專利名稱：用于抑制和改善疾病的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的制作方法
背景技術(shù)：
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明總體上涉及醫(yī)藥和合成化學領(lǐng)域。更具體而言，本發(fā)明涉及類胡蘿卜素類似物的合成和應用。
2.相關(guān)技術(shù)描述心血管疾病(CVD)，特別是冠狀動脈疾病(CAD)，仍是美國和全世界死亡的主導原因。CVD是全世界死亡率和發(fā)病率的主導原因。輕度至中度降低心血管風險，從而導致急性冠脈綜合征的急診部就診和住院治療減少，可以產(chǎn)生明顯的臨床和公共衛(wèi)生益處。
對抗氧化劑的廣泛研究已表明它們是初級和二級預防心血管疾病的有效治療劑。CVD仍是美國所有種族死亡的主導原因；現(xiàn)在大約6千萬美國人患有某種形式的CVD。如果可以消除CVD則在美國的預期壽命將增加差不多7年。由CVD導致的絕對死亡數(shù)自1996年以來已有所降低，但是它在美國仍是單一最大死亡原因，其總年度醫(yī)療保健負擔大于$3000億(包括心臟病發(fā)作和中風)。
局部缺血是特定的組織缺乏足夠的含氧血供。局部缺血是許多急性和慢性疾病狀況的基礎(chǔ)，所述疾病包括但不限于●心肌梗塞，或MI●不穩(wěn)定性心絞痛●穩(wěn)定性心絞痛●經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)(PTCA)后的突然重閉●血栓形成性中風(中風總數(shù)的85％)●栓塞性血管閉塞
●外周血管機能不全●器官移植●深靜脈血栓形成，或DVT●留置導管閉塞局部缺血也可能成為選擇性操作中的一個問題，例如預定的器官移植；預定的冠狀動脈分流移植手術(shù)(CABG)；和預定的經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)(PTCA)。這些情況中的每一種的共同之處是再灌注損傷現(xiàn)象在將含氧血流重新引入到先前局部缺血的區(qū)域時產(chǎn)生活性氧種類(ROS)，隨后發(fā)生反常額外的組織損害。特別地，在急性心肌梗塞(AMI)和急性血栓形成性中風中使用溶栓療法-以及用PTCA進行外科血管再形成-通常伴有局部缺血心肌和/或腦的再灌注。臨床結(jié)果隨著在急性血栓形成后實現(xiàn)早期開放而改善，但并非不用付出代價(即“再灌注損傷”)。
目前的治療允許再灌注藥理學活性劑，包括重組組織型纖溶酶原活化物(r-TPA)、阿尼普酶(APSAC)、鏈激酶和尿激酶。近來的研究已表明早期外科再灌注帶來AMI之后的最佳臨床結(jié)果。但是，外科再灌注僅在15-20％的美國醫(yī)療中心可獲得，而在全世界則更少。因此，藥理學再灌注對可預見的未來而言可能仍是臨床上適當?shù)暮椭匾摹?br> 溶栓治療在大約20％的梗塞動脈的再灌注中是不成功的。在成功地進行再灌注的動脈中，大約15％突然重閉(24小時之內(nèi))。系統(tǒng)炎癥的衡量指標(例如C-反應蛋白或CRP的血清水平)與這些患者的臨床重閉十分相關(guān)。心肌搶救作用似乎在急性斑塊破裂和血栓形成之后的2-6小時“治療窗”內(nèi)最大。在急性血栓形成性或血栓栓塞性中風中，這種治療窗甚至更窄，通常小于血栓形成后3小時。在局部缺血性中風3小時內(nèi)施用重組組織型纖溶酶原活化物顯著地改善臨床結(jié)果，但增加出血的風險。
在局部缺血期間，許多細胞經(jīng)歷與缺氧有關(guān)的生物化學和病理學變化，但保持潛在活力。因此這些潛在存活的細胞是再灌注期中的“戰(zhàn)場”。局部缺血引起受影響的組織發(fā)生變化，并可能最終導致處于危險的心肌的收縮帶和/或凝固壞死。局部缺血心肌的病理變化包括但不限于●自由基和ROS產(chǎn)生●ATP喪失和缺陷ATP再合成●磷酸肌酸喪失●細胞外鉀喪失●心肌產(chǎn)生主動張力的能力喪失●細胞腫脹●酸中毒●離子穩(wěn)態(tài)喪失●結(jié)構(gòu)破壞●電不穩(wěn)定和心律失常發(fā)生●脂膜過氧化物●谷胱甘肽和其它內(nèi)源性/外源性抗氧化劑消耗(包括維生素C和E和類胡蘿卜素)對尚未不可逆地達到壞死閾的局部缺血心肌的援救是再灌注損傷中干預的焦點。
間隙連接是一種在大部分動物細胞類型中發(fā)現(xiàn)的獨特類型的細胞間連接。它們形成使相鄰細胞的細胞質(zhì)互相連接的水性通道，并使小(小于大約1千道爾頓)細胞質(zhì)組分的直接細胞間交換成為可能。通過對接由各個相鄰細胞提供的兩個半通道(“連接子”)跨越其間的胞外空間創(chuàng)建間隙連接。每個半通道是6個連接蛋白分子的低聚物。
連接蛋白43是所發(fā)現(xiàn)的第二種連接蛋白基團，它編碼在確立的細胞系和組織中最廣泛表達的連接蛋白中的一種。由連接蛋白43形成的間隙連接涉及發(fā)育、心臟功能和生長調(diào)控。
CVD的一個共同的表現(xiàn)是心律失常。一般認為心律失常是心臟電活動的紊亂，其表現(xiàn)為心率或心律異常。心律失?；颊呖赡芙?jīng)歷從心悸至昏暈(″暈厥″)的廣泛癥狀。
心血管系統(tǒng)中的主要連接蛋白為連接蛋白43。認為在血管壁細胞，特別是內(nèi)皮細胞之中細胞反應的間隙連接協(xié)調(diào)對于血管舒縮張力的局部調(diào)節(jié)和循環(huán)穩(wěn)態(tài)的維持而言是關(guān)鍵性的?？刂七B接蛋白43的上調(diào)還可以有助于保持心臟組織中的電穩(wěn)定性。保持心臟組織中的電穩(wěn)定性可以有益于每年數(shù)十萬患有某些類型心血管疾病[例如局部缺血性心臟病(IHD)和心律失常]的人的健康，并可以防止處于高度心律失常風險的患者發(fā)生心源性猝死。
通常認為癌癥的特征是不受控的、異常的細胞生長。前述的連接蛋白43還與細胞生長控制有關(guān)。連接蛋白43所致的生長控制可能歸因于連接蛋白43與間隙連接通訊有關(guān)。保持、恢復或增加功能性間隙連接通訊抑制轉(zhuǎn)化細胞的增殖。因此，上調(diào)和/或控制連接蛋白43的可獲得性可以潛在地抑制和/或改善癌細胞的擴散。
慢性肝損傷，不管其病因如何，可以造成從急性和慢性炎癥至早期纖維化，并最終至肝硬化和晚期肝臟疾病(ESRD)的進行性病理范圍。初始損傷繼發(fā)的炎性事件級聯(lián)，包括釋放細胞因子和形成活性氧種類(ROS)，活化肝星形細胞(HSC)。HSC產(chǎn)生細胞外基質(zhì)組分(ECM)，包括膠原，并且在產(chǎn)生肝纖維化的過程中是關(guān)鍵。
晚期肝臟疾病[表現(xiàn)為肝硬化或肝細胞癌(HCC)]是美國與疾病有關(guān)的死亡的第8個主導原因。由病毒感染、酒精濫用、藥物誘導的毒性、鐵和銅超負荷以及許多其它因素導致的肝的慢性炎癥可以引發(fā)肝纖維化。肝細胞損害的副產(chǎn)物活化枯否細胞，其然后釋放多種細胞因子、ROS(特別包括超氧化物陰離子)和其它旁分泌和自分泌因子，進而作用于肝星形細胞(HSC)。目前認為纖維發(fā)生級聯(lián)中的關(guān)鍵細胞是HSC-負責產(chǎn)生ECM的細胞類型。體外證據(jù)表明，ROS可以誘導HSC細胞。在所有慢性肝臟疾病患者中觀察到氧化應激的間接標記物(例如硫代巴比妥酸活性種類或TBARS)的水平升高。此外，慢性肝臟疾病患者的谷胱甘肽、谷胱甘肽過氧化物酶、超氧化物歧化酶、類胡蘿卜素和α-生育酚(維生素E)的水平明顯較低。提供這些內(nèi)源性和/或外源性抗氧化劑逆轉(zhuǎn)許多慢性肝臟疾病的征象，包括病程的代用標記和肝纖維化的直接衡量指標。因此，它們可能是肝臟疾病治療干預的有效藥劑。
概述在某些實施方案中，施用類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)類似物可以抑制和/或改善治療對象疾病的發(fā)生?？梢杂妙惡}卜素的結(jié)構(gòu)類似物治療的疾病可以包括涉及產(chǎn)生活性氧種類和/或其它自由基種類(例如單線態(tài)氧，這是一種活性氧種類但不是自由基)的任何疾病。在某些實施方案中，水溶性類胡蘿卜素類似物可以用于治療涉及產(chǎn)生活性氧種類的疾病。活性氧種類和其它自由基與非自由基種類對DNA、蛋白和脂質(zhì)的氧化涉及許多人類疾病。自由基可能是以下病癥的主要原因，可使身體對其它引發(fā)疾病的因子更敏感，可抑制內(nèi)源性防御和修復過程，和/或可促進初期疾病的進展。本領(lǐng)域技術(shù)人員施用類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)類似物-包括考慮治療藥物遞送的藥代動力學和藥效學-預期可抑制和/或改善所述病癥。在第一類病癥中，主要是單一器官受影響，其證據(jù)是在疾病的病理中涉及自由基和/或非自由基。這些實例不應被看作是限定，其它病癥對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
頭、眼、耳、鼻和咽喉與年齡相關(guān)的黃斑變性(ARMD)、視網(wǎng)膜脫離、高血壓性視網(wǎng)膜疾病、葡萄膜炎、脈絡(luò)膜炎、玻璃體炎、眼出血、退化性視網(wǎng)膜損傷、白內(nèi)障生成和白內(nèi)障、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變、美尼爾病、藥物誘導的耳毒性(包括氨基糖苷和速尿毒性)、感染性和特發(fā)性耳炎、中耳炎、感染性和過敏性鼻竇炎、頭頸部癌癥；中樞神經(jīng)系統(tǒng)(腦和脊髓)老年性癡呆(包括阿爾茨海默癡呆)、尼曼-皮克病、神經(jīng)毒素反應、高壓氧效應、帕金森氏病、腦和脊髓外傷、高血壓性腦血管損傷、中風(血栓栓塞性、血栓形成性和出血性)、感染性腦炎和腦膜炎、變應性腦脊髓炎和其它脫髓鞘疾病、肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)、多發(fā)性硬化、神經(jīng)元蠟樣脂褐質(zhì)沉積癥、共濟失調(diào)-毛細血管擴張綜合征、鋁、鐵和其它重金屬超負荷、原發(fā)性腦癌/惡性腫瘤和腦轉(zhuǎn)移瘤；心血管動脈硬化、動脈粥樣硬化、外周血管疾病、心肌梗塞、慢性穩(wěn)定性心絞痛、不穩(wěn)定性心絞痛、特發(fā)性手術(shù)損傷(CABG、PTCA期間)、炎性心臟疾病[由C-反應蛋白(CRP)和髓過氧化物酶(MPO)衡量并受其影響]、低密度脂蛋白氧化(ox-LDL)、心肌病、心律失常(局部缺血性和心肌梗塞后誘導的)、充血性心衰(CHF)、藥物毒性(包括亞德里亞霉素和阿霉素)、克山病(硒缺乏)、錐蟲病、酒精性心肌病、靜脈停滯和損傷(包括深靜脈血栓形成或DVT)、血栓性靜脈炎；肺哮喘、反應性氣道疾病、慢性阻塞性肺病(COPD或肺氣腫)、氧過多、高壓氧效應、香煙煙霧吸入效應、環(huán)境氧化劑污染物效應、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、支氣管肺發(fā)育不良、礦物塵肺、阿霉素毒性、博來霉素毒性、百草枯和其它殺蟲劑毒性、化學性肺炎、特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化、感染性肺炎(包括真菌)、結(jié)節(jié)病、石棉沉著病、肺癌(小細胞和大細胞)、炭疽感染、炭疽毒素接觸；腎高血壓性腎病、終末期腎病、糖尿病性腎病、感染性腎小球腎炎、腎病綜合征、變應性腎小球腎炎、I-IV型超敏反應、腎同種移植排斥、腎炎性抗腎小球基底膜疾病、重金屬腎毒性、藥物誘導的(包括氨基糖苷、速尿和非甾體抗炎藥)腎毒性、橫紋肌溶解、腎癌；肝四氯化碳肝損傷、內(nèi)毒素和脂多糖肝損傷、慢性病毒感染(包括肝炎感染)、感染性肝炎(非病毒性病因)、血色素沉著、肝豆狀核變性病、對乙酰氨基酚過量、充血性心衰伴肝充血、肝硬化(包括酒精性、病毒性和特發(fā)性病因)、肝細胞癌、肝轉(zhuǎn)移瘤；胃腸炎性腸病(包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和腸易激綜合征)、結(jié)腸癌、息肉病、感染性憩室炎、中毒性巨結(jié)腸、胃炎(包括幽門螺桿菌感染)、胃癌、食管炎(包括巴瑞特氏食道癥)、胃食管反流疾病(GERD)、惠普爾病、膽石病、胰腺炎、血β-脂蛋白缺乏癥、感染性胃腸炎、痢疾、非甾體抗炎藥誘導的毒性；造血/血液Pb(鉛)中毒、藥物誘導的骨髓抑制、原卟啉光氧化、淋巴瘤、白血病、卟啉癥、寄生蟲感染(包括瘧疾)、鐮狀細胞性貧血、地中海貧血、蠶豆病、惡性貧血、范康尼氏貧血、感染后貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫缺陷綜合征(AIDS)；泌尿生殖感染性前列腺炎、前列腺癌、良性前列腺肥大(BPH)、尿道炎、睪丸炎、睪丸扭轉(zhuǎn)、子宮頸炎、宮頸癌、卵巢癌、子宮癌、陰道炎、陰道痙攣；肌肉骨骼骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、肌腱炎、肌營養(yǎng)不良、退化性椎間盤疾病、退化性關(guān)節(jié)疾病、運動誘導的骨胳肌損傷、腕管綜合征、格林-巴利綜合征、佩吉特骨病、強直性脊椎炎、異位骨形成；和體被日照射損傷(包括曬斑)、熱損傷、化學和接觸性皮膚炎(包括漆樹屬皮炎)、牛皮癬、布盧姆氏綜合征、粘膜白斑病(特別是口)、感染性皮炎、卡波濟氏肉瘤。
第二類是多器官病癥，其病理已在某些方面令人信服地與自由基和非自由基損傷相關(guān)聯(lián)衰老(包括與年齡相關(guān)的免疫缺陷和過早衰老疾病)、癌癥、心血管疾病、腦血管疾病、輻射損傷、酒精介導的損害(包括韋-科綜合征)、局部缺血-再灌注損害、炎性和自身免疫疾病、藥物毒性、淀粉樣疾病、超負荷綜合征(鐵、銅等)、多系統(tǒng)器官衰竭和內(nèi)毒素血癥/膿毒病。
可以用類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物治療的疾病可以包括但不限于心血管炎癥、丙型肝炎感染、癌(肝細胞癌和前列腺)、黃斑變性、類風濕性關(guān)節(jié)炎、中風、阿爾茨海默氏病，和/或骨關(guān)節(jié)炎。在一個實施方案中，給治療對象施用水溶性類胡蘿卜素類似物可以抑制和/或改善治療對象再灌注損傷的發(fā)生。在某些實施方案中，可以給治療對象單獨或與其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物組合來施用水溶性和其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物。可以通過給治療對象施用治療量的水溶性和/或其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物來抑制或改善正在經(jīng)歷或已經(jīng)歷或傾向于經(jīng)歷心肌梗塞、中風、外周血管疾病、靜脈或動脈閉塞、器官移植、冠狀動脈分流移植手術(shù)、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)和心血管驟停和/或死亡的人類治療對象發(fā)生再灌注損傷。
“水溶性”類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物是可以在水溶液中單獨或與賦形劑一起配制的那些類似物。水溶性類胡蘿卜素類似物可以包括形成分子自裝配體的那些化合物和合成衍生物，它可能更恰當?shù)乇环Q為“水可分散性”類胡蘿卜素類似物。水溶性和“水可分散性”類胡蘿卜素類似物可能在本發(fā)明某些方面是優(yōu)選實施方案。
在一個實施方案中，給治療對象施用水溶性類胡蘿卜素類似物可以抑制和/或改善與心律失常有關(guān)的某些類型的心血管疾病。在某些實施方案中，可以給治療對象單獨或與其它類胡蘿卜素類似物組合來施用水溶性類胡蘿卜素類似物。類胡蘿卜素類似物可能有助于保持心臟組織的電穩(wěn)定性。對心臟組織電穩(wěn)定性保持的幫助可以抑制和/或改善某些類型的心血管疾病，特別包括可歸因于致命性心律失常的心源性猝死。
在一個實施方案中，給治療對象施用水溶性類胡蘿卜素類似物可以抑制和/或改善治療對象肝臟疾病的發(fā)生。在某些實施方案中，可以給治療對象單獨或與其它類胡蘿卜素類似物組合來施用水溶性類胡蘿卜素類似物。所述肝臟疾病可以是慢性肝臟疾病，例如丙型肝炎感染。
在一個實施方案中，給治療對象施用水溶性類胡蘿卜素類似物可以抑制和/或改善初始、轉(zhuǎn)化和/或癌細胞的增殖和繁殖。在某些實施方案中，可以給治療對象單獨或與其它類胡蘿卜素類似物組合來施用水溶性類胡蘿卜素類似物。類胡蘿卜素類似物可以抑制致癌物引發(fā)細胞的增殖速率。類胡蘿卜素類似物可以增加連接蛋白43表達。連接蛋白43表達的增加可以增加、保持或恢復間隙連接細胞間通訊，從而抑制致癌物引發(fā)細胞的生長。
實施方案還可涉及給該治療對象施用包含類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的組合的藥物組合物。一種可注射的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物-蝦青素的組合物可特別用于本文所述的治療方法。在另一個實施方案中，將可注射的蝦青素結(jié)構(gòu)類似物與另一種蝦青素結(jié)構(gòu)類似物和/或其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物一起給藥，或者與其它促進期望目的的抗氧化劑和/或賦形劑一起配制給藥。在某些實施方案中，一種或多種蝦青素結(jié)構(gòu)類似物是水溶性的。
在一個實施方案中，包含類胡蘿卜素的化合物可以具有通式結(jié)構(gòu)(I)
各個R3可以獨立地為氫或甲基。R1和R2可以獨立地為H、具有一個或多個取代基的無環(huán)烯烴或包含一個或多個取代基的環(huán)。在某些實施方案中，取代基可以至少部分親水。這些類胡蘿卜素衍生物可以用于藥物組合物。在一個實施方案中，包括通式結(jié)構(gòu)(I)的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的藥物組合物可以用于治療再灌注損傷。
本文所用的術(shù)語“二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物”、″dAST″、″Cardax″、″CardaxTM″、″rac″和“蝦青素二琥珀酸酯衍生物(ADD)”代表二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物用于不同立體異構(gòu)體和水性配方的不同命名法，并代表目前優(yōu)選但是例舉性的用于預期使用這種類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的實施方案。二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物(astaCOOH)是用于閃光光解研究以直接與非酯化的“外消旋”(即立體異構(gòu)體的混合物)蝦青素進行比較的質(zhì)子化形式的衍生物?！錍ardax-C″是二鈉鹽二琥珀酸酯二維生素C衍生物(衍生物XXIII)，用于超氧化物陰離子清除實驗，通過電子順磁共振(EPR)成像來測定。
附圖的簡要說明參照以下與附圖結(jié)合對目前優(yōu)選但只不過是例示性的本發(fā)明的實施方案所作的詳細說明將更為完全地理解以上的簡要說明和本發(fā)明方法和裝置的進一步的目標、特征和優(yōu)點。


圖1為在自然界中發(fā)現(xiàn)的幾種“母體”類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)的圖示；圖2描述用電子順磁共振(EPR)成像監(jiān)測的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物對活性氧種類超氧化物陰離子的作用；圖3描述用電子順磁共振(EPR)成像監(jiān)測的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/游離維生素C溶液對活性氧種類超氧化物陰離子的作用；
圖4描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物靜脈內(nèi)制劑(CardaxTM)預處理的雄性Sprague-Dawley大鼠中梗塞大小相對減小的圖示；圖5描述為當前研究合成的內(nèi)消旋蝦青素(3R，3’S-或3S，3’R-二羥基-β，β-胡蘿卜素-4，4′-二酮；dAST)的全反式(全-E)二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物的化學結(jié)構(gòu)(顯示為全-E二陰離子bolamphiphile)；圖6描述25℃下在乙醇中的dAST的紫外-可見吸收光譜(室長度1cm，c＝1.05×10-5M)。摩爾吸收系數(shù)示于括號內(nèi)。吸收光譜的第二衍生曲線表示近UV區(qū)的峰的確切位置和隱藏的主要譜帶的振動精細結(jié)構(gòu)；圖7描述Ringer緩沖液(pH 7.4，室長度1cm，c＝1.85×10-5M，t＝37℃)中的dAST的吸收光譜。顯示了摩爾吸收系數(shù)；圖8描述通過以低L/P比率用在Ringer緩沖液(pH 7.4)中的dAST滴定人血清白蛋白(HSA)而獲得的誘導的CD和UV/Vis光譜。HSA的濃度為1.6×10-4M，而加入配體為等份試樣的DMSO儲備溶液(室長度1cm，t＝37℃)。顯示了在不同L/P值下測定的曲線。插圖在溶液中總內(nèi)消旋類胡蘿卜素濃度的基礎(chǔ)上計算的誘導的CD和吸收譜帶的摩爾圓二色性吸收系數(shù)(Δε，以M-1cm-1為單位)和摩爾吸收系數(shù)(ε，以M-1cm-1為單位)；圖9描述通過用以上L/P比率為1的在Ringer緩沖液(pH 7.4)中的dAST滴定HSA而獲得的誘導的CD和UV/Vis光譜。HSA的濃度為2.3×10-4M，而加入的配體為等份試樣的DMSO儲備溶液(室長度1cm，t＝37℃)。顯示了L/P值為1.2、2.0、2.9、4.1、5.7和7.4時測定的曲線。CD強度隨配體濃度平行地增加；圖10描述通過用以上L/P比率為1的在0.1M pH 7.4磷酸鹽緩沖液中的dAST滴定HSA而獲得的誘導的CD和UV/Vis光譜。HSA的濃度為2.2×10-4M，而加入的配體為等份試樣的DMSO儲備溶液(室長度1cm，t＝37℃)。顯示了L/P值為1.2、2.0、2.9、4.1、5.7、9.0、10.6和13.1時測定的曲線。CD強度隨配體濃度平行地增加；圖11描述關(guān)于兩種內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子的右手性排列的例示，對于它們激子相互作用在CD光譜中產(chǎn)生長波正和短波負卡滕效應?；疑肿游挥诩埰矫娴暮竺妫粓D12描述(上圖)在37℃下在0.1M pH 7.4磷酸鹽緩沖液中測定的dAST導致的HAS的熒光猝滅。HSA和配體的最初和最終濃度分別在4.2×10-6M-4.0×10-6M和1.3×10-6M-1.4×10-5M之間變化。在曲線上標注L/P比率。(下圖)單獨的DMSO對HSA固有熒光的影響。實驗條件如正文；圖13描述脂肪酸-游離HSA的X-射線晶體結(jié)構(gòu)。顯示了HSA的亞結(jié)構(gòu)域和兩個主要藥物結(jié)合位點。虛線表示域間裂隙的空間尺寸，而星號表示Trp214的位置。dAST分子的3和3′手性碳原子之間的原子間距離為28；圖14描述二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物(圖注中的″rac″)誘導鼠胚胎成纖維細胞(10T1/2)中的功能性間隙連接通訊。如正文所述將融合培養(yǎng)物處理4天，然后測定轉(zhuǎn)移熒光染料熒光黃的能力。箭頭表示注射熒光黃的細胞；圖15A描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的混合物處理的細胞中的連接蛋白43蛋白表達，通過定量Western印跡分析來評價。認為上面的條帶代表裝配為間隙連接的磷酸化形式的蛋白；下面的條帶代表未裝配的蛋白(Saez，1998)。泳道11∶2乙醇(EtOH)/H2O(僅僅溶劑的陰性對照)；泳道2TTNPB，一種合成的類維生素A，在丙酮中，濃度10-8M(陽性對照)；泳道3乙酸視黃酯，在丙酮中，濃度10-5M(陽性對照)；泳道4二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物(″rac″)，濃度10-5M，在1∶2EtOH/H2O配方中遞送；泳道53R，3′R二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物，濃度10-5M，在1∶2 EtOH/H2O配方中遞送；泳道63S，3′S二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物，濃度10-5M，在1∶2 EtOH/H2O配方中遞送；和泳道7內(nèi)消旋二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物，濃度10-5M，在1∶2 EtOH/H2O配方中遞送；圖15B描述用考馬斯藍染色的免疫印跡，表明所有條帶的相同蛋白載量。這證明免疫標記的差別不是人為地由裝載和/或轉(zhuǎn)移至膜上的總蛋白的變異性導致的；圖15C描述與陽性對照和僅用溶劑處理的對照相比二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物對連接蛋白43蛋白表達的相對誘導水平的數(shù)字分析。泳道如圖15A。將折疊誘導相對于1∶2 EtOH/H2O處理的陰性對照中對照水平的Cx43表達進行歸一化，將其設(shè)定為任意單位＝1.0；圖15D描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物處理的鼠胚胎成纖維細胞(10T1/2)中Cx43蛋白表達的劑量-反應曲線，它由定量Western印跡分析法來評價。上面的條帶認為代表裝配為間隙連接的磷酸化形式的蛋白；下面的條帶代表未裝配的蛋白。泳道11∶2 EtOH/H2O(僅溶劑的陰性對照)。泳道2TTNPB，在丙酮中，濃度10-8M(陽性對照)。泳道3二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(″rac″)，濃度10-5M，在1∶2的EtOH/H2O配方中遞送。泳道4二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(″rac″)，濃度5×10-6M，在1∶2的EtOH/H2O配方中遞送。泳道5二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(″rac″)，濃度10-6M，在1∶2 EtOH/H2O配方中遞送；圖15E描述與陽性對照和僅用溶劑處理的對照相比二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物對連接蛋白43蛋白表達的相對誘導水平的數(shù)字分析。泳道如圖15D。將折疊誘導相對于1∶2EtOH/H2O處理的對照中對照水平的Cx43表達進行歸一化，將其設(shè)定為任意單位＝1.0；圖16描述二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物增加Cx43免疫反應性連接斑塊的裝配。如上述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物將10T1/2細胞融合培養(yǎng)物處理4天(1)濃度10-5M，在1∶2 EtOH/H2O中；(2)用1∶2 EtOH/H2O作為僅溶劑的陰性對照；或(3)TTNPB，濃度10-8M，在四氫呋喃(THF)溶劑中，作為陽性對照。如正文所述用Cx43抗體將細胞免疫染色。A組二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物，濃度10-5M，在1∶2 EtOH/H2O中；C組1∶2 EtOH/H2O，作為溶劑對照；E組TTNPB，濃度為10-8M，在四氫呋喃(THF)溶劑中，作為陽性對照。B、D和F組分別對A、C和E組進行數(shù)字分析，表明固定設(shè)置的閾值以上的像素是熒光強度陽性。黃色箭頭免疫反應性連接斑塊；紅色箭頭細胞核位置。注意到用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物處理的培養(yǎng)物中連接免疫反應性斑塊的數(shù)量和強度比僅用溶劑處理的對照組大。C和D組所示的連接斑塊代表對照組中罕見的斑塊；這些培養(yǎng)物中的大部分細胞為Cx43染色陰性；圖17描述為目前研究合成的蝦青素的二鈉二琥珀酸二酯的4種立體異構(gòu)體(顯示為全-E幾何異構(gòu)體)；將立體異構(gòu)體的混合物或單獨的立體異構(gòu)體用于分別的應用(見圖注)；圖18描述由DEPMPO自旋阱檢測的在純水性配方中的蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物對超氧化物陰離子信號的平均抑制百分率。混合物＝立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物[1∶2∶1比率的3S，3′S，內(nèi)消旋(3R，3′S和3′R，3S)，3R，3′R]。將水性配方中的各衍生物相對于不加入化合物時檢測的對照EPR信號(根據(jù)慣例設(shè)為0％抑制)進行標準化。注意到水中3S，3′S制劑缺乏對超氧化物的抑制作用。在每種情況下，水性配方的效力小于在EtOH中的相應配方(圖19)；圖19描述由DEPMPO自旋阱檢測的在乙醇配方中的蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物對超氧化物陰離子信號的平均抑制百分率?；旌衔铮搅Ⅲw異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物[1∶2∶1比率的3S，3′S，內(nèi)消旋(3R，3′S和3′R，3S)，3R，3′R]?；旌衔铩?nèi)消旋和3R，3′R儲備溶液為1∶2乙醇/水(33％EtOH)；3S，3′S儲備溶液為1∶1乙醇/水(50％EtOH)。在分離的嗜中性白細胞試驗中最終的EtOH濃度分別為0.3％和0.5％。將在乙醇配方中的各衍生物相對于不加入化合物時檢測的對照EPR信號(根據(jù)慣例設(shè)為0％抑制)進行標準化；圖20描述由DEPMPO自旋阱檢測的蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物的立體異構(gòu)體的混合物對超氧化物陰離子信號的平均抑制百分率(在1∶2 EtOH/水配方中測試；在分離的嗜中性白細胞試驗中最終EtOH濃度0.3％)。隨著衍生物的濃度增加，抑制作用以非線性、依賴于劑量的方式增加。在3mM下，觀察到對超氧化物陰離子信號接近完全的抑制(95.0％抑制)；圖21描述由DEPMPO自旋阱檢測的鹽酸鹽二賴氨酸蝦青素衍生物對超氧化物陰離子信號的平均抑制百分率。此衍生物高度水溶(＞50mg/ml)，且在此測定中優(yōu)異的自由基猝滅能力不需要助溶劑。將此衍生物的超氧化物陰離子抑制作用與圖20關(guān)于在純水性配方中形成超分子裝配體的衍生物所示的抑制作用進行比較；圖22描述黑小鼠單劑經(jīng)口管飼之后非酯化的游離蝦青素的血漿濃度對時間的標準圖。在血漿中僅檢測到非酯化的游離蝦青素，證明類胡蘿卜素類似物在哺乳動物腸中完全脫酯化，如先前所述；圖23描述黑小鼠單劑經(jīng)口管飼之后非酯化的游離蝦青素的肝濃度對時間的標準圖。在肝中僅檢測到非酯化的游離蝦青素，也證明(參見關(guān)于血漿的圖22)類胡蘿卜素類似物在哺乳動物腸中完全脫酯化，如先前所述。在每個時間點，非酯化的游離蝦青素的肝水平大于血漿中觀察到的水平，這是一個新的發(fā)現(xiàn)，表明游離類胡蘿卜素在此研究所用的新乳劑載體中的實體器官遞送得到大大改善；圖24描述通過經(jīng)口管飼500mg/kg的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物對脂多糖(LPS)誘導的小鼠肝損傷的影響(通過血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶或ALT升高來測定)。各組測試3只動物。對照動物接受單獨的鹽水(假處理的對照；圖的左側(cè)部分)或不含二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的乳劑(載體對照)。假處理的動物接受新衍生物表現(xiàn)出對ALT的背景水平無影響；接受含500mg/kg的新衍生物的口服乳劑的小鼠表現(xiàn)出ALT誘導水平降低，表明在LPS損害之后抗肝壞死的保護作用；圖25描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物靜脈內(nèi)配方(CardaxTM)預處理的雄性Sprague-Dawley大鼠中梗塞大小相對減小的圖示?？煽吹絼┝亢凸Ｈ笮p小之間的線性關(guān)系。梗塞大小減小水平接近對局部缺血預處理觀察到的結(jié)果；圖26描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物靜脈內(nèi)配方(CardaxTM)預處理的雄性Sprague-Dawley大鼠中梗塞大小的相對減小的圖示；圖27描述使用閃光光解得到的二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物(astaCOOH)的瞬間吸收vs.延遲。實驗在乙腈(MeCN)中使用nitronaftalin(NN)作為光敏劑來進行。所得的光譜證明二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物表現(xiàn)與作為自由基猝滅劑的非酯化的游離外消旋蝦青素相同(形成類胡蘿卜素自由基陽離子)，鑒定該衍生物為在口服和靜脈遞送之后在體內(nèi)產(chǎn)生非酯化的游離蝦青素的活性“軟藥物”；圖28描述使用閃光光解得到的參照化合物非酯化的游離外消旋蝦青素(asta)]的瞬間吸收vs.延遲。實驗在乙腈(MeCN)中使用nitronaftalin(NN)作為光敏劑來進行。所得的光譜幾乎可疊加在二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物(astaCOOH)所得的光譜上，表明兩種化合物具有相同的自由基-陽離子形成性能；圖29描述用抗連接蛋白43抗體進行聚丙烯酰胺凝膠Western印跡的圖示；圖30描述用抗連接蛋白43抗體，然后在Biorad成像儀上進行HRP化學發(fā)光而得到的Western印跡定量光密度圖像的圖示；圖31描述在服藥后96小時由陽性對照(TTNPB，有效的合成類維生素A)和受試化合物(二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物，在四種水和/或乙醇(EtOH)/水配方中H2O-10-5、H2O-10-6、H2O-10-7和EtOH/H2O-10-5)相對于無菌水對照(H2O)對連接蛋白43表達的相對折疊誘導的圖；圖32描述在給黑小鼠經(jīng)口管飼在乳劑載體中的500mg/kg二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(ADD)11天之后血漿和肝中非酯化的游離蝦青素的平均水平圖。所達到的血漿和肝中的峰值和谷值水平都＞200nM，其被認為在體內(nèi)對氧化應激和肝損傷有保護作用。在第11次服藥后6小時肝中所得的峰值水平為必需的保護水平的近9倍(1760nM)；圖33描述由DEPMPO自旋阱檢測的二鈉鹽二琥珀酸酯二維生素C衍生物[衍生物(XXIII)]對超氧化物陰離子信號的平均抑制百分率。當衍生物的濃度增加時，抑制作用以依賴于劑量的方式增加。在60μM下，觀察到對超氧化物陰離子信號接近完全的抑制作用。此衍生物水溶性也十分高，并無需助溶劑將其引入試驗中(見圖21)。該新衍生物在自由基猝滅效率方面與以1∶2與維生素C配制的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的配方相當(見圖3)，表明這種衍生物的活性、“軟藥物”性能。這種共同抗氧化劑(co-antioxidant)衍生物策略將相對自由基清除效力(如果與二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物相比)增加50倍；圖34描述非酯化的游離蝦青素(作為立體異構(gòu)體的全反式混合物)對MCA誘導的小鼠胚胎成纖維細胞(10T1/2)的腫瘤轉(zhuǎn)化的影響。非酯化的游離蝦青素在口服和靜脈內(nèi)施用新類胡蘿卜素衍生物之后在體內(nèi)快速產(chǎn)生，并在血液和實體器官中檢測到高濃度(見圖22和23)。非酯化的游離青蝦素表現(xiàn)出腫瘤轉(zhuǎn)化降低水平(100％)超過類似濃度的在本測定中測試的任何其它類胡蘿卜素，證明此化合物對癌癥化學預防應用的效用增加；圖35描述蝦青素處理的平皿與對照平皿的比較(見關(guān)于圖34的描述)；圖36描述蝦青素(作為立體異構(gòu)體混合物)與前面測試的類胡蘿卜素在此實驗室用此試驗所進行的比較(見關(guān)于圖34的描述)；圖37描述用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物靜脈內(nèi)配方(CardaxTM)預處理的雄性新西蘭兔中梗塞大小的相對減小的圖示。當與在嚙齒動物中以相同劑量和相同預處理方案觀察到的梗塞大小減小進行比較時，在兔模型中觀察到梗塞大小的減小增加38％；和圖38描述用二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物靜脈內(nèi)配方(CardaxTM)預處理的雄性新西蘭兔中血漿C-反應蛋白(CRP)的循環(huán)水平的相對減小的圖示。通過皮下注射1％巴豆油來刺激發(fā)生急性期反應的對照兔(單獨鹽水注射)表現(xiàn)出相對于基線(在再灌注時所取的靜脈樣品)循環(huán)CRP水平平均增加23.5％。相比之下，CardaxTM處理的動物(50mg/kg)表現(xiàn)出相對于基線循環(huán)CRP水平平均降低(-15.7％)，表明CardaxTM的有效抗炎作用。
詳述“母體”類胡蘿卜素可以總體上指用作類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物合成的起始骨架的天然化合物。類胡蘿卜素衍生物可以衍生自天然存在的類胡蘿卜素。例如，天然存在的類胡蘿卜素可以包括番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素。
類胡蘿卜素是一組主要由植物、酵母和微藻類產(chǎn)生的天然色素。目前相關(guān)化合物家族的數(shù)量超過600種已有描述的成員，不包括Z和E異構(gòu)體。在人血清或組織中已發(fā)現(xiàn)50種。人和其它動物不能從頭合成類胡蘿卜素，必須從其飲食中獲得它們。所有的類胡蘿卜素具有共同的化學特征，例如聚類異戊二烯結(jié)構(gòu)、形成發(fā)色團的長多烯鏈和中央雙鍵周圍接近對稱。兩個C20香葉草基香葉草基二磷酸酯分子的尾至尾連接產(chǎn)生母體C40碳骨架。不含氧化官能團的類胡蘿卜素稱為“胡蘿卜素”，反映它們的烴屬性；氧化胡蘿卜素已知為“葉黃素”。在分子的一端或兩端的環(huán)化產(chǎn)生7個確定的末端基團(代表性結(jié)構(gòu)如圖1所示)。
證實的自然界中類胡蘿卜素的功能包括集光、光保護以及分別在顯微生物、哺乳動物和鳥類中的保護性和與性有關(guān)的著色。較近的觀察是類胡蘿卜素抗人與年齡有關(guān)的疾病的保護作用，作為細胞內(nèi)復雜抗氧化劑網(wǎng)絡(luò)的一部分。這種作用由各類胡蘿卜素的生理化學性能和它們在生物體內(nèi)的功能之間的緊密關(guān)系所賦予。分子中心部分的交替雙鍵和單鍵的長系統(tǒng)(在多烯鏈全長上使π-軌道電子離域)賦予類胡蘿卜素獨特的分子形狀、化學反應性和光吸收性能。此外，環(huán)繞C＝C雙鍵的異構(gòu)產(chǎn)生可以分離為單獨化合物(已知為Z(″順式″)和E(″反式″)或幾何異構(gòu)體)的明顯不同的分子結(jié)構(gòu)。在大于600種所述的類胡蘿卜素中，在自然界中有時見到甚至更多數(shù)目的理論上可能的單Z和多Z異構(gòu)體。Z雙鍵的存在在鄰近的氫原子和/或甲基之間制造更大的空間位阻，因此Z異構(gòu)體與對應的全-E形式相比通常熱力學穩(wěn)定性較小，而化學反應性更大。全-E構(gòu)型是延伸的、線性和剛性分子。相比之下，Z異構(gòu)體不是簡單的線性分子(所謂的“彎曲鏈”異構(gòu)體)。多烯鏈中任何Z的存在產(chǎn)生彎曲鏈分子。Z-異構(gòu)體結(jié)晶或聚集的趨勢比全-E小得多，而Z異構(gòu)體比其全-E對應物更容易在體內(nèi)溶解、吸收和轉(zhuǎn)運。這對于哺乳動物的腸內(nèi)(例如口服)和腸胃外(例如靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、肌內(nèi)和皮下)服藥而言具有重要意義。
具有手性中心的類胡蘿卜素可以作為R(rectus)或S(sinister)構(gòu)型存在。例如，蝦青素(在3和3′碳具有2個手性中心)可以作為4種可能的立體異構(gòu)體存在3S，3′S；3R，3′S和3S，3′R(內(nèi)消旋形式)；或3R，3′R。各個立體異構(gòu)體的相對比例可能隨天然來源而變。例如，雨生紅球藻(Haematococcus pluvialis)微藻粉為99％3S，3′S蝦青素，并且可能是占優(yōu)勢的人進化蝦青素來源。磷蝦(3R，3′R)和酵母來源與微藻來源相比產(chǎn)生不同的立體異構(gòu)體組合物。合成蝦青素，由大制造商如Hoffmann-LaRoche AG、Buckton Scott(USA)或BASF AG生產(chǎn)，以非酯化的游離蝦青素的1∶2∶1立體異構(gòu)體混合物[3S，3′S；3R，3′S，3′R，3S(內(nèi)消旋)；3R，3′R]的確定的幾何異構(gòu)體混合物提供。來自鮭科魚的天然來源蝦青素主要是單一立體異構(gòu)體(3S，3′S)，但包含幾何異構(gòu)體的混合物。來自天然來源雨生紅球藻(Haematococcuspluvialis)的蝦青素可以包含近50％Z異構(gòu)體。如上述，Z構(gòu)象改變可能在類胡蘿卜素分子的兩部分之間產(chǎn)生更高的位阻，使它穩(wěn)定性降低，反應性增大，并在低氧張力下對反應性更敏感。在這種情況下，相對于全-E形式，Z形式(1)可能首先降解；(2)可能更好地抑制活性氧種類如超氧化物陰離子攻擊細胞；和(3)可能優(yōu)先減緩自由基形成?？傊琙形式可能最初在熱力學上有利以保護細胞和細胞膜的親脂部分免受破壞。但是，重要的是注意到全-E形式的蝦青素，與β-胡蘿卜素不同的是，以其在β-紫羅酮環(huán)上二羥基-和二酮取代的形式，保持顯著的口服生物利用度和抗氧化能力，并已證明其在大部分研究中具有超過β-胡蘿卜素的增大的效力。還推斷全-E形式的蝦青素在體內(nèi)對細胞具有最大的膜穩(wěn)定作用。因此，可能在天然和合成的立體異構(gòu)體的混合物中全-E形式的蝦青素在抗氧化機理中也非常重要，并可能是最適于特定藥物制劑的形式。
類胡蘿卜素，特別是蝦青素的抗氧化機理，包括單線態(tài)氧猝滅、直接自由基清除和脂質(zhì)過氧化鏈斷裂。類胡蘿卜素的多烯鏈吸收單線態(tài)氧的激發(fā)能，通過沿鏈發(fā)生離域而有效地穩(wěn)定能量轉(zhuǎn)移，并將能量作為熱消散至局部環(huán)境。從三重線態(tài)葉綠素(在植物中)或其它卟啉和原卟啉(在哺乳動物中)至類胡蘿卜素的能量轉(zhuǎn)移比到氧以形成高度反應性和破壞性單線態(tài)氧(1O2)的可供選擇的能量轉(zhuǎn)移更容易發(fā)生。類胡蘿卜素還可以接受來自單線態(tài)氧的可能在原位形成的激發(fā)能，并再次將能量作為熱消散至局部環(huán)境。這種單線態(tài)氧猝滅能力在心臟局部缺血、黃斑變性、卟啉癥和單線態(tài)氧的產(chǎn)生具有破壞作用的其它病癥中具有重要的意義。在物理猝滅機理中，類胡蘿卜素分子可以再生(最常見)或喪失。類胡蘿卜素還是優(yōu)異的鏈斷裂抗氧化劑，這是一種在抑制脂質(zhì)過氧化中重要的機理。蝦青素可以給不穩(wěn)定的多不飽和脂肪酸(PUFA)自由基貢獻氫(H)，阻止鏈反應。過氧自由基還可以通過加到類胡蘿卜素的多烯鏈而成為脂質(zhì)過氧化物鏈終止的直接原因。適宜劑量的蝦青素已顯示出可完全抑制脂質(zhì)體系統(tǒng)中的過氧自由基鏈反應。蝦青素與維生素E共享這種單線態(tài)氧猝滅和直接自由基清除的雙重抗氧化防御系統(tǒng)，并在大部分情況(特別在體內(nèi)低氧張力下)下優(yōu)于維生素E作為自由基清除劑和單線態(tài)氧物理猝滅劑。
類胡蘿卜素，特別是蝦青素，是有效的直接自由基清除劑和單線態(tài)氧猝滅劑，具有用于抑制或改善再灌注損傷的治療劑的所有期望的性質(zhì)。合成具有“軟藥物”性能(即衍生形式的活性)，具有與前體部分連接的生理學相關(guān)的可裂解鍵的新類胡蘿卜素衍生物可以在血漿和實體器官中產(chǎn)生顯著水平的游離類胡蘿卜素。在非酯化的游離蝦青素的情況下，這是一個特別有用的實施方案(以下非酯化的游離蝦青素特有的特征)●天然形式脂溶；可以改造以變得更具水溶性
●分子量為597道爾頓[大?。?0道爾頓(Da)，容易穿過血腦屏障或BBB]●類胡蘿卜素特征性的長多烯鏈，在單線態(tài)氧猝滅和脂質(zhì)過氧化鏈斷裂中有效●對哺乳動物無維生素A原活性(消除人維生素A過多和類維生素A毒性的顧慮)。
作為有效的單線態(tài)氧猝滅劑和直接自由基清除劑(特別是超氧化物陰離子)的抗氧化劑的給藥應該通過影響纖維發(fā)生途徑早期肝星形細胞的活化來限制肝纖維化和進展成肝硬化。因此，通過施用有效的抗氧化劑來降低ROS水平可能在防止HSC和枯否細胞活化方面是關(guān)鍵。這種保護性抗氧化作用似乎擴展至潛在治療性抗氧化劑的范圍，包括水溶性(例如維生素C、谷胱甘肽、白藜蘆醇)和親脂性(例如維生素E、β-胡蘿卜素、蝦青素)活性劑。因此，水溶性和親脂性活性劑合成組合的共同抗氧化劑衍生物策略是特別有用的實施方案。
一般將維生素E看作參照抗氧化劑。與維生素E相比，類胡蘿卜素更有效地猝滅在均勻的有機溶劑和脂質(zhì)體系統(tǒng)中的單線態(tài)氧。它們在脂質(zhì)體系統(tǒng)中也是更好的鏈斷裂抗氧化劑。已證實它們在體內(nèi)的功效和效力增加。它們在低氧張力和低濃度下特別有效，這使它們成為局部缺血是組織損傷和病理的重要部分的疾病狀況中特別有效的藥劑。這些類胡蘿卜素在口服之后還具有對肝的天然向性。因此，類胡蘿卜素的治療給藥應該在限制纖維變性方面提供比維生素E更大的益處。
與使用某些類胡蘿卜素和類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物有關(guān)的問題包括(1)在天然和合成來源中提供的復雜的異構(gòu)體混合物，包括非類胡蘿卜素污染物，導致諸如FDA的機構(gòu)所要求的安全性和效力試驗高代價的增加；(2)對治療對象給藥后生物利用度有限；和(3)區(qū)別誘導細胞色素P450酶(這種酶家族表現(xiàn)出種特異性差別，在將動物研究外推到人研究時必須要考慮)。
在一個實施方案中，母體類胡蘿卜素可以具有任何天然存在的類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)?？梢杂米髂阁w化合物的天然存在的類胡蘿卜素的某些實例如圖1所示。
在某些實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物可以包括具有結(jié)構(gòu)(I)的化合物 各個R3可以獨立地為氫、甲基、烷基、鏈烯基或芳族取代基。R1和R2可以獨立地為H、具有至少一個取代基的無環(huán)烯烴或者具有通式結(jié)構(gòu)(II)的具有至少一個取代基的環(huán) 其中n可以介于4-10個碳原子之間。W為所述取代基。取代基可以至少部分親水。親水取代基可以有助于增加類胡蘿卜素衍生物的水溶性。在某些實施方案中，類胡蘿卜素衍生物可以至少部分水溶。所述環(huán)可以包括至少一個手性中心。所述無環(huán)烯烴可以包括至少一個手性中心。所述環(huán)可以包括至少一個不飽和度。在某些環(huán)實施方案中，所述的環(huán)可以是芳族的。所述環(huán)可以包括取代基。取代基可以是親水性的。在某些實施方案中，所述環(huán)可以包括，例如(a)、(b)或(c) 或 在某些實施方案中，取代基可以包括，例如羧酸、氨基酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
在某些實施方案中，各個取代基-W可以獨立地包括-XR。各個X可以獨立地包括O、N或S。在某些實施方案中，各個取代基-W可以獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。在某些取代基實施方案中，取代基可以包括，例如(d)-(pp)

其中各個R例如獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。在某些實施方案中，取代基可以包括(d)-(pp)的任何組合。在某些實施方案中，帶負電的取代基可以包括堿金屬，一種金屬或不同堿金屬的組合(在有超過一個帶負電的取代基的實施方案中)，作為抗衡離子。堿金屬可以包括但不限于鈉、鉀和/或鋰。
雖然以上的結(jié)構(gòu)和隨后的結(jié)構(gòu)描述E構(gòu)型的烯烴，但這不應被看作是限定。本文所討論的化合物可以包括烯烴為Z構(gòu)型的實施方案或者包括在相同的分子內(nèi)Z和E構(gòu)型組合的烯烴。本文所述的化合物可以在Z和E構(gòu)型之間天然轉(zhuǎn)化，和/或在兩種構(gòu)型之間平衡存在。
在一個實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(III)的類胡蘿卜素衍生物 各個Y可以獨立地為O或H2。各個R可以獨立地為OR1或R1。
各個R1可以獨立地為-烷基-NR23+、-芳族-NR23+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基、肽、聚賴氨酸或芳基。此外，各個R2可以獨立地為H、烷基或芳基。所述類胡蘿卜素衍生物可以包括至少一個手性中心。
在一個特定的實施方案中，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(IV) 在一個特定的實施方案中，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(V)
在一個實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(VI)的類胡蘿卜素衍生物 各個Y可以獨立地為O或H2。各個R可以獨立地為H、烷基或芳基。所述類胡蘿卜素衍生物可以包括至少一個手性中心。
在一個特定的實施方案中，Y可以為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(VII) 在Y為O的一個特定的實施方案中，類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(VIII) 在一個實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(IX)的類胡蘿卜素衍生物 各個Y可以獨立地為O或H2。各個R’可以為CH2。n可以為1-9。各個X可以獨立地為 或 各個R可以獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。各個R1可以獨立地為H、烷基或芳基。所述類胡蘿卜素衍生物可以包括至少一個手性中心。
在Y為H2的一個特定的實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(X) 在Y為O的一個特定的實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(XI) 在一個實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(XII)的類胡蘿卜素衍生物， 各個Y可以獨立地為O或H2。所述類胡蘿卜素衍生物可以包括至少一個手性中心。
在一個特定的實施方案中，Y可以為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(XIII) 在Y為O的一個特定的實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)(XIV) 在某些實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(XV)的二琥珀酸酯類胡蘿卜素衍生物 在某些實施方案中，化合物可以包括具有結(jié)構(gòu)(XVI)的二鈉鹽二琥珀酸酯類胡蘿卜素衍生物
在某些實施方案中，化合物可以包括具有與類胡蘿卜素偶聯(lián)的共同抗氧化劑(co-antioxidant)，特別是一個或多個維生素C類似物(即L抗壞血酸)的類胡蘿卜素衍生物。某些實施方案可以包括與類胡蘿卜素偶聯(lián)的維生素C的羧酸和/或羧酸酯衍生物(例如結(jié)構(gòu)(XVII))。
Carbohydr.Res.1978，60，251-258公開如EQN.5所述抗壞血酸C-6位的氧化 某些實施方案可以包括與類胡蘿卜素偶聯(lián)的維生素C和/或維生素C類似物。維生素C可以通過醚鍵與類胡蘿卜素偶聯(lián)(例如結(jié)構(gòu)(XVIII))。
某些實施方案可以包括與類胡蘿卜素偶聯(lián)的維生素C二琥珀酸酯類似物(例如結(jié)構(gòu)(XIX)。
某些實施方案可以包括類胡蘿卜素和/或類胡蘿卜素衍生物與共同抗氧化劑，特別是維生素C和/或維生素C類似物組合的溶液或藥物制劑。藥物制劑可以包括大約2∶1比率的維生素C和類胡蘿卜素。
在某些實施方案中，可以將類胡蘿卜素(例如蝦青素)與維生素C偶聯(lián)形成醚鍵。醚鍵可以用如EQN.1所述的Mitsunobu反應來形成。
在某些實施方案中，維生素C可以被選擇性酯化。維生素C可以在C-3位被選擇性酯化(例如EQN.2)。J.Org.Chem.2000，65，911-913公開用伯醇在未受保護的抗壞血酸的C-3位進行選擇性酯化。
在某些實施方案中，可以將類胡蘿卜素與維生素C偶聯(lián)?？梢栽贑-6，C-5二醇位置將維生素C偶聯(lián)到類胡蘿卜素，如EQNS.3和4所述，形成縮醛。
在某些實施方案中，可以用二羥乙酸接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.6所述。Tetrahedron 1989，22，6987-6998公開類似的縮醛形成
在某些實施方案中，可以用二羥乙酸接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.7所述。J.Med.Chem.1988，31，1363-1368公開二羥乙酸氯化物。
在某些實施方案中，可以用磷酸酯接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.8所述。Carbohydr.Res.1988，176，73-78公開L-抗壞血酸6-磷酸酯。
在某些實施方案中，可以用磷酸酯接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.9所述。Carbohydr.Res.1979，68，313-319公開維生素C的6-溴代衍生物。Carbohydr.Res.1988，176，73-78公開維生素C的6-溴代衍生物與磷酸酯的反應。

在某些實施方案中，可以用磷酸酯接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.10所述。J.Med Chem.2001，44，1749-1757和J.Med Chem.2001，44，3710-3720公開烯丙基氯衍生物和它與親核試劑，包括磷酸酯在弱堿性條件下的反應。
在某些實施方案中，可以用磷酸酯接頭將類胡蘿卜素偶聯(lián)到水溶性部分(例如維生素C)，如EQN.11所述?？梢杂貌荚谖词鼙Ｗo的抗壞血酸的C-3位進行選擇性酯化而將維生素C偶聯(lián)到類胡蘿卜素。
在某些實施方案中，化合物可以包括含有偶聯(lián)到類胡蘿卜素上的一個或多個氨基酸(例如賴氨酸)和/或氨基酸類似物(例如賴氨酸鹽酸鹽)的類胡蘿卜素衍生物[例如結(jié)構(gòu)(XX)]。
在某些實施方案中，類胡蘿卜素衍生物可以包括



在一個實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物可以由天然存在的類胡蘿卜素合成。所述類胡蘿卜素可以包括圖1中所述的結(jié)構(gòu)2A-2E。在某些實施方案中，類胡蘿卜素衍生物可以由包含一個或多個醇取代基的天然存在的類胡蘿卜素合成。在其它實施方案中，所述類胡蘿卜素衍生物可以由包含一個或多個醇取代基的天然存在的類胡蘿卜素的衍生物合成。所述合成可以產(chǎn)生單一立體異構(gòu)體。所述合成可以產(chǎn)生類胡蘿卜素衍生物的單一幾何異構(gòu)體。所述合成/合成流程可以包括在母體類胡蘿卜素上進行的任何在先純化或分離步驟。實例可以包括但不限于3S，3′S全-E類胡蘿卜素衍生物，其中母體類胡蘿卜素為蝦青素。合成流程可以包括對類胡蘿卜素和/或取代基前體的不同官能團進行保護，然后脫保護。可以用堿將醇脫質(zhì)子。可以使脫質(zhì)子的醇與具有好的離去基團的取代基前體反應。所述的堿可以包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何非親核堿，例如二甲基氨基吡啶。脫質(zhì)子的醇可以用作親核試劑與取代基前體反應置換離去基團。離去基團可以包括但不限于Cl、Br、甲苯磺?；︿灞交酋；?、甲磺?；蛉谆酋；?。這些僅是可以使用的離去基團的幾個實例，還有更多是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知并且顯而易見的。在某些實施方案中，取決于所用的離去基團，可能甚至不必將醇脫質(zhì)子。在其它實例中，離去基團可以是內(nèi)在的，并可以隨后包括在類胡蘿卜素衍生物最終的結(jié)構(gòu)中，一個非限制性的實例可以包括酐或應變環(huán)醚。例如，可以使脫質(zhì)子的醇與琥珀酸酐反應。在一個實施方案中，可以進一步將蝦青素的二琥珀酸酯轉(zhuǎn)化成二鈉鹽。制備所述的某些特定實施方案的合成流程的實例在實施例部分作了描述。以下所述的實例是關(guān)于制備類胡蘿卜素衍生物的合成流程的一個一般性非限制性實例。
局部缺血-再灌注(I/R)損傷病理生理特征再灌注局部缺血心肌導致處于危險的組織發(fā)生明顯的細胞和局部改變，從而使由局部缺血侵害產(chǎn)生的損傷惡化。具體而言，再灌注后發(fā)生血管和微血管損傷、內(nèi)皮機能障礙、細胞壞死加速和粒細胞活化。
血管和微血管損傷由補體活化，循環(huán)和局部C-反應蛋白與暴露的細胞上的Clq和磷酸膽堿相互作用形成膜攻擊復合物(MAC)，然后發(fā)生細胞死亡和內(nèi)皮通透性增加，受影響的內(nèi)皮和活化的白細胞產(chǎn)生超氧化物陰離子(O2-)，微栓子、細胞因子釋放(特別是IL-6)，血小板活化伴隨IIbIIIa受體活化，然后釋放ADP和5-羥色胺而導致。然后發(fā)生內(nèi)皮機能障礙，隨后由機能障礙的內(nèi)皮產(chǎn)生超氧化物陰離子，進一步破壞受影響的內(nèi)皮，形成正反饋循環(huán)。已表明局部缺血-再灌注導致脈管系統(tǒng)的早期和嚴重損傷，從而進一步危害肌細胞存活。粒細胞活化也在再灌注期間發(fā)生。這種細胞系的活化和脫粒導致釋放髓過氧化物酶(MPO)、彈性蛋白酶、蛋白酶和氧衍生的自由基和非自由基種類(最重要的是在“呼吸爆發(fā)”之后的超氧化物陰離子、次氯酸鹽、單線態(tài)氧和過氧化氫)。氧衍生的自由基和非自由基(例如單線態(tài)氧)種類涉及許多與局部缺血和再灌注有關(guān)的損害，且已清楚地表明脂質(zhì)過氧化是再灌注的后果，如由硫代巴比妥酸活性物質(zhì)(TBARS)、丙二醛(MDA)或共軛二烯形成來測定。
冠狀血管內(nèi)皮和心肌本身局部缺血損傷創(chuàng)建有利于產(chǎn)生能夠損害組織的自由基和其它非自由基氧衍生種類的條件，其在此總稱為活性氧種類(″ROS″)。人的基于內(nèi)皮的黃嘌呤脫氫酶-黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)是超氧化物陰離子(O2-)的一個來源。人心肌缺乏這種酶系統(tǒng)。在健康組織中，90％的酶作為脫氫酶(D)形式存在；它在局部缺血組織中轉(zhuǎn)化成氧化酶(O)形式。(O)-形式，使用分子氧為電子受體，在冠脈內(nèi)皮中產(chǎn)生超氧化物陰離子O2-。從而可獲得超氧化物陰離子以在局部環(huán)境中制造其它組織損害。超氧化物陰離子本身不是生物系統(tǒng)中最具反應性或破壞性的自由基種類。但是，它是某些壽命較短和較長的、更具破壞性的自由基和/或ROS如羥基基團、過氧化氫、單線態(tài)氧和過氧自由基的來源。因此，可以認為它是I/R損傷中的“關(guān)鍵”基團。以下顯示了形成這些重要氧化劑的超氧化物自由基的生物反應(1)超氧化物陰離子可以接受單一電子(“一價還原”)，產(chǎn)生過氧化物(O2-2)。然后過氧化物偶聯(lián)2個質(zhì)子形成過氧化氫(H2O2)。H2O2容易通過細胞膜擴散，且不能容易地從細胞質(zhì)中排除，其中它可以與細胞組分反應或活化中心炎性級聯(lián)如核因子kappa-B(NF-kappa-B)，所述級聯(lián)也涉及I/R損傷中的其它炎性損害。
(2)超氧化物陰離子一般自身發(fā)生反應產(chǎn)生過氧化氫和氧(“歧化”)。超氧化物歧化可以是自發(fā)的或由酶超氧化物歧化酶(SOD)催化，它是一種導致形成氧化SOD的反應
(3)超氧化物陰離子可以用作還原劑，并給金屬陽離子提供單一電子(“一價還原”)。例如，在以下的兩步法中，高鐵(Fe3+)被還原，然后用作催化劑以將過氧化氫(H2O2)轉(zhuǎn)化成羥基自由基(HO·)。
(步驟1)然后，還原的金屬陽離子亞鐵(Fe2+)催化斷裂過氧化氫的氧-氧鍵。這產(chǎn)生一個羥基自由基(HO·)和一個氫氧化物離子(HO-)。所述反應已知為Fenton反應，其在再灌注損傷中特別重要，其中鐵和/或銅區(qū)室化喪失(一般通過紅細胞RBC溶血)(步驟2)羥基自由基容易穿過細胞膜。羥基自由基損害是“擴散速率限制的”，也就是說，損害可能施加的3維距離與基團的擴散速率有關(guān)。羥基自由基是一種特別具有毒性的ROS。羥基自由基可以加到有機底物(由以下反應中的R表示)，并形成本身為自由基的羥基化加合物。在局部缺血-再灌注損傷的情況下，內(nèi)皮和肌細胞膜中的多不飽和脂肪酸(PUFAs)對羥基自由基損害特別敏感(羥基化加合物)以上形成的加合物還可以在金屬陽離子或分子氧存在下氧化。這形成氧化的穩(wěn)定產(chǎn)物。在第一種情況下，額外的電子轉(zhuǎn)移至金屬離子，而在第二種情況下轉(zhuǎn)移至氧(形成超氧化物)。兩種加合物自由基還可以彼此反應形成氧化的、穩(wěn)定的和交聯(lián)的產(chǎn)物和水。這是膜蛋白氧化中的一個重要過程
此外，羥基自由基可以通過從這些分子中抽取電子而氧化有機底物
氧化底物(R·)為自由基。這些自由基可以在鏈式反應中與其它分子反應。
類胡蘿卜素是特別有效的脂質(zhì)-過氧化鏈斷裂劑。在一種情況下，與基態(tài)氧的反應產(chǎn)生過氧化自由基(ROO·)
過氧化自由基非常具有活性。它們可與其它有機底物在鏈式反應中反應
鏈式反應在PUFAs和其它敏感性膜脂質(zhì)的氧化損害中是常見的。
氧消耗率的測定是鏈式反應的開始和進行的一個指示。重要的是注意到在脂質(zhì)體模型系統(tǒng)中，適宜劑量的非酯化的游離蝦青素能夠完全抑制鏈式反應和伴隨的氧消耗。
(4)超氧化物陰離子可以與羥基自由基(HO·)反應形成單線態(tài)氧(1O2*)。單線態(tài)氧不是一種自由基，但在心臟生物系統(tǒng)中具有高度活性和破壞性。單線態(tài)氧涉及膜結(jié)合蛋白如5′-核苷酸酶的破壞，所述酶在維持和恢復血管擴張化合物如腺苷的局部濃度中具有重要性(表現(xiàn)對人梗塞大小的減小有效)
(5)超氧化物陰離子還可以與自由基氧化氮(NO·)反應，產(chǎn)生過氧亞硝酸(OONO-)。過氧亞硝酸是生物系統(tǒng)中具有高度活性和破壞性的分子。
多形核白細胞(PMNS)，特別是嗜中性白細胞，和活化的巨噬細胞是氧衍生的自由基和非自由基種類的豐富來源。位于吞噬細胞細胞膜中的NADPH氧化酶系統(tǒng)是刺激后自由基的重要來源。PMNs和活化的巨噬細胞快速地消耗“呼吸爆發(fā)”中的氧，并將其轉(zhuǎn)化成超氧化物陰離子，然后轉(zhuǎn)化成過氧化氫(H2O2)，以及大量的單線態(tài)氧。PMNs還是次氯酸鹽-另一種破壞性活性氧種類的來源。雖然在感染中在吞噬細胞活性中重要，但在局部缺血和再灌注期間的局部環(huán)境中，這些ROS攻擊局部區(qū)域中的正常和受損的宿主細胞而發(fā)生進一步的細胞損傷。
嗜中性白細胞是延長心肌局部缺血之后再灌注期間的氧自由基的一個主要來源，特別是在實驗性梗塞的動物模型中。許多先前的研究已證實在局部缺血-再灌注期間形成氧自由基，但很少指出這種自由基在體內(nèi)的來源或已檢查了延長的心肌局部缺血中的自由基產(chǎn)生。嗜中性白細胞在先前局部缺血的組織中大量募集，并被認為通過局部釋放多種介質(zhì)，主要是氧自由基來誘導損傷。先前，活化的嗜中性白細胞對再灌注損傷和潛在心肌搶救的貢獻仍不清楚。已提出一種方法用于檢測自由基，特別是超氧化物陰離子，這種方法不干擾自由基產(chǎn)生的血源機理。
開胸和閉胸的狗經(jīng)歷主動脈和冠脈竇導管插入(Duilio等人，2001)。不注入化學物質(zhì)。取而代之，將血液抽至預填充自旋阱的注射器，并用電子順磁共振(EPR)光譜法分析。在冠脈閉塞90分鐘后，氧自由基的經(jīng)心濃度在再流動后10分鐘升高數(shù)倍，并保持至少1小時明顯升高。自由基大部分來源于嗜中性白細胞，特別是超氧化物陰離子。這些自由基在施用以下物質(zhì)后表現(xiàn)出明顯降低(1)嗜中性白細胞NADPH-氧化酶抑制劑和(2)抗嗜中性白細胞CD18-粘附分子的單克隆抗體(R15.7)。設(shè)計第一種干預用于減少嗜中性白細胞呼吸爆發(fā)，而第二種用于減少嗜中性白細胞募集至再灌注損傷部位。通過單克隆抗體R15.7導致的自由基產(chǎn)生減少還與明顯較小的梗塞大小有關(guān)，并與伴隨的無再流動區(qū)域減少有關(guān)。第一次證明，活化的嗜中性白細胞是延時局部缺血后體內(nèi)再灌注心臟中氧化劑的主要來源，這種現(xiàn)象是長久存在的，且抗嗜中性白細胞干預可以有效地防止再灌注期間氧自由基經(jīng)心濃度的增加。在這些實驗性梗塞的動物模型中，在冠脈閉塞之前預先存在的病理的缺乏可能過分強調(diào)嗜中性白細胞募集和活化對I/R損傷的促進作用；但實際上在人動脈粥樣硬化的情況下，已駐留在“危險區(qū)域”的活化的巨噬細胞和活化的T淋巴細胞也可大大促進I/R損傷。
局部缺血導致受影響區(qū)域細胞中ATP耗盡。在通?！靶孤贝蠹s5％健康組織中加工的電子的線粒體電子轉(zhuǎn)運鏈水平下，當呼吸鏈大量減少時有利于進一步泄漏部分還原的氧種類(特別是O2-)。這主要在局部缺血期間發(fā)生。局部細胞環(huán)境中的凈效應是從抗氧化至促氧化的氧化還原狀態(tài)平衡的傾斜，同時其吸收附加的自由基危害而不造成進一步細胞損害的能力減小。
預防局部缺血-再灌注損傷用于先前動物和/或人試驗的藥理學活性劑在動物模型或有限的人試驗中評價了以下化合物作為急性心肌梗塞(AMI)期間減少局部缺血-再灌注損傷和/或心肌搶救的治療劑。大部分是生物抗氧化劑。
●超氧化物歧化酶(和衍生物或模擬物)●過氧化氫酶●谷胱甘肽和谷胱甘肽過氧化物酶●黃嘌呤氧化酶抑制劑●維生素B、C、E(和衍生物)●鈣拮抗劑●ACE抑制劑●巰基硫醇化合物(特別是N-乙酰半胱氨酸)●鐵螯合劑(甲磺酸去鐵胺)●抗炎劑(例如布洛芬)●磷酸肌酸●N-2-巰基丙酰甘氨酸(MPG)●普羅布考(和衍生物)●褪黑激素●輔酶Q-10Singh和印度合作者的開創(chuàng)性研究之前證明急性心肌梗塞人患者的內(nèi)源性抗氧化劑耗盡，而補充抗氧化劑混合物和/或輔酶Q10(一種有效的親脂性抗氧化劑)單一療法在AMI后30天有效實現(xiàn)心肌搶救和改善傳統(tǒng)上硬的臨床終點(例如總心源性死亡和非致命再梗塞)。AMISTAD試驗證明腺苷在三個分別的患者組中作為心肌搶救試劑的有用性。RheothRxTM(一種流變試劑)也有效地作為人試驗中的搶救劑，但腎毒性繼發(fā)后被棄用。最近，Medicure，Inc.在與Duke ClinicalResearch Institute合作的小型II期初步研究中證明維生素B衍生物可用于心肌搶救。因此，現(xiàn)在更好地理解在先前對I/R損傷的回顧中認識到的“翻譯”問題(從實驗性梗塞的動物模型中的效力至人臨床效力)。但是，商業(yè)上的機會窗口仍然存在，因為尚未有藥劑被特別批準用作人用搶救試劑。
心肌局部缺血-再灌注損傷治療的時間選擇如以上討論，早期再灌注急性心肌梗塞(主要采用藥理學或手術(shù)再灌注)終止由于局部缺血導致的細胞死亡，但矛盾地導致進一步的損傷-最可能通過氧化機理。Horwitz等人(1999)在57只狗中確定了機會窗口，在此期間抗氧化劑必須以治療濃度存在以防止在局部缺血90分鐘和隨后再灌注48小時期間發(fā)生再灌注損傷。在該試驗中進行的統(tǒng)計分析關(guān)注鑒定引起梗塞大小差別的組成員成分，并揭示治療持續(xù)時間是主要的決定因素。如果在再灌注第1個小時內(nèi)的任何時間開始，則大于或等于3小時的輸注明顯減小梗塞大小。Duilio等人(2001)在犬模型中通過證明反映過氧化自由基鏈反應的氧消耗在再灌注后10分鐘開始以及自由基活性在再灌注的至少第1小時保持升高來進一步澄清這個問題。Singh等人(1996)先前在人患者中證明，在MI后平均13小時起始抗氧化劑治療，并持續(xù)28天，則心肌搶救以及改善硬的臨床終點(非致命再梗塞，死亡)是可能的。因此，具有長半衰期的血漿抗氧化劑可能特別適于這種情況，因為它們可以以負荷劑量給藥，并在整個關(guān)鍵的AMI后早期(0-24小時)在血漿中衰變?？诜惡}卜素的血漿半衰期范圍從葉黃素(“氧化的”類胡蘿卜素包括蝦青素、辣椒黃素、葉黃素和玉米黃質(zhì))的大約21小時至胡蘿卜素(“烴”類胡蘿卜素如番茄紅素)的222小時。在Horwitz等人(1999)的試驗中超氧化物歧化酶及其模擬物在人研究中的血漿抗氧化劑半衰期(7分鐘)與關(guān)于葉黃素的近21小時和關(guān)于胡蘿卜素的近9天的半衰期的明顯差別突出了在人AMI中類胡蘿卜素的藥代動力學優(yōu)點和對抗I/R損傷的潛在的心臟保護作用。
抗氧化劑在再灌注損傷中的關(guān)鍵評價人研究在Singh等人(1994)進行的研究中，與對照患者相比表現(xiàn)AMI的患者的維生素A、C、E和β-胡蘿卜素平均水平明顯降低。AMI患者的脂質(zhì)過氧化物明顯升高。AMI和低維生素血漿水平之間的負關(guān)系在調(diào)節(jié)這些患者的吸煙和糖尿病之后仍然明顯。類似地，Levy等人(1998)研究了38名AMI患者，他們與年齡相匹配的健康對照對象相比表現(xiàn)出維生素A、E和β-胡蘿卜素水平明顯降低。在血栓溶解之后，治療患者血清中的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物明顯升高。溶栓治療還導致血漿維生素E水平明顯降低。這些描述的研究表明在呈現(xiàn)AMI時經(jīng)歷急性冠脈事件的患者的抗氧化劑維生素血清水平可能降低。在急性情況下用抗氧化劑化合物進行藥理學干預可能會糾正抗氧化劑維生素缺乏和全身抗氧化狀態(tài)。
在初級和/或二級預防CVD的情況下用抗氧化劑進行前瞻性人干預試驗同樣有限，但大多數(shù)是成功的。4/5目前的人研究強烈支持維生素E在減少心臟病風險和并發(fā)癥率方面的有效性。對患有明顯腎病的患者進行的抗氧化劑對晚期腎病中的心血管疾病的二級預防研究揭示，給予800IU/天的天然來源維生素E的患者的非致命性MI降低70％。類似地，如本文所提到的，許多藥劑現(xiàn)已成功地用于人的心肌搶救應用。
在急性情況下靜脈內(nèi)遞送低分子量化合物以抑制或改善I/R損傷需要評價它的免疫原性。對快速輸注化合物的輸血類型和其它不良反應的發(fā)生率應該最小化。分子量＜1000Da的化合物，例如阿司匹林、孕酮和蝦青素可能不具有免疫原性，除非與載體復合。當分子量增加到1000-6000Da時，例如胰島素和ACTH，化合物可能是或可能不是免疫原性的。當分子量增加至＞6000Da時，化合物可能是免疫原性的。此外，脂質(zhì)很少具有免疫原性，同樣除非與載體復合。蝦青素，作為一種葉黃素類胡蘿卜素，其天然形式具有高度脂溶性。它的尺寸也小(597Da)。因此，可注射的蝦青素結(jié)構(gòu)類似物在恰當?shù)呐浞街械拿庖咴钥赡苄缘停怯糜谀壳爸委熯m應癥的特別理想的化合物。
預防心律失常用于先前的動物試驗的藥理學活性劑Gutstein等人(2001)進行的研究評價基因修飾的小鼠，其不能在心肌中表達連接蛋白43[Cx43條件敲除(CKO)小鼠]。Gutstein等人發(fā)現(xiàn)盡管Cx43 CKO小鼠具有正常心臟結(jié)構(gòu)和收縮性能，但它們一致地發(fā)生心源性猝死，顯然是由于自發(fā)的致命性室性心動過速。這些數(shù)據(jù)支持間隙連接通道特別是連接蛋白43在保持心臟電穩(wěn)定性中的關(guān)鍵作用。能夠由類胡蘿卜素誘導的連接蛋白43是在人組織中最廣泛表達的連接蛋白。因此，類胡蘿卜素和類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物可以用于治療心律失常。
預防癌癥用于先前動物試驗的藥理學活性劑已主要在動物模型中評價類胡蘿卜素在預防和治療癌癥方面的可能治療價值。先前，類胡蘿卜素的抗氧化性能是涉及類胡蘿卜素及其在癌癥預防中的應用的研究的焦點。Bertram等人(1991)進行的研究指出雖然類胡蘿卜素是抗氧化劑，但這種特定的性能似乎不是導致它們作為癌癥化學預防劑的活性的主要因素。而是發(fā)現(xiàn)類胡蘿卜素的活性與它們上調(diào)間隙連接通訊的能力十分相關(guān)。已推定間隙連接充當由生長受抑制的正常細胞產(chǎn)生的抗增殖信號的傳送管道。能夠由類胡蘿卜素誘導的連接蛋白43是人組織中最廣泛表達的連接蛋白。因此，上調(diào)連接蛋白43可能是類胡蘿卜素用于化學預防人和其它動物的癌癥的機理。而且最近Nishino等人(2003)進行的人研究證明通過長期口服給予的類胡蘿卜素混合物(10mg番茄紅素，α-和β-胡蘿卜素各5mg)有效地化學預防日本高危肝硬化患者的肝細胞癌。因此更顯著地在肝內(nèi)蓄積的具有更大效力的化學預防癌癥的類胡蘿卜素(例如蝦青素)可能是特別有用的實施方案。
類胡蘿卜素用于治療局部缺血-再灌注損傷、肝臟疾病、心律失常和癌癥的應用本文所用的術(shù)語“抑制”和“改善”一般定義為防止和/或減輕疾病狀態(tài)的負面結(jié)果。因此，本文所述的方法和組合物可能作為急性和慢性(預防性)形式均具有價值。
本文所用的術(shù)語“局部缺血-再灌注損傷”一般定義為歸因于對先前局部缺血的組織(慢性或急性局部缺血)的再氧化的病理情況，它包括動脈粥樣硬化和血栓栓塞性血管疾病及其相關(guān)的疾病。具體而言，主要的疾病或過程包括心肌梗塞、中風、外周血管疾病、靜脈或動脈閉塞、器官移植、冠狀動脈分流移植手術(shù)、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)和心血管驟停和/或死亡包括在內(nèi)，但它們不被視為是對在其各自的病理學中涉及局部缺血組織再灌注的其它病理過程的限制。
本文所用的術(shù)語“心律失常”一般定義為不同于心搏的正常節(jié)律任何變化，包括竇性心律失常、早搏、心傳導阻滯、房顫、房撲、室性心動過速、室顫、交替脈和陣發(fā)性心動過速。本文所用的術(shù)語“心律失?！币话愣x為心臟電活動的紊亂，其表現(xiàn)為心率或心律的異常。心律失常最通常與心血管疾病，特別是局部缺血性心臟病有關(guān)。
本文所用的術(shù)語“癌癥”一般認為其特征是不受控的、異常的細胞生長。具體而言，癌可能指病態(tài)組織，包括致癌物引發(fā)的細胞和致癌物轉(zhuǎn)化的細胞。
本文所用的術(shù)語“類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物”可以一般定義為類胡蘿卜素及其生物活性結(jié)構(gòu)類似物。典型的類似物包括表現(xiàn)同等或提高的生物有用和相關(guān)的功能，但在結(jié)構(gòu)上不同于母體化合物的分子。
母體類胡蘿卜素選自文獻中所述的多于600種天然存在的類胡蘿卜素和它們的立體和幾何異構(gòu)體。這些類似物可以包括但不限于酯、醚、碳酸酯、酰胺、氨基甲酸酯、磷酸酯和醚、硫酸酯、糖苷醚，含或不含間隔(接頭)。
本文所用的術(shù)語“多于一種類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的協(xié)同組合”可以一般定義為包括一種類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物與一種或多種其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物或共同抗氧化劑組合(作為衍生物或在溶液和/或制劑中)的任何組合物。
本文所用的術(shù)語“治療對象”可以一般定義為所有哺乳動物，特別是人。
本文所用的術(shù)語“給藥”可以一般定義通過任何實現(xiàn)期望目標的方法施用藥物或非處方藥(OTC)或營養(yǎng)組合物。例如，給藥可以包括腸胃外、皮下、靜脈內(nèi)、冠脈內(nèi)、直腸、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、透皮或含服途徑?？蛇x擇或同時地，給藥可以通過口服途徑。給藥劑量取決于接受者的年齡、健康、體重和疾病狀態(tài)，同時治療的類型(如果有的話)，治療頻率和目標效果的性質(zhì)。本文所述的旨在抑制局部缺血-再灌注損傷的任何技術(shù)也可以用于抑制或改善肝臟疾病，非限制性實例為丙型肝炎感染。本文所述的涉及抑制和/或改善局部缺血-再灌注損傷的技術(shù)也可以用于抑制和/或改善心律失常。本文所述的涉及抑制和/或改善局部缺血-再灌注損傷的技術(shù)也可以用于抑制和/或改善癌癥。
一個實施方案可以包括給治療對象單獨或聯(lián)合施用類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物，從而抑制和/或改善局部缺血-再灌注損傷的發(fā)生。所述類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物可以是水溶性和/或水可分散性衍生物。所述類胡蘿卜素衍生物可以包括實質(zhì)上增加天然存在的類胡蘿卜素的水溶性的任何取代基。
所述類胡蘿卜素衍生物可以保持和/或改善母體類胡蘿卜素的抗氧化性能。所述類胡蘿卜素衍生物可以保持母體類胡蘿卜素的無毒性能。所述類胡蘿卜素衍生物相對于母體類胡蘿卜素在對治療對象給藥時可以具有提高的生物利用度。所述母體類胡蘿卜素可以天然存在。
另一個實施方案可以包括給治療對象施用包含多于一種類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的協(xié)同組合的組合物，借此減少局部缺血-再灌注損傷的發(fā)生。所述組合物可以是類胡蘿卜素衍生物的“外消旋的”(即潛在立體異構(gòu)形式的混合物)混合物。還包括含有與藥學上可接受的載體(例如人血清白蛋白)組合的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的藥物組合物。在一個實施方案中，可以將類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)類似物與人血清白蛋白(即HSA)在溶劑中復合。HSA可以用作藥學上可接受的載體。
在某些實施方案中，組合物可以包括1.0克或更少的特定類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物與1.0克或更少的一種或多種其它類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物和/或共同抗氧化劑組合的所有組合物，其量有效實現(xiàn)期望的目的。雖然個體治療對象的需要有變化，但各個組分的有效量的最佳范圍的確定在本領(lǐng)域技能范圍內(nèi)。典型地，類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物可以施用于哺乳動物，特別是人，參照被治療局部缺血-再灌注損傷的哺乳動物或人的體重，口服劑量為5-100mg/天。典型地，可以將類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物施用于哺乳動物，特別是人，參考被治療再灌注損傷的哺乳動物或人的體重，腸胃外給藥劑量為5-500mg/天。在其它實施方案中，口服或腸胃外施用大約100mg類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物以治療或預防局部缺血-再灌注損傷。
單位口服劑量可以包括大約0.25mg至大約1.0克或大約5-25mg的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物。單位腸胃外劑量可以包括大約25mg-1.0克或25mg-500mg的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物。單位冠脈內(nèi)劑量可以包括大約25mg-1.0克或25mg-100mg的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物。單位劑量可以每天給藥一次或多次，隔天給藥，以負荷劑量或大丸藥形式給藥，或者在腸胃外溶液中滴定至常規(guī)接受的或新的生物化學代用標記或臨床終點，這些屬于本領(lǐng)域的技能。
除了將類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物作為原料化學物質(zhì)施用之外，可以將化合物作為包含有利于可藥用的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物加工的合適的藥學上可接受的載體、防腐劑、賦形劑和助劑的藥物制劑的一部分給藥。制劑，特別是可以口服并可以用于優(yōu)選類型的給藥的制劑，例如片劑、軟明膠、錠劑、糖錠和膠囊，以及可以直腸給藥的制劑，例如栓劑，和用于注射或口服給藥的適宜溶液，可以在如上述的提供類似生物利用度的劑量范圍內(nèi)與賦形劑一起制備。
藥物制劑可以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式制備，例如通過常規(guī)混合、制粒、制糖錠、軟明膠包囊、溶解、提取或凍干方法。因此，口服用藥物制劑可以通過將活性化合物與固體和半固體賦形劑和適宜的防腐劑和/或共同抗氧化劑合并來獲得。任選地，可以將所得的混合物研磨和加工。如果需要或必需的話，可以在加入適宜的助劑之后將所得的顆?；旌衔镉糜讷@得片劑、軟明膠、錠劑、膠囊或糖錠核心。
適宜的賦形劑可以是填充劑，例如糖類(例如乳糖、蔗糖或甘露糖)，糖醇(例如甘露醇或山梨醇)，纖維素制劑和/或磷酸鈣(例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣)。此外，可以使用粘合劑，例如淀粉糊(例如玉蜀黍或玉米淀粉、小麥淀粉、米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芪膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮)?？梢约尤氡澜鈩?例如上述淀粉)和羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或藻酸或其鹽(例如藻酸鈉)。助劑首先是流動調(diào)節(jié)劑和潤滑劑(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇或PEG)。糖錠核心提供以適宜包衣，如果需要的話它耐受胃液。軟明膠膠囊(“軟明膠”)提供適宜包衣，所述包衣一般包含明膠和/或適宜的可食用染料。不含動物組分和可食的明膠膠囊因為廣泛地使用和消耗而可能特別適用于本文所述的實施方案。為此目的，可以使用濃縮的糖溶液，它可以任選包含阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇(PEG)和/或二氧化鈦、漆溶液和適宜的有機溶劑或溶劑混合物，包括二甲亞砜(DMSO)、四氫呋喃(THF)、丙酮、乙醇或其它適宜的溶劑和助溶劑。為了生產(chǎn)耐胃液的包衣，可以使用適宜的纖維素制劑例如乙酰纖維素鄰苯二甲酸酯或羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯的溶液?？梢詫⑷玖匣蛏丶拥狡瑒┗蛱清V包衣或軟明膠膠囊，例如用于識別和為了表征活性化合物劑量的組合，或者掩飾膠囊內(nèi)容物用于臨床或其它研究。
可以口用的其它藥物制劑包括由明膠制備的推入-配合膠囊和由明膠和增塑劑如甘油或山梨醇制備的軟熱封膠囊。推入-配合膠囊可以包含顆粒形式的活性化合物，其可以與填充劑如乳糖、粘合劑如淀粉和/或潤滑劑如滑石或硬脂酸鎂，以及任選地穩(wěn)定劑和/或防腐劑混合。在軟膠囊中，可以將活性化合物溶解或懸浮在適宜的液體，例如脂肪油如米糠油或花生油或棕櫚油或液體石蠟中。在其它實施方案中，可以加入穩(wěn)定劑和防腐劑。
可以直腸使用的可能的藥物制劑例如包括由活性化合物與栓劑基質(zhì)的組合組成的栓劑。例如適宜的栓劑基質(zhì)為天然或合成甘油三酯或鏈烷烴。此外，還可以使用由活性成分和基質(zhì)的組合組成的明膠直腸膠囊。可能的基質(zhì)材料例如包括液體甘油三酯、聚乙二醇或鏈烷烴。
用于腸胃外給藥的適宜的配方包括但不限于水溶性和/或水可分散性形式的活性化合物的水溶液，例如水溶性鹽、酯、碳酸酯、磷酸酯或醚、硫酸酯、糖苷醚，以及間隔和/或接頭。此外，可以施用作為適宜的油注射懸浮液的活性化合物的懸浮液，特別適于肌內(nèi)注射。可以使用適宜的親脂性溶劑，助溶劑(例如DMSO或乙醇)，或賦形劑，包括脂肪油如米糠油或花生油和/或棕櫚油或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯。水性注射懸浮液可以包含增加懸浮液粘度的物質(zhì)，例如包括羧甲基纖維素鈉、山梨醇、右旋糖酐和/或環(huán)糊精。環(huán)糊精(例如(β-環(huán)糊精)可以具體用于增加用于腸胃外注射類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的水溶性?？梢灾苽浒惡}卜素結(jié)構(gòu)類似物和例如卵黃磷脂酰膽堿(E-PC)的混合物的脂質(zhì)體配方用于注射。任選地，所述懸浮液還可以包含穩(wěn)定劑，例如抗氧化劑如BHT或防腐劑如芐醇。
實施例現(xiàn)在已經(jīng)描述了本發(fā)明，參照以下實施例更容易理解本發(fā)明，所述實施例僅以例示的方式提供，而不意在限定本發(fā)明。
關(guān)于本文所述化合物的合成和表征，試劑購自商業(yè)來源并原樣使用，除非另外指出。用于反應和分離的溶劑是試劑級并不經(jīng)純化使用，除非另外指出。所有以下反應在氮(N2)氣氛下進行，并避免直接光線。“外消旋”蝦青素(為1∶2∶1比率的立體異構(gòu)體3S，3′S、內(nèi)消旋和3R，3′R的混合物)購自Divi′s Laboratories，Ltd(Buckton Scott，India)?！巴庀比~黃素和玉米黃質(zhì)購自Indofine Chemical Co.，Inc。用Uniplate硅膠GF 250micron板進行薄層色譜(TLC)。用于過程中控制(IPC)的HPLC分析用Varian Prostar Series 210液相色譜儀進行，該色譜儀具有Alltech Rocket，Platinum-C18，100，3μm，7×53mm，PN 50523；溫度25℃；流動相(A＝水；B＝10％二氯甲烷/甲醇)，40％A/60％B(起始)；8分鐘內(nèi)線性梯度至100％B；保持100％B4分鐘，1分鐘內(nèi)線性梯度至40％A/60％B；流速2.5mL/分；起始壓力2050PSI；PDA檢測器波長474nm。用Bruker Advance 300記錄NMR，并用ThermoFinnigan AQA光譜儀進行質(zhì)譜測定。用Agilent1100LC/MSD VL ESI系統(tǒng)記錄LC/MS；柱Zorbax Eclipse XDB-C18Rapid Resolution(4.6×75mm，3.5μm，USUT002736)；溫度25℃；起始壓力107巴；流速1.0ml/分；流動相(％A＝0.025％TFA，在H2O中，％B＝0.025％TFA，在乙腈中)方法1(化合物8-21，23-27，30，31)70％A/30％B(初始)，5分鐘內(nèi)分階梯度至50％B，8.30分鐘內(nèi)分階梯度至98％B，在98％B保持15.20分鐘，15.40內(nèi)分階梯度至30％B；方法2(化合物28，29)70％A/30％B(初始)，4分鐘內(nèi)分階梯度至50％B，7.30分鐘內(nèi)分階梯度至90％B，10.30分鐘內(nèi)分階梯度至98％B，保持在98％B 15.20分鐘，15.40分鐘內(nèi)分階梯度至30％B；方法3(化合物22)70％A/30％B(初始)，5分鐘內(nèi)分階梯度至50％B，8.30分鐘內(nèi)分階梯度至98％B，在98％B保持25.20分鐘，在25.40分鐘內(nèi)分階梯度至30％B；PDA檢測器470nm；LRMS+模式，ESI。
蝦青素(2E).HPLC保留時間11.629分鐘，91.02％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)598(M++2H)(60)，597(M++H)(100)；HPLC保留時間12.601分鐘，3.67％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)597(M++H)(100)；HPLC保留時間12.822分鐘，5.31％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)597(M++H)(100)。
葉黃素(XXX).HPLC保留時間12.606分鐘，100％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)568(M+)(100)。
玉米黃質(zhì)(XXXI).HPLC保留時間12.741分鐘，100％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)568(M+)(100)。
實施例1合成XV(蝦青素的二琥珀酸酯(琥珀酸一-(4-{18-[4-(3-羧基-丙酰氧基)-2，6，6-三甲基-3-氧代-環(huán)己-1-烯基]-3，7，12，16-四甲基-十八烷-1，3，5，7，9，11，13，15，17-壬烯基}-3，5，5-三甲基-2-氧代-環(huán)己-3-烯基)酯)) 室溫下往在DCM(″二氯甲烷″)(50mL)中的蝦青素2E(6.0g，10.05mmol)的溶液加入DIPEA(″N，N-二異丙基乙基胺″)(35.012mL，201mmol)、琥珀酸酐(10.057g，100.5mmol)和DMAP(″4-(二甲基氨基)吡啶″)(0.6145g，5.03mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌48小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(60mL/10mL)終止反應，然后用DCM萃取。用Na2SO4干燥合并的有機層，并濃縮得到蝦青素二琥珀酸酯(XV)(100％)。HPLC保留時間10.031分鐘，82.57％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)798(M++2H)(52)，797(M++H)(100)；HPLC保留時間10.595分鐘，4.14％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)797(M++H)(40)，697(100)；HPLC保留時間10.966分鐘，5.68％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)797(M++H)(100)，679(31)；HPLC保留時間11.163分鐘，7.61％(AUC)；LRMS(ESI)M/Z(相對強度)797(M++H)(38)，679(100)，且無可檢測的蝦青素2E。
實施例2合成XVI(蝦青素的二琥珀酸酯(琥珀酸一-(4-{18-[4-(3-羧基-丙酰氧基)-2，6，6-三甲基-3-氧代-環(huán)己-1-烯基]-3，7，12，16-四甲基-十八烷-1，3，5，7，9，11，13，15，17-壬烯基}-3，5，5-三甲基-2-氧代-環(huán)己-3-烯基)酯)的二鈉鹽) 將蝦青素的二琥珀酸酯(2g，2.509mmol)和200mL乙醇在室溫和氮氣氛下于500mL圓底燒瓶中攪拌。一次性加入乙醇鈉(340mg，5.019mmol，Acros#A012556101)固體，并將溶液攪拌過夜。第二天，濾出沉淀，用乙醇洗滌，然后用二氯甲烷洗滌得到一種紫色固體，蝦青素的二琥珀酸酯的二鈉鹽，XVI[1.41g，67％]，放置在高度真空管道中干燥。1H-NMR(甲醇-d4)δ6.77-6.28(14H，m)，5.53(2H，dd，J＝12.6，6.8)，2.68-2.47(8H，m)，2.08-1.88(22H，m)，1.37(6H，s)，1.24(6H，s)；13C NMR(CDCl3)δ196.66，180.80，175.01，163.69，144.12，141.38，138.27，136.85，136.12，135.43，132.35，129.45，126.22，124.71，72.68，44.09，38.63，34.02，32.34，31.19，26.86，14.06，13.19，12.91；質(zhì)譜+ESI，819.43一鈉鹽，797.62蝦青素的二琥珀酸酯；HPLC 7.41分鐘(99.84％)。
實施例3合成蝦青素的BocLys(Boc)OH酯(XXI).
HPLC柱Waters Symmetry C18 3.5微米4.6mm×150mm；溫度25℃；流動相(A＝0.025％TFA，在H2O中；B＝0.025％TFA，在MeCN中)，95％A/5％B(起始)；線性梯度至100％B經(jīng)歷12分鐘，保持4分鐘；線性梯度至95％B/5％A經(jīng)歷2分鐘；線性梯度至95％A/5％B經(jīng)歷4分鐘；流速2.5ml/分；檢測器波長474nm。
往在二氯甲烷(500mL)中的蝦青素2E(11.5g，19.3mmol)和BocLys(Boc)OH(20.0g，57.7mmol)的混合物加入4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(10.6g，86.6mmol)和1，3-二異丙基碳化二亞胺(″DIC″)(13.4g，86.7mmol)。用鋁箔覆蓋圓底燒瓶，并將混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜。16小時后，根據(jù)HPLC和TLC反應不完全。將另外1.5當量的DMAP和DIC加到反應物，2小時后根據(jù)HPLC反應完全。然后將混合物濃縮至100mL，濾出一種白色固體(1，3-二異丙基脲)。用硅膠(10％-50％庚烷/EtOAc)對濾液進行快速色譜處理得到目標產(chǎn)物，為一種暗紅色固體(XXI)(28.2g，＞100％產(chǎn)率)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.24(2H，t，J＝6.3Hz)，6.78(2H，d，5.0Hz)，6.57-6.27(14H，m)，5.50-5.41(2H，m)，3.99-3.97(2H，d，6.0Hz)，2.90(4H，m)，2.03(4H，m)，2.00(6H，s)，1.97(6H，s)，1.82(6H，s)，1.70-1.55(4H，m)，1.39-1.33(36H，m)，1.24-1.13(8H，m)，1.01-0.99(6H，m)，0.86-0.83(6H，m).HPLC21.3分鐘(24.6％AUC))；22.0分鐘(48.1％(AUC))；22.8分鐘(20.6％(AUC)).TLC(1∶1庚烷/EtOAcRf0.41；Rf0.5；Rf0.56).通過正模式流動注射在Agilent 1100 LC/MSDVL ESI系統(tǒng)上進行LC/MS分析；流動相A＝在H2O中的0.025％TFA；B＝在MeCN中的0.025％TFA，10％A/90％B(起始)；起始壓力10巴；PDA檢測器470nm.+ESI，m/z＝1276.1(M+Na+)。
實施例4合成蝦青素的二賴氨酸酯的四鹽酸鹽(XX)。
將蝦青素的DiBocLys(Boc)酯(XXI)(20.0g，16.0mmol)和在1，4-二噁烷中的HCl(4.00M，400mL，1.60mol，100eq)的混合物于室溫和氮氣氛下攪拌。用鋁箔蓋住圓底燒瓶，并將反應物攪拌1小時，此時根據(jù)HPLC反應完全。沉淀標題化合物，用過濾法收集，用醚(3×100mL)洗滌，并干燥(14.7g，92％，根據(jù)HPLC為91.6％純度)。將部分(13.5g)粗固體溶于500mL 1∶2甲醇/二氯甲烷混合物，并在氮氣氛下攪拌。然后滴加乙醚(168mL)，并用過濾法收集沉淀的固體得到目標產(chǎn)物，為一種暗紅色固體(8.60g，63.7％產(chǎn)率)。1HNMR(DMSO-d6)δ8.65(6H，s)，8.02(6H，s)，6.78-6.30(14H，m)，5.59-5.51(2H，m)，4.08(2H，m)，2.77(4H，m)，2.09-2.07(4H，m)，2.01(6H，s)，1.97(6H，s)，1.90-1.86(4H，m)，1.84(6H，s)，1.61-1.58(8H，m)，1.37(6H，s)，1.22(6H，s).HPLC7.8分鐘(97.0％(AUC))。用Agilent 1100 LC/MSD VL ESI系統(tǒng)進行LC/MS分析，所述系統(tǒng)具有zorbax Eclipse XDB-C18 Rapid Resolution4.6×75mm，3.5微米，USUT002736；溫度25℃；流動相(％A＝0.025％TFA，在H2O中；％B＝0.025％TFA，在MeCN中)，70％A/30％B(起始)；線性梯度至50％B，經(jīng)歷5分鐘，線性梯度至100％B，經(jīng)歷7分鐘；流速1.0mL/分鐘；起始壓力108巴；PDA檢測器470nm。質(zhì)譜+ESI，m/z＝853.9(M+H+)，m/z＝875.8(M+NA+)；LC 4.5分鐘。
實施例5合成蝦青素二琥珀酸酯的雙-(2-OTBS抗壞血酸)6-酯(XXII)
HPLC柱Waters Symmetry C18 3.5微米4.6mm×150mm；溫度25℃；流動相(A＝0.025％TFA，在水中；B＝0.025％TFA，在乙腈中)，95％A/5％B(起始)；線性梯度至100％B經(jīng)歷5分鐘，保持10分鐘；線性梯度至95％B經(jīng)歷2分鐘；線性梯度至95％A/5％B經(jīng)歷3分鐘；流速1.0mL/min；檢測器波長474nm。
往在600mL二氯甲烷中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(20.00g，25.1mmol)的攪拌的溶液加入4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(6.13g，50.2mmol)、2-O-叔丁基二甲基甲硅烷基(OTBS)抗壞血酸(XXVI)(21.86g，75.3mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI-HCl)(12.02g，62.75mmol)。14小時后用硅膠(1.0kg硅膠，洗脫劑0.5％HOAc/5％MeOH/EtOAc)對反應混合物進行快速色譜處理。將餾分10濃縮得到暗紅色固體(6.47g，19.2％產(chǎn)率，根據(jù)HPLC為58％AUC純度)。用硅膠(600g硅膠，洗脫劑0.25％HOAc/5％MeOH/EtOAc)對粗產(chǎn)物進行快速色譜處理。將餾分6-10真空濃縮得到暗紅色固體(1.50g，4.4％產(chǎn)率，根據(jù)HPLC為94.8％AUC純度)。1H-NMR(CDCl3)δ11.13(2H，s)，6.78-6.28(14H，m)，5.43(2H，dd，J＝12.2，7.1Hz)，5.34(2H，s)，4.78(2H，d，J＝5.4Hz)，4.11-4.07(6H，m)，2.69-2.65(8H，m)，2.05-1.97(22H，m)，1.81(6H，s)，1.33(6H，s)，0.92(18H，s)，0.15(6H，s)，0.14(6H，s)；HPLC 13.4分鐘[94.8％(AUC)]；質(zhì)譜-ESI，m/z＝1340.6(M-)。
實施例6合成蝦青素二琥珀酸酯的雙抗壞血酸6-酯(XIX)。
0℃下往在THF(5mL)中的蝦青素二琥珀酸酯的雙-(2-OTBS抗壞血酸)6-酯(XXII)(100mg，0.075mmol)的攪拌溶液加入HF·Et3N(121μL，0.745mmol)。將反應物于0℃下攪拌1小時，然后溫至室溫。將反應物攪拌2.5小時，然后通過傾入包含5mL IPAC和5mL水的分液漏斗來終止反應。除去水層，并用水(2×5mL)洗滌有機層。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，得到一種暗紅色固體，將其不經(jīng)純化而使用；
1H-NMR(CDCl3)δ11.12(2H，s)，8.40(2H，s)，6.87-6.28(14H，m)，5.43-5.32(4H，m)，4.69(s，2H)，4.09(s，4H)，3.99(s，2H)，2.68-2.50(m，8H)，2.00-1.76(22H，m)，1.36-1.19(12H，m)；HPLC 8.9分鐘[80.7％(AUC)]；質(zhì)譜+ESI，m/z＝1113.2(M+H+)。
實施例7合成蝦青素二琥珀酸酯的雙抗壞血酸6-酯的鈉鹽(XXIII)。
室溫下往在丙酮(5mL)中的粗品蝦青素二琥珀酸酯的雙抗壞血酸6-酯(XIX)(0.075mmol)的攪拌的溶液加入原甲酸三乙酯(62μL，0.373mmol)。將溶液攪拌15分鐘，然后滴加在丙酮中的2-乙基己酸鈉的溶液(93μL，0.019mmol，0.20M)。通過過濾除去所得的沉淀。將濾液冷卻至0℃，并用附加的在丙酮中的2-乙基己酸鈉(373μL，0.075mmol，0.20M)處理。將反應物攪拌5分鐘，然后通過過濾收集固體物質(zhì)，用丙酮(5mL)洗滌，并在高度真空下干燥得到一種暗紅色固體(27.8mg，32.2％產(chǎn)率)HPLC 8.9分鐘[88.2％(AUC)]，質(zhì)譜+APCI，m/z＝1113.3(M+3H-2Na+)。
實施例8合成蝦青素二琥珀酸酯的二環(huán)己基甲酯(XXIV)。
HPLC柱Alltech Rocket，Platinum-C18，100，3 AM，7×53mm；溫度25 ℃；流動相(A＝0.025％TFA在水中；B＝0.025％TFA，在乙腈中)，70％A/30％B(起始)；保持40秒；線性梯度至50％B經(jīng)歷4分20秒；線性梯度至100％B經(jīng)歷1分30秒，保持4分40秒；線性梯度至70％A/30％B，20秒；流速2.5mL/分；檢測器波長474nm。
室溫和N2氮氣氛下往在25mL圓底燒瓶中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(100mg，0.125mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(6.0mL)的攪拌的溶液加入碳酸銫(90.0mg，0.275mmol)，并用鋁箔覆蓋。將反應物攪拌15分鐘，然后加入溴甲基環(huán)己烷(52.0μL，0.375mmol)。2天后，通過加入4mL碳酸氫鈉飽和溶液終止反應，并用50mL二氯甲烷稀釋。用25mL水將稀釋的溶液洗滌二次，然后用無水硫酸鈉干燥。將有機溶液過濾，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法除去溶劑。用快速色譜法(10-50％EtOAc/庚烷)純化粗殘余物，得到一種暗紅色固體(40.2mg，32.5％產(chǎn)率)1H-NMR(CDCl3)δ7.03-6.17(14H，m)，5.54(2H，dd，J＝12.9，6.7Hz)，3.92(4H，d，J＝6.4Hz)，2.82-2.63(8H，m)，2.08-1.92(14H，m)，1.90(6H，s)，1.75-1.62(14H，m)，1.34-1.20(22H，m)；HPLC 8.9分鐘[83.9％(AUC)]；TLC(3∶7 EtOAc/庚烷Rf0.38)；質(zhì)譜+ESI，m/z＝989.6(M+H+)。
實施例9合成2-OTBS-5，6-isopropyledine抗壞血酸(XXV) HPLCAlltech Rocket，Platinum-C18，100A，3μm，7×53mm，PN50523；溫度25℃；流動相(A＝0.025％TFA，在水中；B＝0.025％TFA，在乙腈中)，90％A/10％B(起始)；線性梯度至30％B經(jīng)歷3分鐘；線性梯度至90％B經(jīng)歷3分鐘，保持2分鐘；線性梯度至90％A/10％B經(jīng)歷1分鐘，然后保持1分鐘；流速2.5ml/分；檢測器波長256nm。
室溫下往在1.00L THF中的5，6-isopropyledine抗壞血酸(100.0g，463mmol)的攪拌的溶液加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(TBSCl)(76.7g，509mmol)，然后在30分鐘內(nèi)加入N，N-二異丙基乙基胺(DIPEA)(161mL，925mmol)。將反應物于室溫下攪拌14小時，然后真空濃縮。將混合物溶于甲基叔丁基醚(MTBE)(1.00L)，并用1M碳酸鉀(1.00L)在分液漏斗中萃取。再用MTBE(1.00L)萃取水層一次，并用2N HCl將水層的pH調(diào)節(jié)至pH6。用乙酸異丙酯(IPAC)(1.00L)萃取水層二次，并濃縮得到一種米色固體(150.4g，98％產(chǎn)率)1H-NMR(DMSO d6)δ11.3(1H，s)，4.78(1H，d，J＝2.0Hz)，4.41-4.36(1H，m)，4.11(1H，dd，J＝8.4，7.4Hz)，3.92(1H，dd，J＝8.4，6.0)，1.24(3H，s)，1.23(3H，s)，0.92(9H，s)，0.14(6H，s)；HPLC 5.9分鐘[91.6％(AUC)]；質(zhì)譜-ESI，m/z＝329.2(M-H-)。
實施例10合成2-OTBS抗壞血酸(XXVI).
室溫和氮氣氛下往在1.50 L二氯甲烷中的2-OTBS-5，6-isopropyledine抗壞血酸(XXV)(150.4g，455mmol)的攪拌的溶液加入丙二硫醇(54.0mL，546mmol)。將溶液冷卻至-45℃，然后以保持溫度低于-40℃的速率滴加BF3-OEt2(58.0mL，455mmol)。1小時后，根據(jù)HPLC反應完全。通過將冷反應混合物傾入含有1.00L IPAC和500mL飽和氯化銨溶液和500ml水的分液漏斗來終止反應。將有機層濃縮至一種白色固體。為了清除丙二硫醇，將固體在二氯甲烷(250mL)中再漿化2小時，加入庚烷(1.00L)，并攪拌1小時。將混合物真空濃縮至500ml體積。將混合物過濾并真空干燥得到一種米色固體(112.0g，85％產(chǎn)率)1H-NMR(DMSO d6)δ11.0(1H，s)，4.89(2H，s)，4.78(1H，d，J＝1.2Hz)，3.82-3.80(1H，m)，3.45-3.42(2H，m)，0.923(9H，s)，0.14(6H，s)；HPLC 4.9分鐘[92.0％(AUC)]；質(zhì)譜-ESI，m/z＝289.0(M-H-)。
實施例11合成蝦青素的雙-二甲基磷酸酯(XXVII).
HPLCWaters Symmetry C18，3μm，4.6×150mm，WAT200632，溫度25℃；流動相(A＝水；B＝10％DCM/MeOH)，10％A/90％B(起始)；線性梯度至100％B經(jīng)歷9分鐘；保持100％B經(jīng)歷11min，線性梯度至10％A/90％B經(jīng)歷1分鐘；流速1.0ml/分；檢測器波長474nm。
37℃下往在二氯甲烷中的蝦青素2E(500mg，0.84mmol)和甲基咪唑(0.50ml，6.27mmol)的混合物加入溴代磷酸二甲酯(2M，5.04mL)(Ding，2000)。24小時后，根據(jù)HPLC反應未完全，加入溴代磷酸二甲酯(2M，5.04mL)。48小時后，根據(jù)HPLC反應未完全，并加入溴代磷酸二甲酯(2M，5.04mL)。72小時后，根據(jù)HPLC反應完全。用二氯甲烷(20mL)稀釋反應物，并用水(20mL)終止反應。分離各層并再次用20mL二氯甲烷萃取水層。合并有機層，并在真空下濃縮得到2.69g(＞100％產(chǎn)率)。1H NMR(CDCl3)δ6.58-6.14(14H，m)，5.05-4.95(2H，m)，3.91-3.60(12H，m)，2.11-2.04(4H，m)，2.04-1.92(12H，m)，1.85(6H，s)，1.26(6H，s)，1.15(6H，s).HPLC4.29分鐘(86.7％AUC)).流動相A＝0.025％TFA，在H2O中；B＝0.025％TFA，在乙腈中，10％A/90％B(起始)；PDA檢測器474nm.+ESI，m/z＝813.62(M+1)。
實施例12合成蝦青素的BocProOH酯(XXVIII).
LC/MS分析在Agilent 1100 LC/MSD VL ESI系統(tǒng)上進行LC/MS分析，所述系統(tǒng)含有Zorbax Eclipse XDB-C18 Rapid Resolution4.6×75mm，3.5μM，USUT002736；溫度25℃；流動相(％A＝0.025％TFA，在H2O中；％B＝0.025％TFA，在MeCN中)，70％A/30％B(起始)；線性梯度至50％B經(jīng)歷5分鐘，線性梯度至98％B經(jīng)歷3分鐘，在98％B下保持17分鐘；流速1.0ml/分；起始壓力108巴；PDA檢測器470nm，373nm，214nm.LRMS+模式，ESI。
往在二氯甲烷(500mL)中的蝦青素2E(5.00g，8.38mmol)和BocProOH(10.8g，50.3mmol)的混合物加入4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(6.14g，50.3mmol)和1，3-二異丙基碳化二亞胺(DIC)(7.79mL，50.3mmol)。將混合物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜。16小時后，根據(jù)TLC反應完全。然后將混合物濃縮至干，并用100mL乙醚將粗殘余物漿化，通過硅藻土濾墊過濾。用硅膠(Et2O)對濾液進行快速色譜處理得到目標產(chǎn)物，為一種暗紅色固體(8.56g，＞100％產(chǎn)率)。LC17.5分鐘[23.1％AUC)]；18.2分鐘[45.1％(AUC)]；19.4分鐘[22.0％(AUC)].TLC(3∶2 EtOAc/己烷Rf0.51；Rf0.55；Rf0.59).MS+ESI，m/z＝1013.8(M+Na+)。
實施例13合成蝦青素的二脯氨酸酯的二鹽酸鹽(XXIX).
在氮氣氛下將乙醚(130mL)和EtOH(48.9mL，838mmol)的混合物冷卻至-78℃。30分鐘內(nèi)往冷卻的混合物滴加乙酰氯(82.0mL，838mmol)。從冷卻浴中移出反應物，并緩慢溫至室溫。將燒瓶內(nèi)容物傾入含有蝦青素的DiBocPro酯(XXVIII)(8.31g，8.38mmol)和攪拌棒的單獨的圓底燒瓶。用鋁箔覆蓋燒瓶，并將反應物在室溫和氮氣氛下攪拌過夜。16小時后，根據(jù)LC反應完全。標題化合物沉淀并用過濾法收集，用乙醚(3×100mL)洗并干燥(6.37g，88.0％粗產(chǎn)率，根據(jù)LC為75.2％純度).LC8.00分鐘[75.2％(AUC)].MS+ESI，m/z＝791.7(M+H+)。
實施例14合成葉黃素二琥珀酸酯(XXXII).
室溫下往在DCM(2mL)中的葉黃素(XXX)(0.010g，0.018mmol)的溶液加入DIPEA(0.063mL，0.360mmol)、琥珀酸酐(0.036g，0.360mmol)和DMAP(0.021g，0.176mmol)。
將反應混合物在室溫下攪拌48小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(6mL/1mL)終止反應，然后用DCM萃取。用Na2SO4干燥合并的有機層，并濃縮得到葉黃素二琥珀酸酯(XXXII)(93.09％)。HPLC保留時間11.765分鐘，93.09％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)769(M+)(24)，651(100)，且無可檢測的葉黃素。
實施例15合成玉米黃質(zhì)的琥珀酸酯(XXXIII，XXXIV).
(XXXIII和XXXIV)室溫下往在DCM(2mL)中的玉米黃質(zhì)(XXXI)(0.010g，0.018mmol)的溶液加入DIPEA(0.063ml，0.360mmol)、琥珀酸酐(0.036g，0.360mmol)和DMAP(0.021g，0.176mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌48小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(6mL/1mL)終止反應，然后用DCM萃取。用Na2SO4干燥合并的有機層，并濃縮得到玉米黃質(zhì)一琥珀酸酯(XXXIII)(2.86％)。HPLC保留時間12.207分鐘，2.86％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)669(M++H)(53)，668(M+)(100)，玉米黃質(zhì)二琥珀酸酯(XXXIV)(97.14％)HPLC保留時間11.788分鐘，67.42％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)792(M++Na)(42)，769(M+)(73)，651(100)；HPLC保留時間13.587分鐘，11.19％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)792(M++Na)(36)，769(M+)(38)，663(100)；HPLC保留時間13.894分鐘，18.53％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)769(M+)(62)，663(77)，651(100)，且無可檢測的玉米黃質(zhì)實施例16合成蝦青素的烏頭酸酯(XXXV，XXXVI)。
(XXXV和XXXVI)室溫下往在DCM/DMF(″N，N-二甲基甲酰胺″)(4ml/2mL)中的蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)的溶液加入DIPEA(0.878mL，5.04mmol)、順式烏頭酸酐(0.2622g，1.68mmol)和DMAP(0.4105g，3.36mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到烏頭酸一酯(XXXV)(13.25％)HPLC保留時間10.485分鐘，4.95％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)777(M++Na+2H)(57)，623(100)；HPLC保留時間10.722分鐘，8.30％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)777(M++Na+2H)(6)，709(100)，烏頭酸二酯(XXXVI)(27.67％)HPLC保留時間9.478分鐘，15.44％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)933(M++Na+2H)(10)，831(100)；HPLC保留時間9.730分鐘，12.23％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)913(M++4H)(4)，843(100)，和蝦青素(44.40％)。
實施例17合成蝦青素的檸檬酸酯(XXXVII，XXXVIII).
室溫下往在DCM(8mL)中的檸檬酸(0.5149g，2.86mmol)的懸浮液加入DIPEA(1.167mL，0.6.70mmol)、DIC(0.525mL，3.35mmol)、DMAP(0.4094g，3.35mmol)和蝦青素(0.200g，0.335mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1MHCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到檸檬酸一酯(XXXVII)(26.56％)HPLC保留時間9.786分鐘，17.35％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)773(M++3H)(14)，771(M++H)(100)；HPLC保留時間9.989分鐘，9.21％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)773(M++3H)(50)，771(M++H)(100)，檸檬酸二酯(XXXVIII)(7.81％)HPLC保留時間8.492分鐘，3.11％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)968(M++Na)(75)，967(100)，946(M++H)(37)；HPLC保留時間8.708分鐘，2.43％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)968(M++Na)(95)，946(M++H)(100)；HPLC保留時間8.952分鐘，2.27％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)946(M++H)(19)，500(100)，和蝦青素(21.26％)。
實施例18合成蝦青素的二甲基氨基丁酸一酯(XXXIX).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的4-(二甲基氨基)-丁酸鹽酸鹽(0.2816g，1.68mmol)的懸浮液加入DIPEA(0.878mL，5.04mmol)、HOBT(“1-羥基苯并三唑”)-H2O(0.3094g，2.02mmol)、DMAP(0.4105g，3.36mmol)和蝦青素(0.100g，0.168mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20ml/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到4-(二甲基氨基)丁酸一酯(XXXIX)(24.50％)HPLC保留時間9.476分鐘，20.32％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)732(M++Na)(13)，729(100)；HPLC保留時間9.725分鐘，4.18％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)732(M++Na)(50)，729(100)，和蝦青素(61.21％)。
實施例19合成蝦青素的谷胱甘肽一酯(L)。
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的還原谷胱甘肽(0.5163g，1.68mmol)的懸浮液加入DIPEA(0.878mL，5.04mmol)、HOBT-H2O(0.3094g，2.02mmol)、DMAP(0.4105g，3.36mmol)、DIC(0.316mL，2.02mmol)和蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1MHCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到谷胱甘肽一酯(L)(23.61％)HPLC保留時間9.488分鐘，16.64％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)886(M+)(13)，810(54)，766(100)；HPLC保留時間9.740分鐘，3.57％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)886(M+)(24)，590(78)，546(100)；HPLC保留時間9.997分鐘，3.40％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)886(M+)(25)，869(85)，507(100)，和蝦青素(68.17％)。
實施例20合成蝦青素的酒石酸二酯(LI).
室溫下往在DCM/DMF(5mL/5mL)中的(L)-酒石酸(0.4022g，2.68mmol)的懸浮液加入DIPEA(1.167mL，0.6.70mmol)、HOBT-H2O(0.5131g，3.35mmol)、DMAP(0.4094g，3.35mmol)和蝦青素2E(0.200g，0.335mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到酒石酸二酯(LI)(18.44％)HPLC保留時間9.484分鐘，14.33％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)884(M++Na+H)(100)，815(72)，614(72)；HPLC保留時間9.732分鐘，4.11％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)883(M++Na)(100)，539(72)，和蝦青素(67.11％)。
實施例21合成蝦青素二琥珀酸酯的山梨醇一酯(LII).
室溫下往在DMF(10mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.200g，0.251mmol)的溶液加入DIPEA(1.312mL，7.53mmol)、HOBT-H2O(0.4610g，3.01mmol)、DMAP(0.6133g，5.02mmol)和(D)-山梨醇(0.4572g，2.51mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到山梨醇一酯(LII)(3.52％)HPLC保留時間9.172分鐘，3.52％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)984(M++Na)(28)，503(100)，和蝦青素二琥珀酸酯(91.15％)。
實施例22合成蝦青素二琥珀酸酯的山梨醇二酯(LIII).

室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.656mL，3.76mmol)、HOBT-H2O(0.2313g，1.51mmol)、DMAP(0.3067g，2.51mmol)、DIC(0.236mL，1.51mmol)和(D)-山梨醇(0.2286g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到山梨醇二酯(LIII)(44.59％)HPLC保留時間8.178分鐘，11.58％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1148(M++Na)(40)，545(100)；HPLC保留時間8.298分鐘，33.01％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1148(M++Na)(20)，545(100)，并無可檢測的蝦青素二琥珀酸酯。
實施例23合成蝦青素的嗎啉氨基甲酸酯(LIV，LV).
(LIV和LV)室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)的溶液加入DIPEA(0.878mL，5.04mmol)、DMAP(0.4105g，3.36mmol)和4-嗎啉碳酰氯(0.196mL，1.68mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到4-嗎啉一氨基甲酸酯(LIV)(33.17％)HPLC保留時間11.853分鐘，29.01％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)710(M+)(100)；HPLC保留時間13.142分鐘，1.37％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)710(M+)(100)；HPLC保留時間13.383分鐘，2.79％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)710(M+)(100)，4-嗎啉二氨基甲酸酯(LV)(33.42％)HPLC保留時間12.049分鐘，29.71％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)824(M++H)(54)，823(M+)(100)；HPLC保留時間13.761分鐘，1.29％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)823(M+)(100)，692(75)；HPLC保留時間14.045分鐘，2.42％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)823(M+)(100)，692(8)，和蝦青素(22.10％)。
實施例24合成蝦青素的甘露醇一碳酸酯(LVII).
0℃下往在DCM(4mL)中的蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)的溶液加入DIPEA(0.585mL，3.36mmol)和1，2，2，2-四氯乙基氯甲酸酯(0.103mL，0.672mmol)。將反應混合物于0℃下攪拌2小時，在室溫下攪拌1.5小時，此時將(D)-甘露醇(0.3060g，1.68mmol)、DMF(3mL)和DMAP(0.2052g，1.68mmol)加到反應物。將反應混合物在室溫下攪拌24小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水(20mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到甘露醇一碳酸酯(LVII)(10.19％)HPLC保留時間9.474分鐘，10.19％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)827(M++Na)(50)，804(M+)(25)，725(58)，613(100)，和蝦青素(53.73％)。
實施例25合成蝦青素的(二甲基氨基)丁酸二酯(LVIII)。
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的4-(二甲基氨基)丁酸鹽酸鹽(0.2816g，1.68mmol)的懸浮液加入DIPEA(0.878ML，5.04mmol)、DMAP(0.4105g，3.36mmol)、HOBT-H2O(0.3094g，2.02mmol)、DIC(0.316mL，2.02mmol)和蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1MHCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到(二甲基氨基)丁酸二酯(LVIII)(77.70％)HPLC保留時間7.850分鐘，56.86％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)824(M++H)(64)，823(M+)(100)；HPLC保留時間8.443分鐘，3.87％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)823(M+)(5)，641(20)，520(100)；HPLC保留時間9.021分鐘，16.97％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)824(M++H)(58)，823(M+)(100)，且無可檢測的蝦青素。
實施例26合成蝦青素的芐基一醚(LIX).
0℃下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素2E(0.100g，0.168mmol)和芐基溴(0.400mL，3.36mmol)的溶液加入KHMDS(“雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鉀”)(6.72mL；0.5M，在甲苯中，3.36mmol)。將反應混合物于0℃下攪拌1小時，然后溫至室溫。將混合物于室溫下攪拌24小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到芐基一醚(LIX)(15.06％)HPLC保留時間12.705分鐘，15.06％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)686(M+)(93)，597(100)，和蝦青素(67.96％)。
實施例27合成蝦青素的甘露醇一醚(LX).
室溫下往在DCM(15mL)中的蝦青素2E(0.200g，0.335mmol)的溶液加入48％HBr(10mL)和H2O(30mL)。用DCM萃取水層，用Na2SO4干燥合并的有機層，并濃縮得到蝦青素的溴化物衍生物，為一種暗紅色油。室溫下往在DCM/DMF(6mL/6mL)中的粗溴化物的溶液加入DIPEA(1.58ML，9.09mmol)、DMAP(0.3702g，3.03mmol)和(D)-甘露醇(0.5520g，3.03mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌24小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到甘露醇一醚(LX)(4.40％)HPLC保留時間9.479分鐘，4.40％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)783(M++Na)(64)，710(66)，653(100)，和蝦青素(79.80％)。
實施例28合成蝦青素二琥珀酸酯的三(羥基甲基)氨基甲烷一酰胺(LXI).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.653mL，3.75mmol)、DMAP(0.3054g，2.50mmol)、HOBT-H2O(0.2297g，1.50mmol)和三(羥基甲基)氨基甲烷(0.1514g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到三(羥基甲基)氨基甲烷一酰胺(LXI)(4.40％)HPLC保留時間9.521分鐘，3.50％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)923(M++Na)(36)，900(M+)(80)，560(100)；HPLC保留時間9.693分鐘，0.90％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)923(M++Na)(11)，813(33)，500(100)，和蝦青素二琥珀酸酯(84.34％)。
實施例29合成蝦青素二琥珀酸酯的三(羥基甲基)氨基甲烷二酰胺(LXII).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.653mL，3.75mmol)、DMAP(0.3054g，2.50mmol)、HOBT-H2O(0.2297g，1.50mmol)、DIC(0.235ML，1.50mmol)和三(羥基甲基)氨基甲烷(0.1514g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到三(羥基甲基)氨基甲烷二酰胺(LXII)(66.51％)HPLC保留時間8.086分鐘，19.34％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1026(M++Na)(22)，1004(M++H)(84)，1003(M+)(100)，502(83)；HPLC保留時間8.715分鐘，47.17％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1004(M++H)(71)，1003(M+)(100)，986(62)，和蝦青素二琥珀酸酯(18.61％)。
實施例30合成蝦青素二琥珀酸酯的腺苷一酯(LXIII).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.653mL，3.75mmol)、DMAP(0.3054g，2.50mmol)、HOBT-H2O(0.1914g，1.25mmol)和(-)-腺苷(0.3341g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌48小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到腺苷一酯(LXIII)(21.13％)HPLC保留時間9.005分鐘，2.43％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1047(M++H)(36)，1046(M+)(57)，524(100)；HPLC保留時間9.178分鐘，10.92％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1047(M++H)(80)，1046(M+)(100)，829(56)，524(94)；HPLC保留時間9.930分鐘，7.78％(AUC)；LRMS(ESI)(相對強度)1046(M+)(100)，524(34)，和蝦青素二琥珀酸酯(58.54％)。
實施例31合成蝦青素二琥珀酸酯的麥芽糖二酯(LXIV).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.653mL，3.75mmol)、DMAP(0.3054g，2.50mmol)、HOBT-H2O(0.2297g，1.50mmol)、DIC(0.235mL，1.50mmol)和(D)-麥芽糖-H2O(0.4504g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌36小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1M HCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到麥芽糖二酯(LXIV)(25.22％)HPLC保留時間7.411分鐘，12.53％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1468(M++Na)(18)，1067(16)，827(100)；HPLC保留時間7.506分鐘，12.69％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1468(M++Na)(52)，827(76)，745(100)，和蝦青素二琥珀酸酯(22.58％)。
實施例32合成蝦青素二琥珀酸酯的白藜蘆醇酯(LXV，LXVI).
室溫下往在DCM/DMF(3mL/3mL)中的蝦青素二琥珀酸酯(XV)(0.100g，0.125mmol)的溶液加入DIPEA(0.653mL，3.75mmol)、DMAP(0.3054g，2.50mmol)、HOBT-H2O(0.2297g，1.50mmol)、DIC(0.235mL，1.50mmol)和白藜蘆醇(0.2853g，1.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌24小時，此時用DCM稀釋反應物，用鹽水/1MHCl(20mL/3mL)終止反應，然后用DCM萃取。將合并的有機層濃縮得到白藜蘆醇一酯(LXV)(1.12％)HPLC保留時間10.039分鐘，1.12％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1009(M++2H)(18)，1007(M+)(21)，637(100)，白藜蘆醇二酯(LXVI)(60.72％)HPLC保留時間10.324分鐘，15.68％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1217(M+)(28)，1007(100)，609(69)，504(85)；HPLC保留時間10.487分鐘，29.26％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1218(M++H)(80)，1217(M+)(100)，609(60)；HPLC保留時間10.666分鐘，15.78％(AUC)；LRMS(ESI)m/z(相對強度)1218(M++H)(84)，1217(M+)(100)，609(71)，且無可檢測的蝦青素二琥珀酸酯。
精確測定二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)的水溶性將總共30mg的樣品(二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物，為1∶2∶1比率的立體異構(gòu)體3S，3′S、內(nèi)消旋和3R，3′R的全反式混合物)加到在15mL玻璃離心管中的2mL無菌過濾的(0.2μM Millipore)去離子(DI)水。將管包在鋁箔中，并將混合物振蕩2小時，然后在3500rpm下離心10分鐘。將水溶液通過0.45微米PVDF可棄型過濾器過濾。然后將1ml體積的濾液用DI水適宜地稀釋，并在480nM下測定溶液的濃度，采用由新鮮樣品制備的四點校正曲線?？紤]稀釋后，二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的飽和溶液的濃度為8.64mg/mL。
抑制和/或改善疾病的實驗數(shù)據(jù)比較自由基-陽離子形成能力非酯化的游離蝦青素和二酸二琥珀酸酯蝦青素，使用閃光光解圖27和圖28描述在獲得關(guān)于非酯化的游離蝦青素和二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物的三重態(tài)和類胡蘿卜素陽離子自由基狀態(tài)形成的閃光光解之后的光譜分析結(jié)果。類胡蘿卜素陽離子自由基的形成是作為抗氧化劑的新衍生物的潛在生物物理行為的衡量指標。如果衍生物保持非酯化的游離蝦青素的抗氧化行為，則所有先前證實的(即文獻先例)關(guān)于蝦青素的治療應用可以合理地設(shè)想用于新衍生物，包括至少單線態(tài)氧猝滅、脂質(zhì)過氧化鏈斷裂和/或直接自由基清除。
直接照射類胡蘿卜素(car)不導致形成類胡蘿卜素三重態(tài)(3cars)；需要一種光敏劑。在此實驗中，將nitronaftalin(NN)用作光敏劑。照射后，受激的光敏劑(NN*)形成光敏劑三重態(tài)(3NN)。當3NN遭遇類胡蘿卜素時，發(fā)生與3NN的能量和電子轉(zhuǎn)移反應。通過特征性吸收譜帶來檢測所得的相對穩(wěn)定的3car和類胡蘿卜素陽離子自由基(car.+)。非極性溶劑(例如己烷)有利于3car的形成，而更具極性的溶劑(醇、水)有利于car.+的形成。光敏劑的陰離子自由基(NN.-)由于低吸收系數(shù)而不通?？吹健?br> A.蝦青素二琥珀酸(astaCOOH)的光譜在乙腈(MeCN)中的astaCOOH的瞬間吸收光譜，敏化劑NN.
光譜中的負峰證明NN和astaCOOH的基態(tài)消耗。550nm處的正峰表明形成astaCOOH三重態(tài)；850nm處的正峰表明形成astaCOOH陽離子自由基。3car衰變相當迅速。15μs后，一半的3car消失，50μs后，沒有3car剩余。car.+在此時間范圍內(nèi)是穩(wěn)定的。
B.參照化合物[非酯化的游離蝦青素(asta)]的光譜.
在乙腈(MeCN)中的asta的瞬間吸收光譜，敏化劑NN.
asta的光譜與astaCOOH的光譜接近相同。50μs后，3car已消失。在此時間范圍內(nèi)，car.+是穩(wěn)定的。關(guān)于astaCOOH和asta的吸收光譜中的負和正峰可重疊。
閃光光解結(jié)果簡要討論在閃光光解實驗期間二酸二琥珀酸酯蝦青素衍生物(astaCOOH)和非酯化的游離蝦青素(asta)之間似乎存在的差別很小。AstaCOOH在閃光光解實驗中的表現(xiàn)類似asta。因此，用琥珀酸將游離蝦青素酯化不改變光物理性能和陽離子自由基壽命。兩種化合物在閃光光解實驗期間都是光穩(wěn)定的。二琥珀酸酯蝦青素衍生物保持蝦青素的有效抗氧化潛能，并在酯化狀態(tài)下具有活性。因此可以將它看作一種“軟”藥物(作為經(jīng)修飾的實體有活性)，而不是前藥，用于治療應用，賦予此衍生物有價值的雙相自由基清除活性的性能(即水相和脂相自由基清除)。
誘導連接蛋白43蛋白表達Rogers等人(1990)詳細描述了關(guān)于細胞培養(yǎng)，Western印跡法、定量光密度分析和總蛋白評價的方法，Bertram(1999)提出了修改。簡言之，在4mL細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中用以下制劑處理小鼠胚胎成纖維細胞CH3/10T1/2細胞，培養(yǎng)基包含2％小牛血清1.TTNPB[p-(E)-2-(5，6，7，8-四氫-5，5，8，8-四甲基-2-萘基)丙烯基苯甲酸]10-8M，在丙酮中[關(guān)于連接蛋白43上調(diào)的陽性對照(4μl在4mL中)]2.二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/H2O，濃度10-5M(40μL在4mL中)3.二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/H2O，濃度10-6M(4μL在4mL中)4.二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/H2O，濃度10-7M(1∶10稀釋，4μL在4mL中)5.二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物H2O/乙醇[EtOH]配方，濃度10-5M(40μL在4mL中)6.二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物H2O/EtOH配方，濃度10-6M(4μL在4mL中)7.無菌H2O對照(40μL在4mL中)8.無菌H2O/EtOH對照(20μL EtOH，20μL H2O在4mL中)9.培養(yǎng)基對照(4mL)在用受試化合物和對照溶液培養(yǎng)96小時之后收集細胞。所有培養(yǎng)基溶液的顏色相同，但在用10-5稀釋的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物進行的兩種處理之后顏色主觀上變成橙紅色。用光顯微鏡發(fā)現(xiàn)TTNPB處理的細胞呈條紋狀，證明肌細胞分化，這是此細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的預期結(jié)果。在收獲并沉淀細胞之后，包含兩種10-5二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物溶液的管為亮紅色；兩種10-6稀釋管為粉紅色。如先前關(guān)于其它有色類胡蘿卜素所證實的，這是細胞攝入受試化合物的主觀證據(jù)。
然后溶解細胞，使50μg的各種蛋白在10％聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳。然后將凝膠轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素濾器。用考馬斯藍染色測定總蛋白(圖29；泳道6、7和9于凝膠轉(zhuǎn)移后變模糊，不包括在定量比較中[圖31])。用抗連接蛋白43抗體進行Western印跡法，然后在Biorad成像儀上進行HRP化學發(fā)光(圖30)。將原始凝膠剝離(stripped)一次，并重復Western印跡兩次，然后觀察。將結(jié)果相對于顯示對照條件(無受試化合物)下連接蛋白43蛋白的背景組成型表達的泳道8對照(EtOH/H2O)進行歸一化。由陽性對照和受試化合物導致的相對連接蛋白43誘導的結(jié)果如圖31所示。
Cx43結(jié)果簡要討論.
所有受試二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物制劑均誘導連接蛋白43表達超出在水和乙醇/水對照中組成表達的水平(圖31)。在不存在真實處理效果(無效假設(shè)對照μ1＝處理平均μ2)的情況下在5種分別單獨的試驗條件下檢測出誘導連接蛋白43蛋白表達的可能性為1/25或p＝0.03。在水中配制的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物在各試驗條件下均誘導連接蛋白43蛋白表達(從10-5至10-7M)。測試的最低二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/水組合的降低表明誘導的反應的劑量依賴性。
在用在培養(yǎng)基中的最終乙醇濃度為0.5％進行評價的單一試驗條件下相對誘導升高。這種發(fā)現(xiàn)高度提示此配方的生物利用度增加，因為已知乙醇減少水溶液中二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的聚集。在水中濃度大于10-7和在乙醇/水組合中濃度為10-5的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的溶液似乎具有比陽性TTNPB對照更高的誘導水平。TTNPB是一種高效力的類維生素A，它在96小時時間點以10-8M有效地誘導連接蛋白43表達。
二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物對小鼠成纖維細胞中細胞間間隙連接通訊(GJC)的誘導
進行一系列實驗以評價二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物誘導鼠成纖維細胞的無限增殖細胞系中的間隙連接通訊(GJC)的能力。進行研究(1)在功能水平，通過單層培養(yǎng)物中融合細胞之間的染料轉(zhuǎn)移增加衡量細胞/細胞通訊；(2)在分子水平，通過這些化合物誘導連接蛋白43(Cx43)蛋白表達的能力來測定。Cx43是允許GJC的這些成纖維細胞中細胞間通道的結(jié)構(gòu)單元；(3)在細胞水平，由二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物增加與相鄰細胞直接接觸的質(zhì)膜區(qū)域中的Cx43免疫反應性斑塊的數(shù)量和大小的能力所示。
(1)通訊分析。進行實驗以評價二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物[作為全反式(全E)立體異構(gòu)體、S，S′、內(nèi)消旋和R，R’1∶2∶1比率的統(tǒng)計混合物]增強小鼠胚胎成纖維細胞C3H/10T1/2細胞之間的間隙連接細胞間通訊(GJC)的能力。這種能力先前與類胡蘿卜素抑制致癌物誘導的腫瘤轉(zhuǎn)化的能力高度相關(guān)(Zhang，1992)。而且，Cx43介導的心肌細胞之間的連接通訊負責保持同步收縮和防止心律失常的信號的轉(zhuǎn)移(Peters，1995)。
基本如前述(Zhang，1994)通過將熒光染料熒光黃CH(Sigma，St.Louis，MO)顯微注射至個體融合細胞來分析連接通透性。簡言之，用以下試劑將C3H/10T1/2細胞的融合培養(yǎng)物處理4天(1)溶于1∶2乙醇/水(EtOH/H2O)配方的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(1×10-5M)；(2)溶于四氫呋喃的一種合成類維生素A-TTNPB(1×10-8M)，作為陽性對照；或(3)1∶2 EtOH/H2O處理的細胞，作為陰性對照。在相差鏡頭下鑒定各個培養(yǎng)皿中的單一細胞，并使用裝載作為10％溶液的熒光染料熒光黃的微注射針(Eppendorf，Hamburg，Germany)進行加壓注射。通過遙控顯微操作器來控制針，并將細胞和顯微鏡置于氣動抗振動臺上。通過用導致熒光黃發(fā)黃色熒光的UV光簡短照明來證明成功注射熒光黃。這種染料足夠小，以通過間隙連接，并且?guī)щ?，從而可以僅進入與注射細胞相鄰的細胞，如果它們處于連接通訊的話。在允許連接轉(zhuǎn)移的2分鐘后，在UV照明下采取數(shù)字圖象。與注射細胞相鄰的熒光細胞的數(shù)目之后通過使用無偏密度閾值方法和SigmaScan軟件程序(Jandel Scientific)進行數(shù)字圖像分析來確定。將該通訊細胞的數(shù)目用作連接通訊的指標，如前述(Hossain，1993)。
此分析的結(jié)果表明，溶于1∶2 EtOH/H2O配方的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(1×10-5M)有效增加連接通訊的程度，超過在1∶2EtOH/H2O處理的對照組中所見的程度。在22個顯微注射處理的細胞中，有15個(56％)通過間隙連接而功能性偶聯(lián)，相比之下對照細胞僅有11分之3(27％)。這些差別是統(tǒng)計學上有差異的(p＜0.04；配對的Student′st檢驗)。代表性顯微照片如圖14所示A組用濃度為1×10-5M的在1∶2 EtOH/H2O中的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物處理；C組1∶2 EtOH/H2O溶劑陰性對照；E組TTNPB，濃度為1×10-8M，在作為溶劑的四氫呋喃中，陽性對照；和B、D、F組分別數(shù)字分析顯微照片A、C、E，顯示在設(shè)置閾值以上的像素是熒光黃熒光陽性的。由于細胞核具有最大體積，它們蓄積最多熒光黃，并表現(xiàn)最大熒光。
(2)分子研究。二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的混合物和純化的對映異構(gòu)體形式的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(S，S′、內(nèi)消旋和R，R′形式，根據(jù)HPLC純度＞90％)增加鼠成纖維細胞中的Cx43蛋白的表達，它由基本如所述(Zhang，1992和1994)的免疫(Western)印跡法評價。簡言之，在補充5％胎牛血清(AtlantaBiologicals，Atlanta，GA)和25μg/mL硫酸慶大霉素(Sigma，St.Louis，MO)的含Earle鹽(Atlanta Biologicals，Atlanta，GA)的Eagle基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細胞C3H/10T1/2細胞，并在37℃下在5％CO2中培養(yǎng)。在100毫米(mm)平皿中接種后第7天，用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物將融合細胞處理4天，然后如所述地收獲細胞并分析Cx43蛋白誘導。根據(jù)制造商的指示用蛋白分析試劑盒(Pierce Chemical Co.，Rockford，IL)測定蛋白含量。通過Western印跡法，使用NuPage western印跡試劑盒和儀器(Invitrogen，Carlsbad，CA)分析包含100μg蛋白的細胞溶解產(chǎn)物，并用針對對應于小鼠、人和大鼠Cx43的C末端域的合成多肽產(chǎn)生的兔多克隆抗體(Zymed，San Francisco，CA)檢測Cx43蛋白。使用結(jié)合有HRP的抗兔二抗(Pierce Chemical Co.，Rockford，IL)通過化學發(fā)光來觀察Cx43免疫反應性條帶。用冷卻的CCD相機獲得數(shù)字圖像，然后進行定量光密度測定(Bio-Rad，Richmond，CA)。通過用考馬斯藍蛋白染料染色和數(shù)字圖像分析證明泳道的蛋白載量相同。
在此實驗中，將二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物以1∶2乙醇/H2O配方、濃度為1×10-5M加到細胞培養(yǎng)物。立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物和純化的對映異構(gòu)體形式表現(xiàn)出與單獨用1∶2乙醇/H2O處理的細胞培養(yǎng)物相比Cx43的表達增加(圖15A和圖15B)。用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物處理在所有受試衍生物中引起最高Cx43誘導水平。這些誘導水平比用包括在內(nèi)作為陽性對照的類維生素A四氫四甲基萘基丙烯基苯甲酸(TTNPB)(Hoffman-LaRoche，Nutley，NJ)和乙酸視黃酯(Sigma，St.Louis，MO)所見的誘導水平小數(shù)倍；這種相對效力差別與先前的研究一致。
(3)細胞研究。二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物在處理的鼠10T1/2細胞中在細胞/細胞接觸區(qū)域增加Cx43的裝配，與功能性間隙連接的形成一致。
在此實驗中，通過免疫熒光染色法評價Cx43的表達和裝配成斑塊。操作基本上如Zhang(1992)所述。簡言之，C3H/10T1/2細胞的融合培養(yǎng)物在Permanox塑料4室玻片(Nalge Nunc International，Naperville，IL)上生長，并用以下試劑處理4天(1)溶于1∶2EtOH/H2O配方的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物)；(2)在四氫呋喃中的濃度為1×10-8M的類維生素A TTNPB，作為陽性對照；或(3)1∶2 EtOH/H2O，作為溶劑對照。用-20℃甲醇將細胞固定過夜，用緩沖液洗滌，用在PBS中的1％牛血清白蛋白(Sigma，St，Louis，MO)封閉，如在以上(2)那樣用兔多克隆抗Cx43抗體(Zymed，San Francisco，CA)培養(yǎng)，并用結(jié)合Alexa568的抗兔二抗(MolecularProbes，Eugene，OR)檢測。用568nm光照射玻片，并在600nm波長下使用Zeiss Axioscope光學顯微鏡和Roper Scientific冷卻的CCD相機獲得圖像。
用TTNPB類維生素A對照和濃度為1×10-5M的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物處理的玻片表現(xiàn)出免疫反應性Cx43在與相鄰細胞直接接觸的細胞膜區(qū)域裝配成為斑塊。這種裝配與間隙連接的斑塊的位置和形成一致，已知所述斑塊是通過連接而關(guān)連的細胞群中多個單獨間隙連接聚集形成的(Perkins，1997)。在用作為對照的溶劑處理的培養(yǎng)物中，這種免疫反應斑塊是不常見的，并且比在用二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物或作為陽性對照的TTNPB處理的細胞中檢測到的斑塊要小。這些斑塊的頻率及其大小與在第1部分和圖14所述的熒光黃染料轉(zhuǎn)移實驗所檢測到的間隙連接通透性的功能差異(TTNPB＞二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物＞溶劑對照)一致，并與在第2部分和圖15所述的免疫印跡實驗中所檢測的Cx43誘導程度一致。代表性顯微照片如圖16所示。
鼠成纖維細胞中非酯化的游離蝦青素對致癌物誘導的腫瘤轉(zhuǎn)化的抑制在口服酯化的蝦青素之后在哺乳動物腸中產(chǎn)生非酯化的游離蝦青素。僅游離蝦青素在哺乳動物血漿和實體器官中發(fā)現(xiàn)。這在單一和多劑量口服藥代動力學研究中再次得到證明；結(jié)果如本文所述。血清白蛋白的固有酯酶活性以及血清和實體器官中混棲酯酶的作用在腸胃外施用二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)之后快速地產(chǎn)生非酯化的游離蝦青素。
閃光光解實驗也證明二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物和非酯化的游離蝦青素在類胡蘿卜素陽離子自由基形成方面具有相同的抗氧化行為。進行實驗來評價非酯化的游離蝦青素(二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)的體內(nèi)最終裂解產(chǎn)物，作為1∶2∶1比率的立體異構(gòu)體3S，3S′、內(nèi)消旋和3R，3′R的全反式混合物測試)在已故的CharlesHeidelberger的實驗室中開發(fā)的C3H10T1/2細胞培養(yǎng)模型(Reznikoff，1973)中抑制腫瘤轉(zhuǎn)化的能力。這種細胞培養(yǎng)體系顯示出有效地模擬在全動物腫瘤形成中的引發(fā)和轉(zhuǎn)化事件(Bertram，1985)。在這些細胞中，致癌性多環(huán)烴3-甲基膽蒽(MCA)處理在少部分處理的細胞中產(chǎn)生引發(fā)事件，在5周之后導致這些細胞發(fā)生形態(tài)轉(zhuǎn)化，表現(xiàn)為存在轉(zhuǎn)化的病灶。將這些轉(zhuǎn)化的細胞注射至同系小鼠導致在注射部位形成肉瘤，表明轉(zhuǎn)化的致癌性質(zhì)(Reznikoff，1973)。此試驗被改造為適于檢測癌癥預防劑(Bertram，1989)，而癌癥預防性類維生素A和類胡蘿卜素已證明可抑制此體系中的轉(zhuǎn)化(Bertram，1991；Pung，1988；和Merriman，1979)。
此實驗根據(jù)先前確立的方案(Bertram，1991和Pung，1988)進行。簡言之，將源自小鼠胚胎成纖維細胞的10T1/2細胞以103細胞/60mm平皿的密度接種在補充4％胎牛血清(Atlanta Biologicals，Atlanta，GA)和25μg/mL硫酸慶大霉素(Sigma，St.Louis，MO)的Eagle基本培養(yǎng)基(BME)(Atlanta Biologicals，Atlanta，GA)中。24小時后用在丙酮中的5.0μg/mL MCA(Sigma，St.Louis，MO)或作為對照的0.5％丙酮(最終濃度)處理細胞。在MCA處理后24小時更換培養(yǎng)基。7天后用在THF中的蝦青素或在丙酮中的乙酸視黃醇酯處理細胞，并每7天進行再處理，持續(xù)4周。用適宜的溶劑對照處理其它平皿。在實驗開始5周后，用甲醇固定細胞，并用10％吉姆沙染色劑(Sigma，St.Louis，MO)染色，并給II型和III型病灶評分(Reznikoff，1973)。
此分析的結(jié)果表明與用MCA和作為溶劑對照的THF處理的細胞相比用蝦青素處理4周導致MCA誘導的轉(zhuǎn)化病灶數(shù)量發(fā)生濃度依賴性減小(如圖34所述)。圖34描述非酯化的、游離蝦青素(作為立體異構(gòu)體的全反式混合物)對MCA誘導的腫瘤轉(zhuǎn)化的作用。圖代表總共68份用3×10-6M、1×10-6M和3×10-7M的蝦青素處理的培養(yǎng)物，它們分別在0.3％、0.1％和0.03％的THF載體中遞送。對照如下總共16平皿沒有接受致癌物，并用0.05％乙醇溶劑處理；對照沒有表現(xiàn)任何轉(zhuǎn)化事件?？偣?0個平皿用MCA和1％THF溶劑處理，產(chǎn)生0.92病灶/平皿的轉(zhuǎn)化率。與用MCA-處理的對照的各種處理的平均病灶/平皿比較來計算蝦青素處理的平皿的轉(zhuǎn)化降低百分率(％降低)。用配對的Student’st檢驗進行推理性統(tǒng)計，分別得到計算的P值為0.00004、0.00001、和0.00006。認為P＜0.05是顯著的。用3×10-6M蝦青素處理導致完全抑制轉(zhuǎn)化的表型(圖35)。圖35描述蝦青素處理的平皿與對照平皿的比較。代表性平皿用以下試劑處理A，無MCA，溶劑對照；B，MCA 5.0μg/mL，1％THF作為溶劑對照；C，MCA，在THF中的3×10-6M蝦青素(作為立體異構(gòu)體的全反式混合物)。值得注意的是這種抑制水平遠遠超過先前關(guān)于使用相同方案(Bertram，1991)測試的所有其它類胡蘿卜素報道的水平。比較目前的數(shù)據(jù)與先前在受試濃度下腫瘤轉(zhuǎn)化降低百分率所報道的數(shù)據(jù)表明，蝦青素是比β-胡蘿卜素或角黃素有效得多的轉(zhuǎn)化抑制劑(圖36)。圖36描述蝦青素(作為立體異構(gòu)體的混合物)與先前測試的類胡蘿卜素進行的比較。編輯數(shù)據(jù)，將用蝦青素處理的培養(yǎng)物中MCA-誘導的腫瘤轉(zhuǎn)化病灶/平皿的降低百分率與先前Bertram實驗室報道的在用β-胡蘿卜素和角黃素(Bertram，1991)采用相同的方案處理之后的數(shù)據(jù)得出的病灶/平皿的降低百分率進行比較。在此報道關(guān)于β-胡蘿卜素和角黃素在先前試驗的最高濃度(1×10-5M)下的降低百分率；對蝦青素沒有采用這種更高濃度，因為蝦青素在較低濃度下測定的活性較大。這些研究表明合成衍生物的裂解的蝦青素部分在口服和腸胃外給藥之后是高度有效的癌癥化學預防劑的潛能。結(jié)合本文還報道的肝蓄積藥代動力學數(shù)據(jù)(在單一和多劑量策略之后)，此化合物的應用構(gòu)成特別有用的實施方案。
抑制活性氧種類在實驗中，以Percoll梯度從人志愿者全血中分離嗜中性白細胞。然后將分離的嗜中性白細胞重懸在磷酸鹽緩沖鹽水中，并用佛波醇酯作最大刺激以誘導呼吸爆發(fā)和產(chǎn)生超氧化物陰離子。往活化的人嗜中性白細胞的溶液中加入不同濃度的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物，然后測定超氧化物信號[如用電子順磁共振(EPR)成像測定]。二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(作為立體異構(gòu)體的混合物)以依賴于劑量的方式減少測定的超氧化物陰離子信號(圖2)；在3mM濃度下實現(xiàn)近乎完全抑制超氧化物陰離子信號。圖2表明在對照組中活化之后強烈的超氧化物信號，以及用100μM-3mM的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物滴定的結(jié)果。在100μM下測試的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物清除28％的總信號。在3mM下，幾乎沒有超氧化物信號剩余。這些結(jié)果表明對上述的其它抗嗜中性白細胞干預所證實的在局部缺血-再灌注損傷中的心臟保護作用也可以用本文所述的新類胡蘿卜素衍生物實現(xiàn)。除了減少在局部缺血-再灌注損傷中重要的超氧化物陰離子信號之外，用所述的新類胡蘿卜素衍生物還可能實現(xiàn)心肌搶救，因為超氧化物陰離子在心肌局部缺血延長期間在組織損傷和死亡中起主要作用。
圖3描述二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/維生素C溶液對活性氧種類(超氧化物陰離子)的作用，這是用EPR成像監(jiān)測的。溶液分別包括大約2比大約1的維生素C和二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物的混合物。二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/維生素C溶液以依賴于劑量的方式降低測定的超氧化物陰離子信號(圖3)；在0.02μM濃度實現(xiàn)完全抑制超氧化物陰離子信號。圖3證明在對照組中活化之后的強超氧化物信號，以及用0.01μM-0.02μM的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物/維生素C溶液滴定的結(jié)果。
在第三個實驗中，再次以Percoll梯度從第二人志愿者的全血中分離嗜中性白細胞。然后將分離的嗜中性白細胞重懸在磷酸鹽緩沖鹽水中，并用佛波醇酯作最大刺激以誘導呼吸爆發(fā)和產(chǎn)生超氧化物陰離子。往活化的人嗜中性白細胞的溶液加入4種濃度的鹽酸鹽二賴氨酸酯蝦青素衍生物(XX)，然后測定超氧化物信號(用EPR成像測定)。鹽酸鹽二賴氨酸酯蝦青素衍生物也以依賴于劑量的方式減少測定的超氧化物陰離子信號(圖21)，從在1μM下減少大約5％至在3mM下減少98％。再次在3mM濃度下實現(xiàn)接近完全地抑制超氧化物陰離子信號。這種新的類胡蘿卜素衍生物在低濃度(1μM)下表現(xiàn)出清除效力，以及增加濃度的該衍生物在此體外試驗中接近完全地消除超氧化物陰離子信號的能力。
這種新衍生物在體外作為水性清除劑的活性再次表明新衍生物(二鈉二琥珀酸酯蝦青素，鹽酸鹽二賴氨酸蝦青素)在體內(nèi)將充當軟藥物(即作為完整、未裂解的新衍生物有活性)而不是前藥(不具有活性，直至裂解成游離蝦青素)。此衍生物(XX)的水溶性大于50mg/mL，表明本發(fā)明方法可用于增加母體類胡蘿卜素(在此情況下為蝦青素)的水溶性，從接近零的固有水溶性增加至高mg/mL范圍。
二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物導致的直接超氧化物陰離子清除通過電子順磁共振成像法表明的各立體異構(gòu)體相對于立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物的相對效力材料非酯化的全E蝦青素[立體異構(gòu)體3S，3′S、內(nèi)消旋(3S，3′R和3′S，3R)和3R，3′R的1∶2∶1統(tǒng)計混合物]購自Buckton Scott(India)，并如提供的那樣使用(HPLC表明＞95％純度)。將蝦青素溶于HPLC級二甲亞砜(DMSO；Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)。以9種配方分別單獨測試蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物(關(guān)于蝦青素，上述，全E的1∶2∶1混合物；在所有的表和圖中標記為“混合物”)；3S，3′S和3R，3′R(光學異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體)；和內(nèi)消旋(3S，3′R和3′S，3R的混合物；對映異構(gòu)體對的非對映異構(gòu)體)。所有二琥珀酸酯衍生物合成純度根據(jù)HPLC＞90％。首先在來自10mM儲備溶液的在純水溶液(去離子水)中適宜的最終濃度下測試二琥珀酸酯衍生物。然后由在乙醇的1∶2混合物中以10mM制備的儲備溶液(儲備溶液中EtOH的最終濃度33％；分離的嗜中性白細胞試驗中的最終濃度0.3％；HPLC級乙醇，Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)測試4種二琥珀酸酯衍生物中的每一種。還由50％ EtOH濃度的儲備溶液(在分離的嗜中性白細胞試驗中的最終濃度0.5％)測試3S，3′S衍生物。二琥珀酸酯衍生物的乙醇配方表現(xiàn)出完全解聚在純水溶液中形成的超分子裝配體，提供衍生物的單體溶液，然后立即引入試驗。還進行單獨乙醇的陰性對照(在分離的嗜中性白細胞試驗中為0.3％和0.5％最終EtOH濃度)和超氧化物歧化酶模擬陽性對照(10μM最終濃度；MetaphorePharmaceuticals，Inc.，St.Louis，MO)。
合成類胡蘿卜素衍生物[琥珀酸一-(4-{18-[4-(3-羧基-丙酰氧基)-2，6，6-三甲基-3-氧代-環(huán)己-1-烯基]-3，7，12，16-四甲基-十八烷-1，3，5，7，9，11，13，15，17-壬烯基}-3，5，5-三甲基-2-氧代-環(huán)己-3-烯基)酯；圖17]及其立體異構(gòu)形式，蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物，全反式(全-E)形式。所述衍生物為在3和3′碳位置具有2個手性中心的對稱手性分子，包含4種立體異構(gòu)體3R，3′R和3S，3′S(光學異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體)，以及非對映異構(gòu)體內(nèi)消旋形式(3R，3′S和3′R，3S)。由商業(yè)來源的蝦青素合成的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物包含1∶2∶1比率的3R，3′R、內(nèi)消旋(3R，3′S和3′R，3S)和3S，3′S立體異構(gòu)形式。所有單獨的立體異構(gòu)體和統(tǒng)計混合物根據(jù)HPLC合成純度＞90％，允許直接比較這些形式作為直接自由基清除劑的個體效力。用于此研究的全-E形式立體異構(gòu)體是線性、剛性分子(bolaamphiphiles)，因為在間隔物的多烯鏈中缺乏順式(或Z)構(gòu)型。
蝦青素的二鈉二琥珀酸二酯相對于母體化合物蝦青素表現(xiàn)出水“分散性”增大。各立體異構(gòu)體和統(tǒng)計混合物的水分散性都大于8mg/mL(大約10mM)，使它們可被引入不含助溶劑的緩沖水性試驗體系。對于在本研究中測試的衍生物也觀察到母體類胡蘿卜素如蝦青素(Salares，1977)以及新類胡蘿卜素衍生物(例如辣椒紅衍生物)(Zsila，2001和Bikadi，2002)在水溶液中形成超分子裝配體的趨勢。
超分子自我裝配導致水溶液中相當大的聚集體，并阻止聚集分子與自由基種類的最大直接相互作用。因此，在純水性配方和含有助溶劑乙醇的配方中比較新蝦青素衍生物的直接清除表現(xiàn)。在儲備溶液中，1∶2濃度的EtOH/水表現(xiàn)出完全解聚統(tǒng)計混合物、內(nèi)消旋和3R，3′R衍生物；需要50％乙醇儲備溶液來完全解聚3S，3′S異構(gòu)體。還相對于陰性(即乙醇載體)和陽性[超氧化物歧化酶(SOD)模擬物，游離外消旋蝦青素，在DMSO中]對照測定化合物的清除能力。
白細胞純化和制備通過Percoll密度梯度離心從新鮮取樣的單一志愿者的靜脈血(S.F.L.)中分離人多形核白細胞(PMNs)，產(chǎn)生PMN純度為＞95％。
將各10mL全血與0.8mL 0.1M EDTA和25mL鹽水混合。將稀釋的血液鋪于1.080g/mL特定密度的9mL Percoll上。在400×g和20℃下離心20分鐘后，移出血漿、單核細胞和Percoll層。通過加入18mL冰冷的水30秒，然后加入2mL 10×PIPES緩沖液(25mM PIPES，110mM NaCl和5mM KCl，用NaOH滴定至pH 7.4)溶解紅細胞。在4℃下將細胞沉淀，傾析上清液，并重復此過程。在第二次低滲溶解之后，用PAG緩沖液(PIPES緩沖液，包含0.003％人血清白蛋白和0.1％葡萄糖)洗滌細胞兩次。然后，通過在血細胞計數(shù)器上進行光學顯微鏡檢查來計數(shù)PMN。然后將最終的沉淀懸浮在PAG-CM緩沖液(PAG緩沖液，含有1mM CaCl2和1mM MgCl2)中。
EPR測定所有EPR測定使用在X-譜帶以TM110腔操作的Bruker ER300 EPR光譜計進行。微波頻率用Model 575微波計數(shù)器(EIP Microwave，Inc.，San Jose，CA)測定。為測定佛波醇-酯(PMA)刺激的PMN產(chǎn)生O-2，用10mM的DEPMPO(Oxis，Portland，OR)進行EPR自旋-捕集研究。用PMA(1ng/mL)刺激1×106PMNs，并將其裝填至毛細管以進行EPR測定。為測定在DMSO中的非酯化的游離“外消旋”蝦青素和在9種配方之每種中的二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物的自由基清除能力，將PMN與化合物預溫育5分鐘，然后如前述進行PMA刺激。用于自旋-捕集實驗的儀器設(shè)置如下調(diào)節(jié)幅度，0.32G；時間常數(shù)，0.16s；掃描時間，60s；調(diào)節(jié)頻率，100kHz；微波功率，20毫瓦；和微波頻率，9.76GHz。將樣品置于石英EPR扁平室中，并記錄光譜。如報道那樣鑒定光譜中的組成信號并進行定量(Lee，2000)。
統(tǒng)計分析用NCSS統(tǒng)計軟件包(NCSS 2001和PASS 2002，Kaysville，UT)進行統(tǒng)計分析。所有統(tǒng)計學檢驗在α＝0.05下進行。
EPR結(jié)果簡述在研究開始時將由Metaphore，Inc.生產(chǎn)的有效SOD模擬物用作陽性對照。如在Zweier實驗室反復觀察到的，在僅僅水載體中的10μM劑量近乎完全消除超氧化物陰離子信號，如用DEPMPO檢測(97％抑制；表1)。還評價了單獨乙醇的陰性對照(最終濃度0.3％)，因為乙醇在這些體系中表現(xiàn)出較小清除活性；在此濃度下看到5.7％抑制作用。在表1的描述數(shù)據(jù)中，沒有從包含乙醇的配方中扣除該抑制量，因為在此研究中評價給藥載體本身(在EtOH中的二鈉二琥珀酸酯衍生物)在直接清除中的效用。評價在DMSO中的非酯化的游離蝦青素(100μM)作為與此研究中合成的新衍生物進行直接比較的參照標準；蝦青素/DMSO載體的平均抑制作用為28％(表1)。
圖18顯示最終濃度為100μM的在水中的4種立體異構(gòu)體(混合物和3種單獨的立體異構(gòu)體)中每一種的相對清除能力。除了3R，3′R對映異構(gòu)體(28.7％抑制)，所有其它新衍生物配方表現(xiàn)出相對于蝦青素/DMSO配方降低的清除能力(范圍-2.0％至19.3％抑制；表1)?？梢钥闯觯?S，3′S配方?jīng)]有表現(xiàn)出任何平均清除活性。但是，當在乙醇配方中引入到分離的嗜中性白細胞試驗體系中時，在每種情況下清除活性增大超過在水中配制的相同衍生物(圖19；范圍38.0％-42.5％)。重要的是注意到3S，3′S衍生物在50％EtOH中配制以進行這種比較。觀察到在乙醇配方中的新衍生物清除能力增加超過在DMSO中的蝦青素的趨勢，但在扣除乙醇載體(在試驗中的最終濃度為0.3％)的平均清除能力之后，該趨勢不明顯(NS)。此外，在乙醇中的4種受試的新衍生物制劑之間沒有觀察到平均清除能力的顯著差異(圖19)。
圖20表明增加濃度的在乙醇配方中的二鈉二琥珀酸酯蝦青素的立體異構(gòu)體的混合物對超氧化物信號抑制的滴定結(jié)果。當濃度從100μM增至3mM時，觀察到對超氧化物信號接近完全的抑制作用(在3mM劑量下為95.0％抑制；表1和圖18)。劑量-反應曲線是非線性的。對抑制百分率和測試劑量進行調(diào)整，二鈉二琥珀酸酯衍生物比在本研究中用作陽性對照的SOD模擬物的效力低1至2個數(shù)量級(表1)。表1描述在本研究中測試的蝦青素的二鈉二琥珀酸酯衍生物的不同配方的描述統(tǒng)計。各個配方評價的樣本大小為3或更大，除了在50％EtOH儲備溶液中的3S，3′S(N＝2)，和在研究開始時評價的SOD模擬物(陽性對照，N＝1)。
表1
EPR結(jié)果簡述蝦青素是一種有效的親脂性抗氧化劑，它通常在富含脂質(zhì)的細胞膜、脂蛋白和其它組織中發(fā)揮其抗氧化性能(Britton，1995)。作為水分散性活性劑效用增大的蝦青素的衍生物具有直接清除由在呼吸爆發(fā)刺激之后分離的人嗜中性白細胞產(chǎn)生的水相超氧化物陰離子的能力。
新衍生物的純水性配方在直接清除能力方面的效力小于乙醇配方。在某些溶劑(例如水)中水溶性類胡蘿卜素衍生物的超分子裝配可以解釋它們在這些溶劑中效力的缺乏。所述聚集是螺旋狀、“card-pack”類型，在純水性溶液中形成大小超過240nm的聚集物。增加緩沖液的離子強度可以增加這些聚集體的大小和穩(wěn)定性。這些聚集體的自由基清除能力與相同化合物的單體溶液相比減小；實際上，對于溶于水的3S，3′S立體異構(gòu)體沒有見到清除能力(表1，圖18)。必須小心地制備用于體外和體內(nèi)試驗的配方，因為超分子裝配限制可與自由基種類相互作用的分子的數(shù)量。聚集體的大小也必須考慮，已經(jīng)描述了包含多至106個分子和尺寸達到300nm或更大的聚集體(Bakadi，2002)。
滴定二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物劑量至3mM(作為在1∶2 EtOH/水中的立體異構(gòu)體的混合物)表現(xiàn)出接近完全抑制超氧化物陰離子信號(95％抑制)，如用DEPMPO自旋肼測定(圖20)。劑量-反應曲線是非線性的，要求增加劑量以接近完全抑制自由基信號(圖20)。在最低測試濃度(100μM)下抑制近40％的信號。此劑量下二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的效力可以直接與用作本研究中的陽性對照的超氧化物歧化酶(SOD)模擬物(在10μM為97％抑制)進行比較。這些結(jié)果表明，作為水相自由基清除劑，二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物比SOD模擬物的效力小1至2個數(shù)量級。但是，在體內(nèi)這些衍生物衰變成游離蝦青素，其在富含脂質(zhì)的細胞膜[包括線粒體膜和核膜(Goto，2001)]中變得具有活性，因而提供雙重保護作用(水相和脂相自由基清除)，這是用水溶性蛋白和酶模擬物不能實現(xiàn)的。非酯化的游離蝦青素(當以0.02％食物wt/wt作為飲食補充物提供時)具有抗ROS介導的對骨骼肌和心肌的艱苦運動損害的心臟保護作用(Aoi等人2003)。因此，這種特征(即雙相自由基清除)應該使此類化合物可額外地用作自由基和活性氧種類預防是重要的適應癥中的臨床治療劑(Cross，1987)。
此研究第一次證明由EPR光譜學檢測到的一類新的類胡蘿卜素衍生物對超氧化物陰離子的直接清除。發(fā)現(xiàn)所述化合物在純水溶液中形成超分子裝配體。相對于相同化合物的單體溶液，超分子裝配體的形成可能限制它們的清除效力。在所述新化合物的4種潛在的立體異構(gòu)體中沒有看到清除能力的顯著差異。劑量-范圍研究表明衍生物的濃度可以增加至接近完全抑制誘導的超氧化物陰離子信號。作為潛在的體內(nèi)治療劑，這類化合物可以用作水相和脂相清除劑，從而可以廣泛地用于有效的自由基清除劑對其具有經(jīng)證實的效力的急性和慢性疾病。二鈉二琥珀酸酯二維生素C蝦青素衍生物導致的直接超氧化物陰離子清除在電子順磁共振(EPR)成像實驗中，以Percoll梯度從人志愿者全血中分離嗜中性白細胞。然后將分離的嗜中性白細胞重懸在磷酸鹽緩沖鹽水中，并用佛波醇酯作最大刺激以誘導呼吸爆發(fā)和產(chǎn)生超氧化物陰離子。往活化的人嗜中性白細胞的溶液加入不同濃度的二鈉二琥珀酸酯二維生素C蝦青素衍生物(XXIII)(半系統(tǒng)命名琥珀酸4-[18-(4-{3-[2-(3，4-二羥基-5-氧代-2，5-二氫呋喃-2-基)-2-羥基-乙氧基羰基]-丙酰氧基}-2，6，6-三甲基-2-氧代-環(huán)己-1-烯基)-3，7，12，16-四甲基-十八烷-1，3，5，7，9，11，13，15，17-壬烯基]-3，5，5-三甲基-2-氧代-環(huán)己-3-烯基酯2-(3，4-二羥基-5-氧代-2，5-二氫呋喃-2-基)-2-羥基-乙基酯)，然后測定超氧化物信號(如用EPR成像測定)。二鈉二琥珀酸酯二維生素C蝦青素衍生物(XXIII)以依賴于劑量的方式減少測定的超氧化物陰離子信號(圖33)；在60μM濃度下實現(xiàn)完全抑制超氧化物陰離子信號。這代表效力比同樣合成用于本系列實驗的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)增加50倍。測試的衍生物的純度為88％(通過HPLC曲線下面積或AUC確定)。該新的類胡蘿卜素衍生物-通過對各維生素C的6-OH位置進行酯化而設(shè)計成“軟藥物”-保持單獨維生素C分子的抗氧化功能。衍生物(XXIII)的效力接近1∶2摩爾比的二鈉二琥珀酸酯蝦青素(XVI)和游離維生素C的配方的效力(其以20μM/40μM二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)/游離維生素C配方完全抑制超氧化物陰離子信號)。每摩爾的衍生物在體內(nèi)產(chǎn)生2摩爾游離維生素C和1摩爾非酯化的游離蝦青素的衍生物(XXIII)特別優(yōu)選用于某些臨床適應癥。衍生物(XXIII)還可能在這些臨床情況下表現(xiàn)效力增加其中水相清除(通過完整母體衍生物以及游離維生素C)和脂相清除(通過非酯化的游離蝦青素)對于可歸因于ROS和其它自由基種類損傷的病理情況的減少是重要的。
雄性Sprague-Dawley大鼠中的梗塞大小減小圖4、圖25和圖26描述雄性Sprague-Dawley大鼠中梗塞大小的減小。用在水溶液中的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物(作為立體異構(gòu)體的混合物)預處理雄性Sprague-Dawley大鼠，然后進行閉塞并誘導心肌梗塞。用100mg/kg仲丁硫巴比妥麻醉雄性Sprague-Dawley大鼠(175-200克s)，進行器械操作，并暴露心臟。環(huán)繞左冠狀動脈周圍放置縫線，并進行30分鐘的總冠狀動脈閉塞，然后進行2小時再灌注，此時從動物上切離心臟測定梗塞大小。用緩沖液洗滌心臟，并用保持在37℃下的在pH 7.40的磷酸鹽緩沖液中的三苯基四唑翁氯化物(TTC)染色溶液培養(yǎng)。梗塞大小(IS)表示為占危險面積的％(IS/AAR，％)。在整個實驗過程中監(jiān)測系統(tǒng)血壓、心率、血氣和體溫，并將體溫和血氣嚴格控制在正常生理水平。通過為期4天每天尾靜脈注射I.V.給藥25、50或75mg/kg的二鈉鹽二琥珀酸酯蝦青素衍生物或無菌鹽水載體，然后進行梗塞實驗和測定梗塞大小。
搶救結(jié)果簡述.
梗塞大小減小和相應的心肌搶救隨劑量呈線性和明顯地增加(P＝0.001**)。在最大受試劑量75mg/kg下，平均心肌搶救為56％，它接近用局部缺血預處理策略可獲得的搶救率。在測試更高劑量前對在此大鼠中進行單一劑量I.V.注射有體積限制；但是非酯化的游離血漿水平的蝦青素和IS/AAR％之間的顯著的線性相關(guān)性(P＜0.001**；r2＝0.67)表明在大約120-125mg/kg的劑量下可實現(xiàn)100％搶救。這第一次證明新類胡蘿卜素衍生物的心臟保護作用。
口服二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的藥代動力學、增加的生物利用度和增加的靶組織分布血漿藥代動力學在雄性C57BL/6小鼠上測定二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的單一劑量口服藥代動力學參數(shù)(包括Cmax、Tmax、AUC(0-72)Vd和清除率)。以在先前研究中顯示出可有效預防Sprague-Dawley大鼠中CCl4給藥之后繼發(fā)的損傷(在這些研究中為100mg/kg體重)的單一最大劑量(500mg/kg)給動物口服衍生物。在以下時間點，從每個時間點至少3只動物獲得用于HPLC分析血漿和肝中游離蝦青素水平的樣品時間0[在受試化合物給藥之前即時進行]、攝入后2、4、6、8、12、16、24、48和72小時。
以其它間隔(10、14和36小時；表2和3)取N＜3的附加的樣品。在此研究中當類胡蘿卜素酯在哺乳動物腸中完全裂解成游離類胡蘿卜素，其被動移動通過腸細胞時測定非酯化的游離蝦青素水平。
實驗方法簡述血漿藥代動力學將雄性C57BL/6小鼠，大約25g，關(guān)養(yǎng)在籠中(3只小鼠/籠)，并自由進食標準小鼠食物(Purina Mouse Chow，Ralston Purina，St.Louis)和水，持續(xù)至少5天，然后開始實驗。將二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物與以下組分混合以制備適于經(jīng)口管飼的乳液●無菌過濾(0.2微米Millipore)水；●橄欖油(Bertolli USA，Inc.，Secaucus，NJ)；●大豆卵磷脂，IV-S型(Sigma-Aldrich Co.，St.Louis，MO；目錄號P3644)。
二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物在純水性配方中表現(xiàn)出大約8.64mg/mL的水溶性。在上述乳液中，溶解度增至大約50mg/mL，允許在這些動物中通過管飼法服藥多達500mg/kg。這種在給藥載體中溶解度顯著增加6倍大大利于這些小鼠的管飼法研究。
用于制備乳液的方法如下(1)將80mg大豆卵磷脂(Sigma catalog P3644)加到5.0mL水。在15mL離心管中間歇地渦旋混合大約30分鐘直至懸浮液均一；(2)室溫下加入2.5mL橄欖油并渦旋混合。這產(chǎn)生均一、稠厚、渾濁的黃色懸浮液。這種乳液物質(zhì)可以在室溫或4℃冰箱中儲存。如果儲存的話，在第3步(以下)加入二鈉二琥珀酸酯衍生物之前即刻渦旋混合；(3)將50mg/mL的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物直接加到乳液。此濃度下該化合物容易地進入均一懸浮液。渦旋混合然后立即進行管飼以確保均一懸浮液；和(4)所述物質(zhì)具有堵塞小鼠管飼針的可能性。在每2次管飼之后沖洗管飼針。
通過經(jīng)口管飼法以500mg/kg體重單一劑量施用乳液。在實驗之前的晚上從所有籠中撤出食物。在施用乳液后1小時，對所有動物恢復食物和水。
用于全血和組織取樣、樣品提取和HPLC分析的方法已作了詳述(Osterlie，2000)。簡言之，將全血收集在包含EDTA的Vacutainer管中，然后通過在4℃，1500×g下離心20分鐘來制備血漿。隨后將血漿樣品等分試樣化，并在液氮中快速冷凍，然后轉(zhuǎn)運并進行HPLC分析。
組織蓄積還在與血漿樣品相同的時間點測定肝中的游離蝦青素濃度。處死后從藥代動力學研究的各只動物中取出肝臟，并在液氮中快速冷凍。如所述(Jewell，1999)制備用于HPLC分析的肝組織。因此，在與血漿分析相同的時間點同時檢查游離蝦青素的肝蓄積。
實驗方法簡述游離蝦青素的肝蓄積在液氮中快速冷凍來自各只動物的至多300mg肝。用氯仿/甲醇/水的混合物，根據(jù)Jewell的方法(1999)進行組織勻漿和提取。然后如以上關(guān)于血漿樣品所述通過HPLC法評價肝中非酯化的游離蝦青素蓄積。
藥代動力學結(jié)果簡述在適宜的取樣間隔時間的游離蝦青素的血漿和肝水平的總結(jié)表如表2和3所示。血漿和肝非酯化的游離蝦青素曲線下面積vs.時間(AUC′s)也包括在表2和3中。這些結(jié)果表明，對于各取樣間隔，肝中游離蝦青素水平相同或大于在血漿中的水平。這一改善的組織特異性遞送至肝在文獻中是沒有先例的；實際上游離蝦青素的肝水平通常低于在給藥后相同時間點血漿中的相應水平(Kurihara，2002)。因此，在上述乳液中的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物是用于在口服之后遞送治療濃度的游離類胡蘿卜素至感興趣組織的優(yōu)異載體。
表2非酯化的游離蝦青素的血漿水平
表3非酯化的游離蝦青素的肝水平
當在口服載體或食物中提供類胡蘿卜素如蝦青素時通常需要進行預處理(15天至6周)以在肝損傷研究中實現(xiàn)有效水平(Kang，2001；Kim，1997；Aoi等人1993)。在此情況下，用單一劑量實現(xiàn)治療水平(200nm或以上)。
0.9mg/L的Cmax(表4)在嚙齒動物中也是空前的，這些動物僅吸收小百分比的口服劑量的類胡蘿卜素。游離類胡蘿卜素的這些血漿和肝水平是在僅僅服用在乳液載體中的單一劑量化合物之后就獲得的，這一點是有意義的。在人中，Osterlie等人(2000)已描述在單一劑量100mg(大約1.1mg/kg口服劑量)在橄欖油載體中的非酯化的游離蝦青素之后的Cmax血漿水平為1.3mg/L。當在脂肪載體中提供時人通常吸收40-50％口服劑量的類胡蘿卜素，相比之下嚙齒動物只有少數(shù)幾個百分點。因此，本研究證明，用為嚙齒動物研制的乳液載體達到了人中Cmax的近70％，從而大大增加此衍生物用于肝保護研究的有用性。
表4pK參數(shù)
*最大濃度**最大濃度的時間***曲線下面積腸胃外施用CardaxTM(二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物)之后兔中實驗性梗塞大小和C-反應蛋白的循環(huán)水平的降低用Barrett等人(2002)等人的方法并進行細微修改來研究腸胃外施用二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)對兔中誘導的梗塞大小減小和誘導的循環(huán)C-反應蛋白(CRP)水平的影響。本研究的目的在于調(diào)查二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(XVI)減輕炎癥的能力，這是在兔心臟中在實驗性心肌局部缺血/再灌注損傷情境下通過CRP測定的。已提出常用作急性炎性(“急性期”)反應的標志的CRP可能實際上具有通過活化補體級聯(lián)而介導的促炎效果。伴隨氧自由基(ROS)形成增加的心肌局部缺血/再灌注損傷已表現(xiàn)出可活化補體系統(tǒng)。在該體系中已證明(1)繼發(fā)于遠端炎性病損的血漿CRP的內(nèi)源性增加與繼發(fā)于區(qū)域局部缺血和再灌注的心肌組織損傷的增加有關(guān)；(2)這種損傷的增加(表現(xiàn)為梗塞大小增加)是由補體活性介導的；和(3)CRP是一種“效應物，而不僅是系統(tǒng)性炎癥的間接度量。因此，循環(huán)CRP水平降低，和先前用CardaxTM在嚙齒動物中所見的梗塞大小減小一起，形成急性冠脈綜合征情境中的有力抗炎治療療法。
簡言之，將雄性新西蘭白兔(2.25-2.5kg)用于此研究。通過皮下注射4個等分試樣(各0.5mL)在玉米油中的1％巴豆油來誘導急性期炎性反應，所述注射開始于用CardaxTM進行預處理的第二天。每天施用一次在水或等體積的無菌鹽水中的CardaxTM(50mg/kg IV，通過耳靜脈注射)，持續(xù)4天，然后在第5天完成實驗性梗塞形成。如前述(Barret等人2002)，使用基于ELISA的方法，用抗兔CRP抗體得到循環(huán)CRP水平增加的時間進程。在實驗的最后一天(第5天在最后一次藥物灌輸之后大約24小時)，使用甲苯噻嗪(3mg/kg)和氯胺酮(35mg/kg)的混合物，然后肌內(nèi)使用戊巴比妥(90mg/kg)麻醉兔。需要時再施用戊巴比妥以保持麻醉。在氣管切開術(shù)之后，用室內(nèi)空氣給兔子通氣，并通過左開胸術(shù)暴露心臟。然后將心臟支承在心包支架中，并將3-0絲結(jié)扎線放置在冠狀動脈左前降支周圍。通過往對結(jié)扎線加牽引力而將動脈閉塞30分鐘，然后再灌注180分鐘。在完成此方案之前刻即獲得靜脈血樣以測定血漿CRP。
在該方案的再灌注期完成時，取出心臟，并在Langendorff灌注儀器上通過主動脈插入導管。然后用改良的Krebs-Henseleit緩沖液再灌注心臟10-15分鐘(20-25mL/分)。在此段時間結(jié)束時，用80mL0.4％2，3，5-三苯基四唑翁氯化物(TTC)在37℃下灌注心臟以確定危險區(qū)域(AAR)。然后在與外科制備/實驗梗塞形成期間相同的區(qū)域結(jié)扎冠狀動脈左回旋支。此時，停止灌注泵，并通過與主動脈套管連接的側(cè)口將3.0mL Evan藍染料緩慢注射入心臟。使所述溶液分布至整個心臟大約30秒。然后與垂直軸成直角將心臟切成六個橫向部分。棄去右心室、心尖和心房組織。由紫色/藍色劃界的組織代表由非梗塞相關(guān)的冠狀動脈分布灌注的區(qū)域。將各個橫切部分的兩個表面印至干凈的乙酸酯片上，對其進行掃描，然后數(shù)字化以計算梗塞面積?？偽ｋU面積表示為左心室的百分數(shù)。然后將梗塞大小表示為占危險面積的百分數(shù)。
對照動物和CardaxTM處理的動物的平均梗塞大小如圖37所示。對照動物和CardaxTM處理的動物的循環(huán)CRP水平(表示為基線水間和再灌注時誘導的水平之間的平均差異)如圖38所示。在CardaxTM處理的兔子中看到梗塞大小減小約55.4％；兩組的局部缺血危險區(qū)域類似。類似地，對照中超出基線的循環(huán)CRP水平的平均增加(+23.5％)在CardaxTM處理的動物中完全消除，至低于在基線觀察到的平均水平(-15.7％)。由于CRP既是急性冠脈綜合征中的效應物-在這種急性期反應物水平升高的情況下導致梗塞大小增加-又是初級與二級預防心臟患者中心血管風險的強烈獨立性預測物-這種循環(huán)蛋白水平的降低形成強有力的治療療法。
口服二鈉二琥珀酸酯蝦青素降低小鼠中脂多糖(LPS)導致的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)升高以下研究評價口服二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物在LPS誘導的小鼠肝損傷模型中的肝保護作用的效用。
實驗方法簡述用LPS和半乳糖胺處理三月齡的雄性ICR小鼠以誘導肝損傷(Leist，1995)。首先對小鼠經(jīng)口管飼橄欖油/水/卵磷脂乳液(10mL/kg或?qū)τ?0克小鼠而言0.3mL)或包含二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(50mg/mL)的相同乳液，最終二鈉二琥珀酸酯蝦青素劑量為500mg/kg。2小時后對小鼠腹膜內(nèi)(IP)注射鹽水(10mL/kg)或大腸桿菌LPS(3mg/kg，Sigma目錄號L-3755)和D-半乳糖胺(700mg/kg)的溶液。IP注射后5小時用二氧化碳(CO2)窒息法處死動物，然后收集血漿用于ALT測定。
LPS誘導的損傷結(jié)果的簡述。
這些初步結(jié)果證明二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物對鹽水注射(肝損傷假處理對照)動物的血漿ALT沒有作用。在僅用乳液(不含衍生物)管飼的對照動物中，ALT增加大于3倍。在接受含500mg/kg二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物的乳液的動物中，ALT升高大大減小(N＝3只動物/組)，證明化合物降低作為這些動物中肝細胞壞死的血清標志的ALT的效力。由于LPS誘導的肝損傷是由ROS(包括自由基氧化氮NO*)介導的，且在LPS侵害后發(fā)生顯著的系統(tǒng)炎癥(非酯化的游離蝦青素對此有保護作用(Ohgami等人2003))，該新衍生物用于在其中這種炎癥得到促進的臨床適應癥的效用代表一個特別有用的實施方案。
黑小鼠多劑量口服之后游離蝦青素在血漿和肝中的蓄積在該藥代動力學研究中，用本文所述的方法，給黑小鼠經(jīng)口管飼在乳液載體中的十一(11)個單獨日口服劑量的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(500mg/kg)，并在可能的Cmax和Tmax(6小時)在3只動物中測定游離蝦青素在血漿和肝中的蓄積?？赡艿腃max和Tmax(6小時)是由前面單一劑量口服藥代動力學研究中的血漿和肝樣品推導出來的。評價在單一乳液劑量之后非酯化的游離蝦青素在血漿和肝中的蓄積。所有受試動物的平均血漿濃度為381nM。所有受試動物的平均肝濃度為1735nM。在單一劑量研究中，平均起來，在血漿和肝中均獲得保護水平(對非酯化的游離蝦青素設(shè)在抗氧化ED50為200nM)；所獲得的平均肝濃度差不多為保護水平的9倍。
在多劑量研究中，峰和谷水平均取(給藥之后6小時在可能的Cmax取峰水平；在Cmax后6小時或給藥后12小時獲得谷水平)。在峰和谷血漿中的平均峰水平分別為485nM和231nM；在峰和谷肝的平均峰水平分別為1760nM和519nM。同樣，在各種情況下獲得保護水平，并保持至多劑量給藥后11天；在肝的情況下，獲得差不多為保護水平9倍的水平。同樣，在多次給藥后的各個時間點肝中的蓄積大于血漿中觀察到的蓄積，表明這種給藥載體用于靶向至該實體器官的效用增加(圖32)。由此數(shù)據(jù)組還明顯看出長期施用二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物將在肝保護方面有效。
黑小鼠單一劑量口服之后游離蝦青素在心肌(心臟)和腦中的蓄積通過口服管飼法將在乳液載體中的單一最大劑量的二鈉二琥珀酸酯蝦青素衍生物(500mg/kg)施用于黑小鼠，并在4只動物中在可能的Cmax和Tmax(6小時)測定非酯化的游離蝦青素的蓄積，Cmax和Tmax根據(jù)前面研究中的血漿和肝樣品來推導。在單一劑量后非酯化的游離蝦青素在心臟中的蓄積是優(yōu)異的(4只動物的平均值+/-SEM＝693.25+/-272nM)，并與非酯化的游離蝦青素在肝中的蓄積結(jié)果平行。同樣，在各個時間點，心臟中的蓄積大于血漿中觀察到的蓄積，表明這種給藥載體用于靶向至實體器官的效用增加。非酯化的游離蝦青素在CNS(腦)中的蓄積較不明顯(4只動物的平均值+/-SEM＝3.6+/-1.7nM)，表明穿透血-腦屏障(BBB)是可能的，但長期、多劑量給藥可能是獲得對于CNS應用(阿爾茨海默氏病、中風等)的保護水平所必需的。
內(nèi)消旋蝦青素的二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物與人血清白蛋白(HSA)的相互作用大部分胡蘿卜素類胡蘿卜素和絕大部分葉黃素的差水溶性限制了它們作為水相單線態(tài)氧猝滅劑和自由基清除劑的應用。已將增加類胡蘿卜素的表觀溶解度和/或分散性的化學修飾應用于基礎(chǔ)科學和臨床研究。但是，母體類胡蘿卜素和新衍生物在水溶液中形成超分子裝配體的趨勢使得先綜合全面評價這種行為然后才轉(zhuǎn)向這些化合物的效力的體外和體內(nèi)試驗有正當理由。
圖5描述類胡蘿卜素衍生物，全反式(全-E)形式的合成內(nèi)消旋蝦青素(3R，3’S-二羥基-β，β-胡蘿卜素-4，4′-二酮)的二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物(dAST)。用于產(chǎn)生新衍生物的對稱C40-葉黃素在3和3′位具有兩個手性中心。在水溶液中，C40-葉黃素不表現(xiàn)出旋光活性，因為這些立體中心具有相反的絕對構(gòu)型，并且在內(nèi)部彼此補償。具有羧酸官能團的天然類胡蘿卜素分子優(yōu)先與人血清白蛋白(HSA)-血液中最豐富的蛋白結(jié)合。由于白蛋白結(jié)合強烈影響給定化合物的潛在體內(nèi)生物化學活性，因而將圓二色性(CD)、紫外-可見(UV/Vis)和熒光光譜用于表征這種新類胡蘿卜素衍生物與不含脂肪酸的HSA的相互作用。研究該對稱類胡蘿卜類的蛋白結(jié)合和聚集特性，其通過將含有羧酸末端基團的部分直接酯化而連接，形成剛性、長鏈、高度不飽和二陰離子bolamphiphile。證明在不存在蛋白的緩沖溶液中，內(nèi)消旋類胡蘿卜素形成不表現(xiàn)CD卡滕效應(CE)的緊密包裝的H型card-pack聚集體。但是在低配體/蛋白(L/P)摩爾比下，內(nèi)消旋類胡蘿卜素立即并優(yōu)先以單體方式與HSA締合，表明允許在水溶液中發(fā)生超分子裝配的二級化學相互作用(范德華力，氫鍵鍵合)在生物相關(guān)環(huán)境中被克服。超過1∶1配體/蛋白摩爾比，內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子再次開始聚集；在這些比率下觀察到的聚集是手性的，產(chǎn)生表現(xiàn)出強烈激子型CD活性的超分子結(jié)構(gòu)。
實驗方法簡述由結(jié)晶蝦青素[3R，3′R，3R，3′S，3S，3′S(25∶50∶25)]，一種商購的立體異構(gòu)體的統(tǒng)計混合物(Buckton Scott，India)合成新的衍生物dAST。通過高壓液相色譜法(HPLC)分離蝦青素立體異構(gòu)體，導致合成用于本研究中測試的純化的內(nèi)消旋二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物。所用的內(nèi)消旋立體異構(gòu)體的全反式(全-E)形式由于在間隔物的多烯鏈中缺乏順式(或Z)構(gòu)型因而是一種線性、剛性分子(圖5)。成功地合成了根據(jù)HPLC純度＞99％的合成內(nèi)消旋蝦青素的二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物。
材料基本上不含脂肪酸的人血清白蛋白(catalog No.A-1887，lot No.14H9319)購自Sigma，并如提供地使用。使用雙蒸水和光譜級二甲亞砜(DMSO，Scharlau Chemie S.A.，Barcelona，Spain)和乙醇(Chemolab，Budapest，Hungary)。所有其它化學物質(zhì)為分析級。
制備dAST的儲備溶液在將內(nèi)消旋類胡蘿卜素溶于DMSO之后，將100μl DMSO溶液加到在光程長度為1cm的矩形比色杯中的2mL乙醇中。在260-650nm下記錄吸收光譜。由在λmax下的光吸收值計算濃度(ε478nm＝116，570M-1cm-1)。
制備HSA溶液對于光譜樣品制備，將HSA溶于pH 7.4 Ringer或0.1M pH 7.4磷酸鹽緩沖液。計算白蛋白濃度，E1％1cm＝5.31，使用實驗得到的279nm下的吸光度數(shù)據(jù)。HSA的分子量定義為66500Da。
圓二色性和UV/Vis吸收光譜用Jasco J-715分光偏振計，在25±0.2和37±0.2℃下，在光程長度為1cm的矩形比色杯中記錄CD和UV光譜。通過配備磁力攪拌的Peltier恒溫器提供溫度控制。以1.0nm帶寬和0.5nm分辨率且掃描速率為100nm/分，使所有的光譜聚集三次。誘導的CD定義為dAST-HSA混合物的CD減去相同波長下單獨HSA的CD，并表示為毫度的橢圓率(mdeg)。
37℃下用在pH 7.4 Ringer和0.1M磷酸鹽緩沖液中的dAST對HSA進行CD/UV/Vis滴定將Ringer緩沖液，L/P值為0.007-0.102mL 1.6×10-4M HSA溶液置于光程長度為1cm的比色杯中，并以10μL等分試樣用自動移液管加入少量配體儲備溶液(c＝2.2×10-4)。將Ringer緩沖液，L/P值為0.82-13.132ml的2.3×10-6M HSA溶液置于光程長度為1cm的比色杯中，并用自動移液管加入μL體積的配體儲備溶液(c＝3.9×10-4)。將磷酸鹽緩沖液，L/P值為0.82-13.102mL 2.2×10-6M HSA溶液置于光程長度為1cm的比色杯中，并用自動移液管加入μL體積的配體儲備溶液(c＝3.6×10-4)。
測定dAST存在下HAS的固有熒光在1cm矩形室中在0.1M pH 7.4磷酸鹽緩沖液中制備2mL的4.2×10-6M HSA溶液。連續(xù)地將1.3×10-4和3.3×10-4M內(nèi)消旋類胡蘿卜素DMSO溶液以μL體積加入在Jasco J-715分光偏振計的樣品室內(nèi)的比色杯中。在240和360nm之間以0.5nm波長增量激發(fā)所得的樣品溶液。用安裝在光源右角的Hamamatsu H5784-型光電倍增檢測器收集在各個波長下的總熒光強度。在樣品溶液中，HSA和dAST的最初和最終濃度分別為4.2×10-6M-4.0×10-6M和1.3×10-7M-1.4×10-5M。內(nèi)消旋類胡蘿卜素/HSA摩爾比在0.03和3.53之間變化。在熒光測定期間，最終的DMSO濃度不超過5V/V％。還進行對照實驗，其中測定將20、50和100μL DMSO加到溶液期間HSA的熒光。
UV/Vis和CD光譜結(jié)果簡述在乙醇和水性緩沖液中的dAST的UV/Vis和CD光譜特性由于其延伸的π系統(tǒng)，dAST在可見光譜中表現(xiàn)出強烈光吸收(圖6)。主要的鐘形吸收譜帶集中在481.5nm處是由于允許的最低能量電子偶極，沿多烯鏈長軸極化的π→π*躍遷。室溫下，對于包含一個或多個共軛羰基的類胡蘿卜素，缺乏細微結(jié)構(gòu)是典型的。但是，振動次能帶實際存在于該曲線下，如由光譜的次級衍生揭示(圖6)。此外，在近UV區(qū)存在進一步的躍遷。根據(jù)在多烯模型上進行的理論計算，在300nm附近的適當強度的譜帶的電子躍遷矩(μ)平行于dAST分子的長軸極化。同時，371nm處的譜帶μ取向沿著共軛體系的雙重C2對稱軸。羰基的弱n→π*躍遷由于其它譜帶而變得模糊。如預期的，內(nèi)消旋類胡蘿卜素化合物在乙醇中不顯示任何CD譜帶，因為兩個相反的手性中心(3R3′S)的作用彼此取消(數(shù)據(jù)未顯示)。
在Ringer緩沖液中，dAST主要吸收譜帶改變，表現(xiàn)大的藍色位移(2541.6cm-1)和頻寬縮窄(圖7)。這些光譜變化表明形成所謂的“card-pack”聚集體，其中的分子通過來自水性環(huán)境的排阻和H鍵合相互作用而緊密結(jié)合在一起(在數(shù)埃范圍內(nèi))。結(jié)果是，多烯鏈的激態(tài)波功能在分子間發(fā)生離域，允許在相鄰分子之間發(fā)生激子共振相互作用。這種相互作用導致UV/Vis光譜中的高能量激子峰。由于在龐大的末端基團中出現(xiàn)不利的空間相互作用，不允許多烯鏈的平行排列；單獨分子的長軸取而代之封閉確定的分子間覆蓋角度。在這些情況下，由手性單體構(gòu)建的類胡蘿卜素聚集體還由于由不對稱中心決定的手性分子間排列而表現(xiàn)出誘導的卡滕效應(CE)。相比之下，內(nèi)消旋類胡蘿卜素化合物在聚集狀態(tài)下在溶液中不表現(xiàn)旋光活性(數(shù)據(jù)未顯示)，原因是缺乏凈分子偏手性。
在低配體/蛋白摩爾比的人血清白蛋白存在下dAST的光學特性在往在pH 7.4 Ringer緩沖液中制備的HSA溶液中加入dAST時，兩個明確的、相反符號的誘導的CD譜帶出現(xiàn)在300和450nm之間，且零交叉點在367nm(圖8)。附圖插入顯示誘導的卡滕效應的強度和在不同L/P比率下的主要吸收譜帶(Δε和ε值相對于總內(nèi)消旋類胡蘿卜素濃度計算)。CEs的大小隨配體濃度增加而增加，但是它們的形狀和波長位置保持不變。如上述，在450nm以下存在兩個躍遷，其可能負責觀察到的旋光活性。300nm附近的吸收譜帶具有躍遷對稱B，而對應的電和磁躍遷矩與沿多烯鏈的雙重對稱軸垂直。將372.5nm處的譜帶的電和磁躍遷矩與C2軸平行極化，它的躍遷對稱為A?？珊侠淼赝茢嘣诘鞍捉Y(jié)合時，這些譜帶由于多烯鏈周圍微環(huán)境的改變而位移至更長的波長。已很好地證明類胡蘿卜素的CD光譜(發(fā)色團部分屬于C2點基團)符合C2-規(guī)則如果總共軛體系獲得右手手性(即鍵6-7和6′-7′周圍的雙面夾角是負的)，則對稱A的躍遷導致負CE，而對稱B的躍遷導致正CE(圖8)。因此，內(nèi)消旋類胡蘿卜素以這樣的方式與HSA結(jié)合蛋白環(huán)境固定良好確定的手性構(gòu)象的末端環(huán)，從而導致觀察到負和正誘導的CD譜帶。
手性3和3′中心的絕對構(gòu)型不決定分子的手性光學特性；相反，白蛋白分子的不對稱蛋白環(huán)境(通過非共價化學相互作用)決定觀察到的活性。與上述在水溶液中的聚集行為相比，dAST分子在這些L/P比率的HSA溶液中不聚集，這通過鐘形和輕微紅色位移的可見吸收譜帶的保持來證明(圖8)。這樣UV/Vis吸收和CD光譜均表明內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子與HSA的結(jié)合以單體形式發(fā)生。
超過1∶1 L/P比率的HSA存在下dAST的光學特性將增加量的dAST加到用pH 7.4 Ringer或0.1M pH 7.4磷酸鹽緩沖液制備的HSA溶液以實現(xiàn)L/P比率高于1。CD和UV/Vis吸收光譜在加入配體期間均表現(xiàn)出顯著變化(圖9和圖10)。除了藍色位移的可見吸收譜帶以外，一個新的正-負CD譜帶對分別出現(xiàn)在480和420nm附近。這些CE′s不表現(xiàn)出振動的精細結(jié)構(gòu)，且它們的振幅隨配體濃度的增加而增長。但是，在Ringer和磷酸鹽緩沖液中獲得的光譜之間存在某些顯著的差別a)在Ringer緩沖液中主要吸收譜帶遷移至較低的波長(434.5nm)。磷酸鹽緩沖液中的相應值為451.5nm。
b)Ringer(441.6cm-1)中來自最大吸收譜帶的CEs的零交叉點的偏差比磷酸鹽緩沖液(148.4cm-1)大3倍。
c)L/P值為8以上，Ringer溶液中的CD譜帶的強度不再增加。相比之下，CD譜帶的振幅繼續(xù)隨磷酸鹽緩沖液中L/P比率增加而增加，甚至在L/P值為13的時候。
d)在相同的L/P比率下，在磷酸鹽緩沖液中測定更強烈的CD譜帶(圖9和圖10)。
這些相反符號的CD譜帶僅在超過1∶1 L/P比率時出現(xiàn)的事實強烈地表明它們源自相鄰內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子之間的手性分子間相互作用。當兩個電子躍遷偶極矩能量類似，在空間上彼此靠近，并形成手性排列時，它們的相互作用表現(xiàn)為手性激子偶合CD光譜表明bisignate couplet，與對應的吸收譜帶的光譜位置相匹配，所述吸收譜帶的信號由兩個偶極之間的扭曲的絕對意義確定。根據(jù)激子手性規(guī)則，正扭曲對應于正長波長CE和較短波長處的負CE，反之亦然。在我們的情況下，躍遷偶極矩的方向是已知的；它沿多烯鏈的長軸極化。因此，相鄰內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子以使它們的長軸形成正(順時針)分子間覆蓋角度的方式排列。圖11所示的兩個共軛鏈的手性排列滿足前者條件；在這些情況下，長波長正和短波長負譜帶將出現(xiàn)在CD光譜中。但是，吸收譜帶的光譜學表現(xiàn)有助于區(qū)別這些空間排列。由于在a和b的情況下相鄰內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子的躍遷偶極矩之間存在不利的庫侖相互作用(圖11)，吸收最大值位移至較高的能量；如果c形式存在，則吸收譜帶變寬且它的最大值位移至較低的能量。因此，dAST分子形成右手手性排列，其中內(nèi)消旋類胡蘿卜素單體的長軸形成正銳角(圖11，a和b)。
提出有關(guān)配體分子的手性排序起源的以下設(shè)想。白蛋白似乎是誘導光學活性所必需的，首先有興趣的是推斷在HSA上存在能夠容納兩個內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子的大的結(jié)合位點。在低L/P值下白蛋白將僅結(jié)合單一配體；在較高L/P濃度下，將復合第二內(nèi)消旋類胡蘿卜素單體。但是如上述，CEs的大小在相當高的L/P值下持續(xù)增加(圖10)，在這種情況下單一結(jié)合位點應已被飽和。這個問題的一個解決方案推斷HSA是一種不對稱模板，在其上開始手性自裝配。最早的一些內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子以右手性排列方式與HSA結(jié)合，而隨后的內(nèi)消旋類胡蘿卜素單體建立在此手性結(jié)構(gòu)之上。在此設(shè)想中，HSA提供第一基本步驟，手性引發(fā)(″手性接種″)；此后自裝配自動地繼續(xù)。但是非常重要是的注意到，在沒有其手性末端基團的情況下，僅少數(shù)dAST分子在HSA的結(jié)合位點處保持右手性排列。3和3′手性中心在允許聚集體在HSA分子上形成手性自裝配體方面起決定作用。在不存在蛋白的情況下，內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子由于缺乏手性區(qū)別而形成右手和左手性裝配體的程度相等。
如上述，在磷酸鹽緩沖液和Ringer溶液中測定的CD曲線之間的光譜差異表明鹽濃度對聚集體穩(wěn)定性的影響(圖9和圖10)。Ringer緩沖液的克分滲透壓濃度和離子強度高于磷酸鹽緩沖液。琥珀酸部分在pH 7.4下在兩種緩沖液中都發(fā)生離子化，在聚集體內(nèi)部和聚集體之間均形成靜電排斥。帶正電的鹽離子能夠減少這種排斥，因而有助于在存在這些陽離子的情況下增加聚集體的穩(wěn)定性和大小。在用超過1∶1 L/P比率的dAST滴定HSA期間，同時形成手性和非手性聚集體；但是僅手性聚集體與HSA締合，而非手性聚集體則沒有。在Ringer緩沖溶液中獲得的CD光譜(圖9)表明非手性聚集體由于鹽離子的掩蔽效果而在這種較高克分滲透壓濃度緩沖液中得以更好穩(wěn)定。加入的配體分子優(yōu)先與存在的聚集體締合，從而導致CD譜帶的振幅達到平臺，并變得恒定，與磷酸鹽緩沖液形成對照。
加入dAST后HSA的熒光猝滅位于亞結(jié)構(gòu)域IIA深處的單一色氨酸殘基(Trp214)在很大程度上負責HSA的固有熒光。HSA的熒光發(fā)射譜與內(nèi)消旋類胡蘿卜素的吸收光譜重疊。因此，在將在DMSO中的dAST增量加入到HSA的溶液之后獲得熒光光譜學測定。結(jié)果清楚地表明內(nèi)消旋-類胡蘿卜素分子能夠有效地猝滅HSA的固有熒光(圖12)。用于制備dAST的儲備溶液的DMSO對固有HAS熒光的影響可以忽略(圖12)。在0.7的L/P比率下，基線熒光強度減小50％。所觀察到的現(xiàn)象表明內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子結(jié)合在Trp214的附近，其在HSA的兩個主要結(jié)合腔中的一個中形成壁的一部分(位點I，亞結(jié)構(gòu)域IIA；圖13)。但是，位點I和位點II(亞結(jié)構(gòu)域IIIA)-都為疏水脂肪酸結(jié)合通道-都不能夠容納長的、剛性dAST分子(圖13)。基于結(jié)構(gòu)類似性，第二種可能性是dAST與HSA的其它長鏈(C18、C20)脂肪酸結(jié)合位點結(jié)合，所述位點已用高分辨率X-射線結(jié)晶學進行充分地表征。在不具有龐大的末端基團的較短開放鏈類胡蘿卜素的情況下，這種可能性是可能的。但是，內(nèi)消旋類胡蘿卜素衍生物本身的多烯鏈測量為28(在3和3′手性碳原子之間)。盡管它們的構(gòu)象可動性，琥珀酸部分需要額外的空間，將分子的有效長度增加至48。仔細地檢查HSA的晶體結(jié)構(gòu)表明，結(jié)構(gòu)域I和III之間的長、窄裂隙可能適于結(jié)合內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子(圖13)。域間裂隙是寬的，且它的窄端靠近色氨酸(Trp214；*在圖13上)殘基，這為在內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子與HSA的域間裂隙結(jié)合時觀察到的熒光猝滅提供結(jié)構(gòu)解釋。而且，可以推斷，附加的dAST分子與域間裂隙中的單一一個分子的締合誘導HSA顯著的構(gòu)象變化，導致中央裂縫變寬。這可能是熒光猝滅不停止于L/P＝1比率，而隨CEs增加繼續(xù)強化的原因(圖13)。
討論UV/Vis和CD光譜學結(jié)果作為從水性環(huán)境被排斥和分子間氫鍵鍵合的結(jié)果，合成的非手性內(nèi)消旋蝦青素的二鈉鹽二琥珀酸酯衍生物在水性緩沖液中形成無旋光活性的card-pack類型的聚集體，這通過相對于在乙醇溶液中觀察到的譜帶來說主要可見吸收譜帶的大藍色位移來表明。在存在過量的不含脂肪酸的HSA的情況下，內(nèi)消旋類胡蘿卜素似乎優(yōu)先以單體方式與HSA締合。這些結(jié)果表明，允許在水溶液中發(fā)生超分子裝配的弱范德華力和氫鍵鍵合在生物相關(guān)環(huán)境中將被迅速克服。在體內(nèi)人血中的白蛋白濃度為大約0.6mM，表明在多至500mg的劑量下，內(nèi)消旋類胡蘿卜素(分子量841Da)將以單體方式與白蛋白締合(排除與循環(huán)血細胞和脂蛋白的額外的潛在非特異性結(jié)合，這會增加潛在非聚集劑量)。結(jié)合的內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子表現(xiàn)出誘導的CD譜帶，這種譜帶用共軛體系的右手性螺旋構(gòu)象充分解釋。在增加濃度的dAST存在下HSA的分級熒光猝滅強化了這樣的觀點類胡蘿卜素-白蛋白復合體的形成負責這種猝滅，并表明結(jié)合的配體和HSA的色氨酸214殘基之間的空間鄰近。
基于光譜數(shù)據(jù)、dAST分子的分子長度和充分表征的HSA的晶體結(jié)構(gòu)，結(jié)合位點暫定地指定于位于結(jié)構(gòu)域I和III之間的域間裂隙。
在高于1∶1 L/P比率的內(nèi)消旋類胡蘿卜素和HSA的CD光譜中似乎存在正-負譜帶對。這種發(fā)現(xiàn)歸因于以右手性裝配排列的內(nèi)消旋類胡蘿卜素多烯鏈之間的分子間手性激子偶合。實驗數(shù)據(jù)表明HSA用作一種手性模板，在該模板上自裝配開始，然后繼續(xù)，受內(nèi)消旋類胡蘿卜素分子的末端基團的手性來支配。在pH 7.4磷酸鹽緩沖液和Ringer溶液中得到的bisignate CD光譜之間的差異表明，自裝配受溶液的克分滲透壓濃度和離子強度影響。隨著克分滲透壓濃度增加，聚集體的穩(wěn)定性提高，推測起來是由于鹽陽離子對帶負電的琥珀酸羧酸官能團的靜電屏蔽。
本發(fā)明的不同方面的進一步修改和可替代選擇的實施方案考慮本說明書對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。因此，應將本說明書理解為僅是例示性的，其目的是教導本領(lǐng)域技術(shù)人員實施本發(fā)明的一般方式。應該理解，應將本文所示和所述的本發(fā)明的形式理解為目前優(yōu)選的實施方案。可以替代本文例示和描述的元素和材料，部分和過程可以顛倒，且本發(fā)明的某些特征可以獨立地利用，所有這些對已從本發(fā)明的描述中獲益的本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的?？梢栽诓槐畴x以下權(quán)利要求所述的本發(fā)明的實質(zhì)和范圍的情況下改變本文所述的要素。
權(quán)利要求
1.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中所述取代基至少部分親水。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中所述取代基增加化合物的水溶性。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中各個環(huán)獨立地為 或
10.權(quán)利要求1的化合物，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
11.權(quán)利要求1的化合物，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐，H，烷基或芳基。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
13.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
14.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
15.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+，-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
16.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
17.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
18.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
19.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
20.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
21.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
22.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
23.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
24.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
25.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
26.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
27.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
28.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
29.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
30.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
31.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
32.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
33.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
34.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
35.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
36.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
37.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
38.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
39.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
40.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
41.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
42.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
43.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
44.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
45.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
46.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
47.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
48.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
49.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
50.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
51.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
52.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
53.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
54.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為OR1或R1；其中各個R1獨立地為-烷基-NR23+、-芳族-NR23+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R2獨立地為H、烷基或芳基。
55.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
56.權(quán)利要求54的化合物，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
57.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
58.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，和其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
59.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
60.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
61.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
62.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
63.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
64.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
65.權(quán)利要求1的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
66.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
67.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
68.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
69.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
70.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
71.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
72.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
73.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
74.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
75.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
76.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
77.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
78.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
79.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
80.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
81.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
82.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
83.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
84.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
85.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
86.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
87.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
88.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
89.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
90.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
91.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
92.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
93.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
94.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
95.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
96.權(quán)利要求54的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
97.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為OR1或R1；其中各個R1獨立地為-烷基-NR23+、-芳族-NR23+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R2獨立地為H、烷基或芳基。
98.權(quán)利要求97的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
99.權(quán)利要求97的化合物，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
100.權(quán)利要求97的化合物，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
101.權(quán)利要求97的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
102.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為H、烷基或芳基。
103.權(quán)利要求102的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
104.權(quán)利要求102的化合物，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
105.權(quán)利要求102的化合物，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
106.權(quán)利要求102的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
107.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個Y獨立地為O或H2；其中R′為CH2；其中n為1-9；其中各個X獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R1獨立地為H、烷基或芳基。
108.權(quán)利要求107的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
109.權(quán)利要求107的化合物，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
110.權(quán)利要求107的化合物，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
111.權(quán)利要求107的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
112.化合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個Y獨立地為O或H2。
113.權(quán)利要求111的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
114.權(quán)利要求111的化合物，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
115.權(quán)利要求111的化合物，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
116.權(quán)利要求111的化合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
117.藥物組合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
118.權(quán)利要求117的組合物，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
119.權(quán)利要求117的組合物，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
120.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
121.權(quán)利要求117的組合物，其中所述取代基至少部分親水。
122.權(quán)利要求117的組合物，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
123.權(quán)利要求117的組合物，還包含人血清白蛋白。
124.權(quán)利要求123的組合物，其中人血清白蛋白的摩爾量超過類胡蘿卜素衍生物。
125.權(quán)利要求117的組合物，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
126.權(quán)利要求117的組合物，其中各個環(huán)獨立地為 或
127.權(quán)利要求117的組合物，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
128.權(quán)利要求117的組合物，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
129.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
130.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，和其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
131.權(quán)利要求117的組合物，還包含與所述類胡蘿卜素衍生物組合的第二種類胡蘿卜素衍生物。
132.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
133.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
134.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
135.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
136.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
137.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
138.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
139.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
140.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
141.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
142.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
143.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
144.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
145.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
146.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
147.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
148.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
149.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
150.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
151.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
152.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
153.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
154.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
155.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
156.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
157.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
158.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
159.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
160.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
161.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
162.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
163.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
164.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
165.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
166.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
167.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
168.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
169.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
170.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
171.權(quán)利要求117的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
172.藥物組合物，包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基；以及人血清白蛋白，其中人血清白蛋白的摩爾量超過類胡蘿卜素衍生物。
173.權(quán)利要求172的組合物，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
174.權(quán)利要求172的組合物，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
175.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
176.權(quán)利要求172的組合物，其中所述取代基至少部分親水。
177.權(quán)利要求172的組合物，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
178.權(quán)利要求172的組合物，還包含人血清白蛋白。
179.權(quán)利要求172的組合物，其中人血清白蛋白的摩爾量超過類胡蘿卜素衍生物。
180.權(quán)利要求172的組合物，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
181.權(quán)利要求172的組合物，其中各個環(huán)獨立地為 或
182.權(quán)利要求172的組合物，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
183.權(quán)利要求172的組合物，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
184.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
185.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
186.權(quán)利要求172的組合物，還包含與所述類胡蘿卜素衍生物組合的第二種類胡蘿卜素衍生物。
187.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
188.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
189.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
190.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
191.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
192.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
193.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
194.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
195.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
196.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
197.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
198.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
199.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
200.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
201.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
202.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
203.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
204.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
205.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
206.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
207.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
208.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
209.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
210.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
211.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
212.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
213.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
214.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
215.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
216.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
217.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
218.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
219.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
220.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
221.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
222.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
223.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
224.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
225.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
226.權(quán)利要求172的組合物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
227.包含具有以下結(jié)構(gòu)的類胡蘿卜素衍生物的化合物的合成方法 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基；使類胡蘿卜素與取代基的前體反應，其中所述類胡蘿卜素具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；和其中R1和R2獨立地為包含至少一個醇的無環(huán)烯烴或包含至少一個醇的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為醇。
228.權(quán)利要求227的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
229.權(quán)利要求227的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
230.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
231.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基至少部分親水。
232.權(quán)利要求227的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
233.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為單一立體異構(gòu)體。
234.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為單一幾何異構(gòu)體。
235.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素為單一立體異構(gòu)體。
236.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素為單一幾何異構(gòu)體。
237.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基包含離去基團。
238.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基包含離去基團，且其中所述化合物還包含所述離去基團。
239.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基包含離去基團，且其中所述離去基團為Cl、Br、甲苯磺?；︿灞交酋；?、甲磺酰基或三氟甲磺?；?。
240.權(quán)利要求227的方法，還包括用非親核堿將醇脫質(zhì)子化。
241.權(quán)利要求227的方法，還包括用非親核堿將醇脫質(zhì)子化，其中所述非親核堿包括二甲基氨基吡啶。
242.權(quán)利要求227的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
243.權(quán)利要求227的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
244.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
245.權(quán)利要求227的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
246.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
247.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為蝦青素。
248.權(quán)利要求227的方法，其中所述取代基的前體為琥珀酸。
249.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
250.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
251.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
252.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
253.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
254.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
255.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
256.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
257.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
258.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
259.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
260.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
261.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
262.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
263.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
264.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
265.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
266.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
267.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
268.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
269.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
270.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
271.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
272.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
273.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
274.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
275.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
276.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
277.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
278.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
279.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
280.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
281.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
282.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
283.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
284.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
285.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
286.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
287.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
288.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
289.權(quán)利要求227的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
290.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
291.權(quán)利要求290的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
292.權(quán)利要求290的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
293.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
294.權(quán)利要求290的方法，其中所述取代基至少部分親水。
295.權(quán)利要求290的方法，其中所述的局部缺血-再灌注損傷與哺乳動物治療對象的心肌梗塞、中風、外周血管疾病、靜脈或動脈閉塞、深靜脈血栓形成、器官移植、冠狀動脈分流移植手術(shù)、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)或心血管驟停和/或死亡有關(guān)。
296.權(quán)利要求290的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
297.權(quán)利要求290的方法，其中所述治療對象為人。
298.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
299.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
300.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
301.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
302.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
303.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
304.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
305.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
306.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
307.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
308.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
309.權(quán)利要求290的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
310.權(quán)利要求290的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
311.權(quán)利要求290的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
312.權(quán)利要求290的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
313.權(quán)利要求290的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
314.權(quán)利要求290的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
315.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
316.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
317.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
318.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
319.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
320.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
321.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
322.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
323.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
324.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
325.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
326.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
327.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
328.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
329.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
330.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
331.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
332.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
333.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
334.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
335.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
336.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
337.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
338.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
339.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
340.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
341.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
342.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
343.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
344.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
345.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
346.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
347.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
348.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
349.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
350.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
351.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
352.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
353.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
354.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
355.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
356.權(quán)利要求290的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
357.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為OR1或R1；其中各個R1獨立地為-烷基-NR23+、-芳族-NR23+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R2獨立地為H、烷基或芳基。
358.權(quán)利要求357的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
359.權(quán)利要求357的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
360.權(quán)利要求357的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
361.權(quán)利要求357的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
362.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為H、烷基或芳基。
363.權(quán)利要求362的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
364.權(quán)利要求362的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
365.權(quán)利要求362的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
366.權(quán)利要求362的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
367.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中R′為CH2；其中n為1-9；其中各個X獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R1獨立地為H、烷基或芳基。
368.權(quán)利要求367的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
369.權(quán)利要求367的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
370.權(quán)利要求367的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
371.權(quán)利要求367的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
372.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2。
373.權(quán)利要求372的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
374.權(quán)利要求372的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
375.權(quán)利要求372的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
376.權(quán)利要求372的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
377.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療局部缺血-再灌注損傷的方法，所述方法包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
378.權(quán)利要求377的方法，其中各個取代基-W獨立地包括-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
379.權(quán)利要求377的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
380.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
381.權(quán)利要求377的方法，其中所述取代基至少部分親水。
382.權(quán)利要求377的方法，其中所述局部缺血-再灌注損傷與哺乳動物治療對象的心肌梗塞、中風、外周血管疾病、靜脈或動脈閉塞、深靜脈血栓形成、器官移植、冠狀動脈分流移植手術(shù)、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動脈血管成形術(shù)或心血管驟停和/或死亡有關(guān)。
383.權(quán)利要求377的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
384.權(quán)利要求377的方法，其中所述治療對象為人。
385.權(quán)利要求377的方法，其中給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物包括大約5mg-300mg/天的劑量。
386.權(quán)利要求377的方法，其中給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1.0g/天的劑量。
387.權(quán)利要求377的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
388.權(quán)利要求377的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
389.權(quán)利要求377的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
390.權(quán)利要求377的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
391.權(quán)利要求377的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
392.權(quán)利要求377的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
393.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
394.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
395.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
396.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
397.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
398.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
399.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
400.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
401.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
402.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
403.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
404.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
405.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
406.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
407.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
408.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
409.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
410.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
411.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
412.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
413.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
414.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
415.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
416.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
417.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
418.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
419.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
420.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
421.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
422.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
423.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
424.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
425.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
426.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
427.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
428.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
429.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
430.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
431.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
432.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
433.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
434.權(quán)利要求377的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
435.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療肝臟疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
436.權(quán)利要求435的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
437.權(quán)利要求435的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
438.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
439.權(quán)利要求435的方法，其中所述取代基至少部分親水。
440.權(quán)利要求435的方法，其中所述肝臟疾病與丙型肝炎有關(guān)。
441.權(quán)利要求435的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
442.權(quán)利要求435的方法，其中所述治療對象為人。
443.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
444.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
445.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
446.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
447.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
448.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
449.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
450.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
451.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-10Omg/天的類胡蘿卜素衍生物。
452.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
453.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
454.權(quán)利要求435的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
455.權(quán)利要求435的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
456.權(quán)利要求435的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
457.權(quán)利要求435的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
458.權(quán)利要求435的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
459.權(quán)利要求435的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
460.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
461.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
462.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
463.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
464.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
465.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
466.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
467.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
468.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
469.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
470.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
471.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
472.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
473.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
474.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
475.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
476.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
477.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
478.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
479.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
480.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
481.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
482.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
483.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
484.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
485.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
486.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
487.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
488.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
489.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
490.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
491.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
492.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
493.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
494.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
495.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
496.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
497.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
498.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
499.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
500.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
501.權(quán)利要求435的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
502.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療肝臟疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為OR1或R1；其中各個R1獨立地為-烷基-NR23+、-芳族-NR23+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R2獨立地為H、烷基或芳基。
503.權(quán)利要求502的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
504.權(quán)利要求502的方法，其中所述肝臟疾病與丙型肝炎有關(guān)。
505.權(quán)利要求502的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
506.權(quán)利要求502的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
507.權(quán)利要求502的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
508.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療肝臟疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中各個R獨立地為H、烷基或芳基。
509.權(quán)利要求508的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
510.權(quán)利要求508的方法，其中所述肝臟疾病與丙型肝炎有關(guān)。
511.權(quán)利要求508的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
512.權(quán)利要求508的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
513.權(quán)利要求508的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
514.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療肝臟疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2；其中R′為CH2；其中n為卜9；其中各個X獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R1獨立地為H、烷基或芳基。
515.權(quán)利要求514的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
516.權(quán)利要求514的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
517.權(quán)利要求514的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
518.權(quán)利要求514的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
519.權(quán)利要求514的方法，其中所述肝臟疾病與丙型肝炎有關(guān)。
520.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療肝臟疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個Y獨立地為O或H2。
521.權(quán)利要求520的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
522.權(quán)利要求520的方法，其中所述肝臟疾病與丙型肝炎有關(guān)。
523.權(quán)利要求520的方法，其中Y為H2，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
524.權(quán)利要求520的方法，其中Y為O，所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
525.權(quán)利要求520的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物還包含至少一個手性中心。
526.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療心律失常的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
527.權(quán)利要求526的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
528.權(quán)利要求526的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
529.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
530.權(quán)利要求526的方法，其中所述取代基至少部分親水。
531.權(quán)利要求526的方法，還包括增加連接蛋白43表達。
532.權(quán)利要求526的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
533.權(quán)利要求526的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
534.權(quán)利要求526的方法，其中所述治療對象為人。
535.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
536.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
537.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
538.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
539.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
540.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
541.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
542.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
543.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
544.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
545.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
546.權(quán)利要求526的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
547.權(quán)利要求526的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
548.權(quán)利要求526的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
549.權(quán)利要求526的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
550.權(quán)利要求526的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
551.權(quán)利要求526的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
552.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
553.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
554.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
555.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
556.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
557.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
558.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
559.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
560.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
561.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
562.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
563.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
564.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
565.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
566.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
567.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)
568.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
569.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
570.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
571.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
572.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
573.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
574.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
575.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
576.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
577.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
578.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
579.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
580.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
581.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
582.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
583.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
584.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
585.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
586.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
587.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
588.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
589.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
590.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
591.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
592.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
593.權(quán)利要求526的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
594.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療癌細胞和癌前細胞的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
595.權(quán)利要求594的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
596.權(quán)利要求594的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
597.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
598.權(quán)利要求594的方法，其中所述取代基至少部分親水。
599.權(quán)利要求594的方法，還包括降低癌細胞和癌前細胞的增殖速率。
600.權(quán)利要求594的方法，其中癌細胞包括致癌物引發(fā)的細胞。
601.權(quán)利要求594的方法，還包括增加連接蛋白43表達。
602.權(quán)利要求594的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
603.權(quán)利要求594的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
604.權(quán)利要求594的方法，其中所述治療對象為人。
605.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
606.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
607.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
608.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
609.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
610.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
611.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
612.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
613.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
614.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
615.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
616.權(quán)利要求594的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
617.權(quán)利要求594的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
618.權(quán)利要求594的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
619.權(quán)利要求594的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
620.權(quán)利要求594的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
621.權(quán)利要求594的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
622.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
623.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
624.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
625.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
626.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
627.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
628.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
629.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
630.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
631.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
632.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
633.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
634.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
635.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
636.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
637.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
638.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
639.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
640.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
641.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
642.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
643.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
644.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
645.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
646.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
647.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
648.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
649.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
650.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
651.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
652.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
653.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
654.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
655.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
656.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
657.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
658.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
659.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
660.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
661.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
662.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
663.權(quán)利要求594的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
664.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物增加連接蛋白43表達的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
665.權(quán)利要求664的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
666.權(quán)利要求664的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
667.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
668.權(quán)利要求664的方法，其中所述取代基至少部分親水。
669.權(quán)利要求664的方法，還包括降低癌細胞和癌前細胞的增殖速率。
670.權(quán)利要求664的方法，還包括降低癌細胞的增殖速率，其中癌細胞包括致癌物引發(fā)的細胞。
671.權(quán)利要求664的方法，還包括治療局部缺血-再灌注損傷。
672.權(quán)利要求664的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
673.權(quán)利要求664的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
674.權(quán)利要求664的方法，其中所述治療對象為人。
675.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
676.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
677.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
678.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
679.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
680.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
681.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
682.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
683.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
684.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
685.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
686.權(quán)利要求664的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
687.權(quán)利要求664的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
688.權(quán)利要求664的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
689.權(quán)利要求664的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
690.權(quán)利要求664的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
691.權(quán)利要求664的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
692.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
693.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
694.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
695.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
696.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
697.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
698.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
699.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
700.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
701.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
702.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
703.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
704.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
705.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
706.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
707.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
708.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
709.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
710.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
711.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
712.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
713.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
714.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
715.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
716.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
717.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
718.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
719.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
720.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
721.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
722.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
723.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
724.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
725.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
726.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
727.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
728.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
729.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
730.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
731.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
732.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
733.權(quán)利要求664的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
734.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療癌細胞和癌前細胞的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基；以及增加連接蛋白43表達。
735.權(quán)利要求734的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
736.權(quán)利要求734的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
737.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
738.權(quán)利要求734的方法，其中所述取代基至少部分親水。
739.權(quán)利要求734的方法，還包括降低癌細胞和癌前細胞的增殖速率。
740.權(quán)利要求734的方法，還包括降低癌細胞的增殖速率，其中癌細胞包括致癌物引發(fā)的細胞。
741.權(quán)利要求734的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
742.權(quán)利要求734的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
743.權(quán)利要求734的方法，其中所述治療對象為人。
744.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
745.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
746.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
747.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
748.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
749.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
750.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
751.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
752.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
753.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
754.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
755.權(quán)利要求734的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
756.權(quán)利要求734的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
757.權(quán)利要求734的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
758.權(quán)利要求734的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
759.權(quán)利要求734的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
760.權(quán)利要求734的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
761.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
762.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
763.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
764.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
765.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
766.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-C02-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
767.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
768.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
769.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
770.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
771.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
772.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
773.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
774.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
775.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
776.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
777.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
778.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
779.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
780.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
781.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
782.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
783.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
784.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
785.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
786.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
787.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
788.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
789.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
790.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
791.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
792.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
793.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
794.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
795.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
796.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
797.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
798.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
799.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
800.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
801.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
802.權(quán)利要求734的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
803.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療心律失常的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基；以及增加連接蛋白43表達。
804.權(quán)利要求803的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
805.權(quán)利要求803的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
806.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
807.權(quán)利要求803的方法，其中所述取代基至少部分親水。
808.權(quán)利要求803的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
809.權(quán)利要求803的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
810.權(quán)利要求803的方法，其中所述治療對象為人。
811.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
812.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
813.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
814.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
815.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
816.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
817.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
818.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
819.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
820.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
821.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1.0g范圍內(nèi)的劑量。
822.權(quán)利要求803的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
823.權(quán)利要求803的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
824.權(quán)利要求803的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
825.權(quán)利要求803的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
826.權(quán)利要求803的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
827.權(quán)利要求803的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
828.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
829.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
830.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
831.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
832.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
833.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
834.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
835.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
836.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
837.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
838.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
839.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
840.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
841.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
842.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
843.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
844.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
845.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
846.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
847.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
848.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
849.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
850.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
851.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
852.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
853.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
854.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
855.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
856.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
857.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
858.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
859.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
860.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
861.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
862.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
863.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
864.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
865.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
866.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
867.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
868.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
869.權(quán)利要求803的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
870.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物減少C-反應蛋白的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R3和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基。
871.權(quán)利要求870的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
872.權(quán)利要求870的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
873.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
874.權(quán)利要求870的方法，其中所述取代基至少部分親水。
875.權(quán)利要求870的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
876.權(quán)利要求870的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
877.權(quán)利要求870的方法，其中所述治療對象為人。
878.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
879.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
880.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
881.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
882.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
883.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
884.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
885.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
886.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
887.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
888.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
889.權(quán)利要求870的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
890.權(quán)利要求870的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
891.權(quán)利要求870的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
892.權(quán)利要求870的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
893.權(quán)利要求870的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
894.權(quán)利要求870的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
895.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
896.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
897.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
898.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
899.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
900.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
901.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
902.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
903.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
904.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
905.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
906.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
907.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
908.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
909.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
910.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
911.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
912.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
913.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
914.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
915.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
916.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
917.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
918.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
919.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
920.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
921.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
922.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
923.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
924.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
925.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
926.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
927.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
928.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
929.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
930.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
931.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
932.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
933.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
934.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
935.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
936.權(quán)利要求870的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
937.用包含類胡蘿卜素衍生物的化學組合物治療疾病的方法，所述方法包括給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物；其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R3獨立地為氫或甲基；其中R1和R2獨立地為H、包含至少一個取代基的無環(huán)烯烴或包含至少一個取代基的環(huán)，其中所述環(huán)具有通用結(jié)構(gòu) 其中n為4-10個碳原子；和其中W為取代基；其中所述疾病產(chǎn)生活性氧種類。
938.權(quán)利要求937的方法，其中各個取代基-W獨立地包含-XR，其中各個X獨立地包含O、N或S。
939.權(quán)利要求937的方法，其中各個取代基-W獨立地包含氨基酸、酯、氨基甲酸酯、酰胺、碳酸酯、醇、磷酸酯或磺酸酯。
940.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物至少部分水溶。
941.權(quán)利要求937的方法，其中所述取代基至少部分親水。
942.權(quán)利要求937的方法，還包括增加細胞間間隙連接通訊。
943.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括與年齡相關(guān)的黃斑變性(ARMD)、視網(wǎng)膜脫離、高血壓性視網(wǎng)膜疾病、葡萄膜炎、脈絡(luò)膜炎、玻璃體炎、眼出血、退化性視網(wǎng)膜損傷、白內(nèi)障生成、白內(nèi)障、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變、美尼爾病、藥物誘導的耳毒性、感染性耳炎、特發(fā)性耳炎、中耳炎、感染性鼻竇炎、過敏性鼻竇炎或頭頸部癌癥。
944.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括老年性癡呆、阿爾茨海默氏病、尼曼-皮克病、神經(jīng)毒素反應、高壓氧效應、帕金森氏病、腦外傷、脊髓外傷、高血壓性腦血管損傷、中風、感染性腦炎、腦膜炎、變應性腦脊髓炎、多發(fā)性硬化、神經(jīng)元蠟樣脂褐質(zhì)沉積癥、共濟失調(diào)-毛細血管擴張綜合征、金屬超負荷、肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)、原發(fā)性腦癌/惡性腫瘤或腦轉(zhuǎn)移瘤。
945.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括動脈硬化、動脈粥樣硬化、外周血管疾病、心肌梗塞、炎性心臟疾病、心肌病、心律失常、藥物毒性、克山病、錐蟲病或酒精性心肌病、慢性穩(wěn)定性心絞痛、不穩(wěn)定性心絞痛、CABG和/或PTCA期間的特發(fā)性手術(shù)損傷、升高的C-反應蛋白(CRP)、髓過氧化物酶(MPO)、低密度脂蛋白氧化(ox-LDL)、充血性心衰(CHF)、靜脈停滯和損傷、深靜脈血栓形成(DVT)或血栓性靜脈炎。
946.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括哮喘、反應性氣道疾病、慢性阻塞性肺病、氧過多、高壓氧效應、香煙煙霧吸入效應、環(huán)境氧化劑污染物效應、急性呼吸窘迫綜合征、支氣管肺發(fā)育不良、礦物塵肺、阿霉素毒性、博來霉素毒性、百草枯、化學性肺炎、特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化、感染性肺炎、結(jié)節(jié)病、石棉沉著病、小細胞和大細胞肺癌、炭疽感染或炭疽毒素接觸。
947.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括高血壓性腎病、終末期腎病、糖尿病性腎病、感染性腎小球腎炎、腎病綜合征、變應性腎小球腎炎、I-IV型超敏反應、腎同種移植排斥、腎炎性抗腎小球基底膜疾病、重金屬腎毒性、藥物誘導的腎毒性、橫紋肌溶解或腎癌。
948.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括四氯化碳肝損傷、內(nèi)毒素肝損傷、脂多糖肝損傷、慢性病毒感染、血色素沉著、肝豆狀核變性、對乙酰氨基酚過量、充血性心衰伴肝充血、酒精性肝硬化、特發(fā)性肝硬化、肝細胞癌或肝轉(zhuǎn)移癌。
949.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括炎性腸病、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征、結(jié)腸癌、息肉病、感染性憩室炎、中毒性巨結(jié)腸、胃炎、幽門螺桿菌感染、胃癌、食管炎、巴瑞特氏食道癥、胃食管反流疾病(GERD)、惠普爾病、膽石病、膽囊炎、胰腺炎、血β-脂蛋白缺乏癥、感染性胃腸炎、痢疾或非甾體抗炎藥誘導的毒性。
950.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括鉛中毒、藥物誘導的骨髓抑制、原卟啉光氧化、淋巴瘤、白血病、卟啉癥、寄生蟲感染、瘧疾、鐮狀細胞性貧血、地中海貧血、蠶豆病、惡性貧血、范康尼氏貧血、感染后貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜或自身免疫缺陷綜合征(AIDS)。
951.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括感染性前列腺炎、前列腺癌、前列腺原位癌、良性前列腺肥大(BPH)、尿道炎、睪丸炎、睪丸扭轉(zhuǎn)、子宮頸炎、宮頸癌、卵巢癌、子宮癌、陰道炎或陰道痙攣。
952.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、肌腱炎、肌營養(yǎng)不良、退化性椎間盤疾病、退化性關(guān)節(jié)疾病、運動誘導的骨胳肌損傷、腕管綜合征、格林-巴利綜合征、佩吉特骨病、強直性脊椎炎或異位骨形成。
953.權(quán)利要求937的方法，其中所述疾病包括日照射損傷、曬斑、熱損傷、化學和接觸性皮膚炎、漆樹屬皮炎、牛皮癬、布盧姆氏綜合征、粘膜白斑病、感染性皮炎或卡波濟氏肉瘤。
954.權(quán)利要求937的方法，其中所述活性氧種類包括自由基。
955.權(quán)利要求937的方法，其中所述治療對象為哺乳動物。
956.權(quán)利要求937的方法，其中所述治療對象為人。
957.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用類胡蘿卜素衍生物。
958.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
959.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象腸胃外施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
960.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用類胡蘿卜素衍生物。
961.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約5-300mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
962.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象冠脈內(nèi)施用劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
963.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象皮下施用類胡蘿卜素衍生物。
964.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服類胡蘿卜素衍生物。
965.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約5-100mg/天的類胡蘿卜素衍生物。
966.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括給治療對象口服劑量為大約0.25mg-1.0g/天的類胡蘿卜素衍生物。
967.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括大約0.25mg-1g范圍內(nèi)的劑量。
968.權(quán)利要求937的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素衍生物包括至少兩種不同的類胡蘿卜素衍生物。
969.權(quán)利要求937的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個手性中心。
970.權(quán)利要求937的方法，其中所述環(huán)還包含至少一個不飽和度。
971.權(quán)利要求937的方法，其中各個環(huán)獨立地為 或
972.權(quán)利要求937的方法，其中所述取代基為羧酸、酯、鏈烷醇、胺、磷酸酯、琥珀酸酯、氨基乙酸酯、醚、葡糖苷、糖或羧酸鹽。
973.權(quán)利要求937的方法，其中各個取代基獨立地為 或 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
974.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物。
975.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物為天然存在的類胡蘿卜素的衍生物，且其中所述天然存在的類胡蘿卜素為番茄紅素、番茄紫素、番茄黃素、蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)或角黃素。
976.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
977.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個R獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基。
978.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
979.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu) 其中各個X獨立地為-烷基-NR13+、-芳族-NR13+、-烷基-CO2-、-芳族-CO2-、-氨基酸-NH3+、-磷酸化氨基酸-NH3+、聚乙二醇、右旋糖酐、H、烷基或芳基；其中各個R′獨立地為-烷基-O、烷基或芳基；和其中n介于大約0-12之間。
980.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
981.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
982.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
983.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
984.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
985.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
986.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
987.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
988.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
989.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
990.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
991.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
992.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
993.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
994.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
995.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
996.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
997.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
998.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
999.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1000.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1001.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1002.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1003.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1004.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1005.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1006.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1007.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1008.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1009.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1010.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1011.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1012.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1013.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1014.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
1015.權(quán)利要求937的方法，其中所述類胡蘿卜素衍生物具有結(jié)構(gòu)
全文摘要
一種在治療對象中抑制和/或改善與活性氧種類，活性氮種類，自由基和/或非自由基有關(guān)的疾病的發(fā)生的方法，其中給治療對象施用類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物，該類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物是單獨或與另一種類胡蘿卜素類似物或共同抗氧化劑配方聯(lián)合施用的。施用所述類似物或類似物組合，從而可以降低治療對象經(jīng)歷與活性氧種類，活性氮種類，自由基和/或非自由基有關(guān)的疾病的風險?？梢越o治療對象施用所述類似物或類似物組合以抑制和/或改善局部缺血－再灌注損傷。可以給治療對象施用所述類似物或類似物組合以抑制和/或改善肝臟疾病?？梢越o治療對象施用所述類似物或類似物組合以抑制和/或改善癌癥。可以給治療對象施用所述類似物或類似物組合以抑制和/或改善心律失常和/或心源性猝死。可以給治療對象施用所述類似物或類似物組合以抑制和/或改善涉及活性氧種類，活性氮種類，自由基和/或非自由基的產(chǎn)生的任何疾病。在一個實施方案中，水溶性和/或水可分散性蝦青素類似物特別有效。本發(fā)明還包括含有單獨或組合的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)類似物的藥物組合物。
文檔編號A61P1/16GK1708480SQ03823260
公開日2005年12月14日 申請日期2003年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月29日
發(fā)明者S·F·洛克伍德, S·奧馬利, D·G·沃塔馬爾, L·M·希克斯, H·杰克遜, G·納多爾斯基 申請人:夏威夷生化技術(shù)公司