專利名稱：一種蘼蕪油制備方法和含有它的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從川芎植物地上部分提取的蘼蕪油，本發(fā)明還涉及蘼蕪油的制備方法，此外本發(fā)明又涉及了含有蘼蕪油作活性成分的藥物。
背景技術(shù)：
我國(guó)傳統(tǒng)中藥川芎為傘形科藁本屬的多年生草本植物川芎Ligusticumchuanxiong Hort.的根莖，為著名川產(chǎn)道地藥材之一，現(xiàn)大面積栽培于四川灌縣、彭縣、崇慶、新都等地。長(zhǎng)期以來，每年5月在川芎收獲后。其地上部分均作為廢物棄去。這些草本植物的地上部分莖葉又稱之為蘼蕪。
為了將這些廢棄苗葉變廢為寶，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)川芎植物的綜合利用，有效帶動(dòng)以種植為源頭的相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展和增效，增強(qiáng)川產(chǎn)道地藥材創(chuàng)收能力，我們對(duì)蘼蕪進(jìn)行了開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供蘼蕪油的制備方法。
本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供含蘼蕪油作活性成分的藥物。
本發(fā)明所述的蘼蕪油是由傘形科藁本屬的多年生草本植物川芎Ligusticumchuanxiong Hort.或Ligusticum wallichii Franch.的莖葉提取得到的揮發(fā)油。采用質(zhì)譜、氣相色譜方法對(duì)蘼蕪油進(jìn)行了定性、定量分析。將所得質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照，共鑒定了46個(gè)化合物，占揮發(fā)油總組成的85.82％；其主要成分含18.46％β-芹子烯、18.36％新蛇床酞內(nèi)酯和9.69％藁本內(nèi)酯。
本發(fā)明所述的蘼蕪油與川芎揮發(fā)油的化學(xué)成分構(gòu)成基本相似，均含有藁本內(nèi)酯、新蛇床酞內(nèi)酯、3-丁叉苯酞等有效成分，但是在含量上有所差異。
本發(fā)明所述的蘼蕪油可以采用常規(guī)的水蒸氣蒸餾法或采用超臨界CO2萃取法從蘼蕪中提取。
超臨界萃取技術(shù)由于采用了二氧化碳等氣體溶劑，從而把傳統(tǒng)的煎煮和有機(jī)萃取合二為一，該技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)如下(1)操作范圍廣，便于調(diào)節(jié)。最常用的操作范圍是壓力8～30MPa，溫度35～80℃。
(2)選擇性好，可通過控制壓力和溫度，有針對(duì)性地萃取中草藥中某些成分。
(3)以二氧化碳為超臨界流體，操作溫度低，在接近室溫條件下進(jìn)行萃取，這對(duì)于熱敏性成分尤其適宜。萃取過程中排除了遇氧氧化和見光反應(yīng)的可能性。萃取物能保持其自然的風(fēng)味。
(4)從萃取到分離一步完成。萃取后CO2不殘留于萃出物上，(5)CO2無毒、無味、不燃，價(jià)廉易得，而且可循環(huán)使用。
(6)可以調(diào)節(jié)萃取物的粒度，可借超臨界流體的核晶作用，使萃取物達(dá)到期望的粒度和粒度分布。
超臨界萃取技術(shù)除具有上述的優(yōu)點(diǎn)外，還具有滅菌效果。其對(duì)大腸桿菌和面包酵母菌等菌類的滅菌效果顯著，而且對(duì)濕潤(rùn)菌體的滅菌效果比干燥菌體的顯著。
采用超臨界CO2萃取法提取蘼蕪油，在蘼蕪油得率及蘼蕪主要有效成分及有效部位提取率，即藁本內(nèi)酯提取率、總內(nèi)酯提取率均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的水蒸汽蒸餾法。
將水蒸汽蒸餾法及超臨界CO2萃取法兩種不同提取方法所得的蘼蕪油進(jìn)行GS-MS分析，結(jié)果超臨界萃取法得到30多個(gè)組分，而水蒸汽蒸餾法得到20多個(gè)組分，其中19個(gè)組分相同。相同組分主要是一些分子量在180以上的化合物，不同組分主要是分子量在180以下的化合物，說明水蒸汽蒸餾法對(duì)蘼蕪油中小分子(分子量在180以下)化合物的提取有較大影響，采用超臨界萃取法則很好的將這部分小分子化合物保留下來。超臨界萃取法較水蒸汽蒸餾法操作簡(jiǎn)單，提取時(shí)間短，提取物中無溶媒殘存，對(duì)環(huán)境污染小，故選擇超臨界法提取蘼蕪油。采用超臨界CO2萃取蘼蕪藥材，其主要成分藁本內(nèi)酯提取率為96.08％、有效部位總內(nèi)酯提取率為94.55％，基本將蘼蕪中有效成分提取完全。
本發(fā)明所述的蘼蕪油的優(yōu)選制備方法為取蘼蕪新鮮藥材，干燥，粉碎，超臨界CO2萃取，萃取溫度30～60℃，萃取壓力8～30MPa，CO2流量每公斤生藥0.1～40kg/hr；分離釜I壓力5～20MPa，溫度20～50℃，分離釜II壓力5～20Mpa，溫度20～50℃；萃取時(shí)間10min～6hr，收集分離釜I、II中的萃取物，合并，置揮發(fā)油分離器中，靜置，分離油層，所得油層再離心分離油層，得蘼蕪油。
其中藥材粉碎粒度為80-120目，萃取物合并置揮發(fā)油分離器中，室溫靜置6小時(shí)以上，分離油層，所得油層以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，分離油層，得蘼蕪油，置棕色瓶?jī)?nèi)，密封貯存。
本發(fā)明所述的蘼蕪油具有改善血液流變學(xué)指標(biāo)，可用于治療冠心病；鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜，可用于治療頭痛。
一般藥理研究表明(一)蘼蕪油對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的鎮(zhèn)靜作用。
(二)對(duì)心血管系統(tǒng)的作用。
1、蘼蕪油對(duì)離體蟾蜍和蛙心臟，在濃度在10-5～10-4時(shí)使收縮振幅增大、心率稍慢。
2、蘼蕪水提液及其生物堿能擴(kuò)張冠狀和血管，增加冠脈血流量，改善心肌缺氧狀況。
3、蘼蕪、蘼蕪總生物堿和川芎嗪能使麻醉犬血管阻力下降，使腦、股動(dòng)脈及下肢血流量增加。
4、川芎嗪延長(zhǎng)在體外ADP誘導(dǎo)的血小板凝聚時(shí)間，對(duì)已聚集的血小板有解聚作用。
(三)對(duì)平滑肌的作用家兔離體妊娠子宮試驗(yàn)表明，蘼蕪浸膏使子宮收縮增強(qiáng)，形成攣縮；大劑量反而使子宮麻痹，收縮停止。
(四)蘼蕪煎劑對(duì)動(dòng)物放射病實(shí)驗(yàn)治療有一定的療效。
本發(fā)明所述蘼蕪油的毒性經(jīng)急毒試驗(yàn)表明，昆明種小鼠灌胃蘼蕪油LD50為2.99ml/kg，95％的可信限為2.14-4.18ml/kg；昆明種小鼠腹腔注射蘼蕪油LD50為0.75ml/kg，95％的可信限為0.58-0.98ml/kg。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)(1)大鼠灌胃蘼蕪油0.45ml/kg.d-1、0.225ml/kg.d-1、0.075ml/kg.d-1，連續(xù)13周；動(dòng)物外觀狀態(tài)正常，攝食正常，體重逐周增加，血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)、系統(tǒng)尸解和主要臟器病理組織學(xué)檢查，未見有意義的毒副改變?？赡嫘杂^察，未見異常。(2)Bealge犬灌胃蘼蕪油0.3ml/kg.d-1、0.15ml/kg.d-1、0.95ml/kg.d-1，連續(xù)13周；除高劑量組個(gè)別犬嘔吐、厭食、體重增加幅度較小外，其它動(dòng)物一般狀態(tài)正常，體重增加，小便常規(guī)、外周血象、骨髓象、血液生化指標(biāo)、心電圖、系統(tǒng)尸解及組織病理學(xué)觀察，未見明顯異常?？赡嫘杂^察，未見異常。結(jié)果提示，蘼蕪油長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，除過量對(duì)犬胃有刺激外，無明顯毒性。
蘼蕪油作為活性成分可以和/或藥學(xué)上可接受的輔料一起制成藥學(xué)上可接受的任意制劑如片劑、顆粒劑、乳劑、膠囊劑、滴丸劑等等。優(yōu)選軟膠囊制劑。
當(dāng)制備蘼蕪油軟膠囊制劑時(shí)，向蘼蕪油加入1-5倍量食用油，采用軟膠囊的一般性方法制成軟膠囊。
本品采用軟膠囊新劑型。因?yàn)檗率徲蜑橛腿芤?，宜制成軟膠囊劑。制成軟膠囊劑可掩蓋蘼蕪油的不良?xì)馕?，減少刺激性，增加制劑穩(wěn)定性，同時(shí)將液體藥物變成固體劑型，便于服用，且藥物進(jìn)入體內(nèi)后又變成液體易于吸收，因而生物利用度高，另因加入輔料較少，因此所得制劑體積較小，攜帶、儲(chǔ)存、運(yùn)輸均較方便。
具體的實(shí)施方式實(shí)施例1取蘼蕪新鮮藥材，干燥，粉碎，粒度為100目，超臨界CO2萃取，萃取溫度50℃，萃取壓力25MPa，CO2流量每公斤生藥20kg/hr。分離釜I壓力15MPa，溫度30℃，分離釜II壓力15Mpa，溫度30℃。萃取時(shí)間3小時(shí)，收集分離釜I、II中的萃取物，合并，置揮發(fā)油分離器中，室溫靜置6小時(shí)以上，分離油層，所得油層以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，分離油層，得蘼蕪油。所得蘼蕪油置棕色瓶?jī)?nèi)，密封貯存。
實(shí)施例2 軟膠囊的制備a)明膠液的制備取明膠100g加入適量水使其吸水膨脹。另將30g甘油及100g水置煮膠鍋中加熱至70-80℃，混合均勻，加入膨脹的明膠攪拌，熔融，保溫11-2小時(shí)靜置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，濾過，保溫待用；b)油液的制備；稱取實(shí)施例1制得的蘼蕪油1000g加熱滅菌，并與澄清的3000g食用植物油充分?jǐn)嚢杈鶆蚣吹茫籧)制丸將已經(jīng)制好的明膠甘油，置適宜容器中控制在60℃左右，將蘼蕪油放入油箱內(nèi)，液狀石蠟溫度以10-17℃為宜，室溫10-20℃，滴頭溫度40-50℃，開始滴丸；d)整丸，干燥，包裝。
試驗(yàn)例1 蘼蕪油的藥理試驗(yàn)蘼蕪油具有活血化瘀、祛風(fēng)止痛，治療瘀血頭痛、風(fēng)寒頭痛及風(fēng)濕頭痛等多種頭痛證的作用。經(jīng)主要藥效學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果如下①蘼蕪油能夠解除腎上腺素所致血管平滑肌的試驗(yàn)性痙攣，提示對(duì)血管痙攣性頭痛又治療作用。
②蘼蕪油能夠降低試驗(yàn)性疼痛扭體法的次數(shù)降低，小鼠對(duì)熱板刺激的痛閾值提高。顯示有明顯鎮(zhèn)痛作用。
③蘼蕪油能夠減少小鼠的自主活動(dòng)次數(shù)，延長(zhǎng)戊巴比妥鈉所致小鼠的睡眠時(shí)間，增加戊巴比妥鈉閾下睡眠的動(dòng)物數(shù)。顯示有鎮(zhèn)靜催眠作用。
④蘼蕪油能夠降低大鼠血瘀動(dòng)物模型的全血漿度、血漿粘度、全血高切還原粘度，減少試驗(yàn)性犬腦局灶性缺血?jiǎng)游锬X缺血的面積，改善腦組織的病理變化。
⑤蘼蕪油能夠提高熱輻射家兔頭痛動(dòng)物模型的痛閾，降低硝酸甘油型大鼠頭痛動(dòng)物模型c-fos基因表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)，降低硝酸甘油型頭痛大鼠外周血CGRP的含量，增加顯示有硝酸甘油致頭痛大鼠外周血ET、5-HT的含量。具有明顯地治療頭痛的作用。
結(jié)果提示，蘼蕪油具有解痙、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、活血，治療頭痛的作用。
權(quán)利要求
1.采用超臨界CO2萃取法制備的蘼蕪油，其特征在于它含有6-90％藁本內(nèi)酯。
2.按照權(quán)利要求1所述的蘼蕪油的制備方法，它包括取蘼蕪新鮮藥材，干燥，粉碎，超臨界CO2萃取，萃取溫度30～60℃，萃取壓力8～30MPa，CO2流量每公斤生藥0.1～40kg/hr；分離釜I壓力5～20MPa，溫度20～50℃，分離釜II壓力5～20Mpa，溫度20～50℃。萃取時(shí)間10min～6hr，收集分離釜I、II中的萃取物，合并，置揮發(fā)油分離器中，靜置，分離油層，所得油層再離心分離油層，得蘼蕪油。
3.按照權(quán)利要求2所述的蘼蕪油制備方法，其中在揮發(fā)油分離器中，室溫靜置6小時(shí)-8小時(shí)，分離油層，所得油層以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，分離油層，得蘼蕪油。
4.蘼蕪油藥物，它包括蘼蕪油作活性成分。
5.按照權(quán)利要求4所述的蘼蕪油藥物，它是軟膠囊。
6.按照權(quán)利要求5所述的蘼蕪油軟膠囊，其中軟膠囊中含有1∶1-5重量比的蘼蕪油與植物油。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蘼蕪油制備方法，它是從蘼蕪中采用CO
文檔編號(hào)A61P25/04GK1634161SQ20031010418
公開日2005年7月6日 申請(qǐng)日期2003年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月31日
發(fā)明者劉傳捷, 牛銳 申請(qǐng)人:成都高新區(qū)開元藥業(yè)有限公司