專利名稱：用于治療支架狹窄的微管穩(wěn)定劑的制作方法
支架中的微管穩(wěn)定劑本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療增殖性疾病、尤其是血管疾病的藥物遞送系統(tǒng)。
許多人罹患由于灌注心臟及其他主要器官的血管的進(jìn)行性堵塞所致的循環(huán)系統(tǒng)疾病。在該類人群中，血管的嚴(yán)重堵塞往往會(huì)導(dǎo)致缺血性損傷、高血壓、卒中或心肌梗死。動(dòng)脈粥樣硬化性損傷限制或阻斷了冠脈或外周血流，是缺血性疾病相關(guān)性發(fā)病和死亡的主要原因，其中包括冠心病及卒中。為了阻斷疾病進(jìn)程、防止累及心肌或其他器官的更嚴(yán)重的疾病狀態(tài)，使用了各種醫(yī)學(xué)血管再造方式，例如經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀血管成形術(shù)(PCTA)、經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)(PTA)、動(dòng)脈粥樣斑塊切除術(shù)、旁路移植術(shù)或其他類型的血管移植方式。
各種血管再造術(shù)后動(dòng)脈粥樣硬化性冠狀動(dòng)脈的再狹窄發(fā)生于10-80％的接受該治療的患者中，這取決于所使用的方式和動(dòng)脈的位置。除了開通被動(dòng)脈粥樣硬化所阻斷的動(dòng)脈之外，血管再造也損傷血管壁內(nèi)的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，從而引發(fā)血栓形成和炎性反應(yīng)。細(xì)胞衍生的生長因子如血小板衍生生長因子、浸潤巨噬細(xì)胞、白細(xì)胞或平滑肌細(xì)胞本身可激發(fā)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移反應(yīng)。發(fā)生局部增殖和遷移的同時(shí)，炎性細(xì)胞還可侵入血管損傷部位，并可能遷移至血管壁的更深層。增殖/遷移通常始于損傷后的一到兩天內(nèi)，且隨著所采用的血管再造方式的不同，可持續(xù)數(shù)天及數(shù)周。
動(dòng)脈粥樣硬化性損傷以及血管中層內(nèi)的細(xì)胞均可遷移、增殖和/或分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白。增殖、遷移和細(xì)胞外基質(zhì)合成將一直持續(xù)到受損的內(nèi)皮細(xì)胞層被修復(fù)，此時(shí)內(nèi)膜內(nèi)的增殖減慢。新形成的組織稱為新生內(nèi)膜、內(nèi)膜增厚或再狹窄損傷，往往會(huì)造成血管腔變窄。管腔狹窄還可能因構(gòu)建性重塑如血管重塑而發(fā)生，導(dǎo)致內(nèi)膜的進(jìn)一步增厚或增生。
因此，需要有效的治療和藥物遞送系統(tǒng)，以預(yù)防和治療損傷后發(fā)生的內(nèi)膜增厚或再狹窄，所述損傷例如血管損傷，包括例如手術(shù)損傷、例如血管再造引發(fā)的損傷，又例如在心臟或其他移植物中的損傷。
令人驚異的是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)微管干擾劑(MIA)任選與其他活性化合物如抗增殖化合物聯(lián)合，當(dāng)局部應(yīng)用于損傷部位時(shí)具有有益效果。
因此，本發(fā)明涉及一種治療方法，用于預(yù)防和治療損傷后發(fā)生的內(nèi)膜增厚或再狹窄，所述損傷例如血管損傷，包括例如手術(shù)損傷、例如血管再造引發(fā)的損傷，又例如在心臟或其他移植物中的損傷，該方法包括向有需要的溫血?jiǎng)游锸┯弥委熡行Я康腗IA。
本發(fā)明具體涉及藥物遞送裝置或系統(tǒng)，包括a)適于局部應(yīng)用或施用于中空管的醫(yī)療裝置，例如基于導(dǎo)管的遞送裝置或腔內(nèi)裝置、特別是涂層支架；以及與之聯(lián)合的b)治療劑量的MIA，任選地以及治療劑量的一種或多種其他活性成分，優(yōu)選每一種均以允許藥物釋放的方式附著于該醫(yī)療裝置上；此后均簡稱為“本發(fā)明的裝置”。
本發(fā)明的裝置優(yōu)選包括涂層支架。
本發(fā)明還涉及MIA衍生物在制備藥物中的用途，該藥物用于-預(yù)防或治療、例如全身性、優(yōu)選局部預(yù)防或治療支架放置后的血管炎癥或平滑肌細(xì)胞在中空管中的增殖及遷移或炎性細(xì)胞浸潤增加或細(xì)胞增殖增加或基質(zhì)沉積或破壞增加或重塑增加；或-治療血管壁的內(nèi)膜增厚；優(yōu)選與上述a)項(xiàng)所定義的醫(yī)療裝置聯(lián)合使用。
MIA化合物是已知的且在臨床上已被用于治療癌癥。該類化合物包括秋水仙堿、鬼臼毒素(如依托泊苷和替尼泊苷)、紫杉烷類(如紫杉醇和多西他賽)、海綿內(nèi)酯(discodermolide)化合物(包括(+)-海綿內(nèi)酯及(+)-海綿內(nèi)酯的類似物和衍生物)、長春花生物堿(如長春堿特別是硫酸長春堿、長春新堿特別是硫酸長春新堿以及長春烯堿)，以及埃坡霉素(epothilone)，如埃坡霉素A、B、C和D及其類似物和衍生物，例如公布于WO99/02514中的化合物，具體為[1S-[1R，3R(E)，7R，10S，11R，12R，16S]]-7，11-二羥基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮雜-17-雙環(huán)[14.1.0]-十七烷-5，9-二酮(例3)。硫酸長春堿可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)產(chǎn)品INBLASTIN R.P.TM施用。硫酸長春新堿可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)產(chǎn)品FARMISTINTM施用。海綿內(nèi)酯可例如如Harbor BranchOceanographic Institute的美國專利4,939,168及5,618,487中所公開而獲得，或例如如GB2280677、WO98/24429及美國專利5,789605和6,031,133所述通過化學(xué)合成而獲得，這些專利在此處引用作為參考。依托泊苷可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)產(chǎn)品ETOPOPHOSTM施用。替尼泊苷可以例如以其市售形式、例如商標(biāo)產(chǎn)品VM 26-BRISTOLTM施用。
海綿內(nèi)酯及其類似物和衍生物是特別有用的MIA化合物。海綿內(nèi)酯及其制備為本領(lǐng)域公知。其類似物及衍生物的制備在文獻(xiàn)中亦有報(bào)道。
可用于本發(fā)明的埃坡霉素由式(I)描述， 其中A代表O或NRN，其中RN為氫或低基烷基，R為氫或低基烷基，R’為甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，且Z為O或鍵。
除非另有說明，在本公開中被指定為“低級(jí)”的有機(jī)基團(tuán)及化合物含有不超過7個(gè)、優(yōu)選不超過4個(gè)碳原子。
其中A代表O、R為氫、R’為甲基且Z為O的式I化合物被稱為埃坡霉素A；其中A代表O、R為甲基、R’為甲基且Z為O的式I化合物被稱為埃坡霉素B；其中A代表O、R為氫、R’為甲基且Z為鍵的式I化合物被稱為埃坡霉素C；其中A代表O、R為甲基、R’為甲基且Z為鍵的式I化合物被稱為埃坡霉素D。
其中A代表O或NRN、其中RN為氫或低級(jí)烷基、R為氫或低級(jí)烷基、R’為甲基且Z為O或鍵的式I的埃坡霉素衍生物以及制備該類埃坡霉素衍生物的方法具體地在專利及專利申請(qǐng)WO 93/10121、US 6,194,181、WO98/25929、WO 98/08849、WO 99/43653、WO 98/22461以及WO 00/31247中被一般性及特定性地公開，在每種情況下具體地在化合物權(quán)利要求和工作實(shí)施例的終產(chǎn)物中公開，其主題在此引入本申請(qǐng)作為參考。同樣包括其中所公開的相應(yīng)的立體異構(gòu)體以及相應(yīng)的晶體變型，例如溶劑合物及多晶型物。
其中A代表O或NRN、其中RN為氫或低級(jí)烷基、R為氫或低級(jí)烷基、R’為甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基且Z為O或鍵的式I的埃坡霉素衍生物以及該類埃坡霉素衍生物的制備方法具體地在專利申請(qǐng)WO99/67252中被一般性及特定性地公開，在本申請(qǐng)中引用之作為參考。同樣包括其中公開的相應(yīng)的立體異構(gòu)體以及相應(yīng)的晶體變型，例如溶劑合物及多晶型物。
埃坡霉素B向相應(yīng)的內(nèi)酰胺的轉(zhuǎn)化公開于WO 99/02514的方案21(31、32頁)以及實(shí)施例3(48-50頁)中。除埃坡霉素B以外的式I化合物向相應(yīng)內(nèi)酰胺的轉(zhuǎn)化可類似地完成。其中RN為低級(jí)烷基的相應(yīng)的式I埃坡霉素衍生物可以通過本領(lǐng)域公知的方法制備，例如從其中RN為氫的埃坡霉素衍生物開始的還原性烷基化反應(yīng)。
優(yōu)選地，本發(fā)明涉及一種治療方法，用于預(yù)防及治療損傷后發(fā)生的內(nèi)膜增厚或再狹窄，所述損傷例如血管損傷，包括例如手術(shù)損傷、例如血管再造引發(fā)的損傷，又例如在心臟或其他移植物中的損傷，該方法包括向有需要的溫血?jiǎng)游?、?yōu)選人施用治療有效量的式I化合物，其中A代表O或NRN，其中RN為氫或低級(jí)烷基，R為氫或低級(jí)烷基，R’為甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基且Z為O或鍵。
根據(jù)本發(fā)明，MIA可以用作唯一的活性成分，或者與以下聯(lián)用免疫抑制劑，例如鈣調(diào)磷酸酶抑制物，例如環(huán)孢菌素如環(huán)孢菌素A，或FK506；EDG-受體激動(dòng)劑，例如FTY720；抗炎藥，例如類固醇、例如皮質(zhì)類固醇如地塞米松或潑尼松；非甾類抗炎藥(NASID)，例如環(huán)加氧酶抑制劑，例如COX-2抑制劑，例如塞來昔布、洛芬昔布、依托考昔(etoricoxib)或伐地考昔(valdecoxib)；或子囊霉素，例如ASM981；抗血栓形成劑或抗凝劑，例如肝素、IIb/IIa抑制劑等；抗增殖劑；非VEGF抑制劑的酪氨酸激酶抑制劑，例如星形孢菌素及其相關(guān)的小分子，例如UCN-01、BAY43-9006、苔蘚蟲素I、哌立福辛(Perifosine)、利莫福辛(Limofosine)、米哚妥林(midostaurin)、RO318220、RO320432、GO6976、Isis 3521、LY333531、LY379196、SU5416、SU6668、AG1296等；抑制PDGF受體酪氨酸激酶的化合物或抗體或與PDGF結(jié)合或降低PDGF受體表達(dá)的化合物，例如ST1571、CT52923、RP-1776、GFB-111、吡咯并[3，4-c]-β-咔啉-二酮等；抑制EGF受體酪氨酸激酶的化合物或抗體或與EGF結(jié)合或降低EGF受體表達(dá)的化合物，如WO 97/02266中公開的化合物如實(shí)施例39的化合物，視黃酸、ZD1839(Iressa)、α-、γ-或δ-生育酚、或α-、γ-或δ-生育三烯酚；或影響GRB2的化合物、IMC-C225；他汀類藥物，如具有HMG-CoA還原酶抑制活性的他汀類藥物，例如氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、托伐他汀、西伐他汀、匹伐他汀(pitavastatin)、羅素他汀(rosuvastatin)或尼伐他汀(nivastatin)；可以增強(qiáng)腔內(nèi)皮的內(nèi)皮再生的化合物、蛋白質(zhì)、生長因子或刺激生長因子生成的化合物，如FGF、IGF；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，如巴馬司他、馬馬司他、trocade、CGS27023、RS130830或AG3340；激酶調(diào)節(jié)劑(即拮抗劑或激動(dòng)劑)，如JNK、ERK1/2、MAPK或STAT；或者刺激NO釋放的化合物或NO供體，如diazeniumdiolates、S-亞硝基硫醇、介離子氧雜三唑類(mesoionic oxatriazole)、異山梨醇組合。
本發(fā)明還提供了MIA與下列物質(zhì)聯(lián)合的局部施用或遞送鈣調(diào)磷酸酶抑制劑，例如如上所公開；EDG-受體激動(dòng)劑，例如如上所公開；抑制PDGF受體酪氨酸激酶的化合物或抗體或與PDGF結(jié)合或降低PDGF受體表達(dá)的化合物，例如如上所公開；抑制EGF受體酪氨酸激酶的化合物或抗體或與EGF結(jié)合或降低EGF受體表達(dá)的化合物，例如如上所公開；他汀類藥物，例如如上所公開；可以促進(jìn)腔內(nèi)皮的內(nèi)皮再生的化合物、蛋白質(zhì)、生長因子或刺激生長因子生成的化合物，例如如上所公開；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，例如如上所公開；激酶調(diào)節(jié)物(即拮抗劑或激動(dòng)劑)的抑制劑，例如如上所公開；或者刺激NO釋放的化合物或NO供體，例如如上所公開。
根據(jù)本發(fā)明的具體發(fā)現(xiàn)，提供了1.一種方法，用于在有需要的哺乳動(dòng)物中預(yù)防或治療平滑肌細(xì)胞在中空管中的增殖及遷移或細(xì)胞增殖增加或細(xì)胞凋亡減少或基質(zhì)沉積增加，該方法包括局部施用治療有效量的MIA，任選地聯(lián)合一種或多種其他活性成分，例如如上所公開的活性成分。
2.一種用于治療血管壁內(nèi)膜增厚的方法，包括自任何基于導(dǎo)管的裝置或腔內(nèi)醫(yī)療裝置控制遞送治療有效量的MIA，任選地聯(lián)合一種或多種其他活性成分，例如如上所公開的活性成分。優(yōu)選地，所治療的疾病為狹窄、再狹窄，例如血管再造后或新血管生成后的狹窄、再狹窄，和/或炎癥和/或血栓形成。
3.一種藥物遞送裝置或系統(tǒng)，包括a)適合于局部應(yīng)用或施用于中空管中的醫(yī)療裝置，例如基于導(dǎo)管的遞送裝置或腔內(nèi)醫(yī)療裝置；和b)治療劑量的MIA，任選聯(lián)合治療劑量的一種或多種如上所公開的其他活性成分，其中每一種均可釋放性地附著于該基于導(dǎo)管的遞送裝置或藥物裝置上。這種局部遞送裝置或系統(tǒng)可以作為在任何血管位置、包括冠狀動(dòng)脈、頸動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、外周動(dòng)脈、大腦動(dòng)脈或其他任何動(dòng)脈或靜脈位置進(jìn)行的血管再造、旁路或移植術(shù)的輔助物以用于減輕狹窄或再狹窄；可以用于減輕吻合狹窄(anastomic stenosis)、例如在動(dòng)靜脈透析通路情況下的吻合狹窄，不論是否采用聚四氟乙烯移植或支架置入，或聯(lián)合任何其他心臟或移植術(shù)，或先天性血管介入。
MIA在下文將被稱為“藥物”。其他可以與該MIA聯(lián)合使用的活性成分、例如如上所公開的活性成分將在下文統(tǒng)稱為“輔助劑”?！八幬铩币辉~應(yīng)指藥物或藥物加上輔助劑。
局部施用優(yōu)選于血管損傷位點(diǎn)或其附近進(jìn)行。
可以通過一種或多種以下途徑進(jìn)行施用經(jīng)導(dǎo)管或其他血管內(nèi)遞送系統(tǒng)、鼻內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹膜間(interperitoneally)或食管。中空管包括循環(huán)系統(tǒng)管道如血管(動(dòng)脈或靜脈)、組織腔、淋巴通路、消化道(包括消化管)、呼吸道、排泄系統(tǒng)管道、生殖系統(tǒng)管道和導(dǎo)管、體腔管道等。一種或多種藥物的局部施用或應(yīng)用可提供所述一種或多種藥物的集中遞送，使其在靶組織中達(dá)到其他施用途徑所不能達(dá)到的組織水平。
將藥物局部遞送入中空管的手段可以是從內(nèi)部或外部將一種或多種藥物物理遞送至中空管。一種或多種藥物的局部遞送包括導(dǎo)管遞送系統(tǒng)、局部注射裝置或系統(tǒng)或留置裝置。該裝置或系統(tǒng)包括但并不限于支架、涂層支架、腔內(nèi)套管、支架移植物、脂質(zhì)體、控制釋放骨架、聚合物腔內(nèi)鋪面(endolumenal paving)或其他血管內(nèi)裝置、栓子遞送顆粒、細(xì)胞定位性如基于親和力的遞送、中空管周的內(nèi)帖劑、中空管周的外帖劑、中空管套(cuff)、外部鋪面、外支架套管等。參見Eccleston等(1995)InterventionalCardiology Monitor 133-40-41，以及Slepian，N.J.(1996)Intervente.Cardiol.1103-116或Regar E，Sianos G，Serruys PW.“支架開發(fā)與局部藥物遞送”，Br Med Bull 2001，59227-48，其公開內(nèi)容均在此處引用作為參考。
“生物相容性”一詞是指一種材料不會(huì)引起或僅引起最小的負(fù)面組織反應(yīng)、包括如血栓形成和/或炎癥。
一種或多種藥物的遞送或應(yīng)用可以使用支架或套管或鞘進(jìn)行。可使用由其中已浸漬或摻入一種或多種藥物的聚合物或其他生物相容性材料制成的或由此材料涂層的腔內(nèi)支架，所述材料例如多孔陶瓷如納米孔徑陶瓷。該類支架可以是可生物降解的或者當(dāng)旨在長期使用時(shí)可由金屬或合金例如鎳和鈦或另一種穩(wěn)定物質(zhì)制成。也可以將一種或多種藥物包埋在已經(jīng)被修飾而含有微孔或槽道的支架或移植體的金屬中。同樣，由含有一種或多種藥物的聚合物或其他生物相容性材料、例如如上所公開的材料制成的腔和/或近腔涂層或外部套管也可用于局部遞送。
支架通常用作留置在導(dǎo)管腔內(nèi)的管型結(jié)構(gòu)以便緩解阻塞。它們可以以非膨脹形式被插入管腔內(nèi)，然后自動(dòng)膨脹(自膨式)或借助于第二種原位裝置膨脹，該第二種原位裝置如安裝有導(dǎo)管的血管成形球囊，其在狹窄的管道或身體通路內(nèi)膨脹，從而截?cái)嗉巴呓馀c管道壁相連的梗阻物，獲得擴(kuò)大的管腔。
例如，可以以多種方式、使用任何生物相容性材料將一種或多種藥物摻入或附著于支架上；它可被摻入例如聚合物或聚合物骨架中并噴至支架的外表面上?？蓪⒁环N或多種藥物與聚合材料的混合物配制在溶劑或溶劑混合物中，并且也通過浸漬涂布、刷涂和/或浸漬/旋轉(zhuǎn)涂布施加于支架的表面，令所述一種或多種溶劑揮發(fā)而留下包埋有一種或多種藥物的薄膜。對(duì)于自微孔、支桿或槽道遞送一種或多種藥物的支架，可以額外地涂布聚合物溶液作為外層以控制一種或多種藥物的釋放；作為替代選擇，可以將藥物包含在微孔、支桿或槽道中，而輔助劑可包含在外層中，反之宜然。藥物也可以附著于支架的內(nèi)層，而輔助劑置于外層，反之宜然。還可以通過共價(jià)鍵、例如酯、酰胺或酐將一種或多種藥物連結(jié)于支架表面，這涉及化學(xué)衍生化。一種或多種藥物還可以被摻入生物相容性多孔陶瓷涂層內(nèi)、例如納米孔徑陶瓷涂層。
聚合材料的實(shí)例包括生物相容的可降解性材料，例如，基于內(nèi)酯的聚酯或共聚酯，例如聚丙交酯；聚丙交酯-乙交酯；聚己內(nèi)酯-乙交酯；聚原酸酯；聚酐；聚氨基酸；多糖；聚磷腈；聚(醚-酯)共聚物，例如PEO-PLLA，或其混合物；以及生物相容非降解性材料，例如聚二甲硅氧烷；聚(乙烯-醋酸乙烯酯)；基于丙烯酸酯的聚合物或共聚物，例如聚甲基丙烯酸丁酯、聚(羥乙基甲基甲基丙烯酸酯)；聚乙烯-吡咯烷酮；氟化聚合物如聚四氟乙烯；纖維素酯。
當(dāng)使用聚合物骨架時(shí)，其可含有兩層，例如其中含有一種或多種藥物的基底層，例如乙烯-醋酸乙烯共聚物和聚甲基丙烯酸丁酯，以及不含一種或多種藥物并作為其擴(kuò)散控制的表面涂層，例如聚甲基丙烯酸丁酯。作為替代選擇，可將藥物包含于基底層中，而將輔助劑包含在外層中，反之宜然。聚合物骨架的總厚度可為約1至20μ或更厚。
根據(jù)本發(fā)明的方法或在本發(fā)明的裝置或系統(tǒng)中，一種或多種藥物的釋放可以是被動(dòng)的、主動(dòng)的或在激活下釋放，如光激活。
隨著時(shí)間的推移，一種或多種藥物從聚合材料或支架中釋放并進(jìn)入周圍的組織中，如達(dá)約1個(gè)月至1年。根據(jù)本發(fā)明，局部遞送允許一種或多種藥物在病變位點(diǎn)保持高濃度，而循環(huán)化合物為低濃度。用于局部遞送應(yīng)用的一種或多種藥物的量根據(jù)使用的化合物、待治療病癥以及期望效果而異。為達(dá)到本發(fā)明的目的，可以施用治療有效量。治療有效量是指足以抑制細(xì)胞增殖并產(chǎn)生對(duì)所述疾病狀態(tài)的預(yù)防和治療作用的量。具體而言，對(duì)于預(yù)防或治療再狹窄、例如血管再造后再狹窄或抗腫瘤治療，局部遞送較全身施用需要較少的化合物。
一種或多種藥物的效用可以在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法以及臨床上得以證明，例如按照下文所述的方法。以下實(shí)施例是說明性的，并不對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。
A1.在“28天大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷模型”中對(duì)晚期新生內(nèi)膜損傷形成的抑制大鼠球囊頸動(dòng)脈模型中，已有許多化合物被證實(shí)在2周時(shí)抑制內(nèi)膜損傷的形成，但僅少數(shù)化合物證明在4周時(shí)仍然有效。
在以下大鼠模型中測(cè)試了式I化合物。
對(duì)大鼠口服給以安慰劑或MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B。手術(shù)前3天開始每天給藥，持續(xù)31天。采用Clowers等人所述的方法(Lab.Invest.1983；49；208-215)致大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷。如Hay C等人(Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.21(2001)1948-1954)所述、采用流式細(xì)胞儀對(duì)血管炎性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行定量。在確定損傷大小的研究中，在處死大鼠前施用BrDU達(dá)24小時(shí)。在球囊損傷后的第1、9或21天時(shí)處死大鼠。摘除頸動(dòng)脈并加以處理，以用于組織學(xué)和形態(tài)學(xué)評(píng)估。
在該試驗(yàn)中，式I化合物、例如埃坡霉素B的效用可以得到證實(shí)，它顯著地減少CD45陽性的白細(xì)胞在1天時(shí)向血管壁及外膜中的浸潤，并顯著減少球囊損傷后9天和12天時(shí)新生內(nèi)膜損傷的形成。此外，當(dāng)將MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B局部施用于經(jīng)球囊處理的頸動(dòng)脈附近的外膜時(shí)(經(jīng)由植入外膜的導(dǎo)管，該導(dǎo)管與Alzet微型泵相連，泵中含有懸浮于賦形劑中的MIA如式I化合物如埃坡霉素B)，在第1天就會(huì)強(qiáng)力抑制CD45+白細(xì)胞的浸潤以及早期(置球囊后9天)和晚期(置球囊后21-31天)新生內(nèi)膜損傷，還能強(qiáng)力抑制構(gòu)建性重塑。
A2.在“家兔髂動(dòng)脈支架模型”中對(duì)28天時(shí)再狹窄的抑制在新西蘭白兔的髂動(dòng)脈中聯(lián)合實(shí)施血管成形術(shù)和支架放置。通過將動(dòng)脈中部的3.0×9.0mm血管成形球囊充氣、繼而將導(dǎo)管回拉一個(gè)球囊長度而致髂動(dòng)脈球囊創(chuàng)傷。重復(fù)兩次球囊損傷，在6atm下將3.0×12mm的支架置于髂動(dòng)脈內(nèi)30秒鐘。在對(duì)側(cè)髂動(dòng)脈以同樣方式進(jìn)行球囊損傷和支架放置。實(shí)施支架放置后血管造影術(shù)。所有動(dòng)物均每日口服接受阿斯匹林40mg/天作為抗血小板治療并喂飼標(biāo)準(zhǔn)低膽固醇家兔飼料。支架放置后28天，將動(dòng)物麻醉并實(shí)施安樂死，在100mmHg下將動(dòng)脈叢以乳酸化Ringer’s液灌注數(shù)分鐘，然后在100mmHg下以10％福爾馬林灌注15分鐘。切取位于主動(dòng)脈遠(yuǎn)端和股動(dòng)脈近端之間的血管部分并清除其外膜周圍組織。置支架部分的動(dòng)脈被包埋在塑料中，并從每個(gè)支架的近端、中間、遠(yuǎn)端切取切片。所有的切片都使用蘇木精-曙紅和Movat五色法染色。實(shí)施計(jì)算機(jī)測(cè)面積法以測(cè)定內(nèi)彈性層(IEL)、外彈性層(EEL)和腔的面積。測(cè)量了支架支桿處及支桿之間的新生內(nèi)膜及新生內(nèi)膜的厚度。將血管面積測(cè)量為EEL內(nèi)的面積。數(shù)據(jù)以平均值±SEM表示。組織學(xué)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析使用方差分析(ANOVA)進(jìn)行，因?yàn)閷?duì)每只動(dòng)物均測(cè)量了兩條置支架的動(dòng)脈，每只動(dòng)物產(chǎn)生一個(gè)均值。P＜0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義。
在支架放置前一天，以初始劑量口服管飼MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B，之后從支架放置當(dāng)天到支架置入后27天以50％的初始劑量給藥。該模型中可以顯示在MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B存在時(shí)的再狹窄損傷形成的程度顯著降低，而用安慰劑處理的動(dòng)物在28天時(shí)存在廣泛的新生內(nèi)膜形成，具有由蛋白多糖/膠原基質(zhì)中大量平滑肌細(xì)胞構(gòu)成的損傷以及明顯完全的內(nèi)皮愈合。此外，與安慰劑處理的動(dòng)物比較，用MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B處理的動(dòng)物中，緊鄰支架近端及緊鄰支架遠(yuǎn)端的動(dòng)脈區(qū)域的損傷形成也被抑制。此外，與安慰劑處理的動(dòng)物比較，用MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B處理的動(dòng)物中，炎性細(xì)胞、特別是那些處于支架支桿周圍區(qū)域的炎性細(xì)胞的數(shù)量明顯減少。
A3.支架的制造稱量支架(例如Multi-Link Vision支架，Guidant公司；或DRIVER支架，Medtronic公司)，然后將其置于旋轉(zhuǎn)或其他支持物上，以用作為藥物儲(chǔ)庫的聚合物或其他合成或生物載體進(jìn)行涂布。在涂布一種該類載體的實(shí)例中，當(dāng)支架旋轉(zhuǎn)時(shí)，將聚交酯-乙交酯、0.75mg/ml(+)-海綿內(nèi)酯以及0.0015mg/ml 2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚溶于甲醇和四氫呋喃的50∶50混合物中的100μl等分試樣溶液涂布其上。涂層支架從支持物上取下后風(fēng)干。最終稱重后，確定支架上的涂層量。
A4.水性溶液中(+)-海綿內(nèi)酯從聚合物涂層中的釋放將4片如上所述2cm涂層支架放入100ml pH7.4的磷酸緩沖液(PBS)中。將每個(gè)系列的另外4片放入100ml聚乙二醇(PEG)/水溶液(40/60v/v，PEG分子量＝400)。將支架片在37℃于振蕩器中孵育。每天更換緩沖液和PEG溶液，對(duì)溶液進(jìn)行不同的試驗(yàn)以測(cè)定所釋放的(+)-海綿內(nèi)酯濃度。此法可以顯示(+)-海綿內(nèi)酯從涂層支架上穩(wěn)定地釋放。術(shù)語“穩(wěn)定的(+)-海綿內(nèi)酯釋放”意指觀察到的藥物釋放率的變化小于10％。
A5.血漿中(+)-海綿內(nèi)酯從聚合物涂層中的釋放也可研究血漿中(+)-海綿內(nèi)酯的釋放。將1cm的涂層支架片置于1ml檸檬酸化的人血漿(來源于Helena實(shí)驗(yàn)室)中，血漿為凍干形式，加入1ml無菌去離子水復(fù)原。將三組支架血漿溶液在37℃孵育，并每日更換血漿。對(duì)溶液進(jìn)行不同的試驗(yàn)以測(cè)定所釋放的(+)-海綿內(nèi)酯濃度。此法可以證實(shí)血漿中(+)-海綿內(nèi)酯自涂層支架中穩(wěn)定地釋放。
A6.在體溫下可藥用聚合物中藥物的穩(wěn)定性可以對(duì)每個(gè)樣本的最后一片進(jìn)行PDGF-刺激的受體酪氨酸激酶試驗(yàn)，以測(cè)定MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B的活性。用游離的MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B可以進(jìn)行類似的試驗(yàn)。體外PDGF-刺激的受體酪氨酸激酶活性的抑制可以在BALB/c3T3細(xì)胞的PDGF受體免疫復(fù)合物中通過類似于E.Andrejauskas-Buchdunger和U.Regenass在Cancer Research，52(1992)5353-5358中描述的方法測(cè)量。通過該法可以比較游離MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B與聚合物涂層中的MIA、例如式I化合物、例如埃坡霉素B的穩(wěn)定性。
在實(shí)施例1至6中，匹美莫司(pimecrolimus)可以用埃坡霉素B、海綿內(nèi)酯置換，產(chǎn)生類似的結(jié)果。
臨床試驗(yàn)根據(jù)本發(fā)明使用的抗炎子囊霉素衍生物匹美莫司的有利效果可進(jìn)一步在天然冠狀動(dòng)脈中單一、主要損傷的血管再造的隨機(jī)、雙盲、多中心試驗(yàn)中得到證實(shí)，例如可按照如下的流程進(jìn)行主要終點(diǎn)是支架內(nèi)(in-stent)晚期管腔喪失(支架置入后即刻的最小管腔直徑和六個(gè)月后的直徑間的差異)。次級(jí)終點(diǎn)包括段內(nèi)(in-segment)狹窄的百分比(支架部分加上自管道支架部分遠(yuǎn)端以及近端5mm的管腔直徑)，和目標(biāo)血管支架處所需要的重復(fù)血管再造率。六個(gè)月后，例如借助實(shí)質(zhì)上常規(guī)的基于導(dǎo)管的冠狀血管造影術(shù)和/或借助冠狀內(nèi)超聲，確定新生內(nèi)膜的增殖程度，表現(xiàn)為包含匹美莫司的涂層支架處理組相對(duì)無涂層支架處理的安慰劑組的平均晚期管腔喪失。
權(quán)利要求
1.一種方法，用于在有需要的哺乳動(dòng)物中預(yù)防或治療平滑肌細(xì)胞在中空管中的增殖及遷移或細(xì)胞增殖增加或細(xì)胞凋亡減少或基質(zhì)沉積增加，該方法包括局部施用治療有效量的微管干擾劑(MIA)。
2.用于治療血管壁內(nèi)膜增厚的方法，包括從基于導(dǎo)管的裝置或腔內(nèi)醫(yī)療裝置控制遞送治療有效量的微管干擾劑(MIA)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中MIA是式I的埃坡霉素， 其中A代表O或NRN，其中RN為氫或低級(jí)烷基，R為氫或低級(jí)烷基，R’為甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，且Z為O或鍵。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中MIA為(+)-海綿內(nèi)酯。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的方法，其中施用或遞送為血管內(nèi)、鼻內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹膜間或食管施用或遞送。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的方法，其中施用和遞送是使用導(dǎo)管遞送系統(tǒng)、局部注射裝置、留置裝置、支架、涂層支架、套管、支架移植物、聚合物腔內(nèi)鋪面或控制釋放骨架進(jìn)行。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中微管干擾劑(MIA)自支架或自涂敷于支架上的涂層施用。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中微管干擾劑(MIA)自支架或自涂敷于支架上的涂層遞送。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，用于治療狹窄、再狹窄或炎癥。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，用于治療狹窄、再狹窄或炎癥。
11.一種藥物遞送裝置或系統(tǒng)，包括a)適于局部應(yīng)用或施用于中空管中的醫(yī)療裝置，例如基于導(dǎo)管的遞送裝置或腔內(nèi)醫(yī)療裝置，和b)可釋放性地附著于該醫(yī)療裝置上的治療劑量的微管干擾劑(MIA)。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的裝置，包含(+)-海綿內(nèi)酯。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的裝置，包含埃坡霉素B或埃坡霉素D。
14.根據(jù)權(quán)利要求11的裝置，包含[1S-[1R，3R(E)，7R，10S，11R，12R，16S]]-7，11-二羥基-8，8，10，12，16-五甲基-3-[1-甲基-2-(2-甲基-4-噻唑基)乙烯基]-4-氮雜-17-雙環(huán)[14.1.0]-十七烷-5，9-二酮。
15.根據(jù)權(quán)利要求11-14中任一項(xiàng)的裝置，其為導(dǎo)管遞送系統(tǒng)、局部注射系統(tǒng)、留置裝置、支架、支架移植物或套管。
16.根據(jù)權(quán)利要求11-14中任一項(xiàng)的裝置，其為涂層支架。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物遞送裝置或系統(tǒng)，包括a)適用于局部應(yīng)用或施用于中空管的醫(yī)療裝置，例如涂層支架；以及與之聯(lián)合的b)治療劑量的MIA、例如埃坡霉素B、例如附著于該醫(yī)療裝置上，以及其在藥物制備中的相應(yīng)用途和相應(yīng)的治療方法。
文檔編號(hào)A61P9/08GK1723018SQ200380105452
公開日2006年1月18日 申請(qǐng)日期2003年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月9日
發(fā)明者M·F·普雷斯科特 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司