專利名稱：一種治療肝炎的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及一種治療肝炎的藥物及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前，肝炎已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種傳染病，嚴(yán)重地影響了生產(chǎn)、工作和學(xué)習(xí)，必須積極地進(jìn)行防治。
用于肝炎治療的藥物品種甚多，如干擾素、阿糖腺苷、拉米夫定、甘草甜素等。同時(shí)，利用中藥治療各類型急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化和膽道疾病也取得了一定的效果，在改善病癥、恢復(fù)肝功能、抑制病毒復(fù)制及抗肝纖維化等方面具有自身優(yōu)勢(shì)，而且毒副作用小、不易復(fù)發(fā)。例如中國(guó)專利CN 1100642A是一種治療乙型病毒性肝炎的中藥制劑，由羚羊角、珍珠母、黃芩、焦梔子、澤瀉、龍膽草等29味中藥組成；中國(guó)專利1179953是一種配套服用的中藥乙肝病毒轉(zhuǎn)陰劑，通過(guò)配套服用甲、乙、丙三種配方組成的中藥而治愈各種急、慢性肝炎；以及中國(guó)專利1253830為治療肝炎、膽管炎、胰腺炎、肝硬化的中藥配方的專利等都公開(kāi)了不同的治療乙型肝炎的中藥配方、制備方法和服用方法。
但是，對(duì)于目前治療肝炎的中成藥，患者長(zhǎng)期服用后會(huì)出現(xiàn)脾虛、寒冷等諸多不適癥狀，導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)障礙、水液失于布散而生濕釀痰。由于這些原因，患者不能全療程用藥，導(dǎo)致療效欠佳。另外，許多復(fù)方中藥只是諸多單味藥簡(jiǎn)單的拼湊堆積，沒(méi)有一定數(shù)量的臨床驗(yàn)證，也沒(méi)有中醫(yī)理論的支持，其臨床療效尚待評(píng)價(jià)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服目前治療肝炎的中藥普遍存在的導(dǎo)致患者脾虛、寒冷，療效不佳，多味藥的簡(jiǎn)單拼湊的問(wèn)題，提供一種配伍精當(dāng)、療效顯著、長(zhǎng)期服用無(wú)毒副作用且藥價(jià)低廉的治療肝炎的藥物，該藥物是著名中醫(yī)的幾十年臨床經(jīng)驗(yàn)與中醫(yī)理論的結(jié)晶。
本發(fā)明的另外一個(gè)目的是提供了該藥物的制備方法。
本發(fā)明藥物遵仲景肝病傳脾之論，集取經(jīng)方小柴胡湯、茵陳蒿湯、大黃蟅蟲丸、黃芪建中湯和、清、消、補(bǔ)之法之主藥，結(jié)合長(zhǎng)期臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)而獨(dú)創(chuàng)。
本發(fā)明藥物由下列組分制成(用量為重量份)柴胡6 黃芩3～9 黃芪3～9茵陳3～9 茜草3～9 梔子3～9蟅蟲3～9 白術(shù)2～8 鳳尾草3～12制備本發(fā)明藥物的配方優(yōu)選重量(份)配比范圍是柴胡6 黃芩3～9 黃芪3～9茵陳4～8 茜草4～8 梔子4～8蟅蟲3～8 白術(shù)4～8 鳳尾草3～12本發(fā)明藥物的最佳重量(份)配比是柴胡6 黃芩6黃芪6茵陳5 茜草5梔子6蟅蟲4 白術(shù)4鳳尾草5本發(fā)明藥物可以采用中藥制劑的常規(guī)方法制備成任何常規(guī)口服制劑。但是為了使該藥物的各原料藥更好的發(fā)揮藥效，優(yōu)選對(duì)梔子、茜草、鳳尾草用乙醇提取。
將上述各組分制成本發(fā)明藥物的生產(chǎn)方法是a)將所述重量配比的梔子粉碎，與所述重量配比的茜草、鳳尾草混合，加70～80％乙醇進(jìn)行回流提取，將提取液回收乙醇，得浸膏1；b)取所述重量配比的柴胡、黃芪、黃芩、茵陳、蟅蟲、白術(shù)，加入水煎煮兩次，合并兩次的水煎液，過(guò)濾得濾液2；c)將浸膏1和濾液2合并，濃縮成相對(duì)密度為1.01～1.30的浸膏，就制成了本發(fā)明藥物的活性組分。
d)向步驟c)得到的本發(fā)明藥物的活性組分中，加入制備不同劑型所需的各種常規(guī)輔料，如崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑等以常規(guī)的中藥制劑方法制成任何一種常用口服劑型，如丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液等。
上述制備方法中，步驟b)中將原料藥加水煎煮時(shí)，優(yōu)選第一次加水8倍量，煎煮1.5小時(shí)，第二次加水6倍量，煎煮1小時(shí)。
本發(fā)明藥物是在總結(jié)大量臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，謹(jǐn)慎擇藥，合理配伍組方而成，以溫補(bǔ)為主，兼以疏肝健脾、清利濕熱、活血軟堅(jiān)于一體，對(duì)肝郁脾虛、濕熱內(nèi)蘊(yùn)、絡(luò)脈瘀阻所致諸病癥，都具有顯著綜合療效。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)具體說(shuō)明本發(fā)明藥物的有益效果。
實(shí)施例1a)取500g梔子，進(jìn)行粉碎，與400g的茜草、500g的鳳尾草混合，加75％乙醇進(jìn)行回流提取，將提取液回收乙醇，得浸膏1；b)取600g柴胡、600g黃芪、300g黃芩、500g茵陳、400g蟅蟲、300g白術(shù)，加入20L水煎煮1小時(shí)，過(guò)濾后，再加入16L水煎液1小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次的煎液，回收乙醇，得提取液2；c)將浸膏1和提取液2合并，濃縮成相對(duì)密度為1.30的浸膏3，制成本發(fā)明藥物的活性組分。
d)向浸膏3中，加入適量淀粉，混合均勻后，裝入明膠硬膠囊，就制成膠囊劑。
取上述本發(fā)明藥物的活性組分(浸膏3)，進(jìn)行下述藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
①對(duì)乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原具有顯著的抑制作用用乙型肝炎病毒基因轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞系2.2.15細(xì)胞，以無(wú)毒濃度(TC0)，將藥液加入2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)板中，培養(yǎng)8天。測(cè)試對(duì)細(xì)胞HBsAg和HBeAg的分泌抑制情況，以及對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清和細(xì)胞內(nèi)HBV-DNA斑點(diǎn)雜交和Southem Blot實(shí)驗(yàn)情況。結(jié)果示于表1。
表1本發(fā)明藥物對(duì)乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原的作用

注劑量分別選無(wú)毒濃度(TC0)，本發(fā)明藥物TC0為10mg/ml，陽(yáng)性對(duì)照拉米夫定TC0為0.8mg/ml。
由表1可明顯看出，本發(fā)明藥物顯著抑制人肝癌細(xì)胞HBsAg和HBeAg的分泌，并對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清和細(xì)胞內(nèi)HBV-DNA也具有一定抑制作用。
②在鴨體內(nèi)對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染的治療效果顯著采用一日齡北京鴨靜脈注射鴨乙型肝炎病毒，7天后開(kāi)始給鴨口服本發(fā)明藥物，試驗(yàn)選用劑量為250mg/kg，1天2次，給藥10天。并設(shè)對(duì)照組，注射相同劑量的生理鹽水。分別在給藥后第5天(T5)、第10天(T10)及停藥后第3天(P3)測(cè)試?guó)喲錎HBV-DNA的情況，結(jié)果示于表2。
表2本發(fā)明藥物治療組與病毒感染對(duì)照組鴨血清DHBV-DNA水平抑制率的比較

結(jié)果顯示對(duì)鴨血清DHBV-DNA有非常顯著的抑制作用，說(shuō)明對(duì)鴨乙型肝炎病毒感染的治療效果顯著。
③有效防治D-氨基半乳糖致大鼠急性肝損傷以大鼠D-氨基半乳糖肝損傷模型(李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991460)(D-氨基半乳糖誘導(dǎo)肝損傷的過(guò)氧化機(jī)理及鋅的保護(hù)作用，中國(guó)藥理學(xué)及毒理學(xué)雜志，1993，7(2)81)，應(yīng)用肝功能生化檢測(cè)及肝臟形態(tài)計(jì)量學(xué)方法，以聯(lián)苯雙酯為對(duì)照，觀察本發(fā)明藥物防治D-氨基半乳糖致大鼠急性肝損傷的療效。結(jié)果示于表3～5。
表3本發(fā)明藥物對(duì)血清ALT和AST活性的影響

表4本發(fā)明藥物對(duì)肝臟MDA含量和對(duì)肝臟SOD活性的影響

表5本發(fā)明藥物對(duì)肝臟系數(shù)的影響

結(jié)果顯示本發(fā)明藥物的保護(hù)作用體現(xiàn)在(1)恢復(fù)肝功能顯著降低D-氨基半乳糖引起的血清ALT、AST含量(P＜0.01)，療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.05)；(2)抑制肝臟過(guò)氧化損傷顯著降低MDA含量(P＜0.01)、升高SOD活性(P＜0.01)，療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.01)；(3)減輕肝臟病變、緩和炎癥反應(yīng)顯著減輕肝臟大體/組織病變，降低肝臟系數(shù)(P＜0.01)優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.01)，同時(shí)還能夠增加存活肝細(xì)胞數(shù)和減少浸潤(rùn)炎性細(xì)胞。說(shuō)明該藥物對(duì)D-氨基半乳糖致大鼠急性肝損傷有明確的保護(hù)作用。
④防治大鼠膽汁瘀滯性黃疸用肝功能生化檢測(cè)，以聯(lián)苯雙酯為對(duì)照，觀察本發(fā)明藥物防治異硫氰酸-1-萘酯致膽汁瘀滯性黃疸(楊新波，黃正明，曹文斌，等.CCl4，D-Gal，ANIT致小鼠肝損傷模型的實(shí)驗(yàn)研究.華人消化雜志，1998，6(1)19-20)的療效。結(jié)果示于表6。
表6本發(fā)明藥物對(duì)血清TBil含量和對(duì)血清ALT活性的影響

結(jié)果顯示本發(fā)明藥物能顯著降低血清總膽紅素(TBil)含量(P＜0.01)和血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性(P＜0.01)，其療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.05)。說(shuō)明本發(fā)明藥物對(duì)膽汁瘀滯性黃疸具有退黃作用。
⑤能夠有效保護(hù)免疫性肝損傷小鼠的免疫功能用肝功能生化檢測(cè)肝臟功能，用免疫學(xué)方法檢測(cè)巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞的主要功能，與聯(lián)苯雙酯比較，觀察本發(fā)明藥物對(duì)卡介苗/內(nèi)毒素誘導(dǎo)免疫性肝損傷小鼠免疫功能(李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，上海科學(xué)技術(shù)出版社，1991460)的影響。
結(jié)果顯示本發(fā)明藥物免疫調(diào)節(jié)的保護(hù)作用體現(xiàn)在(1)恢復(fù)肝功能顯著降低免疫性肝損傷小鼠的血清ALT、AST含量(P＜0.01)，療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.05)(見(jiàn)表7)；(2)恢復(fù)免疫功能脾臟系數(shù)增加，巨噬細(xì)胞吞噬功能回升，NO生成量回升，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率回升，血清IFN-γ和IL-4含量回降，血清溶血素含量回升，作用優(yōu)于聯(lián)苯雙酯。說(shuō)明本發(fā)明藥物能有效保護(hù)免疫性肝損傷小鼠的免疫功能。
表7本發(fā)明藥物對(duì)免疫性肝損傷小鼠血清ALT、AST活性和脾臟系數(shù)的影響

⑥具有防治大鼠CCl4損傷性肝纖維化的作用用肝功能生化檢測(cè)及肝臟形態(tài)學(xué)觀察，以聯(lián)苯雙酯為對(duì)照，觀察本發(fā)明藥物防治CCl4致大鼠反復(fù)性損傷性肝纖維化(李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991460)的作用。
結(jié)果顯示，本發(fā)明藥物對(duì)CCl4大鼠損傷性肝纖維化的保護(hù)作用體現(xiàn)在(1)恢復(fù)肝功能顯著回降CCl4引起的血清ALT、AST、Bil含量升高(P＜0.01)，恢復(fù)血清的蛋白含量，療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.05)。(2)降低肝臟膠原沉積顯著回降血清透明質(zhì)酸含量(HA)(P＜0.01)，回降肝臟膠原蛋白含量(P＜0.01)，療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯(P＜0.05)(見(jiàn)表8)；(3)減輕肝纖維化程度能明顯降低造模大鼠肝細(xì)胞變性壞死程度、減少肝小葉內(nèi)纖維增生所形成的間隔，降低肝纖維化肝臟病變?cè)u(píng)分(P＜0.01)，且療效優(yōu)于聯(lián)苯雙酯組(P＜0.05)。說(shuō)明本發(fā)明藥物可有效防治大鼠CCl4損傷性肝纖維化。
表8本發(fā)明藥物對(duì)血清HA含量和對(duì)肝臟膠原蛋白的影響

此外，毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)本發(fā)明藥物是一個(gè)可于臨床長(zhǎng)期服用的安全性復(fù)方中藥。
①急性毒性試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)觀察灌胃本發(fā)明藥物的一日一次急性毒性反應(yīng)和死亡情況。采用按等比濃度梯度對(duì)小鼠一日一次灌胃給藥，觀察動(dòng)物急性毒性反應(yīng)和死亡情況；以動(dòng)物可耐受的最大濃度和最大體積對(duì)小鼠一日多次灌胃給藥，觀察動(dòng)物毒性反應(yīng)和死亡情況，計(jì)算出最大耐受量等方法。研究結(jié)果顯示根據(jù)藥物的急性毒性試驗(yàn)方法，找不出該藥物一日一次灌胃引起小鼠死亡的劑量，故無(wú)法測(cè)出LD50。用最大耐受量測(cè)定法，計(jì)算出該藥物一日最大耐受量(351.60g生藥/kg體重)相當(dāng)于臨床用量(1.22g生藥/kg體重)288.9倍。表明該藥物毒性甚小，臨床應(yīng)用安全可靠。
②長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)觀察大鼠長(zhǎng)期灌胃給藥對(duì)該藥物所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)及其程度，從而判斷和評(píng)價(jià)該藥物的臨床使用的安全性。于2002年12月28日～2003年08月05日期間，將清潔級(jí)Wistar大鼠(雌雄各半)隨機(jī)分為高、中、低劑量組和正常對(duì)照組。高、中、低劑量組的給藥劑量分別為63.44g·kg-1·d-1、31.72g·kg-1·d-1、15.86g·kg-1·d-1，對(duì)照組為蒸餾水18ml·kg-1·d-1。實(shí)驗(yàn)觀察了該藥物連續(xù)灌胃91天、182天對(duì)大鼠一般活動(dòng)、飲食、糞便、生長(zhǎng)曲線、肝功能、腎功能、糖代謝等影響。
結(jié)果顯示，高、中、低劑量組大鼠外觀行為、進(jìn)食量均正常；實(shí)驗(yàn)中、末期各劑量組血常規(guī)和凝血時(shí)間均在正常變化范圍內(nèi)，與對(duì)照組未見(jiàn)明顯差異；生化指標(biāo)顯示高、中、低劑量組的本發(fā)明藥物對(duì)大鼠糖代謝及脂類代謝無(wú)明顯影響，高劑量組可一過(guò)性影響大鼠肝臟功能和腎臟功能，停藥后獲得較快恢復(fù)。給藥91天、182天和停藥后28天的臟器系數(shù)，182天時(shí)段高劑量組能一過(guò)性增加大鼠甲狀腺、肝臟、脾臟、腎臟的臟器系數(shù)，對(duì)其它器官的臟器系數(shù)無(wú)明顯影響，給藥91天和停藥后28天的臟器系數(shù)各組間均無(wú)顯著差異，各組大體結(jié)構(gòu)及組織形態(tài)均未見(jiàn)明顯病理改變。
因此，本發(fā)明藥物通過(guò)抗病毒、護(hù)肝、退黃、免疫調(diào)節(jié)和抗纖維化等多方面的治療作用，能對(duì)多種病毒性肝炎(例如甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎等)患者起到抗病、緩解病情、最終達(dá)到完全治愈的目的，顯示了該復(fù)方中藥多環(huán)節(jié)整合調(diào)節(jié)作用的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)無(wú)毒副作用，適合臨床長(zhǎng)期服用。
實(shí)施例2a)取400g梔子，進(jìn)行粉碎，與300g的茜草、150g的鳳尾草混合，加75％乙醇進(jìn)行回流提取，將提取液回收乙醇，得浸膏1；b)取300g柴胡、450g黃芪、250g黃芩、150g茵陳、250g蟅蟲、350g白術(shù)，加入18L水煎煮1.5小時(shí)，過(guò)濾后，再加入10L水煎液1小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次的煎液，回收乙醇，得提取液2；c)將浸膏1和提取液2合并，濃縮成相對(duì)密度為1.24的浸膏3。
d)向浸膏3中，加入乙醇作粘合劑，壓制成顆粒劑。
實(shí)施例3a)取200g梔子，進(jìn)行粉碎，與450g的茜草、600g的鳳尾草混合，加75％乙醇進(jìn)行回流提取，將提取液回收乙醇，得浸膏1；b)取300g柴胡、200g黃芪、350g黃芩、400g茵陳、350g蟅蟲、100g白術(shù)，加入15L水煎煮2小時(shí)，過(guò)濾后，再加入10L水煎液1小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次的煎液，回收乙醇，得提取液2；c)將浸膏1和提取液2合并，濃縮成相對(duì)密度為1.10的浸膏3。
d)向浸膏3中，加入輔料制成顆粒，壓制成片。
權(quán)利要求
1.一種治療肝炎的藥物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的藥劑(用量為重量份)柴胡6 黃芩3～9 黃芪3～9茵陳3～9 茜草3～9 梔子3～9蟅蟲3～9 白術(shù)2～8 鳳尾草3～12
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療肝炎的藥物，其中各原料的重量配比(重量份)是柴胡6 黃芩3～9 黃芪3～9茵陳4～8 茜草4～8 梔子4～8蟅蟲3～8 白術(shù)4～8 鳳尾草3～12
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療肝炎的藥物，其中各原料的重量配比(重量份)是柴胡6 黃芩6 黃芪6茵陳5 茜草5 梔子6蟅蟲4 白術(shù)4 鳳尾草5
4. 權(quán)利要求1的一種治療肝炎的藥物的制備方法，該方法包括下列步驟a)將所述重量配比的梔子粉碎，與所述重量配比的茜草、鳳尾草混合，加70～80％乙醇進(jìn)行回流提取，將提取液回收乙醇，得到浸膏；b)取所述重量配比的柴胡、黃芪、黃芩、茵陳、蟅蟲、白術(shù)，加入水煎煮兩次，合并兩次的水煎液，過(guò)濾得濾液；c)將步驟a)得到的浸膏和步驟b)得到的濾液合并，濃縮成相對(duì)密度為1.01～1.30的浸膏。d)將步驟c)得到的浸膏制成任何常用口服劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療肝炎的藥物及其制備方法，該藥物的配方組成為柴胡、黃芩、黃芪、茵陳、茜草、梔子、蟅蟲、白術(shù)、鳳尾草。該藥物遵仲景肝病傳脾之論，在總結(jié)大量臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上合理配伍而成，以疏肝健脾、清利濕熱、活血軟堅(jiān)于一體，對(duì)肝郁脾虛、濕熱內(nèi)蘊(yùn)、絡(luò)脈瘀阻所致諸病癥，都具有顯著綜合療效，并且無(wú)毒副作用，適合臨床長(zhǎng)期服用。
文檔編號(hào)A61P31/12GK1546159SQ200310121459
公開(kāi)日2004年11月17日 申請(qǐng)日期2003年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月17日
發(fā)明者劉渡舟, 王慶國(guó), 李宇航 申請(qǐng)人:北京潤(rùn)普醫(yī)藥開(kāi)發(fā)有限公司