專利名稱：皮膚病的局部治療的制作方法
描述本發(fā)明涉及一種用于治療炎性和/或變應(yīng)性皮膚病的方法，包括局部給予取代的羥基吲哚。
磷酸二酯酶(PDE)的同工酶通過調(diào)節(jié)環(huán)核苷酸水平而涉及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)的調(diào)節(jié)。迄今為止，已經(jīng)鑒定了11種PDE同工酶基因家族(Giembycz，2000)。這些同工酶的區(qū)別在于它們的細(xì)胞分布和生化功能。在特應(yīng)性皮炎患者，特別是兒童的白細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)了較高的PDE4活性(Butler等人，1983；Cooper等人，1985)。PDE4是炎性細(xì)胞，如單核細(xì)胞和單核細(xì)胞衍生的巨嗜細(xì)胞(Gantner等人，1997)、嗜酸性粒細(xì)胞(Dent等人，1994)和B淋巴細(xì)胞(Cooper等人，1985)中的主要同工酶。PDE4抑制劑通過增加胞內(nèi)cAMP水平而顯示出非常強(qiáng)的抗炎作用。通過抑制cAMP降解，PDE4抑制劑可調(diào)節(jié)胞內(nèi)功能(例如，減弱過氧化物的產(chǎn)生)和基因轉(zhuǎn)錄(例如，抑制炎性細(xì)胞因子的合成和/或釋放)(Giembycz，2000，Kuss等人，2002)。因?yàn)镻DE4也在角質(zhì)形成細(xì)胞中表達(dá)，因此這些細(xì)胞可成為使用PDE4抑制劑控制皮膚炎性疾病的其它可能的藥理學(xué)靶(Chujor等人，1998)。
羥基吲哚，它們作為PDE4抑制劑的用途以及它們的制備方法在WO99/55696中公開。這些化合物可用于和嗜酸性粒細(xì)胞活性有關(guān)的疾病，特別是炎性氣管疾病，如支氣管哮喘、變應(yīng)性鼻炎、變應(yīng)性結(jié)膜炎、特應(yīng)性皮炎、濕疹、變應(yīng)性脈管炎、炎癥和增生性皮膚病，如牛皮癬或角化病中。這些化合物可能的給藥形式是口服、腸胃外、靜脈內(nèi)、透皮、局部、吸入和鼻內(nèi)制劑。特別優(yōu)選的化合物是AWD 12-281。
PDE4抑制劑AWD 12-281(N-(3，5-二氯-4-吡啶基)-2-[1-(4-氟-芐基)-5-羥基-1H-吲哚-3-基]-2-氧代乙酰胺)已在變應(yīng)性支氣管狹窄模型中成功進(jìn)行了試驗(yàn)。它可顯著降低變應(yīng)原在被動(dòng)致敏的人類氣管中的支氣管痙攣?zhàn)饔?Schmidt等人，2000)。AWD 12-281可抑制抗原刺激的人類細(xì)胞中的炎性介質(zhì)從鼻息肉釋放，如GM-CSF(粒細(xì)胞-巨嗜細(xì)胞集落刺激因子)、TNF-α(腫瘤壞死因子)和組胺(Kuss等人，2002)。此外，AWD 12-281可體外抑制人類嗜酸性粒細(xì)胞脫粒(Ezeamuzie，2001)。在對(duì)致敏Brown Norway大鼠中的抗原作出氣管反應(yīng)的后期，在支氣管肺泡灌洗期間，AWD 12-281可體內(nèi)顯著降低嗜酸性粒細(xì)胞的積聚。它還對(duì)家豬中LPS誘導(dǎo)的肺中性白細(xì)胞增多癥顯示出抑制作用(Kuss等人，2002)。
其它PDE4抑制劑是cilomilast，現(xiàn)在正相對(duì)于哮喘(Griswold等人，1998，Giembycz，2000)和慢性阻塞性肺病的治療對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)。特別是，有關(guān)慢性阻塞行肺病的II/III期臨床試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)了在臨床上可顯著增加肺功能(Giembycz，2001，Dyke & Montana，2002)。
為了刺激免疫炎癥，已經(jīng)建立了(Ehinger等人，2000)小鼠耳腫脹試驗(yàn)(MEST)，其中按照Gad等人(1986)所述，使用甲苯-2，4-二異氰酸鹽(TDI)將小鼠致敏。它是由Dearman等人(1996)證實(shí)的，其中皮膚的TDI致敏導(dǎo)致BALB/c小鼠中產(chǎn)生Th2-型細(xì)胞因子。來(lái)源于接觸TDI動(dòng)物的活化淋巴結(jié)細(xì)胞產(chǎn)生大量白介素4和10，但僅產(chǎn)生較低水平的干擾素γ。根據(jù)致敏方法的不同，接觸變應(yīng)原TDI誘導(dǎo)IgE-非依賴性(短時(shí)間接觸)或IgE-依賴性(長(zhǎng)時(shí)間接觸)變應(yīng)性皮炎(Scheerens等人，1999)。較高的IgE值只能通過長(zhǎng)時(shí)間接觸致敏獲得。在其中一項(xiàng)研究中，進(jìn)行120天的致敏。
進(jìn)行研究以獲得有關(guān)不同的PDE4抑制劑對(duì)變應(yīng)性和/或炎性反應(yīng)的治療作用有效性的信息。為了改善TDI誘導(dǎo)的耳腫脹，測(cè)量治療過的小鼠耳朵中的細(xì)胞因子白介素(IL)4、IL-6和MIP-2。
人們發(fā)現(xiàn)，TDI攻擊后，作為治療干預(yù)，AWD 12-281的局部給藥可顯著抑制耳腫脹。與其相比，作為參照化合物的PDE4抑制劑cilomilast(SB207499)則不能達(dá)到這種作用。該結(jié)果表明局部給藥的羥基吲哚，如AWD 12-281可有效預(yù)防和治療變應(yīng)性或炎性皮膚病。
因此，本發(fā)明涉及一種用于治療皮膚病的方法，包括對(duì)有此需要的受治療者局部給予治療有效量的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中R1是(i)直鏈或支鏈的-C1-12-烷基或單-或多不飽和的-C2-C12烯基，所述基因任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基可任選被R4單-或多取代，(ii)具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，或具有3-10個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)-或雜環(huán)飽和的或單-或多不飽和的螺環(huán)，其中雜環(huán)系統(tǒng)包含1-6個(gè)雜原子，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，所述環(huán)任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基可任選被R4單-或多取代，R5是具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，或具有3-10個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)-或雜環(huán)飽和的或單-或多不飽和的螺環(huán)，其中雜環(huán)系統(tǒng)包含1-6個(gè)雜原子，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，
所述環(huán)任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基可任選被R4單-或多取代，條件是R5包含選自-F、-Cl、-Br、-I的至少一個(gè)取代基；R2、R3是氫或-OH，其中兩個(gè)取代基中至少有一個(gè)必須是-OH；R4是-H、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-COOH、-(CO)R6、-(CS)R6、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO2R6、-C1-C6-烷基，其中每個(gè)芳基或烷基都可被-OH、-F、-Cl、-Br、-I單-或多取代；R6是-H、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基，直鏈或支鏈的-C1-12-烷基，單-或多不飽和的、直鏈或支鏈的-C2-12-烯基，具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S；A是一個(gè)鍵，或-(CH2)m-、-(CH2)m-(CH＝CH)n-(CH2)p-、-(CHOZ)m-、-(C＝O)-、-(C＝S)-、-(C＝N-Z)-、-O-、-S-、-NZ-，其中，m、p＝0-3且n＝0-2且
Z是-H、或直鏈或支鏈的-C1-12-烷基，單-或多不飽和的、直鏈或支鏈的-C2-12-烯基，具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S；B是碳或硫，或-(S＝O)-；D是氧、硫、CH2或N-Z，其中，如果B是碳，則D是S或CH2；E是一個(gè)鍵，或-(CH2)m-、-O-、-S-、-(N-Z)-，其中m和Z具有上面已經(jīng)描述過的含義。
本發(fā)明還涉及通式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
在通式(I)的化合物中，R5優(yōu)選自具有至少一個(gè)鹵素取代基的單環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)及雜環(huán)，更優(yōu)選具有至少一個(gè)，例如2或3個(gè)鹵素取代基的單環(huán)芳族碳環(huán)及雜環(huán)。R5特別優(yōu)選的例子是具有至少一個(gè)鹵素取代基的吡啶環(huán)或苯環(huán)，如3，5-二氯-4-吡啶基、2，6-二氯苯基、2，6-二氯-4-三氟甲基苯基、2，6-二氯-4-三氟甲氧基苯基等。
R1優(yōu)選自任選被碳環(huán)，例如苯環(huán)取代的C1-C12烷基，例如C1-C4烷基。R1特別優(yōu)選的例子是乙基、丙基(正丙基或異丙基)、芐基和鹵素取代的芐基，例如4-氟芐基、2，6-二氟芐基等。此外，R1可選自被任選取代的單環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或雜環(huán)。
R2優(yōu)選OH且R3優(yōu)選H。A優(yōu)選自-(C＝O)-和-(CHOH)-。B優(yōu)選是C，D優(yōu)選是O且E優(yōu)選-(N-H)-?；衔?I)特別優(yōu)選的例子是AWD 12-281(N-3，5-二氯-4-吡啶基)-2[1-(4-氟芐基)-5-羥基-1H-吲哚-3-基]-2-氧代乙酰胺)或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的化合物特別適合用于治療炎性和/或變應(yīng)性皮膚病，特別是與病理性增加的PDE4-活性有關(guān)的皮膚病，例如變應(yīng)性疾病，如變應(yīng)性皮炎。
通常，通式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可制備用于人類或其它哺乳動(dòng)物中任何疾病狀況的預(yù)防性或治療性處理的藥物，其是由皮膚的炎性反應(yīng)、以及皮膚細(xì)胞的干擾增殖和分化引起的。通式(I)化合物可用于治療皮膚樣鞏膜炎、局限性硬皮病、丹毒、尋常天皰瘡、落葉狀天皰瘡和大皰性類天皰瘡的炎性反應(yīng)。所述化合物對(duì)由活化T-細(xì)胞或免疫系統(tǒng)其它細(xì)胞，像粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或這些免疫細(xì)胞釋放的介質(zhì)，如細(xì)胞因子引起的炎性皮膚病(例如，扁平紅苔癬)也具有有益的作用。此外，這些化合物還可有效治療自身免疫疾病，像皮膚肌炎、紅斑狼瘡等的皮膚表現(xiàn)形式。
因?yàn)檫@些化合物能夠升高環(huán)AMP水平，因此它們可用于治療人類或除人類以外的哺乳動(dòng)物中的良性及惡性增生性皮膚病。當(dāng)在此處使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)‘增生性皮膚病’是指良性及惡性的增生性皮膚病，它們的特征在于細(xì)胞在表皮、真皮或其附件中的分化加速，與不完全的組織分化有關(guān)。這類疾病包括牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、非-特異性皮炎、原發(fā)刺激性接觸性皮炎、變應(yīng)性接觸性皮炎、或變應(yīng)性疾病如特異性變態(tài)反應(yīng)、蕁麻疹、濕疹、角膜結(jié)膜炎、皮膚的基底和鱗狀上皮細(xì)胞癌、層板狀魚鱗病、表皮松懈性角化過度、單純大皰性表皮松懈、惡化前日光誘導(dǎo)的角化病、非-惡性角化病、痤瘡和皮脂溢性皮炎、萊爾綜合征、人類肉芽腫性皮膚損害和特應(yīng)性皮炎、瘙癢和馴養(yǎng)動(dòng)物的獸疥癬。
因?yàn)榛衔锬軌驕p少炎性反應(yīng)，因此它們可用于治療由細(xì)菌、病毒、真菌或寄生蟲感染誘導(dǎo)的皮膚病。這些疾病的例子是游走性紅斑、結(jié)核性皮膚、萊姆病、皮膚利什曼病、毒性表皮壞死松懈、膿皮病、癬和痔瘡。
通式(I)的化合物還可用于治療皮膚樣鞏膜炎、局限性硬皮病、丹毒、尋常天皰瘡、落葉狀天皰瘡和大皰性類天皰瘡。
因?yàn)槠つw細(xì)胞的增殖受到胞內(nèi)cAMP水平的影響，因此通式(I)的化合物可支持傷口愈合。
化合物(I)是作為局部，例如透皮制劑給藥的，優(yōu)選含有活性成分和適宜的藥學(xué)上可接受載體、稀釋劑和助劑的水性或油性混懸液的形式。
通常，通式(I)的化合物，或如果其適宜的藥學(xué)上可接受的鹽，可與常規(guī)的局部賦形劑聯(lián)合作為局部制劑給藥。局部制劑可以，例如，軟膏劑、糊劑、搽劑、滴劑、霜?jiǎng)┗蛳磩?、浸漬敷料、凝膠、膠棒、噴霧劑和氣溶膠的形式提供，且可包含適宜的常規(guī)添加劑如防腐劑，促進(jìn)藥物滲透的溶劑以及軟膏劑和霜?jiǎng)┲械能浕瘎?。所述制劑可含有相容的常?guī)載體，如霜?jiǎng)┗蜍浉鄤┑幕|(zhì)以及洗劑所用的乙醇或油醇。適宜的霜?jiǎng)⑾磩?、凝膠、棒狀物、軟膏劑、噴霧劑或氣溶膠制劑均可用于通式I的化合物或其適宜的藥學(xué)上可接受的鹽。如果是指直腸和肛門皮膚粘膜的治療，則通式(I)化合物可作為栓劑給藥。
活性化合物的劑量可根據(jù)患者的年齡和體重、所治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及類似的因素而改變。每日劑量可以單個(gè)劑量的形式給藥或再分成兩個(gè)或多個(gè)每日劑量給藥，且可以為0.01-5000mg。
在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，將所述化合物給予已患病的皮膚區(qū)域。例如，在變應(yīng)性攻擊后，即所要治療的患者已經(jīng)與變應(yīng)原接觸且優(yōu)選在已經(jīng)觀察到第一個(gè)變應(yīng)性癥狀后給予所述化合物。特別是，化合物的第一次給藥可在變應(yīng)性攻擊后最長(zhǎng)達(dá)48小時(shí)，優(yōu)選最長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)進(jìn)行。然后，給藥將持續(xù)到已經(jīng)獲得所需的效果。
所述化合物(I)可作為單獨(dú)的活性成分給藥或與至少一種其它藥劑聯(lián)合給藥。例如，通式(I)化合物可與刺激cAMP產(chǎn)生的藥物聯(lián)合給藥，例如可包括擬交感神經(jīng)胺如異丙腎上腺素、新異丙腎上腺素、沙丁胺醇、去氧腎上腺素和麻黃堿；黃嘌呤衍生物如茶堿和氨茶堿以及皮質(zhì)類固醇如強(qiáng)的松龍和腎上腺刺激劑如ACTH。對(duì)免疫系統(tǒng)具有作用的藥劑像類固醇、免疫抑制劑(例如，他克莫司、西羅莫司、環(huán)孢素、pimecrolimus)、環(huán)加氧酶抑制劑(例如，吲哚美辛、雙氯酚酸鈉、布洛芬)、或抗組胺(苯海拉明、羥嗪、氯雷他定、西替利嗪)可組合在一起。通式(I)化合物可與治療或處理皮膚病的其它藥劑，例如視黃酸、地蒽酚、維生素D衍生物、alefacept、daclizumab、etanercept等同時(shí)給藥。由細(xì)菌、病毒、真菌或寄生蟲感染引起的皮膚病的治療可用抗生素，例如磺胺、紅霉素和四環(huán)素來(lái)支持。因?yàn)榈鞍?，像趨化因?IP-10)或細(xì)胞因子(例如，IL1β、IL-2)可影響皮膚細(xì)胞的分化和增殖，因此用這些介質(zhì)或抗體補(bǔ)充對(duì)于治療皮膚病而言具有益處。
另外，將通過下列附圖和實(shí)施例更詳細(xì)地解釋本發(fā)明。


圖1使用“Franz”滲濾池和鼠背部皮膚測(cè)量的14C AWD 12-281的皮膚滲透。在360分鐘的培養(yǎng)過程中，測(cè)量血漿中的14C AWD 12-281活性。兩個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。將15μl(110322970dpm)14C AWD 12-281(溶于丙酮/DMSO 1∶1中)涂在剃過的皮膚上。
圖2在TDI攻擊前2小時(shí)，單獨(dú)局部應(yīng)用AWD 12-281、cilomilast和二氟松對(duì)TDI致敏小鼠耳朵的作用。豎條代表與TDI攻擊前獲得的值相比，TDI攻擊后1、5和24小時(shí)的耳腫脹。與沒有處理過的對(duì)照組(白條)相比，TDI處理過的小鼠(黑條)耳腫脹明顯增加。AWD12-281(1％，垂直畫影線的條)以及cilomilast(3％，交叉畫影線的條)和二氟松(0.05％，灰條)在所有測(cè)量時(shí)間都可顯著抑制腫脹。與TDI處理過的動(dòng)物相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(每組n＝6(TDI＝12))。
圖3TDI-攻擊后1小時(shí)，AWD 12-281、cilomilast和二氟松的單一局部應(yīng)用對(duì)TDI致敏小鼠耳朵的作用(治療性干預(yù))。豎條代表TDI攻擊后5和24小時(shí)的耳腫脹。攻擊后5小時(shí)，處理過的組之間沒有顯著差異。與TDI攻擊的對(duì)照小鼠相比，AWD 12-281(1％，白條)以及二氟松(0.05％，灰條)可在攻擊24小時(shí)后顯著抑制腫脹。Cilomilast(3％，交叉畫影線的條)沒有引起顯著的抑制。**P＜0.01，(每組n＝6(TDI＝12))。
圖4使用長(zhǎng)期(120天)反復(fù)接觸致敏方式，AWD 12-281對(duì)TDI致敏小鼠中TDI誘導(dǎo)的耳腫脹的作用。豎條代表TDI攻擊后1、5和24小時(shí)的耳腫脹。攻擊后1和5小時(shí)的組之間沒有顯著性差異。與TDI處理過的對(duì)照小鼠(白條)相比，在TDI攻擊后1小時(shí)給藥的AWD12-281(3％，黑條)可在攻擊后24小時(shí)顯著抑制腫脹。**P＜0.01，(每組n＝5)。
圖5TDI攻擊后24小時(shí)，勻化小鼠耳朵中白介素4(A)、白介素6(B)和巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(C)的濃度。樣品是從局部治療實(shí)驗(yàn)采集的(見圖2)。在TDI攻擊的小鼠耳朵中，白介素4、白介素6和巨噬細(xì)胞炎性蛋白2顯著增加。AWD 12-281(1％)可降低輕微增加(IL-4、MIP-2)或顯著減少(IL-6).Cilomilast(3％)以及二氟松(0.05％)可顯著降低所有介質(zhì)的濃度。與TDI處理過的動(dòng)物相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(每組n＝6(TDI＝12))。
圖6PDE4抑制劑對(duì)小鼠中TDI誘導(dǎo)的耳腫脹的作用。小鼠耳朵是用0.5％TDI處理的。1小時(shí)后(灰條)，用3％AWD 12-281、10％cilomilast處理這些小鼠或不處理(TDI).24小時(shí)后，測(cè)定耳腫脹(黑條)。而AWD 12-281可顯著減少耳腫脹，cilomilast則沒有表現(xiàn)出顯著的抑制作用(p＝0.09)。
實(shí)施例1.材料和方法1.1 致敏過程雌性BALB/c-小鼠是從Charles River(Sulzfeld，Germany)獲得的，8周大(體重20g)。所有動(dòng)物都是健康的且在籠中飼養(yǎng)，每個(gè)籠子6只小鼠，溫度22℃，12-h光照/黑暗-循環(huán)。可隨意獲得水和標(biāo)準(zhǔn)飲食(Altromin，Lage/Lippe，Germany)。
適應(yīng)1周后，剪開腹部皮膚并用Veet脫毛。隨后，用膠帶共10次將腹部皮膚的表皮角質(zhì)層剝?nèi)?。為了進(jìn)行有效致敏，在接下來(lái)的4天里，將100μl 5％TDI丙酮溶液用于剝下來(lái)的表皮。
21天后，通過在左耳的內(nèi)表面和外表面上給予10μl 0.5％TDI的丙酮溶液而加強(qiáng)變應(yīng)性反應(yīng)，以檢驗(yàn)致敏狀態(tài)。攻擊之前以及攻擊后24小時(shí)，用cutimeter(7309型，Mitutoyo，Neuss，Germany)測(cè)量耳朵的厚度。通過比較攻擊之前與攻擊后24小時(shí)的值而計(jì)算腫脹。與早期評(píng)價(jià)的個(gè)體基礎(chǔ)值(約230μm)相比，攻擊后24小時(shí)的平均腫脹差值小于20％的動(dòng)物被排除，這是因?yàn)樗鼈兾幢恢旅?。根?jù)其它小鼠的腫脹強(qiáng)度而將它們平均分配到治療組(n＝6)中，使每組均包括應(yīng)答不同程度的動(dòng)物。它們要休息到7天后耳朵的厚度已經(jīng)幾乎達(dá)到正常水平。為了排除耳朵上剩余的變應(yīng)原，將沒有處理過的右耳用于主要實(shí)驗(yàn)。
1.2 局部應(yīng)用其中一組小鼠(n＝6)沒有被致敏和攻擊。第二組(n＝12)是通過給右耳20μl(內(nèi)表面和外表面兩側(cè)各10μl)0.5％TDI的丙酮溶液而局部攻擊的。TDI攻擊前2小時(shí)，將20μl(內(nèi)表面和外表面兩側(cè)各10μl)AWD12-281(1％＝200μg)或20μl cilomilast(3％＝600μg；溶于丙酮/DMSO9∶1中)給予第三組和第四組的右耳。二氟松(20μl，0.05％＝10μg，溶于丙酮中)用作腎上腺皮質(zhì)激素的陽(yáng)性對(duì)照(n＝6)。在TDI攻擊后24小時(shí)通過頸部脫位處死這些小鼠并采集耳朵(見下面)。
為了模擬治療條件，在TDI攻擊后1小時(shí)，即測(cè)量耳朵厚度后，其它3組(n＝6)直接局部接受AWD 12-281(1％)、citomilast(3％)或二氟松(0.05％)。且測(cè)量TDI攻擊后5和24小時(shí)的耳朵厚度。
第一次攻擊后5周，再次攻擊用AWD 12-281(1％)和cilomilast(3％)“治療性”處理的動(dòng)物。攻擊前，用AWD 12-281(3％)治療其中一組。
此外，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以獲得有關(guān)AWD 12-281在長(zhǎng)期與TDI接觸的模型中的治療性作用。因此，在120天內(nèi)，以10天為間隔，用100μl 0.5％TDI處理10只小鼠的腹部皮膚。最后一次腹部TDI處理后10天，用20μl 0.5％TDI攻擊小鼠左耳，耳的外表面和內(nèi)表面分別用10μl。TDI攻擊后1小時(shí)，5只小鼠用AWD 12-281(3％)處理，5只小鼠假處理。攻擊之前以及攻擊后1、5和24小時(shí)，測(cè)量耳朵的厚度。
1.3 細(xì)胞因子的測(cè)定將所采集耳朵的一部分固定在4％甲醛中用于組織學(xué)切片，并用蘇木紫-曙紅染色，顯示皮膚厚度和粒細(xì)胞積聚。這些參數(shù)是在40倍放大的條件下在10個(gè)視野中測(cè)量的。采樣后，立即將剩余組織驟然冷凍并貯存在液氮中。為了測(cè)定生化參數(shù)，在液氮下將小鼠耳朵勻化。將勻漿放在200μl RPMI 1640培養(yǎng)基中并加入蛋白酶抑制劑Pefabloc(1mmol)，將樣品混合在一起。離心后(10000g，10分鐘，4℃)，收集上清液并測(cè)定蛋白含量。將樣品-80℃貯存，直到測(cè)定細(xì)胞因子。使用可商業(yè)得到的試劑盒，按照制造商的說(shuō)明，通過ELISA測(cè)量樣品中的白介素(IL)4、IL-6和MIP-2。
1.414C AWD 12-281通過鼠背部皮膚滲透14C AWD 12-281通過鼠背部皮膚滲透的能力是在滲濾池(Franzcell)中試驗(yàn)的。將干燥的剪下來(lái)的鼠背部皮膚放在滲濾池上，使1.5cm(直徑)的皮膚一側(cè)與溫?zé)岬?34℃)的緩沖液(牛血清)接觸。將15μl(110322970dpm)的14C AWD 12-281(溶于丙酮/DMSO 1∶1中)涂在剪下來(lái)的皮膚上。在第15、60、120、180、240、300、360分鐘采集樣品并在β計(jì)數(shù)器(Beckman，Munich，Germany)中測(cè)量放射性。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行兩次。
1.5 試劑TDI是由Sigma-Aldrich Chemie(Deisenhofen，Germany)提供的。AWD12-281、14C AWD 12-281和cilomilast是從AWD(Dresden，Germany)獲得的。丙酮、PEG200和DMSO是從Merck(Darmstadt，Germany)購(gòu)買的；甲醛溶液是從Fluka(Deisenhofen，Germany)購(gòu)買的，Miglyol和羥乙基纖維素是從Caesar & Loritz(Hilden，Germany)購(gòu)買的且RPMI 1640培養(yǎng)基是從Biochrom(Berlin，Germany)購(gòu)買的。用于測(cè)定細(xì)胞因子的ELISA是從R & D Systems(Wiesbaden，Germany)購(gòu)買的。Pefabloc是從Boehringer Mannheim(Germany)購(gòu)買的。脫毛霜(Veet)是Reckitt & Colman(Hamburg，Germany)的商標(biāo)。膠帶(Tesafilm)是從Beiersdorf(Hamburg，Germany)獲得的。用Biorad測(cè)(Munchen，Germany)蛋白含量。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果以平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差表示(SE)。通過Mann-Whitney試驗(yàn)(U-試驗(yàn))檢查不同治療組的顯著性差異。因?yàn)門DI處理過的對(duì)照小鼠要與3-5個(gè)不同的組進(jìn)行比較，因此在絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)中，TDI治療過的小鼠數(shù)量都是雙倍的(n＝12)。
2.結(jié)果2.114C AWD 12-281通過鼠背部皮膚滲透在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在緩沖液中測(cè)量到的放射性增加表明AWD 12-281的皮膚滲透。使用后360分鐘測(cè)量的放射性量類似總活性的0.22和0.08％(圖1)。
2.2 局部給藥小鼠耳腫脹TDI-攻擊后1、5和24小時(shí)，對(duì)照小鼠的耳朵厚度表現(xiàn)出約30％、20％和60％的平均增加。當(dāng)TDI攻擊前2小時(shí)給藥時(shí)，局部給藥的AWD12-281(1％)、cilomilast(3％)和二氟松(0.05％)可在所有測(cè)量時(shí)間顯著抑制TDI-誘導(dǎo)的腫脹(圖2)。
用于試驗(yàn)AWD 12-281治療作用的組在TDI攻擊后1小時(shí)，即給藥前立即表現(xiàn)出25-30％的腫脹。給藥后，TDI攻擊后5小時(shí)，沒有觀察到顯著的進(jìn)一步腫脹且不同治療組沒有顯著差異。然而，攻擊后24小時(shí)，AWD 12-281以及二氟松都可顯著抑制TDI誘導(dǎo)的耳腫脹。Cilomilast可誘導(dǎo)輕微但不顯著的腫脹減輕(圖3)。
在長(zhǎng)期(120天)致敏的最后實(shí)驗(yàn)中，將TDI涂在耳朵上可在攻擊后1小時(shí)誘導(dǎo)耳朵厚度增加近40％。局部給藥的AWD 12-281(3％)，在攻擊后1小時(shí)“治療性”應(yīng)用的，在攻擊后5小時(shí)誘導(dǎo)輕微的抑制。與沒有治療過的對(duì)照組相比，在攻擊后24小時(shí)，AWD 12-281可幾乎消除腫脹(圖4)。
組織學(xué)檢查TDI攻擊后24小時(shí)，對(duì)小鼠耳朵皮膚進(jìn)行的組織學(xué)檢查顯示不同程度的水腫和炎性細(xì)胞(主要是粒細(xì)胞)流入。AWD 12-281、cilomilast和二氟松可顯著抑制這些炎性過程(表1)小鼠皮膚中的炎性介質(zhì)在第一次治療后5周再次攻擊的小鼠耳朵中，細(xì)胞因子濃度通常較高。由于耳部皮膚中還殘留有炎性細(xì)胞，因此這是顯而易見的。這些結(jié)果分別在表2中提供(TDI與AWD 12-281 3％相比)。
攻擊后24小時(shí)，TDI處理過的小鼠皮膚中的IL-4顯著增加(圖5a)。1％AWD 12-281顯示出輕微的抑制作用，而3％AWD 12-281(表2)、cilomilast(3％)和二氟松(0.05％)均可顯著抑制這種增加。
攻擊后24小時(shí)，TDI還可顯著增加IL-6的濃度。AWD 12-281(1％、3％)、cilomilast(3％)和二氟松(0.05％)可顯著抑制這種反應(yīng)。AWD12-281(3％)、cilomilast和二氟松的抑制作用是可以進(jìn)行比較的，而AWD 12-281(1％)只顯示出輕微的作用(圖5b和表2)。
MIP-2，人IL-8的功能性同系物在TDI攻擊后也增加。而1％AWD12-281可輕微降低這種增加，3％AWD 12-281、cilomilast(3％)和二氟松(0.05％)可顯著降低MIP-2濃度的增加(圖5c和表2)。
3.討論進(jìn)行研究以試驗(yàn)PDE4抑制劑對(duì)TDI誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹的作用。給予皮膚的TDI主要誘導(dǎo)Th2-型細(xì)胞因子介導(dǎo)的反應(yīng)，這是通過與TDI接觸動(dòng)物的活化淋巴結(jié)細(xì)胞中白介素4和10的含量較高而干擾素α水平較低加以證實(shí)的(Dearman等人，1996，Hayashi等人，2001)。我們自己的結(jié)果表明其它細(xì)胞因子例如IL-1β、IL-6和MIP-2也涉及TDI的變應(yīng)性/炎性皮膚反應(yīng)。促炎細(xì)胞因子的增加還伴有炎性細(xì)胞像嗜中性白細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞(表1)的流入以及不同程度的水腫。因此，耳腫脹可用作功能性參數(shù)。
進(jìn)行AWD 12-281的皮膚滲透性試驗(yàn)。在我們的實(shí)驗(yàn)中，AWD 12-281可被很好地吸收且能夠滲透到緩沖液中。6小時(shí)后觀察到的分別為0.08和0.22％的累積吸收比氫化可的松的吸收高10倍，這是在Franz滲濾池中相對(duì)于人類皮膚測(cè)量的(Hueber等人，1994)。
在TDI攻擊之前，使用PDE4抑制劑進(jìn)行局部治療的結(jié)果證實(shí)了先前的發(fā)現(xiàn)(Ehinger等人，2000)。在該研究中，以較低劑量給予AWD12-281，從而考慮PDE4的不同IC50。AWD 12-281的IC50較之cilomilast約低10倍(Griswold等人，1998，Kuss等人，2002)。
與先前的結(jié)果相反，通過改變致敏方案可獲得更加不同的陽(yáng)性對(duì)照。通過重復(fù)使用本研究中的致敏方案，可在攻擊后24小時(shí)再現(xiàn)并使對(duì)TDI的高度反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化(沒有給出數(shù)據(jù))。由于該時(shí)間點(diǎn)的高度反應(yīng)，我們能夠檢測(cè)大量細(xì)胞因子。為了更接近臨床環(huán)境，決定在已經(jīng)設(shè)置的變應(yīng)性/炎性反應(yīng)中檢測(cè)PDE4抑制劑的作用。因此，PDE4抑制劑是在TDI攻擊后1小時(shí)給予的，其中炎性過程的開始通過30％的平均耳腫脹反映。雖然以較低劑量(1％)給藥，但是AWD 12-281還是可在攻擊后24小時(shí)顯著降低對(duì)TDI的炎性反應(yīng)。這是通過下列研究加以證實(shí)的，其中檢測(cè)了與TDI長(zhǎng)期接觸的結(jié)果。長(zhǎng)期接觸的其中一個(gè)結(jié)果是攻擊后1小時(shí)耳腫脹增加(圖4)，這可能是由于更大程度的IgE介導(dǎo)的反應(yīng)(Scheerens等人，1999)。在該長(zhǎng)期接觸的研究中，以較高濃度(3％)給藥時(shí)，AWD 12-281幾乎可消除TDI誘導(dǎo)的腫脹(圖4)。對(duì)使用AWD 12-281治療過的小鼠進(jìn)行的組織學(xué)檢查表明-與陽(yáng)性對(duì)照形成鮮明對(duì)比-炎性細(xì)胞和血管滲漏幾乎完全消失(沒有給出)。
為了檢測(cè)造成TDI誘導(dǎo)的耳腫脹的炎性介質(zhì)，測(cè)量處理過的小鼠耳朵中的細(xì)胞因子白介素(IL)4、IL-6和MIP-2。
IL-4的過量產(chǎn)生在特應(yīng)性皮炎患者的嚴(yán)重受損的皮膚損害處是很明顯的(Hanifin等人，1996，Spergel等人，1999)。因此我們對(duì)于TDI對(duì)IL-4在小鼠皮膚中產(chǎn)生的影響很感興趣。皮膚中IL-4的來(lái)源是有限的，因?yàn)榻琴|(zhì)形成細(xì)胞和朗格罕氏細(xì)胞不能產(chǎn)生這種細(xì)胞因子(Shreedhar等人，1998，Morita等人，2001)。因此，有趣的是這種免疫作用可在陽(yáng)性對(duì)照中見到。肥大細(xì)胞(Harvima等人，1994；Dastych等人，1999)和Th2細(xì)胞的流入(Shreedhar等人，1998)很明顯是皮膚中IL-4的來(lái)源。Cilomilast體內(nèi)抑制IL-4的能力也已經(jīng)在慢性噁唑酮誘導(dǎo)的接觸敏感性模型中加以證實(shí)(Griswold等人，1998)。AWD 12-281(1％)所致的不充分調(diào)節(jié)作用是由于劑量較低，因?yàn)?％AWD 12-281可導(dǎo)致IL-4濃度的80％抑制(表2B)。
描述了體外IL-6由于TDI而升高(Mattoli等人，1991)。IL-6是在炎性刺激后由角質(zhì)形成細(xì)胞分泌的(McKenzie等人，1990)。PDE4抑制劑對(duì)IL-6釋放的抑制也相對(duì)于LPS刺激的巨噬細(xì)胞而描述(Kambayashi等人，1995)。
MIP-2是嗜中性白細(xì)胞趨化性的重要細(xì)胞因子。這里證實(shí)了TDI誘導(dǎo)的耳腫脹連同嗜中性白細(xì)胞的大量流入。Cilomilast、二氟松和AWD 12-281(3％)的抑制作用可解釋用PDE4抑制劑或糖皮質(zhì)激素治療后嗜中性白細(xì)胞流入減少。
這些結(jié)果共同表明AWD 12-281以及cilomilast可抑制變應(yīng)性皮炎模型中的炎性反應(yīng)。通過局部途徑給藥的AWD 12-281的抗炎反應(yīng)是可靠的且與1％相比，3％給藥的抑制作用明顯更高(圖3和4)。雖然口服和腹膜內(nèi)途徑給藥的cilomilast(3％)也具有抑制作用，但是當(dāng)在TDI攻擊后給藥時(shí)缺少顯著的抑制作用(圖3)?？紤]到變應(yīng)性反應(yīng)的治療在臨床上比預(yù)防性給藥更重要，因此這些數(shù)據(jù)可表明AWD 12-281的優(yōu)點(diǎn)和相關(guān)的羥基吲哚化合物可治療皮膚病，特別是皮膚變應(yīng)性/炎性反應(yīng)。
表1TDI攻擊后24小時(shí)，小鼠耳朵中細(xì)胞流入的組織學(xué)檢查。組織樣品是從局部治療實(shí)驗(yàn)采集的(見圖2)。
表2A)TDI攻擊后24小時(shí)的耳腫脹和TDI攻擊后24小時(shí)，用AWD12-281(3％)治療后，勻化小鼠耳朵中IL-4、IL-6和MIP-2(μg/400g蛋白)的平均值(±s.e.平均值)，**P＜0.01。
B)AWD 12-281(3％)、cilomilast(3％)和二氟松(0.05％)抑制作用的比較(TDI誘導(dǎo)的合成的平均抑制(％))。
A)
B)
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權(quán)利要求
1.一種用于治療皮膚病的方法，包括對(duì)有此需要的受治療者局部給予治療有效量的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是(i)直鏈或支鏈的-C1-12-烷基或單-或多不飽和的-C2-C12烯基，所述基因任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1- 6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基本身可任選被R4單-或多取代，(ii)具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，或具有3-10個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)-或雜環(huán)飽和的或單-或多不飽和的螺環(huán)，其中雜環(huán)系統(tǒng)包含1-6個(gè)雜原子，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，所述環(huán)任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基可任選被R4單-或多取代，R5是具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，或具有3-10個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)-或雜環(huán)飽和的或單-或多不飽和的螺環(huán)，其中雜環(huán)系統(tǒng)包含1-6個(gè)雜原子，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，所述環(huán)任選被下列基團(tuán)單-或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO3H、-SO2R6、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-(CS)R6、-COOH、-(CO)R6、具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)、具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S，其中C6-14芳基和碳環(huán)-及雜環(huán)取代基可任選被R4單-或多取代，條件是R5包含選自-F、-Cl、-Br、-I的至少一個(gè)取代基；R2、R3是氫或-OH，其中兩個(gè)取代基中至少有一個(gè)必須是-OH；R4是-H、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOR6、-NO2、-CN、-COOH、-(CO)R6、-(CS)R6、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-O(CO)R6、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOR6、-SO2R6、-C1-C6-烷基，其中每個(gè)芳基或烷基都可被-OH、-F、-Cl、-Br、-I單-或多取代；R6是-H、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基，直鏈或支鏈的-C1-12-烷基，單-或多不飽和的、直鏈或支鏈的-C2-12-烯基，具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S；A是一個(gè)鍵，或-(CH2)m-、-(CH2)m-(CH＝CH)n-(CH2)p-、-(CHOZ)m-、-(C＝O)-、-(C＝S)-、-(C＝N-Z)-、-O-、-S-、-NZ-，其中，m、p＝0-3且n＝0-2且Z是-H、或直鏈或支鏈的-C1-12-烷基，單-或多不飽和的、直鏈或支鏈的-C2-12-烯基，具有3-14個(gè)環(huán)原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)，具有5-15個(gè)環(huán)原子和1-6個(gè)雜原子的單-、二-或三環(huán)飽和的或單-或多不飽和的雜環(huán)，所述雜原子優(yōu)選N、O和S；B是碳或硫，或-(S＝O)-；D是氧、硫、CH2或N-Z，其中，如果B是碳，則D是S或CH2；E是一個(gè)鍵，或-(CH2)m-、-O-、-S-、-(N-Z)-，其中m和Z具有上面已經(jīng)描述過的含義。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R5選自具有至少一個(gè)鹵素取代基的單環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)和雜環(huán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中R5選自具有至少一個(gè)鹵素取代基的單環(huán)芳族碳環(huán)和雜環(huán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中R5是具有至少一個(gè)鹵素取代基的吡啶環(huán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中R5是具有至少一個(gè)鹵素取代基的苯環(huán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R1選自被任選取代的C1-C12烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R1選自被任選取代的單環(huán)飽和的或單-或多不飽和的碳環(huán)或雜環(huán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R2是OH且R3是H。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中A選自-(C＝O)-和-(CHOH)-。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中B是C。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中D是O。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中E是-(N-H)-。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中化合物(I)是(N-3，5-二氯-4-吡啶基)-2-[1-(4-氟芐基)-5-羥基-1H-吲哚-3-基]-2-氧代乙酰胺)。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述皮膚病是變應(yīng)性和/或炎性疾病。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述變應(yīng)性疾病是變應(yīng)性皮炎。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15任何一項(xiàng)所述的方法，其中將所述化合物給予患病的皮膚區(qū)域。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中在變應(yīng)性攻擊后給予所述化合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中在變應(yīng)性攻擊后最長(zhǎng)達(dá)48小時(shí)給予所述化合物。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-18任何一項(xiàng)所述的方法，其中所述化合物(I)與至少一種其它藥劑共同-給藥。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述其它藥劑是刺激cAMP產(chǎn)生的藥物。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述其它藥劑是皮質(zhì)類固醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療炎性和/或變應(yīng)性皮膚病的方法，包括局部給予取代的羥基吲哚。
文檔編號(hào)A61K45/00GK1681500SQ03821520
公開日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2003年7月10日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月11日
發(fā)明者C·倫德菲爾德特, M·基伊茨曼恩, J·霍普曼恩, W·貝梅, H·庫(kù)斯, N·霍夫根 申請(qǐng)人:埃爾比昂股份公司