3H)，2.31(s，3H)，1.38(d，1H，J＝6.3Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H24N2O4S3489.7(M+H)；實(shí)測(cè)值489.2.
實(shí)施例43′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯基-2-羧酸三氟乙酸鹽
a)2-碘-3-甲基-苯甲酸叔丁基酯向100-mL RB燒瓶加入2-碘-3-甲基苯甲酸(1.1g，4.2mmol)、攪拌桿、Et2O(15mL)和DCM(35mL)，在氬氣氛下冷卻至-78℃。歷經(jīng)30秒加入三氟甲磺酸(250μL)，利用8″/20號(hào)鋼針向溶液通入異丁烯(直至溶液變渾濁)。將反應(yīng)物在-78與-20℃之間攪拌6小時(shí)。加入固體NaHCO3(250mg)，使溶液溫?zé)嶂潦覝?，同時(shí)攪拌。20分鐘后，將溶液倒入含有DCM(50mL)和Na2CO3(2M，20mL)的萃取漏斗中。分離各層，將有機(jī)層用Na2CO3(2M，2×10mL)、水(20mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.05g，78％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.25(m，3H)，2.50(s，3H)，1.62(m，9H)。
b)4-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例3步驟b所用工藝，在二噁烷(12mL)中使用2-碘-3-甲基-苯甲酸叔丁基酯((實(shí)施例4步驟a)960mg，3mmol)、PdCl2(PPh3)2(126mg，0.18mmol)、三乙胺(1.25mL，9mmol)和4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(660μL，4.5mmol)，反應(yīng)溫度為80℃。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(618mg，64％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.67(m，1H)，7.25(m，2H)，2.43(s，3H)，1.57(m，9H)，1.44(m，12H).
c)3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯基-2-羧酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、4-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酸叔丁基酯((實(shí)施例4步驟b)127mg，0.4mmol)、Na2CO3(2M0.8mL，1.6mmol)、Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(35mg，58％)，為淺黃色玻璃狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.01(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.92(s，1H)，7.83(t，1H，J＝1.7Hz)，7.65(m，1H)，7.56(t，1H，J＝7.8Hz)，7.43(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.36(m，2H)，2.58(s，3H)，2.00(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/s)計(jì)算值C29H34N2O6S3602.8；實(shí)測(cè)值602.9.
d)3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯基-2-羧酸三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯基-2-羧酸叔丁基酯((實(shí)施例4步驟c)29mg，0.048mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(23mg，70％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.28(s，1H)，7.99(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.83(m，1H，J＝0.5，1.9Hz)，7.76(ddd，1H，J＝0.5，1.4，7.7Hz)，7.63(dt，1H，J＝0.5，7.7Hz)，7.50(ddd，1H，J＝1.2，1.6，4.9Hz)，7.49(ddd，1H，J＝0.7，1.4，7.7Hz)，7.40(t，1H，J＝7.7Hz)，2.72(s，3H)，2.02(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N2O4S3(M+H)447.6；實(shí)測(cè)值447.1.
實(shí)施例54-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)(2-碘-3-甲基-苯基)-甲醇將亞硫酰氯(6mL)歷經(jīng)1分鐘加入到2-碘-3-甲基苯甲酸(3.0g，11.4mmol)在DCM(10mL)中的0℃溶液中。將溶液在室溫下攪拌24小時(shí)，在真空中除去揮發(fā)性組分。將一部分粗的酰氯(955mg)溶于THF(15mL)，加入NaBH4(380mg，10mmol)。攪拌90分鐘后，TLC分析有多個(gè)明顯的斑點(diǎn)。將反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，加入固體LiAlH4(300mg，7.91mmol)。將反應(yīng)物攪拌30分鐘，然后TLC分析顯示一個(gè)主要的斑點(diǎn)。加入EtOAc(10mL)猝滅反應(yīng)，緩慢倒入劇烈攪拌著的HCl溶液中(1M，30mL)。加入EtOAc(70mL)，分離各層，將有機(jī)層用NaHCO3(3×15mL)、水(15mL)、鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(752mg，89％)，為粘稠的油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.27(m，2H)，7.20(m，2H)，4.74(m，2H)，2.50(s，3H)，2.0(br s，1H).
b)7-甲基-3H-苯并[c][1，2]氧硼雜環(huán)戊烷-1-醇將丁基鋰(2.5M，2.91mL，7.3mmol)滴加到芳基鹵((實(shí)施例5步驟a)723mg，2.91mmol)在Et2O(12mL)中的-78℃溶液中。將溶液在-78℃下攪拌2小時(shí)，一次性加入硼酸三甲酯(3.3mL，29.1mmol)。使溶液歷經(jīng)15分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)(出現(xiàn)明膠樣ppt)。加入EtOAc(80mL)和HCl(0.1N，30mL)，將兩相溶液攪拌15分鐘。分離各層，將有機(jī)層用HCl(0.1N，2×10mL)、水(10mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中濃縮溶液，得到油性固體，用己烷研制后進(jìn)一步固化。粗標(biāo)題化合物(被烴基代硼酸丁基酯產(chǎn)物污染)無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用，以環(huán)狀半酯與游離代硼酸的混合物存在。1H-NMR(CDCl3)δ7.1-7.4(m，3H)，5.23(m，2H)，2.57(s，3H)。
c){[4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、7-甲基-3H-苯并[c][1，2]氧硼雜環(huán)戊烷-1-醇((實(shí)施例5步驟b)59mg，0.4mmol)、Na2CO3(2M 0.8mL，1.6mmol)、Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含40％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(21mg，40％)，為淺黃色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ7.96(m，2H)，7.86(m，1H)，7.54(m，1H)，7.43(m，1H)，7.18-7.38(m，3H)，4.53(d，1H，J＝13.3Hz)，4.45(d，1H，J＝13.3Hz)，2.54(s，3H)，1.96(s，3H)，1.49(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H28N2O5S3532.7；實(shí)測(cè)值532.9.
d)4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例5，步驟c)21mg，0.039mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的C18-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(19mg，86％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.04(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.88(m，1H)，7.71(dt，1H，J＝0.5，7.7Hz)，7.57(ddd，1H，J＝1.2，1.6，7.7Hz)，7.42(m，1H)，7.34(t，1H，J＝7.7Hz)，7.26(m，1H)，4.20(s，2H)，2.72(s，3H)，1.99(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H20N2O3S3(M+H)433.6；實(shí)測(cè)值433.1.
實(shí)施例64-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)3-溴-N-甲氧基-2，N-二甲基-苯甲酰胺將亞硫酰氯(6mL)歷經(jīng)1分鐘加入到2-碘-3-甲基苯甲酸(3.0g，11.4mmol)在DCM(10mL)中的0℃溶液中。將溶液在室溫下攪拌24小時(shí)，在真空中除去揮發(fā)性組分。將一部分粗的酰氯(1.56g，6.7mmol)溶于無(wú)水DCM(15mL)。加入N，O-二甲基羥胺(814mg，8.35mmol)，繼之以三乙胺(2.80mL，20.1mmol)。在室溫下攪拌18小時(shí)后，在真空中除去溶劑。使殘余物在EtOAc(60mL)與含水HCl(1N，20mL)之間分配后，將有機(jī)層進(jìn)一步用HCl(1N，10mL)、NaOH(1N，3×10mL)、水(10mL)、鹽水(20mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.58g，92％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于隨后的反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)δ7.57(dd，1H，J＝1.2，7.9Hz)，7.21(d，1H，J＝7.4Hz)，7.08(t，1H，J＝7.7Hz)，3.39(br s，3H)，3.35(br s，3H)，2.36(s，3H)。
b)3-溴-2-甲基-苯甲醛將氫化鋁鋰(201mg，5.31mmol)一次性加入到3-溴-N-甲氧基-2，N-二甲基-苯甲酰胺((實(shí)施例6步驟b)1.1g，4.24mmol)在THF(25mL)中的-78℃溶液中。在-78℃下攪拌1小時(shí)后，用EtOAc(10mL)猝滅氫化物試劑，將溶液緩慢倒入劇烈攪拌著的檸檬酸(10％，30mL)與EtOAc(50mL)混合物。分離各層后，將有機(jī)層用NaHCO3(3×20mL)、水(20mL)和鹽水(30mL)洗滌。將溶液干燥(硫酸鈉)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(813mg，96％)，為無(wú)色的油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ10.28(s，1H)，7.80(m，2H)，7.25(m，1H)，2.78(s，3H)。
c)1-溴-3-二甲氧基甲基-2-甲基-苯將3-溴-2-甲基-苯甲醛((實(shí)施例6步驟c)813mg，4.08mmol)溶于無(wú)水MeOH(50mL)和原甲酸三甲酯(8mL)。加入甲苯磺酸(100mg)，將溶液在室溫下攪拌6小時(shí)。加入固體NaHCO3(200mg)，將溶液攪拌30分鐘，在真空中除去揮發(fā)性組分。將殘余物溶于無(wú)水EtOAc(10mL)，過(guò)濾溶液(45微米濾器)，在真空中除去溶劑。粗產(chǎn)物(918mg，92％)的1H-NMR分析大致揭示原料向標(biāo)題化合物的轉(zhuǎn)化率為90％，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.47(dd，1H，J＝1.2，8.1Hz)，7.44(dd，1H，J＝0.9，7.9Hz)，6.99(t，1H，J＝7.9Hz)，5.37(s，1H)，3.25(s，6H)，2.37(s，3H)。
d)2-甲?；?1-甲基-苯基代硼酸如實(shí)施例5步驟b使1-溴-3-二甲氧基甲基-2-甲基-苯((實(shí)施例6步驟c)500mg，2mmol)、丁基鋰(2.5M，1mL，2.5mmol)和硼酸三甲酯(2.3mL，20mmol)反應(yīng)。經(jīng)過(guò)含水處理后，將殘余物溶于丙酮(18mL)和HCl(1N，2mL)。在室溫下放置18小時(shí)后，在真空中除去揮發(fā)性組分，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速色譜純化(含25-40％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(126mg，38％)。標(biāo)題化合物以代硼酸與酸酐在CDCl3中的混合物存在，因此所報(bào)道的NMR信號(hào)代表相關(guān)信號(hào)對(duì)或組。1H-NMR(CDCl3)δ10.44(s，1H)，8.38(dd，1H，J＝1.4，7.4Hz)，7.49(t，1H，J＝7.5Hz)，3.12(s，3H)。
e)[4-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27)50mg，0.1mmol)、Pd(PPh3)4(29.4mg，0.025mmol)、2-甲?；?1-甲基-苯基代硼酸((實(shí)施例6步驟d)65mg，0.4mmol)、Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(30mg，56％)，為淺黃色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ10.36(s，1H)，8.02(s，1H)，7.99(ddd，1H，J＝1.4，1.9，7.7Hz)，7.93(t，1H，J＝1.6Hz)，7.87(dd，1H，J＝3.0，6.3Hz)，7.60(dt，1H，J＝0.5，7.7Hz)，7.54(dt，1H，J＝1.5，7.7Hz)，7.43(m，2H)，2.57(s，3H)，2.49(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H26N2O5S3530.7；實(shí)測(cè)值530.9.
f)4-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例6步驟e)30mg，0.056mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(22mg，73％)，為白色固體。根據(jù)質(zhì)子NMR分析，該醛是被水化的。1H-NMR(CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝1.4，1.9，7.7Hz)，7.98(t，1H，J＝1.5Hz)，7.72(dt，1H，J＝0.5，7.7Hz)，7.67(dt，1H，J＝1.5，7.9Hz)，7.63(dd，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.33(t，1H，J＝7.7Hz)，7.22(dd，1H，J＝1.4，7.4Hz)，5.56(s，1H)，2.76(s，3H)，2.22(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N2O3S3431.6(M+H)；實(shí)測(cè)值431.3，448.2(M+H2O).
實(shí)施例74-(5′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)3-羥甲基-2-甲基-苯基代硼酸如實(shí)施例5步驟b使丁基鋰(2.5M，4mL，10mmol)、3-碘-4-甲基-苯甲醇(1g，4mmol)和硼酸三甲酯(6mL，53mmol)反應(yīng)。經(jīng)過(guò)含水處理和SiO2快速色譜純化(合40-50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(180mg，27％)。標(biāo)題化合物以代硼酸與酸酐在CDCl3中的混合物存在，因此所報(bào)道的NMR信號(hào)代表相關(guān)信號(hào)對(duì)或組。1H-NMR(CDCl3)δ7.06-7.30(m，3H)，4.56(s，3H)，4.16(br s，1H)，2.32(s，3H)。
b){[4-(5′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(100mg，0.2mmol))、Pd(PPh3)4(59mg，0.05mmol)、3-羥甲基-2-甲基-苯基代硼酸((實(shí)施例7步驟a)105mg，0.63mmol)、Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水操作和粗產(chǎn)物的SiO2快速色譜純化(含25-50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(72mg，67％)，為淺黃色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ8.00(s，1H)，7.96(dt，1H，J＝2.1，4.4Hz)，7.93(m，1H)，7.54(m，2H)，7.27(m，2H)，7.18(d，1H，J＝1.4Hz)，4.68(s，2H)，2.54(s，3H)，2.20(s，3H)，1.51(s，9H).
c)4-(5′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(3′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例7步驟b)15mg，0.028mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(12mg，80％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.02(m，1H)，7.99(m，1H)，7.68(m，2H)，7.29(d，2H，J＝1.8Hz)，7.21(br s，1H)，4.61(s，2H)，2.72(s，3H)，2.22(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H20N2O3S3(M+H)433.6；實(shí)測(cè)值433.1.
實(shí)施例84-(5′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(5′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(5′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例7步驟b)30mg，0.056mmol)溶于DMSO(1mL)與DCM(1mL)的混合物，冷卻至0℃。加入三乙胺(12μL，0.084mmol)和三氧化硫-吡啶配合物(11mg，0.068mmol)，將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。根據(jù)TLC有明顯的部分轉(zhuǎn)化。加入另外的三乙胺(20μL，0.14μl)和三氧化硫-吡啶配合物(18mg，0.11mmol)，將溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。加入異丙醇(250μL)，將反應(yīng)物攪拌15分鐘，加入EtOAc(40mL)。將EtOAc溶液用檸檬酸(2×10mL)、NaHCO3(2×10mL)、水(5×10mL)和鹽水(20mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(26mg，87％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CD3OD)δ10.00(s，1H)，7.99(m，3H)，7.81(dd，1H，J＝1.67.7Hz)，7.72(d，1H，J＝7.7Hz)，7.59(m，2H)，7.46(d，1H，J＝7.7Hz)，2.58(s，3H)，2.30(s，3H)，1.51(s，9H).
b)4-(5′-甲酰基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(5′-甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例8步驟b)15mg)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(12mg，80％)，為白色固體。根據(jù)質(zhì)子NMR分析，該醛顯然有80％是被水化的。 1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.03(m，1H)，7.98(m，1H)，7.68(m，2H)，7.35(m，2H)，7.26(d，1H，J＝1.6Hz)，5.39(s，1H)，2.73(s，3H)，2.24(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N2O3S3(M+H)431.6；實(shí)測(cè)值431.2.
實(shí)施例94-[3-(4-甲基-吡啶-3基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)(亞氨基-{4-[3-(4-甲基-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將丁基鋰(2.5M，1.88mL，4.5mmol)滴加到3-溴-4-甲基吡啶(645mg，3.75mmol)在Et2O(15mL)中的-78℃溶液中。將溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，一次性加入硼酸三甲酯(5mL，44mmol)。使溶液歷經(jīng)15分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)。在真空中除去揮發(fā)性組分，將固體殘余物在高真空下干燥2小時(shí)。使一部分粗固體(81mg，0.4mmol)與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、Pd(PPh3)4(29mg，0.025mmol)、Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)按照實(shí)施例1步驟c所用工藝反應(yīng)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(36mg，71％)，為淺黃色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ8.50(d 1H，J＝5.1Hz)，8.42(s，1H)，8.07(s，1H)，7.99(m，2H)，7.45-7.70(m，5H)，7.24(d，1H，J＝5.1Hz)，2.59(s，3H)，2.27(s，3H)，1.52(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H25N3O4S3503.7；實(shí)測(cè)值503.8.
b)4-[3-(4-甲基-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用(亞氨基-{4-[3-(4-甲基-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例9步驟a)36mg，0.071mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的C18-HPLC純化(10-40％ CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物(22mg，49％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.74(br s，2H)，8.37(s，1H)，8.19(m，2H)，8.01(d，1H，J＝5.6Hz)，7.85(m，2H)，2.74(s，3H)，2.55(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O2S3(M+H)404.5；實(shí)測(cè)值404.1.
實(shí)施例104-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒；雙-三氟乙酸鹽 a)({4-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將丁基鋰(2.5M，1.0mL，2.5mmol)滴加到3-溴-2-氯吡啶(384mg，2.0mmol)在Et2O(10mL)中的-78℃溶液中。將溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，一次性加入硼酸三甲酯(2.3mL，20mmol)。使溶液歷經(jīng)15分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)。除去揮發(fā)性組分，將固體物質(zhì)在高真空下干燥2小時(shí)。使一部分粗固體(105mg，0.63mmol)與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(50mg，0.1mmol))、Pd(PPh3)4(29mg，0.025mmol)、Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)按照實(shí)施例1步驟c所用工藝反應(yīng)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(31mg，58％)，為淺黃色玻璃狀物。
b)4-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒；雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用({4-[3-(2-氯-吡啶-3-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例10步驟b)31mg，0.059mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的C18-HPLC純化(10-40％ CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物(29mg，74％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.45(dd，1H，J＝1.9，4.9Hz)，8.36(s，1H)，8.16(t，1H，J＝1.5Hz)，8.12(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.7Hz)，7.90(dd，1H，J＝1.9，7.7Hz)，7.83(dt，1H，J＝1.5，7.7Hz)，7.75(dt，1H，J＝0.5，7.7Hz)，7.53(dd，1H，J＝4.9，7.7Hz)，2.73(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H14ClN3O2S3(M+H)424.0；實(shí)測(cè)值424.1.
實(shí)施例114-[3-(3-甲基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 向帶有含隔螺帽的2-英錢(qián)小瓶加入{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27(100mg，0.2mmol))和Pd(PPh3)4(59mg，0.025mmol)。加入四氫呋喃，繼之以3-甲基-2-吡啶基溴化鋅(Aldrich Chemical Company)(0.5M THF溶液，800μL，0.4mmol)。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)1小時(shí)，如實(shí)施例1步驟c處理。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)快速色譜(SiO2)純化(含25-50％ EtOAc的己烷)，得到淺黃色玻璃狀物(74mg，73％)，將其用三氟乙酸處理，如實(shí)施例1步驟d經(jīng)過(guò)C18-HPLC純化(10-40％ CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物(46mg，61％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.59(dd，1H，J＝0.9，5.1Hz)，8.34(s，1H)，8.22(m，2H)，8.16(ddd，1H，J＝0.7，1.4，7.9Hz)，7.92(ddd，1H，J＝0.5，1.1，7.7Hz)，7.82(dt，1H，J＝0.7，7.7Hz)，7.68(dd，1H，J＝5.4，7.9Hz)，2.73(s，3H)，2.39(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O2S3(M+H)404.5；實(shí)測(cè)值404.1.
實(shí)施例124-(3-烯丙氧基-5-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)1，3-二溴-5-叔丁氧基-苯向劇烈攪拌著的1，3-二溴苯基代硼酸(4.5g，16.1mmol)的MeOH(50mL)與THF(50mL)溶液交替加入(逐滴)含水過(guò)氧化氫(30％，10mL)和NaOH(1M，20mL)(逐滴)，維持pH～10。溶液變渾濁，攪拌30分鐘(用10N NaOH維持pH～10)。加入EtOAc(200mL)和飽和NaHCO3(50mL)，分離各層。將有機(jī)層用NaHCO3(50mL)、水(20mL)、鹽水(50mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于DCM(80mL)。冷卻至-78℃后，加入異丁烯(～20mL)，繼之以三氟甲磺酸(300μL)。將渾濁溶液在-78℃下攪拌15分鐘，在-20至-10℃下攪拌1小時(shí)。加入附加量的異丁烯(～10mL)和三氟甲磺酸(200μL)，將溶液攪拌1小時(shí)。小心地加入固體K2CO3(1g)，將溶液在室溫下攪拌10分鐘，加入NaOH(1N，30mL)。分離各層，將有機(jī)層進(jìn)一步用NaOH(1N，5×10mL)、水(10mL)和鹽水(30mL)萃取。干燥和在真空中除去溶劑后，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速色譜純化(含2-5％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(3.80g，77％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.38(t，1H，J＝1.6Hz)，7.09(d，2H，J＝1.6Hz)，1.36(s，9H)。
b)4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將丁基鋰(2.5M，3.25mL，8.13mmol)滴加到1，3-二溴-5-叔丁氧基-苯((實(shí)施例12步驟a)2.4g，7.71mmol)在Et2O(80mL)中的-78℃溶液中。將溶液在-78℃下攪拌2小時(shí)，一次性加入硫(310mg，9.69mmol)。使溶液歷經(jīng)30分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)。加入EtOAc(50mL)和檸檬酸(5％，30mL)，分離各層。將有機(jī)層用NaHCO3(2×30mL)、水(10mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，將殘余物重新溶于THF(40mL)。加入三苯膦(2.03g，7.74mmol)、4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)2.13g，8.0mmol)、水(1mL)和DMAP-樹(shù)脂(7.0g，10mmol)，將混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。過(guò)濾溶液，固體用DCM洗滌，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速色譜部分純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物與4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯原料的混合物。將粗產(chǎn)物重新溶于DCM(60mL)，加入mCPBA(77％，6.04g，27.1mmol)，將溶液在40℃下攪拌5小時(shí)。加入DCM(50mL)和含水硫代硫酸鈉(放熱)，分離各層。將有機(jī)層用Na2CO3(2M，6×30mL)、鹽水(50mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中濃縮溶劑，繼之以SiO2快速色譜純化(含25-75％ DCM的己烷)，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色玻璃狀物(2.85g，77％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.28(d，1H，J＝0.5Hz)，7.71(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68(m，1H)，7.39(m，1H)，4.00(s，3H)，1.42(s，9H)。
c)4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將硫代甲醇鈉(1M EtOH溶液，4.4mL，4.4mmol)滴加到4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(1.91g，4.0mmol)在THF(40mL)中的-78℃溶液中。將溶液在-78℃下攪拌30分鐘，加入冰乙酸(1mL)。將溶液用EtOAc(60mL)稀釋?zhuān)肗aHCO3(2×30mL)、水(2×20mL)、鹽水(30mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中濃縮溶液，繼之以殘余物的SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.48g，76％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.01(d，1H，J＝0.5Hz)，7.74(m，1H)，7.66(m，1H)，7.37(m，1H)，3.99(s，3H)，2.48(s，3H)，1.41(s，9H)。
d)4-(3-溴-5-羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將三氟乙酸(5mL)加入到4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例12步驟c)240mg，0.5mmol)的DCM(5mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，在真空中除去溶劑，得到214mg油(定量)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
e)4-(3-烯丙氧基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將碳酸銫(33mg，0.1mmol)和烯丙基溴(30μL，0.35mmol)加入到4-(3-溴-5-羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例12步驟d)30mg，0.71mmol)的無(wú)水DMF(3mL)溶液中。在室溫下攪拌16小時(shí)后，將溶液倒入水(20mL)與EtOAc(30mL)的混合物中。分離各層，將有機(jī)層用水(5×5mL)、鹽水(20mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
f)4-(3-烯丙氧基-5-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽將三甲基鋁(2M甲苯溶液，10mL)小心地加入到NH4Cl(1.08g，11mmol)的甲苯(10mL)懸液中，新鮮制備二甲基鋁酰胺的1M儲(chǔ)備溶液。將4-(3-烯丙氧基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(33mg，0.07mmol)用二甲基鋁酰胺溶液(2mL，20mmol)處理，加熱至100℃達(dá)2小時(shí)，在此期間有沉淀生成。將溶液倒入劇烈攪拌著的SiO2(20g)在CHCl3(70mL)中的混合物中。將燒瓶用甲醇(10mL)沖洗，將SiO2混合物攪拌10分鐘。使溶液通過(guò)熔融玻璃柱過(guò)濾，將SiO2用含15％ MeOH的DCM(150mL)洗脫。濃縮洗脫液，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含10％MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(15mg，44％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.27(s，1H)，7.69(t，1H，J＝1.6Hz)，7.52(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，7.44(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，6.03(m，1H)，5.41(ddd，1H，J＝1.6，3.3，17.2Hz)，5.29(ddd，1H，J＝1.4，2.8，10.5Hz)，4.64(dt，2H，J＝1.6，5.4Hz)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C15H15BrN2O3S3447.4；實(shí)測(cè)值447.1.
實(shí)施例13
4-(3-溴-5-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 按照實(shí)施例12步驟e的工藝，將4-(3-溴-5-羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯((實(shí)施例12步驟d)30mg，0.71mmol)用碳酸銫(33mg，0.1mmol)和甲基碘(44μL，0.71mmol)烷基化。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理后，使殘余物受到實(shí)施例12步驟f的脒化條件處理。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的純化工藝，得到標(biāo)題化合物(17mg，53％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.27(s，1H)，7.69(t，1H，J＝1.6Hz)，7.52(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，7.37(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，3.87(s，3H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例144-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)4-(5-叔丁氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用苯代硼酸(42mg，0.35mmol)、4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例12步驟c)(83mg，0.17mmol))、Na2CO3(2M，1.4mL，2.8mmol)、Pd(PPh3)4(48mg，0.04mmol)、甲苯(5.6mL)和乙醇(2.8mL)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化(含20％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(55mg，65％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.91(t，1H，J＝1.6Hz)，7.63(t，1H，J＝2.0Hz)，7.57(m，2H)，7.47(m，2H)，7.41(m，2H)，4.33(q，2H，J＝7.2Hz)，2.60(s，3H)，1.42(s，9H)，1.36(t，3H，J＝7.2Hz).
b)4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯將4-(5-叔丁氧基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯(55mg，0.11mmol)溶于1∶1 TFA/DCM(10mL)，攪拌1小時(shí)。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(48mg，98％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
c)4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽如實(shí)施例12步驟f將4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯((實(shí)施例14步驟b)12mg，0.028mmol)用二甲基鋁酰胺試劑(2mL，2mmol)處理。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的猝滅、處理和純化工藝，得到標(biāo)題化合物(10mg，89％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，7.69(t，1H，J＝1.6Hz)，7.59(m，2H)，7.47(m，2H)，7.40(m，2H)，7.32(m，1H)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.36；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例154-(5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 按照實(shí)施例12步驟e的工藝，將4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯((實(shí)施例14步驟b)12mg，0.028mmol)在DMF(1.2mL)中用碳酸銫(13.5mg，0.041mmol)和碘代甲烷(9μL，0.138mmol)烷基化。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理后，按照實(shí)施例12步驟f的工藝將殘余物用二甲基鋁酰胺試劑(2mL)處理。在制備型TLC純化(含15％MeOH的DCM)之后分離標(biāo)題化合物，為白色固體(10mg，86％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，7.82(t，1H，J＝1.6Hz)，7.65(m，1H)，7.63(m，1H)，7.53(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，7.46-7.50(m，3H)，7.41(m，1H)，3.93(s，3H)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例164-(5-烯丙氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 按照實(shí)施例12步驟e的工藝，將4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯((實(shí)施例14步驟b)12mg，0.028mmol)在DMF(1.2mL)中用碳酸銫(13.5mg，0.041mmol)和烯丙基溴(12μL，0.138mmol)烷基化。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理后，按照實(shí)施例12步驟f的工藝將殘余物用二甲基鋁酰胺試劑(2mL)處理。在制備型TLC純化(含15％MeOH的DCM)之后分離標(biāo)題化合物，為白色固體(10mg，81％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，7.82(t，1H，J＝1.6Hz)，7.63(m，2H)，(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，7.48(m，3H)，7.42(m，1H)，6.08(m，1H)，5.45(ddd，1H，J＝1.6，3.3，17.2Hz)，5.31(ddd，1H，J＝1.4，2.8，10.5Hz)，4.64(dt，2H，J＝1.6，5.1Hz)，2.75(s，3H).
實(shí)施例174-(5-芐氧基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 按照實(shí)施例12步驟e的工藝，將4-(5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯((實(shí)施例14步驟b)12mg，0.028mmol)在DMF(2mL)中用碳酸銫(13.5mg，0.041mmol)和芐基溴(17μL，0.138mmol)烷基化。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理后，按照實(shí)施例12步驟f的工藝將殘余物用二甲基鋁酰胺試劑(2mL)處理。在制備型TLC純化(含15％ MeOH的DCM)之后分離標(biāo)題化合物，為白色固體(9mg，66％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.26(s，1H)，7.82(t，1H，J＝1.6Hz)，7.62(m，2H)，7.54(m，2H)，7.30-7.50(m，8H)，5.26(s，2H)，2.70(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例184-2′-氯-5-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(3-溴-5-羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例14步驟f的工藝和處理，將4-(3-溴-5-叔丁氧基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例12步驟c)1.48g，3.1mmol)轉(zhuǎn)化為脒(40mL二甲基鋁酰胺試劑)，同時(shí)除去叔丁基醚。將一部分粗脒(800mg)溶于DMF，加入二碳酸二叔丁酯(436mg，2mmol)、二異丙基乙胺(350μL，2mmol)和DMAP(50mg)。攪拌16小時(shí)后，將溶液倒入EtOAc(60mL)與檸檬酸(20mL)中。分離各層，將有機(jī)層進(jìn)一步用檸檬酸(10mL)、NaHCO3(2×20mL)、水(5×10mL)和鹽水(30mL)萃取。經(jīng)硫酸鈉干燥和在真空中除去溶劑后，將殘余物溶于MeOH，加入固體K2CO3。將混合物攪拌過(guò)夜，過(guò)濾溶液，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(80mg，0.158mmol)。
b){[4-(2′-氯-5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所述工藝，使{[4-(3-溴-5-羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(80mg，0.158mmol)與2-氯苯基代硼酸(98.6mg，0.631mmol)、Na2CO3(134mg，1.26mmol)和Pd(PPh3)4(45.5mg，0.039mmol)反應(yīng)。經(jīng)過(guò)含水處理繼之以SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(20mg，24％)。
c)4-(2′-氯-5-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(10mg，0.0185mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的C18-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(4mg，50％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.28(s，1H)，7.51(m，2H)，7.44(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，7.40(m，2H)，7.38(m，3H)，7.13(dd，1H，J＝1.6，2.3Hz)，2.73(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例194-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將碘代甲烷(3μL，0.045mmol)和四丁基氟化銨(1M THF溶液，14μL，0.014mmol)加入到{[4-(2′-氯-5-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例19步驟b)5mg，0.009mmol)的THF溶液中。攪拌2小時(shí)后，將溶液用EtOAc(20mL)稀釋。將有機(jī)層用水(2×4mL)和鹽水(5mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的純化(制備型TLC；含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(3.1mg，62％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.84(s，1H)，7.64(t，1H，J＝1.6Hz)，7.53(dd，1H，J＝1.6，2.6Hz)，7.47(m，1H)，7.33(m，3H)，7.21(dd，1H，J＝1.6，2.6Hz)，3.89(s，3H)，2.60(s，3H)，1.52(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
b)4-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用工藝，使用{[4-(2′-氯-5-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(3.1mg，0.008mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的C18-HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(1.8mg，50％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，7.64(t，1H，J＝1.6Hz)，7.59(dd，1H，J＝1.4，2.6Hz)，7.55(m，1H)，7.42(m，3H)，7.13(dd，1H，J＝1.4，2.6Hz)，3.93(s，3H)，2.75(s，3H). ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13BrN2O3S3421.4；實(shí)測(cè)值421.1.
實(shí)施例205-溴-4-(3′-甲酰基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(3-溴-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯在帶有攪拌桿的圓底燒瓶中，將4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)1g，3.75mmol)和Et3N(523μL，3.75mmol)溶于THF(10mL)。向其中加入3-溴苯硫酚(467μL，4.51mmol)，同時(shí)攪拌。反應(yīng)變渾濁，因此加入另外的THF(12mL)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌12小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，然后溶于EtOAc。將有機(jī)層用飽和NaHCO3和鹽水洗滌若干次。合并有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.40g，定量收率)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.79(t，1H，J＝1.8Hz)，7.67-7.70(m，1H)，7.54-7.85(m，1H)，7.37-7.41(t，1H，J＝7.9Hz)，6.87(s，1H)，3.88(s，1H).
b)4-(3-溴-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(3-溴-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(1.40g，4mmol)和m-CPBA(6.1g，20mmol)溶于DCM(25mL)，在40℃下加熱2小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入飽和硫代硫酸鈉進(jìn)行猝滅，繼之以用鹽水和飽和NaHCO3進(jìn)行含水處理。合并有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.60g，定量收率)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ8.31(s，1H)，8.12-8.14(t，1H，J＝1.9Hz)，8.02-8.05(m，1H)，7.78-7.82(m，1H)，7.44-7.50(t，1H，J＝7.9Hz)，4.01(s，3H).
c)5-氨基-4-(3-溴-苯磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(3-溴-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(407mg，1.0mmol，實(shí)施例20步驟b)溶于EtOH(6mL)。向其中加入氯化銨(535mg，10mmol)的水(3mL)溶液。將該混合物加熱至50℃，同時(shí)攪拌，然后加入鐵(277mg，5mmol)。然后將反應(yīng)物加熱至80℃，攪拌12小時(shí)。然后使反應(yīng)混合物通過(guò)Celite_過(guò)濾，用10％ DCM/MeOH洗滌。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(598mg，定量收率)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ8.05(s，1H)，7.84-7.86(m，1H)，7.70-7.75(m，1H)，7.56(s，1H)，7.40(m，1H)，6.02(br s，2H)，3.85(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H10BrNO4S2375.9(M+H)；實(shí)測(cè)值376.1.
d)5-氨基-4-(3′-甲?；?聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用5-氨基-4-(3-溴-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(754.2mg，2mmol，實(shí)施例20步驟e)、3-甲酰基苯基代硼酸(599.7mg，4mmol)、Pd(PPh3)4(462.2mg，0.4mol)、含水Na2CO3(2M，8mL，16mmol)、乙醇(8mL)和甲苯(16mL)。殘余物經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(Biotage FlashTMSystem-40M SiO2柱)(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(317mg，40％)，為褐色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ10.10(s，1H)，8.10-8.17(m，2H)，7.92-7.95(m，2H)，7.82-7.89(t，2H，J＝8.1Hz)，7.58-7.70(m，3H)，6.05(br s，2H)，3.80(s，3H).
e)5-溴-4-(3′-甲?；?聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯將裝有加液漏斗、冷凝器和隔帽的干燥3-頸燒瓶用氬凈化。在該燒瓶中，將亞硝酸叔丁酯(121μL，1.58mmol)和溴化銅(II)(36.8mg，1.58mmol)溶于乙腈(2mL)，加熱至60℃。滴加5-氨基-4-(3′-甲?；?聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯(317.2mg，0.79mmol，實(shí)施例20步驟d)的乙腈(2mL)溶液，連續(xù)攪拌和加熱1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的快速柱色譜純化(Biotage FlashTMSystem-40M SiO2柱)(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(128mg，34％)，為褐色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ10.10(s，1H)，8.26-8.28(m，1H)，8.08-8.16(m，2H)8.01-8.06(m，1H)，7.86-7.89(m，3H)，7.64-7.70(t，2H，J＝8.1Hz)，3.90(s，3H).
f)5-溴-4-(3′-甲?；?聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽混合NH4Cl(426mg，8mmol)、AlMe3(2M甲苯溶液，4mL，8mmol)與甲苯(4mL)，制備1M二甲基鋁酰胺溶液。然后將該溶液加熱至80℃達(dá)15分鐘，然后冷卻至室溫。然后將1M二甲基鋁酰胺溶液加入到含有5-溴-4-(3′-甲酰基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(128mg，0.28mmol)的干燥燒瓶中，將反應(yīng)物在90℃下加熱2小時(shí)。向溶液加入二氧化硅(1g)同時(shí)攪拌，猝滅反應(yīng)，繼之以過(guò)濾和用含10％ MeOH的DCM洗脫。在真空中濃縮濾液，繼之以C18-HPLC純化(18-80％ CH3CN，25min)，得到標(biāo)題化合物(49mg，38％)，為灰白色固體。1H-NMR(CD3OD and CD3Cl)δ10.10(s，1H)，8.35(s，1H)，8.31-8.33(m，1H)，8.17-8.18(t，1H，J＝1.39Hz)，8.04-8.10(m，2H)，7.96-7.99(m，2H)，7.75-7.77(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H13BrN2O3S2448.9(M+H)；實(shí)測(cè)值449.2.
實(shí)施例215-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用5-氨基-4-(3-溴-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(598.9mg，1.6mmol)(實(shí)施例20步驟a-c)、鄰-甲苯基-苯基代硼酸(435.6mg，3.2mmol)、Pd(PPh3)4(366.6mg，0.32mmol)、含水Na2CO3(2M，6.4mL，12.8mmol)、乙醇(6.4mL)和甲苯(12.8mL)制備5-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯。殘余物經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(Biotage FlashTMSystem-40M SiO2柱)(含25％ EtOAc的己烷)，得到加合物(137mg，23％)，為淺褐色固體。ESI-MS(m/z)C19H17NO4S2計(jì)算值387.02；實(shí)測(cè)值388.3。然后如實(shí)施例20步驟f所述將5-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(61mg，16mmol)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(6mg，10％)，為淺褐色固體。1H-NMR(CD3OD)δ7.96-7.99(m，1H)，7.95(s，1H)，7.93-7.94(m，1H)，7.63-7.69(m，3H)，7.18-7.32(m，3H)，2.22(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O2S2372.0(M+H)；實(shí)測(cè)值372.2.
實(shí)施例225-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)5-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例20步驟e的工藝，在乙腈(2mL)中使用亞硝酸叔丁酯(104μL，88mmol)、氯化銅(II)(118.5mg，0.88mmol)、乙腈(2ml)和5-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(170.2mg，0.43mmol，實(shí)施例21)。殘余物經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(Biotage FlashTMSystem-12M SiO2柱)(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(128mg，34％)，為褐色固體。1H-NMR(CDCl3)δ8.26(1H，s)，7.92-7.98(3H，m)，7.56-7.60(2H，m)7.28-7.32(3H，m)，3.90(3H，s)，2.24(3H，s).
b)5-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將5-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(36mg，0.09mmol)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(7.1mg，20％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.03-8.06(m，1H)，7.95-7.97(m，1H)，7.71-7.74(m，2H)，7.30-7.33(m，2H)，7.25-7.30(m，1H)，7.19-7.21(d，1H，J＝6.74Hz)，2.24(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H15ClN2O2S2391.0(M+H)；實(shí)測(cè)值391.2.
實(shí)施例234-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 從實(shí)施例22步驟a分離4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(4.0mg，0.01mmol)，為副產(chǎn)物。然后如實(shí)施例20步驟f所述將該分子轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(0.9mg，25％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.80(s，1H)，8.25-8.26(d，1H，J＝1.6Hz)，8.02-8.05(m，1H)，7.95-7.96(m，2H)，7.68-7.71(m，2H)，7.17-7.21(m，1H)，2.24(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H16N2O2S2357.0(M+H)；實(shí)測(cè)值357.3.
實(shí)施例245-溴-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)5-氯-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例20步驟e的工藝，在乙腈(1mL)中使用亞硝酸叔丁酯(10μL，0.05mmol)、溴化銅(II)(11mg，0.05mmol)和5-氨基-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(9.1mg，0.03mmol，實(shí)施例21)。殘余物經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(Biotage FlashTMSystem-12M SiO2柱)(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(5.1mg，42％)，為灰白色固體。1H-NMR(CDCl3)δ8.08(s，1H)，7.92-7.98(m，2H)，7.59-7.61(m，2H)7.29-7.30(m，3H)，7.19-7.21(m，1H)，3.90(s，3H)，2.24(s，3H).
b)5-溴-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將5-溴-4-(2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(5.1mg，0.01mmol，實(shí)施例24步驟a)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(1.1mg，21％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.04-8.07(m，1H)，7.19-7.21(m，1H)，2.24(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H13BrN2O2S2434.0實(shí)測(cè)值437.1.
實(shí)施例254-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)2-溴-3-甲基-苯基胺按照實(shí)施例20步驟c的工藝，使用2-溴-1-甲基-3-硝基-苯(1g，4.6mmol，溶于12mL EtOH，Aldrich Chemical Company)、氯化銨(2.5g，46mmol，溶于6mL H2O)和鐵(1.3g，23mmol)。得到標(biāo)題化合物(1.0g，定量收率)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ6.95-7.00(t，1H，J＝7.6Hz)，6.60-6.65(dd，2H，J＝8.1，4.4Hz)，4.10(br s，2H)，2.35(s，3H).
b)3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺按照實(shí)施例3步驟b所述工藝，使用2-溴-3-甲基-苯基胺(185mg，1.0mmol，實(shí)施例25步驟a)、PdCl2(PPh3)2(70.2mg，0.1mmol)、二噁烷(3mL)、Et3N(729μL，6mmol)和4，4，5，5，-四甲基-[1，3，2]-二氧硼雜環(huán)戊烷(453μL，3mmol)。殘余物經(jīng)過(guò)制備型SiO2TLC純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(94mg，40％)，為黃色固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H20BNO2234.1(M+H)實(shí)測(cè)值234.1.
c){[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所述工藝，使用3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺(95mg，0.41mmol，實(shí)施例25步驟b)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100.7mg，0.21mmol，實(shí)施例27步驟c)、Pd(PPh3)4(47mg，0.04mmol)、含水Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)。殘余物經(jīng)過(guò)制備型SiO2TLC純化(含33％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(30mg，28％)，為灰白色固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O4S3517.2；實(shí)測(cè)值517.8.
d)4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽如實(shí)施例1步驟d所述將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.058mmol，實(shí)施例25步驟c)去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(28.1mg，94％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.08-8.12(m，1H)，7.96(t，1H，J＝1.6Hz)，7.76-7.80(t，1H，J＝7.6Hz)，7.60-7.64(dd，1H，J＝1.6，7.6Hz)，7.22-7.25(t，1H，J＝7.9Hz)，6.98-7.03(m，2H)，2.73(s，3H)，1.97(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H19N3O2S3418.1(M+1)；實(shí)測(cè)值418.1.
實(shí)施例264-(3′-甲?；?4′-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-溴-2-二甲氧基甲基-苯酚在0℃下，向5-溴-2-羥基-苯甲醛(1g，4.9mmol，Aldrich ChemicalCompany)的MeOH(25mL)溶液緩慢加入硼氫化鈉(226mg，5.9mmol)，同時(shí)攪拌。加入后，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢枇硗?小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌(20mL×2)。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.2g，定量)，為黃色的油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CD3OD)δ7.35(m，2H)，6.75-6.77(d，1H，J＝7.2Hz)，5.55(s，1H)，3.33(s，6H).
b){[4-(3′-二甲氧基甲基-4′-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯利用實(shí)施例1步驟b所述工藝，在THF(5mL)中使用丁基鋰(2.5M，2.8mL，7mmol)、硼酸三甲酯(0.812mL，5.6mmol)、4-溴-2-二甲氧基甲基-苯酚(685mg，2.8mmol，實(shí)施例26步驟a)制備2-二甲氧基甲基-4-羥基苯基代硼酸(212mg.1.0mmol)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。進(jìn)行實(shí)施例1步驟c所述工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.21mmol，實(shí)施例27步驟c)、Pd(PPh3)4(47mg，0.04mmol)、含水Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)、甲苯(1.6mL)和2-二甲氧基甲基-4-羥基-苯基代硼酸(212mg，1.0mmol)。殘余物經(jīng)過(guò)制備型SiO2TLC純化(含33％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(37mg，28％)，為白色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N2O7S3579.1(M+1)；實(shí)測(cè)值579.9.
c)4-(3′-甲?；?4′-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽如實(shí)施例1步驟d所述將{[4-(3′-二甲氧基甲基-4′-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(37mg)(實(shí)施例26步驟b)去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(5mg，14％)。1H-NMR(CD3OD)δ10.34(s，1H)，8.46(m，1H)，8.25-8.27(m，1H)，7.89-7.94(m，3H)，7.72-7.75(m，1H)，7.13-7.16(m，1H)，2.49(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H16N2O4S3433.0(M+1)；實(shí)測(cè)值433.2.
實(shí)施例27{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯 a)4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(3-溴-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(5.9g，0.015mol，實(shí)施例20步驟b)溶于40mL THF，冷卻至-78℃。向其中滴加硫代甲醇鈉(1M，15mL，0.015mmol，EtOH溶液)達(dá)1小時(shí)。用乙酸(878μL，0.015mol)猝滅反應(yīng)，在真空中濃縮反應(yīng)混合物。然后將殘余物溶于EtOAc，用飽和NaHCO3和鹽水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物SiO2快速柱色譜純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(3.0g，50％)，為黃色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.14(t，1H，J＝1.8Hz)，8.02(s 1H)，7.94-7.96(m，1H)，7.72-7.74(m，1H)，7.38-7.42(t，1H，J＝7.9Hz)，7.26(s 1H)，3.88(s 1H)，2.62(s 1H).
b)4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽如實(shí)施例20步驟f所述將4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(1.9g，0.004mol)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(1.9g，定量收率)。1H-NMR(CD3OD)δ8.31(s，1H)，8.16(t，1H，J＝1.8Hz)，8.01-8.04(m，1H)，7.86-7.90(m，1H)，7.52-7.57(t，1H，J＝7.9Hz)，2.74(s，3H).
c){[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒(1.9g，0.0048mol，實(shí)施例27步驟b)溶于DMF(35mL)，同時(shí)聲波處理。向其中加入DIEA(1.67mL，0.0096mol)和二碳酸二叔丁酯(1.27g，0.0058mol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用20％檸檬酸、再用鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。剩余殘余物用己烷研制，分離標(biāo)題化合物(1.84g，76％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.13-8.14(t，1H，J＝1.6Hz)，7.95-7.99(m，1H)，7.79-7.84(m，1H)，7.72(s，1H)，7.48-7.52(t，1H，J＝7.9Hz)，7.19-7.21(m，1H)，2.66(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H19BrN2O4S3492.4(M+1)；實(shí)測(cè)值492.6.
實(shí)施例285-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)1-(3-溴-苯基)-2，2，2-三氟-乙酮在干燥的圓底燒瓶中，將3-溴-苯甲酸甲基酯(2g，9.3mmol，Aldrich Chemical Company)和三甲基(三氟甲基)甲硅烷(1.72mL，11.6mmol，Aldrich Chemical Company)溶于無(wú)水甲苯(50mL)。將溶液冷卻至-78℃后，加入TBAF(232μL，0.23mmol)，使反應(yīng)物緩慢溫?zé)嶂潦覝剡^(guò)夜。攪拌20小時(shí)后，加入2N HCl(50mL)和EtOAc(100mL)，分離各層，水層用另一部分EtOAc萃取。合并有機(jī)部分，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，得到粗的油，用SiO2快速色譜純化(洗脫含5-20％ EtOAc的己烷)，得到1.5g(65％)標(biāo)題化合物，為淺黃色油。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.18(br s，1H)，7.98-8.00(m，1H)，7.82-7.85(m，1H)，7.42-7.46(m，1H).19F-NMR(CDCl3；400MHz)δ-72.06(s).
b)2，2，2-三氟-1-[3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙醇向裝有攪拌桿和橡膠隔的經(jīng)過(guò)烘箱干燥的圓底燒瓶加入1-(3-溴-苯基)-2，2，2-三氟-乙酮(560mg，2.2mmol，如實(shí)施例28，步驟a中制備的)、4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(0.96mL，6.6mmol，Aldrich Chemical Company)、(PPh3)2PdCl2(93mg，0.132mmol，StremChemicals，Inc.，Newburyport，MA)和Et3N(1.8mL，13.2mmol)。排出反應(yīng)混合物，用氬凈化，然后懸浮在二噁烷(16mL)中。在95℃下攪拌18小時(shí)后，使反應(yīng)冷卻，然后通過(guò)Celite_過(guò)濾。在真空中濃縮濾液，殘余物經(jīng)過(guò)色譜純化(SiO2，快速洗脫含5％ EtOAc的己烷)，得到350mg(53％)油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
c)(亞氨基-{5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c的相同工藝，使2，2，2-三氟-1-[3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙醇(123mg，416mmol，實(shí)施例28，步驟b)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.2mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(0) (59mg，0.05mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(800μL，2M水溶液)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.4mL)反應(yīng)，純化(SiO2，快速洗脫含30％ EtOAc的己烷)后得到100mg(85％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.20(t，1H，J＝1.7Hz)，7.94-7.99(m，2H)，7.77-7.81(m，1H)，7.67(br s，1H)，7.57(m，1H)，7.27-7.34(m，1H)，7.15-7.21(m，2H)，5.11(q，1H，J＝6.8Hz)，2.51(s，3H)，1.49(s，9H).19F-NMR(CDCl3；400MHz)δ-78.51(d，J＝6.9Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H25F3N2O5S3586.7；實(shí)測(cè)值586.7.
d)5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在室溫下，將(亞氨基-{5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(25mg，0.043mmol，實(shí)施例28，步驟c)用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，所得殘余物用C18-HPLC純化(含10-80％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，25min)，得到18mg(86％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.33(s，1H)，8.30(t，1H，J＝1.7)，7.97-8.05(m，2H)，7.91(br s，1H)，7.68-7.74(m，2H)，7.53-7.56(m，2H)，5.15(q，1H，J＝7.0Hz)，2.74(s，3H).19F-NMR(CD3OD；400MHz)δ-80.09(d，J＝6.9Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H17F3N2O3S3487.6(M+H)；實(shí)測(cè)值487.3.
實(shí)施例295-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-乙?；?-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)(亞氨基-{5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-乙酰基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯在反應(yīng)小瓶中，將(亞氨基-{5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.051mmol，實(shí)施例28，步驟c)和1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氫-1，2-苯并二氧戊環(huán)-3(1H)-酮(31mg，0.072mmol，Lancaster Synthesis，Windham，NH)溶于DCM(2mL)。向該溶液經(jīng)由注射器緩慢加入濕的DCM(1mL，4μL H2O)。在室溫下攪拌1小時(shí)后，蒸發(fā)反應(yīng)，使殘余物在Et2O(30mL)與10％ Na2S2O3-飽和的NaHCO3(1∶1，15mL)之間分配。水層用另外的Et2O洗滌。合并有機(jī)洗液，用MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到30mg(定量收率)標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.28(br s，1H)，8.26(t，1H，J＝1.7Hz)，8.08-8.13(m，1H)，7.99-8.04(m，1H)，7.96(s，1H)，7.91-7.95(m，1H)，7.82-7.86(m，1H)，7.62-7.71(m，2H)，2.59(s，3H)，1.51(s，9H).19F-NMR(CDCl3；400MHz)δ-84.93(s).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H23F3N2O5S3487.6(M+H)；實(shí)測(cè)值487.2.
b)5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-乙?；?-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在室溫下，將(亞氨基-{5-甲硫基-4-[3′-(2，2，2-三氟-乙酰基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基)-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.051mmol，實(shí)施例29，步驟a)用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，所得殘余物用C18-HPLC純化(含20-60％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，25min)，得到20mg(80％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.35(s，1H)，8.33(t，1H，J＝1.7Hz)，7.98-8.07(m，2H)，7.90-7.93(m，1H)，7.68-7.78(m，3H)，7.60(t，1H，J＝7.8Hz)，2.77(s，3H).19F-NMR(CDCl3；400MHz)δ-84.99(s).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15F3N2O3S3485.5(M+H)；實(shí)測(cè)值485.3，503.3(M+H2O)，517.3(M+CH3OH).
實(shí)施例304-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽
a)5-氨-6-甲基-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯和5-氨-6-甲基-苯并咪唑-3-羧酸叔丁基酯將4-氯-5-甲基-苯-1，2-二胺(560mg，3.6mmol，MaybridgeChemical Co.Ltd.，Cornwall，UK)溶于甲酸(10mL)，使溶液在100℃下回流18小時(shí)。使反應(yīng)冷卻，然后在真空中蒸發(fā)至干，得到5-氯-6-甲基-1H-苯并咪唑，為黃褐色固體(定量收率)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。將上述所得固體(410mg，2.4mmol)、二碳酸二叔丁酯(1.6g，7.4mmol)和DMAP(29mg，0.24mmol)溶于CH3CN(20mL)。向該混合物加入DIEA(1.3mL，7.4mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑，使殘余物在EtOAc(100mL)與飽和含水NaHCO3(75mL)之間分配。分離水層，用EtOAc(100mL)洗滌。合并有機(jī)層，用MgSO4干燥，在真空中濃縮。粗殘余物用快速SiO2色譜純化(含20％ EtOAc的己烷)，得到620mg(97％)標(biāo)題化合物，為區(qū)域異構(gòu)體的1∶1混合物，無(wú)需分離即可使用。
1H-NMR(CDCl3；400MHz，異構(gòu)體的1∶1混合物)δ8.35和8.36(s，1H)，7.89和7.99(s，1H)，7.62和7.75(s，1H)，2.48和2.50(s，3H)，1.698和1.700(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H15ClN2O2266.7；實(shí)測(cè)值266.9，167.2(M-Boc).
b)5-甲基-6-(4，4，5，-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯和5-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯向裝有攪拌桿和Teflon_-內(nèi)襯螺帽的干燥反應(yīng)小瓶中加入5-氯-6-甲基-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯與5-氯-6-甲基-苯并咪唑-3-羧酸叔丁基酯的混合物(150mg，0.56mmol，實(shí)施例30，步驟a)、4，4，5，5，4′，4′，5′，5′-八甲基-[2，2′]雙[[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷基](284mg，1.12mmol，Aldrich Chemical Company)、(2′-二環(huán)己磷基-聯(lián)苯-2-基)-二甲基-胺(17.7mg，0.045mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Pd(OAc)2(6.7mg，0.03mmol.Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)和K3PO4(238mg，1.12mmol)。蓋上小瓶，用氬凈化，然后懸浮在甲苯(3mL)中。在95℃下攪拌18小時(shí)后，使反應(yīng)冷卻，然后通過(guò)Celite_過(guò)濾。在真空中濃縮濾液，殘余物用制備型薄層色譜純化(1∶3 EtOAc/己烷，2000μ SiO2平板)，得到100mg(50％)標(biāo)題化合物(區(qū)域異構(gòu)體的1∶1混合物)，為黃色的油。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H27BN2O4358.2；實(shí)測(cè)值303.2(M-tBu)，259.3(M-Boc).
c)4-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1，步驟c的相同工藝，使5-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯與5-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯的混合物(90mg，0.25mmol，實(shí)施例30，步驟b)、{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(62mg，0.126mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(0)(37mg，0.032mmol，Strem Chemicals，Inc.，Newburyport，MA)、Na2CO3(400μL，2M水溶液)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)反應(yīng)，得到170mg黃褐色泡沫。利用制備型薄層色譜分離這種粗產(chǎn)物(1∶2 EtOAc/己烷，2000μSiO2平板)。分離出若干帶，用ESI-MS分析，其中兩條帶的觀測(cè)質(zhì)量分別與二-Boc(7mg)和單-Boc(47mg)產(chǎn)物一致。合并這兩種化合物，然后在室溫下用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，所得殘余物用C18-HPLC純化(含15-35％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，25min)，得到8mg(15％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ9.34(s，1H)，8.34(s，1H)，8.04-8.10(m，2H)，7.79(br s，1H)，7.74-7.75(m，2H)，7.67(br s，1H)，2.72(s，3H)，2.37(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N4O2S3443.6(M+H)；實(shí)測(cè)值443.1，222.3(M++).
實(shí)施例31N-羥基-4-[3-(6-甲基-3H-并咪唑-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)N-羥基-4-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將4-[3-(6-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽(5mg，7.5μmol，實(shí)施例30，步驟c)、鹽酸羥胺(50mg，720μmol)和Et3N(139μL，1mmol)懸浮在EtOH(3mL)中。將反應(yīng)混合物回流2小時(shí)，此時(shí)薄層色譜顯示原料完全消失。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用C18-HPLC純化(含10-50％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，20min)，得到4.9mg(定量收率)標(biāo)題化合物，為吸濕性白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ9.38(s，1H)，8.08-8.12(m，2H)，8.05-8.07(m，1H)，7.82(brs，1H)，7.73-7.77(m，2H)，7.70(br s，1H)，2.70(s，3H)，2.38(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N4O3S3459.6(M+H)；實(shí)測(cè)值459.2.
實(shí)施例324-[2′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[5-甲硫基-4-(2′-乙烯基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例41-107所述工藝，使2-乙烯基-苯基代硼酸(30mg，0.20mmol，Aldrich Chemical Company)、{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.1mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(0)(29mg，0.025mmol，StremChemicals，Inc.，Newburyport，MA)、Na2CO3(400μL，2M水溶液)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)反應(yīng)，純化(1∶3 EtOAc/己烷，2000μ SiO2平板)后得到25mg(50％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。
b)4-[2′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在室溫下，將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(2′-乙烯基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(25mg，0.05mmol)用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，然后用1M NaOH堿化至pH 8，放置10分鐘。然后將溶液用TFA重新酸化，用C18-HPLC純化(含10-80％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，30min)，得到7mg(33％)標(biāo)題化合物，為白色固體(Rt12.3min)。1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.01-8.05(m，1H)，7.98-8.00(m，1H)，7.64-7.71(m，3H)，7.44-7.49(m，1H)，7.32-7.36(m，1H)，7.16-7.18(m，1H)，4.75(q，1H，J＝6.5Hz)，2.72(s，3H)，1.28(d，3H，J＝6.5Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H20N2O3S3433.6(M+H)；實(shí)測(cè)值433.1.
實(shí)施例334-[4′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[5-甲硫基-4-(4′-乙烯基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所述工藝，使4-乙烯基-苯基-代硼酸(181mg，1.22mmol)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(300mg，0.61mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(0)(141mg，0.122mmol，Strem Chemicals，Inc.，Newburyport，MA)、Na2CO3(2.4mL，2M水溶液)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，7.2mL)反應(yīng)，在SiO2快速色譜純化(1∶3 EtOAc/己烷)后得到138mg(45％)標(biāo)題化合物，為白色玻璃狀固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.21(t，1H，1.7Hz)，8.00(brs，1H)，7.92-7.95(m，1H)，7.79-7.81(m，1H)，7.48-7.58(m，5H)，6.75(dd，1H，J＝17.7，10.9Hz)，5.82(d，1H，J＝17.5)，5.31(d，1H，J＝10.9Hz)，2.54(s，3H)，1.50(s，9H).
b)4-[4′-(1-羥基-乙基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在室溫下，將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(4′-乙烯基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(14mg，0.027mmol，實(shí)施例33，步驟a)用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，然后用1M NaOH調(diào)至pH 8，放置10分鐘。然后將溶液用TFA重新酸化，用C18-HPLC純化(含10-80％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，30min)，得到9mg(81％)標(biāo)題化合物，為白色固體(Rt11.8min)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.25(t，1H，1.7Hz)，7.95-8.01(m，2H)，7.61-7.71(m，3H)，7.49-7.53(m，2H)，4.89(q，1H，J＝6.5Hz)，2.73(s，3H)，1.47(d，3H，J＝6.5Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H20N2O3S3433.6(M+H)；實(shí)測(cè)值433.2.
實(shí)施例344-(2′-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(2′-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟c所述工藝，使2-甲氧基-苯基-代硼酸(181mg，1.22mmol)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.2mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(0)(141mg，0.122mmol，Strem Chemicals，Inc.，Newburyport，MA)、Na2CO3(800μL，2M水溶液)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.4mL)反應(yīng)，在SiO2快速色譜純化(1∶3 EtOAc/己烷)后得到100mg(96％)白色玻璃狀固體。在室溫下將該產(chǎn)物用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)，粗產(chǎn)物用C18-HPLC純化，得到65mg(80％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.29(s，1H)，8.12(brs，1H)，8.02(brd，1H，J＝7.9Hz)，7.86-7.90(m，1H)，7.54(t，1H，J＝8.0Hz)，6.88-7.36(m，4H)，3.30(s，3H)，2.73(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18N2O3S3419.5(M+H)；實(shí)測(cè)值419.3.
b)4-(2′-羥基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在室溫下，將4-(2′-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(46mg，0.086mmol，實(shí)施例34，步驟a)用BBr3(1M DCM溶液)處理18小時(shí)。在0℃下用MeOH猝滅反應(yīng)，然后在真空中濃縮得到固體。該固體用C18-HPLC純化(含10-80％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，25min)，得到34mg(77％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.27(t，1H，J＝1.9Hz)，7.89-7.96(m，2H)，7.61(t，1H，J＝7.9Hz)，7.26-7.30(m，1H)，7.19-7.24(m，1H)，6.90-6.95(m，2H)，2.70(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H16N2O3S3405.5(M+H)；實(shí)測(cè)值405.2.
實(shí)施例354-(3′-羥基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
在室溫下，將4-(3′-甲氧基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(1.4mg，3.3μmol，如實(shí)施例44中制備的)用BBr3(1MDCM溶液)處理18小時(shí)。在0℃下用MeOH猝滅反應(yīng)，然后在真空中濃縮得到固體。該固體用C18-HPLC純化(含10-80％ CH3CN的H2O(0.1％ TFA)，25min)，得到1.0mg(77％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.23(t，1H，J＝1.6Hz)，7.98-8.01(m，1H)，7.92-7.95(m，1H)，7.68(t，1H，J＝7.8Hz)，7.31(t，1H，J＝7.8Hz)，7.05-7.12(m，2H)，6.84-6.87(m，1H)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H16N2O3S3405.5(M+H)；實(shí)測(cè)值405.2.
實(shí)施例365-溴-4-(2-甲氧基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例20步驟a的工藝，使用4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)200mg，0.75mmol)和2-甲氧基-苯硫酚(109μL，1.25mmol，Aldrich Chemical Company)分離4-(2-甲氧基-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯。然后將4-(2-甲氧基-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(200mg，0.61mmol)用TiCl3(20％ aq.HCl溶液，5mL，6.1mmol)的THF(6mL)溶液處理。將反應(yīng)物在室溫下攪拌20分鐘。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，然后溶于EtOAc。有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌若干次。合并有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到5-氨基-4-(2-甲氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯。按照實(shí)施例20步驟e的工藝，使用5-氨基-4-(2-甲氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯(160mg，0.54mmol)、亞硝酸叔丁酯(96μL，0.81mmol)和溴化銅(II)(112.6mg，0.65mmol)生成5-溴-4-(2-甲氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯。按照實(shí)施例20步驟b的工藝，使用5-溴-4-(2-甲氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯(18mg，0.05mmol)和m-CPBA(32mg，0.25mmol)生成5-溴-4-(2-甲氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯。按照實(shí)施例20步驟f的工藝，使用5-溴-4-(2-甲氧基-苯磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯(45mg，11mmol)和二甲基鋁酰胺(1M，0.57mL，0.55mmol)生成標(biāo)題化合物5-溴-4-(2-甲氧基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒(4mg，13％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.12-8.14(d of d，J＝6.1，1.8Hz，1H)，7.70-7.74(m，1H)，7.16-7.24(m，2H)，3.79(s，3H).
實(shí)施例375-甲硫基-4-(萘-2-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 在室溫下，向NaH(30mg，1.24mmol)的DMF懸液緩慢滴加萘-2-硫酚(199mg，1.24mmol，Aldrich Chemical Company)的DMF溶液。然后在室溫下將該澄清溶液滴加到4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)300mg，1.27mmol)的DMF溶液中。含水處理導(dǎo)致4-(萘-2-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯的分離。按照實(shí)施例20步驟b的工藝，使用4-(萘-2-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(194mg，0.56mmol)和m-CPBA(354.4mg，1.2mmol)生成4-(萘-2-磺酰基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯。按照實(shí)施例27步驟a的工藝，使用4-(萘-2-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(32mg，0.085mmol)、硫代甲醇鈉(7.55mg，0.94mmol)生成5-甲硫基-4-(萘-2-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯。按照實(shí)施例20步驟f的工藝，使用5-甲硫基-4-(萘-2-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(29mg，0.77mmol)和二甲基鋁酰胺(0.39mL，0.39mmol)生成標(biāo)題化合物5-甲硫基-4-(萘-2-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(19mg，70％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.67(m，1H)，8.37(s，1H)，8.05-8.15(m，2H)，7.95-8.01(d，J＝7.21Hz，1H)，7.90-7.95(d of d，J＝6.7，2.0Hz)，7.65-7.75(m，2H)，2.70(s，3H).
實(shí)施例384-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-氯磺?；?5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向4-氨基-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(Illig et al.US6,291,514，24g，0.12mol)在二氯甲烷∶甲醇(2∶1，40mL)中的-5℃溶液加入CuCl2·2H2O(6.04g，0.035mol)和濃HCl(19.7mL，0.24mol)。向反應(yīng)混合物壓縮過(guò)量SO2。在-5℃下向該混合物滴加亞硝酸叔丁酯(27.6mL，0.24mol)，然后在相同溫度下攪拌2小時(shí)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀谡婵罩谐ト軇?。將殘余物用二氯甲?500mL)稀釋?zhuān)盟?100mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)快速色譜純化，用含30-50％乙酸乙酯的己烷洗脫，得到4-氯磺?；?5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為固體(12g，35％)。
b)5-甲硫基-4-亞磺基-噻吩-2-羧酸甲基酯的鈉鹽在75℃下，向Na2SO3(7.51g，0.06mol)與NaHCO3(5.22g，0.06mol)的水(27mL)溶液歷經(jīng)3小時(shí)分批加入4-氯磺?；?5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38，步驟a)12g，0.05mol)，然后攪拌另外1小時(shí)。在真空中除去水，將殘余物溶于熱水(10mL)。將該溶液在冰箱中冷卻1周，此時(shí)產(chǎn)物沉淀出來(lái)。將該固體過(guò)濾，用冷水洗滌，干燥，得到12g(87％)5-甲硫基-4-亞磺基-噻吩-2-羧酸甲基酯的鈉鹽。1H-NMR(DMSO-d6)δ7.64(s，1H)，3.78(s，3H)，2.57 (s，3H)。
c)4-(7-溴-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向4，6-二溴-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷](200mg，0.58mmol，按照Hazelton et al.，Tetrahedron515597(1995)制備)的乙醇(15mL)溶液加入5-甲硫基-4-亞磺基-噻吩-2-羧酸甲基酯的鈉鹽((實(shí)施例38，步驟b)175mg，0.64mmol)的15mL H2O溶液和乙酸(40μL，0.70mmol)。將該混合物在室溫下攪拌2.5小時(shí)，倒入冰水漿液中。所得水溶液用二氯甲烷萃取(100mL，3x)。分離有機(jī)層，用鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到4-(7-溴-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為褐色固體(200mg，67％)。
1H-NMR(CDCl3)δ8.08(m，1H)，8.04(s，1H)，7.60(m，1H)，3.91(s，3H)，2.66(s，3H)，2.00-1.24(m，10H).
d)4-(3，4-二氨基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向4-(7-溴-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38，步驟c)200mg，0.39mmol)的1∶1乙醇水(30mL)溶液加入連二亞硫酸鈉(159mg，0.78mmol)，加熱至80℃達(dá)45分鐘。將溶液冷卻至室溫，倒入冰水漿液中。該含水混合物用二氯甲烷萃取(50mL，3x)。分離有機(jī)層，用鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到170mg 4-(3，4-二氨基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為褐色的油。無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
e)4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(3，4-二氨基-5-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38，步驟d)170mg，0.39mmol)溶于甲酸(2.5mL)，加熱至100℃達(dá)2小時(shí)。將所得溶液冷卻至室溫，倒在冰水漿液上，用NaHCO3堿化至pH8。該水溶液用乙酸乙酯萃取(75mL，3x)。分離有機(jī)層，用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到100mg(57％)4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為褐色的油。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C14H11BrN2O4S3447(M+H)；實(shí)測(cè)值447.1和449.1.
f)4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在惰性條件下，將AlMe3溶液(2M甲苯溶液，5mL，10mmol)加入到NH4Cl(0.54g，10mmol)的甲苯(5mL)懸液中制成二甲基鋁酰胺試劑的1M儲(chǔ)備溶液，然后加熱至80℃達(dá)5分鐘。將該溶液(2.5mL，2.5mmol)加入到4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38，步驟e)15mg，0.034mmol)中，然后加熱至100℃達(dá)2小時(shí)。將所得溶液冷卻至室溫，加入到硅膠的二氯甲烷漿液中(15g硅膠/120mL二氯甲烷)，攪拌30分鐘。將漿液過(guò)濾，硅膠用甲醇洗滌。合并濾液和甲醇部分，在真空下蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)HPLC純化(C18-柱，10-70％ CH3CN，30min)，得到3.0mg(21％)4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.51(s，1H)，8.36(d，1H，J＝1.6)，8.33(s，1H)，8.05(d，1H，J＝1.6)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H11BrN4O2S3430.92(M+H)；實(shí)測(cè)值431.2和433.1.
實(shí)施例39-404-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(如實(shí)施例38，步驟e中制備的)(100mg，0.22mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液加入MeI(13.9μL，0.22mmol)和K2CO3(61.8mg，0.45mmol)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100mL)稀釋。將乙酸乙酯層用水(15mL)和鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到20mg(19％)4-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為混合物。該混合物直接用于下一步。
b)4-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在惰性條件下，將AlMe3溶液(2M甲苯溶液，5mL，10mmol)加入到NH4Cl(0.54g，10mmol)的甲苯(5mL)懸液中制成二甲基鋁酰胺試劑的1M儲(chǔ)備溶液，然后加熱至80℃達(dá)5分鐘。向來(lái)自上步的混合物((實(shí)施例39-40，步驟a)20mg，0.043mmol)加入二甲基鋁酰胺試劑(2.5mL，2.5mmol)，然后加熱至100℃達(dá)2小時(shí)。將該溶液冷卻至室溫，加入到15g硅膠和二氯甲烷(120mL)漿液中，攪拌30分鐘。將漿液過(guò)濾，用甲醇洗滌。在真空中除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)HPLC純化(C18-柱，10-70％CH3CN，30min)，得到4-(7-溴-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽39(4.5mg)和4-(7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽40(2.5mg)。
實(shí)施例391H-NMR(CD3OD)δ8.48(s，1H)，8.34(s，1H)，8.33 d，1H，J＝1.6)，8.06(d，1H，J＝1.6)，4.01(s，3H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C14H13BrN4O2S3445(M+H)；實(shí)測(cè)值445.1和447.1.
實(shí)施例401H-NMR(CD3OD)δ8.39(s，1H)，8.34(d，1H，J＝1.4)，8.33(s，1H)，8.07(d，1H，J＝1.2)，4.21(s，3H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C14H13BrN4O2S3445(M+H)；實(shí)測(cè)值445.1和447.1.
實(shí)施例41-107如下以平行方式合成實(shí)施例41至107化合物(見(jiàn)表1)向各自裝有攪拌桿和Teflon_-內(nèi)襯螺帽的干燥2-英錢(qián)小瓶中加入{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.1mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、適當(dāng)?shù)臒N基代硼酸(0.2mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(0.025mmol)。將每只小瓶用氬凈化/排空循環(huán)處理兩次，然后經(jīng)由注射器加入甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)和2M Na2CO3(0.4mL)。將小瓶置于80℃油浴中，攪拌過(guò)夜。向冷卻了的反應(yīng)混合物加入EtOAc(4mL)，將有機(jī)層過(guò)濾(1-g二氧化硅SPE柱)，在真空中蒸發(fā)濾液。所得殘余物用制備型TLC純化(SiO2)，得到Boc-保護(hù)的脒產(chǎn)物。在室溫下將該產(chǎn)物用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)后，在真空中除去溶劑，殘余物用C18HPLC純化(典型HPLC法含10％至80％ CH3CN的H2O溶液(0.1％ TFA)，25min)，得到所需化合物。實(shí)施例94是按照相同的方式制備的，但是Boc保護(hù)基團(tuán)的除去是這樣實(shí)現(xiàn)的，在室溫下用4N HCl的二噁烷溶液處理1小時(shí)。發(fā)現(xiàn)這樣使?fàn)可嬉蚁┗鶊F(tuán)的副反應(yīng)減少至最低程度(參見(jiàn)實(shí)施例32)。
實(shí)施例108-1105-甲硫基-4-(3-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽、5-甲硫基-4-(2-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒和5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-甲脒
a)4-(7-溴-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(7-溴-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38，步驟c)300mg，0.58mmol)的乙醇∶水溶液(1∶1，60mL)用連二亞硫酸鈉(203mg，1.16mmol)處理，如實(shí)施例38步驟d所述。加入連二亞硫酸鈉后生成褐色沉淀。將該沉淀過(guò)濾，在真空下干燥，得到163.6mg 4-(7-溴-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，為褐色固體。該固體無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
b)5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯和5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸乙基酯向經(jīng)過(guò)干燥的燒瓶中加入來(lái)自上步a的4-(7-溴-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(129mg，0.249mmol)、鄰-甲苯基代硼酸(136mg，0.779mmol)、含水Na2CO3(2M，1mL，43mmol)、乙醇(1mL)和甲苯(2mL)。向燒瓶噴射氬，加入Pd(PPh3)4(72mg，0.062mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌和加熱18小時(shí)，然后冷卻至室溫。在真空中除去溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(150mL)，用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去乙酸乙酯，殘余物經(jīng)由制備型TLC純化(20-30％乙酸乙酯/己烷)，得到5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯與5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸乙基酯的混合物，為褐色的油(130mg)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H28N2O4S3和C27H30N2O4S3529.12(M+H)；實(shí)測(cè)值529.3和543.3.
c)5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基和乙基酯將來(lái)自上步b的5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-1，3-二氫-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基和乙基酯的混合物(130mg)用甲酸處理，如實(shí)施例38步驟e所述，繼之以類(lèi)似的處理，得到5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基與乙基酯的粗混合物，為褐色的油(100mg)。該混合物無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。MS(m/z)計(jì)算值C21H18N2O4S3459.04(M+1)；實(shí)測(cè)值459.2和473.2.
d)5-甲硫基-4-(3-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽、5-甲硫基-4-(2-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自上步c的5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基與乙基酯的混合物(100mg，0.22mmol)用甲基碘(13.6μL，0.22mmol)和K2CO3(60.2mg，0.44mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中處理，如實(shí)施例39步驟a所述，繼之以類(lèi)似的處理，得到40mg粗混合物。將該混合物用二甲基鋁酰胺試劑(5mL，5mmol)處理，如實(shí)施例39步驟b所述。1小時(shí)后，加入另外的二甲基鋁酰胺試劑(5mL，5mmol)。1.5小時(shí)后，猝滅反應(yīng)，如實(shí)施例39步驟b所述，繼之以HPLC純化(C18-柱，10-70％ CH3CN，30min)，得到5-甲硫基-4-(3-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(108)、5-甲硫基-4-(2-甲基-7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(109)和5-甲硫基-4-(7-鄰-甲苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(110)。1081H-NMR(CD3OD)δ8.63(s，1H)，8.41(m，1H)，8.36(m，1H)，7.82(m，1H)，7.38-7.26(m，4H)，4.08(s，3H)，2.72(s，3H)，2.09(s，3H).1091H-NMR(CD3OD)δ8.41(m，1H)，8.35(s，1H)，7.73(m，1H)，7.46-7.28(m，4H)，3.32(s，3H)，2.70(s，3H)，2.02(s，3H).1101H-NMR(CD3OD)Cδ8.56(s，1H)，8.41(m，1H)，8.36(m，1H)，7.78(m，1H)，7.44-7.27(m，4H)，2.71(s，3H)，2.10(s，3H).
實(shí)施例111
4-(2-甲基-呋喃-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)4-(2-甲基-呋喃-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯在室溫下，將4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)532mg，2mmol)、2-甲基-呋喃-3-硫醇(600mg，5.26mmol)和DMAP-聚苯乙烯樹(shù)脂(2g，2.86mmol)在THF(10mL)中攪拌12小時(shí)。將樹(shù)脂過(guò)濾，用若干份DCM洗滌(總體積100mL)。在真空中濃縮濾液，黃色殘余物(480mg，80％)無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.46(d，1H，J＝1.9Hz)，7.05(s，1H)，6.43(d，1H，J＝1.9Hz)，3.90(s，3H)，2.38(s，3H).
b)4-(2-甲基-呋喃-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將間-氯過(guò)苯甲酸(276mg，4mmol)和4-(2-甲基-呋喃-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(117mg，0.39mmol)溶于DCM(15mL)，在40℃下攪拌6小時(shí)。加入DCM(50mL)和含水硫代硫酸鈉(放熱)，分離各層。將有機(jī)層用Na2CO3(2M，6×30mL)、鹽水(50mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中濃縮溶劑，繼之以SiO2快速色譜純化(含25-75％DCM的己烷)，得到砜化合物(85mg，66％)，將其重新溶于THF(5mL)。按照實(shí)施例12步驟c的工藝，使用275μL(0.275mmol)硫代甲醇鈉。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物(72mg，85％)，為無(wú)色固體。
c)4-(2-甲基-呋喃-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽按照實(shí)施例12步驟f所用工藝，將4-(2-甲基-呋喃-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(26mg，0.078mmol)用3mL二甲基鋁酰胺試劑轉(zhuǎn)化為脒。制備型TLC純化(含15％ MeOH的DCM)后，分離標(biāo)題化合物，為白色固體(16mg，58％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.26(s，1H)，7.49(d，1H，J＝2.1Hz)，6.69(d，1H，J＝2.1Hz)，2.74(s，3H)，2.63(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H12N2O3S3(M+H)317.4；實(shí)測(cè)值317.2.
實(shí)施例1125-甲硫基-4-(4-苯基-噻唑-2-磺?；?-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)5-硝基-4-(4-苯基-噻唑-2-磺酰基)-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例111步驟a的工藝，在THF(10mL)中使用4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)532mg，2mmol)、4-苯基-噻唑-2-硫醇(483mg，2.5mmol)和DMAP-聚苯乙烯樹(shù)脂(2g，2.86mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理，得到粗的硫化物，將其用間-氯過(guò)苯甲酸(1.38g，8mmol)的DCM(30mL)溶液處理，如實(shí)施例111步驟b所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和SiO2快速色譜純化(含25-50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(245mg，30％)，為白色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.25(s，1H)，7.80(m，2H)，7.75(s，1H)，7.34-7.44(m，3H)，7.05(s，1H)，6.43(d，1H，J＝1.9Hz)，3.98(s，3H).
b)5-甲硫基-4-(4-苯基-噻唑-2-磺?；?-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽按照實(shí)施例12步驟c的工藝，使5-硝基-4-(4-苯基-噻唑-2-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(110mg，0.27mmol)與硫代甲醇鈉(1M EtOH溶液，325μL，0.325mmol)在THF(5mL)中反應(yīng)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化，得到硫代甲基化中間體(82mg，75％)，為白色固體。將一部分固體(52mg，0.126mmol)用二甲基鋁酰胺試劑(5mL)處理，如實(shí)施例12步驟f所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和制備型TLC純化(含15％ MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(21mg，38％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.38(s，1H)，8.31(s，1H)，7.90(m，2H)，7.36-7.46(m，3H)，2.76(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C15H13N3O2S4(M+H)396.6；實(shí)測(cè)值396.1.
實(shí)施例1134-(6-乙氧基-苯并噻唑-2-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)4-(6-乙氧基-苯并噻唑-2-磺酰基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例111步驟a的工藝，在THF(6mL)中使用4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)266mg，1mmol)、6-乙氧基-苯并噻唑-2-硫醇(264mg，1.25mmol)和DMAP-聚苯乙烯樹(shù)脂(0.75g，1.05mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理，得到粗的硫化物，將其用間-氯過(guò)苯甲酸(692mg，4mmol)的DCM(30mL)溶液處理，如實(shí)施例111步驟b所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和SiO2快速色譜純化(含25-50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(250mg，58％)，為無(wú)色玻璃狀物。1H-NMR(CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.94(d，1H，J＝9.1Hz)，7.38(d，1H，J＝2.6Hz)，7.17(dd，1H，J＝2.6，9.1Hz)，4.13(q，2H，J＝7.0Hz)，4.00(s，3H)，1.47(t，3H，J＝7.0Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C15H12N2O7S3(M+H)429.5；實(shí)測(cè)值429.1.
b)4-(6-乙氧基-苯并噻唑-2-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽按照實(shí)施例12步驟c的工藝，使4-(6-乙氧基-苯并噻唑-2-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(65mg，0.15mmol)與硫代甲醇鈉(1MEtOH溶液，175μL，0.175μmol)在THF(5mL)中反應(yīng)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的含水處理和SiO2快速色譜純化，得到硫代甲基中間體(53mg，82％)，為無(wú)色玻璃狀物。將一部分產(chǎn)物(41mg，0.10mmol)用二甲基鋁酰胺試劑(3mL)處理，如實(shí)施例12步驟f所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和制備型TLC純化(含15％ MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(18mg，42％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.37(s，1H)，7.96(d，1H，J＝9.1Hz)，7.62(d，1H，J＝2.6Hz)，7.22(dd，1H，J＝2.6，9.1Hz)，4.14(q，2H，J＝7.0Hz)，2.74(s，3H)，1.44(t，3H，J＝7.0Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C15H15N3O3S4(M+H)414.6；實(shí)測(cè)值414.1.
實(shí)施例1144-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽HCl a)4-溴噻吩-2-羧酸向配有磁攪拌器的燒瓶加入25g(130mmol)4-溴噻吩-2-甲醛(Aldrich Chemical Company)、乙腈(200mL)和4.5g(37.5mmol)磷酸二氫鈉的35mL水溶液。將該混合物在冰-鹽浴上冷卻后，加入15mL(169mmol)35％過(guò)氧化氫和15.3g(169mmol)亞氯酸鈉，將混合物攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。在真空中除去溶劑，將固體懸浮在水(175mL)與1N鹽酸(4mL)的混合物中，在室溫下攪拌10分鐘。在布氏漏斗上收集固體，用水洗滌(2×150mL)，得到26g(97％)4-溴噻吩-2-羧酸，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
b)4-溴噻吩-2-羧酸甲基酯在N2下，向帶有攪拌桿的干燥燒瓶加入6g(29.1mmol)4-溴噻吩-2-羧酸(如前步制備)和無(wú)水甲醇(100mL)。將溶液在冰-鹽浴上冷卻15分鐘，歷經(jīng)15分鐘加入2.55mL(34.9mmol)亞硫酰氯，保持溫度＜-5℃。將反應(yīng)混合物在冰-鹽浴上攪拌另外15分鐘，然后在室溫下攪拌1小時(shí)，最后在N2下回流8小時(shí)。將所得溶液冷卻，濃縮得到6.7g淡琥珀色油。使該油通過(guò)150g二氧化硅，用～600mL CH2Cl2洗脫(棄去前120mL，其中含有微量雜質(zhì)，沒(méi)有酯)。在真空中除去溶劑，得到6.11g(95％收率)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
c)4-溴-5-硝基噻吩-2-羧酸甲基酯在-5°至-10℃下，將硝酸化混合物(HNO3d＝1.42，2mL；濃H2SO4，6mL)緩慢加入到4-溴噻吩-2-羧酸甲基酯(3g，13.57mmol)的濃H2SO4(10mL)溶液中，同時(shí)攪拌。在-5至-10℃下保持30分鐘后，將混合物倒在碎冰上。過(guò)濾分離固體沉淀，用水洗滌，經(jīng)P2O5干燥，得到3.7g 4-溴-5-硝基噻吩-2-羧酸甲基酯，為黃褐色固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
d)4-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向冷卻著的(冰浴)來(lái)自上步c的4-溴-5-硝基噻吩-2-羧酸甲基酯(0.5g，1.88mmol)的二甲基甲酰胺(DMF)溶液加入3-甲氧基苯硫酚(0.29g，2.1mmol)和Cs2CO3(0.67g，2.1mmol)。將所得混合物在50℃下加熱3小時(shí)。在真空下除去DMF，使殘余物在EtOAc與10％ HCl之間分配。將EtOAc層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮，得到油。該油經(jīng)過(guò)硅膠柱色譜純化(EtOAc己烷)，得到0.56g(91％)4-(3-甲氧基-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯。將該酯溶于CH2Cl2(6mL)，用間-氯過(guò)苯甲酸(MCPBA，1.1g)處理，在回流下加熱6小時(shí)。將所得混合物用CH2Cl2(10mL)稀釋?zhuān)蔑柡土虼蛩徕c、1N NaOH和鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠柱色譜純化(EtOAc己烷)，得到油。將該油溶于DMF(5mL)，在冰浴中冷卻。向該溶液加入硫代甲醇鈉(126mg，Aldrich Chemical Company)，將混合物攪拌5小時(shí)。用10％ HCl猝滅反應(yīng)，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)制備型薄層色譜純化，得到171mg 4-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯，直接用于下一步。
e)4-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將來(lái)自上步d的4-(3-甲氧基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(171mg，0.48mmol)用二甲基鋁酰胺試劑(2mL)處理，如實(shí)施例12步驟f所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和制備型TLC純化(含15％ MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(50mg，30％)，為白色固體。1H-NMR(DMSO-d6)δ9.24(寬s，4H)，8.43(s，1H)，7.64-7.51(m，2H)，7.44(s，1H)，7.31(d，1H，J＝9.3Hz)，3.83(s，3H)，2.70(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H14N2O3S3(M+H)343.0；實(shí)測(cè)值343.2.
實(shí)施例1154-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)6-甲基-聯(lián)苯-3-基胺向干燥過(guò)的燒瓶加入3-溴-4-甲基-苯基胺(1g，5.37mmol)、苯基代硼酸(2.62g，21.5mmol)、含水Na2CO3(2M，21.5mL，43mmol)、乙醇(21.5mL)和甲苯(43mL)。向燒瓶噴射Ar，加入Pd(PPh3)4(1.55g，1.34mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌和加熱18小時(shí)，然后冷卻至室溫。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯。將有機(jī)層用水和鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)由柱色譜純化(SiO2，5％ DCM/己烷)，得到黃色的油(463mg，47％)。將它直接用于下一步。
b)6-甲基-聯(lián)苯-3-硫醇在-2℃下，向冷卻著的來(lái)自上步a的6-甲基-聯(lián)苯-3-基胺(463mg，2.53mmol)在鹽酸溶液(0.42mL濃HCl的0.5mL H2O溶液，5mmol)中的溶液滴加NaNO2溶液(Aldrich，0.18g的0.3mL H2O溶液，2.6mmol)。將所得重氮鎓離子溶液攪拌20分鐘，加入到KS2COEt的H2O溶液(0.61g的0.8mL H2O溶液，3.81mmol)中，同時(shí)攪拌。將所得混合物加熱至80℃達(dá)幾分鐘，然后冷卻至室溫，用二乙醚萃取。在真空中除去乙醚，將殘余物用氫氧化鉀溶液(0.5g的1.5mL乙醇溶液，8.91mmol，3.56eq)處理，在回流下加熱8小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用H2O稀釋?zhuān)肏Cl酸化至pH～3。該溶液用Et2O萃取，將有機(jī)層用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到黃色的油(510mg，100％)。將它直接用于下一步。
c)4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯向三苯膦(0.67g，2.55mmol)、4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)1g，3.76mmol)與4-(二甲基)氨基吡啶樹(shù)脂(1eq)的THF溶液加入來(lái)自上步b的6-甲基-聯(lián)苯-3-硫醇。將該混合物攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)由柱色譜純化(SiO2，15％乙酸乙酯/己烷)，得到黃色玻璃狀物(600mg，61％)，用于下一步。
d)4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯向來(lái)自上步c的4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.6g，1.56mmol，1eq)的DCM溶液加入3-氯過(guò)苯甲酸(1.04g，3.42mmol，2.2eq)。將反應(yīng)混合物加熱至回流達(dá)2小時(shí)，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物用飽和Na2S2O3溶液猝滅，然后用飽和Na2CO3溶液、水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到黃色固體(170mg，26％)，直接用于下一步。
e)4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯在-78℃下，向來(lái)自上步d的4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(170mg，0.41mmol)的無(wú)水THF溶液滴加1M NaSMe的乙醇溶液(0.4mL，0.41mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌2小時(shí)，用乙酸(23μL，0.41mmol)猝滅，溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)蔑柡蚇aHCO3溶液(2x)、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中除去。殘余物經(jīng)由柱色譜純化(SiO2，15％ DCM/己烷)，得到黃色玻璃狀物(130mg，76％)。
f)4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽在干燥過(guò)的燒瓶中，在氬下將NH4Cl(Aldrich，1.08g，20mmol)懸浮在無(wú)水甲苯(10mL)中。向該懸液加入2M AlMe3的甲苯溶液(10mL，20mmol)。將該混合物加熱至100℃達(dá)幾分鐘。在Ar下將這種二甲基鋁酰胺試劑(5mL，5mmol)加入到來(lái)自上步e的4-(6-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(130mg，0.31mmol)中。將該反應(yīng)混合物加熱至回流達(dá)1.5小時(shí)，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物倒入硅膠的CHCl3漿液進(jìn)行猝滅。將漿液攪拌30分鐘，然后用10％ MeOH/DCM和MeOH過(guò)濾。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于10％ MeOH/DCM，通過(guò)注射濾器過(guò)濾。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)由制備型HPLC純化，得到米色固體(5mg，4％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.39(bs，1H)，8.96(bs，2H)，8.41(s，1H)，7.88(dd，1H)，7.74(m，1H)，7.61(m，1H)，7.52-7.35(m，5H).計(jì)算值C19H18N2O2S3402.05；實(shí)測(cè)值403.2.
實(shí)施例1165-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽 a)3-苯氧基-苯硫酚在0-2℃下，向冷卻著的3-苯氧基苯胺(2g，0.01mol)在鹽酸溶液(1.69mL濃HCl的2mL H2O溶液，0.02mol)中的溶液滴加NaNO2溶液(Aldrich，0.8g的2mL H2O溶液，0.01mol)。將所得重氮鎓離子溶液攪拌20分鐘，然后加入到KS2COEt的H2O溶液(2.6g的4mL H2O溶液，0.02mol)中，同時(shí)攪拌。將該混合物加熱至80℃達(dá)20分鐘，然后冷卻至室溫，用二乙醚萃取。將乙醚層用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去乙醚，將殘余物溶于乙醇，用氫氧化鈉溶液(12N，0.04mol，3.56eq)處理，在回流下加熱8小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用H2O稀釋?zhuān)肏2SO4酸化至pH～3。該溶液用Et2O萃取，將有機(jī)層用H2O和鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到黃色的油，經(jīng)過(guò)硅膠柱色譜純化，得到3-苯氧基-苯硫酚與對(duì)應(yīng)二硫化物的混合物(1.2g)。將它直接用于下一步。
b)5-硝基-4-(3-苯氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯將來(lái)自上步a的混合物(171mg，0.48mmol)用三苯膦(1.98g，7.52mmol)、4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)0.5g，1.88mmol)和4-(二甲基)氨基吡啶樹(shù)脂(1eq)在THF(25mL)中處理。將該混合物攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)由硅膠柱色譜純化，得到黃色玻璃狀物(420mg)，直接用于下一步。
c)5-硝基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯向來(lái)自上步b的5-硝基-4-(3-苯氧基-苯硫基)-噻吩-2-羧酸甲基酯(420mg，1.1mmol)的DCM溶液加入3-氯過(guò)苯甲酸(1.31g，4.34mmol，4eq)。將反應(yīng)混合物加熱至回流18小時(shí)，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物用飽和Na2S2O3溶液猝滅，然后用1N NaOH溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，殘余物直接用于下一步。
d)5-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯在-78℃下，向來(lái)自上步c的5-硝基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯的無(wú)水THF溶液滴加1M NaSMe的乙醇溶液(1.06mL，1.08mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌5小時(shí)，用乙酸(61μL，1.08mmol)猝滅，溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋?zhuān)?0％HCl、飽和NaHCO3溶液(2x)、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，在真空中除去。殘余物經(jīng)由硅膠柱色譜純化，得到250mg(55％)5-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯。
e)5-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒鹽酸鹽將來(lái)自上步d的5-甲硫基-4-(3-苯氧基-苯磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯(200mg，0.48mmol)用二甲基鋁酰胺試劑(2mL)處理，如實(shí)施例12步驟f所述。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的處理和制備型TLC純化(含10％ MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(120mg，62％)，為白色固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.46(bs，2H)，9.20(bs，2H)，8.43(s，1H)，7.71-7.63(m，2H)，7.49-7.43(m，3H)，7.35(d，1H，J＝7.9Hz)，7.24(t，1H，J＝7.2和7.4Hz)，7.1(d，2H，J＝7.7Hz)，2.68(s，3H).計(jì)算值C18H16N2O3S3405.03(M+H)；實(shí)測(cè)值405.2.
實(shí)施例1174-(聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 向裝有攪拌桿和Teflon_-內(nèi)襯的螺帽的干燥2-英錢(qián)小瓶中加入{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.2mmol，實(shí)施例27，步驟c)、苯基代硼酸(0.3mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(0.025mmol)。將每只小瓶用氬凈化/排空周期處理兩次，然后經(jīng)由注射器加入甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.4mL)和2M Na2CO3(0.8mL)。將小瓶置于80℃油浴中，攪拌過(guò)夜。向冷卻了的反應(yīng)混合物加入EtOAc(4mL)，將有機(jī)層過(guò)濾(1-g二氧化硅SPE柱)，在真空中蒸發(fā)濾液。所得殘余物用制備型TLC(SiO2)純化，得到Boc-保護(hù)的脒產(chǎn)物。在室溫下將該產(chǎn)物用三氟乙酸(50％ DCM溶液)處理1小時(shí)后，在真空中除去溶劑，殘余物用C18-HPLC純化(含20％至100％ CH3CN的H2O(0.1％TFA)，15min)，得到10mg(13％)4-(聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽。1H-NMR(DMSO-d6)δ8.32(s，1H)，8.25(m，2H)，8.02-7.95(m，2H)，7.72-7.63(m，3H)，7.52-7.47(m，2H)，7.44-7.39(m，1H)，2.72(s，3H).計(jì)算值C18H16N2O2S3389.04(M+H)；實(shí)測(cè)值389.2.
實(shí)施例1184-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒
a)5-溴-6-氯-吡啶-3-次磺酸將5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰氯(2.5g，8.6mmol)、亞硫酸鈉(2.0g，16.1mmol)和碳酸氫鈉(1.4g，16.9mmol)溶于水(8mL)與EtOH(3mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時(shí)。TLC分析顯示有SM的損失和強(qiáng)極性新斑點(diǎn)的生成。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，生成白色固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C5H3BrClNO2S255.8(M+H)；實(shí)測(cè)值256.0.1H-NMR(CD3OD)δ8.55(m，1H)，8.29(m，1H).
b)4-(5-溴-6氯-吡啶-3-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(5.0g，19.9mmol)溶于DMF(20mL)，冷卻至0℃。向其中滴加5-溴-6-氯-吡啶-3-次磺酸(實(shí)施例118，步驟a)(1.8g，6.6mmol)的DMF(20mL)達(dá)2小時(shí)。然后將反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，繼續(xù)攪拌另外2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(Biotage-40M，含25％ EtOAc的己烷)。分離產(chǎn)物，為白色固體(2.5g，48％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H6BrClN2O6S2440.8(M+H)；實(shí)測(cè)值441.0.
c)4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例27，a的工藝，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(3.5g，8.10mmol，實(shí)施例118，步驟b)和硫代甲醇鈉(560mg，8.10mmol，1M EtOH溶液)。將反應(yīng)物攪拌2.5小時(shí)，用乙酸猝滅。將所得混合物溶于EtOAc，用鹽水和飽和NaHCO3進(jìn)行含水處理，導(dǎo)致混合物的分離。該混合物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(Biotage-40M，100％己烷至含25％ EtOAc的己烷)。分離產(chǎn)物，為黃色固體(750mg，21％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H10BrClNO4S3441.8(M+H)；實(shí)測(cè)值442.1.1H-NMR(CD3OD+CDCl3)δ8.93(m，1H)，8.50(m，1H)，8.06(s，1H)，3.91(m，3H)，2.67(m，3H).
d)4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例20，f的工藝，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(14mg，0.03mmol，實(shí)施例118，步驟c)和二甲基鋁酰胺(1M，5mL)。將反應(yīng)物在90℃下攪拌3小時(shí)，TLC分析顯示反應(yīng)是完全的。用SiO2猝滅反應(yīng)，過(guò)濾。在真空中濃縮所得濾液，繼之以C18-HPLC純化(10-70％ CH3CN，30min)。分離標(biāo)題化合物，為白色固體(6.4mg，46％)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H9BrClN3O2S3425.9(M+H)；實(shí)測(cè)值426.1.1H-NMR(CD3OD)δ8.96(s，1H)，8.65(s，1H)，8.33(s，1H)，2.76(s，3H).
實(shí)施例1194-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺使用氨彈制備標(biāo)題化合物。將氨氣(5mL)壓縮到帶有攪拌桿的金屬?gòu)椀腡eflon_內(nèi)核中，其中含有4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(321mg，0.73mmol，實(shí)施例118，步驟c)。在試劑的加入期間保持Teflon_內(nèi)核在-78℃。加入試劑后，組裝反應(yīng)彈，然后用手緊密密封，然后通過(guò)扳手的作用擰緊。利用pH紙檢查密封彈有無(wú)泄漏。然后將反應(yīng)彈加入到油浴中，利用適當(dāng)防護(hù)屏加熱至80℃過(guò)夜。第二天，將反應(yīng)彈冷卻至室溫，然后進(jìn)一步在干冰/丙酮浴中冷卻至-78℃。然后打開(kāi)冷卻的容器，使剩余氨揮發(fā)。所得紅色固體無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用(306mg，95％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H10BrN3O3S3407.9(M+H)；實(shí)測(cè)值408.1.1H-NMR(CD3OD)δ8.56(m，1H)，8.18(m，1H)，8.07(s，1H)，2.72(s，3H).
b)4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例20，f的工藝，使用4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺(14mg，0.03mmol，實(shí)施例119，步驟a)和二甲基鋁酰胺(1M，5mL)。將反應(yīng)物在90℃下攪拌3小時(shí)，TLC分析顯示反應(yīng)是完全的。將反應(yīng)物用SiO2猝滅，過(guò)濾。在真空中濃縮所得濾液，繼之以C18-HPLC純化(10-70％ CH3CN，30min)。分離標(biāo)題化合物，為白色固體(4.9mg，39％)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H11BrN4O2S3406.9(M+H)；實(shí)測(cè)值407.1.1H-NMR(CD3OD)δ8.54(m，1H)，8.26(m，1H)，8.15(m，1H)，2.74(s，3H).
實(shí)施例1204-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯在燒瓶中將4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(25mg，0.06mmol，實(shí)施例118，步驟c)和鋅粉(4mg，0.06mmol)溶于1mL乙酸，加熱至50℃達(dá)4小時(shí)。TLC分析顯示有新斑點(diǎn)的生成。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，經(jīng)過(guò)Celite_純化，使用含10％MeOH的DCM洗脫。粗產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H10BrNO4S3407.9(M+H)；實(shí)測(cè)值408.1.
b)4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例20，f的工藝，使用4-(5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(5mg，0.01mmol，實(shí)施例120，步驟a)和二甲基鋁酰胺(1M，5mL)。將反應(yīng)物在90℃下攪拌3小時(shí)，TLC分析顯示反應(yīng)是完全的。將反應(yīng)物用SiO2猝滅，過(guò)濾。在真空中濃縮所得濾液，繼之以C18-HPLC純化(10-70％ CH3CN，30min)。分離標(biāo)題化合物，為白色固體(4.6mg，92％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H10BrN3O2S3391.9(M+H)；實(shí)測(cè)值392.1.1H-NMR(CD3OD)δ9.14(m，1H)，8.97(m，1H)，8.55(m，1H)，8.34(s，1H)，2.76(m，3H).
實(shí)施例1214-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺(25mg，0.06mmol，實(shí)施例120步驟a)、鄰-甲苯基苯基代硼酸(33mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)4(14mg，0.01mmol)、含水Na2CO3(2M，0.4mL)、乙醇(0.4mL)和甲苯(0.8mL)。殘余物經(jīng)過(guò)制備型SiO2色譜純化(含25％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(7.4mg，32％)，為褐色固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O3S3420.0(M+H)；實(shí)測(cè)值420.2.
b)4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例20，f的工藝，使用4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺(7.4mg，0.02mmol，實(shí)施例121，步驟a)和二甲基鋁酰胺(1M，5mL)。將反應(yīng)物在90℃下攪拌3小時(shí)，TLC分析顯示反應(yīng)是完全的。將反應(yīng)用SiO2猝滅，過(guò)濾。在真空中濃縮所得濾液，繼之以C18-HPLC純化(10-70％ CH3CN，30min)。分離標(biāo)題化合物，為白色固體(2.6mg，35％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H18N4O2S3419.0(M+H)；實(shí)測(cè)值419.1.1H-NMR(CD3OD)δ8.6(m，1H)，8.28(s，1H)，7.74(m，1H)，7.36(m，3H)，7.16(m，1H)，2.74(m，3H)，2.13(m，3H).
實(shí)施例1224-(6′-甲基-2′-嗎啉-4-基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[4-(6′-甲基-2′-嗎啉-4-基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，0.04mmol，實(shí)施例25步驟c)、K2CO3(8mg，0.06mmol)、2，6-二甲基吡啶(8mg，0.08mmol)和2-溴乙基醚(18mg，0.08mmol)溶于乙腈(1mL)，加熱至80℃，同時(shí)在氬下攪拌。6小時(shí)后，加入Et3N(8μL，0.06mmol)，將反應(yīng)物繼續(xù)攪拌20小時(shí)。殘余物經(jīng)過(guò)制備型SiO2TLC純化(含50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(7.5mg，32％)，為黃色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H33N3O5S3588.2(M+1)；實(shí)測(cè)值588.0.
b)4-(6′-甲基-2′-嗎啉-4-基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽如實(shí)施例1步驟d將{亞氨基-[4-(6′-甲基-2′-嗎啉-4-基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(7.5mg，0.013mmol，實(shí)施例122步驟a)去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為澄清玻璃狀物(2.2mg，35％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.02-8.05(m，1H)，7.94-7.92(t，1H，J＝1.6Hz)，7.66-7.70(t，1H，J＝7.2Hz)，7.61-7.64(m，1H，J＝7.9Hz)，7.23-7.28(t，1H，J＝7.67Hz)，6.98-7.05(m，2H)，3.13-3.27(m，4H)，2.71(s，3H)，2.63-2.67(m，4H)，2.05(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H25N3O3S3488.1(M+1)；實(shí)測(cè)值488.3.
實(shí)施例l234-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酸鈉將亞硫酸鈉(794mg，6.3mmol)和碳酸氫鈉(554mg，6.6mmol)溶于水(4mL)，同時(shí)加熱(70℃)。歷經(jīng)1小時(shí)緩慢加入固體6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰氯(1000mg，3.4mmol)。將反應(yīng)物在70℃下加熱另外2小時(shí)，繼之以在室溫下放置過(guò)夜。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
b)4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(2.6g，10.2mmol，實(shí)施例27步驟c)溶于DMF(15mL)，將6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酸鈉(946mg，3.4mmol，實(shí)施例123步驟a)部分溶于DMF(15mL)。將4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯的溶液冷卻至-20℃，向其中歷經(jīng)1小時(shí)滴加6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酸鈉的溶液。將反應(yīng)混合物維持在-20℃，同時(shí)攪拌3小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜純化(Biotage Flash System-40M SiO2柱)(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(430mg，29％)，為白色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H6BrClN2O2S2440.9(M+1)；實(shí)測(cè)值441.1.
c)4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例27步驟a所述工藝，使用4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺?；?-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(63mg，0.14mmol，實(shí)施例123步驟b)和硫代甲醇鈉(0.5M EtOH溶液，0.18mmol，360μL)。將反應(yīng)物用乙酸(10μL，0.18mol)猝滅，繼之以在真空中濃縮。然后將殘余物溶于EtOAc，用飽和NaHCO3和鹽水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，在真空中除去溶劑，繼之以制備型SiO2TLC純化(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(14.2mg，23％)，為黃色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H9BrClNO4S3441.9(M+1)實(shí)測(cè)值442.0.
d)4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(實(shí)施例123步驟c)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(6.4mg，50％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.97(s，1H)，8.66(s，1H)，8.33(s，1H)，2.76(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H9BrClN3O2S3425.9(M+1)實(shí)測(cè)值426.1.
實(shí)施例1244-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將氨氣用指形冷凝器壓縮至不銹鋼彈的Teflon內(nèi)核中。收集大約5mL液氨，維持在-78℃下。向其中加入4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(15mg，0.034mmol，實(shí)施例123步驟c)。蓋上反應(yīng)容器，密封，加熱至80℃過(guò)夜，被防護(hù)屏保護(hù)。將反應(yīng)彈冷卻至室溫，然后冷卻至-78℃，然后打開(kāi)。在通風(fēng)櫥中使剩余氨混合物揮發(fā)至干，得到標(biāo)題化合物和4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺(14mg，98％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H11BrN2O4S3422.9(M+1)實(shí)測(cè)值423.0.
b)4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯與4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺(實(shí)施例124步驟a)的混合物轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(4.9mg，36％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.55(s，1H)，8.27(s，1H)，8.14(s，1H)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H11BrClN4O2S3406.9(M+1)實(shí)測(cè)值407.1.
實(shí)施例1254-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用4-(6-氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(25mg，0.06mmol，實(shí)施例124步驟a)，2-甲基苯基代硼酸(33mg，0.25mmol)、Pd(PPh3)4(14mg，0.01mmol)、含水Na2CO3(2M，400μL，0.5mmol)、乙醇(400μL)和甲苯(800μL)。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。將殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以制備型SiO2TLC純化(含20％ MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物(7.4mg，29％)，為白色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18N2O4S3420.0(M+1)實(shí)測(cè)值420.2.
b)4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將4-(6-氨基-5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(實(shí)施例125步驟a)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(2.6mg，35％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.60(s，1H)，8.28(s，1H)，8.14(s，1H)，7.74-7.73(d，1H，J＝2.74Hz)7.36(s，1H)，7.32-7.28(m，1H)，7.16-7.14(d，1H，J＝8.14Hz)，2.74(s，3H)，2.13(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H18N4O2S3419.0(M+1)實(shí)測(cè)值419.1.
實(shí)施例1264-(5-溴-6-苯氧基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(5-溴-6-苯氧基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(6-溴-5-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(110mg，0.24mmol，實(shí)施例123，步驟c)、碳酸銫(156mg，0.48mmol)、苯酚(180mg，1.92mmol)、三氟甲磺酸銅(II)-苯配合物(4mg，0.006mmol)和EtOAc(1.0mg，0.02mmol)都溶于甲苯(10mL)，加熱至110℃達(dá)12小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱SiO2純化(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H14BrNO5S3599.9(M+1)實(shí)測(cè)值500.1.
b)4-(5-溴-6-苯氧基-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將4-(5-溴-6-苯氧基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(實(shí)施例126步驟a)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(1.0mg)。1H-NMR(CD3OD)δ8.66-8.65(m，1H)，8.59-8.58(m，1H)，8.33(s，1H)，7.48-7.44(m，2H)，7.33-7.29(m，1H)，7.18-7.15(m，2H)，2.76(s，3H).ESI-MS(M/z)計(jì)算值C17H14BrN3O3S3483.9(M+1)實(shí)測(cè)值484.1.
實(shí)施例1274-(5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)二-5-溴-3-吡啶基二硫化物在室溫下，將2，4-二溴吡啶(2000mg，8.4mmol)溶于乙醚(10mL)。將反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，滴加正丁基鋰(2.5M，3.4mL，8.4mmol)。將反應(yīng)物在-78℃下攪拌1小時(shí)，繼之以用硫(269mg，8.4mmol)猝滅。使反應(yīng)物歷經(jīng)2小時(shí)溫?zé)嶂潦覝亍Ｔ谡婵罩谐ト軇?，繼之以快速柱SiO2純化(含30％ EtOAc的己烷)。產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步鑒別或純化即可使用。
b)4-(5-溴-吡啶-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將二-5-溴-3-吡啶基二硫化物(600mg，1.6mmol，實(shí)施例127步驟a)、Et3N(223μL，1.6mmol)、三苯膦(419mg，1.6mmol)和4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(427mg，1.6mmol，實(shí)施例114步驟c)溶于THF(5mL)，在室溫下攪拌3天。在真空中除去溶劑，繼之以快速柱SiO2純化(含25％ EtOAc的己烷)，分離標(biāo)題化合物(200mg，33％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H7BrN2O4S2374.9(M+1)實(shí)測(cè)值377.1.
c)4-(5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(5-溴-吡啶-3-基硫基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(126mg，0.33mmol，實(shí)施例127步驟b)和m-CPBA(438mg，1.67mmol，77％)溶于DCM(10mL)，加熱至38℃，同時(shí)攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)物用Na2S2O3猝滅，溶于DCM，用NaHCO3洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱SiO2純化(含25％ EtOAc的己烷)，分離標(biāo)題化合物(151mg，99％)，為黃色固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H7BrN2O6S2406.9(M+1)實(shí)測(cè)值407.1d)4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例27步驟a所述工藝，使用4-(5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯(151mg，0.37mmol，實(shí)施例127步驟c)和硫代甲醇鈉(1.0M EtOH溶液，26.3mg，0.37mmol)。用乙酸(21μL，0.37mol)猝滅反應(yīng)，在真空中除去溶劑。然后將殘余物溶于EtOAc，用飽和NaHCO3和鹽水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜SiO2純化(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H10BrNO4S3407.9(M+1)實(shí)測(cè)值408.1.
e)4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽然后如實(shí)施例20步驟f所述將4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(實(shí)施例127步驟d)轉(zhuǎn)化為脒和純化，分離標(biāo)題化合物(2.7mg)。1H-NMR(CD3OD)δ9.15(m，1H)，9.00(m，1H)，8.58(m，1H)，8.35(s，1H)，2.77(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H10BrN3O2S3391.9(M+1)實(shí)測(cè)值392.2.
實(shí)施例1285-甲硫基-4-(5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將4-(5-溴-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒(300mg，0.77mmol，實(shí)施例127步驟e)溶于DMF(10mL)。向其中加入DIEA(267μL mg，1.53mmol)和(Boc)2O(201.6，0.92mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌12小時(shí)。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于DCM，用20％檸檬酸和鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜SiO2純化(含50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C16H18BrN3O4S3491.9(M+1)實(shí)測(cè)值491.1.
b){亞氨基-[5-甲硫基-4-(5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c所述工藝，使用{[4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.08mmol)、2-甲基苯基代硼酸(23mg，0.17mmol)、Pd(PPh3)4(19mg，0.02mmol)、含水Na2CO3(2M，800μL，0.4mmol)、乙醇(800μL)和甲苯(1600μL)。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。將殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到產(chǎn)物的粗混合物，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
c)5-甲硫基-4-(5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(5-鄰-甲苯基-吡啶-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(127mg，實(shí)施例128步驟b)如實(shí)施例1步驟d所述去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(8mg，8％)。
1H-NMR(CD3OD)δ9.15(s，1H，8.84(s，1H)，8.37(m，2H)，8.36(m，4H)，2.75(s，3H)，2.56(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O2S3404.1(M+1)；實(shí)測(cè)值404.1實(shí)施例1294-(2′-甲酰氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(58mg，0.11mmol，實(shí)施例25步驟c)溶于甲酸(3mL，96％)，加熱至100℃達(dá)24小時(shí)。在真空中除去溶劑，得到所需產(chǎn)物，除去了叔丁基保護(hù)基團(tuán)。將所得化合物如實(shí)施例1步驟d所述純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(11mg，22％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H19N3O3S3446.1(M+1)；實(shí)測(cè)值446.1.
實(shí)施例130[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨基]-乙酸 將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(75mg，0.15mmol，實(shí)施例25步驟c)、溴乙酸叔丁酯(43μL，0.29mmol)、碳酸鉀(29mg，0.21mmol)和2，6-二甲基吡啶(33μL，0.29mmol)溶于甲苯(2mL)。將反應(yīng)物攪拌并加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。向反應(yīng)物加入Et3N(41μL，0.3mmol)，加熱至80℃達(dá)另外12小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以制備型SiO2TLC純化(含20％ MeOH的DCM)，得到{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨基}-乙酸叔丁基酯。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H37N3O6S3632.2(M+1)實(shí)測(cè)值631.9.
將{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨基}-乙酸叔丁基酯如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為褐色固體(1.7mg)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.08-8.06(d，1H，J＝8.83Hz)，7.77(t，1H，J＝7.44Hz，J＝7.67Hz)，7.63-7.61(d，1H，J＝7.67Hz)，7.16(t，1H，J＝7.91Hz，J＝7.91Hz)，7.05-6.68(d，2H，J＝7.67Hz)，6.52-6.50(d，1H，J＝8.14Hz)，3.81(s，1H)，2.72(s，3H)，2.17(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H21N3O4S3476.1(M+1)；實(shí)測(cè)值476.1.
實(shí)施例131{2-[5-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-吡啶-3-基]-3-甲基-芐氧基}-乙酸 a)2-碘-3-甲基-苯甲酰氯將2-碘-3-甲基苯甲酸(1310mg，5mmol)和亞硫酰氯(730μL，10mmol)溶于THF(10mL)，在室溫下攪拌4天。在真空中除去溶劑，將所得殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到油，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
b)(2-碘-3-甲基-苯基)-甲醇將2-碘-3-甲基-苯甲酰氯(1360mg，4.86mmol，實(shí)施例131a)溶于THF(2mL)，冷卻至-78℃。向其中緩慢加入氫化鋁鋰的漿液(184.3mg，4.86mmol)，小心地稱入干燥燒瓶中，冷卻至-78℃，然后加入THF(2mL)。使反應(yīng)物緩慢溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?小時(shí)。通過(guò)將反應(yīng)物冷卻回到-78℃、加入200μL水、200μL 15％ NaOH、600μL水而進(jìn)行猝滅，然后倒在Celite上，用THF過(guò)濾。得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H-NMR(CDCl3)δ7.21-7.19(m，2H)，7.14-7.11(m，1H，)，4.61(s，2H)，2.43(s，3H).
c)(2-碘-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯將(2-碘-3-甲基-苯基)-甲醇(1608mg，6.8mmol，實(shí)施例131步驟b)溶于DMF(10mL)。將溶液冷卻至0℃。向其中一次性加入氫化鈉，將反應(yīng)物在0℃下繼續(xù)攪拌30分鐘。向冷卻后的溶液加入溴乙酸叔丁酯(1.3mL，8.9mmol)，然后使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，然后加熱?0℃達(dá)4小時(shí)。在真空中除去溶劑，將所得殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(1.29g，53％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.28-7.13(m，3H)，4.63(s，2H)，4.07(s，2H)，2.44(s，3H)，1.47(s，9H).
d)[3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯將(2-碘-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯(360mg，1.46mmol，實(shí)施例131步驟c)、反式-二氯雙(三苯膦)鈀(II)(102mg，0.15mmol)和Et3N(1.2mL，8.76mmol)溶于二噁烷(10mL)。向其中緩慢加入4，4，4，5，5，5-四甲基二氧硼雜環(huán)戊烷(423μL，2.91mmol)，將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)2小時(shí)。加入催化量4，4，4，5，5，5-四甲基二氧硼雜環(huán)戊烷和二氯雙(三苯膦)鈀(II)，將反應(yīng)物在50℃下繼續(xù)加熱過(guò)夜。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于EtOAc，繼之以用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。粗反應(yīng)混合物經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(30％ EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(335mg，63％)，為褐色的油。
1H-NMR(CDCl3)δ7.23-7.06(m，3H)，4.72(s，2H)，4.09(s，2H)，2.42(s，3H)，1.45(m，12H)，1.38(s，9H).
e)(2{5-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-吡啶-3-基}-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用[3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯(252.2mg，0.62mmol，實(shí)施例131步驟d)、{[4-(5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(75.9mg，0.15mmol，實(shí)施例128步驟a)、Pd(PPh3)4(35mg，0.03mmol)、含水Na2CO3(2M，1mL)，乙醇(1mL)和甲苯(2mL)。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)24小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜(SiO2)純化殘余物(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(460mg)，為褐色的油。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H37N3O7S3648.2(M+1)實(shí)測(cè)值647.9.
f){2-[5-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-吡啶-3-基]-3-甲基-芐氧基}-乙酸將(2-{5-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-吡啶-3-基}-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯(127mg)(實(shí)施例11步驟e)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ9.05(s，1H)，8.65(s，1H)，8.26(m，1H)，8.19(s，1H)，7.28-7.24(m，3H)，4.12(s，2H)，3.67(s，2H)，2.63(s，3H)，1.92(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H21N3O5S3492.1(M+1)；實(shí)測(cè)值492.1.
實(shí)施例l32N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-丙酰胺酸
a)N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-丙酰胺酸甲基酯將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(22mg，0.04mmol，實(shí)施例25步驟c)溶于THF(1mL)，向其中加入氯羰基-乙酸甲基酯(9μL，0.085mmol)。將反應(yīng)物加熱至50℃達(dá)5小時(shí)，然后在室溫下攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC(SiO2)純化(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H31N3O7S3618.1(M+1)實(shí)測(cè)值617.9.
b)N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-丙酰胺酸將N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-丙酰胺酸甲基酯(20mg，0.03mmol，實(shí)施例132步驟a)和NaOH(1M，90μL，0.09mmol)溶于MeOH(1.5mL)。將反應(yīng)物攪拌2小時(shí)。加入LiOH(1.0mg，0.05mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H29N3O7S3604.1(M+1)；實(shí)測(cè)值504.0(boc的失去).
c)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-丙酰胺酸將N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-丙酰胺酸(實(shí)施例132步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為玻璃狀固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.28(s，1H)，8.07-8.05(m，1H)，7.85(s，1H)，7.72-7.68(t，1H，J＝7.67Hz，J＝7.90Hz)，7.57-7.55(m，1H)，7.43-7.26(m，3H)，2.74(s，3H)，2.07(s，3H)，2.05(s，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H21N3O5S3504.1(M+1)；實(shí)測(cè)值503.9.
實(shí)施例133N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-琥珀酰胺酸三氟乙酸鹽 a)N-{3′-[5-叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-琥珀酰胺酸乙基酯將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(38.5mg，0.07mmol，實(shí)施例25步驟c)和3-氯羰基-丙酸乙基酯(13μL，0.09mmol)溶于THF(1mL)，加熱至50℃達(dá)1小時(shí)。將反應(yīng)物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(30％ EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H35N3O7S3646.2(M+1)；實(shí)測(cè)值645.8.
b)N-{3′-[-叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-琥珀酰胺酸將N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-琥珀酰胺酸乙基酯(實(shí)施例133步驟a)和LiOH溶于MeOH，在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
c)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-丙酰胺酸三氟乙酸鹽將N-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-琥珀酰胺酸(實(shí)施例133步驟c)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.31(s，1H)，8.07-8.05(m，1H)，7.85(s，1H)，7.72-7.68(t，1H，J＝7.67Hz，J＝7.90Hz)，7.56-7.53(m，1H)，7.37-7.35(t，1H，J＝7.67Hz，J＝7.67Hz)，7.29-7.21(m，1H)，3.36(s，4H)，2.74(s，3H)，2.09(s，3H).ESI-M(m/z)計(jì)算值C23H23N3O5S3518.1(M+1)；實(shí)測(cè)值518.1.
實(shí)施例1344-(4′-氨基-2′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(2′-氯-6′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將2-溴-1-氯-3-甲基-5-硝基-苯(45mg，0.219mmol)、{[4-(3-甲硼烷基-二羥基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.11mmol，實(shí)施例140步驟a)和Pd(PPh3)4(25mg，0.02mmol)合并在含水Na2CO3(2M，500μL)、乙醇(500μL)和甲苯(1mL)中。將反應(yīng)物加熱至80℃過(guò)夜。將所得殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(30％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(20mg，29％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H24ClN3O6S3582.1(M+1)；實(shí)測(cè)值582.1.
b){[4-(4′-氨基-2′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(2′-氯-6′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，0.034mmol，實(shí)施例134步驟a)溶于EtOH(2mL)。向其中加入氯化銨(18mg，0.34mmol)的水(4mL)溶液。將反應(yīng)物加熱至50℃，加入鐵(9.6mg，0.34mmol)。然后將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)12小時(shí)，繼之以通過(guò)Celite用甲醇和EtOAc過(guò)濾。在真空中除去溶劑，得到所需產(chǎn)物，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
c)4-(4′-氨基-2′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{[4-(4′-氨基-2′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例134步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為暗黃色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.33(s，1H)，8.03-8.00(m，1H)，7.85-7.84(m，1H)，7.70-7.66(t，1H，J＝7.67Hz，J＝7.67Hz)，7.54-7.52(m，1H)，6.94(s，1H)，6.84(m，1H)，2.70(s，3H)，1.99(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18N3O2S3452.0(M+1)；實(shí)測(cè)值452.1.
實(shí)施例135N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-氯-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽 a)4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺將(4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯(1000mg，2.9mmol)溶于DCM(10mL)。向其中加入TFA(10mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時(shí)。用1N NaOH調(diào)節(jié)pH至8，在真空中除去溶劑。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，分離各層。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(756mg，定量)，為褐色的油。1H-NMR(CDCl3)δ8.44(s，1H)，8.02(s，1H)，7.61(s，1H)，3.05(s，3H).
b)2-溴-5-氯-1-甲基-3-硝基-苯向裝有隔板、加液漏斗和冷凝器的3-頸燒瓶加入亞硝酸叔丁酯(966μL，8.12mmol)和氯化銅(II)(1090mg，8.12mmol)的乙腈(10mL)溶液。將4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺(756mg，4.06mmol，實(shí)施例135步驟a)溶于乙腈(6mL)，通過(guò)加液漏斗緩慢加入同時(shí)加熱至60℃。將反應(yīng)物用EtOAc猝滅，用水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為褐色固體(721mg，72％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.54(d，1H，J＝2.33)，7.44(d，1H，J＝2.56Hz)，2.55(s，3H).
c)2-溴-5-氯-3-甲基-苯基胺將2-溴-5-氯-1-甲基-3-硝基-苯(721mg，3.5mmol，實(shí)施例135步驟b)溶于EtOH(6mL)。向其中加入氯化銨(1.9g，35mmol)的水(10mL)溶液。將反應(yīng)物加熱至50℃，加入鐵(9.6mg，0.34mmol)，然后將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)12小時(shí)。使反應(yīng)混合物通過(guò)Celite過(guò)濾，用甲醇和乙酸乙酯洗滌，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌，以除去鹽。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(595mg，78％)，為褐色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ6.63-6.61(m，2H)，2.33(s，3H).
d)5-氯-3-甲基-2-(4，4，5，-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺將2-溴-5-氯-3-甲基-苯基胺(595mg，2.7mmol，實(shí)施例135步驟c)、Pd(OAc)2(30.3mg，0.14mmol、2-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯(189.2mg，0.54mmol)和Et3N(1.5mL，10.8mmol)溶于二噁烷(10mL)。向其中緩慢加入4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(1.2mL，8.1mmol)。將反應(yīng)物加熱至80℃過(guò)夜。在真空中除去溶劑，將所得殘余物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物與3-甲基-2，5-雙-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺的混合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
e){[4-(2′-氨基-4′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例1步驟c的工藝，使用5-氯-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺(663mg，2.5mmol，實(shí)施例135，步驟d)、{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(1.2g，2.5mmol，實(shí)施例27步驟c)、Pd(PPh3)4(577mg，0.5mmol)、含水Na2CO3(2M，10mL)、乙醇(10mL)和甲苯(20mL)。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)24小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜(SiO2)純化(含30％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H26ClN3O4S3552.1(M+1)實(shí)測(cè)值551.7.
f)({4-[4′-氯-2′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(2′-氨基-4′-氯-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(120mg，0.22mmol，實(shí)施例135，步驟e)和Et3N(0.91μL，0.65mmol)溶于DCM(4mL)。向其中加入(4-甲磺酰基-丁酰氯(0.144M，3.1mL，0.44mmol，實(shí)施例209a)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜純化(20％ EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為橙色固體(124mg，81％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H34ClN3O7S4700.1(M+1)實(shí)測(cè)值700.1.
g)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-氯-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽將({4-[4′-氯-2′-(4-甲磺酰基-丁酰氨基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(124mg，0.18mmol，實(shí)施例135步驟f)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為澄清玻璃狀物(70mg，65％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.08-8.06(d，1H，J＝10.00Hz)，7.87(m，1H)，7.71(t，1H，J＝7.91Hz，J＝8.61Hz)，7.56-7.54(d，1H，J＝9.07)，7.33(m，2H)，2.92(s，3H)，2.85(t，2H，J＝7.91Hz，J＝7.67Hz)，2.73(s，3H)，2.21(t，2H，J＝5.35Hz，J＝7.91Hz)，2.07(s，3H)，1.82-1.73(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值·C24H26ClN3O5S4600.1(M+1)；實(shí)測(cè)值600.1.
實(shí)施例1364-[4′-(N′-己基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)({4-[4′-(3-己基-硫脲基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒(26mg，0.05mmol，實(shí)施例220步驟b)溶于EtOH。向其中加入異硫氰酸己酯(30μL)，將反應(yīng)物在80℃下加熱4小時(shí)。在真空中除去溶劑，反應(yīng)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化或鑒別即可使用。
b)({4-[4′-(N′-己基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將({4-[4′-(3-己基-硫脲基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(33mg，.14mmol，實(shí)施例136步驟a)溶于氨的甲醇溶液(2.0M，4mL)。向其中加入氧化汞(II)(33.9mg，0.16mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)。加入另外的氧化汞(II)(154mg，0.08mmol)，將反應(yīng)物加熱至40℃過(guò)夜。將反應(yīng)物用0.2μM濾盤(pán)過(guò)濾，用EtOAc洗滌，繼之以在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用(30mg)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H41N5O4S3644.2(M+1)；實(shí)測(cè)值644.1.
c)4-[4′-(N′-己基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將({4-[4′-(N′-己基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，實(shí)施例136步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色玻璃狀物(11.5mg，43％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.03-8.00(m，2H)，7.73-7.67(m，2H)，7.33-7.31(m，1H)，7.24-7.18(m，2H)，3.63(m，2H)，2.72(s，3H)，2.27(s，3H)，1.69-1.62(m，2H)，1.44-1.33(m，6H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H33N5O2S3544.2(M+1)；實(shí)測(cè)值544.1.
實(shí)施例1375-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-戊酸三氟乙酸鹽 a)5-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-戊酸甲基酯將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.19mmol，實(shí)施例25步驟c)溶于THF(3mL)。向其中加入5-氯羰基-戊酸甲基酯(41.5mg，0.23mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，繼之以在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H37N3O7S3660.2(M+1)；實(shí)測(cè)值660.8.
b)5-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-戊酸將5-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-戊酸甲基酯(125mg，0.19mmol，實(shí)施例137步驟a)和LiOH(12.5mg，0.54mmol)溶于MeOH(3mL)，加熱至60℃達(dá)12小時(shí)。將反應(yīng)物溶于EtOAc，用20％檸檬酸洗滌。將水層用乙酸酸化(pH 3)，用EtOAc萃取。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，繼之以在真空中除去溶劑。所得產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型RP-HPLC純化(0-100％水/乙腈-兩種溶劑都不含TFA，45分鐘，λ＝ 245nm)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.95-7.93(d，1H，J＝9.3Hz)，7.81-7.78(d，1H，J＝7.91Hz)，7.63-7.59(m，1H)，7.55-7.53(t，1H，J＝8.35，Hz，J＝7.59Hz)，7.38-7.36(d，1H，J＝9.35Hz)，7.25-7.21(m，1H)，7.07-7.05(d，1H，J＝7.07Hz)，6.78(s，1H)，3.55(s，2H)，2.51(s，3H)，2.15-2.12(m，2H)，1.96-1.95(m，2H)，1.93(s，3H).
c)5-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-戊酸三氟乙酸鹽將5-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-戊酸(實(shí)施例137步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色玻璃狀物。
1H-NMR(CD3OD)δ8.29(s，1H)，8.06-8.04(m，1H)，7.89(s，1H)，7.68(t，1H，J＝7.67Hz，J＝8.84Hz)，7.54-7.52(d，1H，J＝7.91Hz)，7.38-7.29(m，2H)，7.18-7.16(d，1H，J＝7.67Hz)，2.75(s，3H)，2.11-2.09(m，2H)，2.08(s，3H)，2.03-1.91(m，2H)，1.27-1.08(m，4H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H27N3O5S3546.1(M+1)；實(shí)測(cè)值546.1.
實(shí)施例1384-[3-(3-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-溴-3-甲基-吡啶-1-醇將乙酰溴(5mL)冷卻至0℃。向其中分批加入4-硝基-3-甲基-吡啶-1-醇(1000mg，6.48mmol)，同時(shí)維持溫度。加入完全后，將反應(yīng)物加熱至50℃，攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)物冷卻至0℃，用冰猝滅，用固體Na2CO3中和(pH＝8)。將中性含水反應(yīng)混合物用DCM萃取。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(1.05mg，86％)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C6H6BrNO188.0(M+1)；實(shí)測(cè)值188.0.
b)4-溴-3-甲基-吡啶將4-溴-3-甲基-吡啶-1-醇(1050mg，5.6mmol，實(shí)施例138步驟a)溶于DCM(10mL)，冷卻至-20℃。向其中緩慢加入PCl3，將反應(yīng)物在-20℃下攪拌15分鐘。然后使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡_(dá)15分鐘。冷卻回到-20℃后，用水(5mL)猝滅反應(yīng)。然后使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，用NaOH(246mg，1.1mmol)的水(5mL)溶液猝滅。分離反應(yīng)混合物，用鹽水洗滌有機(jī)層。水層用10N NaOH調(diào)至pH＝10。水層然后用DCM和EtOAc萃取，合并全部有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。
1H-NMR(CDCl3)δ8.26(s，1H)，8.08-8.06(d，1H，J＝5.14Hz)，7.30-7.29(d，1H，J＝5.35Hz)，2.21(s，3H).
c)(亞氨基-{4-[3-(3-甲基-吡啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將4-溴-3-甲基-吡啶(100mg，0.219mmol，實(shí)施例138步驟b)、{[4-(3-甲硼烷基-二羥基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(266mg，0.58mmol，實(shí)施例140步驟a)和Pd(PPh3)4(134mg，0.12mmol)合并在含水Na2CO3(2M，2mL)、乙醇(2mL)和甲苯(4mL)中，加熱至80℃過(guò)夜。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(10％ DCM/MeOH)，得到標(biāo)題化合物(120mg，41％)。
ESI-MS(mz)計(jì)算值C23H25N3O4S3504.1(M+1)；實(shí)測(cè)值503.7.
d)4-[3-(3-甲基-吡啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將(亞氨基-{4-[3-(3-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例138步驟c)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色玻璃狀物。
1H-NMR(CD3OD)δ8.85(s，1H)，8.78-8.76(d，1H，J＝5.78Hz)，8.38(s，1H)，8.24-8.21(m，2H)，7.92-7.84(m，3H)，2.75(s，3H)，2.47(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17N3O2S3404.1(M+1)；實(shí)測(cè)值404.1.
實(shí)施例1394-[3-(3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)(5-甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯將5-甲基-煙酸(2g，14.6mmol)溶于叔丁醇(59mL)。向其中加入N，N-二異丙基乙胺(7.6mL，43.8mmol)和二苯基疊氮化磷酰(3.8mL，17.5mmol)。在裝有隔板和氬氣管線的燒瓶中，將反應(yīng)物加熱至80℃過(guò)夜。在真空中蒸發(fā)溶劑，將所得殘余物溶于EtOAc，用飽和NaHCO3和水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)過(guò)快速柱色譜(SiO2)純化(含50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.03g，67％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.22(m，1H)，8.14(m，1H)，7.88(br s，1H)，6.58(br s，1H)，2.34(s，3H)，1.55(s，9H).
b)(4-碘-5-甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯將(5-甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯(255mg，1.2mmol，實(shí)施例139步驟a)和三甲基乙二胺(905μL，6.0mmol)溶于THF(4mL)，冷卻至-78℃。向其中加入正丁基鋰(2.5M，2.4mL，6.0mmol)。將反應(yīng)物在-78℃下攪拌30分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝剡_(dá)30分鐘。將碘(1.5g，6.0mmol)溶于THF(4mL)，在-78℃下緩慢加入到反應(yīng)混合物中。使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡_(dá)1小時(shí)，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于EtOAc，用鹽水和水洗滌。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜(SiO2)純化(含50％ EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(55mg，14％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.91(s，1H)，8.07(s，1H)，6.81(br s，1H)，2.44(s，3H)，1.56(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H15IN2O2335.0(M+1)；實(shí)測(cè)值334.9.
c)({4-[3-(3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將(4-碘-5-甲基-吡啶-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯(106mg，0.32mmol，實(shí)施例139步驟b)、{[4-(3-甲硼烷基-二羥基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(145mg，0.32mmol，實(shí)施例140步驟a)和Pd(PPh3)4(74mg，0.06mmol)合并在含水Na2CO3(2M，1.2mL)、乙醇(1.2mL)和甲苯(2.4mL)中，加熱至80℃過(guò)夜。將反應(yīng)混合物溶于EtOAc，用鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化(40％ EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H34N4O6S3619.2(M+1)；實(shí)測(cè)值618.8.
d)4-[3-(3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將({4-[3-(3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例139步驟c)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.37(s，1H)，8.18-8.16(d，1H，J＝8.84Hz)，8.06-8.05(m，2H)，7.99(s，1H)，7.87(t，1H，J＝7.67Hz，J＝7.44Hz)，7.71-7.68(d，1H，J＝7.67Hz)，2.73(s，3H)，2.09(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H18N4O2S3419.1(M+1)；實(shí)測(cè)值419.1實(shí)施例1404-[3-(2，5-二甲基-1H-咪唑-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a){[4-(3-二羥基甲硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在0℃下，將2M i-PrMgCl的THF溶液(1.1mL，2.2mmol)滴加到{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.5g，1.0mmol)(實(shí)施例27c)的5.0mL THF溶液中。將溶液在0℃下攪拌20分鐘，然后冷卻至-78℃，加入2.5M n-BuLi的己烷溶液(0.6mL，1.5mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后在-78℃下加入硼酸三甲酯(0.35mL，3.3mmol)，使混合物達(dá)到室溫。將反應(yīng)物用飽和NH4Cl(10mL)猝滅，用EtOAc萃取(3×20mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗固體經(jīng)過(guò)5g SPE純化，用10％ MeOH/DCM洗脫，得到0.45g(95％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.28(m，1H)，8.05(m，1H)，7.95(m，1H)，7.60(m，2H)，2.66(s，3H)，1.51(s，9H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C17H21BN2O6S3456.1，實(shí)測(cè)值456.7(M+H).
Suzuki偶聯(lián)的一般工藝向含有0.50g(1.1mmol){[4-(3-二羥基甲硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯、0.22g(1mmol)5-碘-2，4-二甲基-1H-咪唑和0.006g Pd(PPh3)4(5mol％)的燒瓶中加入8mL甲苯、4mL EtOH和4mL 2M Na2CO3。向混合物回充氬，然后在80℃下加熱4小時(shí)。用水(10mL)稀釋混合物，將產(chǎn)物用EtOAc萃取(3×10mL)，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾，蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為BOC-保護(hù)的脒。在25℃下將BOC-保護(hù)的脒在2mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)，然后蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，用線性梯度的含10％ CH3CN至50％ CH3CN的0.1％ TFA/H2O洗脫30分鐘，得到0.39g(75％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H)，8.25(m，1H)，8.14(m，2H)，7.88(m，1H)，7.63(s，1H)，2.74(s，3H)，2.68(s，3H)，2.49(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C17H18N4O2S3406.1，實(shí)測(cè)值407.1(M+H).
實(shí)施例141
4-[3-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例140的一般工藝制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.08(s，1H)，8.38(s，1H)，8.29(m，1H)，8.24(m，1H)，7.96(m，1H)，7.85(m，1H)，7.81(s，1H)，3.92(s，3H)，2.75(s，3H).質(zhì)譜 (ESI，m/z)計(jì)算值C16H16N4O2S3392.1，實(shí)測(cè)值393.1(M+H).
實(shí)施例1424-[3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例140的一般工藝制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H)，8.25(m，1H)，8.14(m，1H)，7.91(m，1H)，7.81(m，1H)，2.74(s，3H)，2.68(s，3H)，2.49(s，3h).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C16H16N4O2S3392.1，實(shí)測(cè)值393.1(M+H).
實(shí)施例1434-[3-(1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a){[4-(3-甲?；?苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在0℃下，將2M i-PrMgCl的THF溶液(1.1mL，2.2mmol)滴加到{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.5g，1.0mmol)(實(shí)施例27c)的5.0mL THF溶液中。將溶液在0℃下攪拌20分鐘，然后冷卻至-78℃，加入2.5M n-BuLi的己烷溶液(0.6mL，1.5mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后在-78℃下加入N，N-二甲基甲酰胺(0.30mL，3.8mmol)，使混合物達(dá)到室溫。將反應(yīng)物用飽和NH4Cl(10mL)猝滅，用EtOAc萃取(3×20mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗固體經(jīng)過(guò)20g SPE純化，用50％ EtOAc/己烷洗脫，得到0.33g(75％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H)，8.48(s，1H)，8.26(m，1H)，8.10(m，1H)，8.06(s，1H)，7.71(s，1H)，2.50(s，3H)，1.51(s，9H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H20N2O5S3440.1，實(shí)測(cè)值440.8(M+H).
將上述醛(0.026g，0.06mmol)與N-甲基-1，2-苯二胺(0.014g，0.12mmol)的0.2mL乙醇溶液在80℃下加熱12小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于1mL 50％ TFA/DCM，在25℃下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，用線性梯度的含10％ CH3CN的0.1％ TFA/H2O至50％ CH3CN洗脫30分鐘，得到0.028g(87％)標(biāo)題化合物，為紅色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.62(m，1H)，8.45(m，1H)，8.41(s，1H)，8.28(m，1H)，8.03(m，1H)，8.00(m，1H)，7.90(m，1H)，7.75(m，2H)，4.13(s，3H)，2.76(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C20H18N4O2S3442.1，實(shí)測(cè)值443.1(M+H).
實(shí)施例1444-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例143制備該化合物，使用1，2-苯二胺。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.85(m，1H)，8.44(m，1H)，8.42(s，1H)，8.33(m，1H)，7.95(m，1H)，7.82(m，2H)，7.56(m，2H)，2.74(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C19H16N4O2S3428.0，實(shí)測(cè)值429.1(M+H).
實(shí)施例1454-[3-(1-乙基-1H-苯并咪唑-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將({4-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例144中所制備的)(25mg，0.05mmol)、K2CO3(13mg，0.10mmol)與碘代乙烷(12mg，0.08mmol)在0.5mL丙酮中的混合物加熱至60℃達(dá)2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，然后濃縮，將殘余物溶于0.5mL 50％ TFA/DCM，在25℃下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，用線性梯度的含10％ CH3CN的0.1％ TFA/H2O至50％ CH3CN洗脫30分鐘，得到26mg(93％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.58(m，1H)，8.44(m，1H)，8.41(s，1H)，8.20(m，1H)，8.02(m，2H)，7.90(m，1H)，7.71(m，2H)，4.55(q，2H)，2.75(s，3H)，1.59(t，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C21H20N4O2S3456.1，實(shí)測(cè)值457.1(M+H).
實(shí)施例1463-{2-[3-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-苯基]-苯并咪唑-1-基}-丙烷-1-磺酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例145相似的方式制備該化合物，使用1，3-丙烷磺內(nèi)酯的DMF溶液。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.58(m，1H)，8.43(m，1H)，8.36(s，1H)，8.25(m，1H)，8.10(m，1H)，8.00(m，1H)，7.88(m，1H)，7.71(m，2H)，4.72(t，2H)，2.79(t，cH)，2.77(s，3H)，2.32(m，2H)質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C22H22N4O5S4550.1，實(shí)測(cè)值550.1(M+H).
實(shí)施例1474-[3-(羥基-吡啶-2-基-甲基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
在0℃下，將2M i-PrMgCl的THF溶液(0.16mL，0.36mmol)滴加到{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.08g，0.16mmol)(實(shí)施例27c)的0.75mL THF溶液中。將溶液在0℃下攪拌20分鐘，然后冷卻至-78℃，加入2.5M n-BuLi的己烷溶液(0.084mL，0.21mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后在-78℃下加入2-吡啶甲醛(0.023mL，0.24mmol)，使混合物達(dá)到室溫。將反應(yīng)物用飽和NH4Cl(5mL)猝滅，用EtOAc萃取(3×10mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗固體經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為BOC-保護(hù)的脒，在2mL 50％ TFA/DCM中去保護(hù)(25℃，1hr)，得到0.035g(40％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.79(m，1H)，8.53(m，1H)，8.33(s，1H)，8.24(m，1H)，7.97(m，3H)，7.86(m，1H)，7.67(m，1H)，6.32(s，1H)，2.50(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H17N3O3S3419.0，實(shí)測(cè)值420.0(M+H).
實(shí)施例1484-[3-(4-羥基-1-甲基-哌啶-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例147相似的方式制備，使用1-甲基-4-哌啶酮。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.34(s，1H)，8.28(m，1H)，7.96(m，1H)，7.84(m，1H)，7.66(m，1H)，3.48(m，4H)，2.96(s，3H)，2.73(s，3H)，2.38(m，2H)，1.98(m，2H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H23N3O3S3425.1，實(shí)測(cè)值426.1(M+H).
實(shí)施例1494-[3-(4-羥基-四氫-吡喃-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
按照與實(shí)施例147相似的方式制備，使用四氫-4H-吡喃-4-酮。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.24(m，1H)，7.92(m，1H)，7.83(m，1H)，7.60(m，1H)，3.88(m，4H)，2.71(s，3H)，2.12(m，2H)，1.63(m，2H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C17H20N2O4S3412.1，實(shí)測(cè)值413.0(M+H).
實(shí)施例1504-[3-(4-甲氧基-四氫-吡喃-4-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 在25℃下，向BOC-保護(hù)的脒(46mg，0.09mmol)(實(shí)施例149中所制備的)的0.2mL DMF溶液加入NaH(60％油分散體，5.7mg，0.14mmol)。將反應(yīng)物攪拌20分鐘，然后加入碘代甲烷(6μL，0.09mmol)，將反應(yīng)物攪拌另外12小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為BOC-保護(hù)的脒，在2mL 50％ TFA/DCM中去保護(hù)(25℃，1hr)，得到標(biāo)題化合物(11.5mg，20％)，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.14(m，1H)，7.92(m，1H)，7.80(m，1H)，7.66(m，1H)，3.89(m，4H)，3.00(s，3H)，2.74(s，3H)，2.02(m，4H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H22N2O4S3426.1，實(shí)測(cè)值427.1(M+H).
實(shí)施例151
4-(3-呋喃-2-基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將50mg(0.10mmol){[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例27c中所制備的)、54mg(0.15mmol)2-三丁基甲錫烷基呋喃與12mg(10mol％)Pd(PPh3)4的0.5mLTHF溶液在80℃氬下加熱10小時(shí)。將反應(yīng)物用NH4Ac(5mL)猝滅，用EtOAc萃取(3×5mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。在25℃下將粗產(chǎn)物在1mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)，然后濃縮，經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，得到19mg(50％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.32(m，1H)，8.01(m，1H)，7.90(m，1H)，7.66(m，1H)，7.65(m，1H)，6.98(m，1H)，6.60(m，1H)，2.75(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C16H14N2O3S3378.0，實(shí)測(cè)值379.1(M+H).
實(shí)施例1523-[3-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-苯基]-丁-2-烯酸乙基酯三氟乙酸鹽 a)亞氨基-[5-甲硫基-4-(3-三丁基甲錫烷基-苯磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在0℃下，將2M i-PrMgCl的THF溶液(1.1mL，2.2mmol)滴加到{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.5g，1.0mmol)(實(shí)施例27c)的5.0mL THF溶液中。將溶液在0℃下攪拌20分鐘，然后冷卻至-78℃，加入2.5M n-BuLi的己烷溶液(0.6mL，1.5mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后在-78℃下加入三丁基氯化錫(0.65g，2.0mmol)，使混合物達(dá)到室溫。將反應(yīng)物用飽和NH4Cl(10mL)猝滅，用EtOAc萃取(3×20mL)，經(jīng)Na2SO4干燥，蒸發(fā)。粗固體經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到0.35g(50％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.14(m，1H)，8.00(s，1H)，7.87(m，1H)，7.71(m，1H)，7.46(m，1H)，2.59(s，3H)，1.53(s，9H)，1.51(m，6H)，1.34(m，6H)，1.11(m，6H)，0.89(m，9H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C29H46N2O4S3Sn 702.2，實(shí)測(cè)值702.7(M+H).
將42mg(0.06mmol){亞氨基-[5-甲硫基-4-(3-三丁基甲錫烷基-苯磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯、21mg(0.09mmol)順式-3-碘巴豆酸乙酯、3mg(5mol％)Pd(PPh3)4與1mg(10mol％)CuI在0.3mL DMF中的混合物在100℃氬下加熱12小時(shí)。蒸發(fā)DMF，在25℃下將粗產(chǎn)物在1mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，得到7mg(23％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.02(m，1H)，7.88(m，1H)，7.61(m，2H)，6.05(s，1H)，3.90(q，3H)，2.78(s，3H)，2.22(s，3H)，1.02(t，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H20N2O4S3424.1，實(shí)測(cè)值425.1(M+H).
實(shí)施例1534-[3-(1H-咪唑-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將20mg(0.04mmol){[4-(3-甲酰基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例143a)、10uL(0.06mmol)40％乙二醛水溶液與65mg(0.84mmol)NH4Ac在甲醇中的混合物在80℃下加熱12小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，在25℃下將殘余物在1mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)。再次蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，得到4mg(18％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.64(m，1H)，8.39(s，1H)，8.24(m，2H)，7.88(m，1H)，7.63(s，1H)，2.73(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C15H14N4O2S3378.0，實(shí)測(cè)值379.1(M+H).
實(shí)施例154N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯-2-基]-乙酰胺三氟乙酸鹽 將30mg(0.06mmol){[4-(2′-氨基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(按照實(shí)施例140中的Suzuki偶聯(lián)一般工藝制備，使用2-氨基苯基代硼酸)、10mg(0.09mmol)2，6-二甲基吡啶與7mg(0.07mmol)乙酸酐的2mL DCM溶液在25℃下攪拌12小時(shí)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為BOC-保護(hù)的脒，在25℃下、在1mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)進(jìn)行去保護(hù)。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，得到20mg(60％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H)，8.18(m，1H)，8.07(m，1H)，7.76(m，1H)，7.71(s，1H)，7.47(m，4H)，2.82(s，3H)，2.74(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C20H19N3O3S3445.1，實(shí)測(cè)值446.1(M+H).
實(shí)施例1554-(2′-甲磺酰氨基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
將30mg(0.06mmol){[4-(2′-氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(按照實(shí)施例140中的Suzuki偶聯(lián)一般工藝制備，使用2-氨基苯基代硼酸)、10mg(0.09mmol)2，6-二甲基吡啶與8mg(0.07mmol)甲磺酰氯的2mL DCM溶液在25℃下攪拌12小時(shí)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)快速色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為BOC-保護(hù)的脒，在25℃下、在1mL 50％ TFA/DCM中攪拌1小時(shí)進(jìn)行去保護(hù)。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化，得到25mg(70％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.29(s，1H)，8.06(m，1H)，8.03(m，1H)，7.73(m，2H)，7.42(m，4H)，2.73(s，3H)，1.96(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C19H19N3O4S4481.0，實(shí)測(cè)值482.1(M+H).
實(shí)施例1564-[5-溴-6-(3-咪唑-1-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-[5-溴-6-(3-咪唑-1-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向含有攪拌桿的小瓶中加入4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、3-咪唑-1-基-丙基胺(0.018g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。將反應(yīng)容器密封，將溶液加熱至80℃達(dá)18小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以色譜純化(5％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.69(d，1H，J＝2.1Hz)，8.10(d，1H J＝2.1Hz)，8.03(s，1H)，8.02(s，1H)，7.57(s，1H)，7.10(s，1H)，6.97(s 1H)，5.70(t，1H，J＝5.8Hz)，4.06(t，2H，J＝6.8Hz)，3.89(s，3H)，3.57(m，2H)，2.97(s，2H)，2.90(s，2H)，2.64(s，3H)，2.17(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H19BrN4O4S3532.5(M+H)；實(shí)測(cè)值530.9，532.9.
b)4-[5-溴-6-(3-咪唑-1-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將三甲基鋁[2M甲苯溶液](1.12mL，2.26mmol)緩慢加入到含有攪拌桿和氯化銨(0.120g，2.26mmol)的燒瓶中。在氬下，將該溶液在90℃油浴中放置5分鐘。使溶液冷卻至室溫。然后將該溶液加入到4-[5-溴-6-(3-咪唑-1-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(100mg，0.22mmol)的甲苯[2mL]溶液中。將反應(yīng)物在80℃下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)物加入到硅膠的DCM漿液中。使用15％ MeOH/DCM過(guò)濾漿液。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％ TFA)]，得到標(biāo)題化合物。1H-NMR(MeOH)δ8.96(s，1H)，8.62(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.12(d，1H，J＝2.3Hz)，7.68(t，1H，J＝1.7Hz)，7.56(t，1H，J＝1.6Hz)，4.32(t，2H，J＝7.2Hz)，3.60(t，2H，J＝6.7Hz)，2.72(s，3H)，2.24(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H19BrN6O2S3515.47(M+H)；實(shí)測(cè)值515.1，517.0.
實(shí)施例1574-[5-溴-6-(2-甲基-2-嗎啉-4-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-[5-溴-6-(2-甲基-2-嗎啉-4-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例156步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、2-甲基-2-嗎啉-4-基-丙基胺(0.023g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。殘余物的色譜純化(25％-50％ EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.70(d，IH，J＝2.1Hz)，8.08(d，1H，J＝2.1Hz)，8.02(s，1H)，6.82(t，1H，J＝4.1)，3.90(s，3H)，3.76(t，4H，J＝4.1)，3.37(d，2H，J＝4.1)，2.64(s，3H)，2.57(t，4H，J＝4.5)，1.59(s，3H)，1.13(s，6H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H26BrN3O5S3565.54(M+H)；實(shí)測(cè)值564.0，565.9.
b)4-[5-溴-6-(2-甲基-2-嗎啉-4-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.194mL，0.389mmol)、氯化銨(0.021g，0.389mmol)、4-[5-溴-6-(2-甲基-2-嗎啉-4-基-丙基氨基)-吡啶-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.022g，0.039mmol)、甲苯[1mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H26BrN5O3S3549.54(M+H)；實(shí)測(cè)值547.9，549.9.
實(shí)施例1584-{5-溴-6-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-{5-溴-6-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例156步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、3-氨甲基-6-三氟甲基吡啶(0.026g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。殘余物的色譜純化(25％-50％EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H15BrN3O4S3583.44(M+H)；實(shí)測(cè)值582.0，583.9.
b)4-{5-溴-6-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.463mL，0.927mmol)、氯化銨(0.049g，0.927mmol)、4-{5-溴-6-[(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.054g，0.093mmol)、甲苯[1mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H15BrF3N5O2S3567.44(M+H)；實(shí)測(cè)值566.0，567.9.
實(shí)施例1594-{5-溴-6-[2-(3H-咪唑-4-基)-乙氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-{5-溴-6-[2-(3H-咪唑-4-基)-乙氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例156步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、2-(3H-咪唑-4-基)-乙基胺(0.027g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。殘余物的色譜純化(0％-6％ MeOH/DCM)得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H17BrN4O4S3518.44(M+H)；實(shí)測(cè)值517.0，519.
b)4-{5-溴-6-[2-(3H-咪唑-4-基)-乙氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.773mL，1.546mmol)、氯化銨(0.082g，1.546mmol)、4-{5-溴-6-[2-(3H-咪唑-4-基)-乙氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.080g，0.155mmol)、甲苯[2mL]。HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H17BrN4O4S3501.45(M+H)；實(shí)測(cè)值502.2，504.2.
實(shí)施例1604-[5-溴-6-(4-氨磺酰基-芐基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-[5-溴-6-(4-氨磺酰基-芐基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例156步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、4-氨甲基-苯磺酰胺(0.033g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。殘余物的色譜純化(0％-5％ MeOH/DCM)得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18BrN3O6S4592.53(M+H)；實(shí)測(cè)值592.0，593.9.
b)4-[5-溴-6-(4-氨磺酰基-芐基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.773mL，1.546mmol)、氯化銨(0.082g，1.546mmol)、4-{5-溴-6-[2-(3H-咪唑-4-基)-乙氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.080g，0.155mmol)、甲苯[2mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H17BrN4O4S3501.45(M+H)；實(shí)測(cè)值502.2，504.2.
實(shí)施例1614-(6-芐基氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(6-芐基氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向含有攪拌桿的小瓶中加入4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.020g，0.045mmol)(實(shí)施例2步驟c)、芐胺(0.005g，0.407mmol)、MeOH[2.0mL]。將反應(yīng)容器密封，加熱至50℃達(dá)72小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的色譜純化(10％-20％EtOAc/Hx)，得到標(biāo)題化合物。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H17BrN2O4S3514.45(M+H)；實(shí)測(cè)值513.2，515.1.
b)4-(6-芐基氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.120mL，0.253mmol)、氯化銨(0.014g，0.253mmol)、4-(6-芐基氨基-5-溴-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.013g，0.0253mmol)、甲苯[2mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18BrN3O2S3497.47(M+H)；實(shí)測(cè)值497.3，499.1.
實(shí)施例1624-(5-溴-6-異丁氨基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(5-溴-6-異丙氨基-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯向含有攪拌桿的小瓶中加入4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.100g，0.226mmol)(實(shí)施例2步驟c)、異丙胺(0.012g，0.204mmol)、THF[2.0mL]。將反應(yīng)容器密封，加熱至70℃達(dá)72小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以色譜純化(0％-15％EtOAc/Hx)，得到標(biāo)題化合物。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C15H17BrN2O4S3466.41(M+H)；實(shí)測(cè)值466.9.
b)4-(5-溴-6-異丁氨基-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.620mL，1.247mmol)、氯化銨(0.067g，1.247mmol)、4-(5-溴-6-異丙氨基-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.058g，0.125mmol)、甲苯[2mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C14H17BrN4O2S3450.41(M+H)；實(shí)測(cè)值449.1，451.0.
實(shí)施例1634-{5-溴-6-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-{5-溴-6-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例162步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.100g，0.226mmol)(實(shí)施例2步驟c)、3-氨甲基吡啶(0.046g，0.430mmol)、THF[4.0mL]。殘余物的色譜純化(25％-50％ EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H16BrN3O4S3515.44(M+H)；實(shí)測(cè)值514.1，516.0.
b)4-{5-溴-6-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.710mL，1.439mmol)、氯化銨(0.077g，1.439mmol)、4-{5-溴-6-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.074g，0.1439mmol)、甲苯[2mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H16BrN5O2S3499.44(M+H)；實(shí)測(cè)值499.1，501.0.
實(shí)施例1644-{5-溴-6-[(吡啶-4-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將三甲基鋁[2M甲苯溶液](0.850mL，1.694mmol)緩慢加入到含有氯化銨(0.091g，1.694mmol)和攪拌桿的燒瓶中。在氬下將該溶液在90℃油浴中放置5分鐘。然后使溶液冷卻至室溫。然后將該溶液加入到4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.075g，0.1694mmol)(實(shí)施例2步驟c)的甲苯[1mL]溶液中。將反應(yīng)物在80℃下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)物加入到硅膠的DCM漿液中。使用15％ MeOH/DCM過(guò)濾漿液。粗產(chǎn)物用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H9BrClN3O2S3427.76(M+H)；實(shí)測(cè)值426.0，428.0.
b){[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯向含有攪拌桿的燒瓶中加入4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-乙硫基-噻吩-2-甲脒(0.96g，2.25mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.74g，3.39mmol)、二異丙胺(1.16g，9.03mmol)、DMF(60.0mL)。將溶液在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以色譜純化(10％-15％EtOAc/Hx)?；衔锖袣埩舻亩妓岫宥□?。將化合物溶于己烷，加熱至40℃達(dá)1小時(shí)。過(guò)濾溶液，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C11H9BrClN3O2S3527.76(M+H)；實(shí)測(cè)值426.0，428.0.
c)[(4-{5-溴-6-[(吡啶-4-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯向含有攪拌桿的容器中加入{[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.035g，0.066mmol)、4-氨甲基吡啶(0.015g，0.133mmol)、THF[3mL]。將反應(yīng)容器密封，加熱至70℃達(dá)18小時(shí)，冷卻至室溫，在真空中濃縮。將粗殘余物溶于氯仿/三氟乙酸(1/1)溶液(2mL)，在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％ TFA)]，得到標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H16BrN5O2S3499.44(M+H)；實(shí)測(cè)值498.0，500.0.
實(shí)施例1654-{5-溴-6-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-{5-溴-6-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例164步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用{[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.035g，0.066mmol)(實(shí)施例164步驟b)、2-氨甲基吡啶(0.014g，0.133mmol)、THF[3mL]，繼之以氯仿/TFA(1∶1)，得到標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H16BrN5O2S3499.44(M+H)；實(shí)測(cè)值499.1，501.0.
實(shí)施例1664-{6-[(4-氨基-嘧啶-5-基甲基)-氨基]-5-溴-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例164步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用{[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.035g，0.067mmol)、4-氨基-5-氨甲基-2-甲基嘧啶(0.018g，0.135mmol)、THF[2mL]，繼之以DCM/TFA(1∶1)和反相HPLC，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H19BrN6O2S3528.48(M+H)；實(shí)測(cè)值528.0，529.9.
實(shí)施例1674-[5-溴-6-(3-羥基-2，2-二甲基-丙基氨基)-吡啶-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例164步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用{[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.035g，0.066mmol)、3-氨基-2，2-二甲基丙醇(0.013g，0.133mmol)、THF[2mL]，繼之以DCM/TFA(1∶1)和反相HPLC，得到標(biāo)題化合物。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H22BrN3O3S3493.48(M+H)；實(shí)測(cè)值493.1，495.0.
實(shí)施例1684-{5-溴-6-[(3-甲基-噻吩-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 向含有攪拌桿的容器中加入{[4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.035g，0.066mmol)、3-甲基噻吩-2-甲基胺(0.016g，0.133mmol)、THF[2mL]。將反應(yīng)容器密封，加熱至70℃達(dá)18小時(shí)，冷卻至室溫，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物的色譜純化(10％-25％ EtOAC/Hx)得到中間體，將其溶于氯仿/三氟乙酸(1/1)溶液(2mL)，在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％ TFA)]，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H18BrN3O2S4517.52(M+H)；實(shí)測(cè)值516.9，518.9.
實(shí)施例1694-{5-溴-6-[(四氫-呋喃-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-{5-溴-6-[(四氫-呋喃-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例156步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-(5-溴-6-氯-吡啶-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.050g，0.113mmol)(實(shí)施例2步驟c)、c-(四氫-呋喃-2-基)-甲基胺(0.015g，0.146mmol)、二異丙基乙胺(0.073g，0.565mmol)、THF
、DMF
。殘余物的色譜純化(10％-35％ EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H19BrN2O5S4508.45(M+H)；實(shí)測(cè)值507.1，509.0b)4-{5-溴-6-[(四氫-呋喃-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例156步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用三甲基鋁[2M甲苯溶液]，(0.443mL，0.867mmol)、氯化銨(0.046g，0.867mmol)、4-{5-溴-6-[(四氫-呋喃-2-基甲基)-氨基]-吡啶-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.044g，0.087mmol)、甲苯[ImL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C16H19BrN4O3S3492.45(M+H)；實(shí)測(cè)值491.1，493.0.
實(shí)施例1704-{4′-[N′-(4-甲磺?；?丁基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)2-甲基-1-(4-甲磺酰基-丁基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲按照實(shí)施例171步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用4-甲磺酰基-丁基胺(0.058g，0.378mmol)、2-甲基-1-(3-甲磺酰基-丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.100g，0.344mmol)、三苯膦(0.098g，0.378mmol)、THF[6mL]。向其中加入偶氮二羧酸二異丙酯(0.076g，0.378mmol)。殘余物的色譜純化(50％EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物。
b)[亞氨基-(4-{4′-[N′-(4-甲磺?；?丁基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例171步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.025g，0.480mmol)(實(shí)施例120步驟b)、2-甲基-1-(4-甲磺?；?丁基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.101g，0.240mmol)、MeOH[2mL]、乙酸(0.029g，0.480mmol)。色譜純化(10％-20％EtOAc/Hx)。將化合物溶于三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)[4mL]。在真空中除去溶劑，繼之以反相HPLC純化，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H31N5O4S4594.81(M+H)；實(shí)測(cè)值594.1.
實(shí)施例171
4-{4′-[N′-(3-甲磺酰基-丙基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)3-甲磺?；?丙-1-醇將3-溴-丙-1-醇溶于EtOH[2mL]，將甲亞磺酸溶于H2O[2mL]。將這兩種溶液加入在一起，加熱至50℃達(dá)18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，用EtOAc萃取，用硫酸鈉干燥，在真空中除去溶劑。殘余物的色譜純化(1％-7％MeOH/DCM)得到標(biāo)題化合物。1H-NMR(CDCl3)δ3.69(m，2H)，3.14(m，2H)，2.91(s，3H)，2.02(m，2H).
b)2-甲基-1-(3-甲磺?；?丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲在氬下，將3-甲磺?；?丙-1-醇(0.059g，0.362mmol)、2-甲基-1-(3-甲磺酰基-丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.123g，0.329mmol)、三苯膦(0.112g，0.362mmol)、THF[8mL]加入到含有攪拌桿的燒瓶中。向其中加入偶氮二羧酸二異丙酯(0.095g，0.362mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中除去溶劑，繼之以色譜純化(0％-25％ EtOAc/Hx)，得到標(biāo)題化合物(0.089g)。1H-NMR(CDCl3)δ3.75(t，2H，J＝6.7Hz)，3.14(m，2H)，2.94(s，3H)，2.42(s，3H)，2.20(m，2H)，1.52(s，9H)，1.50(s，9H).
c)[亞氨基-(4-{4′-[N′-(3-甲磺酰基-丙基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將2-甲基-1-(3-甲磺?；?丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.089g，0.217mmol)、{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.022g，0.043mmol)(實(shí)施例120步驟b)、MeOH[2mL]加入到含有攪拌桿的燒瓶中。向其中加入乙酸(0.026g，0.434mmol)，將溶液加熱至40℃達(dá)18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)色譜純化(10％-20％ EtOAc/DCM)，得到標(biāo)題化合物(0.026g，68％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C39H53N5O10S4881.13(M+H)；實(shí)測(cè)值879.8，880.8.
d)4-{4′-[N′-(3-甲磺酰基-丙基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將[亞氨基-(4-{4′-[N′-(3-甲磺?；?丙基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.026g，0.029mmol)溶于三氟乙酸∶二氯甲烷的1∶1溶液[1.5mL∶1.5mL]。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.017g)。.ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H29N5O4S4580.78(M+H)；實(shí)測(cè)值580.1.
實(shí)施例1724-{4′-[N′-(6-甲磺酰基-己基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)6-甲磺?；?己-1-醇按照實(shí)施例171步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用6-溴-己-1-醇(0.300g，1.660mmol)、甲亞磺酸(0.844g，8.280mmol)、EtOH[2mL]、H2O[2mL]。殘余物的色譜純化(1％-5％MeOH/DCM)得到標(biāo)題化合物(0.141g 48％)。
1H-NMR(CDCl3)δ 3.67(t，2H，J＝6.2Hz)，3.03(t，2H，J＝8.0Hz)，2.92(s，3H)，1.89(m，2H)，1.60(m，2H)，1.46(m，4H).
b)2-甲基-1-(6-甲磺?；?己基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲按照實(shí)施例171步驟b的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用6-甲磺?；?己-1-醇(0.141g，0.782mmol)、2-甲基-1-(3-甲磺酰基-丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.206g，0.711mmol)、三苯膦(0.205g，0.782mmol)、THF[5mL]。向其中加入偶氮二羧酸二異丙酯(0.158g，0.782mmol)。殘余物的色譜純化(0％-100％EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物(0.213g，66％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H36N2O6S2453.63(M+H)；實(shí)測(cè)值253.1.
c)[亞氨基-(4-{4′-[N′-(6-甲磺?；?己基)-N ′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例171步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用2-甲基-1-(6-甲磺?；?己基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.213g，0.471mmol)、{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.081g，0.157mmol)(實(shí)施例120步驟b)、MeOH[4mL]、乙酸(0.094g，1.570mmol)。色譜純化(0％-20％EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物(0.086g，60％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C42H59N5O10S4923.21(M+H)；實(shí)測(cè)值921.8.
d)4-{4′-[N′-(6-甲磺?；?己基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例171步驟d的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用亞氨基-(4-{4′-[N′-(6-甲磺?；?己基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.086g，0.093mmol)、三氟乙酸[2mL]、DCM[2mL]。反相HPLC得到標(biāo)題化合物(0.021g，38％)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H35N5O4S4622.86(M+H)；實(shí)測(cè)值622.2.
實(shí)施例1734-{4′-[N′-(5-甲磺?；?戊基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)1-氯-5-甲磺?；?戊烷按照實(shí)施例171步驟a的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用1-溴-5-氯-戊烷(0.400g，2.150mmol)、甲亞磺酸(1.090g，10.75mmol)、EtOH[3mL]、H2O[3mL]。殘余物的色譜純化(0％-25％MeOH/DCM)得到標(biāo)題化合物(0.213g，53％)。1H-NMR(CDCl3)δ3.55(t，2H，J＝6.3Hz)，3.03(t，2H，J＝8.0Hz)，2.91(s，3H)，1.85(m，4H)，1.63(m，2H)b)2-甲基-1-(5-甲磺酰基-戊基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲將1-氯-5-甲磺?；?戊烷(0.021g，1.153mmol)、碘化鈉(0.086g，5.765mmol)、丙酮[5mL]加熱至50℃達(dá)1小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，用EtOAc萃取，在真空中濃縮。然后將該固體溶于DMF[1mL]，在0℃下加入到氫化鈉(0.020g，0.865mmol)與2-甲基-1-(3-甲磺?；?丙基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.016g，0.576mmol)的DMF[3mL]溶液中。向其中加入碘化鈉(0.864g，5.765mmol)，將反應(yīng)物在50℃下加熱18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，過(guò)濾，得到標(biāo)題化合物(0.124g，49％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H34N2O6S4439.60(M+H)；實(shí)測(cè)值239.2.
c)[亞氨基-(4-{4′-[N′-(6-甲磺?；?己基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例171步驟c的工藝進(jìn)行反應(yīng)，使用2-甲基-1-(5-甲磺?；?戊基)-1，3-雙(氨基甲酸-叔丁基酯)-異硫脲(0.124g，0.283mmol)、{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.048g，0.094mmol)(實(shí)施例120步驟b)、MeOH[4mL]、乙酸(0.057g，0.942mmol)。色譜純化(5％-40％EtOAc/Hx)得到標(biāo)題化合物(0.049g，18％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C41H57N5O10S4909.18(M+H)；實(shí)測(cè)值907.8，908.9.
d)4-{4′-[N′-(5-甲磺酰基-戊基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將[亞氨基-(4-{4′-[N′-(6-甲磺酰基-己基)-N′，N″-(氨基甲酸叔丁基酯)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.049g，0.054mmol)溶于三氟乙酸∶二氯甲烷的1∶1溶液[3mL∶3mL]。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％ TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.030g，92％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H33N5O4S4608.84(M+H)；實(shí)測(cè)值608.2.
實(shí)施例174(5-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基}-戊基)-膦酸三氟乙酸鹽
a)[5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊基]-膦酸二乙基酯將溴鄰苯二酰胺(0.400g，1.351mmol)和亞磷酸三甲酯(0.900mL，5.250mmol)一起加入在含有攪拌桿的燒瓶中。將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，繼之以色譜純化(50％-100％EtOAc/Hx)，得到標(biāo)題化合物(0.300g，62％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H24NO5P354.35(M+H)；實(shí)測(cè)值354.1.
b)(5-氨基-戊基)-膦酸二乙基酯將[5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊基]-膦酸二乙基酯(0.300g，0.849mmol)溶于THF[2mL]、IPA[4mL]。向該溶液加入肼(0.081g，2.540mmol)，在室溫下攪拌18小時(shí)。將白色沉淀過(guò)濾，用二氯甲烷洗滌。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物(0.136g，72％)。
1H-NMR(CDCl3)δ4.07(m，4H)，2.68(t，2H，J＝6.74Hz)，1.72(m，2H)，1.60(m，2H)，1.43(m，4H)，1.31(m，6H).
c)[5-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-戊基]-膦酸將{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.100g，0.204mmol)(實(shí)施例25步驟c)、氯甲酸4-硝基苯基酯(0.041g，0.204mmol)、吡啶(0.018g，0.224mmol)、DCM[3mL]加入到含有攪拌桿的燒瓶中。將該溶液在室溫下攪拌2.5小時(shí)。向該溶液加入(5-氨基-戊基)-膦酸二乙基酯(0.136g，0.611mmol)和三乙胺(0.062g，0.611mmol)。將溶液在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以色譜純化(50％-100％EtOAc/Hx)，得到標(biāo)題化合物(0.138g，88％)。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C34H47N4O8PS3767.93(M+H)；實(shí)測(cè)值667.1.
d)(5-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基}-戊基)-膦酸將[5-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-戊基]-膦酸(0.058g，0.076mmol)、三甲代甲硅烷基碘(0.162g，0.756mmol)和DCM[5mL]加入到燒瓶中，加熱至40℃達(dá)10分鐘。從加熱浴中移去反應(yīng)物，在室溫下攪拌1小時(shí)。向該溶液加入H2O[56μL]，攪拌1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物。向濃縮產(chǎn)物加入MeOH[2mL]和20wt％HCl(aq.)[84μL]，在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H31N4O6PS3611.71(M+H)；實(shí)測(cè)值611.0.
實(shí)施例175N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺酰基-丁酰胺鹽酸鹽 a)(亞氨基-{4-[6′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.500g，2.020mmol)、(實(shí)施例25步驟c)、三乙胺(0.153g，3.030mmol)和DCM[30mL]加入到含有攪拌桿的燒瓶中。緩慢加入4-甲磺酰基-丁酰氯(0.013g，0.611mmol)，同時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以色譜純化(50％-80％EtOAc/Hx)。將產(chǎn)物溶于三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)溶液[4mL]。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，繼之以反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.138g，88％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O5S4566.75；實(shí)測(cè)值566.1.
實(shí)施例176{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨基]-甲基}-膦酸 a)({3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨基}-甲基)-膦酸二乙基酯向按照實(shí)施例120步驟b工藝制備的{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，58.0μmol)、碳酸銫(19mg，58μmol)與N，N-二甲基乙酰胺(0.4mL)的混合物加入三氟甲磺酸二乙氧基-磷酰甲基酯(18mg，58μmol)(Xu，Y.et al，J.Org.Chem.61，7697(1996)；Phillion，D. et al，Tetrahedron Lett.27，1477(1986))，在50℃下加熱48小時(shí)。加入另外的三氟甲磺酸二乙氧基-磷酰甲基酯(18mg，58μmol)。將混合物在50℃下加熱另外24小時(shí)。蒸發(fā)溶劑。使所得混合物在DCM與H2O之間分配。分離水層，用DCM萃取。合并全部DCM層，用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用EtOAc/DCM(20和30％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(38mg，98％收率)，為橙色的油。
1H NMR(CDCl3)δ8.23(s，1H)，7.92-7.88(m，2H)，7.53-7.46(m，2H)，6.98(d，1H，J＝8.0Hz)，6.56-6.53(m，2H)，4.23-4.15(m，4H)，3.56(d，2H，J＝12.5Hz)，2.43(S，3H)，2.16(S，3H)，1.52(S，9H)，1.35(t，6H，J＝7.0Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H39N3O7PS3668.2(M+H)；實(shí)測(cè)值667.8.
b){[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨基]-甲基}-膦酸在0℃下，向({3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨基}-甲基)膦酸二乙基酯(38mg，0.057mmol)的DCM(1.2mL)溶液歷經(jīng)3分鐘加入碘代三甲基甲硅烷(25μL)。在0℃下1小時(shí)后，加入H2O。將混合物攪拌30分鐘，然后濃縮得到褐色固體。將該固體溶于MeOH(1.32mL)，加入20％HCl，在環(huán)境溫度下攪拌3小時(shí)。將混合物濃縮，得到褐色固體。向該固體加入TFA/DCM(1∶1，3mL)，在環(huán)境溫度下攪拌40分鐘。然后將反應(yīng)混合物濃縮，經(jīng)過(guò)HPLC純化(C18柱，10-70％ CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物(11mg，38％收率)，為白色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H23N3O5PS3512.1(M+H)；實(shí)測(cè)值512.1.
實(shí)施例1775-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-三氟甲磺酰氨基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[5-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-三氟甲磺酰氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在冰-H2O浴中，向按照實(shí)施例120步驟b工藝制備的{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(34mg，66μmol)與DIEA(28μL，0.16mmol)的DCM(1.0mL)溶液加入三氟甲磺酸酐(12μL，72μmol)，同時(shí)攪拌。冰浴耗盡后，繼續(xù)將混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)，然后倒入飽和NaHCO3中，用EtOAc萃取(2x)。合并萃取液，用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用EtOAc/己烷(20至40％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(9mg，21％收率)，為油。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H27F3N3O6S4650.1(M+H)；實(shí)測(cè)值649.6.
b)5-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-三氟甲磺酰氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-三氟甲磺酰氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(9mg，14μmol)在TFA/DCM(1∶1，3mL)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌40分鐘。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用MeOH/DCM(5至8％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(5mg，54％收率)，為淡黃色固體。
1H NMR(CDCl3)δ8.32(s，1H)，8.04-8.01(m，1H)，7.96-7.95(m，1H)，7.68-7.66(m，2H)，7.17(m，3H)，2.72(s，3H)，2.21(s，3H)，ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H19F3N3O4S4550.0(M+H)；實(shí)測(cè)值550.0.
實(shí)施例1783-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-丙酸 a)3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-丙酸乙基酯向NaH(2.7mg，68μmol，60％油分散體)的DMF(0.1mL)懸液加入按照實(shí)施例213步驟b工藝制備的{[4-(2′-羥甲基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，56.4μmol)的DMF(0.1mL)溶液。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，然后放置在冰-水浴中。20分鐘后，一次性加入3-溴丙酸乙酯(8.6μL，67.0μmol)的DMF(0.05mL)溶液。移去冰-水浴，將混合物攪拌16小時(shí)。加入H2O，用EtOAc萃取混合物(3x)。合并萃取液，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠快速色譜純化，用EtOAc/DCM(15％)、繼之以EtOAc/己烷(40％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(9mg，25％收率)，為油。
1H NMR(CDCl3)δ7.99(d，1H，J＝7.7Hz)，7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，7.60-7.56(m，1H)，7.44(d，1H，J＝7.6Hz)，7.38(d，1H，J＝7.4Hz)，7.34-7.30(m，1H)，7.23(d，1H，J＝7.3Hz)，4.27-4.09(m，4H)，3.78(bs，2H)，2.67(t，2H，J＝5.9Hz)，2.57(s，3H)，2.02(s，3H)，1.47(s，9H)，1.28(t，3H，J＝7.1Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H37N2O7S3633.2(M+H)；實(shí)測(cè)值632.9.
b)3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-丙酸向3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-丙酸乙基酯(7.0mg，11μmol)的THF(0.5mL)與MeOH(0.25mL)溶液加入氫氧化鋰一水化物(0.56mg，13μmol)的H2O(50mL)溶液。將混合物在80℃下用微波處理150秒，用0.25N HCl酸化至～pH 3，用EtOAc/DCM萃取(1∶1，3x)。合并萃取液，用H2O洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用MeOH/DCM(2至4％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(5.1mg，76％收率)，為白色固體。
1H NMR(CDCl3)δ8.03-8.00(m，1H)，7.88-7.87(m，1H)，7.70(bs，1H)，7.57(t，1H，J＝7.7Hz)，7.43-7.40(m，1H)，7.36-7.28(m，2H)，7.23(d，1H，J＝6.9Hz)，4.28-4.15(m，2H)，3.65-3.75(m，2H)，2.65(t， 2H，J＝6.0Hz)，2.58(s，3H)，2.01(s，3H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H33N2O7S3605.1(M+H)；實(shí)測(cè)值604.8.
c)3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-丙酸將3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-丙酸(5.1mg，8.4μmol)在TFA/DCM(1∶1，1.5mL)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠快速色譜純化，用MeOH/DCM(5至12％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(3.0mg，69％收率)，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.18(s，1H)，8.03-8.00(m，1H)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68(t，1H，J＝7.8Hz)，7.54-7.52(m，1H)，7.41(d，1H，J＝7.6Hz)，7.33(t，1H，J＝7.6Hz)，7.24(d，1H，J＝7.4Hz)，4.23-4.16(m，2H)，3.64(t，2H，J＝6.1Hz)，2.69(s，3H)，2.54(t，2H，J＝6.0Hz)，1.99(s，3H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H24N2O5S3505.1(M+H)；實(shí)測(cè)值505.1.
實(shí)施例1795-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊腈向5-溴戊腈(5.12g，30.0mmol)的DMF(40mL)溶液加入鄰苯二酰亞氨基鉀(6.00g，32.4mmol)。將上述懸液在60℃下加熱16小時(shí)，濃縮，在H2O與DCM之間分配。分離DCM層，用H2O(3x)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，得到標(biāo)題化合物(6.84g，定量收率)，為白色固體。
1H NMR(CDCl3)δ7.87-7.80(m，2H)，7.76-7.70(m，2H)，3.73(t，2H，J＝6.1Hz)，2.43(t，2H，J＝7.1Hz)，1.89-1.82(m，2H)，1.74-1.67(m，2H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H13N2O2229.1(M+H)；實(shí)測(cè)值229.1.
b)2-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-異吲哚-1，3-二酮向5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊腈(6.84g，30mmol)與疊氮三甲基甲硅烷(14mL，108mmol)的甲苯(40mL)溶液加入二丁基氧化錫(2.1g，6.0mmol)。將混合物在100℃下加熱48小時(shí)，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用EtOAc/DCM(30和60％)、繼之以甲醇/DCM(2.5和5％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(6.72g，83％收率)，為白色固體。
1H NMR(DMSO)δ7.86-7.80(m，4H)，3.59(t，2H，J＝6.8Hz)，2.90(t，2H，J＝7.1Hz)，1.74-1.58(m，4H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H14N5O2272.1(M+H)；實(shí)測(cè)值272.0.
c)2-[4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基]-異吲哚-1，3-二酮向2-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-異吲哚-1，3-二酮(4.07g，15.0mmol)與二異丙基乙胺(7.8mL，45.0mmol)的DCM(60mL)溶液加入三苯甲基氯(5.86g，21.0mmol)。將溶液在環(huán)境溫度下攪拌14小時(shí)，濃縮。使所得殘余物在EtOAc/DCM(3∶1)與H2O之間分配。分離有機(jī)層，用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠快速色譜純化，用DCM/己烷(40，80和100％)、繼之以EtOAc/DCM(1和2％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(5.08g，66％收率)，為淡黃色固體。
1H NMR(CDCl3)δ7.87-7.82(m，2H)，7.74-7.70(m，2H)，7.36-7.31(m，9H)，7.12-7.09(m，6H)，3.71(t，2H，J＝7.1Hz)，2.99(t，2H，J＝7.2Hz)，1.89-1.71(m，4H).
d)4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基胺向2-[4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基]-異吲哚-1，3-二酮(175mg，0.313mmol)的2-丙醇/THF(2∶1，3.0mL)溶液加入肼(30mL，0.939mmol)。將溶液在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。濾出白色固體，用DCM洗滌(5x)。合并濾液和洗液，濃縮，溶于DCM，用H2O(2x)和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，得到標(biāo)題化合物(131mg，97％收率)，為淡黃色油。
1H NMR(CDCl3)δ7.36-7.28(m，9H)，7.12-7.09(m，6H)，2.93(t，2H，J＝7.6Hz)，2.69(t，2H，J＝7.0Hz)，1.84-1.77(m，2H)，1.52-1.45(m，2H).
e){亞氨基-[5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯向按照實(shí)施例25步驟c工藝制備的{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(60mg，0.116mmol)與吡啶(10mg，0.128mmol)的DCM(1.1mL)溶液加入氯甲酸4-硝基苯基酯(23mg，0.116mmol)，在環(huán)境溫度下攪拌4小時(shí)。向上述混合物加入4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基胺(65mg，0.151mmol)的DCM(0.65mL)溶液，攪拌48小時(shí)。將混合物濃縮，在制備型TLC平板(1000μm)上純化，用EtOAc/DCM(5和20％)展開(kāi)，得到標(biāo)題化合物(15mg，14％收率)，為黃色固體。
1H NMR(CDCl3)δ7.95(d，1H，J＝7.93Hz)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.74(s，1H)，7.56(t，1H，J＝7.7Hz)，7.44-7.42(m，1H)，7.35-7.28(m，13H)，7.23-7.19(m，1H)，7.11-7.08(m，7H)，4.94(t，1H，J＝5.5Hz)，3.26-3.16(m，2H)，2.91(t，2H，J＝7.3Hz)，2.62(s，3H)，2.10(s，3H)，1.80-1.72(m，2H)，1.56-1.44(m，1H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C49H51N8O5S3927.3(M+H)；實(shí)測(cè)值926.8.
f)5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[4-(2-三苯甲基-2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(15mg，16μmol)的TFA/DCM(1∶1，2.0mL)溶液在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用MeOH/DCM(3至7.5％，含有0.1％TFA)洗脫，得到標(biāo)題化合物(5mg，45％收率)，為白色固體。
1H NMR(CDCl3)δ8.29(s，1H)，8.02-8.00(m，1H)，7.88(t，1H，J＝1.7Hz)，7.67(t，1H，J＝7.7Hz)，7.56-7.53(m，1H)，7.42(d，1H，J＝7.8Hz)，7.28(t，1H，J＝7.7Hz)，7.12(d，1H，J＝7.5Hz)，3.05(t，2H，J＝6.4Hz)，2.92(t，2H，J＝7.5Hz)，2.70(s，3H)，2.92(s，3H)，1.73-1.65(m，2H)，1.44-1.36(m，2H)ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H29N8O5S3585.1(M+H)；實(shí)測(cè)值585.0.
實(shí)施例1805-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[5-(2H-四唑-5-基)-戊基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
按照實(shí)施例179的工藝，從6-溴己腈制備標(biāo)題化合物。
1H NMP(CD3OD)δ 8.30(s，1H)，8.05-8.02(m，1H)，7.89(t，1H，J＝1.6Hz)，7.69(t，1H，J＝7.8Hz)，7.56-7.54(m，1H)，7.42(d，1H，J＝7.8Hz)，7.28(t，1H，J＝7.8Hz)，7.11(d，1H，J＝7.5Hz)，3.00(t，2H，J＝6.5Hz)，2.93(t，2H，J＝7.5Hz)，2.70(s，3H)，1.99(s，3H)，1.78-1.71(m，2H)，1.42-1.34(m，2H)，1.30-1.25(m，2H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H31N8O3S3599.2(M+H)；實(shí)測(cè)值599.0.
實(shí)施例1815-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺酰基)-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將按照實(shí)施例179步驟e工藝從{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯和3-氨基丙腈制備的[(4-{2′-[3-(2-氰基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(31mg，51μmol)、疊氮三甲基甲硅烷(40μL，0.30mmol)、二丁基氧化錫(3.5mg，10μmol)與甲苯(1.5mL)的混合物在70℃下加熱16小時(shí)，在80℃下加熱4小時(shí)。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠快速色譜純化，用EtOAc/DCM(50，100％)、繼之以MeOH/DCM(5，10％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(14mg，42％收率)，為無(wú)色的油。
1H NMR(CDCl3)δ8.00(s，1H)，7.75-7.71(m，2H)，7.34-7.29(m，3H)，7.21(t，1H，J＝7.8Hz)，7.10-1.01(m，2H)，6.58(bs，1H)，6.00(bs，1H)，3.60(bs，2H)，3.04(bs，2H)，2.52(s，3H)，1.93(s，3H)，1.49(s，9H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H33N8O5S3657.2(M+H)；實(shí)測(cè)值656.8.
b)5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{亞氨基-[5-甲硫基-4-(6′-甲基-2′-{3-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(10mg，15.3μmol)的TFA/DCM(2.0mL，1∶1)溶液在環(huán)境溫度下攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮至干，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用含有0.1％TFA的10％MeOH/DCM洗脫，得到標(biāo)題化合物(4.7mg，46％收率)，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.29(s，1H)，8.03-8.01(m，1H)，7.86(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68(t，1H，J＝7.8Hz)，7.52-7.50(m，1H)，7.42(d，1H，J＝7.9Hz)，7.28(t，1H，J＝7.7Hz)，7.12(d，1H，J＝7.5Hz)，3.48-3.41(m，2H)，3.00(t，2H，J＝6.7Hz)，2.70(s，3H)，1.99(s，3H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H25N8O3S3557.1(M+H)；實(shí)測(cè)值557.0.
實(shí)施例1825-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-{3-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基}-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
按照實(shí)施例179的工藝，從利用實(shí)施例120步驟b工藝制備的{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯合成標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.00-7.95(m，2H)，7.66-7.65(m，2H)，7.31-7.27(m，2H)，7.10(d，1H，J＝8.3Hz)，3.26(t，2H，J＝6.8Hz)，3.00(t，2H，J＝7.5Hz)，2.72(s，3H)，2.20(s，3H)，1.90-1.82(m，2H)，1.64-1.57(m，2H)ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H29N8O5S3585.1(M+H)；實(shí)測(cè)值585.0.
實(shí)施例1834-[4′-(N′-乙?；?胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)1-乙?；?1，3-雙-叔丁氧羰基亞氨基-2-甲基-異硫脲向1，3-雙-叔丁氧羰基亞氨基-2-甲基-異硫脲(2.33g，8.0mmol)的二氯甲烷(DCM)(8.0mL)溶液加入二異丙基乙胺(DIEA)(2.79mL，16.0mmol)和乙酰氯(0.60mL，8.4mmol)，在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。加入另外的DIEA(2.79mL，16.0mmol)和乙酰氯(0.60mL，8.4mmol)。1小時(shí)后，將混合物濃縮至干，在二氯甲烷與飽和NaHCO3之間分配。分離有機(jī)層，用H2O和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用DCM/己烷(40％，100％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(2.60g，97％收率)，為黃色的油。
1H NMR(CDCl3)δ2.48(s，3H)，2.46(s，3H)，1.52(s，9H)，1.47(s，9H).
b)4-[4′-(N′-乙?；?胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽向利用實(shí)施例120步驟b工藝從{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯合成的{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(60mg，0.116mmol)與1-乙?；?1，3-雙-叔丁氧羰基亞氨基-2-甲基-異硫脲(193mg，0.58mmol)的甲醇(4.0mL)溶液加入乙酸(66μL，1.16mmol)，在40℃下加熱16小時(shí)。加入三乙胺(0.25mL)。將混合物濃縮至干，繼之以硅膠柱快速色譜純化，用乙酸乙酯/DCM(5，10，15％)洗脫，得到胍化產(chǎn)物(60mg)，為黃色固體。將該固體用三氟乙酸/DCM(6mL，1∶1)在環(huán)境溫度下處理1小時(shí)，濃縮至干。所得殘余物經(jīng)由HPLC純化(C18-柱，20-65％CH3CN，25min)，得到標(biāo)題化合物(33mg，49％收率)，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.02-7.98(m，1H)，7.96(s，1H)，7.67-7.66(m，2H)，7.50-7.48(m，2H)，7.15(d，1H，J＝8.0Hz)，2.72(s，3H)，2.22(s，3H)，2.14(s，3H).
實(shí)施例1844-{4′-胍基-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)[(4-{4′-氨基-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯向利用實(shí)施例179步驟e工藝從4-甲磺酰基-丁基胺(實(shí)施例202步驟c)和[2-氨基-3′-(5-氨甲?；?2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(實(shí)施例294步驟c)制備的{3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-[3-(4-甲磺酰基-丁基)-脲基]-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(148mg，0.173mmol)的THF(5.0mL)溶液歷經(jīng)5分鐘加入四丁基氟化銨的THF溶液(0.87mL，0.87mmol，1.0M)。然后將混合物在50℃下加熱30分鐘，濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用EtOAc、繼之以甲醇/DCM(2.5，5％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(100mg，82％收率)，為黃色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.16(s，1H)，7.98-7.95(m，1H)，7.85(t，1H，J＝1.6Hz)，7.64(t，1H，J＝7.8Hz)，7.50-7.48(m，1H)，6.82(d，1H，J＝2.2Hz)，6.49-6.48(m，1H)，3.11-3.02(m，4H)，2.94(s，3H)，2.65(s，3H)，1.90(s，3H)，1.73-1.67(m，2H)，1.51-1.46(m，1H).
b)[(4-{4′-(N′， N″-二-叔丁氧羰基-胍基)-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯向[(4-{4′-氨基-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.141mmol)、1，3-雙-叔丁氧羰基亞氨基-2-甲基-異硫脲(205mg，0.705mmol)與甲醇(5.0mL)的混合物加入乙酸(0.081mL，1.41mmol)，在40℃下加熱16小時(shí)。加入三乙胺(0.3mL)。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)硅膠柱快速色譜純化，用EtOAc/DCM(0至40％)洗脫，得到標(biāo)題化合物(110mg，82％收率)，為灰白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.19(s，1H)，8.04-8.02(m，1H)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.9Hz)，7.63(bs，1H)，7.51-7.54(m，1H)，7.35(bs，1H)，3.11-3.04(m，4H)，2.93(s，3H)，2.64(s，3H)，1.98(s，3H)，1.76-1.68(m，2H)，1.58(bs，9H)，1.54-1.46(m，20H).
c)4-{4′-胍基-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽向裝有[(4-{4′-(N′，N″-二-叔丁氧羰基-胍基)-2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(110mg，0.116mmol)的燒瓶中加入三氟乙酸的DCM溶液(3.0mL，50％)，在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮，經(jīng)過(guò)HPLC純化(C18-柱，含5-50％CH3CN的H2O，15min)，得到標(biāo)題化合物(63mg，62％收率)，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.08-8.05(m，1H)，7.91(t，1H，J＝1.7Hz)，7.76(t，1H，J＝7.9Hz)，7.57-7.52(m，2H)，7.00(d，1H，J＝1.7Hz)，3.13-3.10(m，4H)，2.95(s，3H)，2.71(s，3H)，2.00(s，3H)，1.78-1.71(m，2H)，1.57-1.50(m，2H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H34N7O5S4652.1(M+H)；實(shí)測(cè)值652.1.
實(shí)施例185-1864-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽a)5-甲硫基-4-亞磺基-噻吩-2-羧酸甲基酯的鈉鹽4，6-二氯-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]4-(7-氯-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4，6-二氯-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]((按照文獻(xiàn)方法制備Hazelton，C.J.et al.，Tetrahedron，515597(1995))0.200g，0.729mmol)的絕對(duì)乙醇(5mL)溶液用5-甲硫基-4-亞磺基-噻吩-2-羧酸甲基酯鈉鹽((實(shí)施例38步驟b)0.200g，0.729mmol)的水∶乙醇(2∶1，3.3mL)溶液處理。加入乙酸，將反應(yīng)物在室溫下攪拌21.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒在冰水上，在真空中除去乙醇。所得水性混合物用CH2Cl2萃取(4×25mL)。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到產(chǎn)物4-(7-氯-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.307g，89％)，為褐色的油。
1H NMR(CDCl3)δ8.051(d，1H，J＝1.2Hz)，8.038(s，1H)，7.381(d，1H，J＝1.2Hz)，3.908(s，3H)，2.662(s，3H)，1.964(m，10H).
b)4-(3，4-二氨基-5-氯-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(7-氯-螺[苯并咪唑-2，1′-環(huán)己烷]-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(來(lái)自上步a，0.307g，0.652mmol)的乙醇∶水(1∶1，6.4mL)溶液用Na2S2O4處理，加熱至80℃達(dá)1.5小時(shí)。將混合物冷卻，倒在冰水上，用CH2Cl2萃取(4×25mL)。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到產(chǎn)物4-(3，4-二氨基-5-氯-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.224g，87％)，為褐色的油。由于游離二胺的不穩(wěn)定性，加入甲酸(4.5mL)，將所得溶液冷藏貯存過(guò)夜。
c)4-(7-氯-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將得自上面的冷藏的4-(3，4-二氨基-5-氯-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((來(lái)自上步b)0.224g，0.570mmol)的甲酸溶液(4.5mL)緩慢溫?zé)嶂潦覝兀缓蠹訜嶂粱亓?110℃)達(dá)3小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，倒在冰上。小心地分批加入固體NaHCO3，同時(shí)攪拌，調(diào)節(jié)pH至pH 8。用EtOAc萃取水溶液(2×150mL)。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在真空中除去溶劑，得到產(chǎn)物4-(7-氯-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.201g，87％)，為褐色泡沫狀固體。粗產(chǎn)物直接用于下一反應(yīng)。
d)4-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將4-(7-氯-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((來(lái)自上步c)0.201g，0.499mmol)的DMF(4mL)溶液用α-溴-2，6-二氟甲苯(0.114g，0.549mmol)和固體K2CO3(0.152g，1.10mmol)處理。將反應(yīng)物在室溫下攪拌17小時(shí)，用EtOAc稀釋?zhuān)盟浞窒礈?5×150mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(2％MeOH與2M NH3的CH2Cl2溶液)，得到產(chǎn)物4-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(0.102g，38％)。這些異構(gòu)體不能用硅膠色譜分離，但將它們一起進(jìn)行下一反應(yīng)。
e)4-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將4-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯與4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((來(lái)自上步d)0.101g，0.191mmol)的無(wú)水甲苯(5mL)溶液用預(yù)生成的二甲基鋁酰胺處理，加熱至100℃達(dá)2.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，分批加入到二氧化硅的CH2Cl2懸液中。將懸液攪拌20分鐘，然后通過(guò)微細(xì)孔隙率玻璃漏斗過(guò)濾。用含10％MeOH的CH2Cl2(1000mL)清洗二氧化硅，在真空中濃縮濾液。制備型HPLC純化(含10-55％乙腈的1％TFA/水，30min)得到產(chǎn)物4-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.006g，6％)和4-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.007g，7％)，為白色固體。
實(shí)施例1854-[7-氯-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
1H NMR(MeOD)δ8.479(s，1H)，8.348(d，1H，J＝1.6Hz)，8.341(s，1H)，7.931(d，1H，J＝1.6Hz)，7.460(m，1H)，7.049(t，2H，J＝8.4Hz)，6.004(s，2H)，2.736(s，3H).C20H15ClF2N4O2S3513.00(M+1)實(shí)測(cè)值513.10.
實(shí)施例1864-[7-氯-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽1H NMR(MeOD)δ9.001(s，1H)，8.384(d，1H，J＝2.0Hz)，8.372(s，1H)，7.984(d，1H，J＝1.6Hz)，7.532(m，1H)，7.141(t，2H，J＝8.0Hz)，5.825(s，2H)，2.674(s，3H).C20H15ClF2N4O2S3513.00(M+1)實(shí)測(cè)值513.10實(shí)施例187-1884-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例38步驟e)2.19g，4.90mmol)的無(wú)水甲苯(20mL)溶液用2MAlMe3(39.0mL，78.0mmol)和NH4Cl(4.21g，78.7mmol)的無(wú)水甲苯(39mL)溶液處理，如實(shí)施例20步驟f所述。粗產(chǎn)物(2.11g，100％)直接用于下一反應(yīng)。
b)4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯將4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒((來(lái)自上步a)2.11g，4.89mmol)的無(wú)水DMF(30mL)溶液用二碳酸二叔丁酯(4.27g，19.6mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(3.40mL，19.5mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2天，在真空中除去溶劑。硅膠色譜純化(含30-50％EtOAc的己烷，以5％遞增)，得到產(chǎn)物4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯(1.30g，42％)，為褐色的油。
1H NMR(CDCl3)δ8.675(m，1H)，8.62(s，1H)，8.16(d，1H，J＝1.6Hz)，7.89(s，1H)，2.56(s，3H)，1.73(s，9H)，1.52(s，9H).
c){[4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-苯并咪唑-1-羧酸叔丁基酯((來(lái)自上步b)1.00g，1.58mmol)的MeOH(10mL)溶液用含水Na2CO3(0.340g，3.17mmol的2mL水溶液)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于EtOAc，用水(1×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物{[4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.755g，90％)，為褐色固體。1H NMR(MeOD)δ8.48(s，1H)，8.32(m，1H)，8.20(s，1H)，8.03(d，1H，J＝1.6Hz)，2.63(s，3H)，1.48(s，9H).
d)({4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯{4-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((來(lái)自上步c)0.132g，0.248mmol)的無(wú)水DMF(3mL)溶液用2-氟-5-硝基芐基溴(0.087g，0.373mmol)和二異丙胺(0.070mL，0.497mmol)處理，加熱至40℃達(dá)24小時(shí)。將溶液用EtOAc稀釋?zhuān)盟浞窒礈?4×35mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物({4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯和({4-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.015g，9％)，為褐色固體。 C25H23BrFN5O6S3684.00(M+1)實(shí)測(cè)值684.60.
e)4-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將({4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯與({4-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((來(lái)自上步d)0.015g，0.022mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液冷卻至0℃，用25％三氟乙酸的CH2Cl2溶液(1.00mL)處理。使混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?.2小時(shí)。在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.002g，47％)和4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.002g，47％)，為白色固體。
實(shí)施例1874-[7-溴-3-(2-氟-5-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽1HNMR(MeOD)δ8.728(s，1H)，8.355(m，2H)，8.309(s 1H)，8.286(d，1H，J＝1.6Hz)，8.060(d，1H，J＝1.6Hz)，7.468(t，1H，J＝9.6Hz)，5.832(s，2H)，2.623(s，3H).C20H15BrFN5O4S3583.95(M+1)實(shí)測(cè)值585.0.
實(shí)施例1884-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽1HNMR(MeOD)δ8.636(s，1H)，8.455(d，1H，J＝1.6Hz)，8.337(s，1H)，8.295(m，1H)，8.098(d，1H，J＝2.0Hz)，7.610(dd，1H，J＝6.4Hz，J＝2.8Hz)，7.468(t，1H，J＝8.8Hz)，6.054(s，2H)，2.722(s，3H).C20H15BrFN5O4S3583.95(M+1)實(shí)測(cè)值585.0.
實(shí)施例1894-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)({4-[7-溴-1-(2-氟-4-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯{4-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例187-188步驟c)0.097g，0.183mmol)的DMF(3mL)溶液用2-氟-4-硝基芐基溴(0.064g，0.274mmol)和二異丙胺(0.051mL，0.365mmol)處理，加熱至40℃達(dá)24小時(shí)。將溶液用EtOAc稀釋?zhuān)盟浞窒礈?4×35mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物({4-[7-溴-1-(2-氟-4-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯和({4-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.012g，10％)，為褐色固體。 C25H23BrFN5O6S3684.00(M+1)實(shí)測(cè)值684.50.
b)4-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將({4-[7-溴-1-(2-氟-4-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯與({4-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((來(lái)自上步a)0.005g，0.007mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液冷卻至0℃，用25％三氟乙酸的CH2Cl2溶液(1.00mL)處理。使混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)。在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-[7-溴-3-(2-氟-4-硝基-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.002g，47％)，為白色固體。
1H NMR(MeOD)δ 8.714(s，1H)，8.308(s，1H)，8.231(d，1H，J＝1.6Hz)，8.106(m，2H)，8.047(d，1H，J＝0.8Hz)，7.556(t，1H，J＝8.4Hz)，5.854(s，2H)，2.630(s，3H).C20H15BrFN5O4S3583.95(M+1)實(shí)測(cè)值585.05.
實(shí)施例1904-[1-(5-氨基-2-氟-芐基)-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將({4-[7-溴-1-(2-氟-5-硝基-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例187-188步驟d)0.030g，0.044mmol)的EtOH(3mL)溶液用NH4Cl(0.023g，0.438mmol)水溶液處理，加熱至50℃。加入鐵粉(0.012g，0.219mmol)，將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)4小時(shí)。將混合物冷卻，通過(guò)Celite過(guò)濾。用EtOH清洗濾餅，在真空中除去EtOH。將剩余水溶液用飽和含水NaHCO3堿化至pH 10，用EtOAc萃取(2×25mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(3mL)，用三氟乙酸(0.75mL)處理。將混合物在室溫下攪拌1.5小時(shí)，在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-[3-(5-氨基-2-氟-芐基)-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.014g，49％)，為白色固體。1H NMR(MeOD)δ8.714(s，1H)，8.308(s，1H)，8.231(d，1H，J＝1.6Hz)，8.106(m，2H)，8.047(d，1H，J＝0.8Hz)，7.556(t，1H，J＝8.4Hz)，5.854(s，2H)，2.630(s，3H).
實(shí)施例1913-({3-[4-溴-6-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-苯并咪唑-1-基甲基]-4-氟-苯基氨甲?；鶀-甲硫基)-丙酸三氟乙酸鹽
a)[(4-{7-溴-3-[5-(2-溴-乙酰氨基)-2-氟-芐基]-3H-苯并咪唑-5-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將({4-[3-(5-氨基-2-氟-芐基)-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例190)0.012g，0.018mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液用溴乙酰溴(0.007g，0.037mmol)和三乙胺(0.006mL，0.046mmol)處理，在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?2×10mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物[(4-{7-溴-3-[5-(2-溴-乙酰氨基)-2-氟-芐基]-3H-苯并咪唑-5-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.014g，92％)，為黃褐色固體。C27H26Br2FN5O5S3773.94(M+1)實(shí)測(cè)值774.10.
b)3-[(3-{4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-苯并咪唑-1-基甲基}-4-氟-苯基氨甲酰基)-甲硫基]-丙酸甲基酯將[(4-{7-溴-3-[5-(2-溴-乙酰氨基)-2-氟-芐基]-3H-苯并咪唑-5-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例191步驟a)0.014g，0.017mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液用3-巰基丙酸甲酯(2.50μL，0.025mmol)處理，在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?1×10mL)處理。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物3-[(3-{4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-苯并咪唑-1-基甲基}-4-氟-苯基氨甲?；?-甲硫基]-丙酸甲基酯(0.011，85％)，為黃褐色固體。C31H33BrFN5O8S4814.04(M+1)實(shí)測(cè)值814.70.
c)3-({3-[4-溴-6-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-苯并咪唑-1-基甲基]-4-氟-苯基氨甲?；鶀-甲硫基)-丙酸三氟乙酸鹽將3-[(3-{4-溴-6-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-苯并咪唑-1-基甲基}-4-氟-苯基氨甲?；?-甲硫基]-丙酸甲基酯((實(shí)施例191步驟b)0.011g，0.014mmol)的MeOH∶H2O(2∶1，3mL)溶液用LiOH(1.61mg，0.070mmol)處理，將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2(3mL)。加入三氟乙酸(0.750mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌45分鐘。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物3-({3-[4-溴-6-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-苯并咪唑-1-基甲基]-4-氟-苯基氨甲酰基}-甲硫基)-丙酸三氟乙酸鹽(0.004g，43％)，為白色固體。
1H NMR(MeOD)δ8.691(s，1H)，8.140(s，1H)，8.068(s，1H)，8.018(s，1H)，7.647(m，1H)，7.547(dd，1H，J＝6.4Hz，J＝2.4Hz)，7.176(t，1H，J＝9.6Hz)，5.692(s，2H)，3.498(五重峰，1H，J＝1.6Hz)，3.148(五重峰，1H，J＝1.6Hz)，2.875(d，2H，J＝7.2Hz)，2.651(d，2H，J＝7.2Hz)，2.529(s，3H).C25H23BrFN5O5S4699.97(M+1)實(shí)測(cè)值700.90.
實(shí)施例192[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽
a)2-溴-5-甲氧基-1，3-二甲基-苯將4-溴-3，5-二甲基苯酚(1.00g，4.97mmol)的丙酮(40mL)溶液用固體CsCO3(1.17g，4.97mmol)和甲基碘(0.310mL，4.97mmol)處理，加熱至40℃達(dá)3小時(shí)。在反應(yīng)過(guò)程中加入另外的甲基碘(0.310mL，4.97mmol)，以替換蒸發(fā)損失。在真空中除去丙酮。使所得白色固體殘余物在水與CH2Cl2之間分配。分離各層，進(jìn)一步用CH2Cl2萃取(2×25mL)水層。合并有機(jī)層，用水洗滌(1×25mL)，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到產(chǎn)物2-溴-5-甲氧基-1，3-二甲基-苯(1.01g，94％)，為無(wú)色的油，放置后緩慢固化。1H NMR(CDCl3)δ6.644(s，2H)，3.762(s，3H)，2.382(s，6H).
b)2-溴-1-溴甲基-5-甲氧基-3-甲基-苯將2-溴-5-甲氧基-1，3-二甲基-苯((實(shí)施例192步驟a)1.01g，4.70mmol)的CCl4(50mL)溶液用N-溴琥珀酰胺和AIBN(催化量)處理，加熱至75℃達(dá)3.5小時(shí)。將反應(yīng)物用CH2Cl2稀釋?zhuān)蔑柡秃甆aHCO3洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物2-溴-1-溴甲基-5-甲氧基-3-甲基-苯(1.27g，92％)，為淡橙色固體。
1H NMR(CDCl3)δ6.641(s，2H)，4.601(s，2H)，3.760(s，3H)，2.380(s，3H).
c)(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-甲醇將2-溴-1-溴甲基-5-甲氧基-3-甲基-苯((實(shí)施例192步驟b)10.8g，36.7mmol)的二噁烷∶水(1∶1，200mL)溶液用CaCO3處理，加熱至回流(110℃)達(dá)18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，借助重力過(guò)濾除去固體鹽。在真空中除去二噁烷。加入稀HCl(10mL)，用CH2Cl2萃取混合物(2×150mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，得到淡橙色油，放置后緩慢固化。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到產(chǎn)物(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-甲醇(1.03g，12％)，為黃色的油。1H NMR(CDCl3)δ 6.905(d，1H，J＝3.2Hz)，6.746(d，1H，J＝3.2Hz)，4.720(d，2H，J＝3.6Hz)，3.798(s，3H)，2.390(s，3H).
d)(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯將(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-甲醇((實(shí)施例192步驟c)0.800g，3.46mmol)的DMF(10mL)溶液冷卻至0℃，用NaH(0.100g 95％分散體，4.15mmol)處理，溫?zé)嶂潦覝剡_(dá)30分鐘。然后將混合物用溴乙酸叔丁酯(0.614mL，4.15mmol)處理，在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)物用水稀釋?zhuān)肊tOAc萃取(2×125mL)。合并有機(jī)層，用水充分洗滌(3×300mL)，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯(1.19g，98％)，為黃色的油。
1H NMR(CDCl3)δ6.967(d，1H，J＝2.8Hz)，6.745(d，1H，J＝3.2Hz)，4.683(s，2H)，4.086(s，2H)，3.794(s，3H)，2.380(s，3H)，1.496(s，9H).
e)[5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯將(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例192步驟d)1.19g，3.45mmol)的二噁烷(10mL)溶液用PdCl2(PPh3)2(0.242g，0.345mmol)和三乙胺(2.88mL，20.7mmol)處理。緩慢加入4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧硼雜環(huán)戊烷(1.00mL，6.89mmol)，將混合物加熱至80℃達(dá)15小時(shí)。將反應(yīng)物用EtOAc稀釋?zhuān)名}水洗滌(2×50mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到產(chǎn)物[5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯(0.793g，58％)，為褐色的油。粗產(chǎn)物直接用于下一反應(yīng)。
f){3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-乙酸叔丁基酯將[5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例192步驟e)0.790g，2.01mmol)的甲苯∶EtOH(2∶1，15mL)溶液用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)0.247g，0.503mmol)、含水Na2CO3(2M，2.01mL，4.03mmol)和Pd(PPh3)4(0.116g，0.101mmol)處理。將混合物加熱至80℃達(dá)16.3小時(shí)。將反應(yīng)物用EtOAc稀釋?zhuān)名}水洗滌(2×25mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含5％-60％EtOAc的己烷，以5％遞增)，得到產(chǎn)物{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基}-乙酸叔丁基酯(0.107g，31％)，為灰白色固體。1H NMR(CDCl3)δ8.013(d，1H，J＝7.6Hz)，7.961(s，1H)，7.934(t，1H，J＝1.6Hz)，7.570(t，1H，J＝7.6Hz)，7.440(d，1H，J＝2.0Hz)，6.896(d，1H，J＝2.4Hz)，6.832(d，1H，J＝2.4Hz)，4.200(s，2H)，3.876(s，3H)，3.868(s，2H)，2.630(s，3H)，2.036(s，3H)，1.585(s，9H)，1.540(s，9H).C32H40N2O8S3677.19(M+1)實(shí)測(cè)值676.90.
g)[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽將{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基)-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例192步驟f)0.107g，0.158mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用50％三氟乙酸的CH2Cl2溶液(10mL)處理，在室溫下攪拌4小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含5-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽(0.080g，97％)，為白色玻璃狀固體。
1H NMR(MeOD)δ8.345(s，1H)，8.047(d，1H，J＝8.8Hz)，7.848(t，1H，J＝1.6Hz)，7.692(t，1H，J＝7.6Hz)，7.554(d，1H，J＝7.6Hz)，6.992(d，1H，J＝2.0Hz)，6.871(d，1H，J＝2.0Hz)，4.202(d，2H，J＝5.6Hz)，3.852(s，3H)，3.818(d，2H，J＝2.4Hz)，2.736(s，3H)，1.999(s，3H).C23H24N2O6S3521.08(M+1)實(shí)測(cè)值521.00.
實(shí)施例193[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-羥基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽將[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸((實(shí)施例192步驟g)0.077g，0.0148mmol)的無(wú)水CH2Cl2(10mL)溶液冷卻至0℃，用BBr3(0.592mL，0.592mmol)逐滴處理。將反應(yīng)物在0℃下攪拌30分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?7小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用MeOH猝滅。見(jiàn)到一些HBr放出。在真空中蒸發(fā)全部溶劑，將殘余物溶于EtOAc(100mL)，用水(1×75mL)和鹽水(2×50mL)洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含5-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-羥基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽(0.039g，52％)，為白色玻璃狀固體。1HNMR(MeOD)δ8.344(s，1H)，8.090(d，1H，J＝8.0Hz)，7.877(t，1H，J＝2.0Hz)，7.721(t，1H，J＝7.6Hz)，7.572(d，1H，J＝7.6Hz)，6.778(d，1H，J＝2.8Hz)，6.735(d，1H，J＝2.0Hz)，2.710(s，3H)，2.028(s，2H)，1.935(s，3H)，1.254(t，2H，J＝7.6Hz).
實(shí)施例1944-{2′-[3-(2-苯磺酰氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)(4-{2′-[3-(2-氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例25步驟c)0.150g，0.290mmol)的無(wú)水CH2Cl2(10mL)溶液用吡啶(0.026mL，0.319mol)和氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯(0.064g，0.319mmol)處理，攪拌1.7小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙二胺(0.194mL，2.90mmol)和三乙胺(0.485mL，3.48mmol)處理，在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?3×50mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物[(4-{2′-[3-(2-氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.145g，82％)，為黃褐色固體。1H NMR(MeOD)δ8.195(s，1H)，8.057(d，1H，J＝8.0Hz)，7.902(t，1H，J＝1.6Hz)，7.718(t，1H，J＝8.0Hz)，7.554(d，1H，J＝8.0Hz)，7.511(d，1H，J＝8.0Hz)，7.289(t，1H，J＝7.6Hz)，7.119(d，1H，J＝7.2Hz)，3.099(m，2H)，2.676(s，3H)，2.621(m，2H)，2.007(s，3H)，1.511(s，9H).C27H33N5O5S3604.16(M+1)實(shí)測(cè)值603.90.
b)4-{2′-[3-(2-苯磺酰氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將[(4-{2′-[3-(2-氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例194步驟a)0.060g，0.099mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用苯磺酰氯(0.015mL，0.119mmol)和三乙胺(0.033mL，0.238mmol)處理，攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?2×25mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(10mL)，用三氟乙酸(2mL)處理，在室溫下攪拌1.5小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-{2′-[3-(2-苯磺酰氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.026g，41％)，為白色玻璃狀固體。1H NMR(MeOD)δ8.292(s，1H)，8.036(d，1H，J＝8.0Hz)，7.878(t，1H，J＝1.6Hz)，7.820(d，2H，J＝6.8Hz)，7.534(t，1H，J＝1.6Hz)，7.694(t，1H，J＝8.0Hz)，7.616(m，1H)，7.562(d，2H，J＝7.6Hz)，7.438(d，1H，J＝7.6Hz)，7.276(t，1H，J＝7.6Hz)，7.212(d，1H，J＝7.2Hz)，3.075(q，2H，J＝4.8Hz)，2.448(dt，2H，J＝6.0Hz，J＝2.4Hz)，2.710(s，3H)，2.003(s，3H).
實(shí)施例195a)4-{2′-[3-(2-甲磺酰氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將[(4-{2′-[3-(2-氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例194步驟a)0.050g，0.083mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用甲磺?；?9.50μL，0.099mmol)和三乙胺(27.7μL，0.199mmol)處理，在室溫下攪拌7小時(shí)。將反應(yīng)物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?1×50mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，溶于CH2Cl2(8mL)，用三氟乙酸(0.4mL)處理，在室溫下攪拌2小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-{2′-[3-(2-甲磺酰氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.023g，48％)，為白色玻璃狀固體。
1H NMR(MeOD)δ8.305(s，1H)，8.052(d，1H，J＝9.2Hz)，7.887(t，1H，J＝1.6Hz)，7.719(t，1H，J＝7.6Hz)，7.571(d，1H，J＝7.2Hz)，7.450(d，1H，J＝7.2Hz)，7.284(t，1H，J＝8.0Hz)，7.131(d，1H，J＝7.6Hz)，3.140(m，2H)，3.040(m，2H)，2.898(s，3H)，2.718(s，3H)，2.005(s，3H).C23H27N5O5S4582.09(M+1)實(shí)測(cè)值582.00.
實(shí)施例196[3-(2-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙基)-脲基]-乙酸三氟乙酸鹽 a){3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸甲基酯將[(4-{2′-[3-(2-氨基-乙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例194步驟a)0.030g，0.050mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用異氰酰乙酸乙酯(6.70μL，0.060mmol)處理，在室溫下攪拌35分鐘。將反應(yīng)物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?1×15mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物{3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸甲基酯(0.031g，86％)，為灰白色固體。C32H40N6O8S3733.21(M+1)實(shí)測(cè)值732.90.
b){3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸將{3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸甲基酯((實(shí)施例197步驟a)0.031g，0.042mmol)的MeOH∶水(2∶1，15mL)溶液用NaOH(10N，0.042mL，0.420mmol)處理，在室溫下攪拌18小時(shí)。在真空中蒸發(fā)MeOH，剩余水溶液用冰乙酸酸化至pH 5。用CH2Cl2萃取溶液(3×50mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中蒸發(fā)，得到產(chǎn)物{3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸(0.025g，8 3％)，為灰白色固體。粗產(chǎn)物直接用于下一反應(yīng)。
c)[3-(2-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙基)-脲基]-乙酸三氟乙酸鹽將{3-[2-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-乙基]-脲基}-乙酸((實(shí)施例196步驟b)0.025g，0.035mmol)的CH2Cl2(10mL)懸液用三氟乙酸(1.00mL)處理，在室溫下攪拌1.2小時(shí)。在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物[3-(2-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙基)-脲基]-乙酸三氟乙酸鹽(0.013g，60％)，為白色玻璃狀固體。1H NMR(CD3CN)δ8.099(s，1H)，8.048(d，1H，J＝9.6Hz)，7.815(t，1H，J＝1.6Hz)，7.709(t，1H，J＝8.0Hz)，7.575(d，1H，J＝7.6Hz)，7.498(d，1H，J＝8.0Hz)，7.295(t，1H，J＝7.6Hz)，7.161(d，1H，J＝8.0Hz)，3.756(s，2H)，2.979(sbr，4H)，2.681(s，3H)，2.079(s，3H).
實(shí)施例197a)5-甲硫基-4-[6′-甲基-2′-(N′-甲磺酰基脲基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-甲脒將[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例25步驟c)0.050g，0.097mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液用吡啶(8.6μL，0.106mmol)和氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯(0.021g，0.106mmol)處理，攪拌2小時(shí)。將混合物用甲磺酰胺(0.018g，0.193mmol)和三乙胺(0.108mL，0.773mmol)處理，攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?2×25mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(5mL)，用三氟乙酸(1.00mL)處理，攪拌1小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)得到標(biāo)題化合物(0.015g，57％)，為白色玻璃狀固體。1HNMR(MeOD)δ8.359(s，1H)，8.123(d，1H，J＝9.6Hz)，7.993(t，1H J＝1.6Hz)，7.790(t，1H，J＝8.4Hz)，7.625(d，1H，J＝7.6Hz)，7.370(t，1H，J＝8.0Hz)，7.244(d，1H，J＝7.2Hz)，7.170(d，1H，J＝7.2Hz)，3.008(s，3H)，2.722(s，3H)，2.003(s，3H).C21H22N4O5S4539.05(M+1)實(shí)測(cè)值538.90.
實(shí)施例1984-[4′-甲氧基-6′-甲基-2′-(2-氧代-咪唑烷-1-基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯甲酸將(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-甲醇((實(shí)施例192步驟c)7.85g，34.0mmol)的丙酮(300mL)溶液加熱至60℃，用KMnO4(12.6g，79.8mmol)的水溶液(175mL)處理25分鐘。將混合物加熱至60℃達(dá)另外35分鐘。加入飽和NaHSO3水溶液，直至溶液變?yōu)槊咨?。加入濃NH4OH至pH 10，通過(guò)中等孔隙率玻璃漏斗過(guò)濾固體。將濾液用濃HCl酸化至pH 4，用乙醚萃取溶液(2×200mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物2-溴-5-甲氧基-3-甲基苯甲酸(4.15g，50％)，為白色固體。1H NMR(MeOD)δ6.968(d，1H，J＝2.8Hz)，6.775(d，1H，J＝3.2Hz)，3.776(s，3H)，2.352(s，3H).
b)(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯將2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯甲酸((實(shí)施例198步驟a)3.39g，13.8mmol)的無(wú)水叔丁醇溶液用DPPA(3.58mL，16.6mmol)逐滴處理，攪拌5分鐘。將溶液用二異丙基乙胺(2.89mL，16.6mmol)處理，加熱至80℃達(dá)17.5小時(shí)。在真空中除去叔丁醇。將殘余物溶于EtOAc，用飽和含水NaHCO3(2×60mL)和水(1×60mL)洗滌。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含10％EtOAc的己烷)，得到產(chǎn)物(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯(3.05g，70％)，為無(wú)色的油。1H NMR(CDCl3)δ7.701(d，1H，J＝1.6Hz)，7.146(s，NH)，6.517(d，1H，J＝3.2Hz)，3.797(s，3H)，2.360(s，3H)，1.534(s，9H).
c)2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基胺將(2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例198步驟b)3.00g，9.49mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液用三氟乙酸(7.00mL)逐滴處理。將溶液在室溫下攪拌1.3小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基胺三氟乙酸鹽(2.04g，65％)，為黃色固體。粗混合物直接用于下一反應(yīng)。
d)5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺將2-溴-5-甲氧基-3-甲基-苯基胺((實(shí)施例198步驟c)2.04g，6.18mmol)的無(wú)水二噁烷(100mL)溶液用三乙胺(5.26mL，37.7mmol)、2-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯(0.662g，1.89mmol)和Pd(OAc)2(0.106g，0.472mmol)處理。緩慢加入4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(4.09mL，28.3mmol)，將混合物加熱至回流達(dá)1小時(shí)。在真空中蒸發(fā)二噁烷。將殘余物溶于EtOAc，用水洗滌(2×75mL)。使有機(jī)層借助重力過(guò)濾除去鈀殘余物，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含10-25％EtOAc的己烷，以5％遞增)，得到產(chǎn)物5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺(1.61g，98％)，為淺褐色固體。1H NMR(CDCl3)δ7.361(d，1H，J＝7.6Hz)，7.279(d，1H，J＝8.0Hz)，3.815(s，3H)，2.46(s，3H)，1.356(s，12H).
e){[4-(2′-氨基-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)1.50g，3.05mmol)的甲苯∶EtOH(2∶1，45mL)溶液用5-甲氧基-3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺((實(shí)施例198步驟d)1.61g，6.11mmol)、含水Na2CO3(2M，12.2mL，24.4mmol)和Pd(PPh3)4(0.706g，0.611mmol)處理。將混合物加熱至80℃達(dá)4小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋?zhuān)名}水(1×75mL)和水(2×75mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含25％然后35％然后50％EtOAc的己烷)，得到產(chǎn)物{[4-(2′-氨基-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.680g，40％)，為黃色-褐色固體。1H NMR(MeOD)δ8.223(s，1H)，8.001(d，1H，J＝7.2Hz)，7.879(t，1H，J＝1.6Hz)，7.698(t，1H，J＝8.0Hz)，7.549(d，1H，J＝8.0Hz)，6.287(dd，2H，J＝7.2Hz，J＝2.4Hz)，3.770(s，3H)，2.669(s，3H)，1.900(s，3H)，1.510(s，9H).C25H29N3O5S3548.13(M+1)實(shí)測(cè)值547.70.
f)4-[4′-甲氧基-6′-甲基-2′-(2-氧代-咪唑烷-1-基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{[4-(2′-氨基-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例198步驟e)0.050g，0.091mmol)的無(wú)水CH2Cl2(10mL)溶液用異氰酸溴乙酯(0.010mL，0.110mmol)處理，在室溫下攪拌4小時(shí)。加入另外的異氰酸溴乙酯(0.010mL，0.110mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌15小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水洗滌(1×15mL)，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(10mL)，用三氟乙酸(1.00mL)處理，在室溫下攪拌1小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-[4′-甲氧基-6′-甲基-2′-(2-氧代-咪唑烷-1-基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.010g，21％)，為白色玻璃狀固體。1H NMR(MeOD)δ8.354(s，1H)，8.032(d，1H，J＝7.6Hz)，7.946(s，1H)，7.733(t，1H，J＝7.6Hz)，7.574(d，1H，J＝8.0Hz)，7.059(s，1H)，6.967(s，1H)，3.877(s，3H)，2.730(s，3H)，2.101(s，3H)，3.841(dt，4H，J＝8.8Hz，J＝2.4Hz).C23H24N4O4S3517.10(M+1)實(shí)測(cè)值517.10.
實(shí)施例199N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽 將{[4-(2′-氨基-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例198步驟e)0.050g，0.091mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用三乙胺(38.0μL，0.274mmol)和4-甲磺?；?丁酰氯(0.025g，0.137mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液處理，在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和含水NaHCO3洗滌(1×15mL)。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，加入三氟乙酸(0.5mL)。將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽(0.013g，24％)，為白色玻璃狀固體。1H NMR(MeOD)δ8.309(s，1H)，8.032(d，1H，J＝8.8Hz)，7.868(t，1H，J＝1.6Hz)，7.684(t，1H，J＝8.0Hz)，7.543(d，1H，J＝8.0Hz)，6.871(s，1H)，6.817(d，1H，J＝2.4Hz)，3.841(s，3H)，2.922(s，3H)，2.822(t，2H，J＝7.6Hz)，2.742(s，3H)，2.202(t，2H，J＝6.8Hz)，2.063(s，3H)，1.765(m，2H).C25H29N3O6S4596.09(M+1)實(shí)測(cè)值596.10.
實(shí)施例200a)4-{2′-[3-(2-甲磺?；?乙基)-脲基]-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{[4-(2′-氨基-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例198步驟e)0.070g，0.128mmol)的無(wú)水CH2Cl2(3mL)溶液用1-異氰酰-2-甲磺?；?乙烷(0.019g，0.128mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液處理，攪拌20分鐘。用飽和含水NaHCO3洗滌反應(yīng)混合物(1×25mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(10mL)，用三氟乙酸(2.00mL)處理，在室溫下攪拌30分鐘。在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-{2′-[3-(2-甲磺?；?乙基)-脲基]-4′-甲氧基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.040g，53％)，為白色玻璃狀固體。1HNMR(MeOD)δ8.300(s，1H)，8.031(d，1H，J＝8.0Hz)，7.865(t，1H，J＝1.6Hz)，7.688(t，1H，J＝7.6Hz)，7.568(d，1H，J＝8.0Hz)，7.063(d，1H，J＝1.6Hz)，6.730(d，1H，J＝1.6Hz)，3.818(s，3H)，3.507(t，2H，J＝6.4Hz)，3.171(t，2H，J＝6.0Hz)，2.928(s，3H)，2.725(s，3H)，2.315(s，3H).C24H28N4O6S4597.09(M+1)實(shí)測(cè)值597.00.
實(shí)施例2014-{2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)2-(4-甲硫基-丁基)-異吲哚-1，3-二酮將2-(4-溴-丁基)-異吲哚-1，3-二酮(1.00g，3.54mmol)的MeOH(60mL)溶液用硫代甲醇鈉(0.298g，4.25mmol)處理，加熱至回流18小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑，使殘余物在EtOAc與水之間分配。進(jìn)一步用EtOAc萃取水層(1×75mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物2-(4-甲硫基-丁基)-異吲哚-1，3-二酮(0.803g，91％)。
1H NMR(MeOD)7.844(m，4H)，3.704(t，2H，J＝7.2Hz)，2.549(t，2H，J＝7.2Hz)，2.063(s，3H)，1.792(五重峰，2H，J＝7.2Hz)，1.731(五重峰，2H，J＝7.2Hz).
b)2-(4-甲磺?；?丁基)-異吲哚-1，3-二酮將2-(4-甲硫基-丁基)-異吲哚-1，3-二酮((實(shí)施例201步驟a)1.35g，5.42mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液用3-氯過(guò)苯甲酸(mCPBA，3.03g，13.5mmol)處理，在室溫下攪拌17小時(shí)。用含水Na2S2O3(2×40mL)和水(1×40mL)洗滌溶液。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物2-(4-甲磺?；?丁基)-異吲哚-1，3-二酮(0.866g，57％)。
1H NMR(MeOD)δ7.827(m，4H)，3.732(t，2H，J＝6.4Hz)，3.193(t，2H，J＝7.2Hz)，2.939(s，3H)，1.843(m，4H).
c)4-甲磺?；?丁基胺將2-(4-甲磺?；?丁基)-異吲哚-1，3-二酮((實(shí)施例201步驟b)0.866g，3.08mmol)的EtOH(30mL)溶液用肼處理，在室溫下攪拌18小時(shí)。過(guò)濾除去固體沉淀，在真空中濃縮濾液。為了除去所有過(guò)量的肼，將所得蠟狀固體用甲苯和THF研制，在高真空下放置過(guò)夜，得到產(chǎn)物(0.400g，86％)，為蠟狀灰白色固體。1NMR(MeOD)δ3.153(dd，2H，J＝8.8Hz，J＝0.0Hz)，2.962(s，3H)，2.582(dd，2H，J＝7.6Hz，J＝0.0Hz)，1.811(m，2H)1.747(m，2H).
d)4-{2′-[3-(4-甲磺?；?丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩－2-甲脒三氟乙酸鹽將[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例25步驟c)0.100g，0.193mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液用吡啶(0.017mL，0.213mmol)和氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯(0.043g，0.213mmol)處理，攪拌2小時(shí)。將溶液用4-甲磺?；』?實(shí)施例201步驟c，0.035g，0.232mmol)和三乙胺(0.215mL，1.54mmol)處理，攪拌2小時(shí)。將混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?1×50mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾。將剩余CH2Cl2溶液用三氟乙酸(1.00mL)處理，攪拌1.5小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-50％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到產(chǎn)物4-{2′-[3-(4-甲磺酰基-丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽(0.022g，19％)，為白色玻璃狀固體。
1H NMR(MeOD)δ8.326(s，1H)，8.069(d，1H，J＝8.0Hz)，7.917(t，1H，J＝1.6Hz)，7.740(t，1H，J＝8.0Hz)，7.586(d，1H，J＝7.6Hz)，7.441(d，1H，J＝7.2Hz)，7.305(t，1H，J＝8.0Hz)，7.151(d，1H，J＝8.0Hz)，3.116(dd，2H，J＝8.8Hz，J＝6.4Hz)，3.069(t，2H，J＝6.8Hz)，2.962(s，3H)，2.739(s，3H)，2.025(s，3H)1.732(五重峰，2H，J＝7.6Hz)，1.506(五重峰，2H，J＝7.6Hz).C25H30N4O5S4595.11(M+1)實(shí)測(cè)值595.10.
實(shí)施例202-208將[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例25步驟c)1.00g，1.93mmol)的無(wú)水CH2Cl2(20mL)溶液用吡啶(0.172mL，2.13mmol)和氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯(0.428g，2.13mmol)處理。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將所得氨基甲酸酯{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-氨基甲酸4-硝基-苯基酯的溶液分裝入小瓶中，用下列胺(1.1當(dāng)量)和三乙胺(8.0當(dāng)量)處理。
實(shí)施例2022-((4-溴-苯基)-乙基胺)實(shí)施例203(3-苯基-丙基胺)實(shí)施例204(芐胺)實(shí)施例205(2-氨基-3-苯基-丙酸)實(shí)施例206(6-氨基-2-叔丁氧羰基氨基-己酸)實(shí)施例207(2-(1H-吲哚-3-基)-乙基胺)實(shí)施例208(3，3-二苯基-丙基胺)將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將溶液用水洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(1mL)，用三氟乙酸(0.25mL)處理2小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(含10-80％乙腈的1％TFA/水，30min)，得到實(shí)施例203-208所示產(chǎn)物。均為白色玻璃狀固體。
實(shí)施例2024-(2′-{3-[2-(4-溴-苯基)-乙基]-脲基}-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 1H NMR(MeOD)δ8.299(s，1H)，8.075(d，1H，J＝8.4Hz)，7.894 t，1H，J＝1.6Hz)，7.708(t，1H，J＝8.0Hz)，7.529(d，1H，J＝8.4Hz)，7.376(d，2H，J＝8.4Hz)，7.834(t，1H，J＝8.4Hz)，7.279(t，1H，J＝7.6Hz)，7.134(d，1H，J＝7.6Hz)，6.957(d，2H，J＝7.6Hz)，3.20(m，2H)，2.656(s，3H)，2.555(m，2H)，1.995(s，3H).C28H27BrN4O3S3643.04(M+1)實(shí)測(cè)值643.00.
實(shí)施例2034-{6′-甲基-2′-[3-(3-苯基-丙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 1H NMR(MeOD)δ8.293(s，1H)，8.056(d，1H，J＝8.0Hz)，7.916(t，1H，J＝1.6Hz)，7.715(t，1H，J＝7.6Hz)，7.592(d，1H，J＝7.6Hz)，7.449(d，1H，J＝7.6Hz)，7.308(t，1H，J＝7.6Hz)，7.255(d，2H，J＝7.2Hz)，7.166(t，2H，J＝7.2Hz)，7.147(d，2H，J＝8.0Hz)，3.021(t，2H，J＝6.4Hz)，2.697(s，3H)，2.515(t，2H，J＝7.6Hz)，2.026(s，3H)，1.638(五重峰，2H，J＝7.6Hz).C29H30N4O3S3579.15(M+1)實(shí)測(cè)值579.10.
實(shí)施例2044-[2′-(3-芐基-脲基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 1H NMR(MeOD)δ8.243(s，1H)，8.073(d，1H，J＝9.2Hz)，7.951(t，1H，J＝1.6Hz)，7.685(t，1H，J＝8.0Hz)，7.558(d，1H，J＝7.6Hz)，7.406(d，1H，J＝8.8Hz)，7.301(t，1H，J＝8.0Hz)，7.232(m，4H)，6.977(d，2H，J＝8.4Hz)，4.137(q，2H，J＝16Hz)，2.649(s，3H)，2.029(s，3H).C27H26N4O3S355.12(M+1)實(shí)測(cè)值551.10.
實(shí)施例2052-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-3-苯基-丙酸三氟乙酸鹽 1H NMR(CD3CN)δ10.027(s br，1H)，8.083(s，1H)，7.875(s，1H)，7.807(s，1H)，7.729(t，1H，J＝7.525Hz)，7.525(d，1H，J＝6.8Hz)，7.429(m，1H)，7.272(m，5H)，7.101(m，2H)，5.446(t，1H，J＝10.4Hz)，3.077(m，2H)，2.674(s，3H)，2.018(s，3H).C29H28N4O5S3609.12(M+1)實(shí)測(cè)值609.10.
實(shí)施例2062-氨基-6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽
1H NMR(CD3CN)δ8.135(s，1H)，8.037(d，1H，J＝7.6Hz)，7.839(s，1H)，7.702(t，1H，J＝7.6Hz)，7.566(d，1H，J＝8.0Hz)，7.413(d，1H，J＝8.0Hz)，7.297(t，1H，J＝7.6Hz)，7.186(d，1H，J＝7.2Hz)，3.951(s br，1H)，2.939(t，2H，J＝1.6Hz)，2.674(s，3H)，2.043(s，3H)，1.854(m，2H)，1.311(m，4H).C26H31N5O5S3590.15(M+1)實(shí)測(cè)值590.10.
實(shí)施例2074-(2′-{3-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-脲基}-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 1H NMR(MeOD)δ8.270(s，1H)，8.069(d，1H，J＝8.0Hz)，7.901(t，1H，J＝1.6Hz)，7.661(t，1H，J＝7.2Hz)，7.467(t，2H，J＝8.8Hz)，7.351(t，2H，J＝6.8Hz)，7.296(t，1H，J＝7.6Hz)，7.163(d，1H，J＝8.0Hz)，7.103(t，1H，J＝7.2Hz)，6.991(t，1H，J＝6.8)，6.855(s，1H)，3.428(m，2H)，2.712(t，2H，J＝8.8Hz)，2.575(s，3H)，2.028(s，3H).C30H29N5O3S3604.14(M+1)實(shí)測(cè)值604.10.
實(shí)施例2084-{2′-[3-(3，3-二苯基-丙基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
1H NMR(MeOD)δ8.263(s，1H)，8.022(d，1H，J＝8.8Hz)，7.913(t，1H，J＝1.6Hz)，7.679(t，1H，J＝7.6Hz)，7.585(d，1H，J＝7.6Hz)，7.416(d，1H，J＝7.416Hz)，7.253(m，9H)，7.163(t，3H，J＝6.8Hz)，3.878(t，1H，J＝7.6Hz)，2.944(dt，2H，J＝6.8Hz，J＝2.4Hz)，2.689(s，3H)，2.081(q，2H，J＝7.6Hz)，2.032(s，3H).C35H34N4O3S3655.18(M+1)實(shí)測(cè)值655.10.
實(shí)施例209N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽 a)4-甲磺酰基-丁酰氯在室溫下，將4-甲硫基-丁酸甲基酯(0.50g，3.37mmol)的二氯甲烷[5mL]溶液滴加到mCPBA(1.57g，9.10mmol)的二氯甲烷[15mL]溶液中，然后回流1小時(shí)。然后將溶液冷卻至室溫，加入固體亞硫酸鈉。將反應(yīng)物過(guò)濾，用1N NaOH、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。然后將粗殘余物溶于THF/甲醇/水[2/1/0.1mL]，加入氫氧化鋰(0.18g，4.38mmol)。將反應(yīng)物加熱至50℃達(dá)24小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，加入1N HCl，將產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，用硫酸鎂干燥，得到產(chǎn)物(0.12g，21％)。1H-NMR(CDCl3)δ3.20(t，2H，J＝7.6Hz)，2.98(s，3H)，2.52(t，2H，J＝7.2Hz)，2.09(m，2H)。將該酸溶于二氯甲烷[5mL]，加入亞硫酰氯[5mL]。將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時(shí)，蒸發(fā)，直接用于下一步。
b)(亞氨基-{4-[2′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯在室溫下，將4-甲磺?；?丁酰氯(0.333g，1.81mmol)[實(shí)施例209，步驟a]加入到{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.468g，0.905mmol)[實(shí)施例25，步驟c]與三乙胺(1.83g，18.1mmol)的二氯甲烷溶液中。將反應(yīng)物攪拌24小時(shí)，然后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.520g，78％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H35N3O7S4665.14；實(shí)測(cè)值665.8.
c)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[1mL]加入到(亞氨基-{4-[2′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.011g，0.017mmol)[實(shí)施例209，步驟b]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.004g，36％)，為固體。
1H-NMR(MeOD)δ8.29(s，1H)，8.04(md，1H，J＝6.4Hz)，7.87(t，1H，J＝2.0Hz)，7.69(t，1H，J＝7.6Hz)，7.54(md，1H，J＝7.6Hz)，7.34(t，1H，J＝7.6Hz)，7.28(d，1H，J＝7.2Hz)，7.18(d，1H，J＝7.2Hz)，2.91(s，3H)，2.78(t，2H，J＝7.6Hz)，2.72(s，3H)，2.18(t，2H，J＝7.6Hz)，2.07(s，3H)，1.74(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O5S4566.1；實(shí)測(cè)值566.8.
實(shí)施例210N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-氨磺?；?丁酰胺三氟乙酸鹽a)(亞氨基-{4-[6′-甲基-2′-(4-氨磺?；?丁酰氨基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯在室溫下，將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.013g，0.025mmol)[實(shí)施例25，步驟c]加入到4-氨磺?；?丁酸(0.011g，0.068mmol)、EDCI(0.013g，0.068mmol)與HOBt(0.009g，0.068mmol)的DMF
溶液中。將反應(yīng)物攪拌24小時(shí)，然后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.010g，60％)，為固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H34N4O7S4666.13；實(shí)測(cè)值666.8.
b)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-氨磺?；□０啡宜猁}在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[1mL]加入到(亞氨基-{4-[6′-甲基-2′-(4-氨磺?；?丁酰氨基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.010g，0.015mmol)[實(shí)施例210，步驟a]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.005g，36％)，為固體。
1H-NMR(MeOD)δ8.30(s，1H)，8.04(md，1H，J＝7.6Hz)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.6Hz)，7.54(md，1H，J＝7.6Hz)，7.36(t，1H，J＝7.6Hz)，7.29(d，1H，J＝6.8Hz)，7.19(d，1H，J＝8.0Hz)，2.77-2.72(m，5H)，2.16(t，2H，J＝7.2Hz)，2.09(s，3H)，1.76(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H26N4O5S4566.08；實(shí)測(cè)值567.1.
實(shí)施例21111-氨基-十一酸[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-酰胺雙-三氟乙酸鹽 a)(10-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-癸基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯將亞硫酰氯(0.86mL，2.36mmol)加入到11-(9H-芴-9-基甲氧羰基氨基)-十一酸(0.086g，0.194mmol)的二氯甲烷/DMF[1mL/1滴]溶液中，在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，溶于二氯甲烷[5mL]，在室溫下滴加到{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.097mmol)[實(shí)施例25，步驟c]與三乙胺(0.03mL，0.19mmol)的二氯甲烷[3mL]溶液中，攪拌若干小時(shí)。蒸發(fā)粗反應(yīng)物，殘余物的柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)得到標(biāo)題化合物(0.042g，47％)，為固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C50H58N4O7S3922.35；實(shí)測(cè)值923.0.
b)({4-[2′-(11-氨基-十一酰氨基)-6′甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將50％哌啶的DMF溶液[1mL]加入到(10-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-癸基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(0.040g，0.043mmol)[實(shí)施例211，步驟a]中，攪拌0.5小時(shí)，繼之以蒸發(fā)。殘余物的柱色譜純化(含10％MeOH的二氯甲烷)，得到標(biāo)題化合物(0.024g，77％)，為固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C35H48N4O5S3700.28；實(shí)測(cè)值701.0.
c)11-氨基-十一酸[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-酰胺雙-三氟乙酸鹽在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[1mL]加入到({4-[2′-(11-氨基-十一酰氨基)-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.005g，0.007mmol)[實(shí)施例211，步驟b]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.003g，76％)，為固體。
1H-NMR(MeOD)δ8.28(s，1H)，8.02(d， 1H，J＝7.2Hz)，7.87(m，1H)，7.66(t，1H，J＝8.0Hz)，7.53(d，1H，J＝8.0Hz)，7.34(t，1H，J＝7.6Hz)，7.27(d，1H，J＝7.6Hz)，2.91(t，2H，J＝8.0Hz)，2.71(s，3H)，2.03(s，3H)，1.96(q，2H，J＝7.2Hz)，1.65(m，2H)，1.41-1.12(m，14H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H40N4O3S3600.23；實(shí)測(cè)值601.2.
實(shí)施例212N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-三氟甲磺酰氨基-丁酰胺三氟乙酸鹽 a)4-三氟甲磺酰氨基-丁酸甲基酯將三氟甲磺酰氯(0.23mL，2.16mmol)滴加到4-氨基-丁酸甲基酯鹽酸鹽(0.30g，1.96mmol)與三乙胺(0.68mL，4.90mmol)的二氯甲烷溶液中，在室溫下攪拌18小時(shí)。加入1N HCl，將產(chǎn)物用二氯甲烷萃取，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(0.42g，85％)。
1H-NMR(CDCl3)δ4.89(s，1H)，3.12(t，2H，J＝7.2Hz)，2.94(s，3H)，2.41(t，2H，J＝7.2Hz)，1.84(m，2H，J＝7.2Hz).
b)4-三氟甲磺酰氨基-丁酰氯將4-三氟甲磺酰氨基-丁酸甲基酯(0.42g，1.77mmol)[實(shí)施例212步驟a]溶于甲醇[2mL]，加入1N NaOH[2.66mL]，攪拌2小時(shí)。加入1N HCl，將產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物(0.13g，0.57mmol)溶于二氯甲烷/DMF[1mL/1滴]，加入亞硫酰氯(0.08mL，1.14)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)，直接用于下一步。
c)(亞氨基-{5-甲硫基-4-[6′-甲基-2′(4-三氟甲磺酰氨基丁酰氨基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯在室溫下，將4-三氟甲磺酰氨基-丁酰氯(0.015g，0.058mmol)[實(shí)施例212，步驟b]的二氯甲烷[1mL]溶液加入到{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.025g，0.049mmol)[實(shí)施例25，步驟c]的二氯甲烷[1mL]溶液中，同時(shí)劇烈攪拌0.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，殘余物的柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.020g，57％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H33F3N4O7S4734.12；實(shí)測(cè)值734.7.
d)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-三氟甲磺酰氨基-丁酰胺三氟乙酸鹽在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[2mL]加入到(亞氨基-{5-甲硫基-4-[6′-甲基-2′-(4-三氟甲磺酰氨基丁酰氨基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.020g，0.027mmol)[實(shí)施例212，步驟c]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.009g，54％)，為固體。
1H-NMR(MeOD)δ8.29(s，1H)，8.03(md，1H，J＝8.4Hz)，7.87(m，1H)，7.68(t，1H，J＝7.6Hz)，7.53(md，1H，J＝7.6Hz)，7.34(t，1H，J＝7.6Hz)，7.28(d，1H，J＝7.2Hz)，7.19(d，1H，J＝7.2Hz)，2.98(m，2H)，2.72(s，3H)，2.06(s，3H)，2.05(t，2H，J＝7.6Hz)，1.48(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H25F3N4O5S4634.07；實(shí)測(cè)值635.1.
實(shí)施例213E/Z-{2-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-乙烯基}-膦酸三氟乙酸鹽 a)(2-碘-3-甲基-苯基)-甲醇在室溫下，將亞硫酰氯[5mL]加入到2-碘-3-甲基-苯甲酸(2.00g，7.63mmol)中，加熱至50℃達(dá)1小時(shí)。然后將溶液冷卻和蒸發(fā)。將粗殘余物溶于乙酸乙酯，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。然后將粗產(chǎn)物溶于THF[5mL]，在室溫下加入1M氫化鋁鋰溶液[10.7mL]，攪拌1小時(shí)。加入水
和15％NaOH
，繼之以蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.50g，26％)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ3.20(t，2H，J＝7.6Hz)，2.98(s，3H)，2.52(t，2H，J＝7.2Hz)，2.09(m，2H).
b){[4-(2′-羥甲基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在-78℃下，將正-丁基鋰(2.5M)[4.03mL]加入到(2-碘-3-甲基-苯基)-甲醇(1.00g，4.04mL)[實(shí)施例213，步驟a]的乙醚[20mL]溶液中，攪拌0.5小時(shí)。加入硼酸三甲酯[1.13mL，10.1mmol]，將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，繼之以蒸發(fā)。將粗殘余物溶于乙醇/甲苯(1/2)[30mL]與2M碳酸鈉[16.2mL]，繼之以加入{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.49g，1.01mmol)[實(shí)施例27，步驟c]。向溶液通入氬，然后加入四(三苯膦)鈀(O)(0.18g，0.15mmol)。使反應(yīng)物回流3小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入乙酸乙酯，將粗反應(yīng)物用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.40g，74％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H28N2O5S3532.12；實(shí)測(cè)值532.7.
c)E/Z-(2-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-乙烯基)-膦酸二乙基酯將二氧化錳(0.041g，0.470mmol)加入到{[4-(2′-羥甲基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.025g，0.047mmol)[實(shí)施例213，步驟b]的二氯甲烷[5mL]溶液中，回流3小時(shí)。將反應(yīng)物通過(guò)Celite過(guò)濾，蒸發(fā)。將粗殘余物溶于無(wú)水THF[2mL]，在室溫下加入到(二乙氧基-磷酰甲基)-膦酸二乙基酯(0.011g，0.061mmol)與氫化鈉(0.003g，0.056mmol)的THF[2mL]溶液中，攪拌0.5小時(shí)。加入1N NaOH/MeOH(1/1)溶液[10mL]，將粗產(chǎn)物用乙醚萃取，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.019g，57％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C30H37N2O7PS3664.15；實(shí)測(cè)值664.8.
d)E/Z-{2-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-乙烯基}-膦酸三氟乙酸鹽將三甲代甲硅烷基碘(0.058g，0.271mmol)滴加到E/Z-(2-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-乙烯基)-膦酸二乙基酯(0.018g，0.027mmol)[實(shí)施例213，步驟c]的二氯甲烷[3mL]溶液中，加熱至45℃達(dá)3小時(shí)。將反應(yīng)物用水
猝滅，攪拌0.5小時(shí)，蒸發(fā)。將粗殘余物溶于甲醇，加入20％HCl[.020mL]，攪拌1小時(shí)，濃縮。反應(yīng)混合物經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.005g，28％)，為固體。1H-NMR(MeOD)δ8.28(s，1H)，8.04(t，1H，J＝7.6Hz)，7.83(s，1H)，7.71(t，1H，J＝7.6Hz)，7.63(m，1H)，7.52(m，1H)，7.38(m，1H)，7.26(m，1H)，7.18(t，1H，J＝7.2Hz)，6.92(t，1H，J＝17.6Hz)，6.34(t，1H，J＝18.0Hz)，2.74(s，3H)，2.02-1.95(d，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H21N2O5PS3508.04；實(shí)測(cè)值509.1.
實(shí)施例2142-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲硫基]-琥珀酸三氟乙酸鹽 a)甲磺酸3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲基酯在室溫下，將甲磺酰氯(0.027g，0.241mmol)加入到{[4-(2′-羥甲基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.100g，0.188mmol)[實(shí)施例213，步驟b]與三乙胺(0.048g，0.470mmol)的THF[3mL]溶液中，攪拌18小時(shí)。殘余物的柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)得到標(biāo)題化合物(0.017g，14％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N2O7S4610.09；實(shí)測(cè)值611.8.
b)2-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲硫基]-琥珀酸三氟乙酸鹽在40℃下，將2-巰基-琥珀酸(0.004g，0.028mmol)加入到甲磺酸3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲基酯(0.017g，0.028mmol)[實(shí)施例214，步驟a]與三乙胺(0.009g，0.084mmol)的二氯甲烷
溶液中，攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)。將粗反應(yīng)物溶于二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[2mL]，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.005g，42％)，為固體。
1H-NMR(MeOD)δ8.31(s，1H)，8.06(t，1H，J＝8.0Hz)，7.83(d，1H，J＝16.8Hz)，7.70(q，1H，J＝6.8Hz)，7.57(t，1H，J＝7.2Hz)，7.29-7.21(m，3H)，3.60-3.48(m，1H)，3.54(s，3H)，3.37-3.34(m，1H)，2.70(s，3H)，2.68-2.57(m，1H)，2.31-2.14(m，1H)，1.97(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H24N2O6S4564.05；實(shí)測(cè)值565.1.
實(shí)施例215[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基]-乙酸三氟乙酸鹽
a){3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基}-乙酸叔丁基酯在室溫下，將溴乙酸叔丁酯(0.013mL，0.085mmol)滴加到{[4-(4′-羥基-2′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.077mmol)[實(shí)施例124，步驟b]與碳酸鉀(0.021g，0.154mmol)的丙酮[1mL]溶液中，攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)物蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.011g，28％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H38N2O7S3646.18；實(shí)測(cè)值646.8.
b)[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基]-乙酸三氟乙酸鹽在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[2mL]加入到{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基}-乙酸叔丁基酯(0.020g，0.030mmol)[實(shí)施例215，步驟a]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物(0.011g，75％)，為固體。1H-NMR(MeOD)δ 8.36(s，1H)，8.01(md，1H，J＝7.6Hz)，7.81(m，1H)，7.72(m，1H)，7.51(d，1H，J＝7.6Hz)，7.26(d，1H，J＝8.0Hz)，6.74(s，2H)，4.67(s，2H)，2.73(s，3H)，1.96(s，6H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H22N2O5S3490.07；實(shí)測(cè)值491.2.
實(shí)施例2164-{4′-胍基-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)[(4-{4′-氨基-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將氯甲酸4-硝基苯基酯(0.047g，0.232mmol)加入到{2-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(0.150g，0.222mmol)[實(shí)施例294，步驟f]與吡啶(0.018g，0.232mmol)的二氯甲烷[5mL]溶液中，在室溫下攪拌1小時(shí)。加入N-1-苯基-乙烷-1，2-二胺(0.060g，0.444mmol)，將反應(yīng)物攪拌另外1小時(shí)。將反應(yīng)物蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.150g，81％)，為固體。將該固體溶于THF[1mL]，加入四丁基氟化銨
。將反應(yīng)物加熱至50℃，攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)物蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含50％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.079g，64％)，為固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C33H38N6O5S3694.21；實(shí)測(cè)值694.9.
b)[(4-{4′-(N′， N″-二-叔丁氧羰基-胍基)-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將1，3-雙-叔丁氧羰基-2-甲基-2-假硫脲(0.033g，0.114mmol)加入到[(4-{4′-氨基-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯[實(shí)施例216，步驟a]的甲醇[1mL]與1滴乙酸的溶液中。將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)。將反應(yīng)物蒸發(fā)，殘余物經(jīng)過(guò)柱色譜純化(含25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.072g，68％)，為固體。
ESI-MS(m/z) 計(jì)算值C44H56N8O9S3936.33；實(shí)測(cè)值936.9.
c)4-{4′-胍基-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基}-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽在室溫下，將二氯甲烷/三氟乙酸(1/1)溶液[1mL]加入到[(4-{4′-(N′，N″-二-叔丁氧羰基-胍基)-6′-甲基-2′-[3-(2-苯氨基-乙基)-脲基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基)-亞氨基-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(0.007g，0.007mmol)[實(shí)施例216，步驟b]中，攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，經(jīng)由反相HPLC純化[乙腈/水(0.01％TFA)]，得到標(biāo)題化合物，為固體。1H-NMR(MeOD)δ8.35(s，1H)，8.05(md，1H，J＝8.0Hz)，7.95(m，1H)，7.73(t，1H，J＝8.0Hz)，7.57(m，1H)，7.39(m，2H)，7.14(m，3H)，7.05(m，1H)，3.37(m，4H)，2.71(s，3H)，2.03(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H32N8O3S3636.18；實(shí)測(cè)值637.1.
實(shí)施例2174-(3′-甲酰氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a){[4-(3′-氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照與實(shí)施例1，步驟c相同的工藝，3-氨基-苯基代硼酸(27mg，0.2mmol)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.1mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(29mg，0.025mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(400μL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)的反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含30％EtOAc的己烷)后得到35mg(70％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H25N3O4S3503.6；實(shí)測(cè)值503.9，404.1(M-Boc).
b)4-(3′-甲酰氨基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{[4-(3′-氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.06mmol，如實(shí)施例217，步驟a中制備的)溶于甲酸(5mL)，使反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。在真空中除去甲酸，將殘余物在室溫下用三氟乙酸(50％DCM溶液)處理1小時(shí)。在真空中濃縮混合物，所得殘余物用C18-HPLC純化(含10-80％CH3CN的H2O(0.1％TFA)，25min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.34(s，1H)，8.33(s，1H)，8.29(t，1H，J＝1.6Hz)，8.11-8.13(m，1H)，7.96-8.03(m，2H)，7.70(t，1H，J＝7.7Hz)，7.42-7.50(m，3H)，2.75(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H17N3O3S3432.1(M+H)；實(shí)測(cè)值432.1.
實(shí)施例2183′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-聯(lián)苯-3-羧酸酰胺三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例1步驟c相同的工藝，3-氨甲酰基-苯基代硼酸(33mg，0.2mmol)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.1mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(29mg，0.025mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(400μL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)的反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含30％EtOAc的己烷)后得到38mg(72％)白色泡沫，質(zhì)量與Boc-保護(hù)的標(biāo)題中間體一致。ESI-MS(m/z)C24H25N3O5S3計(jì)算值531.7；實(shí)測(cè)值531.9，432.1(M-Boc)。將該中間體在室溫下用三氟乙酸(50％DCM溶液)處理1小時(shí)，用C18-HPLC純化(含10-65％CH3CN的H2O(0.1％TFA)溶液，30min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(25mg，66％)。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.34(s，1H)，8.33(t，1H，J＝1.9Hz)，8.19(t，1H，J＝1.9Hz)，8.00-8.05(m，2H)，7.85-7.88(m，2H)，7.73(t，1H，J＝7.8Hz)，7.62(t，1H，J＝7.8Hz)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H17N3O3S3432.2(M+H)；實(shí)測(cè)值432.2.
實(shí)施例2194-(4′-氟-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例1步驟c相同的工藝，4-氟-2-甲基-苯基代硼酸(35mg，0.2mmol)、{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(50mg，0.1mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(29mg，0.025mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(400μL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，1.2mL)的反應(yīng)在純化(制備型TLC，1∶3 EtOAc/己烷，2000μSiO2平板)后得到62mg{[4-(4′-氟-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯，為黃褐色油。NMR(CDCl3；400MHz)δ8.02(s，1H)，7.91-7.97(m，2H)，7.51-7.57(m，2H)，7.14(dd，1H，J＝8.4，5.8Hz)，6.92-7.00(m，2H)，2.57(s，3H)，2.20(s，3H)，1.51(s，9H)。將該中間體在室溫下用三氟乙酸(50％DCM溶液)處理1小時(shí)，用C18-HPLC純化(含20-70％ CH3CN的H2O(0.1％TFA)，30min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(30mg，60％)。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.32(s，1H)，8.03(dt，1H，J＝7.0，1.9Hz)，7.94-7.96(m，1H)，7.64-7.70(m，2H)，7.22(dd，1H，J＝8.6，5.8Hz)，6.98-7.09(m，2H)，2.72(s，3H)，2.22(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H17FN2O2S3421.2(M+H)；實(shí)測(cè)值421.2.
實(shí)施例2204-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽
a)3-甲基-4-(4， 4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺將經(jīng)過(guò)烘箱干燥的裝有攪拌桿的圓底燒瓶中加入4-溴-3-甲基苯胺(5.7gm，31mmol)、4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(13.3mL，92mmol，Aldrich Chemical Company)和PdCl2(PPh3)2(2.2gm，3.1mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)。將燒瓶用橡膠隔膜密封，用氬凈化，然后裝入無(wú)水二噁烷(100mL)和三乙胺(26mL)。將反應(yīng)混合物在95℃下劇烈攪拌16小時(shí)。冷卻至室溫后，在真空中除去二噁烷，使殘余物在EtOAc(200mL)與水(100mL)之間分配。將有機(jī)層用飽和NaHCO3(2×75mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的快速色譜純化，得到產(chǎn)物(3.3gm，46％)，為黃褐色油。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ7.61-7.64(m，1H)，6.48-6.58(m，2H)，3.60-3.90，(br s，2H)，2.49(s，3H)，1.34(s，12H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C13H20BNO2234.1(M+H)；實(shí)測(cè)值234.2b){4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照與實(shí)施例1步驟c相同的工藝，3-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺(432mg，1.86mmol，如實(shí)施例220，步驟a中制備的)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(610mg，1.24mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(215mg，0.186mmol，StremChemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(5mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，15mL)的反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含30％至50％ EtOAc的己烷)后得到403mg(63％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ8.00(s，1H)，7.87-7.92(m，2H)，7.47-7.55(m，2H)，6.98(d，1H，J＝7.9Hz)，6.55-6.61(m，2H)，3.65-3.82(br s，2H)，2.53(s，3H)，2.15(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O4S3517.7；實(shí)測(cè)值517.7，418.1(M-Boc).
c)4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(32mg，0.06mmol，如實(shí)施例220，步驟b中制備的)在室溫下用三氟乙酸(50％DCM溶液)處理1小時(shí)，用C18-HPLC純化(含20-70％CH3CN的H2O(0.1％TFA)，30min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(20mg，55％)。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ 8.35(s，1H)，7.99-8.05(m，2H)，7.67-7.73(m，2H)，7.28(d，1H，J＝8.1Hz)，7.10-7.17(m，2H)，2.74(s，3H)，2.27(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H19N3O2S3418.1(M+H)；實(shí)測(cè)值418.1.
實(shí)施例2214-[2′-甲基-4′-(2-嗎啉-4-基-乙氨基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)(4-溴-3-甲基-苯基)-(2-嗎啉-4-基-乙基)-胺將4-溴-3-甲基苯胺(0.96gm，5.14mmol)、4-(2-氯-乙基)-嗎啉(1gm，5.4mmol)、K2CO3(1.5gm，10.8mmol)和NaI(0.81gm，5.4mmol)懸浮在DMSO(10mL)中，將混合物在回流下劇烈攪拌12小時(shí)。將混合物冷卻，用EtOAc稀釋?zhuān)蔑柡蚇aHCO3洗滌。將有機(jī)層用另外一部分NaHCO3和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的快速色譜純化(Biotage Flash System-40M SiO2柱，含10％EtOAc的己烷至100％EtOAc)，得到產(chǎn)物(500mg，31％)，為黃褐色油。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ7.36(d，1H，J＝8.6Hz)，6.61(d，1H，J＝2.8Hz)，6.43(dd，1H，d，8.6，2.8Hz)，4.36(br s，1H)，3.80(t，4H，J＝4.6Hz)，3.20(t，2H，J＝5.8Hz)，2.69(t，2H，J＝6.0Hz)，2.54(t，4H，J＝4.4Hz)，2.40(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值·C13H19BrN2O299.2；實(shí)測(cè)值299.1，301.1.
b)4-[2′-甲基-4′-(2-嗎啉-4-基-乙氨基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照與實(shí)施例220，步驟a相同的工藝，(4-溴-3-甲基-苯基)-(2-嗎啉-4-基-乙基)-胺(440mg，1.9mmol，如實(shí)施例221，步驟a中制備的)、4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(13.3mL，92mmol，Aldrich Chemical Company)、PdCl2(PPh3)2(2.2gm，3.1mmol，StremChemicals Inc，Newburyport，MA)、Et3N(1.6mL，11.4mmol)和二噁烷(5mL)的反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含30％EtOAc的己烷)后得到520mg(79％)黃褐色油。ESI-MS(m/z)C19H31BN2O3計(jì)算值347.3(M+H)；實(shí)測(cè)值347.2。使上述代硼酸酯(520mg，1.5mmol)按照實(shí)施例1步驟c所用工藝與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(368mg，0.75mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(217mg，0.19mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(3mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，9mL)反應(yīng)，純化(SiO2，快速洗脫含EtOAc的己烷)后得到400mg(85％)(亞氨基-{4-[2′-甲基-4′-(2-嗎啉-4-基-乙氨基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯。ESI-MS(m/z)C30H38N4O5S3計(jì)算值630.8；實(shí)測(cè)值630.9，531.1(M-Boc)。將這種中間體用三氟乙酸處理，用C18-HPLC純化(如實(shí)施例220，步驟c中)，得到312mg(78％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ8.31(s，1H)，7.90-7.95(m，2H)，7.60-7.65(m，2H)，7.04(d，1H，J＝8.1Hz)，6.61-6.66(m，2H)，3.95(br s，4H)，3.61(t，2H，J＝6.3Hz)，3.41(m，6H)，2.71(s，3H)，2.19(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H30N4O3S3531.2(M+H)；實(shí)測(cè)值531.1，266.2(M2+).
實(shí)施例2223′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-羧酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例220，步驟a相同的工藝，4-溴-3-甲基-苯甲酸甲基酯(1.75gm，7.6mmol)、4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(3.3mL，23mmol，Aldrich Chemical Company)、PdCl2(PPh3)2(530mg，0.76mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Et3N(6.3mL，46mmol)和二噁烷(30mL)的反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含30％EtOAc的己烷)后得到1.2gm澄清的油(79％)。使上述代硼酸酯(220mg，0.8mmol)按照實(shí)施例1步驟c所用工藝與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.8mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(58mg，0.05mmol，Strem ChemicalsInc，Newburyport，MA)、Na2CO3(1.6mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.4mL)反應(yīng)，純化(制備型TLC，1∶3 EtOAc/己烷，2000μ SiO2平板)后得到3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-羧酸甲基酯。ESI-MS(m/z)C26H28N2O6S3計(jì)算值560.7；實(shí)測(cè)值461.1(M-Boc)。將上述苯甲酸甲基酯(45mg，0.08mmol)用1N NaOH/MeOH(1∶1)處理，在50℃下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用乙酸中和，在真空中除去溶劑，對(duì)殘余物進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ 8.35(s，1H)，8.06-8.11(m，1H)，8.00-8.03(m，2H)，7.95(m，1H)，7.72-7.76(m，2H)，7.35(d，1H，J＝7.9Hz)，2.75(s，3H)，2.30(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N2O4S3447.1(M+H)；實(shí)測(cè)值447.1.
實(shí)施例2232-氨基-N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-乙酰胺三氟乙酸鹽 向{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(80mg，0.15mmol，如實(shí)施例220，步驟b中制備的)的DCM(2.2mL)溶液加入Boc-gly-N-羥基琥珀酰亞胺酯(126mg，0.5mmol)和三乙胺(69μL，0.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜(16h)。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋?zhuān)盟惋柡蚇aHCO3萃取。分離有機(jī)層，用MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮，得到殘余物，用制備型TLC純化(1∶3 EtOAc/己烷，1000μSiO2平板)，得到100mg(99％)黃褐色玻璃狀固體。ESI-MS(m/z)C31H38N4O7S3計(jì)算值674.8(M+)；實(shí)測(cè)值674.8，575.0，519.0，475.1。將這種中間體用三氟乙酸處理，用C18-HPLC純化(同實(shí)施例220，步驟c)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，收率78％。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.34(s，1H)，7.99-8.05(m，2H)，7.67-7.72(m，2H)，7.57(m，2H)，7.22(d，1H，J＝8.1Hz)，3.90(s，2H)，2.74(s，3H)，2.25(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C21H22N4O3S3475.1(M+H)；實(shí)測(cè)值475.1.
實(shí)施例2244-(4′-羥基-2′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)3，5-二甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯酚按照實(shí)施例220，步驟a中所述的工藝，4-溴-3，5-二甲基-苯酚(1.5gm，7.6mmol)、4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(3.3mL，23mmol，Aldrich Chemical Company)、PdCl2(PPh3)2(530mg，0.76mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Et3N(634μL，46mmol)和二噁烷(30mL)的反應(yīng)在色譜純化(50gm，二氧化硅SPE柱)后得到3.4gm黃褐色玻璃狀固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ6.4(s，2H)，2.3(s，6H)，1.4(s，12H).
b){[4-(4′-羥基-2 ′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照與實(shí)施例1，步驟c相同的工藝，3，5-二甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯酚(355mg，0.8mmol，假定來(lái)自實(shí)施例224，步驟a的定量收率)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(100mg，0.2mmol，實(shí)施例27，步驟c)、四(三苯膦)鈀(O)(58mg，0.05mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(0.8mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.4mL)的反應(yīng)在純化(PTLC)后得到35mg(13％)標(biāo)題化合物，為黃褐色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H28N2O5S3532.7；實(shí)測(cè)值532.8，477.0，433.1(M-Boc).
c)4-(4′-羥基-2′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將{[4-(4′-羥基-2′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(15mg，0.03mmol，如實(shí)施例224，步驟c中制備的)在室溫下用三氟乙酸(50％DCM溶液)處理1小時(shí)，用C18-HPLC純化(含10-60％ CH3CN的H2O(0.1％TFA)，30min)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(8mg，53％)。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.35(s，1H)，8.00(m，1H)，7.80(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68(t，1H，J＝7.7Hz)，7.50(m，1H)，6.58(s，2H)，.67-7.73(m，2H)，7.28(d，1H，J＝8.1Hz)，7.10-7.17(m，2H)，2.73(s，3H)，1.91(s，6H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C20H20N2O3S3433.1(M+H)；實(shí)測(cè)值433.1.
實(shí)施例2253′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯-4-羧酸酰胺三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例220，步驟a相同的工藝，4-溴-3-甲基-苯甲酰胺(200mg，0.93mmol)、4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼雜環(huán)戊烷(0.41mL，2.8mmol，Aldrich Chemical Company)、PdCl2(PPh3)2(65mg，0.093mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Et3N(700μL，46mmol)和二噁烷(5mL)的反應(yīng)在色譜純化(SiO2，快速洗脫含30％EtOAc的己烷)后得到140mg褐色的油(58％)。使上述代硼酸酯(140mg，0.54mmol)按照實(shí)施例1步驟c所用工藝與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(88mg，0.18mmol，如實(shí)施例27，步驟c中制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(52mg，0.05mmol，StremChemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(0.7mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，2.1mL)反應(yīng)，純化(制備型TLC，1∶3 EtOAc/己烷，3×1000μSiO2平板)后得到{[4-(4′-氨甲?；?2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯。ESI-MS(m/z)C25H27N3O5S3計(jì)算值545.7；實(shí)測(cè)值446.1(M-Boc)。對(duì)上述苯甲酰胺(44mg，0.08mmol)進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到26mg(59％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.33(s，1H)，8.04-8.08(m，1H)，7.99-8.01(m，1H)，7.85(m，1H)，7.78(m，1H)，7.70-7.73(m，2H)，7.32(d，1H，J＝7.9Hz)，2.72(s，3H)，2.29(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H19N3O3S3446.1(M+H)；實(shí)測(cè)值446.1.
實(shí)施例226{2-[3′(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-乙基}-膦酸三氟乙酸鹽 在0℃下，將亞硫酰氯(1.7mL，23.0mmol)滴加到3-(二乙基膦酰基)丙酸(0.5gm，2.3mmol，Epsilpon Chimie，Brest，F(xiàn)rance)的DCM(2mL)懸液中。加入酰氯后，反應(yīng)混合物變?yōu)槌吻?。移去冰浴，繼續(xù)在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，所得固體貯存在高真空下備用。將如上制備的酰氯(53mg，0.232mmol)轉(zhuǎn)移至{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(40mg，0.077mmol，如實(shí)施例220，步驟b所制備的)與Et3N(900μL，0.62mmol)的DCM(2mL)溶液。將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，然后加入另外40mg酰氯。攪拌～12小時(shí)后，除去揮發(fā)物，使殘余物在EtOAc與水之間分配。將有機(jī)層用另一部分水和飽和NaHCO3洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)色譜純化(PTLC 1000μ平板)，得到33mg(61％)所需(二乙基膦酰基)丙酰胺。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H40N3O8PS3709.8(M+)；實(shí)測(cè)值709.8，610.1(M-Boc).
利用由Zhang，Z.-Y.，et al.，(J.Med.Chem.，1999，423199-3202)所報(bào)道的工藝改進(jìn)，在0℃下將上述(二乙基膦酰基)丙酰胺(33mg，0.046mmol)的DCM(2mL)溶液用碘代三甲基甲硅烷(20μL，0.14mmol)處理1小時(shí)。加入水以猝滅反應(yīng)。攪拌20分鐘后，向反應(yīng)混合物加入2.0N HCl(2mL)和MeOH(2mL)。在加入后反應(yīng)混合物變?yōu)槌吻?。繼續(xù)在室溫下攪拌3小時(shí)，在真空中除去溶劑，將所得殘余物用TFA處理，用C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到12mg(50％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ7.61-7.69(m，3H)，6.95-7.27(m，4H)，6.55(d，1H，J＝8.6Hz)，2.41-2.50(m，2H)，2.19(s，3H)，1.76(s，3H)，1.58-1.63(m，2H). ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H24N3O6PS3554.1(M+H)；實(shí)測(cè)值554.1.
實(shí)施例227{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-甲氧基}-乙酸三氟乙酸鹽 向{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(25mg，0.048mmol，如實(shí)施例220，步驟b制備的)與Et3N(33μL，0.24mmol)的DCM(1mL)溶液加入氧聯(lián)二乙酸酐(17mg，0.144mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，用TFA處理殘余物(同實(shí)施例220，步驟c)。用C18-HPLC純化，得到17mg(68％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.32(s，1H)，7.96-8.03(m，2H)，7.65-7.70(m，2H)，7.57-7.62(m，2H)，7.19(d，1H，J＝8.6Hz)，4.31(s，2H)，4.24(s，2H)，2.72(s，3H)，2.23(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H23N3O6S3534.1(M+H)；實(shí)測(cè)值534.1.
實(shí)施例2285-甲硫基-4-(2′-甲基-4′-脲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 按照Rivier et al.(J.Med.Chem.2001，44，453-467)的工藝，將異氰酸三甲代甲硅烷基酯(45μL，0.29mmol)加入到{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(43mg，0.083mmol，如實(shí)施例220，步驟b制備的)的DMF(0.2mL)溶液中。將反應(yīng)物在室溫下攪拌3天。在真空中除去DMF，用TFA處理殘余物(同實(shí)施例220，步驟c，但是在去保護(hù)混合物中加入1％間-甲酚)。將粗反應(yīng)混合物濃縮至油性殘余物，用Et2O研制，以除去間-甲酚。用C18-HPLC純化，得到10mg(25％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.34(s，1H)，7.96-8.04(m，2H)，7.65-7.70(m，2H)，7.31.738(m，2H)，7.13(d，1H，J＝7.9Hz)，2.74(s，3H)，2.22(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H20N4O3S3461.1(M+H)；實(shí)測(cè)值461.1.
實(shí)施例2292-氨基-4-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-丁酸雙-三氟乙酸鹽
按照實(shí)施例223所述相同工藝，但是用Boc-L-glu(OSu)-OtBu代替Boc-gly-N-羥基琥珀酰亞胺酯，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，收率75％。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.34(s，1H)，7.97-8.03(m，2H)，7.66-7.71(m，2H)，7.52-7.56(m，2H)，7.18(d，1H，J＝8.1Hz)，4.12(t，1H，J＝6.5Hz)，2.73(s，3H)，2.71-2.75(m，2H)，2.24(s，3H)，2.24-2.38(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H26N4O5S3547.1(M+H)；實(shí)測(cè)值547.1.
實(shí)施例2306-[5-(2-氧代-六氫-噻吩并[3，4-d]咪唑-6-基)-戊酰氨基]-己酸[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-酰胺三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例223所述相同工藝，但是用N-(+)-生物素基-6-氨基己酸N-琥珀酰亞氨基酯代替Boc-gly-N-羥基琥珀酰亞胺酯，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，收率11％。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.99-8.02，(m，1H)，7.95-7.97(m，1H)，7.66-7.69(m，2H)，7.49-7.53(m，2H)，7.17(d，1H，J＝8.4Hz)，4.47(dd，1H，J＝7.9，4.2Hz)，4.27(dd，1H，J＝7.8，4.2Hz)，3.15-3.22(m，4H)，2.91(dd，1H，J＝12.6，4.9Hz)，2.73(s，3H)，2.41(t，2H，J＝7.6Hz)，2.23(s，3H)，2.19(t，2H，J＝7.4Hz)，1.35-1.80(m，12H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C35H44N6O5S4757.2(M+H)；實(shí)測(cè)值757.3實(shí)施例2314-氨基-4-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-丁酸雙-三氟乙酸鹽
按照實(shí)施例223所述相同工藝，但是用Boc-L-glu(OtBu)-OSu代替Boc-gly-N-羥基琥珀酰亞胺酯，得到標(biāo)題化合物，為白色固體，收率64％。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.34(s，1H)，7.99-8.05(m，2H)，7.67-7.73(m，2H)，7.56-7.61(m，2H)，7.23(d，1H，J＝8.1Hz)，4.10(t，1H，J＝6.0Hz)，2.74(s，3H)，2.58(t，2H，J＝7.4Hz)，2.26(s，3H)，2.20-2.35(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H26N4O5S3547.1(M+H)；實(shí)測(cè)值547.1.
實(shí)施例2322-氨基-N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯--基]-4-甲磺?；?丁酰胺雙-三氟乙酸鹽 在閃爍小瓶中，將Boc-L-甲硫氨酸砜(124mg，0.44mmol，Chem-Impex，International，INC.，Wood Dale，IL)溶于DMF(2mL)。向該溶液加入HBTU(159mg，0.42mmol)、HOBT(60mg，0.44mmol)和DIEA(400μL，2.1mmol)。劇烈攪拌10分鐘后(溶液變?yōu)榈S色)，將混合物轉(zhuǎn)移至裝有攪拌桿和{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(73mg，0.14mmol，如實(shí)施例220，步驟b制備的)的反應(yīng)小瓶中。將所得混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。進(jìn)行與實(shí)施例223所述類(lèi)似的處理，繼之以TFA處理和RP-HPLC純化，得到58mg(72％)標(biāo)題化合物，為雙-三氟乙酸鹽。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.97-8.03(m，2H)，7.66-7.71(m，2H)，7.57-7.62(m，2H)，7.23(d，1H，J＝8.1Hz)，4.24(t，1H，J＝6.4Hz)，3.25-3.39(m，2H)，3.06(s，3H)，2.72(s，3H)，2.40-2.56(m，2H)，2.25(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H28N4O5S4581.1(M+H)；實(shí)測(cè)值581.0.
實(shí)施例2334-[4′-(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)2-甲硫基-4，5-二氫-咪唑-1-羧酸叔丁基酯將4，5-二氫-2-甲硫基咪唑氫碘化物(3gm，12mmol，AldrichChemical Company)、二碳酸二叔丁酯(5.4gm，24.8mmol)、Et3N(5mL，36mmol)和DMAP(70mg，0.57mmol)溶于DCM(35mL)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用更多的DCM稀釋?zhuān)盟惋柡蚇aHCO3洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過(guò)濾，在真空中蒸發(fā)，得到1gm(38％)標(biāo)題化合物，為白色結(jié)晶性固體。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ3.82-3.86(m，4H)，2.39(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C9H16N2O2S217.1(M+H)；實(shí)測(cè)值216.8，161.0，117.2(M-Boc).
b)4-[4′-(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照Mundla et al.(Tetrahedron Lett.2000，41，6563-6566)的工藝，將{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(18mg，0.035mmol，如實(shí)施例220，步驟b制備的)和2-甲硫基-4，5-二氫-咪唑-1-羧酸叔丁基酯(23mg，0.1mmol，如實(shí)施例233，步驟a制備的)溶于MeOH/乙酸混合物(10∶1，1mL)。將反應(yīng)混合物在55℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮至干。將所得殘余物用TFA處理，用C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到12mg(70％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.00-8.05(m，2H)，7.66-7.73(m，2H)，7.19-7.33(m，3H)，3.84(s，4H)，2.72(s，3H)，2.27(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H23N5O2S3486.1(M+H)；實(shí)測(cè)值486.1.
實(shí)施例2342-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-甲硫基}-乙酰胺三氟乙酸鹽 a)({4-[4′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將{4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(110mg，0.21mmol，如實(shí)施例220，步驟b制備的)、溴乙酰溴(19μL，0.21mmol)和Et3N(33μL，0.23mmol)溶于氯仿(2mL)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時(shí)。由于TLC表明有少量苯胺剩余在反應(yīng)混合物中，加入4μL溴乙酰溴，將反應(yīng)物攪拌另外2小時(shí)。在真空中除去揮發(fā)物，使殘余物在EtOAc與20％檸檬酸之間分配。將有機(jī)層用飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，得到135mg(100％)粗產(chǎn)物，為黃褐色固體。用PTLC純化該產(chǎn)物(1∶1 EtOAc/己烷，2×1500μSiO2平板)，得到標(biāo)題化合物，收率89％，為淡黃色固體。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ8.24(s，1H)，8.00(dt，1H，J＝7.3，1.8Hz)，7.96(br s，1H)，7.92(m，1H)，7.55-7.62(m，2H)，7.41-7.47(m，2H)，7.19(d，1H，J＝8.1Hz)，4.09(s，2H)，2.52(s，3H)，2.25(s，3H)，1.54(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O4S3517.7；實(shí)測(cè)值517.7，418.1(M-Boc).
b)2-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-甲硫基}-乙酰胺三氟乙酸鹽向({4-[4′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(44mg，0.069mmol，如實(shí)施例234，步驟a制備的)的MeOH(0.6mL)溶液加入2-巰基乙酰胺(100μL 10％甲醇溶液，Maybridge plc)和Et3N(30μL，0.21mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5小時(shí)，然后在真空中濃縮。將殘余物用TFA處理，用C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到32mg(84％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.32(s，1H)，7.99-8.02(m，1H)，7.95-7.97(m，1H)，7.66-7.68(m，2H)，7.51-7.55(m，2H)，7.17(d，1H，J＝8.1Hz)，3.48(s，2H)，3.37(s，2H)，2.72(s，3H)，2.23(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H25N3O5S4664.1(M+H)；實(shí)測(cè)值564.1.
實(shí)施例2352-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基氨甲?；鵠-甲硫基}-琥珀酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例234，步驟b所述相同的工藝，({4-[4′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(17mg，0.027mmol，如實(shí)施例234，步驟a制備的)、巰基琥珀酸鹽(6mg，0.04mmol)、Et3N(12μL，0.08mmol)和MeOH(3mL)的反應(yīng)在RP-HPLC純化后得到12mg(75％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.34(s，1H)，7.99-8.00-8.05(m，1H)，7.97-7.99(m，1H)，7.68-7.70(m，2H)，7.54-7.58(m，2H)，7.19(d，1H，J＝7.9Hz)，3.85(dd，1H，J＝9.5，5.6Hz)，3.56 and 3.69(AB quartet，2H，J＝15.1Hz)，2.97(dd，1H，J＝17.2，9.8Hz)，2.76(dd，1H，J＝17.0，5.6Hz)，2.74(s，3H)，2.25(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H25N3O7S4608.1(M+H)；實(shí)測(cè)值608.1.
實(shí)施例2364-(4′-胍基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a){[4-(4′-氨基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例295，步驟h的工藝，4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺(350mg，1.5mmol，如實(shí)施例135，步驟a制備的)、{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(1.0gm，2.27mmol，如實(shí)施例140，步驟a制備的)、四(三苯膦)鈀(O)(433mg，0.375mmol，Strem Chemicals Inc，Newburyport，MA)、Na2CO3(6mL，2M)和甲苯/EtOH混合物(2∶1，18mL)在80℃下的24小時(shí)反應(yīng)在純化(SiO2，快速洗脫含5％至50％EtOAc的己烷)后得到250mg(30％)標(biāo)題化合物，為黃色固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H26N4O6S3563.1(M+H)；實(shí)測(cè)值562.8，463.1(M-Boc).
b)({4-[4′-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照先前公布的工藝(Bergerson et al.，J.Org Chem.1987，52，1700-1703；WO 99/20608)，將氯化汞(II)(190mg，0.7mmol)一次性加入到攪拌著的{[4-(4′-氨基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(130mg，0.23mmol，如實(shí)施例236，步驟a制備的)、N，N′-雙(叔丁氧羰基)-S-甲基異硫脲(203mg，0.7mmol，Aldrich Chemical Company)與Et3N(173μL，1.15mmol)在DCM(3mL)中的混合物中。將混合物在室溫下攪拌24小時(shí)，然后用快速色譜純化(Biotage Flash System-40M SiO2柱，含10％至30％EtOAc的己烷)，得到145mg(78％)標(biāo)題化合物，為澄清的油。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C35H44N6O10S3805.2(M+H)；實(shí)測(cè)值804.7，704.9，604.9，505.1(M-3xBoc).
c)4-(4′-胍基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將({4-[4′-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(10mg，12.4μmol，如實(shí)施例236，步驟b制備的)如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理和用C18-HPLC純化，得到1.1mg(17％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.34(s，1H)，8.04(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.92-7.94(m，1H)，7.72-7.79(m，2H)，7.62(ddd，1H，J＝7.7，1.6，1.2Hz)，7.60(dd，1H，J＝2.1，0.7Hz)，2.72(s，3H)，2.18(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C20H20N6O4S3505.1(M+H)；實(shí)測(cè)值505.1.
實(shí)施例2374-(6′-氨基-4′-胍基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽
a){[4-(2′，4′-二氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{2-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(1000mg，1.48mmol，實(shí)施例294，步驟f)溶于THF(25mL)。向其中加入TBAF(1M，1.62mL，1.62mmol)，將反應(yīng)物溫?zé)嶂?0℃，攪拌3小時(shí)。加入另外的TBAF(1.48mL，1.48mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于EtOAc，用水洗滌若干次(5次)。合并有機(jī)層，干燥(MgSO4)，在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(800mg，100％)。1H-NMR(CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.95-7.93(m，1H)，7.89-7.88(m，1H)，7.59-7.53(m，2H)，6.08(m，1H)，5.99(m，1H)，2.55(s，3H)，1.85(s，3H)，1.52(s，9H).
b)4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)]-}-{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(2′，4′-二氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(342mg，0.64mmol，實(shí)施例237，步驟a)溶于MeOH(4mL)和乙酸(200μL)。向其中緩慢加入1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(203mg，0.70mmol)的MeOH懸液，將反應(yīng)物在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，繼之以快速柱色譜純化(SiO2)(含40％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(235mg，47％)，為白色固體。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C35H46N6O8S3775.3(M+1)；實(shí)測(cè)值774.8.
c)4-(6′-氨基-4′-胍基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)]-}-{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(10mg，12.9μmol，如實(shí)施例237，步驟b制備的)如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理和用C18-HPLC純化，得到3mg(50％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.35(s，1H)，8.04(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.1Hz)，7.92-7.95(m，1H)，7.75(t，1H，J＝7.8Hz)，7.58(dt，1H，J＝7.6，1.1Hz)，6.65-6.63(m，2H)，2.71(s，3H)，1.94(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H22N6O2S3475.1(M+H)；實(shí)測(cè)值475.1.
實(shí)施例2383-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸甲基酯雙-三氟乙酸鹽 a)({4-[6′-(2-羥基-乙酰氨基)-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯向{[4-(6′-氨基-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(216mg，0.384mmol，如實(shí)施例295，步驟h制備的)的DCM(2mL)溶液加入DIEA(212μL，1.15mmol)和乙酰氧基乙酰氯(54mL，0.5mmol)。將溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋?zhuān)蔑柡蚇aHCO3、水和鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮，得到256mg粗油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。ESI-MS(m/z)C28H30N4O9S3計(jì)算值663.1(M+H)；實(shí)測(cè)值662.7，563.0(M-Boc)。向上述所得粗中間體的MeOH(2.5mL)溶液加入1N NaOH(2.5mL)，將混合物在室溫下攪拌45分鐘，此時(shí)TLC符合完全轉(zhuǎn)化。將反應(yīng)混合物用乙酸中和，在真空中濃縮，使殘余物在EtOAc與飽和NaHCO3之間分配。將有機(jī)層用水和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮，得到220mg(92％，兩步粗收率)標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C26H28N4O8S3621.1(M+H)；實(shí)測(cè)值620.7，521.0(M-Boc).
b)({4-[4′-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-6′-(2-羥基-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯向({4-[6′-(2-羥基-乙酰氨基)-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(220mg，.354mmol，如實(shí)施例237，步驟a制備的)的EtOH(2.2mL)溶液加入NH4Cl溶液(1.1mL，3.2M，3.54mmol)。將混合物在50℃下劇烈攪拌30分鐘。加入鐵粉(100mg，1.77mmol)，將混合物加熱至80℃達(dá)3.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾(0.2μ，Wheaton注射濾器)，濃縮濾液得到固體，使其在EtOAc與1N Na2CO3之間分配。將有機(jī)層用另一部分Na2CO3洗滌，干燥(MgSO4)，過(guò)濾，濃縮，得到粗的所需產(chǎn)物。用PTLC純化(4×1500μ平板，含5％MeOH的DCM)，得到58mg所需苯胺。ESI-MS(m/z)C26H30N4O6S3計(jì)算值591.1(M+H)；實(shí)測(cè)值591.0，491.0(M-Boc)。向這種苯胺(55mg，0.09mmol)的MeOH/AcOH(10∶1，5mL)溶液加入N，N′-雙(叔丁氧羰基)-S-甲基異硫脲(78mg，0.27mmol，Aldrich ChemicalCompany)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?0℃，攪拌3小時(shí)。在真空中濃縮混合物，得到固體，經(jīng)過(guò)PTLC純化(2×1000μ平板，1∶1 EtOAc/己烷)，得到45mg(60％)標(biāo)題化合物，為澄清的油。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ11.60(s，1H)，10.27(s，1H)，8.20(m，2H)，8.04(d，1H，J＝6.7Hz)，7.90(br s，1H)，7.64(t，1H，J＝7.8Hz)，7.40-7.45(m，2H)，4.42(br s，1H)，3.84和3.99(AB四重峰，2H，J＝15.4Hz)，2.55(s，3H)，1.93(s，3H)，1.57(s，9H)，1.53(s，9H)，1.48(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C37H48N6O10S3833.2(M+H)；實(shí)測(cè)值832.8，732.8，632.9，533.1.
c)甲磺酸{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基}-甲基酯在0℃下，向({4-[4′-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-6′-(2-羥基-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(40mg，48μmol，如實(shí)施例238，步驟b制備的)與二異丙基乙胺(100μL，192μmol)的DCM(1mL)溶液加入甲磺酰氯(10μL，130μmol)。將溶液在0℃下攪拌30分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，殘余物經(jīng)過(guò)色譜純化(PTLC，1∶1EtOAc/己烷，1000μSiO2平板)，得到40mg(97％)所需標(biāo)題化合物，為玻璃狀固體。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C38H50N6O12S4911.2(M+H)；實(shí)測(cè)值910.7，810.8，710.8，611.1.
d)3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸甲基酯雙-三氟乙酸鹽將3-巰基丙酸甲酯(大為摩爾過(guò)量)加入到(甲磺酸{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-(N，N′-雙-叔丁氧羰基)-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-甲基酯(7mg，7.7μmol，如實(shí)施例238，步驟c制備的)與Et3N(20μL)的DCM(200μL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，然后在真空中濃縮。將所得殘余物如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理和用C18-HPLC純化，得到3mg(45％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.32(s，1H)，8.08(ddd，1H，J＝8.0，2.0，1.2Hz)，7.92(t，1H，J＝1.6Hz)，7.74(t，1H，J＝8.0Hz)，7.57(dt，1H，J＝7.6，1.6Hz)，7.45(d，1H，J＝2.3Hz)，7.20(dd，1H，J＝2.3，0.7Hz)，3.67(s，3H)，3.05和3.10(AB四重峰，2H，J＝15.5Hz)，2.73(s，3H)，2.40-2.44(m，2H)，2.27-2.33(m，2H)，2.08(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N6O5S4635.1(M+H)；實(shí)測(cè)值635.1.
實(shí)施例2393-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸雙-三氟乙酸鹽 在室溫下，將3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-甲硫基}-丙酸甲基酯雙-三氟乙酸鹽(5.7mg，6.3μmol，如實(shí)施例238，步驟d制備的)的MeOH(200μL)溶液用1N NaOH(200μL)處理2小時(shí)。將反應(yīng)物用乙酸酸化，粗產(chǎn)物用C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到4mg(75％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3CN；400MHz)δ9.67(br s，1H)，9.44(br s，2H)，8.36(s，1H)，8.19(s，1H)，8.12(ddd，1H，J＝8.1，1.9，1.1Hz)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.75-7.81(m，3H)，7.55(dt，1H，J＝7.7，1.5Hz)，7.10(d，1H，J＝1.9Hz)，6.84(br s，4H)，3.01和3.08(AB四重峰，2H，J＝16.2Hz)，2.69(s，3H)，2.24-2.36(m，4H)，2.04(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C25H28N6O5S4621.1(M+H)；實(shí)測(cè)值621.0.
實(shí)施例2406-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽 向{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(23mg，0.044mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)與Et3N(50μL，0.36mmol)的DCM(2mL)溶液加入6-異氰酰-己酸乙酯(40μL，0.22mmol)，將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋?zhuān)缓笥盟惋柡蚇aHCO3洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮。將所得粗產(chǎn)物溶于MeOH(3mL)，在室溫下用1N NaOH(3mL)處理2小時(shí)。將反應(yīng)物用乙酸酸化，在真空中濃縮，對(duì)殘余物進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ 8.30(s，1H)，8.05(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.89(t，1H，J＝1.6Hz)，7.71(t，1H，J＝7.8Hz)，7.54-7.58(m，1H)，7.43(d，1H，J＝7.7Hz)，7.28(t，1H，J＝7.8Hz)，7.10-7.14(m，1H)，2.97(td，2H，J＝6.8，2.2Hz)，2.72(s，3H)，2.26(t，2H，J＝7.4Hz)，2.00(s，3H)，1.51-1.59(m，2H)，1.19-1.36(m，4H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N4O5S3575.1(M+H)；實(shí)測(cè)值575.1.
實(shí)施例2413-(2-{2-[2-(2-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基)-丙酸三氟乙酸鹽 如實(shí)施例194，步驟a所述，將{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(75mg，0.145mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)、氯甲酸對(duì)-硝基苯基酯(31mg，0.152mmol)、吡啶(40μL，0.435mmol)的DCM(1mL)溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。向該混合物加入氨基-dPEG4-TM-叔丁基酯(93mg，0.29mmol，Quanta Biodesign，Powell，Ohio)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌另外16小時(shí)。將混合物濃縮，對(duì)殘余物進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到25mg(24％)標(biāo)題化合物，為玻璃狀固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.31(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.1Hz)，7.87-7.90(m，1H)，7.72(t，1H，J＝7.8Hz)，7.55-7.58(m，1H)，7.45(d，1H，J＝8.1Hz)，7.28，(t，1H，J＝7.8Hz)，7.12(d，1H，J＝7.3Hz)，3.68(t，2H，J＝6.3Hz)，3.50-3.62(m，12H)，3.39(t，2H，J＝5.2Hz)，3.16(t，2H，J＝5.3Hz)，2.72(s，3H)，2.50(t，2H，J＝6.3Hz)，2.00(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H40N4O9S3709.2(M+H)；實(shí)測(cè)值709.2.
實(shí)施例2424-[2′-甲基-6′-(3-苯乙基-脲基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 向{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.058mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)與DIEA(100μL，0.57mmol)的DCM(1.5mL)溶液加入(2-異氰酰-乙基)-苯(100μL，0.68mmol)，將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋?zhuān)缓笥盟惋柡蚇aHCO3洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮。對(duì)所得殘余物進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到20mg(62％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ 8.30(s，1H)，8.08(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.1Hz)，7.90(t，1H，J＝1.6Hz)，7.71(t，1H，J＝7.8 Hz)，7.51-7.55(m，1H)，7.36-7.39(m，1H)，7.22-7.30(m，3H)，7.12-7.19(m，2H)，7.02-7.06(m，2H)，3.14-3.24(m，2H)，2.64(s，3H)，2.52-2.62(m，2H)，2.00(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C28H28N4O3S3565.1(M+H)；實(shí)測(cè)值565.1.
實(shí)施例243{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙酸乙基酯三氟乙酸鹽 向{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(15mg，0.029mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)與Et3N(20μL，0.15mmol)的DCM(1.0mL)加入異氰酰-乙酸乙酯(10μL，0.087mmol)，將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋?zhuān)缓笥盟惋柡蚇aHCO3洗滌。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過(guò)濾，在真空中濃縮。將所得粗產(chǎn)物分為兩等份。對(duì)一份進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.31(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.90(t，1H，J＝1.6Hz)，7.72(t，1H，J＝7.8Hz)，7.56-7.60(m，1H)，7.46-7.50(m，1H)，7.30(t，1H，J＝7.8Hz)，7.12-7.16(m，1H)，4.16(q，2H，J＝7.2Hz)，3.76(d，2H，J＝4.2Hz)，2.72(s，3H)，2.01(s，3H)，1.26(t，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H26N4O5S3547.1(M+H)；實(shí)測(cè)值547.1.
實(shí)施例244{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-乙酸三氟乙酸鹽
將實(shí)施例244所得另一份粗乙基酯在室溫下用MeOH/1N NaOH混合物(1∶1，2mL)處理4小時(shí)進(jìn)行皂化。將粗反應(yīng)混合物用乙酸酸化，在真空中濃縮，對(duì)殘余物進(jìn)行TFA處理，繼之以C18-HPLC純化，如實(shí)施例220，步驟c所述，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.31(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.88(t，1H，J＝1.8Hz)，7.72(t，1H，J＝7.8Hz)，7.56-7.60(m，1H)，7.47-7.51(m，1H)，7.30(t，1H，J＝7.9Hz)，7.12-7.15(m，1H)，3.68-3.80(m，2H)，2.72(s，3H)，2.01(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H22N4O5S3519.1(M+H)；實(shí)測(cè)值519.1.
實(shí)施例245{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲氧基}-乙酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例227相同的工藝，{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(28mg，0.054mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)、Et3N(45μL，0.32mmol)和聯(lián)氧二乙酸酐(20mg，0.16mmol)在DCM(2mL)中的反應(yīng)繼之以類(lèi)似的處理和純化，得到標(biāo)題化合物(50％，兩步收率).1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.28(s，1H)，8.08(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.85(t，1H，J＝1.5Hz)，7.72(t，1H，J＝7.8Hz)，7.56-7.60(m，1H)，7.53(d，1H，J＝8.1Hz)，7.36(t，1H，J＝7.8Hz)，7.26(d，1H，J＝7.7Hz)，3.70-3.91(m，4H)，2.72(s，3H)，2.08(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H23N3O6S3534.1(M+H)；實(shí)測(cè)值534.1.
實(shí)施例2462-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-乙酰胺三氟乙酸鹽 a)({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例234，步驟a所述工藝，{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(137mg，0.265mmol，如實(shí)施例25，步驟c制備的)、溴乙酰溴(28μL，0.32mmol)和DIEA(70μL，0.40mmol)在氯仿(3mL)中的反應(yīng)在色譜純化(PTLC，含10％EtOAc的DCM，2×1500μSiO2平板)后得到129mg(76％)標(biāo)題化合物，為黃色泡沫狀固體。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.05-8.10(m，1H)，7.85-7.95(m，2H)，7.65-7.73(m，2H)，7.46-7.51(m，1H)，7.35(t，1H，J＝7.9Hz)，7.16(d，1H，J＝7.7Hz)，3.64和3.74(AB四重峰，2H，J＝14.0Hz)，2.60(s，3H)，2.03(s，3H)，1.52(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H28BrN3O5S3637.0(M+H)；實(shí)測(cè)值637.8，639.8，538.0，540.0(M-Boc).
b)2-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-甲硫基}-乙酰胺三氟乙酸鹽向({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(9mg，0.014mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)的MeOH(0.1mL)溶液加入2-巰基乙酰胺(20μL10％甲醇溶液，Maybridge plc)和Et3N(6μL，0.042mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5小時(shí)，然后在真空中濃縮。將殘余物如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理，然后用C18-HPLC純化(含10-60％CH3CN的H2O，含有0.1％TFA)，得到8.7mg(94％)標(biāo)題化合物，為澄清的玻璃狀固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.30(s，1H)，8.09(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.72(t，1H，J＝7.9Hz)，7.57-7.60(m，1H)，7.35-7.40(m，2H)，7.27-7.31(m，1H)，3.05 and 3.11(AB四重峰，2H，J＝14.9Hz)，2.78 and 2.85(AB四重峰，2H，J＝14.9Hz)，2.74(s，3H)，2.08(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H24N4O4S4549.1(M+H)；實(shí)測(cè)值549.1.
實(shí)施例2473-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例246，步驟b所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(15.2mg，0.029mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)、3-巰基丙酸酯(8μL，0.09mmol)、Et3N(20μL，0.12mmol)在MeOH(1mL)中的1小時(shí)反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到9mg(56％)標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.28(s，1H)，8.06-8.09(m，1H)，7.88(t，1H，J＝1.9Hz)，7.70(t，1H，J＝7.8Hz)，7.53-7.57(m，1H)，7.33-7.38(m，2H)，7.25-7.29(m，1H)，2.95和3.04(AB四重峰，2H，J＝15.4Hz)，2.73(s，3H)，2.31-2.36(m，2H)，2.16-2.20(m，2H)，2.04(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H25N3O5S4564.1(M+H)；實(shí)測(cè)值564.1.
實(shí)施例2482-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-琥珀酸三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例246，步驟b所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(15.3mg，0.03mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)、巰基琥珀酸鹽(14mg，0.09mmol)、Et3N(20μL，0.12mmol)和MeOH(1mL)的2小時(shí)反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到12mg(67％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz，(+)與(-)對(duì)映體在NMR上表現(xiàn)為兩種不同的非對(duì)映體，可能由于o-甲基-聯(lián)苯環(huán)系附近的構(gòu)型限制)δ 8.27(s，1H)，8.04-8.09(m，1H)，7.84-7.88(m，1H)，7.66-7.73(m，1H)，7.53-7.57(m，1H)，7.32-7.44(m，2H)，7.27(t，1H，J＝6.7Hz)，3.38-3.42(m，0.5H)，3.09-3.29(m，2H)，2.62-2.79(m，2.5H)，2.75(s，3H)，2.44-2.50(m，0.5H)，2.22-2.28(m，0.5H)，2.06(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H25N3O7S4608.1(M+H)；實(shí)測(cè)值608.1.
實(shí)施例2492-溴-N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-乙酰胺三氟乙酸鹽 在室溫下，將({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(22mg，0.034mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)在TFA/DCM混合物(1∶1，4mL)中攪拌1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)物，所得殘余物用RP-HPLC純化(含10-50％CH3CN的H2O，含有0.1％TFA，30min)，得到15mg(68％)標(biāo)題化合物，為澄清的玻璃狀固體(分析型RP-HPLC純度＞99.9％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C21H20BrN3O3S3538.0(M+H)；實(shí)測(cè)值538.0和540.0實(shí)施例2502-乙酰氨基-3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-3-甲基-丁酸三氟乙酸鹽 將N-乙酰基-青霉胺(3.0mg，0.0154mmol，外消旋)和DIEA(7μL，0.04mmol)溶于DMSO(223μL)，然后轉(zhuǎn)移至2-溴-N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-乙酰胺三氟乙酸鹽溶液(20mM DMSO溶液，230μL，0.0046mmol，從實(shí)施例249所述標(biāo)題化合物制備)中。在室溫下將反應(yīng)物在振蕩器上混合1小時(shí)。加入溴甲基Wang樹(shù)脂(16mg，1.47mmol/gm)，以清除過(guò)量的硫醇。振蕩2小時(shí)后，將樹(shù)脂過(guò)濾，濾液直接用RP-HPLC純化，如實(shí)施例246，步驟b所述，得到1.5mg(50％，分析型RP-HPLC上的單峰)標(biāo)題化合物，為玻璃狀固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H32N4O6S4649.1(M+H)；實(shí)測(cè)值649.1.
實(shí)施例2512-乙酰氨基-3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-甲硫基}-丙酸三氟乙酸鹽
按照與實(shí)施例246，步驟b所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(10mg，0.016mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)、(L)-N-乙酰半胱氨酸(22mg，0.135mmol)、Et3N(50μL，0.12mmol)和DCM(0.5mL)的2小時(shí)反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到7mg(71％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.30(s，1H)，8.06-8.09(m，1H)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68-7.73(m，1H)，7.54-7.59(m，1H)，7.34-7.39(m，2H)，7.26-7.30(m，1H)，4.41-4.48(m，1H)，2.94-3.10(m，2H)，2.74(s，3H)，.2.59-2.64(m，1H)，2.43-2.49(m，1H)，2.06(s，3H).2.00(d，3H，2.1 J＝2.1Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H28N4O6S4621.1(M+H)；實(shí)測(cè)值621.1.
實(shí)施例2523-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸三氟乙酸鹽 a)({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例234，步驟a所述工藝，{[4-(6′-氨基-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(204mg，0.37mmol，如實(shí)施例198，步驟e制備的)、溴乙酰溴(39μL，0.45mmol)和Et3N(77μL，0.56mmol)在DCM(5mL)中的反應(yīng)在色譜純化(PTLC，含50％EtOAc的己烷，4×1000μSiO2平板)后得到170mg(69％)標(biāo)題化合物，為黃色泡沫狀固體。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.02-8.05(m，1H)，7.91(s，1H)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.73(br s，1H)，7.63-7.67(m，2H)，7.45-7.49(m，1H)，6.69(d，1H，J＝2.1Hz)，3.85(s，3H)，3.69和3.74(AB四重峰，2H，J＝14.1Hz)，2.59(s，3H)，2.00(s，3H)，1.52(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H30BrN3O6S3668.0(M+H)；實(shí)測(cè)值669.6，667.6，570.0，568.0(M-Boc).
b)3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸三氟乙酸鹽按照與實(shí)施例246，步驟b所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(12mg，0.018mmol，如實(shí)施例252，步驟a制備的)、3-巰基丙酸酯(8μL，0.09mmol)、Et3N(20μL，0.12mmol)在MeOH(1mL)中的1小時(shí)反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到9.3mg(62％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.29(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.8Hz)，7.53-7.57(m，1H)，7.05(d，1H，J＝2.5Hz)，6.84(d，1H，J＝2.5Hz)，3.83(s，3H)，2.98和3.06(AB 四重峰，2H，J＝15.4Hz)，2.73(s，3H)，2.32-2.36(m，2H)，2.19-2.23(m，2H)，2.02(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H27N3O6S4594.1(M+H)；實(shí)測(cè)值594.0.
實(shí)施例2533-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸甲基酯三氟乙酸鹽
按照與實(shí)施例246，步驟b所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(22mg，0.04mmol，如實(shí)施例252，步驟a制備的)、3-巰基丙酸甲酯(10μL，0.09mmol)、Et3N(20μL，0.12mmol)在MeOH(1mL)中的1小時(shí)反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.31(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.8Hz)，7.53-7.57(m，1H)，7.06(d，1H，J＝2.4Hz)，6.85(d，1H，J＝2.4Hz)，3.84(s，3H)，3.68(s，3H)，3.00和3.07(AB四重峰，2H，J＝15.4Hz)，2.74(s，3H)，2.39-2.42(m，2H)，2.23-2.27(m，2H)，2.03(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H29N3O6S4608.1(M+H)；實(shí)測(cè)值608.1.
實(shí)施例254N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-2-甲磺?；?乙酰胺三氟乙酸鹽 按照與實(shí)施例257所述相同的工藝，({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(37mg，0.065mmol，如實(shí)施例252，步驟a制備的)和甲亞磺酸鈉(25mg，0.195mmol，Aldrich Chemical Company)在EtOH/CH3CN(1∶1，2mL)中的反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到29mg(66％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.30(s，1H)，8.03(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.84(t，1H，J＝1.6Hz)，7.66(t，1H，J＝7.8Hz)，7.51-7.54(m，1H)，6.99(d，1H，J＝2.6Hz)，6.84(d，1H，J＝2.6Hz)，3.89和3.93(AB四重峰，2H，J＝14.1Hz)，3.82(s，3H)，2.86(s，3H)，2.72(s，3H)，2.01(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C23H25N3O6S4568.1(m+H)；實(shí)測(cè)值568.0.
實(shí)施例2556-甲磺?；?己酸[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-酰胺三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例234，步驟a所述工藝，{[4-(6′-氨基-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(60mg，0.11mmol，實(shí)施例198，步驟e制備的)、6-溴-己酰氯(26μL，0.17mmol)和Et3N(79μL，0.55mmol)在DCM(1mL)中的反應(yīng)在含水處理后得到標(biāo)題化合物，為粗油。ESI-MS(m/z)C31H38BrN3O6S3計(jì)算值724.1(M+H)；實(shí)測(cè)值626.1，624.1(M-Boc)。將上述所得粗溴化物中間體懸浮在EtOH-水混合物(1∶1，3mL)中，向該混合物加入甲亞磺酸鈉(45mg，0.33mmol，Aldrich Chemical Company)。將反應(yīng)混合物在50℃下加熱48小時(shí)，然后在真空中濃縮。將殘余物如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理，然后用C18-HPLC純化(含10-60％CH3CN的H2O，含有0.1％TFA)，得到12mg(18％，從苯胺計(jì))標(biāo)題化合物，為澄清的玻璃狀固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.30(s，1H)，8.02(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.1Hz)，7.86(t，1H，J＝1.6Hz)，7.67(t，1H，J＝7.9Hz)，7.52(dt，1H，J＝7.7，1.2Hz)，6.85(d，1H，J＝2.5Hz)，6.77(d，1H，J＝2.5Hz)，3.82(s，3H)，2.98-3.04(m，2H)，2.96(s，3H)，2.72(s，3H)，1.99-2.04(m，2H)，2.03(s，3H)，1.57-1.66(m，2H)，1.05-1.25(m，4H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H33N3O6S4624.1(M+H)；實(shí)測(cè)值624.1實(shí)施例256N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-甲氧基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-3-甲磺酰基-丙酰胺三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例234，步驟a所述工藝，{[4-(6′-氨基-4′-甲氧基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(60mg，0.11mmol，如實(shí)施例198，步驟e制備的)、丙烯酰氯(22μL，0.22mmol)和Et3N(80μL，0.55mmol)在THF(1mL)中的反應(yīng)在含水處理后得到標(biāo)題化合物，為粗油。ESI-MS(m/z)C28H31N3O6S3計(jì)算值602.1(M+H)；實(shí)測(cè)值601.9，502.1(M-Boc)。將上述所得粗丙烯酰胺中間體懸浮在EtOH-水混合物(1∶1，3mL)中，向該混合物加入甲亞磺酸鈉(45mg，0.33mmol，Aldrich Chemical Company)。將反應(yīng)混合物在50℃下加熱48小時(shí)，然后在真空中濃縮。將殘余物如實(shí)施例220，步驟c所述用TFA處理，然后用C18-HPLC純化(含10-60％CH3CN的H2O，含有0.1％TFA)，得到15mg(23％，從苯胺計(jì))標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.30(s，1H)，8.03(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.1Hz)，7.83(t，1H，J＝1.6Hz)，7.67(t，1H，J＝7.8Hz)，7.54(dt，1H，J＝7.7，1.3Hz)，6.84-6.87(m，2H)，3.82(s，3H)，3.07(t，2H，J＝7.8Hz)，2.86(s，3H)，2.73(s，3H)，2.44-2.51(m，2H)，2.06(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O6S4582.1(M+H)；實(shí)測(cè)值582.1.
實(shí)施例257N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-2-甲磺?；?乙酰胺三氟乙酸鹽 向({4-[6′-(2-溴-乙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(8mg，0.0125mmol，如實(shí)施例246，步驟a制備的)的EtOH(1.0mL)溶液加入甲亞磺酸鈉(13mg，0.127mmol，Aldrich Chemical Company)，將反應(yīng)物攪拌過(guò)夜，用MS和TLC監(jiān)測(cè)。在室溫下～16小時(shí)后，原料已經(jīng)消失，在真空中濃縮反應(yīng)物，得到油。將這種中間體用三氟乙酸處理2小時(shí)，繼之以RP-HPLC純化，得到5.2mg(78％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.31(s，1H)，8.05(ddd，1H，J＝7.9，1.9，1.2Hz)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.68(t，1H，J＝8.0Hz)，7.53-7.56(m，1H)，7.33-7.37(m，2H)，7.26-7.30(m，1H)，3.85-3.94(m，2H)2.84(s，3H)，2.72(s，3H)，2.04(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H23N3O5S4538.0(M+H)；實(shí)測(cè)值538.0.
實(shí)施例258N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-2-甲磺?；?丙酰胺三氟乙酸鹽 a)({4-[6′-(2-溴-丙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例234，步驟a所述工藝，{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(65mg，0.126mmol，實(shí)施例25，步驟c)、外消旋2-溴-丙酰溴(19μL，0.189mmol)和Et3N(52μL，0.378mmol)在DCM(2mL)中的反應(yīng)在色譜純化(PTLC，含10％EtOAc的DCM，2×1500μSiO2平板)后得到55mg(67％)標(biāo)題化合物，為玻璃狀固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H30BrN3O5S3652.0(M+H)；實(shí)測(cè)值653.6，651.7，553.9，552.0(M-Boc).
b)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯2-基]-2-甲磺?；?丙酰胺三氟乙酸鹽按照實(shí)施例257所述工藝，({4-[6′-(2-溴-丙酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(30mg，0.046mmol，實(shí)施例258，步驟a)和甲亞磺酸鈉(48mg，0.46mmol，Aldrich Chemical Company)在EtOH(1mL)中的反應(yīng)在TFA處理和RP-HPLC純化后得到18mg(72％)標(biāo)題化合物，為白色固體。1H-NMR(CD3OD；400MHz，(+)與(-)對(duì)映體在NMR上表現(xiàn)為兩種不同的非對(duì)映體，可能由于o-甲基-聯(lián)苯環(huán)系附近的構(gòu)型限制)δ 8.328.31(2xs，1H)，8.05-8.08(m，1H)，7.87-7.88(m，1H)，7.69(t，1H，J＝7.8Hz)，7.52-7.55(m，1H)，7.27-7.39(m，3H)，3.67-3.74(m，1H)，2.78，2.724，2.718，2.16(4xs，6H)，2.06，2.03(2xs，3H)，1.30，1.28，1.17，1.15(4xs，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C23H25N3O5S4552.1(M+H)；實(shí)測(cè)值652.0.
實(shí)施例2596-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸
a)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸乙基酯將{2-氨基-3′-[5-(亞氨基-甲氧羰基氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯((實(shí)施例294步驟f)0.020g，0.030mmol)的無(wú)水CH2Cl2(3mL)溶液用6-異氰酰-己酸乙基酯(5.30μL，0.030mmol)處理，在室溫下攪拌40分鐘。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟礈?1×15mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到產(chǎn)物6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸乙基酯(0.025g，98％)，為灰白色固體。1H NMR(CD3OD)δ8.217(s，1H)，8.062(d，1H，J＝8.0Hz)，7.920(t，1H，J＝1.6Hz)，7.718(t，1H，J＝8.0Hz)，7.647(d，1H，J＝1.6Hz)，7.556(d，1H，J＝7.6Hz)，7.282(s，1H)，4.292(dd，2H，J＝8.4Hz，J＝1.6Hz)，3.063-3.002(m，2H)，2.699(s，3H)，2.327(t，2H，J＝7.2Hz)，2.011(s，3H)，1.604(五重峰，2H，J＝7.2Hz)，1.538(s，9H)，1.403-1.362(m，2H)，1.124(dd，2H，J＝7.2Hz，J＝1.6Hz)，1.281(t，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C39H55N5O9S3Si(M+H)862.3；實(shí)測(cè)值861.90.
b)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸將6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸乙基酯((實(shí)施例259步驟a)0.437g，0.507mmol)的THF∶水(2∶1，15mL)溶液用固體LiOH(0.097g，4.06mmol)處理，在室溫下攪拌18.5小時(shí)。在真空中除去THF，剩余水溶液用冰乙酸酸化至pH 5。用CH2Cl2萃取溶液(3×50mL)。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物(0.4222g，99％)，為灰白色固體。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C37H51N5O9S3Si(M+H)834.3；834.2.
c)6-(3-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-己酸將6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸((實(shí)施例259步驟b)0.422g，0.506mmol)的無(wú)水THF(20mL)溶液用四丁基氟化銨(1M己烷溶液，3.39mL，3.39mmol)處理，在40℃下攪拌4小時(shí)。在真空中蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2，用水洗滌(4×50mL)。將有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，在真空中濃縮。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含4％MeOH的CH2Cl2)，得到產(chǎn)物6-(3-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-己酸(0.200g，57％)，為灰白色固體。將該產(chǎn)物與1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(0.252g，0.870mmol)和乙酸(0.5mL)合并在MeOH(10mL)中，在40℃下攪拌2小時(shí)。在真空中除去溶劑。經(jīng)過(guò)硅膠色譜純化(含4％MeOH的CH2Cl2，然后含10％MeOH的CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物(0.215g，80％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.22(s，1H)，8.06(m，1H)，7.89(m，1H)，7.72(m，1H)，7.69(m，1H)，7.53(m，1H)，7.32(m，1H)，3.01(m，2H)，2.66(s，3H)，2.27(t，2H，7.4Hz)，1.97(s，3H)，1.57(m，2H)，1.54(s，18H)，1.51(s，9H)，1.37(m，2H)，1.27(m，2H).
d)6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d所用反應(yīng)條件，使用6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-4-(N′，N″-雙-叔丁氧羰基-胍基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-己酸((實(shí)施例259步驟c)80mg，0.086mmol)。經(jīng)過(guò)類(lèi)似的HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(70mg，95％)。1H-NMR(CD3CN/D2O)δ8.23(s，1H)，8.04(m，1H)，7.83(m，1H)，7.74(m，1H)，7.55(m，1H)，7.48(m，1H)，6.99(m，1H)，2.92(m，2H)，2.66(s，3H)，2.24(t，2H，7.4Hz)，1.95(s，3H)，1.48(m，2H)，1.27(m，2H)，1.25(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H33N7O5S3(M+H)632.2；實(shí)測(cè)值632.1.
實(shí)施例260N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺?；?丁酰胺雙-三氟乙酸鹽 a)({4-[4′-氨基-6′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例261步驟b的工藝，在DCM(5mL)中使用4-甲磺?；?丁酰氯(實(shí)施例209步驟a(53mg，0.29))、{[4-(6′-氨基-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例295步驟h)130mg，0.23mmol)和Et3N(192μL，1.38mmol)。攪拌1小時(shí)后，有原料剩余，加入另外20mg酰氯。使溶液在EtOAc(70mL)與含水NH4Cl(30mL)之間分配，分離各層。將有機(jī)層用NaHCO3(20mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到126mg酰胺產(chǎn)物。將殘余物溶于EtOH(5mL)。加入飽和含水NH4Cl(1.5mL)，繼之以鐵粉(110mg，2mmol)。將混合物在80℃下劇烈攪拌30分鐘。使溶液通過(guò)0.22μm濾器過(guò)濾，然后在EtOAc(70mL)與水(20mL)之間分配。分離各層，有機(jī)溶液經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮溶液，得到粗標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.96(m，2H)，7.77(s，1H)，7.57(t，1H，J＝7.9Hz)，7.43(dt，1H，J＝1.3，7.7Hz)，7.10(br s，1H)，7.04(br s，1H)，6.43(br s，1H)，3.85(br s，2H)，2.92(m，2H)，2.88(s，3H)，2.56(s，3H)，2.20(t，2H，J＝6.7Hz)，1.98(m，2H)，1.90(s，3H)，1.50(s，9H).
b)N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺酰基-丁酰胺雙-三氟乙酸鹽將乙酸(500μL)加入到({4-[4′-氨基-6′-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例260步驟a)136mg，0.2mmol)與1，3-雙-(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(145mg，0.5mmol)的MeOH(10mL)溶液中。將溶液在40℃下攪拌16小時(shí)，然后在EtOAc(80mL)與水(40mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用含水NaHCO3(2×30mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮后，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化。將殘余物如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理，類(lèi)似地經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(47mg，23％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.39(s，1H)，8.09(ddd，1H，J＝0.9，1.9，8.1Hz)，7.92(t，1H，J＝1.6Hz)，7.74(t，1H，J＝7.7Hz)7.58(m，1H)，7.24(m，2H)，2.94(s，3H)，2.86(t，2H，J-7.7Hz)，2.76(s，3H)，2.24(m，2H)，2.12(s，3H)，1.80(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H30N6O5S4(M+H)623.1；實(shí)測(cè)值623.1.
實(shí)施例2615-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-戊酸雙-三氟乙酸鹽 a)5-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-戊酸甲基酯在0℃下，向{[4-(6′-氨基-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例295步驟h)130mg，0.23mmol)與Et3N(192μL，1.38mmol)的DCM(5mL)溶液加入5-氯羰基-戊酸甲基酯(53mg，0.29)。攪拌1小時(shí)后，使溶液在EtOAc(70mL)與含水NH4Cl(30mL)之間分配，分離各層。將有機(jī)層用NaHCO3(20mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到36mg酰胺產(chǎn)物。將殘余物溶于EtOH(5mL)。加入飽和含水NH4Cl(1.5mL)，繼之以鐵粉(110mg，2mmol)。將混合物在80℃下劇烈攪拌30分鐘。使溶液通過(guò)0.22μm濾器過(guò)濾，然后在EtOAc(70mL)與水(20mL)之間分配。分離各層，有機(jī)溶液經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮溶液，得到粗標(biāo)題化合物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ8.0(m，2H)，7.84(s，1H)，7.96(m，2H)，7.59(t，1H，J＝7.7Hz)，7.43(m，1H)，7.23(br s，1H)，6.86(br s，1H)，6.45(br s，1H)，3.85(br s，2H)，3.65(s，3H)，2.60(m，3H)，2.35(m，2H)，2.00(m，2H)，1.90(s，3H)，1.67(m，2H)，1.90(s，3H)，1.53(s，9H).
b)5-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-戊酸雙-三氟乙酸鹽將乙酸(500μL)加入到5-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基}-戊酸甲基酯((實(shí)施例260步驟b)136mg，0.2mmol)與1，3-雙-(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(145mg，0.5mmol)的MeOH(10mL)溶液中。將溶液在40℃下攪拌16小時(shí)，然后在EtOAc(80mL)與水(40mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用含水NaHCO3(2×30mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮后，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化。將殘余物溶于MeOH(10mL)，加入1N NaOH(400μL，0.4mmol)。攪拌6小時(shí)后，用AcOH(100μL)中和溶液，在真空中除去溶劑。將殘余物如實(shí)施例1步驟d用1∶1TFA/DCM處理，類(lèi)似地經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(12mg，19％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.09(ddd，1H，J＝1.2，2.1，7.9Hz)，7.88(t，1H，J＝1.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.7Hz)7.52(m，1H)，7.22(m，1H)，7.17(m，1H)，2.72(s，3H)，2.12(m，2H)，2.08(s，3H)，2.02(m，2H)，1.25(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N6O5S3(M+H)603.1；實(shí)測(cè)值603.2.
實(shí)施例2624-[2′-甲基-4′-(N-甲基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)(4-溴-3-甲基-苯基)-甲基-胺將4-溴-3-甲基苯胺(3.72g，20mmol)的甲酸(15mL)溶液在100℃下加熱8小時(shí)。在真空中除去溶劑，使殘余物在EtOAc(100mL)與含水NaHCO3(50mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，濃縮。將殘余物溶于THF(80mL)，冷卻至0℃。歷經(jīng)10分鐘分批加入氫化鋁鋰(1.52g，40mmol)。將混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，加入另外當(dāng)量的(750mg)LAH。16小時(shí)后，用EtOAc和MeOH猝滅混合物，過(guò)濾固體。產(chǎn)物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(2.56g，64％)，為無(wú)色的油。1H-NMR(CDCl3)δ7.29(d，1H，J＝8.6Hz)，6.33(dd，1H，J＝2.8Hz)，7.29(d，1H，J＝2.8，8.6Hz)，3.66(s，2H)，2.81(d，1H，J＝5.4Hz)，2.33(s，3H).
b){亞氨基-[4-(2′-甲基-4′-甲氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例294步驟e的工藝，在二噁烷(20mL)中使用(4-溴-3-甲基-苯基)-甲基-胺((實(shí)施例262步驟a)600mg，3mmol)、乙酸鈀(34mg，0.15mmol)和2-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯(210mg，0.6mmol)。類(lèi)似的處理得到粗的頻哪醇代硼酸酯(720mg，98％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。按照實(shí)施例294步驟f的工藝，使粗的代硼酸酯(540mg，2.18mmol)與{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)715mg，1.46mmol)、含水Na2CO3(2M，4.4mL，8.8mL)和Pd(PPh3)4(407mg，0.37mmol)在乙醇(4.4mL)和甲苯(8.8mL)中反應(yīng)。類(lèi)似的處理和SiO2快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(482mg，62％)，為黃色玻璃狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.0(s，1H)，7.95(m，1H)，7.90(m，1H)，7.55(m，1H)，7.51(m，1H)，7.05(m，1H)，6.53(m，2H)，2.9(s，3H)，2.56(s，3H)，2.56(s，3H)，2.22(s，3H)，1.52(s，9H).
c)4-[2′-甲基-4′-(N-甲基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例314的工藝，在50℃下、在DMF(3mL)中使用{亞氨基-[4-(2′-甲基-4′-甲氨基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例262步驟b)106mg，0.2mmol)、HgCl2(109mg，0.4mmol)、1，3-雙-(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(116mg，0.4mmol)和DIEA(350μL，2mmol)。類(lèi)似的處理和SiO2快速柱色譜純化后，將產(chǎn)物如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理。經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.04(m，2H)，7.72(m，2H)，7.39(m，2H)，7.31(m，1H)，3.40(s，3H)，2.72(s，3H)，2.29(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H23N5O2S3(M+H)474.1；實(shí)測(cè)值474.1.
實(shí)施例2636-{N′-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-胍基}-己酸
a)1，3-雙-(叔丁氧羰基)-1-(三甲代甲硅烷基乙基-6-己酸酯)-2-甲噻-2-假硫脲將二異丙基碳二亞胺(1.72mL，11mmol)滴加到0℃的6-溴己酸(1.95g，10mmol)、三甲代甲硅烷基乙醇(2.4g，20mmol)與DMAP(122mg，1mmol)的DCM(20mL)溶液中。使混合物歷經(jīng)1小時(shí)溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?6小時(shí)。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于EtOAc(100mL)，過(guò)濾溶液。將溶液用5％檸檬酸(3×20mL)、NaHCO3(3×20mL)和鹽水(30mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中濃縮溶液，得到TMSE酯，為無(wú)粘性油(2.25g，76％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ4.16(m，2H)，2.41(s，3H)，3.41(t，2H，J＝6.75Hz)，2.30(t，2H，J＝6.75Hz)，1.88(m，2H)，1.65(m，2H)，1.47(m，2H).
將氫化鈉加入到0℃的1，3-雙-(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(581mg，2mmol)的DMF(10mL)溶液中。在0℃下攪拌30分鐘后，加入2-三甲代甲硅烷基乙基-6-溴己酸酯(738mg，2.5mmol)溶液，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)，在60℃下攪拌1小時(shí)，然后在80℃下攪拌18小時(shí)。使溶液在EtOAc(120mL)與水(50mL)之間分配，分離各層。將有機(jī)層用水(8×30mL)和鹽水(50mL)萃取，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，繼之以SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(526mg，52％)。1H-NMR(CDCl3)δ4.13(m，2H)，2.41(s，3H)，2.30(t，2H，J＝7.4Hz)，1.69(m，4H)，1.53(s，9H)，1.50(s，9H)，1.34(m，4H)，1.00(m，2H).
b)6-{N′-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-胍基}-己酸將乙酸(0.5mL)加入到{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例220步驟b)130mg，0.25mmol)與1，3-雙-(叔丁氧羰基)-1-(三甲代甲硅烷基乙基-6-己酸酯)-2-甲基-2-假硫脲((實(shí)施例263步驟a)245mg，0.5mmol)的MeOH(10mL)溶液中。將溶液在40℃下加熱24小時(shí)。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到被保護(hù)的胍(112mg，46％)。將一部分產(chǎn)物(15mg)如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理。經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(9.3mg，75％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.04(m，2H)，7.71(m，2H)，7.35(d，1H，J＝8.1Hz)，7.27(d，1H，J＝1.9Hz)，7.22(dd，1H，J＝1.9，8.1Hz)，3.34(m，2H)，2.74(s，3H)，2.36(t，2H，J＝7.4Hz)，2.29(s，3H)，1.70(m，4H)，1.48(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H31N5O4S3(M+H)574.2；實(shí)測(cè)值574.2.
實(shí)施例264 a)4-(4-氨基-3-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將亞硫酸鈉(1.5g，11.9mmol)和NaHCO3(1.12g，13.3mmol)溶于水(30mL)，加入4-乙酰氨基-3-硝基-苯磺酰氯(1.94g，7mmol)。將乙醇(10mL)和混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。加入含水NaOH(10N，6mL，60mmol)，將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)2小時(shí)。將溶液用濃HCl調(diào)至pH～8，在真空中除去溶劑。加入DMF(15mL)，將混合物攪拌15分鐘，然后使無(wú)機(jī)鹽沉降下來(lái)。經(jīng)由注射器除去DMF，用第二部分DMF(10mL)洗滌鹽，合并DMF溶液，緩慢加入到0℃的4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)931mg，3.5mmol)的DMF(15mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去DMF，使殘余物在EtOAc(100mL)與含水NaHCO3(30mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用含水NaHCO3(2×20mL)、水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，將殘余物溶于THF(20mL)，冷卻至-78℃。滴加甲醇鈉的甲醇溶液(1M，7mL，7mmol)，將反應(yīng)物攪拌30分鐘。加入乙酸(500μL)，繼之以EtOAc(100mL)。將溶液用NaHCO3(3×30mL)、鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮和殘余物的色譜純化，得到標(biāo)題化合物(381mg，28％)，為黃色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ10.56(br s，2H)，9.04(d，1H，J＝8.8Hz)，8.89(d，1H，J＝2.3Hz)，8.22(dd，1H，J＝2.3，9.1Hz)，8.04(s，1H)，3.90(s，3H)，2.64(s，3H)，2.35(s，3H).
b)4-(4-溴-3-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例318步驟c所用工藝，在乙腈(總計(jì)8mL)中使用4-(4-氨基-3-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例264步驟a)100mg，0.26mmol)、CuBr2(73mg，0.31mmol)和亞硝酸叔丁酯(46μL，0.39mmol)。標(biāo)題化合物(118mg，100％)無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ8.46(m，1H)，8.03(m，2H)，7.94(d，1H，J＝8.4Hz)，3.90(s，3H)，2.65(s，3H).
c)5-甲硫基-4-{3-硝基-4-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-苯磺酰基}-噻吩-2-羧酸甲基酯將吡啶-2-基-甲基胺(60μL)、DIEA(175μL，1mmol)和4-(4-溴-3-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例264步驟b)56mg，0.12mmol)在60℃THF(3mL)中加熱30分鐘。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(41mg，69％)。
1H-NMR(CDCl3)δ9.46(m，1H)，8.90(m，1H)，8.64(m，1H)，8.01(d，1H，J＝2.6Hz)，7.94(m，1H)，8.03(m，2H)，7.71(dt，1H，J＝1.9，7.7Hz)，7.28(m，2H)，6.95(d，1H，J＝9.0Hz)，4.67(d，1H，J＝5.1Hz)，3.87(s，3H)，2.60(s，3H).
d)5-甲硫基-4-(1-吡啶-2-基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例318步驟e的工藝，使用5-甲硫基-4-{3-硝基-4-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-苯磺?；鶀-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例264步驟c)41mg，0.08mmol)、鐵(110mg，2mmol)和EtOH/含水AcOH，繼之以用甲酸處理，得到標(biāo)題化合物。1H-NMR(CD3OD)δ8.50(m，1H)，8.42(s，1H)，8.08(m，1H)，7.97(d，1H，J＝2.5Hz)，7.85(m，1H)，7.72(m，1H)，7.71(dt，1H，J＝1.9，7.7Hz)，7.57(m，1H)，7.29(m，1H)，7.22(d，1HJ＝7.8Hz)，6.95(d，1H，J＝9.0Hz)，5.57(s，2H)，3.82(s，3H)，2.56(s，3H).
e)5-甲硫基-4-(1-吡啶-2-基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例12步驟f的工藝，使用5-甲硫基-4-(1-吡啶-2-基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例264步驟d)36mg)和5mL(5mmol)二甲基鋁酰胺溶液。類(lèi)似的處理和純化得到標(biāo)題化合物(13.2mg，23％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.63(ddd，1H，J＝0.9，1.6，5.35Hz)，8.58(m，1H)，8.34(s，1H)，8.19(dt，1H，J＝1.6，7.8Hz)，8.08(dd，1H，J＝1.6，8.7Hz)，7.85(d，1H，J＝8.7Hz)，7.69(m，1H)，7.66(m，1H)，5.98(s，1H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H17N5O2S3(M+H)444.1；實(shí)測(cè)值444.1.
實(shí)施例265-2664-(3-芐基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(1-芐基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(3-芐基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-(1-芐基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(20mg，44.7μmol，實(shí)施例38步驟e)、芐基溴(5.3μL，44.7μmol)、K2CO3(12.4mg，89.4μmol)和DMF(1.5mL)。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-(3-芐基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯與4-(1-芐基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯化合物的混合物，為褐色的油(27.7mg，定量)。該混合物直接用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H17BrN2O4S3536(M+1)；實(shí)測(cè)值538.9.
b)4-(3-芐基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(1-芐基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自實(shí)施例265-266步驟a的混合物(27.7mg，44.7μmol)如實(shí)施例39-40步驟a所述轉(zhuǎn)化為脒并純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-芐基(1.6mg，米色固體)和1-芐基(2.0mg，白色固體)。
1H-NMR(CD3OD，3-芐基)δ9.08(s，1H)，8.27(s，1H)，8.23(s，1H)，8.10(s，1H)，7.35-7.45(m，5H)，5.70(s，2H)，2.58(s，3H).ESI-MS(m/z)(計(jì)算值C20H17BrN4O2S3521.0(M+1)；實(shí)測(cè)值523.0.1H-NMR(CD3OD，1-benzyl)δ8.73(s，1H)，8.44(s，1H)，8.32(s，1H)，8.10(s，1H)，7.27-7.37(m，3H)，7.06-7.11(m，2H)，5.93(s，2H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H17BrN4O2S3521.0(M+1)；實(shí)測(cè)值523.0.
實(shí)施例267-2684-(3-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(1-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-(3-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-(1-烯丙基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(20mg，44.7μmol，實(shí)施例38步驟e)、烯丙基溴(3.9μL，44.7μmol)、K2CO3(12.4mg，89.4μmol)和DMF(1.5mL)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-(3-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯與4-(1-烯丙基-7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯的混合物，為褐色的油(22.4mg，定量)。該混合物直接用于下一步。 ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H15BrN2O4S3486.9(M+1)；實(shí)測(cè)值488.9.
b)4-(3-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(3-烯丙基-7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自實(shí)施例267-268步驟a的混合物(22.4mg，44.7μmol)如實(shí)施例20步驟b所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-烯丙基(1.0mg，米色固體)和1-烯丙基(2.5mg，米色固體)。
1H-NMR(CD3OD，3-allyl)δ8.54(s，1H)，8.31-8.34(m，2H)，8.04-8.05(m，1H)，6.05-6.14(m，1H)，5.33-5.36(m，1H)，5.21-5.26(m，1H)，5.05-5.08(m，2H)，2.71(s，3H).ESI-MS(m/z)C計(jì)算值C16H15BrN4O2S3471.0(M+1)；實(shí)測(cè)值473.0.1H-NMR(CD3OD，1-烯丙基)δ8.31-8.55(m，3H)，8.05-8.11(m，1H)，6.10-6.22(m，1H)，4.92-5.32(m，4H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C16H15BrN4O2S3471.0(M+1)；實(shí)測(cè)值473.0.
實(shí)施例2694-(7-溴-3-苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(7-溴-3-苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照文獻(xiàn)制備4-(7-溴-3-苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(Lam，P.Y.S.et al.，Tetrahedron Letters，423415(2001))，在寬松蓋住蓋子的1-英錢(qián)小瓶中使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(20mg，44.7μmol，實(shí)施例38步驟3)、苯基代硼酸(11.4mg，93.5μmol)、Cu(OAc)2(8.5mg，46.8μmol)、吡啶N-氧化物(4.7mg，49.2μmol)、三乙胺(13μL，93.3μmol)和CH2Cl2(1.5mL)。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)盟望}水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(12mg，51％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C20H15BrN2O4S3522.9(M+1)；實(shí)測(cè)值525.0.
b)4-(7-溴-3-苯基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將4-(7-溴-3-苯基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(12mg，22.9μmol)如實(shí)施例20步驟f所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(1.6mg，14％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.80(s，1H)，8.13-8.32(m，3H)，7.63-7.74(m，5H)，2.73(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H15BrN4O2S3507.0(M+1)；實(shí)測(cè)值509.0.
實(shí)施例270-2714-(7-溴-3-環(huán)丙基甲基-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(7-溴-1-環(huán)丙基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-(7-溴-3-環(huán)丙基甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯(100mg，0.217mmol，實(shí)施例38步驟e)、(溴甲基)環(huán)丙烷(21μL，0.217mmol)、K2CO3(60mg，0.434mmol)和DMF(3mL)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-(7-溴-3-環(huán)丙基甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯與4-(7-溴-1-環(huán)丙基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯的混合物，為褐色的油(72mg，64％)。該混合物直接用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H17BrN2O4S3515(M+1)；實(shí)測(cè)值516.9.
b)4-(7-溴-3-環(huán)丙基甲基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-(7-溴-1-環(huán)丙基甲基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 將來(lái)自實(shí)施例270-271步驟a的混合物(72mg，0.14mmol)如實(shí)施例39-40步驟b所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-環(huán)丙基甲基(3-CPM)(2.8mg，米色固體)和1-環(huán)丙基甲基(1-CPM)(3.3mg，米色固體)。
1H-NMR(CD3OD，3-CPM)δ8.63(s，1H)，8.40(d，1H，J＝1.40Hz)，8.35(s，1H)，8.05(d，1H，J＝1.40Hz)，4.27(d，2H，J＝7.21Hz)，2.72(s，3H)，1.35-1.42(m，1H)，0.68-0.73(m，2H)，0.5-0.54(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H17BrN4O2S3485.0(M+1)；實(shí)測(cè)值487.0.1H-NMR(CD3OD，1-CPM)δ8.55(s，1H)，8.37-8.38(m，1H)，8.34(s，1H)，8.10-8.11(m，1H)，4.52(d，2H，J＝7.21Hz)，2.72(s，3H)，1.43-1.51(m，1H)，0.62-0.67(m，2H)，0.47-0.52(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H17BrN4O2S3485.0(M+1)；實(shí)測(cè)值487.0.
實(shí)施例272-2734-[7-溴-3-(2，6-二氯-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2，6-二氯-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
a)4-[7-溴-3-(2， 6-二氯-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯和4-[7-溴-1-(2， 6-二氯-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯(100mg，0.217mmol，實(shí)施例38步驟e)、2-溴甲基-1，3-二氯-苯(52mg，0.217mmol)、K2CO3(60mg，0.434mmol)和DMF(3mL)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-[7-溴-3-(2，6-二氯-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯與4-[7-溴-1-(2，6-二氯-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯的混合物，為褐色的油(70mg，52.2％)。該混合物直接用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H15BrCl2N2O4S3618.9(M+1)；實(shí)測(cè)值620.9.
b)4-[7-溴-3-(2，6-二氯-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2，6-二氯-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自實(shí)施例272-273步驟a的混合物(70mg，0.11mmol)如實(shí)施例39-40步驟b所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-(2，6-二氯芐基)(3-DCB)(2.5mg，米色固體)和1-(2，6-二氯芐基)(1-DCB)(2.2mg，米色固體)。1H-NMR(CD3OD，3-DCB)δ8.58(s，1H)，8.30-8.33(m，2H)，8.00(d，1H，J＝1.63Hz)，7.55-7.58(m，2H)，7.44-7.49(m，1H)，5.90(s，2H)，2.64(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrCl2N4O2S3588.9(M+1)；實(shí)測(cè)值590.9.1H-NMR(CD3OD，1-DCB)δ8.34-8.40(m，2H)，8.16-8.18(m，1H)，7.86-7.90(m，1H)，7.46-7.60(m，3H)，6.22(s，2H)，2.64(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrCl2N4O2S3588.9(M+1)；實(shí)測(cè)值590.9.
實(shí)施例274-2754-[7-溴-3-(2，5-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2，5-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-[7-溴-3-(2，5-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯和4-[7-溴-1-(2，5-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯(100mg，0.217mmol，實(shí)施例38步驟e)、2-溴甲基-1，4-二氟-苯(28μL，0.217mmol)、K2CO3(60mg，0.434mmol)和DMF(3mL)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-[7-溴-3-(2，5-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯與4-[7-溴-1-(2，5-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸乙基酯的混合物，為褐色的油(70mg，50％)。該混合物直接用于下一步。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H15BrF2N2O4S3586.0(M+1)；實(shí)測(cè)值588.9.
b)4-[7-溴-3-(2，5-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2， 5-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自實(shí)施例274-275步驟a的混合物(70mg，0.12mmol)如實(shí)施例39-40步驟b所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-(2，5-二氟芐基)(3-DFB)(3.0mg，白色固體)和1-(2，5-二氟芐基)(1-DFB)(3.2mg，白色固體)。1H-NMR(CD3OD，3-DFB)δ8.58(s，1H)，8.30-8.33(m，2H)，8.00(d，1H，J＝1.63Hz)，7.55-7.58(m，2H)，7.44-7.49(m，1H)，5.90(s，2H)，2.64(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrCl2N4O2S3588.9(M+1)；實(shí)測(cè)值590.9.1H-NMR(CD3OD，1-DFB)δ8.57(s，1H)，8.41-8.45(m，1H)，8.32-8.36(m，1H)，8.07-8.11(m，1H)，7.05-7.27(m，2H)，6.43-6.54(m，1H)，5.94(s，2H)，2.72(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrCl2N4O2S3588.9(M+1)；實(shí)測(cè)值590.9.
實(shí)施例276-2774-[7-溴-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-[7-溴-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯和4-[7-溴-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯按照實(shí)施例39步驟a的工藝，使用4-(7-溴-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(50mg，0.11mmol，實(shí)施例38步驟e)、2-溴甲基-1，3-二氟-苯(23mg，0.11mmol)、K2CO3(31mg，0.22mmol)和DMF(1.5mL)。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含2-4％2.0M NH3的甲醇/CH2Cl2)，得到4-[7-溴-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯與4-[7-溴-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯的混合物，為褐色的油(67mg，定量)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H15BrF2N2O4S3572.9(M+1)；實(shí)測(cè)值574.9.
b)4-[7-溴-3-(2，6-二氟-芐基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽和4-[7-溴-1-(2，6-二氟-芐基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將來(lái)自實(shí)施例276-277步驟a的混合物(67mg，0.11mmol)如實(shí)施例39-40步驟a所述轉(zhuǎn)化為脒和純化，得到2種區(qū)域異構(gòu)體3-(2，6-二氟芐基)(3-DFB)(3.5mg，米色固體)和1-(2，6-二氟芐基)(1-DFB)(1.6mg，白色固體)。1H-NMR(CD3OD，3-DFB)δ8.64(s，1H)，8.31-8.35(m，2H)，8.02(s，1H)，7.45-7.54(m，1H)，7.08-7.14(m，2H)，5.74(s，2H)，2.65(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrF2N4O2S3556.0(M+1)；實(shí)測(cè)值559.0.1H-NMR(CD3OD，1-DFB)δ8.42(s，1H)，8.35-8.37(m，1H)，8.32(s，1H)，7.39-7.48(m，1H)，6.99-7.06(m，1H)，7.03(t，2H，J＝8.34)，6.02(s，2H)，2.71(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H15BrF2N4O2S3556.0(M+1)；實(shí)測(cè)值559.0.
實(shí)施例2786-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-(4-羧基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽
a)6-[3-(4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-脲基]-己酸乙基酯在室溫下，將6-異氰酰-己酸乙基酯(370μL，2.16mmol)加入到4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺(250mg，1.08mmol，實(shí)施例135步驟a)的CH2Cl2(5mL，無(wú)水)溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜，然后稀釋在EtOAc中，用飽和NH4Cl溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以快速色譜純化(50-75％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(162mg，36％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.59(d，1H，J＝2.56Hz)，7.42-7.48(m，1H)，4.10-4.17(m，2H)，3.20-3.28(m，2H)，2.39(s，3H)，2.29-2.35(m，2H)，1.47-1.68(m，4H)，1.23-1.41(m，5H).
b)6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-2-硝基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯向25mL圓底燒瓶中裝入6-[3-(4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-脲基]-己酸乙基酯(110mg，0.264mmol，實(shí)施例278步驟a)、{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(234mg，0.529mmol，實(shí)施例140步驟a)、含水Na2CO3(2M，1.06mL，2.12mmol)、乙醇(1.06mL，無(wú)水)和甲苯(2.11mL，無(wú)水)。加入攪拌桿，使溶液脫氣10分鐘，加入Pd(PPh3)4(76mg，65.8μmol)。將反應(yīng)混合物在80℃ Ar下攪拌5小時(shí)，然后冷卻至室溫。在真空中除去溶劑。將殘余物用EtOAc稀釋?zhuān)名}水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(50-100％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(74mg，37％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C33H41N5O9S3748.2(M+1)；實(shí)測(cè)值747.8.
c)6-(3-{2-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯將6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-2-硝基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯(74mg，98.9μmol，實(shí)施例278步驟b)的EtOH(5mL)溶液如實(shí)施例20步驟c用Fe(28mg，0.50mmol)和NH4Cl水溶液(50mg，0.93mmol，10mL)還原。在真空中除去濾液中的溶劑。將粗產(chǎn)物用EtOAc稀釋?zhuān)盟望}水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(70.8mg，定量)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C33H43N5O7S3718.2(M+1)；實(shí)測(cè)值718.1.
d)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-(4-甲氧羰基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯在室溫下，將4-氯羰基-丁酸甲酯(20.4μL，0.148mmol)加入到6-(3-{2-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯(70.8mg，96.4μmol，實(shí)施例278步驟c)與三乙胺(41.2μL，0.296mmol)的CH2Cl2(5mL，無(wú)水)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以快速色譜純化(75-100％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(45.5mg，54.5％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C39H51N5O10S3846.3(M+1)；實(shí)測(cè)值845.9.
e)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠2-(4-羧基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸在0℃下，將氫氧化鋰(53.8μL，0.215mmol，4N水溶液)加入到6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-(4-甲氧羰基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯(45.5mg，53.8μmol，實(shí)施例278步驟d)的MeOH/H2O(10mL，2∶1)溶液中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過(guò)夜。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(50mg，定量)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C36H45N5O10S3804.2(M+1)；實(shí)測(cè)值803.9.
f)6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-(4-羧基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽將6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-(4-羧基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸(43.2mg，53.7μmol，實(shí)施例278步驟e)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(15mg，40％)。
1H-NMR(CD3OD)δ 8.27(s，1H)，8.00-8.04(m，1H)，7.87-7.89(m，1H)，7.63-7.71(m，1H)，7.49-7.54(m，1H)，7.32-7.35(m，1H)，7.25-7.26(m，1H)，3.22(t，2H，J＝6.98Hz)，2.73(s，3H)，2.34(t，2H，J＝7.44Hz)，2.05(s，3H)，1.88-2.03(m，4H)，1.54-1.71(m，4H)，1.34-1.48(m，4H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H37N5O8S3704.2(M+1)；實(shí)測(cè)值704.1.
實(shí)施例2796-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-(4-甲磺酰基-丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽
a)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯按照實(shí)施例278步驟d的工藝，使用6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯(39mg，54.3μmol，實(shí)施例278步驟b)、三乙胺(22.7μL，0.163mmol)、4-甲磺酰基-丁酰氯(15mg，81.5μmol，實(shí)施例209步驟a)和CH2Cl2(3mL，無(wú)水)。將反應(yīng)混合物稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為褐色的油(48mg，定量)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C38H51N5O10S4866.3(M+1)；實(shí)測(cè)值865.8.
b)6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸按照實(shí)施例278步驟e的工藝，使用6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯(48mg，54.3μmol，實(shí)施例279步驟a)的MeOH/H2O(2∶1)溶液和4N LiOH(54.3μL，0.217mmol)。粗產(chǎn)物直接用于下一步。
ESI-MS(m/z) 計(jì)算值C36H47N5O10S4838.2(M+1)；實(shí)測(cè)值837.8.
c)6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽將6-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-(4-甲磺?；?丁酰氨基)-6-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸(45.5mg，54.3μmol，實(shí)施例279步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(10mg，25％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.01-8.05(m，1H)，7.86-7.89(m，1H)，7.68(t，1H，J＝7.91Hz)，7.52-7.57(m，1H)，7.23-7.37(m，2H)，3.23(t，2H，J＝6.98Hz)，2.92(s，3H)，2.80(t，2H，J＝7.68Hz)，2.74(s，3H)，2.34(t，2H，J＝7.44Hz)，2.18(t，2H，J＝7.21Hz)，2.05(s，3H)，1.72-1.79(m，2H)，1.63-1.71(m，2H)，1.54-1.62(m，2H)，1.39-1.47(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C31H39N5O8S4738.2(M+1)；實(shí)測(cè)值738.1.
實(shí)施例2804-{2′-甲基-4′-[N′-(3-苯基-丙基)-胍基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)1，3-雙(叔丁氧羰基)-3-(3-苯基丙基)-2-甲基-2-假硫脲在0℃下，將氫化鈉(95.8mg，2.40mmol，60％礦物油分散體)分2批加入到1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(580mg，2.0mmol)的DMF(4mL，無(wú)水)溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，然后加入(3-溴-丙基)-苯(607μL，3.99mmol)，將反應(yīng)混合物加熱至60℃達(dá)16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(5-10％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油(310mg，38％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.16-7.30(m，5H)，3.53-3.58(m，2H)，2.62-2.66(m，2H)，2.38(s，3H)，1.95-2.05(m，2H)，1.5(s，9H)，1.46(s，9H).
b)4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-(3-苯基-丙基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-N-甲基-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(40mg，77.3μmo1，實(shí)施例220步驟b)和1，3-雙(叔丁氧羰基)-3-(3-苯基丙基)-2-甲基-2-假硫脲(63mg，0.154μmol，實(shí)施例280步驟a)溶于5％乙酸/MeOH(1.5mL)溶液，加熱至40℃過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，在真空中除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(5-10％EtOAc/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物，為紅色的油(26.9mg，40％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C44H55N5O8S3878.3(M+1)；實(shí)測(cè)值877.9.
c)4-{2′-甲基-4′-[N′-(3-苯基丙基)-胍基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-(3-苯基-丙基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-N-甲基-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒(26.9mg，30.6μmol，實(shí)施例280步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(11mg，62％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.00-8.04(m，2H)，7.69-7.73(m，2H)，7.17-7.34(m，8H)，3.30-3.34(m，2H)，2.71-2.76(m，5H)，2.27(s，3H)，1.93-2.02(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C29H31N5O2S3578.2(M+1)；實(shí)測(cè)值578.2.
實(shí)施例2814-[2′-甲基-4′-(N′-苯乙基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)1，3-雙(叔丁氧羰基)-3-(3-苯乙基)-2-甲基-2-假硫脲按照實(shí)施例280步驟a的工藝，使用1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(580mg，2.0mmol)、NaH(95.8mg，2.40mmol，60％礦物油分散體)、(2-碘-乙基)-苯(578μL，3.99mmol)和DMF(4mL，無(wú)水)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(5-10％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油(146mg，19％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.18-7.33(m，5H)，3.71-3.75(m，2H)，2.96-3.01(m，2H)，2.37(s，3H)，1.51(s，9H)，1.49(s，9H).
b)({4-[4′-(N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-苯乙基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯按照實(shí)施例280步驟b的工藝，使用{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(40mg，77.3μmol，實(shí)施例220步驟b)、1，3-雙(叔丁氧羰基)-3-(3-苯乙基)-2-甲基-2-假硫脲(61mg，0.155mmol，實(shí)施例281步驟a)和5％乙酸/MeOH(1.5mL)溶液。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(5-10％EtOAc/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物，為紅色的油(31.5mg，47％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C43H53N5O8S3864.3(M+1)；實(shí)測(cè)值863.9.
c)4-[2′-甲基-4′-(N′-苯乙基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將({4-[4′-(N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-苯乙基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(31.5mg，36.5μmol，實(shí)施例281步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(14.2mg，68.9％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，7.99-8.05(m，2H)，7.65-7.72(m，2H)，7.24-7.39(m，6H)，7.03-7.09(m，2H)，3.60(t，2H，J＝7.02Hz)，2.96(t，2H，J＝7.02Hz)，2.72(s，3H)，2.23(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H29N5O2S3564.2(M+1)；實(shí)測(cè)值564.2.
實(shí)施例2824-{2′-甲基-4′-[N′-(3-甲基-丁基)-胍基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a)1，3-雙(叔丁氧羰基)-3-(3-苯乙基)-2-甲基-2-假硫脲按照實(shí)施例280步驟a的工藝，使用1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(580mg，2.0mmol)、NaH(95.8mg，2.40mmol，60％礦物油分散體)、1-碘-3-甲基-丁烷(528μL，3.99mmol)和DMF(4mL，無(wú)水)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以制備型TLC純化(5-10％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油(235mg，33％)。1H-NMR(CDCl3)δ3.49-3.56(m，2H)，2.39(s，3H)，1.52-1.60(m，3H)，1.51(s，9H)，1.48(s，9H)，0.89-0.94(m，6H).
b)4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-(3-甲基-丁基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-N-叔丁氧羰基-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒按照實(shí)施例280步驟b的工藝，使用{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(40mg，77.3μmol，實(shí)施例220步驟b)、1，3-雙(叔丁氧羰基)-1-(3-甲基丁基)-2-甲基-2-假硫脲(56mg，0.155mmol，實(shí)施例282步驟a)和5％乙酸/MeOH(1.5mL)溶液。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(5-10％EtOAc/CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物，為紅色的油(29.2mg，46％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C40H55N5O8S3830.3(M+1)；實(shí)測(cè)值829.9.
c)4-{2′-甲基-4′-[N′-(3-苯基-丙基)-胍基]-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將4-{4′-[N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-N′-(3-甲基-丁基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-N-叔丁氧羰基-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒(29.2mg，35.2μmol，實(shí)施例282步驟b)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(13.6mg，73％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.00-8.05(m，2H)，7.67-7.73(m，2H)，7.18-7.34(m，3H)，3.30-3.34(m，2H)，2.72(s，3H)，2.27(s，3H)，1.66-1.79(m，1H)，1.52-1.59(m，2H)，0.99(d，6H，J＝6.64Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H31N5O2S3530.2(M+1)；實(shí)測(cè)值530.2.
實(shí)施例2834-(5-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸雙-三氟乙酸鹽 a)4-[5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊氧基]-苯甲酸甲基酯將4-羥基-苯甲酸甲基酯(3.01g，19.8mmol)、2-(5-溴-戊基)-異吲哚-1，3-二酮(3.9g，13.2mmol)與K2CO3(1.82g，13.2mmol)在丙酮(150mL)中的混合物加熱至回流達(dá)24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，在真空中除去溶劑。將粗產(chǎn)物稀釋在EtOAc中，用1N NaOH和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑。使粗產(chǎn)物從EtOAc中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(4g，83％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.95-7.98(m，2H)，7.83-7.86(m，2H)，7.70-7.73(m，2H)，6.86-6.89(m，2H)，4.00(t，2H，J＝6.22Hz)，3.88(s，3H)，3.73(t，2H，J＝7.29Hz)，1.82-1.89(m，2H)，1.73-1.81(m，2H)，1.50-1.57(m，2H).
b)4-(5-氨基-戊氧基)-苯甲酸甲基酯將4-[5-(1，3-二氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-戊氧基]-苯甲酸甲基酯(1g，2.72mmol，實(shí)施例283步驟a)與肼(98.4μL，3.13mmol)的MeOH∶H2O(10mL，4∶1)懸液加熱至65℃達(dá)2小時(shí)。在室溫下向反應(yīng)混合物加入另外的肼(171μL，5.44mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至70℃達(dá)2小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。向反應(yīng)物加入碳酸鉀(30mL，1N水溶液)和二氯甲烷(200mL)。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(500mg，77％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.95-8.00(m，2H)，6.88-6.92(m，2H)，4.02(t，2H，J＝6.43Hz)，3.88(s，3H)，2.71-2.76(m，2H)，1.79-1.86(m，2H)，1.49-1.56(m，4H).
c)4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸甲基酯在室溫下，將氯甲酸4-硝基苯基酯(99.2mg，0.49mmol)加入到{2-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(303mg，0.45mmol，實(shí)施例294步驟f)與吡啶(39.8μL，0.49mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入4-(5-氨基-戊氧基)-苯甲酸甲基酯(117mg，0.49mmol，實(shí)施例283步驟b)和三乙胺，在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，繼之以快速色譜純化(50-60％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(280mg，66.5％)。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C44H57N5O10S3Si940.3(M+1)；實(shí)測(cè)值939.9.
d)4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸將氫氧化鋰(45.8mg，2.08mmol)加入到4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸甲基酯(280mg，0.298mmol，實(shí)施例283步驟c)的1，4-二噁烷∶水(10mL，2∶1)溶液中，在室溫下經(jīng)過(guò)2天。在真空中除去溶劑。將殘余物稀釋在水中，用乙酸酸化至pH～5，用EtOAc萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(276mg，定量)。1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ7.93-7.99(m，3H)，7.83-7.86(m，2H)，7.52-7.59(m，2H)，7.15-7.20(m，2H)，6.85-6.89(m，2H)，4.21-4.26(m，2H)，3.99(t，2H，J＝6.43Hz)，3.13-3.24(m，2H)，2.61(s，3H)，2.02(s，3H)，1.75-1.83(m，2H)，1.43-1.56(m，13H)，1.02-1.08(m，2H)，0.07(s，9H).
e)4-[5-(3-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-戊氧基]-苯甲酸將四丁基氟化銨溶液(2.38mL，1M THF溶液)加入到4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-4-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧羰基氨基)-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸(276mg，0.298mmol，實(shí)施例283步驟d)的THF(10mL)溶液中，在35℃下經(jīng)過(guò)2天。在真空中除去溶劑。將殘余物稀釋在EtOAc中，用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為褐色固體(300mg，定量)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C37H44N5O8S3782.2(M+1)；實(shí)測(cè)值781.8.
f)4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-(N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-胍基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸將1，3-雙(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(433mg，1.49mmol)加入到4-[5-(3-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基}-脲基)-戊氧基]-苯甲酸(233mg，0.298mmol，實(shí)施例283步驟e)的5％AcOH/MeOH(10mL)溶液中，在35℃下經(jīng)過(guò)2天。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)快速色譜純化(1-6％MeOH/二氯甲烷)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(70mg，23％)。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C48H61N7O12S31024.4(M+1)；實(shí)測(cè)值1024.0.
g)4-(5-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸雙-三氟乙酸鹽將4-(5-{3-[3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-(N′，N″-雙(叔丁氧羰基)-胍基)-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸(15mg，14.6μmol，實(shí)施例283步驟f)如實(shí)施例1步驟d去保護(hù)和純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(4.2mg，39.6％)。
1H-NMR(CD3CN/D2O)δ8.19(s，1H)，7.98-8.03(m，1H)，7.90-7.95(m，2H)，7.80-7.83(m，1H)，7.69-7.74(m，1H)，7.49-7.55(m，2H)，6.93-6.97(m，3H)，4.01(t，2H，J＝6.43Hz)，2.88-3.03(m，2H)，2.64(s，3H)，1.94-1.97(m，3H)，1.66-1.73(m，2H)，1.29-1.37(m，4H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C33H37N7O6S3724.2(M+1)；實(shí)測(cè)值724.2.
實(shí)施例2844-(4-氨基-3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 按照實(shí)施例12步驟f的反應(yīng)條件，使用4-(4-氨基-3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺((實(shí)施例319步驟d)50mg，0.12mmol)和二甲基鋁酰胺試劑(5mL)。類(lèi)似的處理和HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(26mg，34％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.23(s，1H)，7.96(d，1H，J＝2.1Hz)，7.67(dd，1H，J＝2.1，8.6Hz)，6.85(d，1H，J＝8.6Hz)，2.71(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C12H12BrN3O2S3(M+H)405.9；實(shí)測(cè)值405.9，407.9(m+2).
實(shí)施例285[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基甲基]-膦酸 向含有{[4-(4′-羥基-2′，6′-二甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例224步驟b)233mg，0.42mmol)的燒瓶中加入Cs2CO3(137mg，0.42mmol)、DMF(2mL)和三氟-甲磺酸二乙氧基磷酰甲基酯(200mg，0.67mmol，(Xu，Y.et alJ.Org.Chem.61，7697(1996)；Phillion，D.et al Tetrahedron Lett.27，1477(1986))，加熱至50C。加熱該混合物，在Ar氣氛下攪拌18小時(shí)。在真空下除去DMF，將殘余物溶于EtOAc，用水和飽和NaCl洗滌。分離EtOAc層，經(jīng)Na2SO4干燥，在真空下蒸發(fā)，得到油。經(jīng)過(guò)制備型薄層色譜純化(EtOAc/己烷)，得到94mg(33％){3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2，6-二甲基-聯(lián)苯-4-基氧基甲基}-膦酸二乙基酯，為白色固體。將該固體溶于二氯甲烷(2mL)，在冰浴中冷卻。向其中加入碘代三甲基甲硅烷(Aldrich Chemical Company，60μL)，將混合物攪拌1小時(shí)，此時(shí)除去二氯甲烷，將殘余物溶于MeOH，用6N HCl處理。將該混合物攪拌3小時(shí)，在高真空下除去溶劑。向該殘余物加入50％TFA的二氯甲烷溶液，將混合物攪拌1小時(shí)。在真空下除去TFA和二氯甲烷，殘余物經(jīng)過(guò)制備型HPLC純化(反相乙腈/水)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(30mg，33％)。1H-NMR(CD3OD)δ7.8-7.7(m，2H)，7.62(s，1H)，7.5-7.3(m，2H)，6.7(s，2H)，3.77(d，2H，J＝9.8Hz)，2.44(s，3H)，1.74(s，6H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值 C21H23N2O6PS3527.1(M+H)；實(shí)測(cè)值527.1.
實(shí)施例2865-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲脒 a)4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲醛在0℃下，將硝酸鉀.(110g，1.09mol)的H2SO4(550mL，濃)溶液歷經(jīng)45分鐘加入到4-溴-噻吩-2-甲醛(207.6g，1.08mol)的H2SO4(1.1L，濃)與CH2Cl2(5mL，無(wú)水)溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物倒在冰上，過(guò)濾，用水和己烷洗滌。將黃色固體干燥過(guò)夜，得到標(biāo)題化合物(251.4g，98.6％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.56(s，1H)。
b)4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲醛肟在室溫下，將鹽酸羥胺(85g，1.2mol)歷經(jīng)5分鐘加入到4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲醛(234mg，0.529mmol，實(shí)施例286步驟a)的EtOH(7.5mL，200 proof-無(wú)水)吡啶(100mL，無(wú)水)溶液中。將反應(yīng)混合物加熱至回流過(guò)夜，然后冷卻至室溫。在真空中除去溶劑，得到固體殘余物，用水洗滌，過(guò)濾。將固體在高真空下干燥過(guò)夜，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(225g，88％)。該固體無(wú)需進(jìn)一步鑒別即可用于下一步。
c)4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲腈將4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲醛肟(216g，0.86mol，實(shí)施例286步驟b)與乙酸酐(1L，10.6mol)的混合物加熱至回流達(dá)4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，在真空中除去溶劑。將粗反應(yīng)混合物稀釋在二氯甲烷中，用水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，在真空中濃縮，得到殘余物，在二乙醚/己烷中攪拌，過(guò)濾，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(170.2g，85％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ8.25(s，1H)。
d)4-(3-溴-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-甲腈將三乙胺(104mL，0.75mol)緩慢加入到4-溴-5-硝基-噻吩-2-甲腈(165g，0.708mol，實(shí)施例286步驟c)與3-溴-苯硫酚(78mL，0.76mmol)的THF(1.2L)溶液中，在室溫下經(jīng)過(guò)2天。在真空中除去溶劑，將所得殘余物稀釋在EtOAc中，用飽和Na2CO3溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑，將殘余物在二乙醚∶己烷(1∶5)中攪拌，過(guò)濾，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(232.7g，96％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.88-7.92(m，1H)，7.65-7.81(m，2H)，7.48-7.54(m，1H)，7.22(s，1H).
e)4-(3-溴-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-甲腈在室溫下，將mCPBA(26.3g，11.7mol，77％)的1，2-二氯乙烷溶液歷經(jīng)30分鐘加入到4-(3-溴-苯硫基)-5-硝基-噻吩-2-甲腈(10g，29.3mmol，實(shí)施例286步驟d)的1，2-二氯乙烷(200mL)溶液中。將反應(yīng)混合物加熱至回流達(dá)2.5小時(shí)，然后冷卻至室溫。用0.5N NaOH和水洗滌反應(yīng)混合物，有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。在真空中除去溶劑。將殘余物在二乙醚中攪拌，過(guò)濾，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(6.9g，63％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ8.53(s，1H)，8.14-8.16(m，1H)，7.98-8.05(m，2H)，7.62-7.67(m，1H).
f)4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲腈在-78℃下，將硫代甲醇鈉(1.87g，26.8mmol)的EtOH(26.8mL，無(wú)水)溶液分批加入到4-(3-溴-苯磺?；?-5-硝基-噻吩-2-甲腈(10g，26.8mmol，實(shí)施例286步驟e)的THF(67mL，無(wú)水)懸液中。使反應(yīng)溫度維持在-78℃，攪拌1小時(shí)。在-78℃下用乙酸(2mL，34.9mmol)猝滅反應(yīng)，繼之以使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后過(guò)濾。將黃色固體用二乙醚洗滌，保存。在真空中濃縮濾液，得到殘余物，將其懸浮在二乙醚中，在室溫下攪拌過(guò)夜。從懸液中過(guò)濾固體。合并黃色固體，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(8.77g，87.4％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.45(s，1H)，7.97-8.16(m，3H)，7.62-7.67(m，1H)，2.71(s，3H).
g)5-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺酰基)-噻吩-2-甲腈將4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲腈(實(shí)施例286步驟f，200mg，0.534mmol)、哌啶(56mg，0.64mmol)、Pd(OAc)2(24mg，0.11mmol)、BINAP(100mg，0.16mmol)與Cs2CO3在2mL甲苯中的混合物在150℃ Ar下攪拌16小時(shí)，然后冷卻至室溫。混合物直接經(jīng)過(guò)PTLC純化(30％EtOAc/己烷)，得到20mg產(chǎn)物，為淺黃色油。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ7.68(m，1H)，7.67(s，1H)，7.54-7.52(m，1H)，7.39-7.32(m，2H)，3.16-3.12(m，4H)，2.45(s，3H)，1.64-1.59(m，4H)，1.55-1.50(m，2H). 質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值 C17H18N2O2S3，379.1(M+H)，實(shí)測(cè)值379.3.
b){亞氨基-[5-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺?；?-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在-78℃ Ar下，向氨基甲酸叔丁酯(8mg，0.069mmol，AldrichChemical Company)的1mL THF溶液加入35μL n-BuLi。將混合物在-78℃下攪拌15分鐘。加入5-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲腈(20mg，0.053mmol，實(shí)施例286步驟g)的1mL THF溶液。將所得混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，然后在50℃下攪拌過(guò)夜。冷卻至室溫，混合物直接經(jīng)過(guò)PTLC純化(20％EtOAc/己烷)，得到10mg(38％)產(chǎn)物，為無(wú)色的油。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ 8.42(s，1H)，7.74(dd，1H，J＝1.6，1.6Hz)，7.67(s，1H)，7.62(ddd，1H，J＝7.5，1.6，1.6Hz)，7.57(d，1H，J＝7.5，1.6，1.6Hz)，7.52(dd，1H，J＝7.5，7.5)，3.42-3.40(m，4H)，2.54(s，3H)，1.64(br s，6H)，1.61(s，9H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值 C22H29NO4S3，496.1 (M+H)，實(shí)測(cè)值495.9.
i)5-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒在0℃ Ar下，向5-甲硫基-4-(3-哌啶-1-基-苯磺?；?-噻吩-2-甲脒(10mg，0.020mmol，實(shí)施例286步驟h)的1mL CH2Cl2溶液加入5滴(～200μL)TFA。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)。在減壓下除去溶劑，繼之以殘余物的硅膠快速色譜純化(5％MeOH/CH2Cl2)，得到7.5mg(77％)產(chǎn)物，為無(wú)色的油。
1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ 8.25(s，1H)，7.76(dd，1H，J＝1.6，1.6Hz)，7.62(ddd，1H，J＝7.5，1.6，1.6Hz)，7.56(ddd，1H，J＝7.5，1.6，1.6Hz)，7.51(dd，1H，J＝7.5，7.5)，3.31-3.30(m，4H)，2.54(s，3H)，1.57-1.56(m，6H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C17H21N3O2S3，396.1(M+H)，實(shí)測(cè)值396.2.
實(shí)施例2875-甲硫基-4-{3-[5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-苯磺?；鶀-噻吩-2-甲脒 a)4-碘-5-甲基-1H-苯并咪唑?qū)?-甲基-1H-苯并咪唑(132mg，1.0mmol)與NIS(248mg，1.10mmol)的1mL TFA溶液回流1小時(shí)，然后冷卻至室溫。用30mL EtOAc處理，用飽和NaHCO3溶液中和混合物。將有機(jī)層用H2O(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，干燥(Na2SO4)。在減壓下除去溶劑，繼之以殘余物的硅膠快速色譜純化(5％MeOH/CH2Cl2)，得到78mg(30％)產(chǎn)物，為白色固體。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ8.07(d，1H)，7.57(br s，1H)，7.22(d，1H，J＝8.4Hz)，2.59(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C8H7IN2，259.0(M+H)，實(shí)測(cè)值259.2.
b)4-碘-5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑在Ar下，向4-碘-5-甲基-1H-苯并咪唑(100mg，0.39mmol，實(shí)施例287步驟a)與SEMC1(71mg 0.43mmol)的2mL DMF溶液加入NaH(11mg，0.43mmol)。將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，直接經(jīng)過(guò)PTLC純化(25％EtOAc/己烷)，得到122mg(81％)產(chǎn)物，為無(wú)色的油。
1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ7.95(s，1H)，7.37(d，1H，J＝8.4Hz)，7.21(d，1H，J＝8.4Hz)，5.48(s，2H)，3.47(t，2H，J＝8.3Hz)，2.59(s，3H)，0.89(t，2H，J＝8.3Hz)，-0.06(s，9H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C14H21IN2OSi，389.1(M+H)，實(shí)測(cè)值389.0.
c)[亞氨基-(5-甲硫基-4-{3-[5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-苯磺?；鶀-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，0.044mmol，實(shí)施例140步驟a)、4-碘-5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑(21mg，0.054mmol，實(shí)施例287步驟b)與Pd(PPh3)4在1.2mL 1∶1∶2 EtOH/2MNa2CO3/甲苯中的混合物在90℃下攪拌5小時(shí)，然后冷卻至室溫。用3mLH2O處理，用EtOAc萃取混合物(3×5mL)。在減壓下除去溶劑，繼之以殘余物的硅膠快速色譜純化(30％EtOAc/己烷)，得到21mg(71％)產(chǎn)物，為淺黃色固體。1H-NMR(CDCl3；400MHz)δ 8.42(s，1H).8.08(s，1H)，8.05(s，1H)，8.01(ddd，1H，J＝7.2，1.8，1.7Hz)，7.71-7.67(m，2H)，7.57(d，1H，J＝8.4Hz)，7.39(d，1H，J＝8.7Hz)，5.64(s，2H)，3.57(t，2H，J＝8.3Hz)，2.61(s，3H)，2.33(s，3H)，1.51(s，9H)，0.95(t，2H，J＝8.3)，-0.03(s，9H).).
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C31H40N4O5S3Si，673.2，(M+H)，實(shí)測(cè)值672.9.
d)5-甲硫基-4-{3-[5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-苯磺?；鶀-噻吩-2-甲脒向[亞氨基-(5-甲硫基-4-{3-[5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-苯磺酰基}-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(7mg，0.01mmol，實(shí)施例287步驟c)的0.7mL CH2Cl2溶液加入0.3mL TFA。將所得溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。在減壓下除去溶劑，繼之以殘余物的硅膠快速色譜純化(5-10％MeOH/CH2Cl2)，得到6mg(84％)產(chǎn)物，為無(wú)色的油。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ8.84(s，1H).8.32(s，1H)，8.14(ddd，1H，J＝7.6，1.6，1.6Hz).8.08(s，1H)，7.83-7.77(m，3H)，7.52(d，1H，J＝8.4Hz)，5.79(s，2H)，3.65(t，2H，J＝8.0Hz)，2.72(s，3H)，2.29(s，3H)，0.93(t，2H，J＝8.0Hz)，-0.04(s，9H). 質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值 C26H32N4O3S3Si，573.1，(M+H)，實(shí)測(cè)值573.0.
實(shí)施例2884-[3-(5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將[亞氨基-(5-甲硫基-4-{3-[5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-苯磺酰基}-噻吩-2-基)-甲基]-氨基甲酸叔丁基酯(14mg，0.021mmol，實(shí)施例287步驟c)的1mL TFA溶液在50℃Ar下加熱2小時(shí)，冷卻至室溫。在減壓下除去溶劑，繼之以殘余物的硅膠快速色譜純化(10-15％MeOH/CH2Cl2)，得到14mg(100％)產(chǎn)物，為無(wú)色的油。1H-NMR(CD3OD；400MHz)δ9.28(s，1H).8.35(s，1H)，8.20(d，1H，J＝7.6Hz).8.11(s，1H)，7.86(dd，1H，J＝7.7，7.7)，7.80(m，2H)，7.63(d，1H，J＝8.6Hz)，2.72(s，3H)，2.30(s，3H).質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C20H18N4O2S3，443.1.00(M+H)，實(shí)測(cè)值443.1.
實(shí)施例2894-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒.TFA鹽a)(亞氨基-{4-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯將{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.058mmol，40mg，實(shí)施例140步驟a)、2-碘-3-甲基-5-硝基吡啶(0.08mmol，21.1mg)、CuI(0.01mmol，2.2mg)與(Ph3P)4Pd(0.006mmol)的DMF(0.6mL)溶液在100℃ Ar下加熱3小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入水(20mL)中。用CH2Cl2萃取產(chǎn)物(3×10mL)。合并CH2Cl2萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)過(guò)二氧化硅純化(30％EtOAc∶己烷)，得到(亞氨基-{4-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯。收率48％；1H NMR(CDCl3)δ9.36(br，1H)，8.37和8.25(s，1H每個(gè))，8.1和7.8(d，J＝2.4Hz，1H每個(gè))，7.93(s，1H)，7.74(t，J＝6.8Hz，1H)，2.7和2.5(s，3H每個(gè))，1.35(s，9H)b)4-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒.TFA鹽將(亞氨基-{4-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，實(shí)施例289步驟a)溶于CH2Cl2與TFA的1∶1混合物(1mL)。將所得溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，在真空中濃縮，得到黃色的油，在高真空中干燥。然后加入乙醚(10mL)，抽吸過(guò)濾收集所生成的沉淀，得到4-[3-(3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒.TFA鹽。收率78％；1H NMR(DMSO)δ9.36(br，2H)，9.31(d，J＝2.4Hz，1H)，8.75(brs，s)，8.65(d，J＝2.4Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.20(m，1H)，8.13和8.06(d，J＝6.6Hz，1H每個(gè))，7.84(t，J＝6.7Hz，1H)，2.7和2.4(s，3H每個(gè))；MS 448.03(M+)計(jì)算值C18H16N4O4S3；實(shí)測(cè)值449.1(M++1)實(shí)施例2904-[3-(5-氨基-3-甲基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒.TFA鹽 將{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(0.058mmol，40mg，實(shí)施例140；步驟a)、2-碘-3-甲基-5-硝基吡啶(0.08mmol，2l.1mg)、CuI(0.01mmol，2.2mg)與(Ph3P)4Pd(0.006mmol)的DMF(0.6mL)溶液在100℃ Ar下加熱3小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入水(20mL)中。用CH2Cl2萃取產(chǎn)物(3×10mL)。合并CH2Cl2萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)過(guò)二氧化硅純化(30％EtOAc∶己烷)，得到預(yù)期偶聯(lián)產(chǎn)物。將產(chǎn)物(54.8mg，0.1mmol)懸浮在EtOH∶水(2∶1，10mL)中，加入NH4Cl(53.5mg，1mmol)和Fe粉(28mg，0.5mmol)。將所得混合物在回流下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入飽和Ma2CO3溶液中，用CH2Cl2萃取產(chǎn)物(3×10mL)。合并CH2Cl2萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到褐黃色油。然后將該化合物(29mg)溶于CH2Cl2與TFA的1∶1混合物(1mL)。將所得溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，在真空中濃縮，得到黃色的油，在高真空中干燥。然后加入乙醚(10mL)，抽吸過(guò)濾收集所生成的沉淀，得到標(biāo)題化合物。收率28％；1H NMR(DMSO)δ 9.37(br，2H)，9.07(br，2H)，8.4(s，1H)，8.05(s，1H)，7.9(d，J＝2.6Hz，1H)，7.85(m，2H)，7.74(t，J＝6.7Hz，1H)，7.1(s，1H)，2.6和2.2(s，3H每個(gè))；MS 418.06(M+)計(jì)算值C18H16N4O2S3；實(shí)測(cè)值419.1(M++1)實(shí)施例2914-[3-(3-甲基-吡嗪-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒TFA鹽 a)(亞氨基-{4-{3-(3-甲基-吡嗪-2-基)-苯硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯向含有{亞氨基-[5-甲硫基-4-(3-三丁基甲錫烷基-苯磺酰基)-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(22.3mg，0.031mmol，實(shí)施例152步驟a)、甲基-碘吡嗪(8.3mg，0.038mmol)、Pd(PPh3)4(10mol％，3.6mg)和CuI(20mol％，1.2mg)的燒瓶中加入0.5mL DMF。將燒瓶用Ar凈化，然后在油浴中加熱至100℃達(dá)16小時(shí)。在真空中濃縮所得產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(80％EtOAc-己烷)，得到7.2mg(46％)產(chǎn)物，為黃色固體，被少量錫污染。
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值 C22H24N4O4S3，505.1(M+H)，實(shí)測(cè)值405.1(M+H-BOC).1H NMR(CDCl3，400MHz)d 1.53(s，9H)，2.60(s，3H)，2.65(s，3H)，7.70(t，1H，J＝8.8Hz)，7.87-7.89(m，2H)，8.10(d，1H，J＝8.8Hz)，8.25(s，1H)，8.53(m，2H)；b)4-[3-(3-甲基-吡嗪-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒TFA鹽在0℃下，向7mg(亞氨基-{4-{3-(3-甲基-吡嗪-2-基)-苯硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例291步驟a)的0.3mLCH2Cl2溶液加入含有10μL H2O的0.3mL TFA。使反應(yīng)物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。1小時(shí)后，在真空中濃縮溶液，利用甲苯進(jìn)行共沸除去(2×5mL)。將橙色-褐色固體用0.2mL己烷/0.5mL CHCl3處理，用聲波微細(xì)粉碎。經(jīng)由吸移管除去上清液。將固體干燥，得到4.8mg(71％)4-[3-(3-甲基-吡嗪-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒TFA鹽，為黃色的膜。
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值 C17H16N4O2S3，404.5.(M+H)，實(shí)測(cè)值405.1；1H NMR(CD3OD，400MHz)d 2.62(s，3H)，2.74(s，3H)，7.79(t，1H，J＝8.9Hz)，7.99-8.01(m，1H)，8.17-8.19(m，1H)，8.29(t，1H，J＝1.7Hz)，8.35(s，1H)，8.56-8.58(m，2H)；實(shí)施例2924-[3-(4-哌嗪-1-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒
a)4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲基向含有0.15g(0.4mmol)4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲腈(實(shí)施例286步驟f)、44.1μL(0.4mmol)N-甲基哌嗪、4.5mg(0.02mmol)Pd(OAc)2、24.8mg(.04mmol)BINAP和195mg(0.6mmol)CsCO3的燒瓶中加入2.5mL甲苯。將燒瓶用Ar凈化，加熱至100℃達(dá)16小時(shí)。然后在真空中濃縮反應(yīng)物，經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(50％-EtOAc-己烷)，分離低Rf產(chǎn)物，再次進(jìn)行制備型TLC純化(10％MeOH-CHCl3)，得到15.5mg(10％收率)4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲腈，純度大于98％。
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C17H19N3O2S3，394.06(M+H)，實(shí)測(cè)值394.1；1H NMR(CDCl3，400MHz)d 2.36(s，3H)，2.57-2.59(m，4H)，2.62(s，3H)，3.29(m，4H)，7.11-7.13(m，1H)，7.38-7.40(m，2H)，7.49(d，1H，J＝1.2Hz)，7.84(s，1H)；b)4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲亞胺酸甲基酯向含有15mg(0.03mmol)4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲腈(實(shí)施例292步驟a)的燒瓶中加入1mL MeOH，在室溫下將所得溶液用1mL 2M NaOMe的MeOH溶液(2mmol)處理。將反應(yīng)物加熱至50℃達(dá)2小時(shí)。此時(shí)冷卻至室溫，加入2滴H2O。在真空中濃縮混合物，繼之以制備型TLC純化(5％MeOH-CHCl3)，得到12mg(74％)4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲亞胺酸甲基酯，為黃色固體。
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H23N3O3S3，426.09(M+H)，實(shí)測(cè)值426.2；1H NMR(CDCl3，400MHz)d 2.36(s，3H)，2.56-2.58(m，7H)，3.27-3.30(m，4H)，3.88(s，3H)，7.09-7.11(m，1H)，7.35-7.43(m，2H)，7.54(s，1H)，7.57(s，1H)，7.71(s，1H)；c)4-[3-(4-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲亞胺酸甲基酯(10mg，0.023mmol，實(shí)施例292步驟b))、NH4OAc(10mg，0.6mmol)和1mL 2M NH3的MeOH溶液在60℃密封試管中加熱3小時(shí)。然后在真空中濃縮反應(yīng)物，經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(10％MeOH-CHCl3-飽和NH3)，得到8.7mg(94％)4-[3-(4-哌嗪-1-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒，為黃色固體。
質(zhì)譜(ESI，m/z)計(jì)算值C18H23N3O3S3，411.09(M+H)，實(shí)測(cè)值411.2.1H NMR(CD3OD，400MHz)δ2.36(s，3H)，2.61-2.64(m，4H)，2.67(s，3H)，3.28-3.31(m，4H)，7.24-7.27(m，1H)，7.42-7.44(m，2H)，7.54(d，1H，J＝1.3Hz)，8.00(s，1H)；實(shí)施例2934-[3-(4-甲基-嘧啶-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)(亞氨基-{4-[3-(4-甲基-嘧啶-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯在氬下，向帶有回流冷凝器的燒瓶中加入按照Yamanaka，Sakamoto，Nishimura，和Sagi，Chem.Pharm.Bull.35(8)，3119-3126(1987)的工藝所制備的5-溴-4-甲基-嘧啶(9mg，0.044mmol)、{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，0.044mmol，實(shí)施例140步驟a)、Na2CO3(2M，0.220mL，0.44mmol)、Pd(PPh3)4(8mg，0.007mmol)、乙醇(0.220mL)、甲苯(0.440mL)、PdCl2(PPh3)2(42mg，0.06mmol)、二噁烷(4mL)和三乙胺(420μL，3mmol)，將混合物在90℃下攪拌2小時(shí)15分鐘。冷卻至室溫后，加入EtOAc(2mL)和NaHCO3(飽和，2mL)，分離各層。在真空中濃縮有機(jī)層，繼之以粗產(chǎn)物的制備型TLC純化(含5％甲醇的二氯甲烷)，得到標(biāo)題化合物(19mg，87％)，為白色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ9.12(s，1H)，8.54(s，1H)，8.10-7.29(m，7H)，2.59(s，3H)，2.50(s，3H)，1.51(s，9H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H24N4O4S3504.1(M-BOC)+H；實(shí)測(cè)值405.1.
b)4-[3-(4-甲基-嘧啶-5-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒將(亞氨基-{4-[3-(4-甲基-嘧啶-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例293步驟a)15mg，0.03mmol)溶于二氯甲烷(1mL)，加入水(1滴)，繼之以三氟乙酸(1mL)。將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)40分鐘。在真空中除去溶劑，使殘余物與二氯甲烷和甲醇共蒸發(fā)，然后經(jīng)過(guò)制備型TLC純化(含10％甲醇的二氯甲烷)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色玻璃狀物(4mg，32％)。1H-NMR(CD3OD)δ9.05(s，1H)，8.61(s，1H)，8.13-8.08(m，2H)，8.04(s，1H)，7.78-7.76(m，2H)，2.66(s，3H)，2.49(s，3H). ESI-MS(m/z)計(jì)算值C17H16N4O2S3404.5(M+H)；實(shí)測(cè)值405.1.
實(shí)施例2944-{4′，6′-雙-[3-(3-甲磺酰基-丙基)-脲基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽a)4-溴-5-甲基-3-硝基苯甲酸甲基酯在室溫下，將4-溴-3-甲基苯甲酸甲基酯(10.13g，44mmol)溶于H2SO4(120mL)與TFA(15mL)的混合物。將溶液在冰浴上冷卻，歷經(jīng)30分鐘分批加入KNO3(4.65g，46mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌4小時(shí)，在此期間使其溫?zé)嶂潦覝?。TLC分析(在微小含水處理之后)顯示原料完全消失(30％EtOAc/Hex)。將溶液倒在冰上，用EtOAc萃取含水漿液(3×150mL)。將有機(jī)層用5％Na2CO3(3×75mL)、NaHCO3(3×50mL)、水(2×100mL)、鹽水(100mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，得到黃色固體/凝膠物質(zhì)(11.6g)，在TLC中為一個(gè)斑點(diǎn)。1H NMR分析顯示有兩個(gè)(主要)產(chǎn)物，比例～2∶1，相當(dāng)于鄰-與間-硝基苯甲酸酯衍生物。產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可進(jìn)行下一步。
b)4-溴-5-甲基-3-硝基苯甲酸在室溫下，將4-溴-5-甲基-3-硝基苯甲酸甲基酯((實(shí)施例294步驟a(11.6g，42.3mmol)溶于MeOH(400mL)，經(jīng)由加液漏斗歷經(jīng)30分鐘滴加2N NaOH(43mL)。將溶液攪拌12小時(shí)，在此期間出現(xiàn)沉淀，sm消失(TLC顯示僅有30％EtOAc中的基線斑點(diǎn))。用濃HCl調(diào)節(jié)pH至～2，在真空中除去甲醇。向含水漿液加入EtOAc(300mL)，分離各層。用EtOAc萃取水層(2×50mL)，然后棄去。合并有機(jī)萃取液，TLC分析顯示有兩種產(chǎn)物(含40％EtOAc的己烷，4％AcOH)。合并有機(jī)萃取液，用0.5N NaH2PO4/0.5N NaOAc的3∶1溶液洗滌(～30×50mL部分)，直至完全除去鄰-硝基苯甲酸(TLC上較低斑點(diǎn)，含40％EtOAc的Hex，4％AcOH)。然后將有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，得到5.4g(47％)白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ 8.10(m，2H)，2.54(s，3H).
c)(4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-氨基甲酸 2-三甲代甲硅烷基-乙基酯在室溫下，將二苯基疊氮化磷酰(4.31mL，20mmol)加入到攪拌著的4-溴-3-甲基-5-硝基-苯甲酸(實(shí)施例294步驟b(5.2g，20mmol))與二異丙基乙胺(3.66mL，21mmol)的1，4-二噁烷(80mL)溶液中。在室溫下30分鐘后，將反應(yīng)物加熱至90℃達(dá)5分鐘。加入三甲代甲硅烷基乙醇(5.73mL，40mmol)，將溶液在95℃下攪拌16小時(shí)。在真空中除去溶劑，使殘余物在EtOAc(100mL)與水(30mL)之間分配。有機(jī)層進(jìn)一步用含水檸檬酸(3×30mL)、NaHCO3(2×30mL)和鹽水(50mL)萃取。經(jīng)過(guò)柱色譜純化(9∶1 Hex/EtOAc)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H NMR(CDCl3)δ7.73(d，1H，J＝2.4Hz)，7.41(br d，1H，J＝1.7Hz)，7.01(s，1H)，4.24(m，2H)，2.43(s，3H)，1.02(m，2H)，0.04(s，9H).
d)(3-氨基-4-溴-5-甲基-苯基)-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯將鐵粉(6.1g，109mmol)加入到(4-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(實(shí)施例294步驟c(4.1g，10.9mmol))與NH4Cl(5.84g，109mmol)的EtOH(27mL)與水(54mL)懸液中。將反應(yīng)物在85℃下加熱14小時(shí)。使冷卻后的混合物通過(guò)celite過(guò)濾，用1∶1EtOAc/MeOH(200mL)洗滌固體。在真空中濃縮濾液，使殘余物在EtOAc(100mL)與H2O(30mL)之間分配。有機(jī)溶液用水(30mL)和鹽水(50mL)洗滌。將溶液干燥和濃縮，得到標(biāo)題化合物(3.24g，86％)，為褐色固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(CDCl3)δ6.96(s，1H)，6.54(s，1H)，6.39(s，1H)，4.26(m，2H)，4.16(s，2H)，2.35(s，3H)，1.06(m，2H)，0.08(s，9H).
e)[3-氨基-5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯將乙酸鈀(106mg，0.47mmol)、2-(二環(huán)己膦基)聯(lián)苯(658mg，1.88mmol)、(3-氨基-4-溴-5-甲基-苯基)-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯(實(shí)施例294步驟d(3.24g，9.38mmol))合并在燒瓶中，置于氬氣氛下。加入對(duì)-二噁烷(40mL)，繼之以三乙胺(5.23mL，38mmol)和頻哪醇硼烷(4.08mL，28mmol)。將溶液在80℃下攪拌1小時(shí)，在此期間出現(xiàn)沉淀。在真空中除去溶劑，使殘余物在EtOAc(100mL)與含水NH4Cl(50mL)之間分配。有機(jī)層進(jìn)一步用NH4Cl(2×30mL)、NaHCO3(30mL)和鹽水(50mL)萃取。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，在真空中濃縮，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(8∶2 Hex/EtOAc)，得到產(chǎn)物(2.44g，66％)，為褐色固體。1H NMR(CDCl3)δ 6.77(s，1H)，6.38(s，1H)，6.28(d，1H，J＝1.9Hz)，4.91(s，2H)，4.23(m，2H)，2.42(s，3H)，1.32(s，12H)，1.03(m，2H)，0.05(s，9H).
f){6-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯向帶有攪拌桿的燒瓶中裝入[3-氨基-5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯((實(shí)施例294步驟e)2.34g，5.96mmol)、{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)2.93g，5.96mmol)、含水Na2CO3(2M，11.9mL，23.8mmol)、乙醇(12mL)和甲苯(24mL)。向溶液噴射氬達(dá)10分鐘，加入Pd(PPh3)4(689mg，0.6mmol)。將兩相溶液在80℃惰性氣氛下劇烈攪拌16小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入EtOAc(80mL)和水(20mL)，分離各層。將有機(jī)層用飽和NaHCO3(2×20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的柱色譜純化(85∶15 DCM/EtOAc)，得到標(biāo)題化合物(2.24g，55％)，為淺褐色固體。1H-NMR(CDCl3)δ7.98(ddd，1H，J＝1.3，1.9，7.8Hz)，7.89(m，2H)，7.61(t，1H，J＝7.7Hz)，7.5(dt，1H，J＝1.3，7.7Hz)，6.88(s，1H)，6.55(d，1H，J＝1.7Hz)，6.47(s，1H)，4.26(m，2H)，3.42(s，2H)，2.56(s，3H)，1.9(s，3H)，1.52(s，9H)，1.06(m，2H)，0.08(s，9H).
g){[4-(4′，6′-二氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯將四丁基氟化銨溶液(1M THF溶液，1mL，1mmol)加入到{6-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基}-氨基甲酸2-三甲代甲硅烷基-乙基酯((實(shí)施例294步驟f)86mg，0.11mmol)的THF(1mL)溶液中。將溶液在50℃下加熱12小時(shí)，然后使溶液在EtOAc(50mL)與水(20mL)之間分配。分離各層，有機(jī)層進(jìn)一步用水(5×10mL)和鹽水(20mL)萃取。將溶液經(jīng)硫酸鈉干燥，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物(71mg，84％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H28N4O4S3(M+H)533.1；實(shí)測(cè)值532.7.
h)4-{4′，6′-雙-[3-(3-甲磺?；?丙基)-脲基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例296的工藝，在二噁烷(4mL)中使用{[4-(4′，6′-二氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(71mg，0.13mmol)、二苯基疊氮化磷酰(250μL，1mmol)、4-甲磺?；?丁酸(166mg，1mmol)和DIEA(183μL，1.05mmol)。類(lèi)似地將粗中間體用TFA/DCM處理，經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到產(chǎn)物(8mg，7％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.30(s，1H)，8.04(ddd，1H，J＝1.1，2.1，8.1Hz)，7.90(t，1H，J＝1.6Hz)，7.73(t，1H，J＝7.9Hz)，7.58(m，1H)，7.49(m，1H)，7.23(dd，1H，J＝0.6，2.1Hz)，3.38(t，2H，J＝6.8Hz)，3.20(m，4H)，3.0(m，2H)，3.01(s，3H)，2.97(s，3H)，2.74(s，3H)，2.05(m，2H)，2.02(s，3H)，1.87(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H32N4O4S3(M+H)759.1；實(shí)測(cè)值759.1，781.1(M′+Na).
實(shí)施例29511-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-十一酸雙-三氟乙酸鹽 a)8-甲基-1H-苯并[d][1，3]噁嗪-2，4-二酮向2-氨基-3-甲基苯甲酸(9.07g，60mmol)的THF(60mL)溶液同時(shí)歷經(jīng)30分鐘加入二異丙基乙胺(20.9mL)和三光氣(5.94g，20mmol)的二氯甲烷(60mL)溶液。加入完成后，將混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。將固體過(guò)濾，用乙醚(2×100mL)和H2O(3×50mL)洗滌，在高真空中干燥，得到標(biāo)題化合物(10.02g，94％收率)，為白色固體。
1H NMR(DMSO)δ11.02(s，1H)，7.76(d，1H，J＝7.7Hz)，7.57(d，1H，J＝7.5Hz)，7.17-7.13(m，1H)，2.32(s，3H).
b)8-甲基-6-硝基-1H-苯并[d][1，3]噁嗪-2，4-二酮在冰-水浴中，向裝有8-甲基-1H-苯并[d][1，3]噁嗪-2，4-二酮((實(shí)施例295步驟a) 9.27g，52.4mmol)的燒瓶中歷經(jīng)5分鐘加入濃H2SO4(90mL)。攪拌10分鐘后，歷經(jīng)15分鐘加入發(fā)煙HNO3(2.9mL)。將反應(yīng)混合物在冰-水浴中攪拌另外30分鐘，在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，然后緩慢倒入冰中，同時(shí)攪拌。收集固體，用H2O洗滌(3×50mL)，在高真空中干燥，得到標(biāo)題化合物(10.4g，89％收率)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO)δ11.65(br s，1H)，8.46-8.43(m，2H)，2.44(s，3H).
c)2-氨基-3-甲基-5-硝基-苯甲酸甲基酯向8-甲基-6-硝基-1H-苯并[d]1，3]噁嗪-2，4-二酮((實(shí)施例295步驟b)1.04g，4.68mmol)的甲醇(30mL)懸液加入甲醇鈉的甲醇溶液(0.5M，0.94mL，4.7mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)，加入飽和NH4Cl進(jìn)行中和。在減壓下除去甲醇，過(guò)濾所得混合物。將固體用H2O洗滌(兩次)，在高真空中干燥，得到產(chǎn)物(0.97g，99％收率)，為黃色固體。1H NMR(DMSO)δ8.48(d，1H，J＝2.7Hz)，8.02-8.01(m，1H)，7.75(br s，2H)，3.86(s，3H)，2.20(s，3H).
d)2-溴-3-甲基-5-硝基-苯甲酸甲基酯在環(huán)境溫度下，向裝有溴化銅(II)(7.40g，33.1mmol)的燒瓶中加入亞硝酸叔丁酯(4.50mL，37.9mmol)的MeCN(30mL)溶液。攪拌5分鐘后，加入2-氨基-3-甲基-5-硝基-苯甲酸甲基酯((實(shí)施例295步驟c)4.97g，23.7mmol)的MeCN(50mL)懸液。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘，在65℃下攪拌20分鐘，然后冷卻回到環(huán)境溫度。過(guò)濾反應(yīng)物，濃縮濾液得到暗褐色固體。將固體用己烷研制，濾出，用己烷洗滌(4×50mL)。合并全部己烷層，濃縮得到標(biāo)題產(chǎn)物(5.7g，88％收率)，為淡黃色固體。
1H NMR(CDCl3)δ 8.35(d，1H，J＝2.5Hz)，8.21(d，1H，J＝2.9Hz)，3.99(s，3H)，2.59(s，3H).
d)2-溴-5-甲基-5-硝基-苯甲酸向2-溴-3-甲基-5-硝基-苯甲酸甲基酯((實(shí)施例295步驟d)5.04g)的乙醇(50mL)溶液加入NaOH水溶液(4M，1.62g，40.5mmol)，在環(huán)境溫度下攪拌16小時(shí)。將所得紅色溶液濃縮至干，溶于少量H2O，用1N HCl酸化至pH 3-4。將固體過(guò)濾，用H2O洗滌(3×50mL)，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(4.5g，94％收率)，為淡黃色固體。1H NMR(DMSO)δ8.36-8.35(m，1H)，8.24-8.23(m，1H)，2.53(s，3H).
f)(2-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯在室溫下，將二苯基疊氮化磷酰(453μL，2.1mmol)加入到攪拌著的2-溴-3-甲基-5-硝基-苯甲酸((實(shí)施例295步驟e)520mg，2mmol)與三乙胺(1.4mL，2.1mmol)的叔丁醇(25mL)溶液中。15分鐘后，將反應(yīng)物加熱至80℃達(dá)16小時(shí)。加入EtOAc(100mL)，溶液用檸檬酸溶液(3×30mL)、NaHCO3(2×30mL)和鹽水(50mL)萃取。經(jīng)過(guò)柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ8.93(d，1H，J＝2.6Hz)，7.77(app dd，1H，J＝0.7，2.8Hz)，7.26(br s，1H)，2.51(s，3H)，1.55(s，9H).
g)2-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺將2-溴-3-甲基-5-硝基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例295步驟d)435mg，1.32mmol)溶于10mL三氟乙酸與DCM的1∶1混合物(總計(jì)10mL)。攪拌1小時(shí)后，在真空中除去溶劑，黃色固體殘余物(306mg)無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H NMR(CDCl3)δ7.46(d，1H，J＝2.8Hz)，7.42(d，1H J＝2.8Hz)，6.62(br s，2H)，2.42(s，3H).
h){[4-(6′-氨基-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯向帶有攪拌桿的燒瓶中裝入{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例140步驟a(752mg，1.65mmol)、2-溴-3-甲基-5-硝基-苯基胺((實(shí)施例295步驟g)306mg，1.32mmol)、含水Na2CO3(2M，4mL，8mmol)、乙醇(4mL)和甲苯(8mL)。向溶液噴射氬達(dá)10分鐘，加入Pd(PPh3)4(294mg，0.25mmol)。將兩相溶液在80℃惰性氣氛下劇烈攪拌16小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入EtOAc(40mL)和水(20mL)，分離各層。將有機(jī)層用飽和NaHCO3(2×20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，繼之以殘余物的柱色譜純化(含10-40％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(245mg，33％)，為黃色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.03(ddd，1H，J＝1.2，2.1，8.1Hz)，7.91(s，1H)，7.90(t，1H，J＝1.6Hz)，7.69(t，1H，J＝7.9Hz)，7.53(app dd，1H，J＝0.7，2.3Hz)，7.50(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.44(app dd，1H，J＝0.5，2.3Hz)，3.70(s，2H)，2.59(s，3H)，2.00(s，3H)，1.51(s，9H).
i)11-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-十一酸甲基酯將三乙胺(139μL，1mmol)加入到{[4-(6′-氨基-2′-甲基-4′-硝基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例295步驟h)118mg，0.21mmol)的DCM(10mL)溶液中。歷經(jīng)5分鐘滴加11-氯羰基-十一酸乙酯(73mg，0.26mmol)。攪拌30分鐘后，反應(yīng)不完全。以相似方式加入另一部分酰氯(3×1eq)，直至反應(yīng)完全。加入EtOAc(40mL)，繼之以用NaHCO3(2×20mL)和鹽水(30mL)進(jìn)行含水處理，得到粗的酰胺(206mg)，為玻璃狀物。將殘余物溶于EtOH(5mL)，加入4M含水NH4Cl(1mL)。加入鐵粉(165mg，3mmol)，將反應(yīng)物在75℃下加熱1小時(shí)。使冷卻后的混合物通過(guò)0.22μm濾器過(guò)濾，用5mL多份的MeOH和EtOAc洗滌固體。加入另外的EtOAc(80mL)，有機(jī)溶液用檸檬酸(2×20mL)、NaHCO3(2×30mL)、水(30mL)和鹽水(50mL)洗滌。將溶液干燥和濃縮，得到標(biāo)題化合物(165mg)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
j)11-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-4-(N，N-雙-(叔丁氧羰基氨基))胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-十一酸將氫氧化鈉(1M，1mL)加入到11-{4-氨基-3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鶀-十一酸甲基酯((實(shí)施例295步驟i)122mg，0.16mmol)的MeOH(10mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌18小時(shí)，用AcOH(500μL)猝滅溶液，在真空中除去溶劑。將殘余物溶于MeOH(10mL)、AcOH(500μL)，加入N，N-雙(叔丁氧羰基)-S-甲基-異硫脲(145mg，0.5mmol)。將溶液在40℃下攪拌16小時(shí)，在真空中除去溶劑。使殘余物在EtOAc(50mL)與水(20mL)之間分配，有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌。將溶液干燥和濃縮，得到殘余物，經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(6∶4 Hex/EtOAc，再25∶75∶5 Hex/EtOAc/MeOH)。殘余物進(jìn)一步經(jīng)過(guò)RP-HPLC純化(C-18柱，CH3CN/H2O)，得到115mg產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD)δ8.16(s，1H)，8.01(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.87(t，1H，J＝1.6Hz)，7.65(t，1H，J＝7.9Hz)，7.53(m，1H)，7.50(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.39(m，1H)，2.66(s，3H)，2.29(t，2H，J＝7.4Hz)，2.05(s，3H)，1.93(m，2H)，1.61(m，2H)，1.53(s，18H)，1.49(s，9H)，1.0-1.40(m，12H)，0.94(m，2H).
k)11-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-十一酸雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例260步驟b的工藝，使用11-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-4-(N，N-雙-(叔丁氧羰基氨基))胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基}-十一酸((實(shí)施例295步驟j)15mg，0.015mmol)和1∶1 TFA/DCM(10mL)。經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到產(chǎn)物(8.2mg，55％)，為不透明的玻璃狀物。
1H-NMR(CD3CN/D2O)δ8.16(s，1H)，7.79(ddd，J＝1.2，2.1，7.9Hz)，7.82(m，1H)，7.67(t，1H，J＝7.9Hz)，7.49(m，1H)，7.18(m，1H)，7.14(m，1H)，2.65(s，3H)，2.26(t，2H，J＝7.4Hz)，2.02(s，3H)，1.85(m，2H)，1.55(m，1H)，0.9-1.3(m，12H)，0.80(m，2H).
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C32H42N6O5S3(M+H)687.2；實(shí)測(cè)值687.2.
實(shí)施例2964-{4′-[3-(3-甲磺?；?丙基)-脲基]-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
將二苯基疊氮化磷酰(250μL，1mmol)加入到4-甲磺?；?丁酸((實(shí)施例209步驟a)166mg，1mmol)與DIEA(183μL，1.05mmol)的二噁烷(4mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌15分鐘，然后在90℃下攪拌3小時(shí)。將溶液冷卻，然后取等分試樣(250μL)加入到{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例220步驟b)76mg)的DCM(2mL)溶液中。將反應(yīng)物攪拌過(guò)夜，在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜的部分純化。將不純的脲如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理，經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(31mg，19％)。1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，8.0(m，1H)，7.97(m，1H)，7.67(m，2H)，7.33(m，2H)，7.13(d，1H，J＝8.1Hz)，3.37(t，2H，J＝6.8Hz)，3.20(m，2H)，3.0(s，3H)，2.73(s，3H)，2.22(s，3H)，2.05(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H28N4O5S4(M+H)581.1；實(shí)測(cè)值581.1.
實(shí)施例2974-[2′-甲基-6′-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 將甲磺酰氯(100μL)歷經(jīng)1分鐘加入到0℃的{[4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例5步驟c)30mg，0.06mmol)與二異丙基乙胺(0.25mL)的DCM(10mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)，溫?zé)嶂潦覝亍＜尤?-甲基哌嗪(0.25mL)，將溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。在真空中除去揮發(fā)性組分，將殘余物在室溫下用1∶1 TFA/DCM(10mL)處理2小時(shí)。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)由制備型HPLC純化(C18-柱，10-70％CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物，為不透明的玻璃狀物(8.2mg)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.38(s，1H)，8.02(ddd，2H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.98(t，1H，J＝1.6Hz)，7.72(t，1H，J＝7.9Hz)，7.57(dt，1H，J＝1.4，7.7Hz)，7.26-7.35(m，3H)，3.39(d，1H，J＝12.9Hz)，3.21(d，1H，J＝12.9Hz)，3.20(brs，4H)，2.87(s，3H)，2.75(s，3H)，2.50(brs，4H)，1.98(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C25H30N4O2S3(M+H)515.2；實(shí)測(cè)值515.2.
實(shí)施例2984-(2′-甲基-6′-嗎啉-4-基甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 將甲磺酰氯(100μL)歷經(jīng)1分鐘加入到0℃的{[4-(6′-羥甲基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例5步驟c)30mg)與二異丙基乙胺(0.25mL)的DCM(10mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)，溫?zé)嶂潦覝亍＜尤?-甲基嗎啉(0.5mL)，將溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。在真空中除去揮發(fā)性組分，將殘余物在室溫下用1∶1 TFA/DCM(10mL)處理2小時(shí)。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)由制備型HPLC純化(C18-柱，10-70％CH3CN，30min)，得到標(biāo)題化合物，為不透明的玻璃狀物(6.8mg)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.40(s，1H)，8.13(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.97(t，1H，J＝1.6Hz)，7.82(t，1H，J＝7.9Hz)，7.61(m，2H)，7.49(m，2H)，4.15(d，1H，J＝13.5Hz)，4.07(d，1H，J＝13.5Hz)，3.82(br s，4H)，2.75(s，3H)，2.18(s，2H)，2.03(s，3H)，1.31(s，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C24H27N3O3S3(M+H)502.1；實(shí)測(cè)值502.1.
實(shí)施例299[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽 a)(2-碘-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯將氫化鈉(53mg，2.2mmol)加入到0℃的2-碘-3-甲基-苯基-甲醇((實(shí)施例5步驟a)492mg，2mmol)的DMF(20mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌30分鐘，加入溴乙酸叔丁酯(0.4mL，2.5mmol)。使溶液歷經(jīng)15分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)。加入EtOAc(80mL)和水(40mL)，分離各層，將有機(jī)層用水(6×20mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，繼之以SiO2快速柱色譜純化(含5-10％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.571g，79％)，為油。1H-NMR(CDCl3)δ7.36(dd，1H，J＝1.4，7.4Hz)，7.30(t，1H，7.4Hz)，7.24(dd，1H，J＝1.4，7.4Hz)，4.72(s，2H)，4.15(s，2H)，2.53(s，3H)，1.56(s，9H).
b)[3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯按照實(shí)施例3步驟b所用工藝，在二噁烷(5mL)中使用(2-碘-3-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例299步驟a)571mg，1.6mmol)、PdCl2(PPh3)2(55mg，0.08mmol)、三乙胺(1.25mL，9.4mmol)和4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(0.91mL，6.4mmol)，反應(yīng)溫度為80℃。類(lèi)似的含水處理和SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物，被鹵化物還原所得產(chǎn)物所污染(542mg，95％)。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.20(t，1H，7.4Hz)，7.11(d，1H，J＝7.4Hz)，7.07(d，1H，J＝7.4Hz)，4.72(s，2H)，3.86(s，2H)，2.43(s，3H)，1.46(s，9H)，1.39(s，12H).
c)[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)123mg，0.25mmol)、[3-甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例299步驟c)270mg，0.75mmol)、Na2CO3(2M，1.5mL，3mmol)、Pd(PPh3)4(66mg，0.06mmol)、乙醇(1.5mL)和甲苯(3mL)。類(lèi)似的含水處理得到417mg粗產(chǎn)物，如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(26.8mg，2 2％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.07(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.86(t，1H，J＝1.6Hz)，7.71(t，1H，J＝7.9Hz)，7.10-7.43(m，3H)，4.25(m，2H)，4.07(br s，1H)，3.78(br s，1H)，2.73(s，3H)，2.35(s，3H)，2.02(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H22N2O5S3(M+H)490.1；實(shí)測(cè)值490.1.
實(shí)施例300[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-6-甲基-聯(lián)苯-3-基甲氧基]-乙酸 a)(3-碘-4-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯按照實(shí)施例299步驟a所用工藝，在DMF(10mL)中使用氫化鈉(53mg，2.2mmol)、3-碘-4-甲基-苯甲醇(992mg，4mmol)、溴乙酸叔丁酯(0.4mL，2.5mmol)。類(lèi)似的含水處理和SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.30g，89％)，為油。1H-NMR(CDCl3)δ7.84(d，1H，J＝1.4Hz)，7.27(d，1H，J＝1.4Hz)，7.23(d，1H，J＝7.7Hz)，4.55(s，2H)，3.99(s，2H)，2.44(s，3H)，1.51(s，9H).
b)[4-甲基-3-(4， 4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯按照實(shí)施例3步驟b所用工藝，在二噁烷(5mL)中使用(3-碘-4-甲基-芐氧基)-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例300步驟a)600mg，1.65mmol)、PdCl2(PPh3)2(58mg，0.08mmol)、三乙胺(1.25mL，9.4mmol)和4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(0.91mL，6.4mmol)。類(lèi)似的含水處理和SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物，被鹵化物還原所得產(chǎn)物所污染(569mg，95％)。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.73(d，1H，J＝1.9Hz)，7.38(dd，1H，J＝2.1，7.9Hz)，7.18(d，1H，J＝7.9Hz)，4.61(s，2H)，3.97(s，2H)，2.55(s，3H)，1.50(s，9H)，1.37(s，9H).
c)[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基甲氧基]-乙酸三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)(239mg，0.24mmol))、[4-甲基-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-芐氧基]-乙酸叔丁基酯((實(shí)施例300步驟c)530mg，1.46mmol)、Na2CO3(2M，3mL，6mmol)、Pd(PPh3)4(70mg，0.06mmol)、乙醇(3mL)和甲苯(6mL)。類(lèi)似的含水處理得到629mg粗產(chǎn)物，如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(47mg，38％)，為白色固體。RP-HPLC(5至100％ACN，8min)分析純度＝100％。
ESI-MS(m/z)計(jì)算值C22H22N2O5S3(M+H)491.1；實(shí)測(cè)值491.1.
實(shí)施例3013′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-3-羧酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺雙-三氟乙酰胺
a)3-碘-4-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-苯甲酰胺將亞硫酰氯(5.6mL)歷經(jīng)1分鐘加入到0℃的3-碘-4-甲基苯甲酸(5g，19.1mmol)的THF(30mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌24小時(shí)，在真空中除去揮發(fā)性組分。將一部分粗的酰氯(1g，3.57mmol)溶于DCM(10mL)，冷卻至0℃。加入二異丙基乙胺(0.78mL，4.46mmol)，繼之以3-嗎啉-4-基-丙基胺(0.52mL，3.56mmol)，將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入EtOAc(80mL)和含水NH4Cl(20mL)，分離各層。將有機(jī)層用含水NH4Cl(2×10mL)、NaOH(1N，3×20mL)、水(20mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(含0-10％MeOH的DCM)，得到產(chǎn)物(695mg，50％)，為黃色玻璃狀物。
b)4-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酰胺按照實(shí)施例3步驟b所用工藝，在二噁烷(5mL)中使用3-碘-4-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-苯甲酰胺((實(shí)施例301步驟a)695mg，1.79mmol)、PdCl2(PPh3)2(63mg，0.09mmol)、三乙胺(1.25mL，9.4mmol)和4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷(0.91mL，6.4mmol)。類(lèi)似的含水處理和SiO2快速柱色譜純化(含0-10％MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物，被鹵化物還原所得產(chǎn)物所污染(653mg，94％)。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
c)3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-3-羧酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺雙-三氟乙酰胺按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用{[4-(3-溴-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)237mg，0.24mmol)、4-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯甲酰胺((實(shí)施例301步驟b)563mg，1.45mmol)、Na2CO3(2M，3mL，6mmol)、Pd(PPh3)4(67mg，0.06mmol)、乙醇(3mL)和甲苯(6mL)。類(lèi)似的含水處理繼之以SiO2快速柱色譜純化(含0-10％MeOH的DCM)得到605mg產(chǎn)物，如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(92mg，48％)，為白色固體。RP-HPLC(5至100％ACN，8min)分析純度＝100％。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H32N4O4S3(M+H)573.2；實(shí)測(cè)值573.2.
實(shí)施例3023′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-羧酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺雙-三氟乙酰胺 a)2-碘-3-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-苯甲酰胺按照實(shí)施例301步驟a所用工藝和規(guī)模，使用2-碘-3-甲基苯甲酸。濃縮溶液，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化(含0-10％MeOH的DCM)，得到產(chǎn)物(878mg，63％)，為黃色玻璃狀物。
b)3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-羧酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺雙-三氟乙酰胺按照實(shí)施例295步驟h所用工藝，使用2-碘-3-甲基-N-(3-嗎啉-4-基-丙基)-苯甲酰胺((實(shí)施例302步驟a)150mg，0.39mmol)、{[4-(3-二羥基硼烷基-苯磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例140步驟a(25mg，0.05mmol)、Na2CO3(2M，1mL，2mmol)、Pd(PPh3)4(30mg，0.03mmol)、乙醇(1mL)和甲苯(2mL)。類(lèi)似的含水處理繼之以SiO2快速柱色譜純化(含0-10％MeOH的DCM)，得到60mg產(chǎn)物，如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(22mg，55％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.05(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.96(t，1H，J＝1.6Hz)，7.72(t，1H，J＝7.9Hz)，7.66(dt，1H，1.4，7.7Hz)，7.46(m，1H)，7.40(m，1H)，4.06(m，2H)，3.73(m，2H)，3.35(m，2H)，3.20(m，2H)，3.08(m，2H)，2.94(m，2H)，2.73(s，3H)，2.09(s，3H)，1.75(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C27H32N4O4S3(M+H)573.2；實(shí)測(cè)值573.2.
實(shí)施例3034-[3-(6-甲酰基-吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)2-溴-6-二甲氧基甲基-吡啶按照實(shí)施例6步驟b的工藝，在MeOH(5mL)中使用6-溴-吡啶-2-甲醛(600mg，3.23mmol)、原甲酸三甲酯(8mL)和甲苯磺酸(100mg)。類(lèi)似的含水處理得到產(chǎn)物(743mg)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
b)4-[3-(6-甲?；?吡啶-2-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒向Rieke鋅(370mg，5.64mmol)的THF(7.4mL)漿液加入2-溴-6-二甲氧基甲基-吡啶(400mg，1.7mmol)的THF(2.6mL)溶液。將懸液加熱至65℃達(dá)2小時(shí)，使溶液通過(guò)0.23μm注射濾器過(guò)濾到{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)(250mg，0.5mmol))與Pd(PPh3)4(0.112mg，0.1mmol)的THF溶液中。將反應(yīng)物在80℃下加熱30分鐘，冷卻，倒入含水NaHCO3中。加入EtOAc(70mL)，分離各層。將有機(jī)層用NH4Cl(2×20mL)、NaHCO3(20mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，繼之以殘余物的SiO2快速柱色譜純化，得到200mg標(biāo)題化合物，被2-二甲氧基甲基-吡啶污染。將產(chǎn)物如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(118mg，38％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)(醛以水合形式存在(縮醛))δ8.60(m，2H)，8.44(s，1H)，8.33(d，1H，J＝7.9)，8.27(d，1H，J＝7.7)，8.23(d，1H，J＝7.7)，8.12(d，1H，J＝7.9)，7.9(t，1H，J＝7.7)，5.82(s，1H)，2.74(s，3H).ESI-MS(m/z)(MeOH中樣品)計(jì)算值 C18H15N3O3S3(M+H)418.0；實(shí)測(cè)值449.9(MeOH加合物).
實(shí)施例3044-[3-(6-甲基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-苯磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)5-溴-6-甲基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯將溴(3.36g，21mmol)加入到胡椒醛醇(3.0g，20mmol)的氯仿(15mL)溶液中。將溶液加熱至60℃達(dá)12小時(shí)。冷卻后，加入DCM(60mL)，將溶液用含水NaHCO3(2×20mL)、鹽水(20mL)萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮后，殘余物5-溴-6-溴甲基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯(5.88g，100％)在放置后固化。將一部分粗固體(2.44g，8.33mmol)溶于THF，冷卻至-78℃。加入氫化鋁鋰(348mg，9.16mmol)，將溶液攪拌3小時(shí)。加入另一部分LAH(80mg，2.03mmol)，將反應(yīng)物攪拌另外1小時(shí)。小心地加入EtOAc以猝滅過(guò)量LAH，繼之以加入MeOH(20mL)。過(guò)濾鹽，在真空中濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物(1.76g，99％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.01(s，1H)，6.73(s，1H)，5.95(s，2H)，2.32(s，3H).
b)4-[3-(6-甲基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-苯磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽將丁基鋰(2.5M，2.4mL，6mmol)滴加到-78℃的5-溴-6-甲基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯((實(shí)施例304步驟a)648mg，3mmol)的Et2O(12mL)溶液中。將溶液攪拌4小時(shí)，維持溫度在-20與-40℃之間。將溶液冷卻至-78℃，一次性快速加入硼酸三甲酯(5mL，44mmol)。使溶液歷經(jīng)15分鐘溫?zé)嶂潦覝?，在室溫下攪?小時(shí)(出現(xiàn)明膠樣ppt)。在真空中除去揮發(fā)性組分，得到粗的芳基代硼酸，為黃色固體。將一部分粗的芳基代硼酸(99mg，0.4mmol)與{[4-(3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例27步驟c)(50mg，0.1mmol))、含水Na2CO3(2M，0.8mL，1.6mmol)、乙醇(0.8mL)和甲苯(1.6mL)合并。按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，類(lèi)似的處理得到產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)制備型TLC純化。將純化后的產(chǎn)物如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化得到標(biāo)題化合物(25mg，45％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.32(s，1H)，7.99(m，1H)，7.93(m，1H)，7.64(m，2H)，6.79(s，1H)，6.68(s，1H)，2.72(s，3H)，2.12(s，3H)，.ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N2O4S3(M+H)447.0；實(shí)測(cè)值447.2.
實(shí)施例305-3064-[7-溴-3-(3-甲基-丁-2-烯基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 4-[7-溴-1-(3-甲基-丁-2-烯基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將{[4-(7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例187-188步驟c)30mg，0.061mmol)、K2CO3(10mg，0.072mmol)與1-溴-3-甲基-丁-2-烯(60μL，0.5mmol)的混合物在DMF(2.5mL)中在室溫下攪拌16小時(shí)。加入EtOAc(50mL)，將有機(jī)溶液用水(8×20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。在真空中除去溶劑，得到22mg產(chǎn)物，如實(shí)施例1步驟d所述用1∶1TFA/DCM處理。類(lèi)似的C18-HPLC純化(10-55％CH3CN，30min)得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
4-[7-溴-3-(3-甲基-丁-2-烯基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽1H-NMR(CDCl3)δ8.55(s，1H)，8.34(s，1H)，8.27(m，1H)，8.06(m，1H)，5.44(m，1H)，5.01(m，2H)，2.72(s，3H)，1.96(s，3H)，1.83(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H19BrN4O2S3(M+H)499.0；實(shí)測(cè)值498.9，500.9(m+2).
4-[7-溴-1-(3-甲基-丁-2-烯基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽1H-NMR(CDCl3)δ8.50(br s，1H)，8.37(br s，1H)，8.32(s，1H)，8.09(s，1H)，5.43(m，1H)，5.27(m，2H)，2.72(s，3H)，1.85(s，3H)，1.77(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C18H19BrN4O2S3(M+H)499.0；實(shí)測(cè)值498.9，500.9(m+2).
實(shí)施例307-3084-(3-芐基-3H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 4-(1-芐基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例318步驟e的工藝，使用4-(4-氨基-3-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例264步驟a)40mg，0.1mmol)得到苯并咪唑中間體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。ESI-MS(m/z)計(jì)算值C14H12N2O4S3(M+H)369.00；實(shí)測(cè)值369.1.
按照實(shí)施例305/306的工藝，在DMF(2.5mL)中使用4-(3H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例187-188步驟c)20mg，0.037mmol)、K2CO3(25mg，0.18mmol)和芐基溴(30mg，0.175mmol)。類(lèi)似的處理后，按照實(shí)施例12步驟f的工藝將化合物的異構(gòu)混合物用二甲基鋁酰胺試劑(5mL)處理。類(lèi)似的處理和HPLC純化得到每種標(biāo)題化合物，為白色固體。
3-芐基異構(gòu)體1H-NMR(CD3OD)δ8.80(br s，1H)，8.26(s，1H)，8.20(brs，1H)，7.88(s，2H)，7.36(m，5H)，5.66(s，2H)，2.56(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N4O2S3(M+H)443.0；實(shí)測(cè)值443.1.
1-芐基異構(gòu)體1H-NMR(CD3OD)δ8.62(br s，1H)，8.44(s，1H)，8.32(brs，1H)，7.94(dd，1H，J＝1.6，8.8Hz)，7.88(s，2H)，7.70(d，1H，J＝8.8Hz)7.34(m，5H)，5.58(s，2H)，2.72(s，3H). ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H18N4O2S3(M+H)443.0；實(shí)測(cè)值443.1.
實(shí)施例3094-[7-溴-1R-(1-苯基-乙基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例318步驟d-f所用工藝，使用4-(3-溴-4-氯-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例318步驟c)35mg，0.072mmol)、1R-苯基-乙基胺(50mg)和DIEA(100μL)。所有其他試劑量、反應(yīng)條件和純化都等同于實(shí)施例318d-f。
1H-NMR(CD3OD)δ8.86(s，1H)，8.23(s，1H)，8.01(d，1H，J＝1.4Hz)，7.96(d，1H，J＝1.4Hz)，7.35(m，5H)，5.95(q，1H，J＝7.2Hz)，2.56(s，3H)，2.07(d，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H19BrN4O2S3(M+H)535.0；實(shí)測(cè)值534.9，536.9(m+2).
實(shí)施例3104-[7-溴-1S-(1-苯基-乙基)-1H-苯并咪唑-5-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例318步驟d-f所用工藝，使用4-(3-溴-4-氯-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例318步驟c)35mg，0.072mmol)、1S-苯基-乙基胺(50mg)和DIEA(100μL)。所有其他試劑量、反應(yīng)條件和純化都等同于實(shí)施例318d-f。
1H-NMR(CD3OD)δ8.86(s，1H)，8.23(s，1H)，8.01(d，1H，J＝1.4Hz)，7.96(d，1H，J＝1.4Hz)，7.35(m，5H)，5.95(q，1H，J＝7.2Hz)，2.56(s，3H)，2.07(d，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H19BrN4O2S3(M+H)535.0；實(shí)測(cè)值534.9，536.9(m+2).
實(shí)施例3116-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯三氟乙酸鹽 a)6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基}-脲基-己酸乙基酯將二異丙基乙胺(35μL，0.2mmol)、6-異氰酰-己酸乙基酯(40μL，0.2mmol)和{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例220步驟b)20mg，0.04mmol)在DCM(1mL)中攪拌24小時(shí)。使溶液在EtOAc(40mL)與0.1NHCl(10mL)之間分配，用另外的0.1N HCl(2×10mL)、NaHCO3(10mL)和鹽水(20mL)洗滌。將溶液干燥，在真空中濃縮，經(jīng)過(guò)SiO2制備型TLC純化，得到產(chǎn)物(12mg，43％)。
1H-NMR(CDCl3)δ8.06(s，1H)，7.94(m，1H)，7.81(m，1H)，7.46(m，2H)，7.23(br t，1H，J＝5.4Hz)，7.15(m，1H)，7.07(m，2H)，6.97(m，1H)，5.32(br t，1H)，4.15(q，2H，J＝7.2Hz)，2.40(s，3H)，2.30(t，2H，J＝7.3Hz)，2.11(s，3H)，1.54-1-70(m，4H)，1.51(s，9H)1.35(m，2H)，1.25(t，3H，J＝7.3Hz).
b)6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸乙基酯三氟乙酸鹽按照實(shí)施例1步驟d的工藝，將6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基]-2-甲基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯((實(shí)施例311步驟a)12mg)用1∶1 TFA/DCM處理。經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到產(chǎn)物(8.3mg)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.31(s，1H)，7.97(m，1H)，7.94(m，1H)，7.65(m，2H)，7.29(m，2H)，7.09(m，1H)，4.10(q，2H，7.2Hz)，3.20(t，2H，7.0Hz)，2.71(s，3H)，2.33(t，2H，J＝7.3Hz)，2.19 (s，3H)，1.65(m，2H)，1.55(m，2H)，1.40(m，2H)，1.23(t，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H34N4O5S3(M+H)603.2；實(shí)測(cè)值603.2.
實(shí)施例3126-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-脲基}-己酸三氟乙酸鹽
將含水氫氧化鈉(1M，0.75μL)加入到6-(3-{3′-[5-(叔丁氧羰基氨基-亞氨基-甲基)-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；鵠-2-甲基-聯(lián)苯-4-基}-脲基)-己酸乙基酯(實(shí)施例311步驟a)52mg，0.07mmol)的MeOH溶液中。將溶液在室溫下攪拌6小時(shí)，加入AcOH(100μL)，在真空中除去溶劑。將殘余物如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理，類(lèi)似地經(jīng)由RP-HPLC純化，得到白色固體(26mg，54％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.34(s，1H)，8.00(m，1H)，7.95(m，1H)，7.67(m，2H)，7.32(m，2H)，7.11(d，1H，J＝8.4Hz)，3.24(t，2H，7.0Hz)，2.74(s，3H)，2.34(t，2H，J＝7.3Hz)，2.22(s，3H)，1.68(m，2H)，1.59(m，2H)，1.44(m，2H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C26H30N4O5S3(M+H)575.1；實(shí)測(cè)值575.1.
實(shí)施例3136-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸乙基酯三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例311步驟a所用工藝，使用{[4-(6′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例25步驟c)60mg，0.12mmol)、6-異氰酰-己酸乙基酯(28mg，0.15mmol)和DIEA(89μL，0.5mmol)。類(lèi)似的處理和純化后，將粗產(chǎn)物如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的HPLC純化得到產(chǎn)物(20mg，24％)，為白色固體。1H-NMR(CD3OD)δ8.31(s，1H)，8.06(ddd，1H，J＝1.2，1.9，7.9Hz)，7.90(t，1H，J＝1.6Hz)，7.72(t，1H，J＝7.9Hz)，7.13(m，1H)，4.11(q，2H，7.2Hz)，2.99(m，2H)，2.73(s，3H)，2.29(t，2H，J＝7.4Hz)，2.01(s，3H)，1.65(m，2H)，1.55(m，2H)，1.35(m，2H)，1.23(t，3H，J＝7.2Hz).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C28H34N4O5S3(M+H)603.2；實(shí)測(cè)值603.2.
實(shí)施例3144-(4′-胍基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 將DIEA(89μL，0.5mmol)加入到{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例220步驟b)26mg，0.05mmol)、1，3-雙-(叔丁氧羰基)-2-甲基-2-假硫脲(29mg，0.1mmol)和HgCl2(27mg，0.1mmol)的DMF(2mL)溶液中。在室溫下攪拌5分鐘后溶液變?yōu)槟：⑷芤涸谑覝叵聰嚢?4小時(shí)，然后在EtOAc(40mL)與水(20mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用檸檬酸(2×10mL)、NaHCO3(20mL)、水(6×10mL)和鹽水(20mL)萃取。干燥(Na2SO4)和在真空中濃縮后，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化。將被保護(hù)的胍如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理。類(lèi)似的HPLC純化得到產(chǎn)物(8mg，24％)，為白色固體。
1H-NMR(CD3OD)δ8.35(s，1H)，8.04(m，2H)，7.71(m，2H)，7.35(d，1H，J＝8.1Hz)，7.28(d，1H，J＝2.3Hz)，7.23(dd，1H，J＝2.3，8.1Hz)，2.74(s，3H)，2.28(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H21N5O2S3(M+H)460.1；實(shí)測(cè)值460.2，230.1(m/2).
實(shí)施例3154-[2′-甲基-4′-(N′-甲氧基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 a){亞氨基-[4-(4′-異硫氰酰-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯在室溫下，將1，1′-硫代羰基二-2(1H)-吡啶酮的DCM溶液(0.25M，300μL，0.075mmol)加入到{[4-(4′-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例220步驟b)26mg，0.05mmol)中。隨著試劑的加入，硫脲的橙色消失，在TLC上出現(xiàn)新的更高的斑點(diǎn)。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化，得到23mg產(chǎn)物。1H-NMR(CDCl3)δ8.01(br s，1H)，7.96(d，1H，J＝7.4Hz)，7.87(s，1H)，7.53 (m，2H)，7.10(d，1H，J＝7.9Hz)，6.93(br s，1H)，6.87(d，1H，J＝7.9Hz)，2.51(s，3H)，2.17(s，3H)，1.50(s，9H).
b)4-[2′-甲基-4′-(N′-甲氧基-胍基)-聯(lián)苯-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽將鹽酸甲氧基胺(30mg，0.36mmol)、{亞氨基-[4-(4′-異硫氰酰-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(實(shí)施例315步驟a)，21mg，0.038mmol)和三乙胺(100μL)在DCM(2mL)/CH3CN(1mL)中攪拌，在室溫下攪拌1小時(shí)。使溶液在EtOAc(40mL)與水(20mL)之間分配，分離各層。將有機(jī)層用檸檬酸(3×10mL)、NaHCO3(20mL)和鹽水(20mL)萃取。干燥(Na2SO4)和在真空中濃縮后，殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化。將純化后的產(chǎn)物溶于氨的MeOH溶液(2M，10mL)，加入氧化汞(100mg)。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，在40℃下攪拌3小時(shí)。過(guò)濾溶液，在真空中濃縮濾液。殘余物經(jīng)過(guò)制備型TLC純化，將產(chǎn)物如實(shí)施例1步驟d用1∶1 TFA/DCM處理。經(jīng)過(guò)HPLC純化，得到產(chǎn)物(6mg，23％)，為白色固體。1HNMR(CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.05(m，2H)，7.72(m，2H)，7.30(m，1H)，7.25(ddd，1H，J＝0.45，2.3，8.1Hz)，7.36(d，1H，J＝8.1Hz)，3.84(s，3H)，2.74(s，3H)，2.29(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C21H23N5O3S3(M+H)490.1；實(shí)測(cè)值490.1.
實(shí)施例3164-[7-溴-3-(3，5-二甲基-異噁唑-4-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 實(shí)施例3174-[7-溴-1-(3，5-二甲基-異噁唑-4-基甲基)-1H-苯并咪唑-5-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽 按照實(shí)施例305-306的工藝，在DMF(2.5mL)中使用{[4-(7-溴-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯((實(shí)施例187-188步驟c)20mg，0.037mmol)、K2CO3(25mg，0.18mmol)和4-氯甲基-3，5-二甲基-異噁唑(25μL，0.15mmol)。分離標(biāo)題化合物，為白色固體。
實(shí)施例3161H-NMR(CDCl3)δ8.69(s，1H)，8.33(s，1H)，8.10(d，1H，J＝1.6Hz)，7.98(d，1H，J＝1.6Hz)，5.52(s，2H)，2.67(s，3H)，2.55(s，3H)，2.02(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18BrN5O3S3(M+H)540.0；實(shí)測(cè)值540.0，542.0(m+2).
實(shí)施例3171H-NMR(CDCl3)δ8.43(br s，1H)，8.40(d，1H，J＝1.6Hz)，8.35(s，1H)，8.13(d，1H，J＝1.6Hz)，5.73(s，2H)，5.27(m，2H)，2.73(s，3H)，2.19(s，3H)，2.03(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H18BrN5O3S3(M+H)540.0；實(shí)測(cè)值540.0，542.0(m+2).
實(shí)施例3184-(7-溴-1-苯基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽 a)4-氨基-3-溴-5-硝基-苯磺酰氯將4-氨基-3-溴-5-硝基苯磺酰胺((US 3987199)1g，3.17mmol)在95℃氯磺酸(10mL)中加熱3小時(shí)。然后將溶液冷卻，倒在冰上，然后過(guò)濾。將固體重新溶于DCM，經(jīng)硫酸鈉干燥。除去溶劑，得到產(chǎn)物(960mg)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
b)4-(4-氨基-3-溴-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將亞硫酸鈉(643mg，5.1mmol)和NaHCO3(480mg，5.7mmol)溶于水(20mL)，加入4-氨基-3-溴-5-硝基苯磺酰氯((實(shí)施例318步驟b)940mg，3mmol)。將懸液在室溫下攪拌1小時(shí)，加入5mL EtOH有助于溶解。將混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，在此期間幾乎全部磺酰氯都已溶解，TLC上的主要斑點(diǎn)位于基線處。在真空中除去溶劑，加入DMF(10mL)。將混合物攪拌15分鐘，使無(wú)機(jī)鹽沉降。經(jīng)由注射器除去DMF，鹽用第二部分DMF(10mL)洗滌，合并DMF溶液，緩慢加入到0℃的4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114步驟c)800mg，3mmol)的DMF(20mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空中除去DMF，使殘余物在EtOAc(100mL)與含水NaHCO3(30mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用含水NaHCO3(2×20mL)、水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，將殘余物溶于THF(20mL)，冷卻至-78℃。滴加甲醇鈉的甲醇溶液(1M，3.75mL，3.75mmol)，將反應(yīng)物攪拌30分鐘。加入乙酸(500μL)，繼之以EtOAc(100mL)。將溶液用NaHCO3(3×30mL)、鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮和殘余物的色譜純化得到產(chǎn)物(430mg)。1H-NMR(CDCl3)δ8.88(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(d，1H，J＝2.1Hz)，8.06(s，1H)，3.93(s，3H)，2.67(s，3H).
c)4-(3-溴-4-氯-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧碳甲基酯向CuCl2(142mg，1.06mmol)與亞硝酸叔丁酯(157μL，1.32mmol)在CH3CN(10mL)中的混合物歷經(jīng)5分鐘滴加4-(4-氨基-3-溴-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例318步驟b)410mg，0.88mmol)的CH3CN(10mL)溶液。1.5小時(shí)后，加入額外的CuCl2(142mg)和亞硝酸叔丁酯(157μL)，將反應(yīng)物攪拌另外1.5小時(shí)。將溶液冷卻，然后在EtOAc(120mL)與水(50mL)之間分配。將有機(jī)層用水(2×20mL)和鹽水(30mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，繼之以色譜純化，得到不純的產(chǎn)物(285mg，68％)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ 8.43(d，1H，J＝2.1Hz)，8.34(d，1H，J＝2.1Hz)，8.02(s，1H)，3.90(s，3H)，2.66(s，3H).
d)4-(3-溴-5-硝基-4-苯氨基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將苯胺(112mg，1.35mmol)、4-(3-溴-4-氯-5-硝基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例318步驟c)53mg，0.11mmol)與乙酸鈉(16.5mg，0.2mmol)在二噁烷(3mL)中的混合物在80℃下加熱24小時(shí)。使混合物在EtOAc(50mL)與0.5N HCl(10mL)之間分配，有機(jī)層進(jìn)一步用0.5N HCl(2×10mL)、NaHCO3(10mL)和鹽水(20mL)萃取。將溶液經(jīng)硫酸鈉干燥，繼之以濃縮，得到產(chǎn)物(58mg)，無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。1H-NMR(CDCl3)δ8.04(s，1H)，7.64(d，1H，J＝2.1Hz)，7.32(d，1H，J＝1.9Hz)，7.25(m，2H)，6.95(m，1H)，6.69(m，2H)，5.70)(s，1H)，3.90(s，3H)，2.66(s，3H).
e)4-(7-溴-1-苯基-1H-苯并咪唑-5-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯將鐵粉(110mg，2mmol)加入到4-(3-溴-5-硝基-4-苯氨基-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯(實(shí)施例318步驟d)的EtOH(4mL)與50％含水AcOH(1mL)溶液中。將反應(yīng)物在60℃下攪拌30分鐘，在此期間TLC分析有明顯的新的較低斑點(diǎn)。加入EtOAc(10mL)，使混合物通過(guò)0.22μm聚丙烯注射濾器過(guò)濾。加入另外的EtOAc(30mL)，溶液用含水NaHCO3(3×10mL)和鹽水(20mL)萃取。將溶液干燥，在真空中濃縮。將一半殘余物(26mg)懸浮在甲酸(3mL)中，在95℃下加熱4小時(shí)。在真空中除去甲酸，殘余物經(jīng)過(guò)色譜純化，得到產(chǎn)物(23mg)。
1H-NMR(CDCl3)δ8.56(d，1H，J＝1.6Hz)，8.13(s，1H)，8.07(d，1H，J＝1.6Hz)，8.04(s，1H)，7.55(m，3H，7.41(m，2H)，3.87(s，3H)，2.61(s，3H).
f)4-(7-溴-1-苯基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽按照實(shí)施例12步驟f的工藝，使用4-(7-溴-1-苯基-1H-苯并咪唑-5-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例318步驟e)23mg，0.044mmol)和二甲基鋁酰胺試劑(5mL)。類(lèi)似的處理和HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(16mg，49％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.53(s，1H)，8.47(d，1H，J＝1.6Hz)，8.37(s，1H)，8.10(d，1H，J＝1.6Hz)，7.53-7.65(m，5H)，2.73(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H15BrN4O2S3(M+H)507.0；實(shí)測(cè)值507.1，509.1(m+2).
實(shí)施例3194-(6-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒 a)3-溴-4-氟-苯基胺將亞氯酸鈉(6.78g，75mmol)和4-氟-3-溴苯甲醛(24.63mmol)溶于1∶1 THF/水(100mL)，在50℃下劇烈攪拌5小時(shí)。加入EtOAc(250mL)和1N HCl(50mL)，分離各層。將有機(jī)層用水洗滌(3×50mL)，然后用0.5M Na2CO3萃取(10×50mL)。合并堿性水層，緩慢用濃HCl酸化，同時(shí)攪拌，使羧酸產(chǎn)物沉淀出來(lái)。過(guò)濾收集固體，在高真空下干燥過(guò)夜(4.93g，91％)。將一部分固體羧酸溶于氯仿(30mL)，加入濃硫酸。連接回流冷凝器與燒瓶，將溶液加熱至55℃。歷經(jīng)1小時(shí)分3批加入疊氮化鈉(2.36g，36.45mmol)。4小時(shí)后，加入另外的硫酸(10mL)和疊氮化鈉(1g)，將反應(yīng)物在55℃下攪拌16小時(shí)。將混合物轉(zhuǎn)移到經(jīng)過(guò)冷卻的大燒瓶中，用5N氫氧化鈉緩慢猝滅硫酸。調(diào)節(jié)溶液至pH～8，用DCM萃取水溶液(5×30mL)。將有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，在真空中濃縮，得到暗褐色油(2.2g，95％)，放置后固化。
1H-NMR(CDCl3)δ6.94(t，8.4Hz)，6.88(dd，1H，J＝2.8，5.6Hz)，6.58(m，1H)，3.62(s，2H).
b)3-溴-4-氟-苯磺酰氯將濃HCl(1.93mL，23.16mmol)加入到3-溴-4-氟-苯基胺((實(shí)施例265步驟a)2.2g，11.58mmol)的18mL 2∶1 DCM/MeOH溶液中。出現(xiàn)沉淀，加入另外9mL 2∶1 DCM/MeOH。將溶液冷卻至-5℃，歷經(jīng)8分鐘滴加硝酸叔丁酯(2.71mL，23.16mmol)。攪拌15分鐘后，將二氧化硫(～5mL)壓縮到反應(yīng)物中，繼之以加入氯化銅(II)(592mg，3.47mmol)(氣體放出)。在真空中除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)SiO2快速柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物(1.9g，59％)。
1H-NMR(CDCl3)δ8.31(dd，1H，J＝2.3，5.8Hz)，8.04(ddd，1H，J＝2.6，4.1，8.8Hz)，7.39(dd，1H，J＝7.7，8.8Hz).
c)4-(3-溴-4-氟-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯在70℃下，將3-溴-4-氟-苯磺酰氯((實(shí)施例319步驟b)1.9g，6.83mmol)和碳酸氫鈉(1.15g，13.66mmol)懸浮在16mL水中。歷經(jīng)3小時(shí)分3批加入亞硫酸鈉(1.64g，13mmol)的15mL水溶液。將混合物攪拌16小時(shí)，在真空中除去溶劑。加入DMF(15mL)，將混合物攪拌15分鐘，然后使無(wú)機(jī)鹽沉降。經(jīng)由注射器除去DMF，鹽用第二部分DMF(10mL)洗滌，合并DMF溶液，緩慢加入到0℃的4-溴-5-硝基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例114，步驟c)931mg，3.5mmol)的DMF(15mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。在真空中除去DMF，使殘余物在EtOAc(100mL)與含水NaHCO3(30mL)之間分配。分離各層，將有機(jī)層用含水NaHCO3(2×20mL)、水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮溶液，將殘余物(1.42g)溶于THF(20mL)，冷卻至-78℃。滴加甲醇鈉的甲醇溶液(1M，5mL，5mmol)，將反應(yīng)物在-78℃下攪拌30分鐘。加入乙酸(500μL)，繼之以EtOAc(100mL)。將溶液用NaHCO3(3×30mL)、鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮和殘余物的色譜純化，得到標(biāo)題化合物(502mg，17％)，為黃色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.16(dd，1H，J＝2.3，6.3Hz)，7.94(s，1H)，7.91(ddd，1H，J＝2.6，4.4，8.6Hz)，7.39(dd，1H，J＝5.3，8.6Hz).
d)4-(4-氨基-3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺按照實(shí)施例124步驟a的工藝，使用4-(3-溴-4-氟-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸甲基酯((實(shí)施例319步驟c)100mg，0.24mmol)。24小時(shí)后，使氨蒸發(fā)，固體產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化即可使用。
1H-NMR(CDCl3)δ7.73(d，1H，J＝2.1Hz)，7.69(s，1H)，7.42(dd，1H，J＝2.1，8.6Hz)，6.57(d，1H)，3.14(s，2H)，2.36(s，3H).
e)4-(6-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺按照實(shí)施例1步驟c所用工藝，使用4-(4-氨基-3-溴-苯磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺((實(shí)施例319步驟d)44mg，0.11mmol)、2-甲基苯基代硼酸(54mg，0.4mmol)、含水Na2CO3(2M，800μL，1.6mmol)和Pd(PPh3)4(29mg，0.025mmol)。類(lèi)似的處理和制備型TLC純化得到標(biāo)題化合物(24mg，56％)。1H-NMR(CDCl3)δ7.97(s，1H)，7.76(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz)，7.67(d，1H，J＝2.3Hz)，7.32(m，2H)，7.28(m，1H)，7.16(m，1H)，6.76(d，1H，J＝8.6Hz)，4.11(s，2H)，2.58(s，3H)，2.13(s，3H).
f)4-(6-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽按照實(shí)施例12步驟f中的反應(yīng)條件，使用4-(6-氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-羧酸酰胺((實(shí)施例319步驟e)24mg，0.06mmol)和二甲基鋁酰胺試劑(5mL)。類(lèi)似的處理和HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(8.8mg，24％)。
1H-NMR(CD3OD)δ8.24(s，1H)，7.72(dd，1H，J＝2.3， 8.8Hz)，7.52(d，1H，J＝2.3Hz)，7.33(m，2H)，7.28(m，1H)，7.12(m，1H)，6.85(d，1H，J＝8.8Hz)，2.71(s，3H)，2.10(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C19H19N3O2S3(M+H)418.1；實(shí)測(cè)值418.1.
實(shí)施例3204-(6′-甲磺酰氨基-2′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽
將{[4-(2′-氨基-6′-甲基-聯(lián)苯-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-基]-亞氨基-甲基}-氨基甲酸叔丁基酯(20mg，0.04mmol，實(shí)施例25步驟c)和甲磺酰氯(5mg，0.04mmol)溶于甲苯(1mL)，加熱至100℃達(dá)48小時(shí)。在真空中除去溶劑，得到失去叔丁基保護(hù)基團(tuán)的所需產(chǎn)物。將所得化合物如實(shí)施例1步驟d純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(1.3mg)。
1H-NMR(CD3OD)δ 8.29(s，1H)，8.07-8.05(d，1H，J＝7.21Hz)，7.90(m，1H)，7.72-7.68(t，1H，J＝8.14Hz，J＝7.67Hz)，7.57-7.55(d，1H，J＝7.67Hz)7.35(m，2H)，7.26(m，1H)，2.75(s，3H)，2.50(s，3H)，1.30(s，3H).ESI-MS(m/z)計(jì)算值C20H21N3O3S4496.0(M+1)；實(shí)測(cè)值496.1.
實(shí)施例321-334
實(shí)施例335片劑的制備如下所述制備分別含有25.0、50.0和100.0mg活性化合物的片劑含有25-100mg活性化合物的劑量的片劑含量-mg活性化合物25.0 50.0 100.00微晶纖維素37.25 100.0200.0改性食用玉米淀粉 37.25 4.25 8.5硬脂酸鎂 0.50 0.75 1.5將全部活性化合物、纖維素和一部分玉米淀粉混合，造粒成10％玉米淀粉糊。將所得顆粒過(guò)篩，干燥，與其余玉米淀粉和硬脂酸鎂摻合。然后將所得顆粒壓制成片，每片分別含有25.0、50.0和100.0mg活性成分。
實(shí)施例336靜脈內(nèi)溶液的制備如下制備上述活性化合物的靜脈內(nèi)劑型活性化合物 0.5-10.0mg檸檬酸鈉 5-50mg檸檬酸 1-15mg氯化鈉 1-8mg注射用水(USP)q.s.至1ml利用上述用量，將活性化合物在室溫下溶于預(yù)先制備的氯化鈉、檸檬酸與檸檬酸鈉在注射用水(USP，參見(jiàn)page 1636 of United StatesPharmacopeia/National Formulary for 1995，published by UnitedStates Pharmacopeial Convention，Inc.，Rockville，Maryland(1994))中的溶液。
實(shí)施例337Cls的體外抑制作用試劑全部緩沖鹽都是從Sigma Chemical Company(St.Louis，MO)獲得的，都是最高可用純度。DTNB是從Pierce(Rockford，IL)購(gòu)買(mǎi)的。Z-Gly-Arg-S-Bzl是從Enzyme Systems Products(Livermore，CA)購(gòu)買(mǎi)的?；罨薈ls是從Calbiochem(La Jolla，CA)購(gòu)買(mǎi)的。
Ki測(cè)定全部測(cè)定法都是基于供試化合物抑制Cls-催化的底物Z-Gly-Arg-S-Bzl水解的能力的，這是經(jīng)由與5，5′-二硫代-雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的次級(jí)反應(yīng)所觀察到的。在典型的Ki測(cè)定中，制備底物的DMSO溶液，稀釋在測(cè)定緩沖液中，后者由50mM HEPES、200mM NaCl，pH 7.5、0.05％正辛基-β-D-吡喃葡糖苷組成。制備的底物溶液的濃度為45μM(Km＝190μM)，DTNB在測(cè)定緩沖液中的濃度為200μM。將供試化合物制成在DMSO中的10μM溶液。在DMSO中制備稀釋液，得到7種最終濃度，涵蓋700倍濃度范圍。將純化活化Cls稀釋在測(cè)定緩沖液中，工作濃度為66nM。
在典型的Ki測(cè)定中，向96孔平板的每孔吸移280μL底物溶液、10μL供試化合物溶液，使平板在37℃下熱平衡15分鐘。加入10μL酶等分試樣引發(fā)反應(yīng)，在Molecular Devices平板讀數(shù)器中連續(xù)記錄405nm下的吸光度增加達(dá)15分鐘。最終的DMSO濃度為4.3％。最終的試劑濃度為[Cls]＝2.3nM，[Z-Gly-Arg-S-Bzl]＝45μM，[DTNB]＝200μM。不含供試化合物的樣本的速度(吸光度變化速率，為時(shí)間的函數(shù))除以含有供試化合物的樣本的速度的比率，對(duì)供試化合物濃度作圖。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，計(jì)算直線的斜率值。斜率的倒數(shù)是實(shí)驗(yàn)測(cè)定的Ki值。
補(bǔ)體抑制數(shù)據(jù)下列化合物對(duì)Cls的Ki值在0.006至0.023微摩爾(μM)范圍內(nèi)實(shí)施例1-13、15-20、24-26、28-30、32-35、37、41-96、98-110、114-119、121、135-136、171、173、184、192、194-195、203、207、209-211、219-220、224、228、231、233、236-239、240、242、246、252、254-263、275、280、282、294-296和314-315。
實(shí)施例11化合物對(duì)Cls的Ki值為0.023μM。實(shí)施例61化合物對(duì)Cls的Ki值為0.006μM。結(jié)果表明，本發(fā)明化合物是補(bǔ)體、具體為Cls的抑制劑。
現(xiàn)已完整地描述了本發(fā)明，將為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的是，在條件、制劑和其他參數(shù)的廣泛等價(jià)范圍內(nèi)也可以實(shí)施本發(fā)明，而不影響本發(fā)明或其任意實(shí)施方式的范圍。本文引用的全部專(zhuān)利和出版物都完整地結(jié)合在此作為參考。
縮寫(xiě)DCM 二氯甲烷NaHCO3碳酸氫鈉NaOH 氫氧化鈉EtOAc 乙酸乙酯THF 四氫呋喃HCl 鹽酸Na2CO3碳酸鈉Pd(PPh3)4四(三苯膦)鈀(O)Et2O二乙醚DMSO 二甲基亞砜MeOH 甲醇K2CO3碳酸鉀DMAP-樹(shù)脂 4-二甲氨基吡啶-改性樹(shù)脂CHCl3氯仿m-CPBA間-氯過(guò)苯甲酸Boc 叔丁氧羰基，也稱tBocTBAF 四丁基氟化銨AlMe3三甲基鋁H2SO4硫酸MgSO4硫酸鎂Cs2CO3碳酸銫
權(quán)利要求
1.式I化合物 或其溶劑化物、水化物或藥學(xué)上可接受的鹽；其中Z是-S(O)-或-S(O2)-；R1是C1-4烷基、鹵代、氨基、C1-6烷硫基、C2-6鏈烯硫基、C1-6烷氧基、三氟甲基、甲磺?；蚱S硫基；Ar是苯基、萘基、吡啶基、咪唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻唑基、吡唑基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲哚基、苯并噻吩基或苯并[c]色烯基，它們中任一個(gè)是可選被取代的；R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、C1-4烷基、C6-10芳基、C1-4羥基烷基、C1-4氨基烷基、單(C1-4)烷基氨基(C2-6)烷基、二(C1-4)烷基氨基(C2-6)烷基、羧基(C1-4)烷基、氰基、硝基、氨基、C1-4烷氧基、羥基或者-CO2Rw，其中Rw是氫、羥基、C1-4烷氧基、氰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷基、C3-8環(huán)烷基、苯基、芐基、 或 其中Rd和Re獨(dú)立地是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，Rf是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，Rg是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基或苯基，和Rh是C6-10芳基(C1-4)烷基或C1-6烷基；和R7是氫、氯、氟或氨基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是鹵代、C1-4烷硫基或C2-4鏈烯硫基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是萘基或苯基，它們中任一個(gè)被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基、氨基或苯氨基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是2-苯基苯基、萘-2-基、2-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、4-氯苯基、2-溴苯基、3，4-二甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-溴苯基、4-乙基苯基、4-溴苯基、4-苯基苯基、3，4-二甲氧基苯基、2-異丙基苯基、3，5-二氯苯基、3-羥基苯基、2-甲基-5-叔丁基苯基、4-叔丁基苯基、3-溴-5-叔丁氧基苯基、3-溴-5-羥基苯基、3-溴-5-甲氧基苯基、3-溴-5-乙烯氧基苯基、3-苯氧基苯基、5-溴-3-甲基苯基或2-氨基苯基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是苯基，它被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基、氨基、苯氨基、羥基四氫吡喃基、(C1-4烷氧基)-四氫吡喃基、羥基哌啶基、羥基-N-(C1-4烷基)-哌啶基、羥基-吡啶基-(C1-4)烷基和(C1-4烷氧基)羰基(C2-6)鏈烯基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是4-氨基-3-溴苯基、3-(4-羥基四氫吡喃-4-基)-苯基、3-(4-羥基-1-甲基哌啶-4-基)-苯基、3-(4-甲氧基四氫吡喃-4-基)-苯基、3-(羥基-吡啶-2-基-甲基)-苯基、3-(1-乙氧羰基-丙烯-2-基)-苯基、3-氯-4-氟苯基或3-碘苯基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是吡啶基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基或苯并咪唑基，它們中任一個(gè)可選地被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基、氨基或甲苯基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是吡啶-2-基、吡啶-3-基、咪唑-2-基、1-甲基咪唑-2-基、2-甲基呋喃-2-基、噻吩-2-基、噻唑-2-基、4-苯基噻唑-2-基、5-乙氧基苯并噻唑-2-基、苯并咪唑-2-基、7-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-1-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-2-甲基-1H-苯并咪唑基、4-溴-1H-苯并咪唑基、6-溴-苯并咪唑基、吡咯-2-基或哌啶-2-基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是苯并[c]色烯基，它可選地被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6鏈烯基、鹵代、羥基、苯基、苯氧基或氨基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar具有式IA 其中Rx是鹵代或者被C1-6烷基或(C1-4烷基)氧基(C1-4)烷基中的一個(gè)或兩個(gè)取代的苯基，所述(C1-4烷基)氧基(C1-4)烷基中C1-4烷基部分之一可選地被羧基取代；Ry是氫、氨基、鹵代、苯氧基或C1-6烷基氨基，其中烷基部分可選地被苯基、吡啶基、四氫呋喃基、咪唑基、嗎啉基、(C1-4鹵代烷基)-吡啶基、氨磺?；交⒘u基、(C1-4烷基)-噻吩基或氨基嘧啶基中的一個(gè)取代；和Rz是氫、鹵代或C1-4烷基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中Rx是2-甲基苯基、2-羧甲氧基甲基-6-甲基苯基或溴。
12.權(quán)利要求10的化合物，其中Ry是氫、氯、氨基、苯氧基、芐氨基、異丙氨基、吡啶-3-基甲氨基、吡啶-4-基甲氨基、吡啶-2-基甲氨基、四氫呋喃-2-基甲氨基、3-(咪唑-1-基)-丙氨基、2-甲基-2-(嗎啉-4-基)-丙氨基、6-三氟甲基-吡啶-3-基甲氨基、2-(3H-咪唑-1-基)-乙氨基、4-氨磺?；S氨基、2，2-二甲基-3-羥基丙氨基、3-甲基噻吩-2-基甲氨基或4-氨基嘧啶-5-基甲氨基。
13.權(quán)利要求10的化合物，其中Rz是氫、甲基或乙基。
14.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar具有式IB 其中R13和R14獨(dú)立地是氫、鹵代或C1-4烷基；R15是氫、鹵代或甲苯基；R17是氫或C1-4烷基；和R16和R18之一是電子對(duì)，另一個(gè)是氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、環(huán)丙基甲基、苯基、芐基、1-苯乙基、吡啶基甲基或異噁唑基甲基，可選地被一個(gè)或兩個(gè)甲基取代，其中所述芐基是未取代的或者被鹵代、硝基、氨基或(2-羧乙基)-硫基乙酰氨基中的一個(gè)或兩個(gè)取代。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R13和R14獨(dú)立地是氫、甲基或乙基。
16.權(quán)利要求14的化合物，其中R15是氫、溴、氯或鄰-甲苯基。
17.權(quán)利要求14的化合物，其中和R17是氫、甲基或乙基。
18.權(quán)利要求14的化合物，其中R16和R18之一是電子對(duì)，另一個(gè)是氫、甲基、環(huán)丙基甲基、烯丙基、3-甲基丁-2-烯基、吡啶-2-基甲基、3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基、苯基、1-苯乙基、芐基、2，6-二氯芐基、2，5-二氟芐基、2，6-二氟芐基、2-氟-5-硝基芐基、2-氟-4-硝基芐基、2-氟-5-氨基芐基或5-[(2-羧乙基)-硫基乙酰氨基]-2-氟芐基。
19.權(quán)利要求1的化合物，具有通式II 或其溶劑化物、水化物或藥學(xué)上可接受的鹽；其中R1、R2、R3、R4、R7和Z是如權(quán)利要求1所定義的；R5是苯基、萘基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吡嗪基、哌啶基或哌嗪基，它們中任一個(gè)是可選被取代的；和R6是氫、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、C2-4鏈烯氧基、苯氧基、芐氧基、鹵代、氨基或硝基。
20.權(quán)利要求19的化合物，其中R5是萘基、苯基或者被一至五個(gè)基團(tuán)取代的苯基，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、(C1-4烷基)羰基、氰基、氨基、單(C1-4)烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、甲?；?、(C1-4烷氧基)羰基、鹵代(C1-4烷氧基)羰基、苯基、苯氧基、苯氧基苯基、聯(lián)苯基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、硝基、亞甲二氧基(-O-CH2-O-)、亞乙二氧基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、C1-4烷硫基、羥基、氨基羰基、單(C1-4烷基)氨基羰基、二(C1-4烷基)氨基羰基和鹵化C1-4羥基烷基組成的組。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中R5是苯基、2-甲氧基苯基、2-甲基苯基、2-乙烯基苯基、2-羥甲基苯基、2-(1-羥基乙基)苯基、2-三氟甲基苯基、2-甲?；交?、2-羥基苯基、2-氯甲基苯基、2-氨基、2-氯苯基、3-甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-甲?；交?-羥甲基苯基、3-氨基苯基、3-異丙基苯基、3-乙氧基苯基、3-乙氧羰基苯基、3-甲基羰基苯基、3-羧基苯基、3-羥基苯基、3-硝基苯基、3-二甲氨基羰基苯基、3-三氟甲基苯基、3-三氟甲氧羰基苯基、4-乙烯基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-甲氧羰基苯基、4-甲基苯基、4-羥甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-乙氧基苯基、4-二甲氨基苯基、聯(lián)苯基、4-苯氧基苯基、4-氯甲基、4-甲基磺酰基)苯基、4-羥基苯基、4-氟苯基、2，5-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、2，3-二甲基苯基、2，5-二氯苯基、3，5-二氯苯基、3-羥基-4-苯基苯基、3，5-雙-三氟甲基苯基、2-羥基-5-苯基苯基、4-甲基-3-硝基苯基、3，4-亞甲二氧基苯基、3，5-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2-乙氧基-6-甲基苯基、3-異丙氧羰基-2-甲基苯基、3-氟-4-苯基苯基、4-甲酰基苯基、2-羧基-6-甲基苯基、3-甲?；?2-甲基苯基、3-羥基-6-甲基苯基、3-甲?；?6-甲基苯基、3-甲?；?6-羥基苯基、3-甲酰基-6-甲氧基苯基、2-氨基-6-甲基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3-[(2，2，2-三氟-1-羥基)乙基]苯基、4-硝基苯基、2-氟-4-苯基苯基、2，4-二甲氧基苯基、4-羥基-3-甲?；交?-甲苯基-5-嗎啉苯基、4-甲氧基苯基、3-羥氨基甲基苯基、4-苯基-乙酰胺、4-苯甲酰胺、2，6-二甲基苯基、苯氧基苯基、2-甲基-6-羥甲基苯基、2-甲基-5-羥甲基苯基、2-羥基-3-苯基苯基、萘基或4-乙氧羰基苯基。
22.權(quán)利要求19的化合物，其中R5是被一至三個(gè)基團(tuán)取代的苯基，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、(C1-4烷基)羰基、氰基、氨基、單(C1-4)烷基氨基、二(C1-4)烷基氨基、甲酰基、(C1-4烷氧基)羰基、鹵代(C1-4烷氧基)羰基、苯基、苯氧基、苯氧基苯基、聯(lián)苯基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、硝基、亞甲二氧基(-O-CH2-O-)、亞乙二氧基、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基亞磺?；1-4烷硫基、羥基、氨基羰基、單(C1-4烷基)氨基羰基、二(C1-4烷基)氨基羰基、鹵化C1-4羥基烷基、羧基(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基、羧基(C1-4)烷氧基、C1-4烷硫基(C1-4)烷基(其中C1-4烷硫基的烷基部分可選地被一個(gè)或兩個(gè)羧基取代)、膦酰基(C2-4)鏈烯基、膦酰基(C1-4)烷基氨基、C1-4鹵代烷基磺酰氨基、膦?；?C1-4)烷氧基、C1-4烷基磺酰氨基、羧基(C1-4)烷基氨基、嗎啉基(C1-4)烷基、嗎啉基、嗎啉基(C1-4)烷基氨基羰基、哌嗪基(C1-4)烷基或哌嗪基(其中所述哌嗪基(C1-4)烷基或哌嗪基中的任一個(gè)可選地被甲基或乙基N-取代)、甲酰氨基、嗎啉基(C1-4)烷基氨基、可選被取代的烷基羰基氨基、可選被取代的脲基和可選被取代的胍基組成的組，其中所述可選被取代的烷基羰基氨基具有式-N(H)-C(O)-C(H)(W1)-Y1a-X1-Y1b-Z1，其中W1是氫或氨基；Y1a是直接的共價(jià)鍵或者C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基；X1是O或S或者直接的共價(jià)鍵；Y1b是C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基，可選地被羧基或氨基取代；和Z1是氨甲酰基、羧基、C1-6烷基磺?；?C1-6烷氧基)羰基、C2-6烷酰氨基、磺基、膦?；?、苯基、氨基磺?；被?、C1-6鹵代烷基磺酰氨基、甲酰氨基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基氨基磺?；?、C1-6烷基磺酰氨基或2-氧代-六氫噻吩并[3，4-d]咪唑-6-基-(C1-6烷基)羰基氨基；或者，W1是氫且Y1a-X1-Y1b-Z1代表氫、鹵代、氨基或三-(C1-4烷基)銨基；其條件是，如果Y1a是直接的共價(jià)鍵且X是O或S，那么W1是氫；其中所述可選被取代的脲基具有式-N(L1)-C(O)-N(L2)-Y2a-X2-Y2b-Z2，其中L1和L2都是氫，或者L1和L2一起代表亞乙基或三亞甲基；Y2a是直接的共價(jià)鍵或者C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基；X2是O或S或者直接的共價(jià)鍵；Y2b是C1-10直鏈或支鏈烷烴的α，ω-二基，可選地被羧基取代；和Z2是羧基、(C1-6烷氧基)羰基、苯氧基、羧基苯氧基、C1-6烷基磺?；⒈交?、芐氧基羰基氨基、氨基、C1-4烷基氨基、鹵代苯基、吲哚基、二苯甲基、苯基磺酰氨基、N′-(羧基(C1-4)烷基)脲基、四唑基、膦酰基或苯氨基；或者，Y2a-X2-Y2b-Z2代表C1-4烷基磺酰基或-(CH2CH2-O-)m-(CH2)n-C(O)OR，其中m是整數(shù)2至6，n是整數(shù)2至4，且R是氫或C1-4烷基；和其中所述可選被取代的胍基具有式-N(L3)-C(＝NL4)-N(L5)-Z3，其中L3是氫或C1-4烷基；L4和L5都是氫，或者L4和L5一起代表亞乙基；和Z3是氫、C1-6烷基、苯基(C1-6)烷基、羧基(C1-6)烷基、C1-4烷氧基、(C1-4烷基)羰基或C1-4烷基磺?；?C1-6)烷基。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在4′-位被可選被取代的胍基取代。
24.權(quán)利要求22的化合物，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在4′-位被可選被取代的胍基取代，在6′-位被可選被取代的烷基羰基氨基或可選被取代的脲基取代。
25.權(quán)利要求22的化合物，其中R5是苯基，在2′-位被甲基取代，在6′-位被可選被取代的烷基羰基氨基或可選被取代的脲基取代。
26.權(quán)利要求23-25任意一項(xiàng)的化合物，其中R2、R3和R4是氫。
27.權(quán)利要求23-25任意一項(xiàng)的化合物，其中R6是氫。
28.權(quán)利要求23-25任意一項(xiàng)的化合物，其中R7是氫。
29.權(quán)利要求23-25任意一項(xiàng)的化合物，其中Z是-SO2-。
30.權(quán)利要求22的化合物，其中R5具有式IIA 其中R8是氫或甲基；R9是氫、甲酰氨基或氨甲?；籖10是甲氧基、羥基、羧甲氧基、膦?；装被?、三氟甲磺酰氨基、膦酰基甲氧基、羧甲氨基、氨基、氯、氟、2-(嗎啉-4-基)-乙氨基、羧基、氨甲?；?1，2-二羧基乙基)-硫基乙酰氨基、羧甲氧基乙酰氨基、4-氨基-4-羧基丁酰氨基、6-[5-(2-氧代-六氫-噻吩并[3，4-d]咪唑-6-基)-戊酰氨基]-己酰氨基、溴乙酰氨基、2-氨基-4-羧基丁酰氨基、三乙銨基乙酰氨基、2-氨基-4-甲磺?；□０被被阴０被?、氨甲酰基甲硫基乙酰氨基、3-膦?；０被?、脲基、N′-(5-羧基戊基)-脲基、N′-(5-乙氧羰基戊基)-脲基、N′-(3-甲磺?；?-脲基、胍基、N′-(3-苯基丙基)-胍基、N′-(2-苯乙基)-胍基、N′-(3-甲基丁基)-胍基、N′-乙?；一?、N′-(4-甲磺?；』?-胍基、N′-(3-甲磺?；?-胍基、N′-(6-甲磺?；夯?-胍基、N′-(5-甲磺?；旎?-胍基、N′-甲氧基胍基、N-甲基胍基、N′-己基胍基、N′-(5-羧基戊基)-胍基或4，5-二氫-1H-咪唑-2-基氨基；R11是氫、3-(嗎啉-4-基)-丙氨基羰基或羧甲氧基甲基；和R12是羧甲氧基甲基、2-羧乙氧基甲基、硝基、氨基、甲基、(1，2-二羧基乙基)-硫基甲基、2-膦酰基乙烯基、嗎啉-4-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、嗎啉-4-基、甲酰氨基、甲磺酰氨基、羧甲氨基、3-(嗎啉-4-基)-丙氨基羰基、氯、乙酰氨基、氨甲?；琢蚧阴０被?2-羧乙基)-硫基乙酰氨基、4-甲磺酰基丁酰氨基、(1，2-二羧基乙基)-硫基乙酰氨基、甲氧羰基甲氧基乙酰氨基、羧甲氧基乙酰氨基、溴乙酰氨基、4-羧基丁酰氨基、氨甲?；籽趸阴０被?2-乙酰氨基-2-羧基-1，1-二甲基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-磺基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-甲氧羰基乙基)-硫基乙酰氨基、(2-乙酰氨基-2-羧乙基)-硫基乙酰氨基、甲磺?；阴０被?、6-甲磺酰基己酰氨基、3-甲磺酰基丙酰氨基、2-甲磺?；０被?、芐硫基乙酰氨基、4-氨基磺?；□０被?、11-氨基十一烷酰氨基、4-三氟甲磺酰氨基丁酰氨基、5-羧基戊酰氨基、羧基乙酰氨基、3-羧基丙酰氨基、11-羧基十一烷酰氨基、5-甲氧羰基戊酰氨基、N′-乙氧羰基甲基脲基、N′-羧甲基脲基、N′-[5-(4-羧基苯氧基)-戊基]-脲基、N′-(2-甲磺?；一?-脲基、N′-(5-羧基戊基)-脲基、N′-(2-[2-{2-(2-羧乙氧基)-乙氧基}-乙氧基]-乙氧基乙基)-脲基、N′-甲磺?；寤?、N′-(4-甲磺?；』?-脲基、N′-(3-苯基丙基)-脲基、N′-芐基脲基、N′-(1-羧基-2-苯乙基)-脲基、N′-(5-芐氧羰基氨基-5-羧基戊基)-脲基、N′-(2-苯乙基)-脲基、N′-(5-氨基-5-羧基戊基)-脲基、N′-[2-(4-溴苯基)-乙基]-脲基、N′-[2-(吲哚-3-基)-乙基]-脲基、N′-(3，3-二苯基丙基)-脲基、N′-(2-苯磺酰氨基乙基)-脲基、N′-(2-甲磺酰氨基乙基)-脲基、N′-[2-(N′-羧甲基脲基)-乙基]-脲基、N′-[2-(2H-四唑-5-基)-乙基]-脲基、N′-[4-(2H-四唑-5-基)-丁基]-脲基、N′-[5-(2H-四唑-5-基)-戊基]-脲基、N′-(5-膦?；旎?-脲基、N′-(5-乙氧羰基戊基)-脲基、N′-(3-甲磺?；?-脲基、N′-(2-苯氨基乙基)-脲基或2-氧代-咪唑烷-1-基。
31.權(quán)利要求19的化合物，其中R5是噻吩基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、嘧啶基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基或吡嗪基，可選地被一個(gè)或兩個(gè)基團(tuán)取代，取代基獨(dú)立地選自由C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羥基烷基、C1-4鹵代烷基、C2-4鏈烯基、甲?；?、(C1-4烷氧基)羰基、苯基、C1-4烷基苯基、苯氧基、鹵代、C1-4鹵代烷氧基、羧基、羥基、硝基、氨基、C1-4烷基磺?；?C1-4烷基)脲基、磺基(C1-4)烷基、三甲代甲硅烷基(C1-4)烷氧基(C1-4)烷基和C1-4烷氧基(C1-4)烷基組成的組。
32.權(quán)利要求31的化合物，其中R5是噻吩-3-基、喹啉-7-基、3，5-二甲基異噁唑-4-基、5-氯噻吩-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-4-基、喹啉-3-基、苯并噻吩-2-基、苯并呋喃-2-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基、4-甲基吡啶-3-基、3-甲基吡啶-2-基、6-甲基苯并咪唑-5-基、苯并咪唑-6-基、1-甲基-4-(2′-甲基苯基)苯并咪唑-6-基、2-甲基-4-(2′-甲基苯基)苯并咪唑-6-基、二苯并呋喃-2-基、2-甲基咪唑基、6-乙氧基-苯并噻唑基、6-甲基-吡啶-3-基、6-氯-吡啶-3-基或3-氯-吡啶-2-基。
33.權(quán)利要求31的化合物，其中R5是3-甲基-5-硝基吡啶-2-基、5-氨基-3-甲基吡啶-2-基、4-甲基嘧啶-5-基、3-甲基吡啶-2-基、2-氯吡啶-3-基、6-甲?；拎?2-基、3-甲基-5-[N′-(3-甲磺?；?1-基)]-脲基吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-4-基、3-氨基-5-甲基-吡啶-4-基、3-氯-5-三氟甲基吡啶-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基、3-甲基-3H-咪唑-4-基、1H-咪唑-2-基、1-甲基-1H-咪唑-2-基、1-乙基-1H-苯并咪唑-2-基、2，5-二甲基-1H-咪唑-4-基、1-(3-磺基丙-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基、3-甲基吡嗪-2-基、5-甲基-1-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-4-基、5-甲基-1H-苯并咪唑-4-基、1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基、2-甲氧基甲基-6-甲基-1H-苯并咪唑-5-基、2，6-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基或1，6-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基。
34.權(quán)利要求19的化合物，其中R5是-NRaRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地是C1-6烷基，或者Ra和Rb與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成一個(gè)環(huán)，該環(huán)選自由哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、咪唑烷基、吡唑烷基和嗎啉基組成的組，其中所述環(huán)可選地被一個(gè)或兩個(gè)C1-4烷基取代。
35.權(quán)利要求34的化合物，其中R5是哌啶-1-基或4-甲基哌嗪-1-基。
36.權(quán)利要求1的化合物，其中R6是氫、甲基、鹵代、氨基、甲氧基、乙氧基、乙烯氧基、羥基或芐氧基。
37.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是溴、甲硫基、乙硫基或丙-2-烯-1-基硫基。
38.權(quán)利要求37的化合物，其中R1是溴或甲硫基。
39.權(quán)利要求38的化合物，其中R1是甲硫基。
40.權(quán)利要求1的化合物，其中Z是SO2。
41.權(quán)利要求1的化合物，其中Z是SO。
42.權(quán)利要求1的化合物，其中R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、C1-6烷基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷氧基或羥基。
43.權(quán)利要求42的化合物，其中R2、R3和R4都是氫。
44.權(quán)利要求42的化合物，其中R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、甲基、乙基、丙基、正丁基、羥基、甲氧基或乙氧基。
45.權(quán)利要求1的化合物，其中R2、R3和R4是-CO2Rw，其中Rw在每種情形中優(yōu)選地是C1-4烷基、C4-7環(huán)烷基或芐基之一。
46.權(quán)利要求45的化合物，其中R2、R3和R4獨(dú)立地是氫、甲基、乙基、丙基、正丁基、羥基、甲氧基、乙氧基、氰基、-CO2CH3、-CO2CH2CH3或-CO2CH2CH2CH3。
47.權(quán)利要求1的化合物，其中R7是氫。
48.選自下組的化合物4-[4′-(N′-己基-胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基]-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-{4′-[N′-(4-甲磺?；?丁基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-{4′-[N′-(3-甲磺?；?丙基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基}-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-{4′-[N′-(6-甲磺酰基-己基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-{4′-[N′-(5-甲磺?；?戊基)-胍基]-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-[4′-(N′-乙?；?胍基)-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-{4′-胍基-2′-[3-(4-甲磺酰基-丁基)-脲基]-6′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒三氟乙酸鹽；4-[4′-(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基氨基)-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-(4′-胍基-2′-甲基-6′-硝基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-(6′-氨基-4′-胍基-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺?；?-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲?；鵠-甲硫基}-丙酸甲基酯雙-三氟乙酸鹽；3-{[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺酰基)-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-甲硫基}-丙酸雙-三氟乙酸鹽；6-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-己酸；N-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-4-甲磺酰基-丁酰胺雙-三氟乙酸鹽；5-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-戊酸雙-三氟乙酸鹽；4-[2′-甲基-4′-(N-甲基-胍基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；6-{N′-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-2-甲基-聯(lián)苯-4-基]-胍基}-己酸；4-{2′-甲基-4′-[N′-(3-苯基-丙基)-胍基]-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-[2′-甲基-4′-(N′-苯乙基-胍基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-{2′-甲基-4′-[N′-(3-甲基-丁基)-胍基]-聯(lián)苯基-3-磺?；鶀-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-(5-{3-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基]-脲基}-戊氧基)-苯甲酸雙-三氟乙酸鹽；11-[3′-(5-脒基-2-甲硫基-噻吩-3-磺?；?-4-胍基-6-甲基-聯(lián)苯-2-基氨甲酰基]-十一酸雙-三氟乙酸鹽；4-(4′-胍基-2′-甲基-聯(lián)苯基-3-磺酰基)-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；4-[2′-甲基-4′-(N′-甲氧基-胍基)-聯(lián)苯基-3-磺?；鵠-5-甲硫基-噻吩-2-甲脒雙-三氟乙酸鹽；及其藥學(xué)上可接受的鹽或前體藥物。
49.藥物組合物，包含權(quán)利要求1-48任意一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
50.藥物組合物，包含權(quán)利要求19的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
51.治療由經(jīng)典補(bǔ)體級(jí)聯(lián)途徑介導(dǎo)的急性或慢性障礙的癥狀的方法，包含對(duì)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的權(quán)利要求1-48任意一項(xiàng)的化合物。
52.治療由經(jīng)典補(bǔ)體級(jí)聯(lián)途徑介導(dǎo)的急性或慢性障礙的癥狀的方法，包含對(duì)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的權(quán)利要求19的化合物。
53.權(quán)利要求51或52的方法，其中所述急性或慢性障礙是炎癥、組織損傷或自體免疫疾病。
54.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)需要補(bǔ)體-介導(dǎo)疾病的治療的哺乳動(dòng)物給藥，所述疾病選自由炎癥、組織損傷及其組合組成的組。
55.權(quán)利要求54的方法，其中所述炎癥或組織損傷發(fā)生在中風(fēng)、心肌梗死、失血性休克或外科手術(shù)或其組合之后。
56.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)需要治療克羅恩病的腸部炎癥、再狹窄或牛皮癬的哺乳動(dòng)物給藥。
57.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物在器官或移植物的移植之前、期間或之后對(duì)哺乳動(dòng)物給藥，以改善哺乳動(dòng)物對(duì)這類(lèi)器官或移植物的排斥。
58.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物在下列之前、期間或之后對(duì)哺乳動(dòng)物給藥(1)用IL-2治療所述哺乳動(dòng)物，(2)所述哺乳動(dòng)物中的骨髓移植，或者(3)所述哺乳動(dòng)物發(fā)作胰腺炎，給藥量有效減少I(mǎi)L-2治療、骨髓移植或胰腺炎的毒性和副作用。
59.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)已被診斷為自體免疫疾病的哺乳動(dòng)物給藥。
60.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)已被診斷為下列疾病的哺乳動(dòng)物給藥艾迪生病、I型糖尿病、橋本甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的腎小球腎炎與皮膚損害、其他類(lèi)腎小球腎炎、大皰性類(lèi)天皰瘡、皰疹樣皮炎、古德帕斯丘綜合征、格雷夫斯病、重癥肌無(wú)力、胰島素抵抗、自體免疫性溶血性貧血、自體免疫性血小板減少性紫癜、免疫復(fù)合物-誘發(fā)的血管炎、腎小球腎炎、II型膠原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或變應(yīng)性神經(jīng)炎。
61.權(quán)利要求60的方法，其中將所述化合物對(duì)已被診斷為重癥肌無(wú)力(MG)、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或系統(tǒng)性紅斑狼瘡的哺乳動(dòng)物給藥。
62.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)已被診斷為神經(jīng)變性疾病的哺乳動(dòng)物給藥。
63.權(quán)利要求62的方法，其中所述神經(jīng)變性疾病是多發(fā)性硬化(MS)、吉-巴綜合征(GBS)、米-費(fèi)綜合征(MFS)、阿爾茨海默氏病(AD)或變異型克-雅病(vCJD)。
64.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)患有成人呼吸窘迫綜合征癥狀的哺乳動(dòng)物給藥。
65.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)膿毒性休克哺乳動(dòng)物給藥。
66.權(quán)利要求52的方法，其中將所述化合物對(duì)需要下列治療的哺乳動(dòng)物給藥遺傳性血管性水腫、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、傷口愈合、腦創(chuàng)傷、哮喘、血液透析、感染、皮膚病、炎性腸疾病、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、熱損傷(灼傷和凍瘡)、溶血性貧血或心肺分流術(shù)中的泵后綜合征。
全文摘要
公開(kāi)了治療由經(jīng)典補(bǔ)體級(jí)聯(lián)途徑介導(dǎo)的急性或慢性障礙癥狀的方法，包含對(duì)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物給以治療有效量的式(I)化合物或其溶劑化物、水化物或藥學(xué)上可接受的鹽，其中R
文檔編號(hào)A61K31/416GK1665800SQ03816116
公開(kāi)日2005年9月7日 申請(qǐng)日期2003年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月28日
發(fā)明者N·薩巴辛格, E·卡利爾, K·倫納德, F·阿里, H·R·赫夫納格爾, J·M·特拉文斯, S·K·巴倫坦, K·T·威爾森, M·D·卡明斯, 潘文曦, J·古舍, S·米格拉, M·沃爾, 陳錦生, M·J·魯?shù)婪? 黃輝 申請(qǐng)人:三維藥物公司