專利名稱：低分子量硫酸軟骨素注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低分子量硫酸軟骨素注射劑及其制備方法，具體地講，本發(fā)明涉及一種分子量在2,000-10,000道爾頓之間的低分子量硫酸軟骨素注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
硫酸軟骨素是一種以豬、牛、羊等動物的軟骨組織和鯊魚等水產(chǎn)品的軟骨為原材料，利用生化提取工藝技術(shù)制得的大分子的酸性粘多糖類。硫酸軟骨素的鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋅鹽等廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健產(chǎn)品、食品、化妝品、寵物飼料等，例如硫酸軟骨素可以作為降血脂藥，用于臨床治療高血脂癥，而硫酸軟骨素A鈉注射液則具有降低血脂、抗動脈粥樣斑塊形成、抗凝以及降低機體耗氧量的作用，可以用于治療動脈粥樣硬化疾病、心絞痛、高血脂癥等。硫酸軟骨素具有多種生理功能，在維持組織和免疫機能上起著重要作用，可以用于防治冠心病、治療偏頭痛等神經(jīng)性疼痛、改善老年性關(guān)節(jié)功能退化等。
現(xiàn)在市售的硫酸軟骨素藥品主要有口服固體劑型(片劑、膠囊劑)、注射劑、滴眼劑等藥品。所有藥品采用的原料藥，均為分子量波動范圍較大的硫酸軟骨素A與硫酸軟骨素C的水溶性聚合體，或者為硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素C的鈉鹽。
硫酸軟骨素產(chǎn)品通常是以一種平均分子量約40,000-50,000道爾頓的水溶性聚合物形式存在，其中，硫酸以醚鍵連接在重復(fù)結(jié)合起來的二糖上。硫酸軟骨素產(chǎn)品通常為硫酸軟骨素A和硫酸軟骨素C這兩種主要構(gòu)型的混合物。
硫酸軟骨素的生產(chǎn)方法主要有三種酸降解、堿降解、酶解法，以其鈉鹽較為常見，還可根據(jù)需要，生產(chǎn)硫酸軟骨素鉀鹽、鈣鹽或鋅鹽，如CN 99112553.3和CN 99112554.1中公開了硫酸軟骨素及其生產(chǎn)方法。不同工藝方法生產(chǎn)的硫酸軟骨素分子量不同，一般在20,000-50,000道爾頓之間。普通硫酸軟骨素藥品存在分子量波動大、口服吸收差、生物利用度低、療效不穩(wěn)定等缺點。但迄今為止，對于硫酸軟骨素藥品的分子量范圍，仍沒有明確的國家藥品標(biāo)準(zhǔn)要求。
藥用硫酸軟骨素原料的生產(chǎn)工藝和技術(shù)，通常必須得到國家藥品行政管理部門的正式批準(zhǔn)，所得到的硫酸軟骨素藥用注射原料的平均分子量在5000-50,000道爾頓之間，硫酸軟骨素A的平均分子量為50,000道爾頓，硫酸軟骨素C的平均分子量為25,000道爾頓?，F(xiàn)有的硫酸軟骨素A鈉注射劑等藥品仍然由分子量波動范圍較大的硫酸軟骨素原料藥制備而得。
但實際上，硫酸軟骨素的生物活性隨分子量不同而各異，其藥理活性與分子量有著密切的關(guān)系。美國專利US3,405,120中已經(jīng)披露，當(dāng)硫酸軟骨素的平均分子量在2,000-6,000道爾頓時，其藥理活性最強，對防治動脈粥樣硬化、風(fēng)濕性炎癥和傷口愈合等具有更好的療效。所以，低分子量的硫酸軟骨素比普通分子量的硫酸軟骨素具有更好的臨床療效。
現(xiàn)有技術(shù)已公開了多種制備低分子量硫酸軟骨素的方法，例如美國專利US3,405,120中的酸水解法、日本特許70-04734和74-30817中的離子交換樹脂法以及日本特許73-14078中的酶解法等。這些方法雖然均可以制備低分子量的硫酸軟骨素，但是其制備方法中沒有進一步純化分離的步驟，如US3,405,120中的酸分解混合物在沒有進行分離的前提下就加入乙醇進行沉淀，因而所制得的產(chǎn)品純度不高，不適于制備注射劑型的藥品。
由于目前我國未有生產(chǎn)低分子量硫酸軟骨素的工藝技術(shù)，而且國內(nèi)外的低分子量的硫酸軟骨素的分離純化技術(shù)尚未過關(guān)，因此一直未有該藥品的注射劑上市。目前，我國市場上出售的硫酸軟骨素中沒有分子量低于10,000道爾頓的產(chǎn)品。低分子量的硫酸軟骨素比分子量不確定的普通硫酸軟骨素的藥理活性要好，而且更易吸收。因此，很有必要研制出一種制備低分子量的硫酸軟骨素的方法，并將低分子量的硫酸軟骨素制成適宜的藥物劑型。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種低分子量硫酸軟骨素注射劑。
在本發(fā)明的低分子量硫酸軟骨素注射劑(或稱注射液)中，所含的低分子量硫酸軟骨素的平均分子量是2,000-10,000道爾頓，其可以選自于硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素A的鈉鹽、硫酸軟骨素A的鉀鹽、硫酸軟骨素A的鈣鹽、硫酸軟骨素A的鋅鹽、硫酸軟骨素A的鐵鹽、硫酸軟骨素A的鎂鹽、硫酸軟骨素A的鋁鹽、硫酸軟骨素C、硫酸軟骨素C的鈉鹽、硫酸軟骨素C的鉀鹽、硫酸軟骨素C的鈣鹽、硫酸軟骨素C的鋅鹽、硫酸軟骨素C的鐵鹽、硫酸軟骨素C的鎂鹽和硫酸軟骨素C中的一種或幾種；這種注射劑為水針劑，并可以含有醫(yī)藥學(xué)上可接受的附加劑。
優(yōu)選地，本發(fā)明的低分子量硫酸軟骨素注射劑中，所含低分子量硫酸軟骨素的平均分子量是2,000-8,000道爾頓。
本發(fā)明中，低分子量硫酸軟骨素優(yōu)選選自于硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素A的鈉鹽、硫酸軟骨素A的鉀鹽、硫酸軟骨素A的鈣鹽、硫酸軟骨素C、硫酸軟骨素C的鈉鹽、硫酸軟骨素C的鉀鹽和硫酸軟骨素C的鈣鹽中的一種或幾種；更優(yōu)選地，低分子量硫酸軟骨素選自于硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素A的鈉鹽、硫酸軟骨素C和硫酸軟骨素C的鈉鹽中的一種或幾種。
本發(fā)明的低分子量硫酸軟骨素注射劑中，所加入的附加劑是選自于氯化鈉、葡萄糖、果糖和乳糖中的一種或幾種，也可以包含其它的藥物輔料如抗氧劑、等滲調(diào)節(jié)劑、增溶劑、抑菌劑、局麻劑、緩沖劑，也可以根據(jù)需要，添加其他的附加劑，例如，配方中含有對血管有刺激的物質(zhì)，可以加入局麻劑；含有易氧化的物質(zhì)可以加入亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉等抗氧劑；含有易酸敗的物質(zhì)可以加入苯甲醇、苯酚、硝酸苯汞等抑菌劑。
上述的低分子量硫酸軟骨素注射劑可以包括低分子量的硫酸軟骨素B等對發(fā)揮藥效沒有太大作用并且不會產(chǎn)生毒副作用的物質(zhì)，但優(yōu)選不含此類物質(zhì)。
在上述的低分子量硫酸軟骨素注射劑中，所采用的低分子量硫酸軟骨素是用包括如下步驟的方法制備的(1)將普通分子量的硫酸軟骨素進行酸水解；(2)上述酸水解后的產(chǎn)物進行堿中和，調(diào)節(jié)至pH＝8-11的堿性條件下，然后進行離心分離，除去雜蛋白的沉淀；(3)將上述步驟(2)所得的上清液調(diào)pH至中性，然后進行超濾，截留除去大分子量的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(4)將步驟(3)所得的濾液進行納濾濃縮，脫除小分子雜質(zhì)。
本發(fā)明另一個目的是提供一種制備低分子量硫酸軟骨素注射劑的方法。
本發(fā)明制備低分子量硫酸軟骨素注射劑的方法包括如下步驟(1)將普通分子量的硫酸軟骨素進行酸水解；(2)上述酸水解后的產(chǎn)物進行堿中和，調(diào)節(jié)至pH＝8-11的堿性條件下，然后進行離心分離，除去雜蛋白的沉淀；(3)將上述步驟(2)所得的上清液調(diào)pH至中性，然后采用超濾膜進行單級超濾或多級超濾，截留除去平均分子量大于10,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(4)將步驟(3)所得的濾液用納濾膜進行納濾濃縮，截留脫除平均分子量小于2,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(5)將步驟(4)所得的濃縮液進行噴霧干燥或者加入乙醇進行結(jié)晶沉淀，得到低分子量硫酸軟骨素；(6)將步驟(5)中制得的低分子量硫酸軟骨素溶于注射用水中，并加入注射用活性炭，加熱保溫，然后過濾脫碳，灌裝、封口，即制得低分子量硫酸軟骨素注射劑。
上述方法中，步驟(1)中的普通分子量的硫酸軟骨素可以是市售的硫酸軟骨素。如果采用的是市售的硫酸軟骨素粗品，則可以直接進行酸水解。當(dāng)然，也可以直接由動物軟骨組織出發(fā)，先通過堿液提取、酶解等方法得到硫酸軟骨素粗品，再進行酸水解。這樣，在酸水解之前可以包括堿液提取和/或酶解等步驟，但這些步驟不是必需的。
上述步驟(1)中酸水解所使用的酸可以是選自于鹽酸、硫酸、硝酸和草酸中的一種，而且最好選用濃度較高的酸，例如選用濃度為0.1-1N的酸。酸水解的作用是得到低分子量的硫酸軟骨素。如果用市售硫酸軟骨素粗品進行酸水解，則酸水解溫度可以控制在40-90℃范圍內(nèi)，優(yōu)選為60-80℃。水解時間一般可以控制在3-12小時內(nèi)，優(yōu)選為8-10小時。
實際上，步驟(1)除了采用酸水解法以外，還可以采用其他方法，例如離子交換樹脂法、酶解法等。
上述步驟(2)中，先用堿性物質(zhì)將步驟(1)酸水解產(chǎn)物的pH值調(diào)至弱酸性范圍可以終止酸水解反應(yīng)，所用的堿性物質(zhì)可以是氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鈣、碳酸氫鈉等，優(yōu)選為碳酸氫鈉、碳酸氫鈉等弱堿；然后，繼續(xù)調(diào)節(jié)至pH＝8-11的堿性條件下，然后進行離心分離，除去雜蛋白的沉淀。離心分離時，優(yōu)選使用連續(xù)流離心機進行雜蛋白的分離。與傳統(tǒng)的濾布、馬槽過濾法相比，這種分離方式的效果好、損耗低、生產(chǎn)效率高。
上述步驟(3)中，超濾的作用是除去低分子量硫酸軟骨素中的大分子雜質(zhì)，例如蛋白質(zhì)、多糖等，并截留分子量不合要求的硫酸軟骨素。所謂的超濾(簡稱UF)是指以壓力為推動力，利用超濾膜的不同孔徑對液體進行分離的物理篩分過程。超濾的截留分子量(CWCO)一般為6,000到500,000道爾頓。實際上，超濾和納濾(NF)都屬于膜分離技術(shù)，即利用分離膜對混合物中各組分的選擇滲透作用性能的差異，以外界能量或化學(xué)位差為推動力對雙組分或多組分混合的氣體或液體進行分離、分級、提純和富集的方法。超濾使用的濾膜能截留不同分子量大小的雜質(zhì)，截留的平均分子量范圍在3,000-50,000道爾頓左右。由于低分子量硫酸軟骨素的分子量范圍是2,000-10,000道爾頓，而蛋白質(zhì)、多糖的平均分子量通常大于10,000道爾頓，因此，脫除雜質(zhì)優(yōu)選采用截留量為10,000道爾頓的濾膜。另外，由于低分子量硫酸軟骨素的黏度較大，對超濾膜的污染較為嚴(yán)重，因此，優(yōu)選采用聚丙烯腈膜、硫化聚砜膜等。
上述步驟(3)中的超濾可以是單級超濾或者多級超濾。優(yōu)選采用三級超濾，截留除去平均分子量大于8,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)。
上述步驟(4)中的納濾可以起到濃縮、除去小分子雜質(zhì)如鹽類的作用。所謂納濾(簡稱NF)是指分離膜的孔徑處于納米級，適宜于分離分子量在200～2,000、分子尺寸約為1nm的溶解組分的膜工藝。NF膜分離需要的跨膜壓差一般為0.5～2.0MPa，比用反滲透膜達到同樣的滲透能量所必需施加的壓差低0.5～3MPa。根據(jù)操作壓力和分離界限，可以定性地將NF排在反滲透和超濾之間，也有人把NF稱為″低壓反滲透″或″疏松反滲透″。NF技術(shù)發(fā)展很快，NF膜組件于80年代中期已經(jīng)商品化。納濾的截留能力大于超濾，能截留平均分子量在200-2,000道爾頓左右的物質(zhì)。與超濾和反滲透相比，納濾的優(yōu)點是既能截留透過超濾膜的那部分小分子量的有機物，又能透析反滲透膜所截留的無機鹽——即濃縮與脫鹽同步進行；而且在同等的外加壓力下，納濾的通量要比反滲透大得多；當(dāng)通量一定時，納濾所需的壓力要比反滲透的低得多。所以用納濾方法替代反滲透方法，“濃縮”過程可更有效、快速地進行，并達到較大的“濃縮”倍數(shù)。單純采用超濾，即使是多級超濾也只能起到濃縮的作用而達不到除鹽的目的，并且濃縮的效率低。因此，本發(fā)明采用納濾的方法進行濃縮、除鹽，要比超濾更為有效、簡便、快捷，大大提高了工業(yè)化生產(chǎn)的效率。
優(yōu)選地，上述步驟(4)中的納濾濃縮是截留脫除平均分子量小于2,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)，尤其是除去小分子雜質(zhì)、無機鹽和水分。
上述步驟(5)中，通過納濾得到的低分子量硫酸軟骨素濃縮液，可以直接干燥，如采用噴霧法進行干燥；也可以在濃縮液中添加乙醇(2-8倍)等有機溶劑進行結(jié)晶沉淀，然后進行干燥。如果選用乙醇法進行沉淀，則乙醇的濃度優(yōu)選為95％。干燥時優(yōu)選采用真空干燥。與傳統(tǒng)的乙醇沉淀、結(jié)晶、干燥工序相比，噴霧干燥法具有生產(chǎn)效率高、損耗低、產(chǎn)品無乙醇殘留、水分易于控制、便于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。
在上述方法的步驟(6)中，低分子量硫酸軟骨素可以直接加注射用水進行溶解，也可以先和增溶劑混勻后再加注射用水溶解。如果注射劑中除了低分子量硫酸軟骨素以外還有其他藥物成分，例如葡萄糖、氯化鈉，則可以將它們一起加入到溶液中并使其溶解。當(dāng)然，還可以根據(jù)需要，加入其它的藥用附加劑。
在上述方法的步驟(6)中，加入注射用活性炭的主要目的是脫色，當(dāng)然也可以采用其它的脫色方法。由于低分子量硫酸軟骨素是一種粘多糖，因此加熱脫色的溫度不宜過高，優(yōu)選為60-70℃；脫色時間也不宜過長，優(yōu)選為15-30分鐘。
在上述方法的步驟(6)中，過濾脫炭所用的裝置可以是沙濾棒、玻璃垂熔漏斗等。
在上述的方法的步驟(6)中，可以將低分子量硫酸軟骨素灌裝至各種規(guī)格的安瓶或其他式樣的容器中，例如青霉素小瓶、輸液瓶等。
在上述方法的步驟(6)中，可以按藥典的規(guī)定進行注射液澄明度、熱原、無菌等質(zhì)量檢查。
由于本發(fā)明利用截留分子量不同的超濾膜和納濾膜，因此可以根據(jù)需要，很方便地分離出各種不同分子量的低分子量硫酸軟骨素產(chǎn)品，例如平均分子量為2,000-4,000、4,000-6,000、6,000-8,000、8,000-10,000道爾頓的低分子量硫酸軟骨素產(chǎn)品，從而可以方便地制備各種不同分子量的低分子量硫酸軟骨素注射劑。
本發(fā)明采用超濾、納濾膜法分級純化硫酸軟骨素，具有高效、節(jié)能、無污染等特點，而且產(chǎn)品質(zhì)量高，干劑含量甚至可以達到99％以上。
以下結(jié)合實施例，來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明不局限于這些實施例，任何在本發(fā)明基本精神上的改進或替代，仍屬于本發(fā)明權(quán)利要求書中所要求保護的范圍。
具體實施例方式
實施例1低分子量硫酸軟骨素的制備將1300升去離子水置于夾層反應(yīng)罐內(nèi)，加熱至65℃，加入30公斤市售硫酸軟骨素(平均分子量59,000道爾頓)粗品，攪拌溶解，溶液加入36％鹽酸26升，加入去離子水至1500升，使溶液的鹽酸濃度約為0.2N。保溫并攪拌反應(yīng)10小時后，迅速冷卻，加入4％氫氧化鈉水溶液，使溶液的pH值在9.0左右，然后用連續(xù)流離心機除去雜蛋白的沉淀。所得的上清液用超濾膜進行過濾，再用納濾膜進行濃縮，濃縮液進行噴霧干燥，得到27.6公斤白色低分子量硫酸軟骨素(平均分子量3700道爾頓)。
實施例2低分子量硫酸軟骨素的制備將1300升去離子水置于夾層反應(yīng)罐內(nèi)，加熱至80℃，加入30公斤市售硫酸軟骨素(平均分子量51,000道爾頓)粗品，攪拌溶解，溶液加入13.5公斤草酸，加入去離子水至1500升，使溶液的鹽酸濃度約為0.1N。保溫并攪拌反應(yīng)12小時后，迅速冷卻，加入16公斤碳酸鈣，分離草酸鈣沉淀后，使溶液的pH值在9.5左右，然后用連續(xù)流離心機除去雜蛋白的沉淀。所得的上清液用超濾膜過濾，納濾膜進行濃縮，濃縮液進行噴霧干燥，得到22.8公斤白色低分子量硫酸軟骨素(平均分子量6300道爾頓)。
實施例3低分子量硫酸軟骨素的制備將650升去離子水置于夾層反應(yīng)罐內(nèi)，加熱至73℃，加入40公斤市售硫酸軟骨素(平均分子量51,000道爾頓)，攪拌溶解，溶液加入36％鹽酸11.2升，加入去離子水至1500升，使溶液的鹽酸濃度約為0.2N。保溫并攪拌反應(yīng)8.5小時后，迅速冷卻，加入6.8公斤碳酸鈉，使溶液的pH值在10.0左右，然后用連續(xù)流離心機除去雜蛋白的沉淀。所得的上清液用超濾膜過濾，納濾膜進行濃縮，濃縮液進行噴霧干燥，得到37公斤白色低分子量硫酸軟骨素(平均分子量4400道爾頓)。
實施例4低分子量硫酸軟骨素的制備按常規(guī)方法由粉碎的動物軟骨，經(jīng)堿提取、酸中和、酶水解后，加入36％的鹽酸，使溶液的酸度在0.1-5N，在35-95℃的條件下，酸水解3-12小時，加堿使溶液的pH值在10.5左右，然后用連續(xù)流離心機除去雜蛋白的沉淀。所得的上清液進行超濾，除去大分子雜質(zhì)，再進行納濾濃縮后，最后進行噴霧干燥，得到平均分子量小于10,000道爾頓的低分子量硫酸軟骨素產(chǎn)品。
實施例5低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備注射劑配方 每1000支用量低分子量硫酸軟骨素(按無水物計) 80g注射用水 加至 2L其制備方法為將低分子量硫酸軟骨素按處方量的105％投料，溶解于水，加水至體積，混勻，60-70℃并保溫，加入0.1％注射用活性炭，60-70℃加保溫20分鐘左右，玻璃垂熔漏斗過濾脫碳，灌裝，封口，115℃熱壓滅菌30分鐘，質(zhì)量檢查，即得2m1的低分子量硫酸軟骨素注射劑。
實施例6低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備注射劑配方每1000支用量低分子量硫酸軟骨素(按無水物計) 100g氯化鈉 900g注射用水 加至 100L其制備方法為將低分子量硫酸軟骨素按處方量的105％投料，溶解于水，加入氯化鈉溶解，加水至體積，混勻，60-70℃并保溫；加入0.3％注射用活性炭，60-70℃加保溫20分鐘左右，沙濾棒過濾脫碳，灌裝，封口，120℃熱壓滅菌30分鐘，質(zhì)量檢查，即得100ml的低分子量硫酸軟骨素注射劑。
實施例7低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備注射劑配方每1000瓶用量低分子量硫酸軟骨素(按無水物計)100g葡萄糖500g注射用水 加至 250L其制備方法為將主藥低分子量硫酸軟骨素按處方量的105％投料，溶解于水，加入葡萄糖溶解，加水至體積，混勻，60-70℃并保溫，加入0.5％注射用活性炭，60-70℃加保溫20分鐘左右，沙芯過濾脫碳，灌裝，封；120℃熱壓滅菌30分鐘，質(zhì)量檢查，即得250ml的低分子量硫酸軟骨素葡萄糖注射劑。
實施例8低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備注射劑配方每1000瓶用量低分子量硫酸軟骨素(按無水物計) 100g氯化鈉 450g葡萄糖 500g注射用水 加至 500L其制備方法為將主藥低分子量硫酸軟骨素按處方量的105％投料，溶解于水，加入氯化鈉、葡萄糖溶解，加水至體積，混勻，60-70℃并保溫，加入0.1％注射用活性炭，60-70℃加保溫20分鐘左右，沙芯過濾脫碳，灌裝，封口，115℃熱壓滅菌30分鐘，質(zhì)量檢查，即得500ml的低分子量硫酸軟骨素葡萄糖氯化鈉注射劑。
權(quán)利要求
1.一種低分子量硫酸軟骨素注射劑，該注射劑中所含的硫酸軟骨素的平均分子量是2,000-10,000道爾頓，其特征在于，所述的低分子量硫酸軟骨素是選自于硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素A的鈉鹽、硫酸軟骨素A的鉀鹽、硫酸軟骨素A的鈣鹽、硫酸軟骨素A的鋅鹽、硫酸軟骨素A的鐵鹽、硫酸軟骨素A的鎂鹽、硫酸軟骨素A的鋁鹽、硫酸軟骨素C、硫酸軟骨素C的鈉鹽、硫酸軟骨素C的鉀鹽、硫酸軟骨素C的鈣鹽、硫酸軟骨素C的鋅鹽、硫酸軟骨素C的鐵鹽、硫酸軟骨素C的鎂鹽和硫酸軟骨素C中的一種或幾種；所述的注射劑為水針劑，并含有醫(yī)藥學(xué)上可接受的附加劑。
2.如權(quán)利要求1所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑，其特征在于，所述的低分子量硫酸軟骨素是選自于硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素A的鈉鹽、硫酸軟骨素A的鉀鹽、硫酸軟骨素A的鈣鹽、硫酸軟骨素C、硫酸軟骨素C的鈉鹽、硫酸軟骨素C的鉀鹽和硫酸軟骨素C的鈣鹽中的一種或幾種。
3.如權(quán)利要求1所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑，其特征在于，所述的低分子量硫酸軟骨素的平均分子量是2,000-8,000道爾頓。
4.如權(quán)利要求1所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑，其特征在于，所述的附加劑是選自于氯化鈉、葡萄糖、果糖和乳糖中的一種或幾種。
5.如權(quán)利要求1所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑，其特征在于，所述的低分子量硫酸軟骨素是采用包括如下步驟的方法制備的(1)將普通分子量的硫酸軟骨素進行酸水解；(2)將上述酸水解后的產(chǎn)物進行堿中和，調(diào)節(jié)至pH＝8-11的堿性條件下，然后進行離心分離，除去雜蛋白的沉淀；(3)將上述步驟(2)所得的上清液調(diào)pH至中性，然后進行超濾，截留除去大分子量的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(4)將步驟(3)所得的濾液進行納濾濃縮，脫除小分子雜質(zhì)。
6.一種低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備方法，該方法包括如下步驟(1)將普通分子量的硫酸軟骨素進行酸水解；(2)將上述酸水解后的產(chǎn)物進行堿中和，調(diào)節(jié)至pH＝8-11的堿性條件下，然后進行離心分離，除去雜蛋白的沉淀；(3)將上述步驟(2)所得的上清液調(diào)pH至中性，然后采用超濾膜進行單級超濾或多級超濾，截留除去平均分子量大于10,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(4)將步驟(3)所得的濾液用納濾膜進行納濾濃縮，截留脫除平均分子量小于2,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)；(5)將步驟(4)所得的濃縮液進行噴霧干燥或者加入乙醇進行結(jié)晶沉淀，得到低分子量硫酸軟骨素；(6)將步驟(5)中制得的低分子量硫酸軟骨素溶于注射用水中，并加入注射用活性炭，加熱保溫，然后過濾脫碳，灌裝、封口，即制得低分子量硫酸軟骨素注射劑。
7.如權(quán)利要求6所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備方法，其特征在于，步驟(1)中酸水解所使用的酸是選自于鹽酸、硫酸、硝酸和草酸中的一種。
8.如權(quán)利要求6所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的離心分離是在連續(xù)流離心機中進行的。
9.如權(quán)利要求6所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的超濾是采用超濾膜進行三級超濾，截留除去平均分子量大于10,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)。
10.如權(quán)利要求6所述的低分子量硫酸軟骨素注射劑的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述的納濾濃縮是截留脫除平均分子量小于2,000道爾頓的硫酸軟骨素和雜質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低分子量硫酸軟骨素的注射劑及其制備方法。本發(fā)明的低分子量硫酸軟骨素注射劑中包括平均分子量在2,000－10,000道爾頓范圍內(nèi)的低分子量硫酸軟骨素和/或其鹽類，還可以另外加入藥用附加劑，所含的低分子量硫酸軟骨素是采用超濾技術(shù)和納濾技術(shù)制得的。相對于普通的硫酸軟骨素注射劑，本發(fā)明的硫酸軟骨素注射劑分子量低，純度高，具有更好的藥理活性。
文檔編號A61P9/00GK1513471SQ20031011930
公開日2004年7月21日 申請日期2003年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月7日
發(fā)明者湯毅, 湯 毅 申請人:湯毅, 湯 毅