專利名稱：一種治療冠心病、心絞痛的雙丹提取物和其注射制劑及其制備方法
所屬領(lǐng)域發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療冠心病、心絞痛的雙丹提取物和其注射制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
冠心病、心絞痛在臨床上是常見病、多發(fā)病，近年來隨著人們生活水平的提高，冠心病發(fā)病年齡有所提前，并且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。越來越多的臨床報(bào)道顯示，中藥在治療冠心病、心絞痛方面具有良好的應(yīng)用前景。雙丹膏由丹參和丹皮兩味中藥組成，丹參微寒入心經(jīng)，能活血化瘀，通痹止痛；牡丹皮性寒亦歸心經(jīng)，善于涼血散瘀。二藥相合，可化瘀活血，行血止痛。實(shí)驗(yàn)證明，丹參能降低血壓，增加冠脈血流量，減慢心率，縮短實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的時(shí)間，還有抗血小板聚集及抗凝作用。牡丹皮則清芳透達(dá)，涼血不致成瘀，活血不致妄行。二藥相伍，實(shí)為治療冠心病、心絞痛之良藥。目前，其臨床上應(yīng)用劑型有膏劑、顆粒劑和口服液，而上述各劑型顯效速度顯然皆不及注射劑，因此將其改制成注射液，在對(duì)冠心病、心絞痛的治療方面會(huì)有較好的臨床療效和應(yīng)用前景，使冠心病、心絞痛的治療真正達(dá)到速效，強(qiáng)效。
丹參為唇形科植物丹參的根及根莖，具有活血祛瘀、清熱涼血的功能。丹參中含有多種化學(xué)成分，其有效成分可分為兩類，一類是水溶性丹參素類(原兒茶醛)；另一類是脂溶性的丹參酮類(丹參酮IIA)。丹參中的脂溶性有效成分丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮等均具有保護(hù)心肌缺血缺氧、抑制血小板聚集的功能。目前，丹參中丹參酮類等脂溶性有效成分的提取方法主要是乙醇回流提取，由于提取受熱時(shí)間長，大量丹參酮已降解，將其做成制劑后，丹參酮的含量往往較低甚至檢測不出，難以起到作用。
丹皮為毛莨科植物牡丹的干燥根皮，具有清熱涼血，活血化瘀的作用。牡丹皮主要含有多種酚類(如丹皮酚)，另外還含有多種單萜類成分(如芍藥苷)。其中丹皮酚有祛風(fēng)鎮(zhèn)痛、降壓、止血、抗炎、抗菌、抑制血小板凝集等多種藥理作用。目前，丹皮酚提取主要采用水蒸氣蒸餾提取，但采用該法提取損失較多。
超臨界流體萃取是一種新型萃取分離技術(shù)。它是利用流體(溶劑)在臨界點(diǎn)附近的某一區(qū)域內(nèi)與待分離混合物中的溶質(zhì)具有異常相平衡行為和傳遞性能的特點(diǎn)以及它對(duì)溶質(zhì)溶解能力隨壓力、溫度改變而在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變動(dòng)的特性，達(dá)到分離溶質(zhì)的一種方法。超臨界二氧化碳流體萃取能夠比較完好地保存中藥有效成分不被破壞或發(fā)生次生化，尤其適合于那些對(duì)熱敏感性強(qiáng)、容易氧化分解的成分的提取。超臨界二氧化碳流體萃取萃取效率高，在有效成分得到富集的同時(shí)，無溶劑殘留，便于控制產(chǎn)品質(zhì)量。
因此，采用超臨界流體萃取具有價(jià)格低、無毒、可循環(huán)使用的特點(diǎn)。超臨界流體萃取脂溶性成分具有工藝簡單、萃取時(shí)間短、操作溫度接近室溫，熱敏感成分幾乎不發(fā)生降解等優(yōu)點(diǎn)。
環(huán)糊精以其特殊的“內(nèi)疏水、外親水”的分子結(jié)構(gòu)與許多客體分子形成包結(jié)配合物，環(huán)糊精在藥學(xué)上主要用于提高藥物在制劑中的穩(wěn)定性，增加難溶性藥物在水中的溶解度等，但β-CD本身的低溶解度限制了它的應(yīng)用，在眾多的環(huán)糊精衍生物中羥丙基β環(huán)糊精(HP-β-CD)衍生物被認(rèn)為是最有前途的高級(jí)藥物載體材料。HP-β-CD在水中的溶解度大于50％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于β-CD1.85％(25℃)，比β-CD的水溶解度提高27倍。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，HP-β-CD本身安全性好，無毒副作用。因此，采用HP-β-CD包合雙丹注射劑中丹參酮類成分，能很好解決丹參酮類脂溶性成分在水中溶解度小的問題。
結(jié)合雙丹注射制劑中丹參酮不穩(wěn)定，容易發(fā)生降解以及丹參酮和丹皮酚在水中溶解度小的特點(diǎn)，本發(fā)明采用超臨界流體萃取法分別提取丹參和丹皮中的脂溶性有效成分，將丹參酮采用羥丙基β-環(huán)糊精包合，丹皮酚用硫酸磺化成丹皮酚磺酸鈉，再與丹參和丹皮中的水提有效部位一起，制成注射液。專利CN99117379公開了中藥丹參中活性成分超臨界二氧化碳萃取工藝方法，采用夾帶劑提取丹參酮，易提取出極性較大的成分，而本發(fā)明的目的是提取出脂溶性成分供HP-β-CD包合，解決脂溶性成分的水溶性問題。利用超臨界流體技術(shù)對(duì)丹皮中的丹皮酚進(jìn)行萃取也有報(bào)道(郭曉玲，孟青，馮毅凡，等.牡丹皮超臨界CO2萃取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，19(3)204-207)，并且丹皮酚的磺化也有報(bào)道(束建清，吳春.運(yùn)用正交試驗(yàn)法選擇丹皮酚最優(yōu)磺化條件[J].中成藥，1995，17(9)6-8)，但將超臨界流體萃取技術(shù)、丹參酮羥丙基β-環(huán)糊精包合和丹皮酚磺化三者結(jié)合應(yīng)用于雙丹復(fù)方制劑中卻未見報(bào)道。專利CN01141436.7報(bào)道了水溶性丹參酮的制備方法，采用乙醇提取丹參，然后直接用β環(huán)糊精包合，因采用乙醇提取出的成分較多，除有丹參酮類成分外，水溶性成分也會(huì)被乙醇提出，這樣用β環(huán)糊精包合，沒有針對(duì)性，如只針對(duì)脂溶性成分，本發(fā)明采用超臨界萃取提取出丹參脂溶性成分，采用HP-β-CD針對(duì)性地包合脂溶性成分，且采用HP-β-CD包合比采用β-CD包合水溶性提高27倍。目前，雙丹制劑的制備工藝均采用水煮醇沉法制備(中藥成方制劑部頒標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2669-97)，其脂溶性有效成分含量低；采用超臨界流體技術(shù)提取丹參中的丹參酮類成分并對(duì)其采用羥丙基β-環(huán)糊精包合，增加了其穩(wěn)定性和水溶性；采用超臨界流體萃取技術(shù)提取丹皮中的酚類成分并將其制成磺酸鹽，解決了其在注射液中溶解度小的問題，因此，通過本發(fā)明，解決了丹參酮和丹皮酚在注射液中溶解度低、含量少、不穩(wěn)定的問題，使制劑更穩(wěn)定，有效成分含量大大提高，從而使制劑成品的質(zhì)量和臨床療效得到保證。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種有效成分含量高、穩(wěn)定、制備工藝合理、顯效迅速的雙丹提取物和其注射制劑及其制備方法。本發(fā)明分別采用二氧化碳超臨界流體萃取提取丹參和丹皮中的脂溶性有效成分，利用羥丙基β-環(huán)糊精(HP-β-CD)包合超臨界流體萃取提取的丹參酮類成分，將超臨界流體萃取的丹皮酚磺化成可溶性的丹皮酚磺酸鹽，從而增進(jìn)了二者在注射液中的溶解度，解決了脂溶性成分在注射液中溶解難的問題，提高了制劑的質(zhì)量和臨床療效。對(duì)超臨界流體萃取后的丹參和丹皮藥粉加水煎煮提取，水提液濃縮后，醇沉二次，濃縮至適量，加入丹參酮HP-β-CD包合物及丹皮酚磺酸鹽，攪拌均勻，用0.2％的活性炭煮沸15分鐘，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，精濾，濾液灌封，滅菌，即得雙丹注射液；在注射液的基礎(chǔ)上，加入適量凍干賦形劑，冷凍干燥，即得凍干粉針劑。本發(fā)明的雙丹注射制劑，有效成分含量高，療效顯著。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一、藥材的前處理取重量比為2∶1的丹參、丹皮藥材分別揀選、用去離子水洗凈、烘干，粉碎成粗粉。
二、提取制備工藝1、取原料丹參∶丹皮＝2∶1依重量比按下述方法提取，分別將丹參和丹皮采用超臨界流體技術(shù)進(jìn)行萃取，得丹參超臨界萃取物丹參酮類和丹皮超臨界萃取物，將萃取出的丹參超臨界萃取物丹參酮類用適量50％乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，恒溫?cái)嚢?，置冰箱中冷藏過夜，抽濾，低溫干燥，得丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物粉末；將萃取出的丹皮超臨界萃取物，攪拌下緩緩加入到裝有濃硫酸和發(fā)煙硫酸(比例為10-15∶8-12)的燒瓶中，50-80℃攪拌30-90分鐘，將反應(yīng)液溶入到適量水中，所得酸水液用醋酸乙酯萃取三次，除去未反應(yīng)物，酸水液用0.5％的活性炭脫色，濾過，濾液在加熱攪拌下加入氯化鈉使其濃度達(dá)23％，放冷，置冰箱中冷藏過夜，即有針狀結(jié)晶析出，過濾，得丹皮酚磺酸鈉；再用水提醇沉法提取、純化經(jīng)超臨界萃取后的丹參、丹皮藥粉，以去離子水煎煮提取三次，提取液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.15(50℃)，放冷，緩緩加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，冷藏靜置，濾過；上清液減壓回收乙醇，濃縮至藥液相對(duì)密度為1.15-1.20(50℃)，放冷，加入乙醇使含醇量達(dá)70-80％，冷藏靜置，濾過，濾液減壓回收乙醇至干，得丹皮和丹參水提取物；將上述丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物、丹皮酚磺酸鹽以及丹參和丹皮的水提取物用適量注射用水溶解，用0.2％的活性炭脫色，濾過，滅菌，精濾，濾液真空低溫和/或冷凍干燥，即得雙丹提取物。
取雙丹提取物，直接無菌分裝，即得雙丹無菌粉針劑。
取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，攪勻，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，灌封，滅菌，即得雙丹注射液。
取雙丹提取物，加適量注射用水溶解，加入凍干賦形劑適量，攪勻，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，滅菌，灌裝，凍冷干燥，即得注射用雙丹凍干粉針劑。
2、本發(fā)明的雙丹注射制劑主要由丹皮酚磺酸鹽、丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物、丹參和丹皮水提取物組成。
3、丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物采用超臨界萃取丹參中的丹參酮，以羥丙基β-環(huán)糊精利用攪拌法進(jìn)行包合。
4、本發(fā)明的雙丹提取物的制備方法，其特征在于分別將丹皮和丹參采用超臨界萃取，將萃取出的丹參酮類成分采用羥丙基β-環(huán)糊精包合，將萃取出的丹皮酚采用濃硫酸磺化，再用水提醇沉法提取、純化丹參和丹皮中的水溶性成分，將上述丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物、丹皮酚磺酸鹽以及丹參和丹皮的水提取物用適量注射用水溶解，用0.2％的活性炭脫色，濾過，滅菌，真空低溫和/或冷凍干燥，即得。
5、本發(fā)明中所用凍干賦形劑可以是任何常規(guī)的凍干用賦形劑，包括甘露醇、乳糖或者是二者的混合物。
注射用雙丹制劑對(duì)大鼠急性心肌缺血的影響實(shí)驗(yàn)儀器與材料1、藥品與試劑1.1、丹參注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司，批號(hào)030102)，垂體后葉素注射液(Pit)(上海第一醫(yī)藥公司批號(hào)030312)。
1.2、儀器olympus-Au-600型全自動(dòng)生化分析儀(日本olympus公司)；LD4-2A型醫(yī)用離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠制造)。
1.3、動(dòng)物Wistar大鼠，體重(220±20)g，♀♂各半，由第一軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.4、實(shí)驗(yàn)方法1.4.1模型制備(1)急性心肌缺血模型垂體后葉素注射液(Pit)20 IU/kg腹腔注射(ip)造模。
1.4.2分組及給藥 60只大鼠隨機(jī)均分為6組(1)正常對(duì)照組ip生理鹽水4ml/(kg·d)，連續(xù)7d；(2)模型組ip生理鹽水4ml/(kg·d)，連續(xù)7d；(3)陽性對(duì)照組ip丹參注射液2g/(kg·d)，連續(xù)7d；(4)雙丹注射液組2g/(kgd)。
1.5、指標(biāo)測定急性心肌缺血實(shí)驗(yàn)除正常對(duì)照組外，各組動(dòng)物均于d8造模，1h后腹主動(dòng)脈采血測以下指標(biāo)。(1)心肌酶4項(xiàng)所取血液離心，取上清液，在olympus-Au-600型全自動(dòng)生化儀上檢測肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)；(2)超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量測定取血清，依試劑盒方法測定，(3)心肌梗塞面積測定實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，迅速剪下心臟，自心尖至心底將左心室切成約1mm厚的心肌片，置于N-BT染色液中，在37℃恒溫水浴中染色15min，梗塞區(qū)不著色，其余區(qū)域呈藍(lán)色。剪取各區(qū)心臟稱重，計(jì)算梗塞區(qū)與左心室的百分比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間兩兩比較用q檢驗(yàn)。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1、心肌酶指標(biāo)各組心肌酶檢測結(jié)果詳見表1。
表1雙丹注射液對(duì)急性心肌缺血大鼠心肌酶的影響(n＝10，x±s)組別AST(IU/L) LDH(IU/L) CK(IU/L) CK-MB(IU/L)正常組143.50±16.52690.92±296.32 1138.23±435.83815.38±244.89模型組206.50±35.42**1295.62±335.24**1662.71±565.37*1118.46±278.51丹參注射液組 164.30±25.36**1029.30±467.851096.45±198.56*845.95±135.28雙丹注射劑組 158.21±28.67**1055.42328368± 995.49±365.76 748.36±198.54與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果表明，與模型組比較，雙丹注射液組可使CK、AST顯著下降，對(duì)CK-MB、LDH也有下降作用。
2.2、對(duì)血清SOD及MDA活性各組血清SOD及MDA活性檢測結(jié)果見表2表2 雙丹注射液對(duì)血清SOD及MDA活性的影響組別 SOD(IU/ml) MDA(nmol/ml)正常組 175.46±6.02 6.46±1.32模型組 152.43±6.38 9.62±2.21丹參注射液組165.63±8.43*6.69±1.31*雙丹注射液組168.35±7.31*6.54±1.21*與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01
具體實(shí)施形式實(shí)施例11、處方丹參1000g丹皮500g2、提取取上述處方量藥材，揀選、用去離子水洗凈、烘干，粉碎成粗粉。取丹參粗粉，置超臨界流體萃取器中，以22Mpa的萃取壓力，45℃的萃取溫度萃取2小時(shí)，得丹參超臨界萃取物；將丹皮粗粉，裝入超臨界萃取罐中，以壓力為25MPa、溫度為35℃、流量為22L/h的條件萃取4h，得丹皮超臨界萃取物。取丹參超臨界萃取物，用適量50％乙醇溶解，加入到飽和的HP-β-CD溶液中，50℃恒溫?cái)嚢柚脸霈F(xiàn)渾濁，繼續(xù)攪拌1.5h，置冰箱中冷藏過夜，抽濾，低溫干燥，得HP-β-CD包合物粉末；取丹皮超臨界萃取物，攪拌下緩緩加入到裝有濃硫酸和發(fā)煙硫酸(12.5∶10)的燒瓶中，75℃攪拌下反應(yīng)30分鐘，將反應(yīng)液緩緩傾入到適量水中，所得酸水液用醋酸乙酯萃取三次，除去未反應(yīng)物，酸水液用0.5％(W/V)的活性炭脫色，過濾，濾液在加熱攪拌下加入氯化鈉使其濃度達(dá)23％，放冷，置冰箱中冷藏過夜，即有針狀結(jié)晶析出，過濾，得丹皮酚磺酸鈉。取超臨界萃取后的丹參、丹皮藥粉，以去離子水煎煮提取三次，提取液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.15(50℃)，放冷，緩緩加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，冷藏靜置，濾過；上清液減壓回收乙醇，濃縮至藥液相對(duì)密度為1.15-1.20(50℃)，放冷，加入乙醇使含醇量達(dá)70-80％，冷藏靜置，濾過，濾液減壓回收乙醇至干，得丹皮、丹參水提取物，備用。將丹參酮HP-β-CD包合物，丹皮酚磺酸鈉鹽以及丹參和丹皮水提取物用適量注射用水溶解，以0.2％的活性炭脫色，濾過，真空低溫和/或冷凍干燥，得雙丹提取物。
3、制備(1)雙丹注射液的制備取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，攪勻，濾過，加注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.0，濾過，灌封，滅菌，即得雙丹注射液。
(2)雙丹凍干粉針劑的制備取雙丹提取物，加適量注射用水溶解，同時(shí)加凍干賦形劑甘露醇50g，攪勻，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，滅菌，灌裝，凍冷干燥，壓蓋，即得注射用雙丹凍干粉針。
實(shí)施例21、處方丹參1000g 丹皮500g2、提取取上述處方量藥材，揀選、用去離子水洗凈、烘干，粉碎成粗粉。取丹參粗粉，置超臨界流體萃取器中，以22Mpa的萃取壓力，45℃的萃取溫度萃取2小時(shí)，得丹參超臨界萃取物；將丹皮粗粉，裝入超臨界萃取罐中，以壓力為25MPa、溫度為35℃、流量為22L/h的條件萃取4h，得丹皮超臨界萃取物。取丹參超臨界萃取物，用適量乙醇溶解，加入到飽和的HP-β-CD溶液中，50℃恒溫?cái)嚢柚脸霈F(xiàn)渾濁，繼續(xù)攪拌1.5h，置冰箱中冷藏過夜，抽濾，低溫干燥，得HP-β-CD包合物粉末；取丹皮超臨界萃取物，攪拌下緩緩加入到裝有濃硫酸和發(fā)煙硫酸(12.5∶10)的燒瓶中，75℃攪拌下反應(yīng)30分鐘，將反應(yīng)液緩緩傾入到適量水中，所得酸水液用醋酸乙酯萃取三次，除去未反應(yīng)物，酸水液用0.5％(W/V)的活性炭脫色，過濾，濾液在加熱攪拌下加入氯化鈉使其濃度達(dá)23％，放冷，置冰箱中冷藏過夜，即有針狀結(jié)晶析出，過濾，得丹皮酚磺酸鈉。取超臨界萃取后的丹參、丹皮藥粉，以去離子水煎煮提取三次，提取液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.15(50℃)，放冷，緩緩加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，冷藏靜置，濾過；上清液減壓回收乙醇，濃縮至藥液相對(duì)密度為1.15-1.20(50℃)，放冷，加入乙醇使含醇量達(dá)70-80％，冷藏靜置，濾過，濾液減壓回收乙醇至干，得丹皮、丹參水提取物，備用。將丹參酮HP-β-CD包合物，丹皮酚磺酸鈉鹽以及丹參和丹皮水提取物用適量注射用水溶解，以0.2％的活性炭脫色，濾過，低溫和/或冷凍干燥，得雙丹提取物。
3、制備(1)雙丹注射液的制備取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，攪勻，濾過，加注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.0，濾過，灌封，滅菌，即得雙丹注射液。
(2)雙丹凍干粉針劑的制備取雙丹提取物，加適量注射用水溶解，同時(shí)加凍干賦形劑乳糖50g，攪勻，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，滅菌，灌裝，凍冷干燥，壓蓋，即得注射用雙丹凍干粉針。
實(shí)施例31、處方丹參1000g 丹皮500g2、提取取上述處方量藥材，揀選、用去離子水洗凈、烘干，粉碎成粗粉。取丹參粗粉，置超臨界流體萃取器中，以22Mpa的萃取壓力，45℃的萃取溫度萃取2小時(shí)，得丹參超臨界萃取物；將丹皮粗粉，裝入超臨界萃取罐中，以壓力為25MPa、溫度為35℃、流量為22L/h的條件萃取4h，得丹皮超臨界萃取物。取丹參超臨界萃取物，用適量乙醇溶解，加入到飽和的HP-β-CD溶液中，50℃恒溫?cái)嚢柚脸霈F(xiàn)渾濁，繼續(xù)攪拌1.5h，置冰箱中冷藏過夜，抽濾，低溫干燥，得HP-β-CD包合物粉末；取丹皮超臨界萃取物，攪拌下緩緩加入到裝有濃硫酸和發(fā)煙硫酸(12.5∶10)的燒瓶中，75℃攪拌下反應(yīng)30分鐘，將反應(yīng)液緩緩傾入到適量水中，所得酸水液用醋酸乙酯萃取三次，除去未反應(yīng)物，酸水液用0.5％(W/V)的活性炭脫色，過濾，濾液在加熱攪拌下加入氯化鈉使其濃度達(dá)23％，放冷，置冰箱中冷藏過夜，即有針狀結(jié)晶析出，過濾，得丹皮酚磺酸鈉。取超臨界萃取后的丹參、丹皮藥粉，以去離子水煎煮提取三次，提取液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10-1.15(50℃)，放冷，緩緩加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，冷藏靜置，濾過；上清液減壓回收乙醇，濃縮至藥液相對(duì)密度為1.15-1.20(50℃)，放冷，加入乙醇使含醇量達(dá)70-80％，冷藏靜置，濾過，濾液減壓回收乙醇至干，得丹皮、丹參水提取物，備用。將丹參酮HP-β-CD包合物，丹皮酚磺酸鈉鹽以及丹參和丹皮水提取物用適量注射用水溶解，以0.2％的活性炭脫色，濾過，低溫和/或冷凍干燥，得雙丹提取物。
3、制備(1)雙丹注射液的制備取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，攪勻，濾過，加注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.0，濾過，灌封，滅菌，即得雙丹注射液。
(2)雙丹凍干粉針劑的制備取雙丹提取物，加適量注射用水溶解，同時(shí)加凍干賦形劑甘露醇30g，乳糖20g，攪勻，濾過，調(diào)節(jié)pH值至7.0，滅菌，灌裝，凍冷干燥，壓蓋，即得注射用雙丹凍干粉針。
權(quán)利要求
1.一種雙丹提取物，其特征在于它是由原料丹皮∶丹參＝2∶1按下述方法提取得到，將丹皮和丹參分別采用超臨界流體技術(shù)萃取，得丹參超臨界萃取物丹參酮類和丹皮超臨界萃取物，將萃取出的丹參超臨界萃取物丹參酮類用適量50％乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，恒溫?cái)嚢?，置冰箱中冷藏過夜，抽濾，低溫干燥，得丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物粉末；將萃取出的丹皮超臨界萃取物，攪拌下緩緩加入到裝有濃硫酸發(fā)煙硫酸為12.5∶10的燒瓶中，攪拌，將反應(yīng)液溶入到適量水中，所得酸水液用醋酸乙酯萃取三次，除去未反應(yīng)物，酸水液用0.5％的活性炭脫色，過濾，濾液在加熱攪拌下加入氯化鈉使其濃度達(dá)23％，放冷，置冰箱中冷藏過夜，即有針狀結(jié)晶析出，過濾，得丹皮酚磺酸鈉；再用水提醇沉法提取、純化經(jīng)超臨界萃取后的丹參、丹皮藥粉，得丹皮和丹參水提取物；將上述丹參酮類羥丙基β-環(huán)糊精包合物、丹皮酚磺酸鹽以及丹參和丹皮的水提取物用適量注射用水溶解，用0.2％的活性炭脫色，濾過，滅菌，精濾，濾液真空低溫干燥和/或冷凍干燥，即得雙丹提取物。
2.一種治療冠心病、心絞痛的雙丹注射制劑，其特征在于它是由權(quán)利要求1所述的雙丹提取物和可藥用的載體或賦形劑組成。
3.權(quán)利要求2所述的注射制劑，其特征在于它可以是注射液或粉針劑，其中粉針劑包括無菌粉針劑和凍干粉針劑。
4.權(quán)利要求2或3所述的注射制劑的制備方法，其特征在于它包括下列步驟取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，調(diào)節(jié)pH值至7.0，灌裝，滅菌，即得。
5.權(quán)利要求2或3所述的注射制劑的制備方法，其特征在于它包括下列步驟取雙丹提取物，用適量注射用水溶解，加適量凍干賦形劑，調(diào)節(jié)pH值至7.0，滅菌，灌裝，冷凍干燥，即得。
6.權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于凍干賦形劑可以是任何常規(guī)的凍干用賦形劑，包括甘露醇、乳糖或者是二者的混合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療冠心病、心絞痛的雙丹提取物和其注射制劑及其制備方法，其制劑包括注射液，粉針劑和凍干粉針劑。其特征在于它主要是由丹皮酚磺酸鹽、丹參酮類羥丙基β－環(huán)糊精包合物、丹參和丹皮的水提物和適量可供藥用的賦形劑組成。其采用超臨界萃取技術(shù)萃取丹參和丹皮中的脂溶性成分丹參酮和丹皮酚，對(duì)丹參酮采用羥丙基β－環(huán)糊精(HP－β－CD)包合，將丹皮酚采用濃硫酸磺化成磺酸鹽，從而使丹參酮和丹皮酚在注射液中的溶解度和含量得到大大提高，保證了雙丹制劑的質(zhì)量和臨床療效。本發(fā)明的雙丹注射制劑，有效成分含量高，穩(wěn)定性好，療效顯著。
文檔編號(hào)A61P9/10GK1546162SQ200310123660
公開日2004年11月17日 申請(qǐng)日期2003年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月17日
發(fā)明者張正生 申請(qǐng)人:張正生