專利名稱：密腺小連翹在制備抗抑郁、促智或／和減肥藥物或食品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥用植物密腺小連翹的應(yīng)用，具體涉及密腺小連翹或其提取物在制備抗抑郁、促智或/和減肥藥物或食品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
密腺小連翹(Hypericum seniavinii Maxim.)為藤黃科金絲桃屬(Hypericum L.)多年生草本植物。常見于灌草叢中，貯藏量較大?，F(xiàn)有的技術(shù)和文獻(xiàn)沒有關(guān)于其抗抑郁、改善記憶、減肥的報(bào)道，也沒有其用于治療抑郁癥、癡呆、肥胖等疾病的記載。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供密腺小連翹或其提取物在制備抗抑郁、促智或/和減肥的藥物或食品中的應(yīng)用。
本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證明密腺小連翹具有抗抑郁、減肥和促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的活性。因此可作為抗抑郁、減肥和/或促智的藥物及食品的原料，用于制備抗抑郁、促智或/和減肥的藥物或食品。
本發(fā)明的應(yīng)用中所述的密腺小連翹是指該植物的花、葉片或有花有葉的地上部分或近頂端部分，或者是這些部分的提取物。其具體應(yīng)用可包括如下1.用于制備抗抑郁、減肥或/和促智的藥物。具體方法是將有效量的密腺小連翹或其提取物與醫(yī)藥上可接受的賦形劑或/和添加劑配合，制成適合于人體使用的不同劑型的藥物。
所制備的藥物，可用于治療抑郁癥、睡眠障礙、肥胖癥或老年癡呆、記憶力減退等病癥。
2.用于制備抗抑郁、減肥或/和促智的食品或食品補(bǔ)充劑。具體方法是將有效量的密腺小連翹或其提取物與常規(guī)的賦形劑和/或食品添加劑配合，制成適合人體服用劑型的食品或食品補(bǔ)充劑，如膠囊劑、片劑、茶劑等。
所制備的食品或食品補(bǔ)充劑，可作為抗衰老、減肥的保健食品，也可用作具有抑郁、焦慮、睡眠障礙、健忘、神經(jīng)功能紊亂等全部或部分癥狀的亞健康和正常人群的食品補(bǔ)充劑。
本發(fā)明所述的密腺小連翹提取物，可通過以下方法制備原料為密腺小連翹(最好使用7-9月采集的植株體)的花、葉片或有花有葉的地上部分或近頂端部分，采收后陰干，粉碎成粗粉，用有機(jī)溶劑在低于55℃(通常為室溫至45℃)浸提或超聲提取1～3次，每次溶劑體積用量為藥材重量的3～10倍，合并提取液，減壓濃縮回收溶劑，得密腺小連翹提取物。所得提取物中金絲桃素類含量一般為0.1～0.6％，總黃酮含量一般為10～50％。
所用的有機(jī)溶劑通常為乙醇、甲醇或丙酮等；有機(jī)溶劑可以是濃度為40～95％(V/V)的水溶液；每次浸提的時(shí)間一般為6～24h；每次超聲提取的時(shí)間一般為10～30min。
所制備的密腺小連翹提取物適用于制備口服制劑，如膠囊劑、片劑、茶劑等。
抑郁、記憶力減退等癥狀往往相伴產(chǎn)生，特別是對(duì)老年癡呆患者而言。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)表明，密腺小連翹或其提取物在具有抗抑郁活性的同時(shí)，還具有提高學(xué)習(xí)記憶的作用，不僅對(duì)抑郁癥的主要癥狀有治療作用，而且對(duì)相關(guān)的睡眠障礙、記憶力減退等癥狀亦有療效，能從多個(gè)環(huán)節(jié)上對(duì)抑郁癥進(jìn)行治療。此提取物在抗抑郁的作用中能夠抑制5-HT的再攝取，表現(xiàn)出抑制食欲、減少攝食從而具有減肥的作用。
具體實(shí)施例方式
以下通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例5～13所述的提取物為實(shí)施例1中所制備的提取物，藥材細(xì)粉為密腺小連翹藥材經(jīng)過球磨粉碎后通過100目篩的部分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行雙尾t檢驗(yàn)。
實(shí)施例1取密腺小連翹粗粉500g，用90％的乙醇室溫不時(shí)攪拌下浸提3次，每次提取24h，每次溶劑用量為3L，合并提取液，減壓濃縮回收溶劑至無醇味，冷凍干燥，得到密腺小連翹提取物，其中金絲桃素類含量為0.13％，總黃酮含量為26.41％。
實(shí)施例2取密腺小連翹粗粉300g，加入甲醇，40℃以下超聲提取3次，每次30min，每次用量均為1.5L。過濾，合并提取液，減壓濃縮回收溶劑得提取物。其中金絲桃素類含量為0.26％，總黃酮類含量為24.19％。
實(shí)施例3取密腺小連翹粗粉400g，加入丙酮，40℃以下超聲提取3次，每次30min，每次用量均為2.4L。過濾，合并提取液，減壓回收溶劑得提取物，其中金絲桃素類含量為0.34％，總黃酮類含量為20.52％。
實(shí)施例4取密腺小連翹粗粉700g，加入丙酮室溫并不斷攪拌下浸提3次，每次1天，溶劑用量分別為4.2L、2.5L和2.5L。過濾，合并提取液，減壓回收溶劑得提取物，其中金絲桃素含量為0.28％，總黃酮類含量為22.64％。
實(shí)施例5密腺小連翹提取物抗抑郁活性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為雄性NIH種小鼠18-22g(由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，隨機(jī)分為提取物組(250，500mg/kg)、空白對(duì)照組、陽性對(duì)照阿米替林組(20mg/kg)，每組10只。實(shí)驗(yàn)在室溫下進(jìn)行，同時(shí)保持自然晝夜節(jié)律。實(shí)驗(yàn)用藥物為本發(fā)明實(shí)施例1所得密腺小連翹提取物，臨用前用0.5％(W/V)的羧甲基纖維素水溶液超聲混懸；陽性對(duì)照藥為鹽酸阿米替林(常州四洲制藥)，臨用前蒸餾水配制；空白對(duì)照組為等體積的0.5％(W/V)的羧甲基纖維素水溶液(以下實(shí)施例亦同)。根據(jù)Porsolt等(PorsoltR.D.，Le Pichon M.，Jalfre M.，Chatterjee S.S.Depressiona new animal model sensitive to antidepressanttreatments.Nature，266，730-732(1977))的方法，分別在實(shí)驗(yàn)前1h灌胃給藥，進(jìn)行小鼠的強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。
在另一組動(dòng)物中，分組及給藥方法同上，根據(jù)Steru等(Steru L.R.，Chermat B.，Thierry P.，Simon.Thetail suspension testa new method for screening antidepressant activity in mice.Psychopharmacology，85，367-370(1985))的方法，進(jìn)行小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
表1.密腺小連翹提取物對(duì)小鼠行為絕望實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別劑量(mg/kg) 游泳不動(dòng)時(shí)間(s)懸尾不動(dòng)時(shí)間(s)空白對(duì)照組 - 105.9±19.2107.9±10.4提取物組 25063.7±13.2*71.7±11.2*提取物組 50071.8±10.7 53.0±9.3**阿米替林組 20 69.4±8.5* 43.2±10.6***P＜0.05，**P＜0.01vs空白對(duì)照組在小鼠游泳及小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可見，密腺小連翹提取物均能顯著縮短游泳不動(dòng)時(shí)間及懸尾不動(dòng)時(shí)間，說明密腺小連翹提取物在這兩種抑郁動(dòng)物模型上顯示出抗抑郁的活性。
實(shí)施例6密腺小連翹提取物對(duì)5-羥色胺酸誘導(dǎo)的小鼠甩頭實(shí)驗(yàn)小鼠腹腔注射(ip)帕吉林100mg/kg，30min后灌胃(ig)給予提取物、空白溶液或丙米嗪，再過1h后ip.5-羥色胺酸(5-HTP)20mg/kg，并立即放入空鼠籠里，累計(jì)第15分鐘到第35分鐘內(nèi)的甩頭次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
表2.密腺小連翹提取物對(duì)5-羥色胺酸誘導(dǎo)的小鼠甩頭實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別 劑量(mg/kg)甩頭次數(shù)(N)空白對(duì)照組 - 2.0±0.6提取物組 2503.8±0.9提取物組 5005.1±1.6*丙米嗪組 20 3.3±0.9*P＜0.05，**P＜0.01vs空白對(duì)照組從表2的結(jié)果可知，密腺小連翹提取物能顯著增加小鼠由5-羥色胺酸誘導(dǎo)的甩頭次數(shù)，表明其抗抑郁作用可能與5-羥色胺突觸再攝取抑制有關(guān)。
實(shí)施例7密腺小連翹提取物對(duì)小鼠體重影響的實(shí)驗(yàn)實(shí)施例5中用于測游泳不動(dòng)時(shí)間的小鼠，分別測其實(shí)驗(yàn)前體重，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后繼續(xù)每天給予提取物250、500mg/kg，空白對(duì)照組給予0.5％(W/V)的羧甲基纖維素水溶液，ig.每日一次，連續(xù)一周，于第七天測其體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。
表3.密腺小連翹提取物對(duì)小鼠體重影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別劑量(mg/kg)實(shí)驗(yàn)前體重(g) 實(shí)驗(yàn)后體重(g)空白對(duì)照組 - 20.1±0.3 26.3±0.6提取物組25020.0±0.3 22.2±0.4**提取物組50020.0±0.4 22.4±0.6***P＜0.05，**P＜0.01vs空白對(duì)照組從表3的結(jié)果可知，實(shí)驗(yàn)前小鼠體重?zé)o顯著差異，連續(xù)給予提取物一周后小鼠體重顯著低于空白對(duì)照組，說明該提取物具有減肥的作用。該提取物可能通過抑制5-HT的突觸再攝取，在中樞抑制食欲，從而達(dá)到減肥的作用。
實(shí)施例8密腺小連翹提取物抗衰老改善學(xué)習(xí)記憶的實(shí)驗(yàn)選用12月齡昆明種小鼠，雌雄兼用，體重40-55g，隨機(jī)分為老齡對(duì)照組、提取物組(100，50mg/kg·d)和陽性對(duì)照腦復(fù)康組；另選昆明種小鼠18-22g 10只，雌雄各半，作為青年對(duì)照組，連續(xù)灌胃7天，每日一次，末次給藥后次日開始訓(xùn)練，進(jìn)行跳臺(tái)和避暗實(shí)驗(yàn)。
跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)將小鼠放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境3min，然后立即通以36V連續(xù)直流電刺激5min，小鼠受到電擊后的正常逃避反應(yīng)是跳上橡皮墊。小鼠雙足同時(shí)接觸銅柵為觸電，視為錯(cuò)誤反應(yīng)。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊又迅速跳回平臺(tái)上。如此訓(xùn)練5min，并記錄每只小鼠5min內(nèi)受到的電擊的次數(shù)，作為錯(cuò)誤次數(shù)，以此評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)成績。24h后重復(fù)測驗(yàn)，記錄動(dòng)物第一次跳下平臺(tái)的潛伏期(若超過3min，按3min計(jì)算)，同時(shí)記錄3min內(nèi)的錯(cuò)誤總數(shù)。以此評(píng)價(jià)記憶保持成績。
避暗實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠頭部背向洞口放入明室，同時(shí)開始計(jì)時(shí)，小鼠穿過洞口進(jìn)入暗室受到電擊，立即停止計(jì)時(shí)，取出小鼠，記錄每只小鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遇到電擊所需的時(shí)間，此即潛伏期，以此評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)成績。24h后重做測驗(yàn)，記錄潛伏期和5min內(nèi)受到電擊的次數(shù)，以此評(píng)價(jià)記憶保持成績。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4與表5所示。
表4.密腺小連翹提取物在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中對(duì)老齡小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響組別 劑量 錯(cuò)誤次數(shù)(N)/減少率(％) 潛伏期(mg/kg) 學(xué)習(xí)記憶 (s)老齡對(duì)照組- 3.8±1.3 - 2.8±1.0 - 59.4±12.6青年對(duì)照組- 2.0±1.2** 47.41.2±0.8** 57.1140.1±35.2**提取物組 1002.5±1.4*34.21.8±1.1*35.7111.3±35.5**提取物組 50 3.3±1.7 13.22.4±1.3 14.370.4±22.5腦復(fù)康組 6002.6±1.0*31.62.0±0.7*28.699.2±20.1***P＜0.05，**P＜0.01vs老齡對(duì)照組在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)中可見，老齡組與青年組相比其遭受電擊的潛伏期明顯縮短，錯(cuò)誤數(shù)顯著增加。密腺小連翹提取物能提高老齡小鼠遭受電擊的潛伏期，減少錯(cuò)誤次數(shù)，說明其具有提高學(xué)習(xí)記憶成績的活性。
表5密腺小連翹提取物在避暗實(shí)驗(yàn)中對(duì)老齡小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響組別 劑量潛伏期(s)/改善率(％) 錯(cuò)誤次數(shù)(mg/kg) (N)學(xué)習(xí)記憶老齡對(duì)照組- 39.7±20.0 - 60.6±23.7 - 4.2±2.0青年對(duì)照組- 72.8±20.6*83.4 132.5±34.7**118.6 2.2±1.0**提取物組 100 66.6±21.5*67.8 90.8±30.0*49.8 2.5±1.3*提取物組 50 70.1±28.2 76.6 59.5±15.9 -1.8 3.3±1.4腦復(fù)康組 600 59.9±18.8*50.9 92.6±34.5*52.8 2.5±1.0**P＜0.05，**P＜0.01vs老齡組同樣，從避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，密腺小連翹提取物能顯著提高老齡小鼠進(jìn)入暗箱的潛伏期，減少電擊次數(shù)。
由以上兩個(gè)實(shí)驗(yàn)可以證明密腺小連翹提取物能夠改善衰老引起的記憶力減退，表現(xiàn)出抗衰老、促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的作用。
實(shí)施例9抗抑郁粉末膠囊材料密腺小連翹提取物150g，藥材細(xì)粉150g，抗壞血酸0.3g，微粉硅膠6g。
制備將提取物用乙醇溶解/混懸，加入藥材細(xì)粉及抗壞血酸，混勻，回收溶劑至干，所得物料真空干燥，粉細(xì)，加入微粉硅膠，裝膠囊，得1000粒抗抑郁粉末膠囊。
實(shí)施例10抗抑郁顆粒膠囊材料密腺小連翹提取物150g，藥材細(xì)粉150g，糖粉40g，抗壞血酸0.35g，羧甲基淀粉鈉8g，PVP 30g，乙醇200ml，硬脂酸鎂4g。
將提取物與藥材細(xì)粉混和，加入糖粉、抗壞血酸和羧甲基淀粉鈉，以PVP的乙醇液為粘合劑，制顆粒，40℃干燥后與硬脂酸鎂混勻后裝膠囊，得抗抑郁顆粒膠囊1000粒。
實(shí)施例11抗抑郁微丸膠囊材料丸芯120g，密腺小連翹提取物50g，抗壞血酸0.3g，淀粉60g，滑石粉60g，羥丙基甲基纖維素(HPMC)6g，丙酮200ml。
將提取物溶解在已加入HPMC的丙酮中，以此為粘合劑，以淀粉和滑石粉為包衣粉，在空白丸芯上進(jìn)行包衣，制得的微丸用IV號(hào)丙烯酸樹脂和羥丙基甲基纖維素進(jìn)行包衣，所得包衣微丸裝膠囊，得抗抑郁微丸膠囊1000粒。
實(shí)施例12抗抑郁軟膠囊材料密腺小連翹提取物150g，抗壞血酸0.3g，植物油150g，吐溫-80 3ml。
將各物料用膠體磨研磨均勻，軟膠囊機(jī)壓制，即得抗抑郁軟膠囊1000粒。
實(shí)施例13促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶片材料密腺小連翹提取物150g，藥材細(xì)粉100g，糖粉100g，抗壞血酸0.35g，羧甲基淀粉鈉8g，HMPC 6g，乙醇200ml，硬脂酸鎂2g，滑石粉2g。
將提取物與藥材細(xì)粉混和，加入糖粉，抗壞血酸和羧甲基淀粉鈉，以HPMC為粘合劑，制顆粒，干燥后與硬脂酸鎂、滑石粉混和均勻，壓片。
實(shí)施例14抗抑郁包衣片材料密腺小連翹提取物100g，藥材細(xì)粉100g，糖粉20g，微粉硅膠20g，抗壞血酸0.25g，羧甲基淀粉鈉3g，PVP 30g，乙醇200ml，硬脂酸鎂2.5g，HPMC 3g。
將提取物與藥材細(xì)粉混和，加入糖粉、微粉硅膠、抗壞血酸和羧甲基淀粉鈉，以PVP的乙醇液為粘合劑，制顆粒，干燥后與硬脂酸鎂混勻，壓片。所得素片用HPMC包衣，即得抗抑郁包衣片1000片。
實(shí)施例15抗抑郁茶劑采集密腺小連翹植物的花、葉片或帶葉片和花的小枝條，陰干或不超過60℃烘干，粉碎后直接裝袋，或添加適量矯味劑后裝袋，密封保存待用。
權(quán)利要求
1.密腺小連翹在制備抗抑郁、促智或/和減肥藥物或食品中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹是指該植物的花、葉片或有花有葉的地上部分或近頂端部分，或者是這些部分的提取物。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹的提取物是由以下方法制備的密腺小連翹的花、葉片或有花有葉的地上部分或近頂端部分，采收陰干后，粉碎成粗粉，用有機(jī)溶劑乙醇、甲醇或丙酮在低于55℃浸提或超聲提取1～3次，每次溶劑體積用量為藥材重量的3～10倍，合并提取液，減壓回收溶劑，得密腺小連翹提取物。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹提取物的制備中所用的有機(jī)溶劑是濃度為40～95％V/V的水溶液。
5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹提取物的制備中用有機(jī)溶劑在浸提或超聲提取的溫度為室溫至45℃。
6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹提取物的制備中用有機(jī)溶劑浸提的時(shí)間為每次6～24h，超聲提取的時(shí)間為每次10～30min。
7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征是所述的密腺小連翹提取物中金絲桃素類含量為0.1～0.6％，總黃酮含量為10～50％。
8.如權(quán)利要求1～7之一所述的應(yīng)用，其特征是將有效量的密腺小連翹或其提取物與醫(yī)藥上可接受的賦形劑或/和添加劑配合，制成抗抑郁、促智和/或減肥的藥物。
9.如權(quán)利要求1～7之一所述的應(yīng)用，其特征是將有效量的密腺小連翹或其提取物與常規(guī)輔料、賦形劑和/或食品添加劑配合，制成抗抑郁、減肥和/或促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的食品。
全文摘要
本發(fā)明涉及植物密腺小連翹或其提取物在制備抗抑郁、促智或/和減肥藥物或食品中的應(yīng)用。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，密腺小連翹或其提取物可作為有效成分用于制備治療抑郁癥、睡眠障礙、老年癡呆、記憶力減退、肥胖等病癥的藥物；亦可作為食品補(bǔ)充劑或食品添加劑制成抗衰老、減肥的食品，或制成可用作具有抑郁、睡眠障礙、健忘、神經(jīng)功能紊亂等全部或部分癥狀的亞健康和普通人群的保健食品。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1554400SQ20031011752
公開日2004年12月15日 申請(qǐng)日期2003年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月26日
發(fā)明者楊得坡, 白潔, 王冬梅, 吳立宏 申請(qǐng)人:中山大學(xué)