專利名稱：吡咯并苯并二氮雜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及吡咯并苯并二氮雜(PBD)、確切為具有C2-C3雙鍵、C2位芳基和該C2芳基上特定取代基的吡咯并苯并二氮雜。
背景技術(shù)：
一些吡咯并苯并二氮雜(PBD)具有識別和結(jié)合特殊DNA序列的能力；優(yōu)選的序列是PuGPu。1965年發(fā)現(xiàn)了第一種PBD抗腫瘤抗生素安茴霉素(Leimgruber等人，J.Am.Chem.Soc.，87，5793-5795(1965)；Leimgruber等人，J.Am.Chem.Soc.，87，5791-5793(1965))。從此以后，已經(jīng)報(bào)道了大量天然存在的PBD，并且針對各種類似物已經(jīng)開發(fā)了十多種合成途徑(Thurston等人，Chem.Rev.1994，433-465(1994))。家族成員包括abbeymycin(Hochlowski等人，J.Antibiotics，40，145-148(1987))、奇卡霉素(chicamycin)(Konishi等人，J.Antibiotics，37，200-206(1984))、DC-81(日本專利58-180487；Thurston等人，Chem.Brit.，26，767-772(1990)；Bose等人，Tetrahedron，48，751-758(1992))、mazethramycin(Kuminoto等人，J.Antibiotics，33，665-667(1980))、新茴霉素A與B(Takeuchi等人，J.Antibiotics，29，93-96(1976))、porothramycin(Tsunakawa等人，J.Antibiotics，41，1366-1373(1988))、prothracarcin(Shimizu等人，J.Antibiotics，29，2492-2503(1982)；Langley和Thurston，J.Org.Chem.，52，91-97(1987))、sibanomicin(DC-102)(Hara等人，J.Antibiotics，41，702-704(1988)；Itoh等人，J.Antibiotics，41，1281-1284(1988))、西伯利亞霉素(Leber等人，J.Am.Chem.Soc.，110，2992-2993(1988))和托馬霉素(tomamycin)(Arima等人，J.Antibiotics，25，437-444(1972))。PBD的一般結(jié)構(gòu)為
它們的區(qū)別在于取代基的數(shù)量、類型與位置、它們的芳族A環(huán)與吡咯并C環(huán)和C環(huán)的飽和度。在B環(huán)中，在N10-C11位存在亞胺(N＝C)、甲醇胺(NH-CH(OH))或甲醇胺甲基醚(NH-CH(OMe))，它是負(fù)責(zé)使DNA烷基化的親電中心。所有已知的天然產(chǎn)物都在手性C11a位具有(S)-構(gòu)型，當(dāng)從C環(huán)向A環(huán)觀察時(shí)，呈現(xiàn)右手扭轉(zhuǎn)。這使它們的三維形狀適合形成與B-型DNA小溝的等螺旋性，引起結(jié)合位點(diǎn)處的滑動(dòng)配合(snugfit)(Kohn，Antibiotics III.Springer-Verlag，紐約，3-11頁(1975)；Hurley和Needham-VanDevanter，Acc.Chem.Res.，19，230-237(1986))。它們在小溝中生成加合物的能力使它們能夠干擾DNA的加工，因此可用作抗腫瘤劑。
本發(fā)明人以前已經(jīng)在WO 00/12508中尤其公開了下列化合物具有細(xì)胞毒性 最近，Cooper.N.等人，Chem.Commun.，16，1764-1765(2002)也公開了具有如上述化合物細(xì)胞毒性的下列化合物 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，與上面討論的已知化合物相比，某一類這些化合物表現(xiàn)出驚人的對抗癌細(xì)胞系的活性。
因此，本發(fā)明的第一方面是式(I)化合物及其鹽、溶劑合物、化學(xué)保護(hù)形式和前體藥物，
其中R6、R7和R9獨(dú)立地選自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝基、Me3Sn和鹵素；其中R和R’獨(dú)立地選自可選被取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基和C5-20芳基；R8選自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝基、Me3Sn和鹵素，或者該化合物是二聚物，每一單體是式(I)，其中每一單體的R8基團(tuán)一起構(gòu)成連接單體的式-X-R”-X-的二聚物橋，其中R”是C3-12亞烷基，該鏈可以被一個(gè)或多個(gè)雜原子、例如O、S、NH和/或芳族環(huán)、例如苯或吡啶中斷，且每一X獨(dú)立地選自O(shè)、S或NH；或者從R6至R9的任一對相鄰基團(tuán)一起構(gòu)成基團(tuán)-O-(CH2)p-O-，其中p是1或2；R2選自(i)可選被取代的萘基；(ii)可選被取代的噻吩基或呋喃基；和(iii)被下列基團(tuán)取代的苯基(a)一個(gè)或多個(gè)氯代或氟代基團(tuán)；(b)乙基或丙基；(c)4-叔丁基；(d)2-甲基；(e)2-與6-位的兩個(gè)甲基。
本發(fā)明的第二方面是本發(fā)明第一方面的化合物在治療方法中的用途。
本發(fā)明的第三方面是藥物組合物，含有本發(fā)明第一方面的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明的第四方面提供本發(fā)明第一方面的化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠容易地確定候選化合物是否治療任何特定細(xì)胞類型的增殖性病癥。例如，下面的實(shí)施例描述了一些測定法，它們可以方便地用于評估由特定化合物所提供的活性。
術(shù)語“增殖性疾病”涉及過量或異常細(xì)胞的不希望或失控的細(xì)胞增殖，這是所不期望的，例如贅生性或增生性生長，無論體外還是體內(nèi)。
增殖性病癥的實(shí)例包括但不限于良性、惡化前與惡性細(xì)胞增殖，包括但不限于贅生物與腫瘤(例如組織細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞瘤、骨瘤)、癌癥(例如肺癌、小細(xì)胞肺癌、胃腸癌、腸癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肝癌、腎癌、膀胱癌、胰腺癌、腦癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤、黑素瘤)、白血病、銀屑病、骨病、纖維增殖性障礙(例如結(jié)締組織的)和動(dòng)脈粥樣硬化。
可以治療任何細(xì)胞類型，包括但不限于肺、胃腸(例如包括腸、結(jié)腸)、乳腺(乳房)、卵巢、前列腺、肝(肝臟)、腎(腎臟)、膀胱、胰腺、腦和皮膚。
取代基本文所用的措辭“可選被取代”涉及可以是未取代的或者可以是被取代的母體基團(tuán)。
除非另有指定，本文所用的術(shù)語“取代”涉及攜帶一個(gè)或多個(gè)取代基的母體基團(tuán)。本文所用的術(shù)語“取代基”在常規(guī)意義上表示與母體基團(tuán)共價(jià)結(jié)合或者(如果適當(dāng)?shù)脑?稠合的化學(xué)部分。有多種取代基都是熟知的，它們的生成方法和向各種母體基團(tuán)引入的方法也是熟知的。
下面詳細(xì)描述取代基的實(shí)例。
C1-7烷基本文所用的術(shù)語“C1-7烷基”涉及從具有1至7個(gè)碳原子的烴化合物的碳原子上除去氫原子所得到的一價(jià)部分，它可以是脂族的或脂環(huán)族的，并且可以是飽和的或不飽和的(例如部分不飽和、完全不飽和)。因而，術(shù)語“烷基”包括以下討論的子類鏈烯基、炔基、環(huán)烷基等。
飽和烷基的實(shí)例包括但不限于甲基(C1)、乙基(C2)、丙基(C3)、丁基(C4)、戊基(C5)、己基(C6)和庚基(C7)。
飽和直鏈烷基的實(shí)例包括但不限于甲基(C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)、正丁基(C4)、正戊基(戊基)(C5)、正己基(C6)和正庚基(C7)。
飽和支鏈烷基的實(shí)例包括異丙基(C3)、異丁基(C4)、仲丁基(C4)、叔丁基(C4)、異戊基(C5)和新戊基(C5)。
C2-7鏈烯基本文所用的術(shù)語“C2-7鏈烯基”涉及具有一條或多條碳-碳雙鍵的烷基。
不飽和鏈烯基的實(shí)例包括但不限于乙烯基(-CH＝CH2)、1-丙烯基(-CH＝CH-CH3)、2-丙烯基(烯丙基，-CH-CH＝CH2)、異丙烯基(1-甲基乙烯基，-C(CH3)＝CH2)、丁烯基(C4)、戊烯基(C5)和己烯基(C6)。
C2-7炔基本文所用的術(shù)語“C2-7炔基”涉及具有一條或多條碳-碳叁鍵的烷基。
不飽和炔基的實(shí)例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)和2-丙炔基(炔丙基，-CH2-C≡CH)。
C3-7環(huán)烷基本文所用的術(shù)語“C3-7環(huán)烷基”涉及同時(shí)也是環(huán)狀基團(tuán)的烷基；也就是從環(huán)烴(碳環(huán))化合物的脂環(huán)原子上除去氫原子所得到的一價(jià)部分，該部分具有3至7個(gè)碳原子，包括3至7個(gè)環(huán)原子。
環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于從下列化合物衍生的那些飽和單環(huán)烴化合物環(huán)丙烷(C3)、環(huán)丁烷(C4)、環(huán)戊烷(C5)、環(huán)己烷(C6)、環(huán)庚烷(C7)、甲基環(huán)丙烷(C4)、二甲基環(huán)丙烷(C5)、甲基環(huán)丁烷(C5)、二甲基環(huán)丁烷(C6)、甲基環(huán)戊烷(C6)、二甲基環(huán)戊烷(C7)和甲基環(huán)己烷(C7)；不飽和單環(huán)烴化合物環(huán)丙烯(C3)、環(huán)丁烯(C4)、環(huán)戊烯(C5)、環(huán)己烯(C6)、甲基環(huán)丙烯(C4)、二甲基環(huán)丙烯(C5)、甲基環(huán)丁烯(C5)、二甲基環(huán)丁烯(C6)、甲基環(huán)戊烯(C6)、二甲基環(huán)戊烯(C7)和甲基環(huán)己烯(C7)；和飽和多環(huán)烴化合物降蒈烷(C7)、降蒎烷(C7)、降冰片烷(C7)。
C3-20雜環(huán)基本文所用的術(shù)語“C3-20雜環(huán)基”涉及從雜環(huán)化合物的環(huán)原子上除去氫原子所得到的一價(jià)部分，該部分具有3至20個(gè)環(huán)原子，其中1至10個(gè)是環(huán)雜原子。優(yōu)選地，每個(gè)環(huán)具有3至7個(gè)環(huán)原子，其中1至4個(gè)是環(huán)雜原子。
在上下文中，前綴(例如C3-20、C3-7、C5-6等)表示環(huán)原子數(shù)或者環(huán)原子數(shù)的范圍，無論碳原子還是雜原子。例如，本文所用的術(shù)語“C5-6雜環(huán)基”涉及具有5或6個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)基。
單環(huán)雜環(huán)基的實(shí)例包括但不限于從下列化合物衍生的那些N1氮雜環(huán)丙烷(C3)、氮雜環(huán)丁烷(C4)、吡咯烷(四氫吡咯)(C5)、吡咯啉(例如3-吡咯啉、2，5-二氫吡咯)(C5)、2H-吡咯或3H-吡咯(異吡咯)(C5)、哌啶(C6)、二氫吡啶(C6)、四氫吡啶(C6)、氮雜(C7)；O1氧雜環(huán)丙烷(C3)、氧雜環(huán)丁烷(C4)、氧雜環(huán)戊烷(四氫呋喃)(C5)、氧雜環(huán)戊烯(二氫呋喃)(C5)、氧雜環(huán)己烷(四氫吡喃)(C6)、二氫吡喃(C6)、吡喃(C6)、氧雜(C7)；S1硫雜環(huán)丙烷(C3)、硫雜環(huán)丁烷(C4)、硫雜環(huán)戊烷(四氫噻吩)(C5)、硫雜環(huán)己烷(四氫噻喃)(C6)、硫雜環(huán)庚烷(C7)；O2二氧雜環(huán)戊烷(C5)、二噁烷(C6)和二氧雜環(huán)庚烷(C7)；O3三噁烷(C6)；N2咪唑烷(C5)、吡唑烷(二唑烷)(C5)、咪唑啉(C5)、吡唑啉(二氫吡唑)(C5)、哌嗪(C6)；N1O1四氫噁唑(C5)、二氫噁唑(C5)、四氫異噁唑(C5)、二氫異噁唑(C5)、嗎啉(C6)、四氫噁嗪(C6)、二氫噁嗪(C6)、噁嗪(C6)；N1S1噻唑啉(C5)、噻唑烷(C5)、硫代嗎啉(C6)；N2O1噁二嗪(C6)；O1S1氧硫雜環(huán)戊烯(oxathiole)(C5)和氧硫雜環(huán)己烷(oxathiane)(噻噁烷)(C6)；和N1O1S1氧雜噻嗪(C6)。
取代的單環(huán)雜環(huán)基的實(shí)例包括從環(huán)狀形式的糖衍生的那些例如呋喃糖類(C5)如呋喃阿拉伯糖、呋喃來蘇糖、呋喃核糖和呋喃木糖；和吡喃糖類(C6)如別吡喃糖(allopyranose)、吡喃阿卓糖、吡喃葡萄糖、吡喃甘露糖、吡喃古洛糖、吡喃艾杜糖、吡喃半乳糖和吡喃塔羅糖。
C5-20芳基本文所用的術(shù)語“C5-20芳基”涉及從芳族化合物的芳族環(huán)原子上除去氫原子所得到的一價(jià)部分，該部分具有3至20個(gè)環(huán)原子。優(yōu)選地，每個(gè)環(huán)具有5至7個(gè)環(huán)原子。
在上下文中，前綴(例如C3-20、C5-7、C5-6等)表示環(huán)原子數(shù)或者環(huán)原子數(shù)的范圍，無論碳原子還是雜原子。例如，本文所用的術(shù)語“C5-6芳基”涉及具有5或6個(gè)環(huán)原子的芳基。
環(huán)原子可以全部是碳原子，此為“碳芳基(carboaryl)”。碳芳基的實(shí)例包括但不限于從下列化合物衍生的那些苯(即苯基)(C6)、萘(C10)、薁(C10)、蒽(C14)、菲(C14)、并四苯(C18)和芘(C16)。
包含稠合環(huán)、其中至少一個(gè)是芳族環(huán)的芳基的實(shí)例包括但不限于從下列化合物衍生的基團(tuán)二氫化茚(例如2，3-二氫-1H-茚)(C9)、茚(C9)、異茚(C9)、四氫化萘(1，2，3，4-四氫萘)(C10)、苊(C12)、芴(C13)、phenalene(C13)、醋菲(acephenanthrene)(C15)和醋蒽(C16)。
作為替代選擇，環(huán)原子可以包括一個(gè)或多個(gè)雜原子，此為“雜芳基”。單環(huán)雜芳基的實(shí)例包括但不限于從下列化合物衍生的那些N1吡咯(氮雜環(huán)戊二烯)(C5)、吡啶(吖嗪)(C6)；O1呋喃(氧雜環(huán)戊二烯)(C5)；S1噻吩(硫雜環(huán)戊二烯)(C5)；N1O1噁唑(C5)、異噁唑(C5)、異噁嗪(C6)；N2O1噁二唑(呋咱)(C5)；N3O1氧雜三唑(C5)；N1S1噻唑(C5)、異噻唑(C5)；N2咪唑(1，3-二唑)(C5)、吡唑(1，2-二唑)(C5)、噠嗪(1，2-二嗪)(C6)、嘧啶(1，3-二嗪)(C6)(例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1，4-二嗪)(C6)；N3三唑(C5)、三嗪(C6)；和N4四唑(C5)。
包含稠合環(huán)的雜芳基的實(shí)例包括但不限于C9(具有2個(gè)稠合環(huán))，從下列化合物衍生苯并呋喃(O1)、異苯并呋喃(O1)、吲哚(N1)、異吲哚(N1)、中氮茚(N1)、二氫吲哚(N1)、異二氫吲哚(N1)、嘌呤(N4)(例如腺嘌呤、鳥嘌呤)、苯并咪唑(N2)、吲唑(N2)、并噁唑(N1O1)、苯并異噁唑(N1O1)、苯并二氧雜環(huán)戊烯(O2)、苯并呋咱(N2O1)、苯并三唑(N3)、苯并噻吩(S1)、苯并噻唑(N1S1)、苯并噻二唑(N2S1)；C10(具有2個(gè)稠合環(huán))，從下列化合物衍生色烯(O1)、異色烯(O1)、色滿(O1)、異色滿(O1)、苯并二噁烷(O2)、喹啉(N1)、異喹啉(N1)、喹嗪(N1)、苯并噁嗪(N1O1)、苯并二嗪(N2)、吡啶并吡啶(N2)、喹喔啉(N2)、喹唑啉(N2)、噌啉(N2)、酞嗪(N2)、萘啶(N2)、蝶啶(N4)；C11(具有2個(gè)稠合環(huán))，從苯并二氮雜(N2)衍生；C13(具有3個(gè)稠合環(huán))，從下列化合物衍生咔唑(N1)、二苯并呋喃(O1)、二苯并噻吩(S1)、咔啉(N2)、啶(N2)、吡啶并吲哚(N2)；和C14(具有3個(gè)稠合環(huán))，從下列化合物衍生吖啶(N1)、呫噸(O1)、噻噸(S1)、氧蒽(oxanthrene)(O2)、吩噁噻(phenoxathiin)(O1S1)、吩嗪(N2)、吩噁嗪(N1O1)、吩噻嗪(N1S1)、噻蒽(S2)、菲啶(N1)、菲咯啉(N2)、吩嗪(N2)。
上述基團(tuán)無論單獨(dú)還是作為另一取代基的一部分，本身可以可選地被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，所述取代基選自它們自身和以下所列另外的取代基。
鹵素-F、-Cl、-Br和-I。
羥基-OH。
醚-OR，其中R是醚取代基，例如C1-7烷基(也稱C1-7烷氧基，如下討論)、C3-20雜環(huán)基(也稱C3-20雜環(huán)氧基)或C5-20芳基(也稱C5-20芳氧基)，優(yōu)選C1-7烷基。
烷氧基-OR，其中R是烷基，例如C1-7烷基。C1-7烷氧基的實(shí)例包括但不限于-OMe(甲氧基)、-OEt(乙氧基)、-O(nPr)(正丙氧基)、-O(iPr)(異丙氧基)、-O(nBu)(正丁氧基)、-O(sBu)(仲丁氧基)、-O(iBu)(異丁氧基)和-O(tBu)(叔丁氧基)。
縮醛-CH(OR1)(OR2)，其中R1和R2獨(dú)立地是縮醛取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基，或者在“環(huán)狀”縮醛基團(tuán)的情況下，R1和R2與它們所連接的兩個(gè)氧原子和它們所連接的碳原子一起構(gòu)成具有4至8個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)?？s醛基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-CH(OMe)2、-CH(OEt)2和-CH(OMe)(OEt)。
半縮醛-CH(OH)(OR1)，其中R1是半縮醛取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。半縮醛基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-CH(OH)(OMe)和-CH(OH)(OEt)。
縮酮-CR(OR1)(OR2)，其中R1和R2如對縮醛所定義，R是除氫以外的縮酮取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基?？s酮基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-C(Me)(OMe)2、-C(Me)(OEt)2、-C(Me)(OMe)(OEt)、-C(Et)(OMe)2、-C(Et)(OEt)2和-C(Et)(OMe)(OEt)。
半縮酮-CR(OH)(OR1)，其中R1如對半縮醛所定義，R是除氫以外的半縮酮取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。半縮醛基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-C(Me)(OH)(OMe)、-C(Et)(OH)(OMe)、-C(Me)(OH)(OEt)和-C(Et)(OH)(OEt)。
氧代(酮基、-酮)＝O。
硫酮(硫代酮)＝S。
亞氨基(亞胺)＝NR，其中R是亞氨基取代基，例如氫、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烷基。酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于＝NH、＝NMe、＝NEt和＝NPh。
甲?；?甲醛、羧醛)-C(＝O)H。
?；?酮基)-C(＝O)R，其中R是酰基取代基，例如C1-7烷基(也稱C1-7烷基酰基或C1-7烷?；?、C3-20雜環(huán)基(也稱C3-20雜環(huán)基?；?或C5-20芳基(也稱C5-20芳基?；?，優(yōu)選C1-7烷基。酰基的實(shí)例包括但不限于-C(＝O)CH3(乙?；?、-C(＝O)CH2CH3(丙?；?、-C(＝O)C(CH3)3(叔丁?；?和-C(＝O)Ph(苯甲酰基、苯酮)。
羧基(羧酸)-C(＝O)OH。
硫代羧基(硫代羧酸)-C(＝S)SH。
硫醇羧基(硫醇羧酸)-C(＝O)SH。
硫羰羧基(硫羰羧酸)-C(＝S)OH。
亞胺酸-C(＝NH)OH。
異羥肟酸-C(＝NOH)OH。
酯(羧酸酯、羧酸的酯、氧基羰基)-C(＝O)OR，其中R是酯取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OC(CH3)3和-C(＝O)OPh。
酰氧基(反酯)-OC(＝O)R，其中R是酰氧基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。酰氧基的實(shí)例包括但不限于-OC(＝O)CH3(乙酰氧基)、-OC(＝O)CH2CH3、-OC(＝O)C(CH3)3、-OC(＝O)Ph和-OC(＝O)CH2Ph。
氧基碳酰氧基-OC(＝O)OR，其中R是酯取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。酯基的實(shí)例包括但不限于-OC(＝O)OCH3、-OC(＝O)OCH2CH3、-OC(＝O)OC(CH3)3和-OC(＝O)OPh。
氨基-NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，例如氫、C1-7烷基(也稱C1-7烷基氨基或二-C1-7烷基氨基)、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烷基，或者在“環(huán)狀”氨基的情況下，R1和R2與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成具有4至8個(gè)環(huán)原子的雜環(huán)。氨基可以是伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NHR1)或叔氨基(-NHR1R2)，也可以是陽離子形式，即季銨基(-+NR1R2R3)。氨基的實(shí)例包括但不限于-NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2和-NHPh。環(huán)狀氨基的實(shí)例包括但不限于氮雜環(huán)丙烷子基、氮雜環(huán)丁烷子基、吡咯烷子基、哌啶子基、哌嗪子基、嗎啉代基和硫代嗎啉代基。
酰胺基(氨基甲?；奔柞；?、氨基羰基、甲酰胺)-C(＝O)NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義。酰胺基的實(shí)例包括但不限于-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)NHCH2CH3和-C(＝O)N(CH2CH3)2，以及這樣的酰胺基，其中R1和R2與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成雜環(huán)結(jié)構(gòu)，例如哌啶子基羰基、嗎啉代羰基、硫代嗎啉代羰基和哌嗪子基羰基。
硫代酰胺基(硫代氨甲酰基)-C(＝S)NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義。硫代酰胺基的實(shí)例包括但不限于-C(＝S)NH2、-C(＝S)NHCH3、-C(＝S)N(CH3)2和-C(＝S)NHCH2CH3。
?；０被??；被?-NR1C(＝O)R2，其中R1是酰胺取代基，例如氫、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烷基，R2是?；〈?，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烷基。?；０被膶?shí)例包括但不限于-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)CH2CH3和-NHC(＝O)Ph。R1和R2可以一起構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，例如琥珀酰亞氨基、馬來酰亞氨基和鄰苯二甲酰亞氨基 琥珀酰亞氨基馬來酰亞氨基鄰苯二甲酰亞氨基氨基羰基氧基-OC(＝O)NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義。氨基羰基氧基的實(shí)例包括但不限于-OC(＝O)NH2、-OC(＝O)NHMe、-OC(＝O)NMe2和-OC(＝O)NEt2。
脲基-N(R1)CONR2R3，其中R2和R3獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義，R1是脲基取代基，例如氫、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烷基。脲基的實(shí)例包括但不限于-NHCONH2、-NHCONHMe、-NHCONHEt、-NHCONMe2、-NHCONEt2、-NMeCONH2、-NMeCONHMe、-NMeCONHEt、-NMeCONMe2和-NMeCONEt2。
胍基-NH-C(＝NH)NH2。
四唑基具有四個(gè)氮原子和一個(gè)碳原子的五元芳族環(huán) 亞氨基-NR，其中R是亞氨基取代基，例如氫、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烷基。亞氨基的實(shí)例包括但不限于＝NH、＝NMe和＝NEt。
脒(脒基)-C(＝NR)NR2，其中每個(gè)R是脒取代基，例如氫、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烷基。脒基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-C(＝NH)NH2、-C(＝NH)NMe2和-C(＝NMe)NMe2。
硝基-NO2。
亞硝基-NO。
疊氮基-N3。
氰基(腈、甲腈)-CN。
異氰基-NC。
氰?；?OCN。
異氰?；?NCO。
氰硫基(硫氰酰)-SCN。
異硫氰基(異硫氰酰)-NCS。
硫氫基(硫醇、巰基)-SH。
硫醚(硫化物)-SR，其中R是硫醚取代基，例如C1-7烷基(也稱C1-7烷硫基)、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。C1-7烷硫基的實(shí)例包括但不限于-SCH3和-SCH2CH3。
二硫化物-SS-R，其中R是二硫化物取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基(也稱C1-7烷基二硫化物)。C1-7烷基二硫化物基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-SSCH3和-SSCH2CH3。
锍化物(亞磺酰基、亞砜)-S(＝O)R，其中R是锍化物取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。锍化物基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)CH3和-S(＝O)CH2CH3。
砜(磺?；?-S(＝O)2R，其中R是砜取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基，例如包括氟化或全氟化C1-7烷基。砜基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)2CH3(甲烷磺酰基、甲磺酰基)、-S(＝O)2CF3(三氟甲磺酰基)、-S(＝O)2CH2CH3(乙磺?；?、-S(＝O)2C4F9(九氟丁磺?；?、-S(＝O)2CH2CF3(三氟乙磺?；?、-S(＝O)2CH2CH2NH2(?；酋；?、-S(＝O)2Ph(苯基磺酰基、苯磺酰基)、4-甲基苯基磺?；?甲苯磺酰基)、4-氯苯基磺?；?氯苯磺?；?、4-溴苯基磺?；?溴苯磺酰基)、4-硝基苯基(硝苯磺酰基)、2-萘磺酸酯(萘磺酰基)和5-二甲氨基萘-1-基磺酸酯(丹磺?；?。
亞磺酸(亞磺基)-S(＝O)OH、-SO2H。
磺酸(磺基)-S(＝O)2OH、-SO3H。
亞磺酸酯(亞磺酸的酯)-S(＝O)OR，其中R是亞磺酸酯取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。亞磺酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)OCH3(甲氧基亞磺?；?、亞磺酸甲酯)和-S(＝O)OCH2CH3(乙氧基亞磺酰基、亞磺酸乙酯)。
磺酸酯(磺酸的酯)-S(＝O)2OR，其中R是磺酸酯取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基?；撬狨セ鶊F(tuán)的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)2OCH3(甲氧基磺?；?、磺酸甲酯)和-S(＝O)2OCH2CH3(乙氧基磺?；?、磺酸乙酯)。
亞磺酰氧基-OS(＝O)R，其中R是亞磺酰氧基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。亞磺酰氧基的實(shí)例包括但不限于-OS(＝O)CH3和-OS(＝O)CH2CH3。
磺酰氧基-OS(＝O)2R，其中R是磺酰氧基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基?；酋Ｑ趸膶?shí)例包括但不限于-OS(＝O)2CH3(甲磺酸酯)-OS(＝O)2CH2CH3(乙磺酸酯)。
硫酸酯-OS(＝O)2OR，其中R是硫酸酯取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。硫酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-OS(＝O)2OCH3和-SO(＝O)2OCH2CH3。
氨亞磺酰(氨基亞磺酰基、亞磺酸酰胺、亞磺酰胺)-S(＝O)NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義。氨亞磺?；鶊F(tuán)的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)NH2、-S(＝O)NH(CH3)、-S(＝O)N(CH3)2、-S(＝O)NH(CH2CH3)、-S(＝O)N(CH2CH3)2和-S(＝O)NHPh。
氨磺酰(氨基磺酰基、磺酸酰胺、磺酰胺)-S(＝O)2NR1R2，其中R1和R2獨(dú)立地是氨基取代基，如對氨基所定義。氨磺酰基的實(shí)例包括但不限于-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2NH(CH3)、-S(＝O)2N(CH3)2、-S(＝O)2NH(CH2CH3)、-S(＝O)2N(CH2CH3)2和-S(＝O)2NHPh。
磺氨基-NR1S(＝O)2OH，其中R1是氨基取代基，如對氨基所定義?；前被膶?shí)例包括但不限于-NHS(＝O)2OH和-N(CH3)S(＝O)2OH。
磺酰氨基-NR1S(＝O)2R，其中R1是氨基取代基，如對氨基所定義，R是磺酰氨基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基?；酋０被膶?shí)例包括但不限于-NHS(＝O)2CH3和-N(CH3)S(＝O)2C6H5。
亞磺酰氨基-NR1S(＝O)R，其中R1是氨基取代基，如對氨基所定義，R是亞磺酰氨基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基。亞磺酰氨基的實(shí)例包括但不限于-NHS(＝O)CH3和-N(CH3)S(＝O)C6H5。
膦基(膦)-PR2，其中R是膦基取代基，例如-H、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。膦基的實(shí)例包括但不限于-PH2、-P(CH3)2、-P(CH2CH3)2、-P(t-Bu)2和-P(Ph)2。
二氧膦基-P(＝O)2。
氧膦基(氧化膦)-P(＝O)R2，其中R是氧膦基取代基，例如C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烷基或C5-20芳基。氧膦基的實(shí)例包括但不限于-P(＝O)(CH3)2、-P(＝O)(CH2CH3)2、-P(＝O)(t-Bu)2和-P(＝O)(Ph)2。
膦酸(膦酰基)-P(＝O)(OH)2。
膦酸酯(膦酰酯)-P(＝O)(OR)2，其中R是膦酸酯取代基，例如-H、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。膦酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-P(＝O)(OCH3)2、-P(＝O)(OCH2CH3)2、-P(＝O)(O-t-Bu)2和-P(＝O)(OPh)2。
磷酸(膦酰氧基)-OP(＝O)(OH)2。
磷酸酯(膦酰氧基酯)-OP(＝O)(OR)2，其中R是磷酸酯取代基，例如-H、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。磷酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-OP(＝O)(OCH3)2、-OP(＝O)(OCH2CH3)2、-OP(＝O)(O-t-Bu)2和-OP(＝O)(OPh)2.
亞磷酸-OP(OH)2。
亞磷酸酯-OP(OR)2，其中R是亞磷酸酯取代基，例如-H、C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。亞磷酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-OP(OCH3)2、-OP(OCH2CH3)2、-OP(O-t-Bu)2和-OP(OPh)2。
氨基亞磷酸酯-OP(OR1)-NR22，其中R1和R2是氨基亞磷酸酯取代基，例如-H、(可選被取代的)C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。氨基亞磷酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-OP(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。
氨基磷酸酯-OP(＝O)(OR1)-NR22，其中R1和R2是氨基磷酸酯取代基，例如-H、(可選被取代的)C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烷基或C5-20芳基。氨基磷酸酯基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-OP(＝O)(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(＝O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(＝O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。
亞烷基C3-12亞烷基本文所用的術(shù)語“C3-12亞烷基”涉及從具有3至12個(gè)碳原子的烴化合物的同一碳原子上除去兩個(gè)氫原子或者從兩個(gè)不同碳原子各除去一個(gè)氫原子所得到的雙齒部分(另有指定除外)，它可以是脂族的或脂環(huán)族的，并且可以是飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的。因而，術(shù)語“亞烷基”包括如下討論的子類亞烯基、亞炔基、亞環(huán)烷基等。
直鏈飽和C3-12亞烷基的實(shí)例包括但不限于-(CH2)n-，其中n是整數(shù)3至12，例如-CH2CH2CH2-(亞丙基)、-CH2CH2CH2CH2-(亞丁基)、-CH2CH2CH2CH2CH2-(亞戊基)和-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-(亞庚基)。
支鏈飽和C3-12亞烷基的實(shí)例包括但不限于-GH(CH3)CH2-、-CH(CH3)CH2CH2-、-CH(CH3)CH2CH2CH2-、-CH2CH(CH3)CH2-、-CH2CH(CH3)CH2CH2-、-CH(CH2CH3)-、-CH(CH2CH3)CH2-和-CH2CH(CH2CH3)CH2-。
直鏈部分不飽和C3-12亞烷基(C3-12亞烯基和亞炔基)的實(shí)例包括但不限于-CH＝CH-CH2-、-CH2-CH＝CH2-、-CH＝CH-CH2-CH2-、-CH＝CH-CH2-CH2-CH2-、-CH＝CH-CH＝CH-、-CH＝CH-CH＝CH-CH2-、-CH＝CH-CH＝CH-CH2-CH2-、-CH＝CH-CH2-CH＝CH-、-CH＝CH-CH2-CH2-CH＝CH-和-CH2-C≡C-CH2-。
支鏈部分不飽和C3-12亞烷基(C3-12亞烯基和亞炔基)的實(shí)例包括但不限于-C(CH3)＝CH-、-C(CH3)＝CH-CH2-、-CH＝CH-CH(CH3)-和-C≡C-CH(CH3)-。
脂環(huán)族飽和C3-12亞烷基(C3-12亞環(huán)烷基)的實(shí)例包括但不限于亞環(huán)戊基(例如亞環(huán)戊-1，3-基)和亞環(huán)己基(例如亞環(huán)己-1，4-基)。
脂環(huán)族部分不飽和C3-12亞烷基(C3-12亞環(huán)烷基)的實(shí)例包括但不限于亞環(huán)戊烯基(例如4-亞環(huán)戊烯-1，3-基)、亞環(huán)己烯基(例如2-亞環(huán)己烯-1，4-基、3-亞環(huán)己烯-1，2-基、2，5-亞環(huán)己二烯-1，4-基)。
包括其他形式除非另有指定，以上包括這些取代基的熟知的離子、鹽、溶劑合物和被保護(hù)形式。例如，對羧酸(-COOH)的稱謂也包括其陰離子(羧酸根)形式(-COO-)、鹽或溶劑合物，以及常規(guī)被保護(hù)的形式。類似地，對氨基的稱謂包括氨基的質(zhì)子化形式(-N+HR1R2)、鹽或溶劑合物，例如鹽酸鹽，以及氨基的常規(guī)被保護(hù)的形式。類似地，對羥基的稱謂也包括其陰離子形式(-O-)、鹽或溶劑合物，以及常規(guī)被保護(hù)的形式。
異構(gòu)體、鹽、溶劑合物、被保護(hù)形式、前體藥物某些化合物可能存在一種或多種特定的幾何、旋光、對映異構(gòu)、非對映異構(gòu)、差向異構(gòu)、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)、立體異構(gòu)、互變異構(gòu)、構(gòu)象或端基異構(gòu)形式，包括但不限于順式-與反式-形式；E-與Z-形式；c-、t-與r-形式；內(nèi)-與外-形式；R-、S-與內(nèi)消旋-形式；D-與L-形式；d-與l-形式；(+)與(-)形式；酮-、烯醇-與烯醇化物-形式；syn-與anti-形式；順錯(cuò)-與反錯(cuò)-形式；α-與β-形式；直立與平伏形式；船-、椅-、扭轉(zhuǎn)-、信封-與半椅-形式；及其組合，以下總稱為“異構(gòu)體”(或“異構(gòu)形式”)。
需要注意，除了下面對互變異構(gòu)形式的討論以外，特別從本文所用的術(shù)語“異構(gòu)體”中排除在外的是結(jié)構(gòu)(或構(gòu)造)異構(gòu)體(也就是這樣的異構(gòu)體，它們的區(qū)別在于原子之間的連接，而不僅僅是原子的空間位置)。例如，對甲氧基-OCH3的稱謂不應(yīng)解釋為對其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體羥甲基-CH2OH的稱謂。類似地，對鄰-氯苯基的稱謂不應(yīng)解釋為對其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體間-氯苯基的稱謂。不過，對一類結(jié)構(gòu)的稱謂完全可以包括屬于該類的結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式(例如，C1-7烷基包括正丙基和異丙基；丁基包括正-、異-、仲-與叔-丁基；甲氧基苯基包括鄰-、間-與對-甲氧基苯基)。
上述排除不涉及互變異構(gòu)形式，例如酮-、烯醇-與烯醇化物-形式，例如下列互變異構(gòu)對酮/烯醇(見下闡述)、亞胺/烯胺、酰胺/亞氨基醇、脒/脒、亞硝基/肟、硫代酮/烯硫醇、N-亞硝基/羥基偶氮和硝基/酸式硝基。
酮 烯醇 烯醇化物需要注意，在術(shù)語“異構(gòu)體”中特別包括具有一個(gè)或多個(gè)同位素取代的化合物。例如，H可以是任意同位素形式，包括1H、2H(D)和3H(T)；C可以是任意同位素形式，包括12C、13C和14C；O可以是任意同位素形式，包括16O和18O；等等。
除非另有指定，對特定化合物的稱謂包括所有這類異構(gòu)形式，包括其(完全或部分)外消旋與其他混合物。這類異構(gòu)形式的制備(例如不對稱合成)和分離(例如分步結(jié)晶和色譜法)的方法是本領(lǐng)域已知的，或者通過以已知方式調(diào)整本文所教導(dǎo)的方法或已知方法而容易獲得。
除非另有指定，對特定化合物的稱謂也包括其離子、鹽、溶劑合物和被保護(hù)形式，例如見下討論。
可能適宜或需要的是制備、純化和/或處理活性化合物的相應(yīng)的鹽，例如藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例在Berge等人，J.Pharm.Sci.，66，1-19(1977)中論及。
例如，如果化合物是陰離子性的，或者具有可能是陰離子的官能團(tuán)(例如-COOH可能是-COO-)，那么可以與適合的陽離子生成鹽。適合的無機(jī)陽離子的實(shí)例包括但不限于堿金屬離子如Na+和K+、堿土金屬陽離子如Ca2+和Mg2+，和其他陽離子如Al3+。適合的有機(jī)陽離子的實(shí)例包括但不限于銨離子(即NH4+)和取代的銨離子(例如NH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些適合的取代的銨離子的實(shí)例有從下列化合物衍生的那些乙胺、二乙胺、二環(huán)己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、芐胺、苯基芐胺、膽堿、葡甲胺和氨丁三醇，以及氨基酸如賴氨酸和精氨酸。常見季銨離子的實(shí)例是N(CH3)4+。
如果化合物是陽離子性的，或者具有可能是陽離子的官能團(tuán)(例如-NH2可能是-NH3+)，那么可以與適合的陰離子生成鹽。適合的無機(jī)陰離子的實(shí)例包括但不限于從下列無機(jī)酸衍生的那些鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞硫酸、硝酸、亞硝酸、磷酸和亞磷酸。
適合的有機(jī)陰離子的實(shí)例包括但不限于從下列有機(jī)酸衍生的那些2-乙酰氧基苯甲酸、乙酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦磺酸、肉桂酸、檸檬酸、依地酸、乙二磺酸、乙磺酸、富馬酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、羥基馬來酸、羥基萘甲酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、粘酸、油酸、草酸、棕櫚酸、撲酸、泛酸、苯乙酸、苯磺酸、丙酸、丙酮酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、對氨基苯磺酸、酒石酸、甲苯磺酸和戊酸。適合的聚合有機(jī)陰離子的實(shí)例包括但不限于從下列聚合酸衍生的那些丹寧酸、羧甲基纖維素。
可能適宜或需要的是制備、純化和/或處理活性化合物的相應(yīng)的溶劑合物。術(shù)語“溶劑合物”在本文中使用常規(guī)含義，表示溶質(zhì)(例如活性化合物、活性化合物的鹽)與溶劑的配合物。如果溶劑是水，溶劑合物可以適宜地被稱為水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。
與本發(fā)明特別有關(guān)的溶劑合物是這樣的，其中溶劑通過PBD部分的亞胺鍵加成，見下闡述，其中該溶劑是水或醇(RAOH，其中RA是如上所述的醚取代基) 這些形式可以被稱為PBD的甲醇胺和甲醇胺醚形式。這些平衡的均衡依賴于化合物存在的條件以及該部分本身的屬性。
一般而言，任何親核性溶劑都能夠生成這類溶劑合物，如上關(guān)于羥基溶劑所述。其他親核性溶劑包括硫醇和胺。
可能適宜或需要的是制備、純化和/或處理活性化合物的化學(xué)保護(hù)形式。術(shù)語“化學(xué)保護(hù)形式”在本文中使用常規(guī)的化學(xué)含義，涉及這樣一種化合物，其中一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)被保護(hù)以免在指定條件下(例如pH、溫度、輻射、溶劑等)發(fā)生不可取的化學(xué)反應(yīng)。在實(shí)踐中，采用熟知的化學(xué)方法來可逆地使官能團(tuán)在指定條件下為非反應(yīng)性的，否則它將為反應(yīng)性的。在化學(xué)保護(hù)形式中，一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)呈被保護(hù)或保護(hù)性基團(tuán)的形式(也稱被屏蔽或屏蔽性基團(tuán)或者被封閉或封閉性基團(tuán))。通過保護(hù)反應(yīng)性官能團(tuán)，能夠進(jìn)行牽涉其他未被保護(hù)的反應(yīng)性官能團(tuán)的反應(yīng)，而不影響被保護(hù)的基團(tuán)；通?？梢栽陔S后的步驟中除去保護(hù)基團(tuán)，基本上不會(huì)影響分子的其余部分。例如參見“有機(jī)合成中的保護(hù)基”(Green，T.和Wuts，P.；第3版；John Wiley和sons，1999)。
在有機(jī)合成中有多種這類“保護(hù)”、“封閉”或“屏蔽”方法得到廣泛使用，并且是熟知的。例如，具有兩個(gè)不等價(jià)反應(yīng)性官能團(tuán)、二者都將在指定條件下是反應(yīng)性的化合物可以被衍生為使官能團(tuán)之一“被保護(hù)”，因此在指定條件下是無反應(yīng)性的；如此保護(hù)后，該化合物可以用作反應(yīng)物，它實(shí)際上僅具有一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)。在所需反應(yīng)(牽涉另一個(gè)官能團(tuán))完成之后，被保護(hù)的基團(tuán)可以被“去保護(hù)”，恢復(fù)成其原來的官能度。
例如，羥基可以被保護(hù)為醚(-OR)或酯(-OC(＝O)R)，例如叔丁基醚；芐基、二苯甲基(二苯基甲基)或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲代甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基醚；或者乙?；?-OC(＝O)CH3，-OAc)。
例如，醛或酮基團(tuán)可以分別被保護(hù)為縮醛(R-CH(OR)2)或縮酮(R2C(OR)2)，其中羰基(＞C＝O)被轉(zhuǎn)化為二醚(＞C(OR)2)，通過與例如伯醇反應(yīng)。用大量過量的水在酸的存在下水解，容易再生醛或酮基團(tuán)。
例如，胺基團(tuán)可以被保護(hù)為例如酰胺(-NRCO-R)或氨基甲酸酯(-NRCO-OR)，例如甲基酰胺(-NHCO-CH3)、芐氧基酰胺(-NHCO-OCH2C6H5，-NH-Cbz)、叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)3，-NH-Boc)、2-聯(lián)苯-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5，-NH-Bpoc)、9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)、6-硝基藜蘆氧基酰胺(-NH-Nvoc)、2-三甲代甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)、2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)、烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)、2-(苯磺?；?乙氧基酰胺(-NH-Psec)；或者在合適的情況下(例如環(huán)狀胺)，被保護(hù)為氧化氮基團(tuán)(＞N-O-)。
例如，羧酸基團(tuán)可以被保護(hù)為酯，例如C1-7烷基酯(例如甲基酯、叔丁基酯)、C1-7鹵代烷基酯(例如C1-7三鹵烷基酯)、三-C1-7烷基甲硅烷基-C1-7烷基酯或C5-20芳基-C1-7烷基酯(例如芐基酯、硝基芐基酯)；或者酰胺，例如甲基酰胺。
例如，硫醇基團(tuán)可以被保護(hù)為硫醚(-SR)，例如芐基硫醚、乙酰氨基甲基硫醚(-S-CH2NHC(＝O)CH3)。
可能適宜或需要的是制備、純化和/或處理活性化合物的前體藥物形式。本文所用的術(shù)語“前體藥物”涉及這樣一種化合物，它在被代謝時(shí)(例如體內(nèi))產(chǎn)生所需的活性化合物。通常，前體藥物是無活性的，或者活性低于活性化合物，但是可以提供有利的處理、施用或代謝性質(zhì)。
例如，一些前體藥物是活性化合物的酯(例如生理學(xué)上可接受的、代謝上不穩(wěn)定的酯)。在代謝期間，酯基團(tuán)(-C(＝O)OR)被裂解，產(chǎn)生活性藥物。這類酯可以這樣生成，例如母體化合物中任意羧酸基團(tuán)(-C(＝O)OH)的酯化作用，酌情預(yù)先保護(hù)存在于母體化合物中的任意其他反應(yīng)性基團(tuán)，如果需要的話繼之以去保護(hù)。
而且，一些前體藥物被酶促活化而產(chǎn)生活性化合物或者在進(jìn)一步化學(xué)反應(yīng)之后產(chǎn)生活性化合物的化合物(例如ADEPT、GDEPT、LIDEPT等)。例如，前體藥物可以是糖衍生物或其他糖苷綴合物，或者可以是氨基酸酯衍生物。
確切而言，在WO 00/12507中描述了吡咯并苯并二氮雜的前體藥物，引用在此作為參考。在這些前體藥物中，能夠在體內(nèi)除去(例如酶促、用光)的氮保護(hù)基團(tuán)與亞胺基的氮結(jié)合，亞胺基的碳攜帶羥基、酯或硫酯基團(tuán)。這種保護(hù)形式的實(shí)例包括
它對硝基還原酶不穩(wěn)定(例如使用ADEPT/GDEPT)； 和 它們對光不穩(wěn)定；和 它對谷胱甘肽不穩(wěn)定(例如使用NPEPT)。
一般合成途徑本發(fā)明化合物合成中的關(guān)鍵中間體是下列化合物，即式(A)的烯醇三氟甲磺酸酯 其中基團(tuán)R6至R9如最終產(chǎn)物所定義，SEM代表三甲代甲硅烷基乙氧基甲基，OTf代表基團(tuán)-OSO2CF3。在WO 00/12508中詳細(xì)描述了這種化合物的合成，引用在此作為參考。確切而言，參考第24頁的流程7，其中上述化合物被稱為中間體P。SEM保護(hù)基可用其他適合的氮保護(hù)基代替。
從這種化合物到所需最終產(chǎn)物的途徑如流程1所述。
流程1關(guān)鍵的烯醇三氟甲磺酸酯中間體(A)可以利用Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)轉(zhuǎn)化為適當(dāng)?shù)腟EM-保護(hù)的二內(nèi)酰胺(B)，也就是鈀催化的烯醇三氟甲磺酸酯(A)與適當(dāng)芳基硼衍生物的交叉偶聯(lián)作用。
SEM-保護(hù)的二內(nèi)酰胺(B)然后可以通過還原形成被保護(hù)的甲醇胺中間體、然后可將其處理以除去SEM保護(hù)基，轉(zhuǎn)化為所需的最終式(I)化合物。二內(nèi)酰胺(B)的還原作用可以借助例如硼氫化鈉來實(shí)現(xiàn)，而適合于除去SEM保護(hù)基的措施是用硅膠處理。
這種合成途徑同樣適用于二聚物的合成。
其他用途本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)(例如抑制)細(xì)胞增殖的如本發(fā)明第一方面所述的化合物。因而，本發(fā)明還提供了體外或體內(nèi)調(diào)節(jié)(例如抑制)細(xì)胞增殖的方法，包括使細(xì)胞與有效量的本發(fā)明第一方面的化合物接觸。
確切而言，這種抑制可以針對如實(shí)施例所公開的某些細(xì)胞系。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠容易地確定一種候選化合物是否調(diào)節(jié)(例如抑制)細(xì)胞增殖。例如，在下面的實(shí)施例中描述了可以方便地用于評估由特定化合物所提供的活性的測定法。
例如，可以使細(xì)胞樣品(例如來自腫瘤)體外生長，使供試化合物與所述細(xì)胞接觸，觀察該化合物對這些細(xì)胞的效應(yīng)。作為“效應(yīng)”的實(shí)例，可以測定細(xì)胞的形態(tài)學(xué)狀態(tài)(例如存活或死亡等)。若發(fā)現(xiàn)供試化合物對細(xì)胞發(fā)揮影響，則這可以用作化合物在治療攜帶相同細(xì)胞型細(xì)胞患者的方法中的功效的預(yù)后或診斷標(biāo)志。
治療方法如上所述，本發(fā)明的第二方面提供了本發(fā)明第一方面的化合物在治療方法中的用途。還提供了治療方法，包括向需要治療的對象施用治療有效量的本發(fā)明第一方面的化合物、優(yōu)選為本發(fā)明第三方面的藥物組合物形式。術(shù)語“治療有效量”是足以對患者顯示益處的量。這類益處可以是至少一種癥狀至少有改善。實(shí)際的施用量和施用的速度與時(shí)程將依賴于所治療疾病的屬性和嚴(yán)重性。治療的處方、例如劑量的決定屬于一般醫(yī)務(wù)人員和其他醫(yī)生的責(zé)任。
化合物可以被單獨(dú)或者與其他治療同時(shí)或者相繼聯(lián)合施用，這依賴于所治療的病癥。治療和療法的實(shí)例包括但不限于化療(施用活性劑，例如包括藥物)、手術(shù)和放射療法。
根據(jù)本發(fā)明和用于本發(fā)明的藥物組合物除了活性成分、即式(I)化合物以外還可以包含藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體、緩沖劑、穩(wěn)定劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其他物質(zhì)。這類物質(zhì)應(yīng)當(dāng)是無毒性的，并且不應(yīng)當(dāng)干擾活性成分的功效。載體或其他材料的精確屬性將依賴于施用途徑，這可以是口服或者注射，例如經(jīng)皮、皮下或靜脈內(nèi)注射。
供口服施用的藥物組合物可以是片劑、膠囊劑、粉劑或液體形式。片劑可以包含固體載體或助劑。液體藥物組合物一般包含液體載體如水、石油、動(dòng)物或植物油、礦物油或合成油?？梢园ㄉ睇}水溶液、葡萄糖或其他糖溶液或者二醇類如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇。膠囊劑可以包含固體載體如明膠。
就靜脈內(nèi)、經(jīng)皮或皮下注射或者在病患部位注射而言，活性成分將呈腸胃外可接受的水溶液形式，它是無熱原的并且具有合適的pH、等滲性和穩(wěn)定性。相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員完全能夠制備合適的溶液，例如使用等滲載體如氯化鈉注射液、林格氏注射液、乳酸化林格氏注射液。根據(jù)需要可以包括防腐劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、抗氧化劑和/或其他添加劑。
優(yōu)選下列優(yōu)選可以適用于上述本發(fā)明的所有方面，或者可以涉及單一方面。這些優(yōu)選可以以任意組合組合在一起。
R6至R9如果化合物是二聚物，優(yōu)選二聚物橋?yàn)槭?O-(CH2)n-O-，其中n是3至12、更優(yōu)選3至7。
R9優(yōu)選地是H。
R6優(yōu)選選自H、OH、OR、SH、NH2、硝基和鹵素、更優(yōu)選H或鹵素、最優(yōu)選H。
R7和R8(當(dāng)化合物不是二聚物時(shí))優(yōu)選獨(dú)立地選自H、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR′和鹵素、更優(yōu)選獨(dú)立地選自H、OH和OR，其中R優(yōu)選地選自可選被取代的C1-7烷基、C3-10雜環(huán)基和C5-10芳基。7-和8-位上特別優(yōu)選的取代基是OMe和OCH2Ph。
R2在一組實(shí)施方式中，R2是可選被取代的萘基。優(yōu)選的取代基包括鹵素，更確切為氯和氟；C1-7烷基、更確切為C1-4烷基，例如甲基和叔丁基；醚基、更確切為C1-4烷氧基，例如甲氧基和芐氧基；C5-20芳基、確切為苯基。
萘基可以與主PBD部分連接在其環(huán)系上的任意位置。例如，如果萘基是未取代的，那么該基團(tuán)可以是萘-1-基或萘-2-基，萘-2-基是優(yōu)選的。
尤其優(yōu)選的萘基包括萘-2-基、6-甲氧基萘-2-基、6-乙氧基萘-2-基和氟和/或氯取代的萘基，單一取代的氟或氯萘-2-基是最優(yōu)選的。
可選的取代基也可以在任意環(huán)位。優(yōu)選的是沒有一個(gè)取代基位于與主PBD部分連接的鍵的任一側(cè)。
在一組實(shí)施方式中，R2是可選被取代的噻吩基。優(yōu)選的取代基包括鹵素，更確切為氯和氟；C1-7烷基、更確切為C1-4烷基，例如甲基和叔丁基；醚基、更確切為C1-4烷氧基，例如甲氧基和芐氧基；C5-20芳基、確切為苯基。
噻吩基可以與主PBD部分連接在其環(huán)系上的任意可用位置。例如，如果噻吩基是未取代的，那么該基團(tuán)可以是噻吩-2-基或噻吩-3-基，噻吩-2-基是優(yōu)選的。
尤其優(yōu)選的噻吩基包括噻吩-2-基、5-氯噻吩-2-基和5-甲基噻吩-2-基。
可選的取代基也可以在任意環(huán)位。如果噻吩基是噻吩-3-基，那么優(yōu)選的是沒有一個(gè)取代基位于與主PBD部分連接的鍵的任一側(cè)。
在一組實(shí)施方式中，R2是可選被取代的呋喃基。優(yōu)選的取代基包括鹵素，更確切為氯和氟；C1-7烷基、更確切為C1-4烷基，例如甲基和叔丁基；醚基、更確切為C1-4烷氧基，例如甲氧基和芐氧基；C5-20芳基、確切為苯基。
呋喃基可以與主PBD部分連接在其環(huán)系上的任意可用位置。例如，如果呋喃基是未取代的，那么該基團(tuán)可以是呋喃-2-基或呋喃-3-基，呋喃-2-基是優(yōu)選的。
尤其優(yōu)選的呋喃基包括呋喃-2-基、5-氯呋喃-2-基和5-甲基呋喃-2-基。
可選的取代基也可以在任意環(huán)位。如果呋喃基是呋喃-3-基，那么優(yōu)選的是沒有一個(gè)取代基位于與主PBD部分連接的鍵的任一側(cè)。
在另一組實(shí)施方式中，R2是苯基，被乙基或丙基取代、優(yōu)選被乙基或正丙基、更優(yōu)選被乙基取代。這些基團(tuán)優(yōu)選地位于鄰-(2-)位或?qū)?(4-)位，鄰-(2-)位是更優(yōu)選的。
因而，尤其優(yōu)選的這種類型R2基團(tuán)是4-乙基苯基。
在另一組實(shí)施方式中，R2是苯基，被一個(gè)或多個(gè)氯代或氟代基團(tuán)取代。如果僅有一個(gè)取代基，它優(yōu)選地位于鄰-(2-)或?qū)?(4-)位、更優(yōu)選對-(4-)位。如果有兩個(gè)或多個(gè)取代基，一般而言，鄰位和對位是優(yōu)選的取代基位置。不過，優(yōu)選的是沒有兩個(gè)氯取代基位于2-和6-位。還優(yōu)選所有取代基不是氟就是氯。
尤其優(yōu)選的這種類型R2基團(tuán)是4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、2，6-二氟苯基和3，4-二氯苯基。
下列化合物是特別優(yōu)選的
(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-萘基)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(11)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-叔丁基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(13)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氯苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(15)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氟苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(17)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(19)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-乙基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(21)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-噻吩基)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(23)；(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-呋喃)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(25)；和(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2，6-二甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(27)。
本發(fā)明第一方面的化合物優(yōu)選地用于治療癌癥、特別是乳腺癌、腎癌與肺癌和抑制乳腺癌、腎癌與肺癌細(xì)胞系生長，并優(yōu)選用于制備具有以上治療和抑制作用的藥物。
確切而言，其中R2是可選被取代的萘基或噻吩基的化合物優(yōu)選地用于治療肺癌、乳腺癌與腎癌和黑素瘤、更優(yōu)選乳腺癌，并優(yōu)選用于制備具有以上治療作用的藥物。
其中R2是具有乙基或丙基取代基的苯基的化合物優(yōu)選地用于治療肺癌、乳腺癌與腎癌和黑素瘤，并優(yōu)選用于制備具有以上治療作用的藥物。
其中R2是具有一個(gè)或多個(gè)氟取代基(優(yōu)選4-氟取代基)的苯基的化合物優(yōu)選地用于治療腎癌，并優(yōu)選用于制備治療腎癌的藥物。
其中R2是具有4-叔丁基取代基、一個(gè)或多個(gè)氯取代基(優(yōu)選4-氯取代基)或2-甲基取代基的苯基的化合物優(yōu)選地用于治療乳腺癌，并優(yōu)選用于制備治療乳腺癌的藥物。其中R2是具有4-叔丁基取代基的苯基的化合物還優(yōu)選地用于治療黑素瘤和腎癌，并優(yōu)選用于制備治療黑素瘤和腎癌的藥物。
其中R2是具有2-甲基取代基的苯基的化合物優(yōu)選地用于治療腎癌，并優(yōu)選用于制備治療腎癌的藥物。
其中R2是具有2，6-二甲基取代基的苯基的化合物優(yōu)選地用于治療腎癌，并優(yōu)選用于制備治療腎癌的藥物。
實(shí)施例一般實(shí)驗(yàn)方法熔點(diǎn)(mp)于Gallenkamp P1384數(shù)字熔點(diǎn)儀上測定，未經(jīng)校正。紅外(IR)光譜用Perkin-Elmer 297分光光度計(jì)記錄。1H-和13C-NMR光譜于Jeol GSX 270MHz FT-NMR分光計(jì)或Brucker AMX-250MHz NMR分光計(jì)上記錄，在20℃+/-1℃下操作?；瘜W(xué)位移以四甲基硅烷(TMS)低場的百萬分之份數(shù)(δ)報(bào)告。自旋多重性被描述為s(單峰)，bs(寬單峰)，d(雙峰)，dd(雙重雙峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，p(五重峰)或m(多重峰)。質(zhì)譜(MS)用Jeol JMS-DX 303 GC質(zhì)譜儀(EI模式70eV，離子源117-147℃)記錄。精確分子質(zhì)量(HRMS)借助峰匹配法測定，使用全氟煤油(PFK)作為內(nèi)部質(zhì)量標(biāo)記，F(xiàn)AB質(zhì)譜從甘油/硫代甘油/三氟乙酸(1∶1∶0.1)基質(zhì)得到，離子源溫度180℃。Na-D線處的旋光度在環(huán)境溫度下用Perkin-Elmer 141偏振計(jì)得到。分析結(jié)果一般在理論值的+/-0.2％之內(nèi)。快速色譜用Aldrich快速色譜硅膠-60(E.Merck，230-400目)進(jìn)行。自動(dòng)快速色譜在Jones Flashmaster II上進(jìn)行。薄層色譜(TLC)用GF254硅膠(含有熒光指示劑)在玻璃板上進(jìn)行。全部溶劑和試劑除非另有規(guī)定，都由Aldrich Chemical Company Ltd.供應(yīng)，使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。無水溶劑如下制備在適當(dāng)干燥劑的存在下在干燥氮?dú)夥罩姓麴s，與4A分子篩或鈉線一起貯存。石油醚表示在40-60℃下沸騰的餾分。
關(guān)鍵中間體的合成 N-(4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲?；?羥基脯氨酸甲基酯(3)在室溫下，向攪拌著的2-硝基-4，5-二甲氧基苯甲酸(1)(25.01g，110.10mmol)的無水DCM(100mL)懸液中一次性加入草酰氯(15.38g，121.11mmol)。加入催化量的DMF(2滴)，將反應(yīng)混合物在惰性氣氛下攪拌16小時(shí)。在-20℃下將酰氯溶液滴加到劇烈攪拌著的吡咯化合物(2)(34.90g，110.10mmol；JOC 5，13，3621(1994))與TEA(45.95mL，33.36g，330.29mmol)的無水DCM(100mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(2×200mL)、飽和NH4Cl(2×200mL)、水(2×200mL)、鹽水(2×200mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物(3)，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用EtOAc作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)過量洗脫劑，得到產(chǎn)物，為泡沫(33.26g，93.9mmol，85％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.69(s，1H)，6.87(s，1H)，5.31(s，2H)，4.97-4.82(m，1H)，4.44(br s，1H)，3.99(s，3H)，3.98(s，3H)，3.81(s，3H)，3.54-3.48(m，1H)，3.18(d，1H，J＝2.02Hz)，2.87(br s，1H)，2.45-2.16(m，2H)；13C NMR(67.8MHz，CDCl3)δ172.6，172.5，167.5，166.8，154.4，154.0，149.3，137.5，137.4，127.0，126.2，109.5，107.2，107.1，69.9，69.1，59.2，57.4，56.9，56.8，56.6，56.4，54.6，53.5，52.5，52.4，39.4，38.0。
(11aS)-6，7-二甲氧基-2(R)-羥基-2，3，5，10，11，11a-六氫-5，11-二氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4-]苯并二氮雜(4)向3(33.0g，93.1mmol)的無水EtOH(250mL)溶液加入10％Pd/C催化劑(3.3g)。將反應(yīng)混合物用55psi H2的Parr氫化器在壓力下氫化18小時(shí)。將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，硅藻土用熱MeOH洗滌，注意勿使濾餅干透。除去過量溶劑，得到粗產(chǎn)物(20.14g)。將粗產(chǎn)物在1N HCl(200mL)和CHCl3(200mL)中攪拌30分鐘。有機(jī)層用1N HCl(100mL)洗滌，合并水層，用飽和NaHCO3水溶液中和。留置水萃取液過夜，生成微細(xì)的白色沉淀(4)，過濾收集，干燥(7.81g，26.72mmol，29％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H，NH)，7.61(s，1H，ArH)，7.36(s，1H，ArH)，4.49-4.41(m，1H，2)，4.22-4.17(m，1H，11a)，3.88(s，6H)，3.82-3.55(m，2H，3)，3.20(br s，1H，OH)，2.87-2.77(m，1H，1)，2.10-2.05(m，1H，1)；13C NMR(CDCl3)δ170.2，165.9，152.0，145.7，130.7，118.2，111.9，104.2，68.1，56.0，55.6，54.2，34.6，18.8。
(11aS)-6，7-二甲氧基-2(R)-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基1-2，3，5，10，11，11a-六氫-5，11-二氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4-]苯并二氮雜(5)向4(7.23g，24.74mmol)與咪唑(8.42g，123.72mmol)的無水DMF(75mL)溶液一次性加入固體氯代TBDMS(8.22g，54.44mmol)，在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水(500mL)中，過濾，得到粗產(chǎn)物(5)，從EtOH(800mL)中重結(jié)晶純化，為微細(xì)的白色針狀物(6.995g，17.21mmol，70％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ10.06(s，1H，NH)，7.37(s，1H，ArH)，6.68(s，1H，ArH)，4.19-4.14(m，1H，2)，4.06-4.01(m，1H，11a)，3.90(s，3H，OMe)，3.88(s，3H，OMe)，3.69-3.63(m，2H，3)，2.85-2.80(m，1H，1)，2.05-2.01(m，1H，1)；13C NMR(67.8MHz，CDCl3)δ170.4，170.2，165.9，152.1，145.8，145.6，131.1，130.7，118.1，111.9，104.3，104.1，69.2，69.1，56.0，55.9，55.7，54.3，54.0，35.0，25.8，25.7，25.6，17.9，-3.0，-3.5，-4.9，-5.0。
(11aS)-6，7-二甲氧基-2(R)-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基1-2，3，5，10，11，11a-六氫-10-[2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基]-5，11-二氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4-]苯并二氮雜(6)在0℃下，向攪拌著的NaH(0.422g，0.704g 60％礦物油分散體，18.34mmol)懸液滴加5(6.50g，15.99mmol)的無水DMF(27.5mL)溶液，將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。在0℃下向攪拌著的反應(yīng)混合物滴加SEM氯(3.11mL，2.93g，17.59mmol)的無水DMF(5mL)溶液，在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水(200mL)中，得到白色沉淀，用二乙醚萃取(4×300mL)。將有機(jī)層用水(2×50mL)、鹽水(2×50mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用石油醚∶EtOAc的80∶20混合物作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(6)，為黃色油(7.01g，13.1mmol，82％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.35(s，1H，ArH)，7.24(s，1H，ArH)，5.52(d，2H，J＝9.89Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.65(d，2H，J＝9.90Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.61-4.56(m，1H，2)，4.23(dd，1H，J＝4.40Hz，8.24Hz，11a)，3.94(s，3H，OMe)，3.92(s，3H，OMe)，3.68(m，4H，SEM 1＝CH2+3)，2.86(m，1H，1)，2.02(m，1H，1)，0.98(t，2H，J＝8.25Hz，SEM 2＝CH2)，0.88(s，9H，TBDMSt-Bu CH3)，0.10(s，6H，2x TBDMS SiCH3)，0.03(s，9H，3x SEM SiCH3)；13C NMR(67.8MHz，CDCl3)δ170.0，165.6，151.8，147.1，133.9，121.5，111.2，105.5，78.1，69.6，67.0，56.5，56.2，56.1，53.6，35.5，25.7，18.4，-1.3，-4.8。
(11aS)-6，7-二甲氧基-2(R)-羥基-2，3，5，10，11，11a-六氫-10-[2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基]-5，11-二氧代-1H-吡咯并[2，1-c ][1，4-]苯并二氮雜(7)向攪拌著的6(7.0g，13.05mmol)的THF(50mL)溶液加入1N TBAF的THF溶液(19.58mL，19.58mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，用DCM(200mL)稀釋，用水(2×200mL)、鹽水(2×200mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，除去過量溶劑，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用50∶50石油醚∶EtOAc作為洗脫劑。在真空中蒸發(fā)純的級分，得到產(chǎn)物(7)(5.9g)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H，ArH)，7.24(s，1H，ArH)，5.52(d，1H，J＝9.9Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.68-4.64(m，2H，SEM氨基縮醛CH2+2)，4.30(dd，1H，J＝5.86，8.24Hz)，3.91(s，3H，OMe)，3.90(s，3H，OMe)，3.87-3.51(m，4H，SEM 1＝CH2+3)，2.95(dt，1H，J＝5.31，13.56Hz，1)，2.17-2.08(m，1H，1)，1.02-0.93(m，2H，SEM 2＝CH2)，0.03(s，9H，3x SiCH3)；13C NMR(67.8MHz，CDCl3)δ169.7，165.9，151.9，147.1，134.0，121.1，111.2，105.5，78.2，69.1，67.1，56.5，56.1，53.9，34.9，18.4，-1.3。
(11aS)-6，7-二甲氧基-2，3，5，10，11，11a-六氫-10-[2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基]-2，5，11-三氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4-]苯并二氮雜(8)在-50℃氮?dú)夥障?，向攪拌著的草酰?10.48mL 2N DCM溶液，20.97mmol)歷經(jīng)5分鐘滴加無水DCM(20mL)中的無水DMSO(3.28g，41.94mmol)。攪拌5分鐘后，向反應(yīng)混合物歷經(jīng)45分鐘滴加7(5.90g，13.98mmol)的無水DCM(45mL)溶液，然后在-50℃下攪拌另外45分鐘。向混合物歷經(jīng)15分鐘滴加TEA(9.89g，97.87mmol)，繼之以攪拌另外15分鐘。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，用H2O(150mL)和DCM(100mL)稀釋。將有機(jī)相用1N HCl(2×100mL)、水(2×100mL)、鹽水(2×100mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物(8)，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用50∶50石油醚(40-60℃)∶EtOAc作為洗脫劑。在真空中蒸發(fā)純的級分，得到產(chǎn)物(4.33g，10.3mmol，74％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.30(s，1H，ArH)，7.24(s，1H，ArH)，5.60(d，1H，J＝9.89Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.69(d，1H，J＝9.89Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.62(dd，1H，J＝9.89，3.12Hz，11a)，4.26-4.19(m，1H，3)，3.95(s，3H，OMe)，3.94(s，3H，OMe)，3.81-3.49(m，4H，SEM 1＝CH2+1+3)，2.82-2.71(m，1H，1)，0.95(t，2H，J＝2.01Hz，SEM 2＝CH2)，-0.04(s，9H，SEM CH3)；13C NMR(67.8MHz，CDCl3)δ206.8，168.8，165.9，152.4，147.5，134.0，120.4，111.1，105.6，78.2，67.2，56.2，54.8，52.3，37.3，18.3，-1.3。
(11aS)-5，10，11，11a-四氫-7，8-二甲氧基-10-[2-(三甲代甲硅烷基)乙氧基甲基]-2-[[(三氟甲基)磺?；鵠氧基]-5，11-二氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜(9)向劇烈攪拌著的8(2.0g，4.77mmol)的無水DCM(100mL)溶液一次性加入無水吡啶(0.46mL，0.452g，5.73mmol)，將混合物在室溫下攪拌10分鐘。一次性快速加入無水三氟甲磺酸酐(1.25mL，1.48g，5.25mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4.5小時(shí)。將變暗的均勻反應(yīng)混合物倒入冷的飽和NaHCO3(200mL)中，混合物用DCM萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用水(2×200mL)、鹽水(2×200mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用80∶20石油醚∶EtOAc作為洗脫劑。在真空中蒸發(fā)純的級分，得到產(chǎn)物(9)，為黃色油(1.79g，3.25mmol，68％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.29(s，1H，ArH)，7.23(s，1H，ArH)，7.15(t，1H，J＝2.01Hz，H3)，5.53(d，1H，J＝10.07Hz，SEM氨基縮醛CH2)，4.68(d，1H，J＝9.89Hz，SEM氨基縮醛CH2)。
實(shí)施例1(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-萘基)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(11)的合成 (a)2-(2-萘基)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(10)向9(517mg，0.93mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(300mg，2.83mmol)、2-萘代硼酸(171mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌96小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過快速柱色譜純化，使用含70％乙酸乙酯的己烷作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物10，為黃色油。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.85-7.71(m，4H，Ar-H x 4)，7.67-7.54(m，2H，H-3，Ar-H x 1)，7.52-7.39(m，3H，H-6，Ar-H x 2)，7.33-7.27(s，1H，H-9)，5.58(d，1H，J＝9.93Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.79-4.66(m，2H，N-CH2-OSEM x 1，H-11a)，4.11(d，1H，J＝16.28Hz，H-1 x 1)，3.97 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.90-3.65(m，2H，O-CH2-SEM)，3.28(dd，1H，J＝10.92，16.23Hz，H-1 x 1)，1.00(t，2H，J＝8.23Hz，CH2-SEM)，0.04(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-萘基)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(11)向攪拌著的10(971mg，1.8mmol)在無水乙醇(19mL)與無水THF(37mL)混合物中的溶液以兩小時(shí)間隔分三批加入固體硼氫化鈉(654mg，17.2mmol)，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、水(30mL)和硅膠(18.3g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物11，為黃色粉末(151mg，0.39mmol，22％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.9(d，1H，J＝4.0Hz，H11)，7.86-7.40(m，8H，H3，H6，6 x Ar-H)，6.85(s，1H，H9)，4.48(dt，1H，J＝4.9，11.2Hz，H11a)，3.98 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.80-3.46(m，2H，2 x H1)。
實(shí)施例2(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-叔丁基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(13)的合成 (a)2-(4-叔丁基苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(12)向9(502mg，0.91mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(302mg，2.85mmol)、4-叔丁基苯代硼酸(177mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌41小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物12(408mg，0.76mmol，84％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.45-7.29(m，7H，H-6 & H-3 & H-9 &Ar-H x 4)，5.56(d，1H，J＝9.97Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.78-4.55(m，2H，N-CH2-OSEM x 1，H-11a)，4.04-3.60(m，9H，7-& 8-MeO和H-1 x 1 &O-CH2-SEM)，3.16(dd，1H，J＝10.35，15.52Hz，H-1 x 1)，1.38-1.21(多個(gè)單峰，非所有甲基等同，9H，t-Bu(CH3)3)，1.04-0.80(m，2H，CH2-SEM)，0.09-(-0.04)(多個(gè)單峰，非所有甲基等同，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-叔丁基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(13)向攪拌著的12(398mg，0.74mmol)在無水乙醇(7.5mL)與無水THF(15mL)混合物中的溶液在0、5和30小時(shí)分三批加入硼氫化鈉(531mg，14.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌44小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、水(25mL)和硅膠(7.5g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物13，為黃色玻璃狀固體(193mg，0.49mmol，67％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.89(d，1H，J＝3.94Hz，H11)，7.58-7.17(m，6H，H3，H6，4 x Ar-H)，6.84(s，1H，H9)，4.49-4.35(m，1H，H11a)，4.05-3.51(m，7H，7-& 8-MeO，H1)，3.49-3.33(m，1H，H1)，1.34(s，9H，Ar-tBu)。
實(shí)施例3(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氯苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(15)的合成 (a)2-(4-氯苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(14)向9(500mg，0.90mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(300mg，2.83mmol)、氯苯代硼酸(155.28mg，1.00mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌46小時(shí)，此時(shí)加入另外的氯苯代硼酸(155mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)。將溶液攪拌另外44小時(shí)，然后用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌。溶液經(jīng)硫酸鎂干燥，經(jīng)過快速柱色譜純化，使用含70％乙酸乙酯的己烷作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物14，為棕色的油(411mg，0.86mmol，95％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.46-7.22(m，7H，H-3 & H-6 & Ar-H x4 & H-9)，5.55(d，1H J＝9.92Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.77-4.61(m，2H，N-CH2-OSEM x 1 & H-11a)，4.01-3.87(m，7H，H-1 x 1和7-& 8-MeO)，3.87-3.63(m，2H，O-CH2-SEM)，3.13(ddd，1H，J＝2.09，10.56，16.15Hz，H-1x 1)，0.98(t，2H，J＝8.20Hz，CH2-SEM)，0.03(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氯苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(15)向攪拌著的14(386mg，0.75mmol)在無水乙醇(7.5mL)與無水THF(15mL)混合物中的溶液在0、5和12小時(shí)分三批加入硼氫化鈉(531mg，14mmol)，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、水(25mL)和硅膠(7.5g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物15，為黃色固體(97.5mg，0.26mmol，35％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.90(d，1H，J＝3.9Hz，H11)，7.53(s，1H，H6)，7.50(bs，1H，H3)，7.32(s，4H，4 x Ar-H)，6.84(s，1H H9)，4.44(ddd，1H，J＝4.1，5.3，11.4Hz，H11a)，3.97 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.58(ddd，1H，J＝1.98，11.6，16.3Hz，H1)，3.4(ddd，1H，J＝1.7，5.4，16.3Hz，H1)。
實(shí)施例4(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氟苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(17)的合成
(a)2-(4-氟苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(16)向9(500mg，0.90mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(308mg，2.91mmol)、4-氟苯代硼酸(139mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌93小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物16，為黃色油(441mg，0.88mmol，99％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.45-7.32(m，5H，H-6 & H-3 & Ar-H x2)，7.27(s，1H，H-9)，7.04(t，2H，Ar-H x 2)，5.56(d，1H，J＝9.80Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.72(d，1H，J＝9.49Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.65(dd，1H，J＝3.28，10.17Hz，H-11a)，4.04-3.88(m，7H，7-& 8-MeO和H-1 x 1)，3.88-3.64(m，2H，O-CH2-SEM)，3.14(ddd，1H，J＝2.26，10.57，16.25Hz，H-1 x 1)，0.99(t，2H，J＝8.33Hz，CH2-SEM)，0.03(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(4-氟苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(17)向攪拌著的16(429mg，0.861mmol)在無水乙醇(8.6mL)與無水THF(17.2mL)混合物中的溶液在0和5小時(shí)分兩批加入硼氫化鈉(201mg，5.3mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、水(25mL)和硅膠(8.6g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物17，為黃色玻璃狀固體(139mg，0.39mmol，46％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.90(d，1H，J＝3.9Hz，H11)，7.53(s，1H，H6)，7.45(s，1H，H3)，7.40-7.20(m，1H，1 x Ar-H)，7.10-6.90(m，3H，3 xAr-H)，6.84(s，1H，H9)，4.43(ddd，1H，J＝4.1，5.4，11.4Hz，H11a)，3.97 &3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.69-3.50(m，1H，H1)，3.39(ddd，1H，J＝1.5，5.3，16.3Hz，H1)。
實(shí)施例5(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(19)的合成 (a)2-(2-甲基苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(18)向9(500mg，0.90mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(300mg，2.83mmol)、2-甲基苯代硼酸(135mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌20小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物18，為黃色的油(439mg，0.89mmol，98％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.44-7.09(m，7H，H-6 & H-3 & H-9 &Ar-H x 4)，5.59(d，1H，J＝9.97Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.78-4.50(m，2H，N-CH2-OSEM x 1，H-11a)，4.06-3.60(m，9H，7-& 8-MeO，O-CH2-SEM，H-1x 1)，3.22(dd，1H，J＝10.23，16.31Hz，H-1 x 1)，2.48(bs，3H，Ar-2-Me)，1.06-0.79(m，2H，CH2-SEM)，0.03(bs，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(19)向攪拌著的18(429mg，0.87mmol)在無水乙醇(8.5mL)與無水THF(17.5mL)混合物中的溶液在0、5和12小時(shí)分三批加入硼氫化鈉(500mg，13.2mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、冰水(25mL)和硅膠(8.5g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物19，為黃色固體(74mg，0.21mmol，25％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.92(d，1H，J＝3.9Hz，H11)，7.55(s，1H，H6)，7.34-7.14(m，5H，H3，4 x Ar-H)，6.85(s，1H，H9)，4.39(dt，1H，J＝4.7，11.4Hz，H11a)，3.97 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.78-3.59(m，1H，H1)，3.47(dd，1H，J＝5.2，16.2Hz，H1)，2.49(s，3H，Ar-CH3)。
實(shí)施例6(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(21)的合成 (a)2-(4-乙基苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(20)向9(501mg，0.91mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(302mg，2.85mmol)、4-乙基苯代硼酸(149mg，0.993mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌41小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(220mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物20，為黃色固體(342mg，0.67mmol，74％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.46-7.15(m，7H，H-6 & H-3 & H-9 &Ar-H x 4)，5.57(d，1H，J＝9.88Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.72(d，1H，J＝9.95Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.65(dd，1H，J＝3.52，10.85Hz，H-11a)，4.03-3.88(m，7H，7-& 8-MeO和H-1 x 1)，3.88-3.64(m，2H，O-CH2-SEM)，3.16(dd，1H，J＝10.84，16.51Hz，H-1 x 1)，2.66(q，2H，J＝7.68Hz，Ar-CH2-Me x 2)，1.24(t，3H，J＝7.57Hz，ArCH2-CH3)，0.99(t，2H，J＝8.29Hz，CH2-SEM)，0.04(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(21)向攪拌著的20(429mg，0.87mmol)在無水乙醇(8.5mL)與無水THF(17.5mL)混合物中的溶液在0、5和12小時(shí)分三批加入硼氫化鈉(500mg，13.2mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、冰水(25mL)和硅膠(8.5g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物21，為黃色固體(74mg，0.21mmol，25％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.92(d，1H，J＝3.9Hz，H11)，7.55(s，1H，H6)，7.34-7.14(m，5H，H3，4 x Ar-H)，6.85(s，1H，H9)，4.39(dt，1H，J＝4.7，11.4Hz，H11a)，3.97 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.78-3.59(m，1H，H1)，3.47(dd，1H，J＝5.2，16.2Hz，H1)，2.49(s，3H，Ar-CH3)。
實(shí)施例7(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-噻吩)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(23)的合成 (a)2-(2-噻吩)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(22)向9(500mg，0.90mmol)的乙醇/水/苯(20/20/20mL)溶液加入碳酸鈉(305mg，2.88mmol)、2-噻吩代硼酸(127mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌164.5小時(shí)，在80℃下回流另外4小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物22，為黃色油(353mg，0.73mmol，80％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.39(s，1H，H-6)，7.32-7.17(m，3H，H-3，H-9，Ar-H x 1)，7.06-6.94(m，2H，Ar-H x 2)，5.56(d，1H，J＝9.97Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.71(d，1H，J＝9.91Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.64(dd，1H，J＝3.51，10.56Hz，H-11a)，4.02-3.88(m，7H，7-& 8-MeO，H-1x 1)，3.88-3.63(m，2H，O-CH2-SEM)，3.18(ddd，1H，J＝2.38，10.76，16.11Hz，H-1x 1)，0.99(t，2H，J＝8.24Hz，CH2-SEM)，0.04(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-噻吩)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(23)向攪拌著的22(333mg，0.69mmol)在無水乙醇(6.9mL)與無水THF(13.8mL)混合物中的溶液在0、7和14小時(shí)分三批加入硼氫化鈉(520mg，13.7mmol)，在室溫下攪拌30小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、水(25mL)和硅膠(6.9g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物23，為黃色固體(49.6mg，0.15mmol，21％收率)。
MS(ES)m/z(相對強(qiáng)度)389.2(22)，373.2(14)，341(8)，194.3(100)。
實(shí)施例8(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-呋喃)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(25)的合成 (a)2-(2-呋喃)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基-乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(24)向攪拌著的9(700mg，1.27mmol)、LiCl(161mg，3.8mmol)與2-(三丁基甲錫烷基)呋喃(0.526mL，615mg，1.65mmol)在無水THF(20mL)中的混合物中加入催化量的四(三苯膦)鈀(0)(5mol％，73mg，0.063mmol)，在回流下加熱2.5小時(shí)。將冷卻了的反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋，混合物用10％氫氧化銨水溶液(100mL)洗滌。將有機(jī)層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，進(jìn)一步經(jīng)過快速色譜純化，使用己烷∶EtOAc的75∶25混合物作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物24(484mg，1.03mmol，81％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.35(s，2H)，7.27(s，1H)，7.23(d，J1＝1.5Hz，1H)，6.37(dd，J1＝1.7Hz，J2＝3.2Hz，1H)，6.26(d，J1＝3.2Hz)，5.52(d，J＝10Hz，1H，SEM)，4.67(d，J＝10Hz，1H，SEM)，4.58(dd，J1＝3.3Hz，J2＝10.6Hz，1H，H11a)，3.91(s，3H，OMe)，3.90(s，3H，OMe)，3.86-3.74(m，2H，1SEM，1H1)，3.69-3.63(m，1H，1SEM)，3.05(ddd，J1＝2.0Hz，J2＝10.6Hz，J3＝15.8Hz，1H1)，0.95(m，2H，SEM)，0(s，9H，SEM)。
13C NMR(CDCl3)δ169.5，163，153.4，150.6，148.7，143.7，135，122.6，122.4，117.7，112.7，108.6，107.2，79.7，68.51，58.75，57.5，31.8，19.7，0。
IR 2952，1689，1640，1606，1518，1453，1430，1358，1276，1248，1209，1102，1069，1010，858，836，787，757。
MS ES+471.2(M+H，100％)，353.1(65％)。d＝+175°，c＝20mg/10mL，T＝18.6℃，CHCl3。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2-呋喃)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(25)在室溫下，向迅速攪拌著的24(400mg，0.85mmol)在無水EtOH(3mL)與無水THF(7mL)的混合物中的溶液一次性加入固體硼氫化鈉(NaBH4，95mg，2.51mmol)，攪拌4小時(shí)。加入更多的硼氫化鈉(60mg，1.58mmol)，將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物用冷水(50mL)稀釋，用EtOAc萃取(2×30mL)。將有機(jī)層用鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，與硅膠(1g)在EtOH(10mL)和水(5mL)中攪拌過夜。然后過濾混合物，借助旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去過量EtOH。其余混合物用EtOAc萃取(2×20mL)。將有機(jī)層用鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過快速柱色譜純化，用己烷∶EtOAc的60∶40混合物洗脫。合并純的級分，得到25，為黃色固體(80mg，0.246mmol，29％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.89(d，J＝4.0Hz，1H，H-11)，7.54(s，1H)，7.42(d，J＝1.4Hz，1H)，7.38(s，1H)，6.84(s，1H)6.44(dd，J1＝1.7Hz，J2＝3.2Hz，1H)，6.28(d，J＝3.2Hz，1H)，4.41(m，1H，H11a)，3.98(s，3H，MeO)，3.96(s，3H，MeO)，3.50(m，1H1)，3.35(ddd，J1＝1.6Hz，J2＝5.2Hz，J2＝16.2Hz，1H，1H1)。
13C NMR(CDCl3)δ163.8，162.8，153.4，150.7，149.3，143.9，141.8，124.3，120.5，115.8，113.1，112.9，111.3，108.2，57.7，57.6，55.2，36。
IR 3117，2936，1626，1601，1559，1508，1450，1426，1377，1344，1265，1215，1102，1072，1039，1007，956，914，882，778，730。
MS ES+325.1(M+H，100％)。d＝+457°，c＝15mg/10mL，T＝20℃.CHCl3。
實(shí)施例9(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2，6-二甲基苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(27)的合成 (a)2-(2，6-二甲基苯)-7，8-二甲氧基-10-(2-三甲代甲硅烷基乙氧基甲基)-1，11a-二氫-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(26)向9(500mg，0.90mmol)的乙醇/水/苯(2/2/6mL)溶液中加入碳酸鈉(300mg，2.85mmol)、2，6-二甲基苯代硼酸(149mg，0.99mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(30mg)，在室溫下攪拌306.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。粗產(chǎn)物經(jīng)過自動(dòng)快速柱色譜純化，使用含100-50％己烷的乙酸乙酯梯度系統(tǒng)作為洗脫劑，得到純產(chǎn)物26(218mg，0.43mmol，47％收率)。
1H(250MHz，CDCl3)NMRδ7.42(s，1H，H-6)，7.28(s，1H，H-9)，7.22-7.02(m，3H，Ar-H x 3)，6.82(bs，1H，H-3)，5.62(d，1H，J＝9.85Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.74(d，1H，J＝9.72Hz，N-CH2-OSEM x 1)，4.64(dd，1H，J＝3.08，10.51Hz，H-11a)，3.96 & 3.94(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.89-3.64(m，3H，O-CH2-SEM，H-1 x 1)，3.02(ddd，1H，J＝2.39，10.58，16.89Hz，H-1x 1)，2.32(s，6H，Ar-2，6-二Me x 6)，1.00(t，2H，J＝8.27Hz，CH2-SEM)，0.03(s，9H，SEM-Si(CH3)3)。
(b)(11aS)-1，11a-二氫-7，8-二甲氧基-2-(2，4-二甲基-苯)-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮雜-5-酮(27)向攪拌著的26(208mg，0.41mmol)在無水乙醇(4.1mL)與無水THF(8.2mL)混合物中的溶液在0和24小時(shí)分兩批加入固體硼氫化鈉(276mg，7.3mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌47小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。在真空中蒸發(fā)有機(jī)層。將粗產(chǎn)物用乙醇(50mL)、冰水(25mL)和硅膠(8.2g)處理，在室溫下攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾，在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，用快速柱色譜純化，使用含70-50％己烷的乙酸乙酯作為洗脫劑。合并純的級分，在真空中蒸發(fā)，得到純產(chǎn)物27，為黃色固體(43.3mg，0.12mmol，29％收率)。
1H(250MHZ，CDCL3)NMRδ7.92(d，1H，J＝3.9Hz，H11)，7.55(s，1H，H6)，7.34-7.14(m，5H，H3，4 x Ar-H)，6.85(s，1H，H9)，4.39(dt，1H，J＝4.7，11.4Hz，H11a)，3.97 & 3.95(2s，6H，7-& 8-MeO)，3.78-3.59(m，1H，H1)，3.47(dd，1H，J＝5.2，16.2Hz，H1)，2.49(s，6H，Ar-CH3)。
生物學(xué)測定法體外-克隆生成細(xì)胞系為了測定所合成化合物的活性，在無菌條件下將皮下連續(xù)傳代生長于胸腺發(fā)育不全裸鼠(Naval Medical Research Institute，USA nu/nu株)中的實(shí)體人腫瘤異種移植物摘除，機(jī)械分解，隨后與酶合劑在37℃RPMI 1640培養(yǎng)基(Life Technologies)中孵育30分鐘，所述酶合劑由膠原酶(41U/ml，Sigma)、DNA酶I(125U/ml，Roche)、透明質(zhì)酸酶(1000U/ml，Sigma)和分散酶II(1.0U/ml)組成。使細(xì)胞通過200μm和50μm篩目大小的篩子，用無菌PBS緩沖液洗滌兩次。利用錐蟲藍(lán)排除法在Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)中測定活細(xì)胞百分比。所生成的細(xì)胞如下乳腺M(fèi)ACL MCF7腎9442肺629L黑素瘤MEXF 462NL克隆生成測定法以24孔格式、按照改進(jìn)的兩層瓊脂測定法進(jìn)行，如Hamburger，A.W.和Salmon，S.E.，Science，197，461-643(1977)所介紹。底層由0.2mL/孔Iscove′s改性Dulbecco培養(yǎng)基(補(bǔ)充有20％胎牛血清和1％慶大霉素)和0.75％瓊脂組成。向補(bǔ)充有0.4％瓊脂的0.2mL相同培養(yǎng)基中加入4×104至8×104個(gè)細(xì)胞，平板接種在底層上的24多孔平皿。通過連續(xù)暴露(藥物覆蓋)在0.2mL培養(yǎng)基中，施加供試化合物。每一平皿包括六個(gè)含有載體的對照孔，以及藥物處置組，6種濃度一式三份。將培養(yǎng)物在37℃和7.5％CO2潮濕氣氛中孵育8-20天，利用倒置顯微鏡密切監(jiān)測集落的生長。在此期間，體外腫瘤生長引起集落形成，直徑＞50μm。在最大集落形成之時(shí)，利用自動(dòng)圖象分析系統(tǒng)(OMNICOM FAS IV，Biosys GmbH)進(jìn)行計(jì)數(shù)。在評價(jià)前24小時(shí)，將活的集落用2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基氯化四唑鎓的無菌水溶液(1mg/ml，100μl/孔)染色。
將化合物濃度對細(xì)胞活力作圖，測定供試化合物的IC50值。
測試了下列化合物(Cooper.N.等人，Chem.Commun.，16，1764-1765(2002)和WO 00/12508)作為對比
結(jié)果如下表所示。
表1-乳腺M(fèi)ACL MCF7
表2-腎RXF 944L
表3-肺629L
表4-黑素瘤MEXF 462NL
NCI體外細(xì)胞毒性研究國家癌癥研究所(NCI)，Bethesda，Maryland，USA具有體外細(xì)胞毒性篩選系統(tǒng)，由大約60種人腫瘤細(xì)胞系組成，測試最少五種濃度的化合物對它們的作用，每種濃度相差10倍。采用48小時(shí)連續(xù)暴露方案，其中利用SRB蛋白測定法估計(jì)細(xì)胞活力或生長。
方法針對大約60種人腫瘤細(xì)胞系評價(jià)供試化合物。Monks和合作者詳細(xì)描述了NCI篩選程序(Monks，A等人，Journal of the National CancerInstitute，1991，83，757)。簡而言之，根據(jù)特定細(xì)胞類型和預(yù)計(jì)靶細(xì)胞密度(基于細(xì)胞生長特征為5000-40,000細(xì)胞每孔)稀釋細(xì)胞懸液，用吸移管(100μL)加入到96孔微量滴定平板中。使細(xì)胞在37℃下預(yù)孵育24小時(shí)，以供穩(wěn)定。在零時(shí)間以100μL等分試樣向各孔加入兩倍于預(yù)期測試濃度的稀釋液。以五種10倍稀釋比例(10-4、10-5、10-6、10-7和10-8μM)評價(jià)供試化合物。將供試化合物在5％CO2氣氛和100％濕度下孵育48小時(shí)。然后利用磺基羅丹明B測定法測定細(xì)胞。利用平板讀數(shù)器讀取光密度，利用微型計(jì)算機(jī)將讀數(shù)加工成GI50值(以摩爾計(jì))，這是限制細(xì)胞生長至50％所需的劑量。
這些研究的結(jié)果可總結(jié)如下，將跨越全部所測試細(xì)胞系的log GI50取平均，推導(dǎo)MG_MID值，該值顯示化合物25(MG_MID＝-7.18)較化合物23(MG_MID＝-6.34)更有效。
供初步體內(nèi)測試的NCI中空纖維測定法NCI的治療學(xué)發(fā)展計(jì)劃的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)分支已經(jīng)采取一種初步體內(nèi)篩選工具來評估經(jīng)過大規(guī)模體外細(xì)胞篩選的化合物的潛在抗癌活性。就這些測定法而言，將人腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)在聚偏氟乙烯(PVDF)中空纖維中，將每種細(xì)胞系樣品植入小鼠的兩個(gè)生理區(qū)室(腹膜內(nèi)和皮下)。每只供試小鼠接受總計(jì)6支纖維(3支腹膜內(nèi)，3支皮下)，代表了3種不同的癌細(xì)胞系。將這些小鼠用各為2種測試劑量的潛在抗癌化合物借助腹膜內(nèi)途徑處理，采用QD x 4處理方案。載體對照由6只僅接受化合物稀釋劑的小鼠組成。在最后處置天后的當(dāng)天收集纖維培養(yǎng)物。為了評估抗癌效果，利用formazyn染劑(MTT)轉(zhuǎn)化測定法測定每一細(xì)胞系的活細(xì)胞質(zhì)量。由此，使用化合物處置樣品的平均光密度除以載體對照的平均光密度，可以計(jì)算T/C％。另外，可以測定每份樣品的細(xì)胞質(zhì)量凈增長，因?yàn)樵谥踩胄∈螽?dāng)天評估了纖維培養(yǎng)物樣品的活細(xì)胞質(zhì)量。因而，可以評估供試化合物的抑制細(xì)胞生長能力和殺細(xì)胞能力。
一般而言，針對最少12種人癌細(xì)胞系測試每種化合物。這代表總計(jì)4項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槊宽?xiàng)實(shí)驗(yàn)含有3種細(xì)胞系。數(shù)據(jù)以2種化合物劑量分別對每一細(xì)胞系的T/C％報(bào)告，對腹膜內(nèi)和皮下樣品單獨(dú)計(jì)算數(shù)值。
基于若干中空纖維測定標(biāo)準(zhǔn)選擇化合物，以供進(jìn)一步在標(biāo)準(zhǔn)皮下異種移植模型中進(jìn)行體內(nèi)測試。這些包括(1)在48種可能的測試組合(12種細(xì)胞系×2個(gè)部位×2種化合物劑量)中有10種的T/C％為50或50以下；(2)在24種可能的組合中最少有4種有一定距離的活性(activity ata distance)(腹膜內(nèi)藥物/皮下培養(yǎng)物)；和/或(3)任一植入部位的凈細(xì)胞殺死率為1種或1種以上細(xì)胞系。為了簡化評價(jià)，采取了一種可迅速評價(jià)給定化合物活性的點(diǎn)系統(tǒng)(point system)。就此而言，對導(dǎo)致活細(xì)胞質(zhì)量減少50％或更多的每種化合物劑量賦值為2。單獨(dú)對腹膜內(nèi)和皮下樣品評分，以便可以評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(1)和(2)。安排聯(lián)合IP+SC評分為20、SC評分為8或者凈細(xì)胞殺死率為一種或多種細(xì)胞系的化合物以供異種移植測試。這種對比表明，如果采用中空纖維測定法作為初始體內(nèi)篩選工具，則錯(cuò)失活性化合物的可能性非常低。除了這些標(biāo)準(zhǔn)以外，其他因素(例如獨(dú)特的結(jié)構(gòu)、作用機(jī)理)也可以導(dǎo)致化合物被安排進(jìn)行異種移植測試，而無需化合物滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。
在這些測定法的變體中測試了某些本發(fā)明化合物，以評估它們對腎細(xì)胞系和黑素瘤細(xì)胞系的活性。在黑素瘤測定法中，僅使用6種細(xì)胞系，因此安排聯(lián)合IP+SC評分為10或者SC評分為4的化合物供異種移植測試。在腎測定法中，僅使用3種細(xì)胞系，因此安排聯(lián)合IP+SC評分為5或者SC評分為2的化合物以供異種移植測試。
該測定法的結(jié)果列在下表5和6中，包括一些公開在Cooper.N.等人，Chem.Commun.，16，1764-1765(2002)和WO 00/12508中的化合物的結(jié)果表5-腎
表6-黑素瘤
基于這些結(jié)果，在NCI程序的下一階段(異種移植)選擇化合物13和27對腎癌進(jìn)行測試，而選擇化合物12和21對黑素瘤進(jìn)行測試。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物及其鹽、溶劑合物、化學(xué)保護(hù)形式和前體藥物， 其中R6、R7和R9獨(dú)立地選自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝基、Me3Sn和鹵素；其中R和R’獨(dú)立地選自可選被取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基和C5-20芳基；R8選自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NHRR’、硝基、Me3Sn和鹵素，或者該化合物是二聚物，每一單體是式(I)，其中每一單體的R8基團(tuán)一起構(gòu)成連接單體的式-X-R”-X-的二聚物橋，其中R”是C3-12亞烷基，該鏈可以被一個(gè)或多個(gè)雜原子、例如O、S、NH和/或芳族環(huán)、例如苯或吡啶中斷，且每一X獨(dú)立地選自O(shè)、S或NH；或者R6至R9中的任一對相鄰基團(tuán)一起構(gòu)成基團(tuán)-O-(CH2)p-O-，其中p是1或2；且R2選自(i)可選被取代的萘基；(ii)可選被取代的噻吩基或呋喃基；和(iii)被下列基團(tuán)取代的苯基(a)一個(gè)或多個(gè)氯代或氟代基團(tuán)；(b)乙基或丙基；(c)4-叔丁基；(d)2-甲基；或(e)2-與6-位的兩個(gè)甲基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自(i)可選被取代的萘基；(ii)可選被取代的噻吩基或呋喃基；和(iii)被下列基團(tuán)取代的苯基(a)一個(gè)或多個(gè)氯代或氟代基團(tuán)；(b)乙基或丙基；(c)4-叔丁基；或(d)2-甲基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R2選自(i)可選被取代的萘基；(ii)可選被取代的噻吩基；和(iii)被下列基團(tuán)取代的苯基(a)一個(gè)或多個(gè)氯代或氟代基團(tuán)；(b)乙基或丙基；(c)4-叔丁基；或(d)2-甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任意一項(xiàng)的化合物，其中R9是H。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項(xiàng)的化合物，其中R6是H。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)的化合物，其中R7和R8(當(dāng)該化合物不是二聚物時(shí))選自O(shè)Me和OCH2Ph。
7.用在治療方法中的根據(jù)權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的化合物。
8.藥物組合物，含有權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
9.權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的化合物在制備用于治療增殖性疾病的藥物中的用途。
10.治療增殖性疾病的方法，包括向需要治療的對象施用治療有效量的權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)化合物及其鹽、溶劑合物、化學(xué)保護(hù)形式和前體藥物，其中R
文檔編號A61P35/00GK1735616SQ200380108373
公開日2006年2月15日 申請日期2003年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月14日
發(fā)明者D·E·瑟斯頓, P·W·霍華德 申請人:斯皮羅根有限公司