專利名稱：在腫瘤治療中用來作為藥物活性成分的脯氨酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及脯氨酸衍生物，尤其是順式-羥基-脯氨酸衍生物(CHP-衍生物)和它們的鹽，含有該衍生物的藥劑，以及該藥劑用于治療腫瘤的用途。本發(fā)明還涉及制造所述化合物和藥劑的方法。
術(shù)語腫瘤或癌癥是指綜合性的疾病概念，在該疾病中細胞的生長和分化失去了控制。癌癥如果不進行治療的話，通常會導(dǎo)致死亡。每年在世界范圍內(nèi)會出現(xiàn)大約七百萬例新的癌癥病例，并且還呈現(xiàn)出上升的趨勢。2000年，在工業(yè)化國家中癌癥是死亡原因第1位。
在過去的30年和40年中，對小鼠測試了不同的氨基酸對腫瘤的影響。其中使用的氨基酸之一是脯氨酸和羥基脯氨酸。隨后的試驗表明，這些小鼠的試驗結(jié)果并不能用于人類癌癥疾病。
根據(jù)很多有希望的初始試驗，在多次的努力中，提出了很多基于脯氨酸和羥基脯氨酸的藥劑，其可以用于癌癥的預(yù)防和治療。例如在DE3538619公開文本中描述了羥基脯氨酸的順式異構(gòu)體在治療癌癥和相關(guān)的腫瘤中的用途。在EP02223850中公開了脯氨酸和羥基脯氨酸的不同的烷基衍生物及其在癌癥疾病的治療中作為藥物的用途。作為烷基衍生物的例子，在EP02223850中討論了不同的N-甲基-衍生物。
WO97/33578描述了含有順式-羥基-脯氨酸和N-甲基-順式-羥基脯氨酸組合的藥物，用來作為尤其是用于癌癥治療的治療活性物質(zhì)，根據(jù)WO97/33578證明在腫瘤細胞的細胞培養(yǎng)中具有抗癌效果，這歸因于細胞增殖的顯著的抑制作用。
該公開的藥劑必須以較高的劑量使用，以獲得其效果。所述結(jié)果的再現(xiàn)是非常困難的。
因此，本發(fā)明的任務(wù)是提供一種藥劑，其可以簡單、安全和有效地使用，從而阻止或抑制癌細胞的增殖、滲潤、侵入、血管生成和/或轉(zhuǎn)移。
本發(fā)明通過提供通式(I)的化合物和/或其鹽而實現(xiàn)了該任務(wù)，
式中，R1是羥基、芳基或氨基酸基團；R2是氫、烷基(C1-C4)、取代的烷基(C1-C4)基團、二烷基(C1-C4)、環(huán)己基、苯基或二苯基基團；R3是烷基(C2-C5)基團；其條件是，當(dāng)R1是羥基時，R2不是甲基。
令人驚訝的是，上述化合物，即羥基脯氨酸(CHP)-衍生物，可以以較高的劑量使用，例如大于0.1或0.2g/kg體重，也基本沒有副作用。令人驚訝的是，該新的衍生物，尤其是N-二甲基酯和苯基-氨基-羰基-酯以及其它要求的化合物可以比公知的抗增殖劑更加有效地使用。
本發(fā)明的藥劑可以例如以5-15g/天的范圍靜脈內(nèi)給藥，以50-150g/天的范圍口服給藥。公知的脯氨酸衍生物特別適合用于癌癥，即用于來自上皮的腫瘤，而根據(jù)本發(fā)明的藥劑可以在多種疾病中使用，這些疾病基本上通過細胞的增殖或轉(zhuǎn)移而被被確定。
根據(jù)本發(fā)明的化合物作為雜交分子使用或在組合藥劑中使用時具有特別的優(yōu)點。該雜交分子例如可以是如下的結(jié)構(gòu)其含有連接在氧代鉑上或連接在氧代鉑和5-氟尿嘧啶(5-FU)上的本發(fā)明的化合物。該雜交分子可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的蓋倫氏方法制備，使得其可以用作前藥。
然而，將細胞內(nèi)含物用于細胞狀活性物質(zhì)內(nèi)含極性化合物對于單一的、尤其是長半衰期的物質(zhì)是非常有效的，但其很難轉(zhuǎn)用在一般的用途中。其中可選的是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的前藥-概念。根據(jù)該定義，前藥含有非活化前體代謝物形式的活性物質(zhì)。人們可以在部分多組分載體-前藥-體系和生物轉(zhuǎn)化體系之間區(qū)分。后者含有需要化學(xué)的或生物代謝形式的活性成分。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員，這樣的前藥體系是公知的。載體-前藥-體系含有作為這樣的連接在掩蔽基團上的活性物質(zhì)，所述掩蔽基團可以通過盡可能簡單的可以控制的機構(gòu)而分裂。本發(fā)明的在本發(fā)明化合物中的掩蔽基團的功能是中和用于改善的細胞吸收的負荷。如果使用具有掩蔽基團的本發(fā)明化合物，則還可以影響其他的藥物參數(shù)，例如生物利用度、組織分布、藥物動力學(xué)以及對于非特定磷酸鹽的穩(wěn)定性。活性物質(zhì)的緩釋還可以帶來長期效果。此外可以帶來改善的代謝產(chǎn)物，其中獲得高的活性物質(zhì)效率或生物特定性。在前藥配方中，掩蔽基團或連接基團，該掩蔽基團連接在活性物質(zhì)上，使得前藥具有足夠的親水性，以能夠溶解在血清中，具有足夠的化合物和酶穩(wěn)定性，以適用于擴散控制的膜傳送。此外，活性物質(zhì)可以在合適的時間中化學(xué)或酶引誘釋放，且顯而易見的是，釋放的輔助成分沒有毒性。然而，在本發(fā)明中，化合物還可以沒有修飾或連接并不將修飾物作為前藥，其中該前藥必須首先通過酶或生物的作用在細胞中以提供上述的化合物。
優(yōu)選的是氨基酸，即天然或人造的氨基酸，例如在Biochemie；Berg，Tymoczko，Stryer(2003)或其它的生物標(biāo)準(zhǔn)文獻中公開的，在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方式中，R1是羥基-、苯基氨基-或氨基酸-基團，R2是氫-、甲基-、二甲基-、環(huán)己基-或二苯基甲基-基團；R3是乙基-、異丁基-和/或氫原子-基團。
在一個特別優(yōu)選的實施方式中，化合物的苯基氨基基團包括修飾的氨基基團，尤其是苯基氨基-羰基氧基基團。特別優(yōu)選的是，化合物選自4-羥基脯氨酸乙酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸乙酯碘化物、4-羥基脯氨酸異丁酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸異丁酯碘化物、4-羥基-1-環(huán)己基脯氨酸-異丁酯、4-羥基-1-二苯基甲基脯氨酸-異丁酯-氫溴化物、4-羥基-1-甲基脯氨酸、4-羥基-1-甲基脯氨酸乙酯、4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯、1-甲基-4-苯基氨基-羰基-氧基-脯氨酸和/或1-甲基-4-苯基氨基-羰基氧基-脯氨酸異丁酯。
本發(fā)明還涉及一種藥劑，其含有本發(fā)明的藥劑，任選具有常規(guī)的輔助物質(zhì)，優(yōu)選藥物上可接受的載體、輔料和/或賦形劑。
本發(fā)明的化合物還可以以鹽的形式使用，所述的鹽是由無機或有機酸衍生得到的。這些鹽例如是乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、Pektinat、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、十一酸鹽，優(yōu)選的化合物的鹽是碘化物、溴化物和/或氯化物。
本發(fā)明中的藥劑是在藥物范圍內(nèi)的任何藥劑，其可以用于患者的預(yù)防、診斷、治療、過程控制或術(shù)后處理，所述的患者尤其與腫瘤細胞或致癌物接觸，使得至少暫時性地確保整體狀況或部分生物體狀況病原體的改變。例如，本發(fā)明的藥劑可以是疫苗、免疫治療劑或免疫預(yù)防劑。本發(fā)明的藥劑可以含有本發(fā)明的化合物或者本發(fā)明的化合物和/或可接受的鹽或這些成分。因此，可以是例如諸如磷酸等無機酸的鹽或者有機酸的鹽。此外，還可以是，所述的鹽不含有羧基并且衍生于無機堿，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵；或者衍生于有機堿，例如異丙胺、三甲胺、2-乙氨基乙醇、組氨酸等。液體載體的例子是無菌水溶液，其不含有其它的材料或活性成分，例如是水或如下物質(zhì)緩沖液，例如具有生理性pH值的磷酸鈉、生理鹽水、或上述的兩者，例如磷酸鹽緩沖的氯化鈉溶液。此外，液體載體可以不僅僅包含緩沖鹽，例如氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖、丙二醇、聚乙二醇等。
藥劑的液體成分還可以含有不包括水的液相。例如，這樣的另外的液體是甘油、植物油、有機酯或水-油乳液。基于全部的藥物組合物，該藥物成分或藥劑中通常含有至少0.1重量％本發(fā)明的化合物。
優(yōu)選將4-羥基脯氨酸乙酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸乙酯碘化物、4-羥基脯氨酸異丁酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸異丁酯碘化物、4-羥基-1-環(huán)己基脯氨酸-異丁酯、4-羥基-1-二苯基甲基脯氨酸-異丁酯氫溴化物、4-羥基-1-甲基脯氨酸、4-羥基-1-甲基脯氨酸乙酯、4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯、1-甲基-4-苯基氨基-羰基-氧基-脯氨酸、1-甲基-4-苯基氨基-羰基氧基-脯氨酸異丁酯、(R)-(+)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇和/或(S)-(-)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇用于與細胞生長、分化和/或分裂相關(guān)的疾病、尤其是腫瘤的診斷、預(yù)防、過程控制、治療和/或術(shù)后處理。用于將本發(fā)明藥劑給藥的劑量或劑量范圍是足夠大的，從而獲得期望的預(yù)防或治療效果。因此，劑量的選擇不應(yīng)出現(xiàn)不期望的副作用。通常，劑量根據(jù)患者的年齡、體質(zhì)、性別而改變，并且顯而易見的是，其還取決于疾病的程度。個體的劑量的確定不僅取決于原發(fā)的疾病，還取決于出現(xiàn)的其它癥狀。確切的劑量可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)公知的途徑和方法確定，例如通過測定定腫瘤大小、依賴于劑量的白細胞數(shù)量或藥物載體等來確定。因此，劑量可以根據(jù)患者單獨確定。例如可以是患者耐受的藥劑劑量，其在血漿中的范圍或在單獨器官中的范圍為0.1-100000μm，優(yōu)選為1-1000μm。此外，劑量還可以取決于患者身體的重量。在這種情況下，藥劑的常規(guī)劑量例如為每kg體重大于0.1g，優(yōu)選為0.1-5000g/kg。此外還可以是，劑量并不取決于患者的整體，而是根據(jù)單個器官而確定。例如可以是，在將本發(fā)明的藥劑例如在生物聚合物中用于單個的患者時，可以借助于手術(shù)將其填充在適宜器官的附近。本領(lǐng)域技術(shù)人員都知道，有很多生物聚合物可以以期望的工藝和方法將分子釋放出來。每ml凝膠組合物，這樣的凝膠例如可以含有1-1000g本發(fā)明的化合物或藥劑，優(yōu)選為5-500g/ml，特別優(yōu)選為10-100g/ml。在這樣的情況中，治療劑作為固體、凝膠狀或液體狀的組合物給藥。
在使用本發(fā)明的化合物時，除了上述濃度以外，在一個優(yōu)選實施方式中，該化合物還可以以每24小時0.05-500g/kg體重的總量使用，優(yōu)選為1-10g/kg體重。其中優(yōu)選使用治療量，其能夠避免或者改善癥狀的紊亂或相應(yīng)的病理學(xué)生理狀況。給藥量應(yīng)足以能抑制或阻止腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移、侵入、滲透和/或血管生成。本發(fā)明化合物對于腫瘤的效果，就其預(yù)防或治療潛力而言，例如表現(xiàn)為對生長的抑制等。其中，治療的效果例如還可以如下通過使用本發(fā)明的化合物，可以良好地用作具有期望副作用的適宜抗腫瘤藥物或通過降低劑量以減少這些藥物副作用的數(shù)量。顯而易見的是，治療效果還包括對腫瘤的直接的效果，也就是說，本發(fā)明化合物的效果并不局限于消除腫瘤，還包括在預(yù)防和治療中各種有利的效果。顯而易見的是，如上所述，劑量取決于受藥人年齡、健康狀況和體重、疾病的程度、必要的同時進行的治療處理方式、治療的頻率和期望效果的種類和副作用。0.05-500g/kg體重的每日劑量可以一次或多次給藥，以獲得期望的結(jié)果。在腫瘤疾病的預(yù)防和治療中，可以使用該每日劑量水平。通常，尤其是該藥劑可以每日進行約1-15次給藥或可以替代地或額外地進行連續(xù)輸液。這樣的給藥可以用作慢性疾病或急癥的治療。與載體物質(zhì)聯(lián)用以形成一次劑量形式的有效物質(zhì)的量，可以根據(jù)要治療的對象和給藥的方式改變，這是不言而喻的。優(yōu)選的是，將目標(biāo)劑量分成2-5次給藥，其中，每一次給藥時，將具有0.05-5g/kg體重的有效物質(zhì)含量的片劑給藥1-2片。不言而喻，有效物質(zhì)的量還可以提高，例如最高為500g/kg的濃度。例如，片劑還可以緩釋，這樣每日給藥的次數(shù)減小至1-3次。緩釋片劑的有效物質(zhì)含量可以是3-300g。當(dāng)有效物質(zhì)-如上所述-例如通過注射給藥時，優(yōu)選每日進行1-8次，通過持續(xù)輸液給藥使受藥者與本發(fā)明化合物接觸時，優(yōu)選每日的量為4-400g。優(yōu)選的每日總量在人藥和獸藥中均是優(yōu)選的。必要時也可以偏離上述的劑量，根據(jù)治療對象的種類和體重、疾病的種類和程度、藥劑給藥的方式和在給藥中的時間或間隔確定。在一些情況下可以優(yōu)選的是，將藥劑以少于上述的量與生物體接觸，在另外的情況下，上述有效物質(zhì)的量必須增加。所需優(yōu)選的劑量的確定以及優(yōu)選物質(zhì)的給藥方式可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本領(lǐng)域的常識容易獲得。在本發(fā)明另一個特別優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的化合物或藥劑以1-80，尤其是1-30g/kg體重的一次劑量給藥。與每日的總量同樣，每次給藥的一次劑量也可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)其專業(yè)知識加以改變。本發(fā)明使用的化合物，可以以上述單獨的濃度和配方與飼料或飼料配方或飲用水混合用于動物的治療中。在給藥時，一次劑量所含有的有效物質(zhì)的量相應(yīng)為1天、半天、三分之一天、四分之一天的劑量。因此，劑量單元優(yōu)選含有1、2、3或4或更多的一次劑量或0.5、0.3或0.25個單獨劑量。優(yōu)選本發(fā)明化合物的每日的劑量分為2-10次給藥，優(yōu)選為2-7次，特別優(yōu)選為3-5次給藥。顯而易見的是，本發(fā)明的藥劑也可以連續(xù)輸液。
在本發(fā)明一個特別優(yōu)選的實施方式中，在本發(fā)明化合物每一次的口服給藥中，使用1-2個片劑。根據(jù)本發(fā)明的片劑可以具有對本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的涂層和外皮，或可以按如下組成，使得僅在受體優(yōu)選的特定部分釋放活性物質(zhì)。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的化合物可以與至少一種其它公知的藥劑一起使用。即，本發(fā)明的化合物在進行預(yù)防或治療時，可以與公知的藥劑結(jié)合使用。該結(jié)合使用可以是一同的，例如在一個藥物配方中給藥，或者也可以是分開的，例如由片劑、注射或其它的治療方式組合的方式，在同一個時間或在不同的時間給藥，其目的是獲得期望的預(yù)防或治療效果。這些公知的藥劑，可以是能增強本發(fā)明化合物的效果的藥劑，包括抗細菌劑或抗病毒劑，例如芐基嘧啶、嘧啶、磺胺、利福平、妥布霉素、夫西地酸、克林霉素、氯霉素和紅霉素。本發(fā)明另外的實施方式涉及一種組合物，其中包括兩種藥劑，至少一種選自上述的抗細菌劑或抗病毒劑或藥劑類。還需要指出的是，本發(fā)明的化合物和組合物還可以與免疫調(diào)節(jié)處理和治療相結(jié)合使用。
通常，本發(fā)明化合物彼此之間和/或與其他的治療或增效劑(例如轉(zhuǎn)運抑制劑、代謝抑制劑、物質(zhì)轉(zhuǎn)化抑制劑、用于腎排泄的抑制劑或激活劑、或葡糖化劑，例如丙磺舒、醋氨酚、阿司匹林、氯羥安定、甲氰咪呱、雷尼替丁、Colifibrat、消炎痛、酮洛芬、萘普生等)存在最佳的比例。優(yōu)選的比例為如下定義的比例在具有其它治療劑的本發(fā)明化合物的情況下，治療的總體效果大于單獨治療劑的效果之和。通常，優(yōu)選的比例是，試劑以10∶1-1∶10、20∶1-1∶20、100∶1-1∶100、500∶1-1∶500的比例存在。有時，為了提高一種或多種其它藥劑的效果，極少量的治療劑就足夠了。另外，本發(fā)明的化合物在聯(lián)合使用時特別有益，使腫瘤的耐藥性的危險得到降低。不言而喻，本發(fā)明的化合物可以與其它公知的抗癌劑一起使用。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說這樣的藥劑是公知的。因此，本發(fā)明的化合物可以與所有常規(guī)的藥劑，尤其是其它的可以與癌癥藥劑一起使用的藥劑一起使用，或者作為單獨的藥劑，或者作為藥劑的組合，可以單獨給藥或聯(lián)合給藥。
優(yōu)選的是，本發(fā)明的化合物與其它公知的藥劑按照約0.005-1的比例給藥。優(yōu)選的是，本發(fā)明的化合物與特定的腫瘤抑制劑以0.05-0.5份約1份公知的藥劑一起給藥。這種情況也同樣適合于抗菌劑。藥物組合物可以以材料或作為水溶液存在，與其它的材料例如防腐劑、緩沖物質(zhì)、用于調(diào)整溶液的滲透壓的介質(zhì)形成溶液。本發(fā)明還涉及試劑盒，其含有本發(fā)明的化合物，任選地還有用于組合試劑盒內(nèi)含物的信息。用于組合試劑盒內(nèi)含物的信息涉及試劑盒用于疾病，尤其是腫瘤疾病的預(yù)防和/或治療的應(yīng)用。該信息例如還可以涉及治療的流程，即，涉及具體的注射或給藥流程、給藥的劑量等。
優(yōu)選的是，藥劑還含有一種或多種選自如下物質(zhì)的藥劑抗病毒劑、抗真菌劑或抗細菌劑和/或免疫刺激劑或化療劑。對于抗病毒劑來說，優(yōu)選是蛋白酶抑制劑和/或逆轉(zhuǎn)-轉(zhuǎn)錄抑制劑。對于免疫調(diào)節(jié)劑來說，優(yōu)選為Bropirimin、抗人體α-干擾素抗體、IL-2、GM-CSF、干擾素、二乙基二巰基氨基甲酸酯、腫瘤壞死因子、納曲酮、Tuscarasol和/或rEPO。對于化療劑來說，優(yōu)選alitretinoin、阿地白介素(IL-2)、六甲蜜胺、全反式-視黃酸(Tretinoin)、氨基苯乙哌啶酮、阿那格雷、阿那曲唑、門冬酰胺酶(E.coli)、硫唑嘌呤、比卡魯胺、博來霉素、Busulfan、卡培他濱、卡鉑、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、順鉑、克拉屈濱(2-CDA)、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、達卡巴嗪、放線菌素D、柔紅霉素(Daunomycin)、柔紅霉素、脂質(zhì)體、地塞米松、多西他賽、多柔比星、多柔比星、脂質(zhì)體、表柔比星、雌莫司汀磷酸鹽、依托泊苷(VP-16-213)、依西美坦、氮尿苷、5-氟尿嘧啶、氟達拉濱、氟甲睪酮、氟他胺、吉西他濱、Gemtuzmab、戈舍瑞林乙酸鹽、羥基脲、伊達比星、異環(huán)磷酰胺、Imatmib Mesylate、伊立替康、α-干擾素、來曲唑、Leuprolide乙酸鹽、左旋咪唑HCl、洛莫司汀、甲地孕酮乙酸鹽、美法侖(L-苯丙氨酸莫司汀)、6-巰嘌呤、甲氨蝶呤、甲氧沙林(8-MOP)、絲裂霉素-C、米托坦、米托蒽醌、尼魯米特、氮莫司汀(氮芥鹽酸鹽)、奧曲肽、紫杉醇、培門冬酶、噴司他丁(2′去氧助間型霉素)、普卡霉素、卟吩姆、潑尼松，丙卡巴肼、Rituximab、Streptozotocin、他莫昔芬、替尼泊苷(VM-26)、6-硫鳥嘌呤、沙利度胺、塞替派、Topotecan、托瑞米芬、Trastuzumab、三甲曲沙、長春滅瘟堿、長春花新堿和/或長春瑞濱。本發(fā)明的化合物還可以與免疫調(diào)節(jié)劑或免疫刺激劑聯(lián)用；免疫調(diào)節(jié)劑或免疫刺激劑優(yōu)選為Propinmin、抗人體α-干擾素抗體、IL-2、GM-CSF、干擾素α、二乙基二巰基氨基甲酸酯、腫瘤壞死因子、納曲酮、Tuscarasol、rEPO以及諸如羥乙基磺酸戊雙脒等抗生素；還可以是能夠抑制或控制與病毒性疾病相關(guān)的惡性腫瘤的藥劑。在用于治療病毒、細菌、真菌和/或寄生蟲感染或癌癥的方法中，如上所述，可以將本發(fā)明的化合物與適合的載體、輔藥或賦形劑一起給藥?？梢杂糜诒景l(fā)明的藥物中的藥物適合的載體、輔藥和賦形劑，包括離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物給藥體系(SEDDS)、例如dα-生育酚聚乙二醇-1000-琥珀酸酯或其它類似的聚合性給藥材料、血清蛋白質(zhì)例如人類血清白蛋白、緩沖物質(zhì)例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨糖酸、山梨酸鉀、顆粒甘油混合物飽和植物脂肪酸、水、鹽或電介質(zhì)，如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯基吡咯烷酮、具有纖維素的材料、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、石蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂，但并不局限于這些。還可以優(yōu)選使用環(huán)糊精，如α-、β-、γ-環(huán)糊精、或化學(xué)改性的衍生物，如羥基烷基環(huán)糊精、包括2-和3-羥基-丙基-β-環(huán)糊精、或其它可溶性的衍生物，從而提高發(fā)明化合物的給藥。對于該方法，可以將本發(fā)明的化合物口服、非腸胃、通過吸入噴射、局部、直腸、鼻腔、口腔、陰道或通過植入的儲存器給藥。優(yōu)選將口服給藥或通過注射給藥作為接觸的形式。本發(fā)明的藥物可以含有任意常規(guī)無毒的藥物可接受的載體、輔藥或賦形劑。在一些情況下，可以采用藥物可接受的酸、堿或緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)藥物配方的pH值，以提高配方化合物或其給藥形式的穩(wěn)定性。術(shù)語非腸道例如按照如下使用，包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、腱鞘內(nèi)、傷口內(nèi)及頭顱內(nèi)注射或輸液的接觸方式。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，載體選自填充劑、填料、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、溶解阻滯劑、吸收促進劑、浸透劑、吸附劑和/或潤滑劑。
其中，填充劑和填料優(yōu)先選用淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；粘合劑優(yōu)先選用羧甲基纖維素、藻酸、明膠、聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑優(yōu)先選用甘油；崩解劑優(yōu)先選用瓊脂-瓊脂、碳酸鈣和碳酸鈉；溶解阻滯劑優(yōu)先選用石蠟；吸收促進劑優(yōu)先選用季銨化合物；浸透劑優(yōu)先選用鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯；吸附劑優(yōu)先選用高嶺土和膨潤土；潤滑劑優(yōu)先選用滑石、硬脂酸鈣和硬脂酸鎂以及固體聚乙二醇或上述物質(zhì)的混合物。
在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方式中，本發(fā)明的化合物可以配制成凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋片劑、預(yù)混物、乳液、浸劑配方、滴劑、濃縮液、顆粒、糖漿、小丸、大丸(Boli)、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑，和/或以這些方式使用。該片劑、糖衣藥丸、膠囊、丸劑和顆粒劑可以含有常規(guī)的、任選的不透明劑，形成和制備涂層和外殼，使得其或有效物質(zhì)僅或優(yōu)選延遲至在腸道中的適宜部位吸收，其中，作為嵌入物質(zhì)，可以例如是聚合物和蠟。
本發(fā)明的化合物或藥劑可以優(yōu)選以任何適合于口服的劑型用于口服給藥，包括膠囊、片劑、含水懸浮液和溶液，但并不限于這些。在用于口服給藥的片劑的情況下，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還添加潤滑劑，例如硬脂酸鎂。為了以膠囊的形式口服給藥，可以包含稀釋劑乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)以含水懸浮液口服給藥時，將有效物質(zhì)與乳化劑和懸浮劑聯(lián)用。如果需要，可以添加適宜的甜味劑和/或調(diào)味劑和/或著色劑。
必要時，本發(fā)明的化合物還可以與一種或多種上述的載體物質(zhì)形成微膠囊的形式。
除了有效物質(zhì)以外，栓劑可以含有常規(guī)的水溶性或水不溶性載體物質(zhì)，例如聚乙二醇、脂肪，如可可脂和高級酯(例如C14醇與C16脂肪酸的酯)或這些物質(zhì)的混合物。
除了有效物質(zhì)以外，軟膏、糊劑、乳膏和凝膠還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如動物和植物脂肪、蠟、石蠟、淀粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚硅氧烷、膨潤土、硅酸、滑石和氧化鋅或其混合物。
除了有效物質(zhì)以外，粉劑和噴霧劑還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如乳糖、滑石、硅酸、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末或這些物質(zhì)的混合物。噴霧劑還可以含有常規(guī)的工作介質(zhì)，例如氯氟烴。
除了有效物質(zhì)以外，溶液和乳液還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如溶劑、增溶劑和乳化劑，例如水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油特別是棉籽油、花生油、玉米油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油，甘油、甘油甲縮醛、四氫糠醇、聚乙二醇和山梨糖醇酐的脂肪酸酯或這些物質(zhì)的混合物。為了不經(jīng)腸胃給藥，溶液和乳液還可以以無菌和血液等滲壓(blutisotonischer)的形式存在。
除了有效物質(zhì)以外，懸浮液還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如液體稀釋劑，如水、乙醇、丙二醇；懸浮劑，如乙氧基化(ethoxilierte)的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、澎潤土、瓊脂-瓊脂和黃蓍膠或這些物質(zhì)的混合物。
藥劑可以是無菌注射配方的形式，例如作為無菌注射的含水或含油懸浮液存在。該懸浮液還可以以本領(lǐng)域中公知的方法，通過使用適宜的分散劑或浸透劑(例如Tween 80)和懸浮劑進行配制。無菌注射配方還可以是在無毒的適于非腸道的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如作為在1，3-丁二醇中的溶液?？梢允褂玫倪m宜的載體和溶劑有甘露醇、水、林格氏溶液和等滲壓氯化鈉溶液。此外，通常使用無菌、非揮發(fā)性的油作為溶劑或懸浮介質(zhì)，為了該目的，可以使用任意柔和的非揮發(fā)性的油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物可以在制備注射劑中使用，例如天然的、藥物適用的油，如橄欖油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化的形式。這些油溶液或懸浮液還可以含有長鏈醇或類似的醇作為稀釋劑或分散劑。
上述的配方還可以含有著色劑、防腐劑以及氣味和味道改善添加劑，例如薄荷油和桉葉油，以及甜味劑，例如糖精。在所述的藥物配方中，化學(xué)式(I)的有效物質(zhì)濃度為全部混合物的約0.1-99.5重量％，優(yōu)選為約0.5-95重量％。
所述的藥物配方除了本發(fā)明的化合物以外，還可以含有其它的藥物有效物質(zhì)。上述藥物配方的制備采用根據(jù)公知方法的常規(guī)途徑進行，例如通過將有效物質(zhì)與載體物質(zhì)混合。
在人類和動物中，上述配方適合用于經(jīng)口、直腸、非腸道(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下)、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(粉劑、軟膏、滴劑)給藥用于治療。作為適宜的配方，可以是注射溶液，用于口服治療的溶液和懸浮液，凝膠、浸劑配方、乳液、軟膏或滴劑。為了進行局部治療，可以使用眼科和皮膚的配方、銀和其它的鹽、耳部滴劑、眼膏、粉劑或溶劑。對于動物，給藥還可以通過具有適宜配方的飼料或飲水進行。此外，對于人類和動物，還可以使用凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋片劑、預(yù)混物、濃縮品、顆粒、小丸、片劑、大丸(Boli)、膠囊、氣溶膠、噴霧劑、吸入劑。此外，本發(fā)明的化合物還可以添加在其它載體材料中，例如塑料、(用于局部治療的塑料藥盒(Kunststoffketten))、骨膠原或骨質(zhì)粉。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的化合物在配方中以0.1-99.5重量％，優(yōu)選為0.5-95重量％，特別優(yōu)選為20-80重量％的濃度使用。即，本發(fā)明的化合物在上述的藥物配方，例如片劑、丸劑、顆粒劑等中，濃度優(yōu)選為全部混合物的0.1-99.5重量％。為了獲得一次的劑型，有效物質(zhì)的量，即與載體物質(zhì)聯(lián)用的本發(fā)明化合物的量，可以根據(jù)治療的對象和特定的給藥方式而改變。在治療對象或患者的狀況改善后，配方中有效化合物的部分可以進行改變，使之存在維持劑量。然后，給藥的劑量或頻率或兩者作為身體癥狀的函數(shù)降低至一定的水平，使得保持在改善的狀態(tài)下。當(dāng)癥狀緩和達到期望程度的時，治療停止。不過，在疾病的癥狀復(fù)發(fā)后，患者可能需要在長時間的基礎(chǔ)上間歇地治療。因此，化合物部分，即在藥物配方的全部混合物中的濃度，與其成分或組分一樣發(fā)生改變，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)其專業(yè)知識進行改變和調(diào)整。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的，本發(fā)明化合物可以以不同的途徑與生物體、優(yōu)選人類或動物接觸使用。另外，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的，該藥劑可以以不同劑量給藥。因此，其給藥應(yīng)當(dāng)這樣來進行，即，盡可能有效地抑制病毒性疾病或者在預(yù)防性的給藥中避免這類疾病的爆發(fā)。給藥的濃度和方式可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過路線試驗確定。優(yōu)選本發(fā)明化合物的給藥方式是以粉劑、片劑、糖漿、滴劑、膠囊等形式口服給藥；以栓劑、溶液等形式直腸給藥；以注射、輸液和溶液、氣體吸入劑、氣溶膠、粉末和膏藥的形式非腸道給藥；以及，以涂軟膏、膏藥、熱敷、洗劑等的形式局部給藥。優(yōu)選本發(fā)明的化合物以接觸的方式用于預(yù)防或治療。在預(yù)防的給藥中，應(yīng)能避免上述腫瘤的形成。在接觸給藥治療的方式中，患者已經(jīng)有了腫瘤疾病，應(yīng)可以殺滅身體中存在的癌細胞或換制其增殖。為此，優(yōu)選的給藥方式例如為皮下、舌下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)和/或局部給藥。
所選擇的給藥方式例如劑量、給藥途徑、輔藥的選擇等的適合性，例如可以通過取出患者的血清-等分試樣或者通過在治療過程中的癌癥細胞進行測試(bildgebenden)的方法而確定?？蛇x的和伴隨其的是，由通過常規(guī)的方法確定的肝的狀態(tài)以及T-細胞或免疫系統(tǒng)的其他細胞的量，可以獲得對患者免疫結(jié)構(gòu)，尤其新陳代謝重要器官特別是肝的總體了解。此外，患者的臨床狀態(tài)可以根據(jù)期望的效果進行觀察。由于腫瘤疾病可能與其它的例如細菌或真菌感染相關(guān)聯(lián)，因此，在臨床上可能需要密切注視伴隨的感染的過程。當(dāng)獲得的抗腫瘤效果不充分時，可以調(diào)整根據(jù)本發(fā)明的藥劑和其他公知的藥物，對患者繼續(xù)進行治療，以期望總體狀況的改善。顯而易見的是，還可以調(diào)整藥劑的載體或賦形劑，或改變給藥途徑。除了口服的方式以外，用于根據(jù)本發(fā)明化合物的治療給藥的另一種優(yōu)選途徑例如還可以是注射，如肌肉內(nèi)或皮下或者血管中注射。此外，還可以通過導(dǎo)管或外科橡膠管供應(yīng)進行給藥。
因此，本發(fā)明還涉及該化合物在與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂相關(guān)的疾病的診斷、預(yù)防、減輕、治療、過程控制和/或術(shù)后治療中的用途。
在一個優(yōu)選實施方式中，與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂相關(guān)的疾病是腫瘤。特別優(yōu)選的是，所述的腫瘤是固體腫瘤和/或白血病。
在一個優(yōu)選實施方式中，被治療、預(yù)防或防止復(fù)發(fā)的腫瘤疾病或癌癥選白喉-鼻-耳范圍或癌癥、肺、縱隔、胃腸道、泌尿生殖系統(tǒng)、婦科系統(tǒng)、胸腔、內(nèi)分泌系統(tǒng)、皮膚、骨骼的腫瘤疾病或癌癥疾病，以及軟組織肉瘤、間皮瘤、黑瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的螯生物、嬰兒的腫瘤疾病或癌癥、淋巴、白血病、副螯生物的并發(fā)癥、無已知初生腫瘤的轉(zhuǎn)移(CUP-綜合癥)、腹膜乳房癌素、惡性免疫缺陷和/或癌轉(zhuǎn)移瘤。
在腫瘤中，尤其是可以治療下列種類的癌癥乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸癌；各種肺癌、支氣管腫瘤；骨髓癌、黑瘤、肝細胞瘤、成神經(jīng)細胞瘤；乳頭狀瘤；Apudom、迷芽瘤、鰓原瘤；惡性癌癥-綜合癥；癌癥-心臟疾病、癌(例如沃克癌、基礎(chǔ)細胞-癌、嗜鹼扁平細胞癌、Brown-Pearce癌、導(dǎo)管癌、埃爾利希癌、原位癌、癌-2癌、美克耳細胞癌、Schleim癌、非-小細胞支氣管癌、Hafer細胞癌、乳頭狀癌、szirrhses癌、細支氣管-小泡癌、小支氣管癌、plattenepithel癌和過渡型細胞癌)；組織細胞功能性紊亂；白血病(例如涉及B-細胞白血病、總細胞白血病、中性細胞白血病、T-細胞白血病、慢性T-細胞白血病、HTLV-II-聯(lián)合白血病、急性淋巴囊腫白血病、慢性淋巴囊腫白血病、肥大細胞白血病和脊髓白血病)；惡性組織細胞增殖、霍奇金癌癥、非霍奇金淋巴瘤、單獨血漿細胞癌；網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞組織增殖、成軟骨細胞瘤；軟骨瘤、軟骨肉瘤；纖維瘤、纖維肉瘤；大細胞癌；組織細胞增殖；脂肪瘤、脂肪肉瘤；白血病性肉瘤；間皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨皮瘤；尤因皮瘤；滑膜瘤；腺纖維瘤；腺淋巴瘤；Karzinos肉瘤；脊索瘤、顱咽管瘤、無性細胞瘤、錯構(gòu)瘤、間質(zhì)瘤；中腎瘤；肌肉瘤、成釉細胞瘤、牙骨質(zhì)瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤、成絨(毛)膜細胞瘤；腺肌肉瘤、腺瘤；膽管瘤；珠光瘤；圓柱瘤；半胱胺加氧酶瘤、囊腺瘤；粒層細胞癌；雌雄胚細胞瘤(Gynadroblastom)；汗腺腺瘤；島狀細胞瘤；Leydig細胞癌；乳突淋瘤；塞爾托利細胞癌、囊細胞癌、平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌細胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；橫紋肌瘤；橫紋肌肉瘤；室管瘤；神經(jīng)節(jié)細胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤；成神經(jīng)管細胞瘤、腦(脊)膜瘤；神經(jīng)鞘瘤；成神經(jīng)細胞瘤；神經(jīng)上皮瘤、纖維神經(jīng)瘤、神經(jīng)瘤、副神經(jīng)節(jié)瘤、非嗜鉻副神經(jīng)節(jié)瘤、血管角質(zhì)瘤、嗜酸性的成血管淋巴增殖；硬化型血管瘤；血管肉瘤；血管球瘤；血管內(nèi)皮瘤；血管瘤；血管外皮細胞瘤、血管肉瘤；淋巴管瘤、淋巴管瘤、淋巴管肉瘤；松果體瘤；葉狀膀胱肉瘤；血管肉瘤；淋巴管肉瘤；多發(fā)性黏液瘤、卵巢瘤；肉瘤(例如尤因肉瘤、實驗、卡波濟氏肉瘤和肥大細胞肉瘤)；瘤(例如骨狀瘤、胸腔瘤、消化系統(tǒng)瘤、結(jié)腸直腸瘤、肝瘤、胰腺瘤、腦垂體瘤、睪丸瘤、眼眶瘤、頭部和頸部腫瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、耳部腫瘤、骨盆腫瘤、呼吸道腫瘤和泌尿生殖器腫瘤)；多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤和頸部平上皮結(jié)構(gòu)不良。
在另一個優(yōu)選的實施方式中，被治療、預(yù)防和防止復(fù)發(fā)的腫瘤疾病或癌癥選自喉-鼻-耳范圍內(nèi)的癌癥，包括內(nèi)鼻腔癌、骨竇癌、鼻咽癌、唇癌、口腔癌、口咽癌、喉癌、下咽部癌、耳癌、唾液腺癌和副神經(jīng)節(jié)瘤；肺癌，包括非-小細胞支氣管癌、小細胞支氣管癌、縱隔癌；胃腸道癌，包括食道癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、膽囊癌和膽管癌、小腸癌、結(jié)腸和直腸癌和肛門癌；泌尿生殖器癌，包括腎癌、輸尿管癌、膀胱癌、前列腺癌、尿道癌、陰莖和睪丸癌；婦科癌癥，包括子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、Korpus癌、惡性滋養(yǎng)層疾病、卵巢癌、輸卵管癌(Tuba Faloppii)；腹腔癌；乳房癌；內(nèi)分泌器官癌，包括甲狀腺癌、副甲狀腺癌、副腎外皮癌、內(nèi)分泌胰腺癌；致癌性腫瘤和致癌性并發(fā)癥；多內(nèi)分泌瘤；骨肉瘤和軟組織肉瘤；間皮瘤；皮膚癌；黑素瘤，包括的皮膚和皮內(nèi)黑素瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌；嬰兒的癌癥，包括視網(wǎng)膜細胞瘤、Wilms癌、神經(jīng)纖維瘤、成神經(jīng)細胞瘤、尤因肉瘤癌癥族、橫紋肌肉瘤；淋巴瘤，包括非霍奇金淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基本淋巴瘤、霍奇金疾??；白血病，包括急性白血病、慢性白血病和淋巴組織白血病、血漿細胞瘤、骨髓塑料化綜合癥、paraneo塑料化綜合癥、無基本癌癥的轉(zhuǎn)移瘤(CUP-綜合癥)、peritoneale致癌性轉(zhuǎn)移瘤；免疫力缺陷導(dǎo)致的惡性腫瘤，包括AIDS導(dǎo)致的惡性腫瘤，如Kaposi肉瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的淋巴瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的霍奇金疾病和與AIDS聯(lián)發(fā)的肛門與生殖器癌、移植導(dǎo)致的惡性腫瘤；轉(zhuǎn)移瘤性癌，包括腦部轉(zhuǎn)移瘤、肺部轉(zhuǎn)移瘤、肝部轉(zhuǎn)移瘤、頸部轉(zhuǎn)移瘤、胸部和心包轉(zhuǎn)移瘤以及惡性腹水。
在另一個優(yōu)選的實施方式中，被治療、預(yù)防和防止復(fù)改編的腫瘤疾病或癌癥選自癌性乳腺炎；胃腸肉瘤，包括結(jié)腸肉瘤、胃部肉瘤、大腸癌和小腸癌；胰腺肉瘤；卵巢肉瘤；肝肉瘤；肺癌；腎細胞肉瘤以及多發(fā)性骨髓瘤。
在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方式中，該化合物或藥物組合物被用于聯(lián)合治療，尤其用于腫瘤的治療。其中特別優(yōu)選的是，聯(lián)合治療包括化療、細胞抑制治療和/或放射治療。
在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方式中，聯(lián)合治療是輔助的生物特異性治療形式。其中尤其特別優(yōu)選的是，治療形式是免疫治療。此外，特別優(yōu)選的是聯(lián)合治療是基因治療。
本發(fā)明中的基因治療，是通過使用天然或重組改變的核酸結(jié)構(gòu)、單獨的基因序列或全部基因或染色體片斷或編碼的轉(zhuǎn)錄區(qū)域的治療方式，目的在于對疾病癥狀的生物基礎(chǔ)和選擇性的避免或逆轉(zhuǎn)的衍生物/修飾物和/或原因試驗，其中，在特定的情況下可理解為在核酸的級別上，尤其是在轉(zhuǎn)錄的級別上對疾病的目標(biāo)分子實現(xiàn)抑制。
對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，各種聯(lián)合治療，特別是用于癌癥的聯(lián)合治療是公知的。例如，在聯(lián)合治療中進行細胞抑制治療或例如在確定的癌癥區(qū)域照射放射線，其中，這些治療可以與基因治療結(jié)合，其中使用本發(fā)明的化合物作為抗癌劑。本發(fā)明的藥劑可以與其它的抗癌劑組合使用。因此，可以特別優(yōu)選的是，將本發(fā)明的化合物用于提高癌癥細胞對細胞抑制和/或放射線的敏感性。另外優(yōu)選的是，將本發(fā)明的化合物用于抑制細胞的生存力、增殖率和/或用于引發(fā)自然死亡和細胞循環(huán)終止。
本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明化合物的方法，例如通過使4-羥基-1-甲基-脯氨酸-乙酯與異氰酸苯酯在乙腈中反應(yīng)以制備1-甲基-4-苯基氨基羰基氧基-脯氨酸-乙酯。
本發(fā)明的化合物1-甲基-4-苯基氨基-羰基氧基-脯氨酸-異丁酯是通過使4-羥基-1-甲基-脯氨酸-異丁酯與異氰酸苯酯在乙腈中反應(yīng)制備。
4-羥基-1-甲基-脯氨酸是通過使4-羥基-脯氨酸在甲醛和Pd/C中，在氫化裝置中反應(yīng)獲得。
4-羥基-1-甲基-脯氨酸乙酯是通過使4-羥基-脯氨酸乙酯和甲醛在乙醇中反應(yīng)獲得。
4-羥基-1-甲基-脯氨酸異丁酯是通過使甲醛、Pd/C和乙醇與4-羥基-脯氨酸異丁酯反應(yīng)獲得。
4-羥基-1-甲基-脯氨酸異丁酯是通過使甲醛和4-羥基-脯氨酸異丁酯在Pd/C的存在下，在乙醇中反應(yīng)獲得。
4-羥基-脯氨酸的衍生物按如下所獲得順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯是將4-羥基-脯氨酸在乙醇中與HCl接觸而獲得(參見實施例)。
順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯是通過使4-羥基脯氨酸在異丁醇中反應(yīng)獲得，其中，與4-羥基-脯氨酸乙酯類似地進行提純。
4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸乙酯碘化物是通過使羥基脯氨酸乙酯溶解在乙腈中并與甲基碘和三乙胺反應(yīng)獲得。
4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸異丁酯碘化物是通過使4-羥基脯氨酸異丁酯與甲基碘在三乙胺和乙腈中反應(yīng)獲得。
4-羥基-1-烷基-脯氨酸酯溴化物是通過將4-羥基脯氨酸酯懸浮在乙腈中并與相應(yīng)的烷基溴接觸獲得。
4-羥基-1-環(huán)己基-脯氨酸異丁酯是通過將溴化氫溶解在氯仿中，接著在氨氣中干燥而形成。
4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物，是與4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸異丁酯碘化物類似地獲得。
本發(fā)明還涉及化合物用于抑制膠原IV和/或谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶(GST)的用途，其中，所述的化合物是如上述用于癌癥治療的化合物。
在細胞培養(yǎng)物或生物體內(nèi)，GST抑制或降低和/或膠原IV抑制或降低具有多種結(jié)果。例如GST在生物體內(nèi)或在體外培養(yǎng)物中能夠聯(lián)接GSH，用于細胞外運輸。在腫瘤細胞的情況下，這意味著，GST將腫瘤基因或腫瘤細胞的其它部分固定在GSH上，并在細胞外的范圍內(nèi)引導(dǎo)，另外還導(dǎo)致擴散的效果以及轉(zhuǎn)移。通過GSH的增多的結(jié)合，這不再代表其它的細胞過程供支配，導(dǎo)致細胞的病理學(xué)改變。通過腫瘤細胞片斷的結(jié)合，還可以抑制細胞內(nèi)部的信息處理和其它的功能進行，從而引發(fā)或促進細胞的轉(zhuǎn)變。通過上述的過程，還可以促進細胞程序死亡(Apoptose)。
然而，對致癌物質(zhì)的提高的耐受性或致癌物質(zhì)抑制作用并不是用CHP衍生物產(chǎn)生的抑制的唯一的結(jié)果。這些抑制的其它二次反應(yīng)例如是在化療后或與化療同步進行自身免疫力疾病、細胞增殖的治療或緩和，使得避免多余的輻射以延緩老化的過程，從而治療傳染性疾病或新陳代謝疾病，例如肝、胰腺、腸和/或胃。
這些GST的抑制的方法優(yōu)選與其它膠原IV抑制的化學(xué)治療方法聯(lián)用。這些膠原IV抑制的治療方法，尤其是通過主-膠原-范圍的這些甘油醇蛋白質(zhì)固定在腫瘤細胞上并滲透和刺穿這些細胞。然而，膠原抑制并不僅于導(dǎo)致避免轉(zhuǎn)移和在腫瘤疾病中的滲透或侵入，而是在所有的炎癥疾病中，在結(jié)締組織中的普通組織改變獲得治療效果，例如在肺纖維組織形成、肝硬化、胰腺纖維組織形成和/或Glomerulosklerose。此外，膠原IV抑制在硬皮病/馬方氏綜合癥、在血管疾病、在新陳代謝疾病、在自身免疫疾病和在神經(jīng)系統(tǒng)疾病、在結(jié)締組織中的神經(jīng)組織中均具有積極的影響-上述的膠狀質(zhì)，例如在早老性癡呆中。顯而易見的是，尤其是在最后提到的疾病中，除了通過CHP衍生物平行治療抑制膠原IV以外，還可以減少纖維組織形成，例如在支持/附加治療形式中的博萊霉素/白消安。
本發(fā)明還涉及在生物體和/或試樣中抑制膠原IV和/或GST的方法，其中，使生物體或試樣與所述的CHP衍生物接觸。該方法例如可以在聯(lián)合治療中使用，使得在化療之后生物體中的細胞再生。CHP與生物體或欲處理的試樣的接觸，例如可以通過口服、皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、陰道、直腸、局部和/或舌下進行。
本發(fā)明還涉及抗膠原IV和/或抗GST劑或者膠原IV或GST降低劑，其包含CHP衍生物，任選地含有常用的助劑。這些常用的助劑，尤其是涉及藥學(xué)可接受的載體、輔藥和/或賦形劑，其中，載體選自填充劑、填料、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、溶解阻滯劑、吸收促進劑、浸透劑、吸附劑和/或潤滑劑。含有CHP衍生物的膠原IV降低劑或抑制劑或者GST降低劑或抑制劑，可以作為凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋片劑、預(yù)混物(Premix)、乳液、浸液配方、滴劑、濃縮液、輸液、顆粒、糖漿、小丸、大丸劑、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑配制或使用。優(yōu)選的是，在配方中CHP濃度為0.1-99.5重量％，優(yōu)選為0.5-95重量％，特別優(yōu)選為1-80重量％。特別優(yōu)選的是，所這的配方是輸液，其中CHP衍生物的存在范圍是1-2重量％。
在本發(fā)明的另一個實施方式中，CHP衍生物以每24小時0.05-1000mg/kg體重、尤其是5-450mg/kg體重的總量使用。
膠原IV抑制劑或GST抑制劑或單獨的CHP衍生物，可以按照0.1-100g/天的量給患者用藥。顯而易見的是，每天的劑量可以分成若干份，將分成的每份的量與生物體接觸2、4、6或10次或更多次。
通過CHP衍生物抑抑制膠原IV和/或GST，特別是αGST，優(yōu)選用于治療(i)炎癥，特別優(yōu)選用于治療(ii)自身免疫疾病。
本發(fā)明中的(i)炎癥，是由結(jié)締組織和血管產(chǎn)生的、生物體對外部或內(nèi)部引起的炎癥刺激產(chǎn)生的反應(yīng)，其目的是消除該炎癥刺激或使其失活并修復(fù)由于刺激導(dǎo)致的組織損壞。引發(fā)產(chǎn)生機械刺激(異物、壓力、損傷)和其它的物理因素(離子束、UV光、熱、冷)、化學(xué)物質(zhì)(堿、酸、重金屬、細菌毒素、過敏原和免疫絡(luò)合物)以及病原體(微生物、寄生蟲、昆蟲)或致病的代謝產(chǎn)物、變態(tài)酶、惡性腫瘤。該癥狀開始于帶有循環(huán)機能不全和組織變質(zhì)的短暫的小動脈變窄(由于Arenalin作用)，接著顯現(xiàn)出典型的局部炎癥(主要癥狀；根據(jù)GALEN和CELSUS)，即，變紅(＝發(fā)紅；由于組胺引起的血管擴張)，發(fā)熱(＝灼熱；由于局部新陳代謝增強引起)，腫塊(＝腫瘤；由于富蛋白質(zhì)的液體-還通過組胺-從改變的血管壁流出引起，由于血停滯前至血停滯中的延緩的血液循環(huán)而被促進)，疼痛(＝痛；由于增加的組織分離和引發(fā)疼痛的炎癥產(chǎn)物引起，例如緩激肽)和功能障礙(＝functiolaesa)。該過程由于以下因素得到補充電解平衡(礦物質(zhì)的傳輸)的紊亂、嗜中性粒細胞和單細胞通過血管壁的遷移(白細胞趨向性)，最終的目的是，炎癥的刺激和損害直至神經(jīng)細胞被去除(吞噬作用)；此外，還遷移入淋巴作用細胞，從而形成對炎癥刺激特定的抗體(免疫反應(yīng))，以及嗜酸性細胞(在治療階段或-非常早-在過敏性-反應(yīng)性過敏中產(chǎn)生)。由于在反應(yīng)中發(fā)生的補充體系的活化，使得這些體系釋放碎片(C3a和C5a)，其(例如組胺和緩激肽)作為炎癥的傳遞質(zhì)，然而，在刺激下會產(chǎn)生所述血液細胞的趨藥性；此外還激活血液的凝塊。接著，開始器官軟組織的損壞(營養(yǎng)不良和凝集壞死)。全部的生物體根據(jù)炎癥的強度和種類發(fā)生反應(yīng)，該炎癥具有發(fā)熱、應(yīng)激反應(yīng)(還表現(xiàn)為適應(yīng)綜合癥)、白細胞增多和在血漿蛋白質(zhì)的混合物中的改變(急性-階段-反應(yīng))，導(dǎo)致加速的血球沉降反應(yīng)。優(yōu)選本發(fā)明中的炎癥是化膿的、滲出性、纖維化、壞疽性、顆?；⒊鲅?、粘膜性、壞死性、增殖的或多產(chǎn)性、假膜的、血清的、特定的和/或潰瘍性的炎癥。
(ii)本發(fā)明中的自身免疫性疾病，是完全地或部分地歸因于自身抗體形成以及其對全部生物體或器官體系的壞影響，即自身侵入的疾病。一種分類是可以是作為器官特異的、媒介的和/或系統(tǒng)性的自身免疫性疾病。優(yōu)選的器官特異自身免疫性疾病是HASHIMOTO甲狀腺炎、原發(fā)粘液水腫、甲狀腺中毒(BASEDOW疾病)、惡性貧血、ADDISON疾病、重癥肌無力和/或少年糖尿病。優(yōu)選的媒介自身免疫性疾病是GOODPASTURE綜合癥、自身免疫溶血性貧血、自身免疫白細胞減少、原發(fā)血小板減少癥、尋常天皰瘡、交感神經(jīng)眼炎、原發(fā)肝硬化、自身免疫性肝炎、結(jié)腸慢性潰瘍和/或SJGREN綜合癥。優(yōu)選的系統(tǒng)性自身免疫性疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性發(fā)熱、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、皮膚肌炎/多肌炎、漸進性系統(tǒng)性硬化、WEGENER顆粒化、全身動脈炎和/或過敏性脈管炎。典型的自身免疫性疾病是甲狀腺中毒、取決于甲狀腺的粘液水腫、HASHIMOTO甲狀腺炎、全身性內(nèi)分泌疾病、惡性貧血、A型慢性胃炎、血液單獨性或總體性微粒元素疾病(例如自身免疫性溶血作用貧血、原發(fā)性血小板減少或原發(fā)性疾??；原發(fā)性白血球減少或粒細胞缺乏癥)、尋常天皰瘡和類天皰瘡、交感神經(jīng)眼炎和多種葡萄膜炎、原發(fā)肝硬化和慢性侵入自身免疫性疾病、I型糖尿病、CROHN疾病和結(jié)腸慢性潰瘍炎、SJGREN綜合癥、ADDISON疾病、播散性紅斑狼瘡和作為這些疾病的Diskoide形式，作為皮膚肌炎、皮膚硬化、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(＝原發(fā)慢性多關(guān)節(jié)炎)、抗腎小球基膜-腎炎。基礎(chǔ)的是侵入的免疫反應(yīng)，其包括由于抑制細胞導(dǎo)致的相對于自身終點的免疫耐受性崩潰，且T-抑制細胞(具有淋巴細胞標(biāo)記T8)的活性降低或T-協(xié)助細胞(具有淋巴細胞標(biāo)記T4)過多；此外，還可以形成自身抗體基因，例如通過與具有半抗原(例如藥物)的寄主蛋白質(zhì)聯(lián)用，通過組織的個體發(fā)育，其首先對自身耐受性產(chǎn)生影響，并用于與例如注射的病毒或細菌相關(guān)的蛋白質(zhì)成分中暴露的蛋白質(zhì)的改變；此外，還與新蛋白質(zhì)中存在的腫瘤相關(guān)。此外，優(yōu)選通過抑制膠原IV和/或GST治療所有上述的癌癥疾病。
以下，借助于實施例進一步闡述本發(fā)明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
1.羥基-脯氨酸-衍生物制備1-甲基-4-苯基氨基羰基氧基脯氨酸乙酯(A-1-23) 原料430mg(0.0025Mol)4-羥基-1-甲基脯氨酸乙酯、300mg異氰酸苯基酯、30ml乙腈合成將原料溶解在乙腈中，并在回流下煮沸約5小時。冷卻至室溫后，在真空下除去溶劑，將粗產(chǎn)物溶解在丙酮中并通過乙醚/庚烷沉淀。
收率200mg(27％理論產(chǎn)量)熔點178-80℃制備1-甲基-4-苯基氨基羰基氧基脯氨酸異丁酯(A-2-23) 原料500mg(0.0025Mol)4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯、300mg異氰酸苯基酯、30ml乙腈。
合成與A-1-23類似。
制備4-羥基-1-甲基脯氨酸(A-0-21) 合成將4g 4-羥基-脯氨酸、4ml甲醛、200mgPd/C和250ml乙醇置于氫化裝置中，在氫氣氛圍下(常壓、室溫)振蕩約36小時(還原性胺化)。接著過濾催化劑，將濾液濃縮直至基本干燥并通過添加約250ml丙酮沉淀反應(yīng)產(chǎn)物(必要時該純凈操作再重復(fù)一次)；吸濾產(chǎn)物并在真空下干燥。
收率4.0g(約91％理論產(chǎn)量)熔點190℃制備4-羥基-1-甲基-脯氨酸乙酯(A-1-21)
原料2g 4-羥基-脯氨酸乙酯、2g甲醛、200mg Pd/C和150ml乙醇合成與A-0-21類似收率1.4g(約64％理論產(chǎn)量)熔點204℃制備4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯(A-2-21) 原料2g 4-羥基-脯氨酸異丁酯、2g甲醛、200mg Pd/C和150ml乙醇合成與A-0-21類似收率1.5g(約65％理論產(chǎn)量)熔點220℃4-羥基脯氨酸的衍生物順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯(A-1)的制備 合成在20g(0.15mol)4-羥基-脯氨酸在400ml無水乙醇中的懸浮液中，一面攪拌和冷卻、一面導(dǎo)入干燥的HCl氣體(約2小時)，直至4-羥基-脯氨酸包含在溶液中，其中，每天(約5-10分鐘)導(dǎo)入一次額外的HCl氣體。
處理/提純在真空中除去乙醇后，將殘留的酯-氫氯化物溶解在氯仿/甲醇(8∶2)中，導(dǎo)入(約5分鐘)干燥的NH3氣體，在真空中除去溶劑并通過加熱的氯仿處理產(chǎn)物混合物(脯氨酸酯+NH4Cl)。萃取出NH4Cl后，將濾液在真空中吸濾至干燥。
收率18g(約75.5％理論產(chǎn)量)熔點115℃順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯(A-2)的制備 原料10g(0.075mol)4-羥基脯氨酸和250ml異丁醇(干燥的)合成處理/提純與4-羥基脯氨酸乙酯類似收率11g(約78.6％理論產(chǎn)量)熔點139℃4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸乙酯-碘化物(A-1-01)的制備 合成將0.8g羥基脯氨酸乙酯溶解在30ml乙腈中并加入0.6g甲基碘和1ml三乙胺。沉淀一夜(在室溫下)后，將反應(yīng)混合物短時間加熱(使得反應(yīng)產(chǎn)物完全溶解在乙腈中)，接著進行過濾(分離三乙銨碘化物)。在真空中除去乙腈并在真空中干燥固體結(jié)晶的殘留的終產(chǎn)物。
收率600g(約44.4％理論產(chǎn)量)
熔點118-120℃4-羥基-1，1-脯氨酸異丁酯碘化物(A-2-01)的制備 原料0.9g 4-羥基-脯氨酸異丁酯(A-2)、1g甲基碘、1ml三乙胺和40ml乙腈合成與A-1-01類似收率0.6g(約36.6％理論產(chǎn)量)熔點180℃4-羥基-1-烷基-脯氨酸酯溴化物的制備 一般步驟將0.01mol的各自的4-羥基-脯氨酸酯懸浮在40ml乙腈中，添加0.01mol相應(yīng)的烷基溴后，在回流下沸騰5小時；冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物加入400ml乙醚中并冷卻過夜(～-20℃)。吸濾并在真空下干燥。
4-羥基-1-環(huán)己基-脯氨酸異丁酯(A-2-03)的制備
合成將1.7g相應(yīng)的氫溴化物溶解在150ml加熱的氯仿中，接著導(dǎo)入干燥的氨氣約3分鐘；冷卻至室溫后，萃取出沉淀的溴化銨，在真空中除去氯仿，接著由庚烷重結(jié)晶殘留的粗產(chǎn)物。
收率0.8g(約61.1％理論產(chǎn)量)無熔點(糊狀)4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物(A-2-04)的制備 合成參見A-2-01收率2.8g(約64.5％理論產(chǎn)量)熔點49-147℃2.合成的羥基脯氨酸衍生物對腫瘤細胞增硝的效果借助于胰腺腫瘤細胞系MIYPaCa2和BxPC3以及乳腺癌細胞系MDA-MB-435和BT20以及結(jié)腸癌細胞系Colo205和HT29，對本發(fā)明的化合物進行測試。將細胞放入96孔微量滴定平板中的培養(yǎng)液(具有10％牛胎兒血清和4mM谷氨酰胺的RPMI-1640)中；每孔具有10000個細胞。將用于測定的成分在微量滴定平板中以相應(yīng)的公知方法進行稀釋并在細胞培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)4天(37℃，5％CO2)。
在培養(yǎng)后，使用Biomedica(Wien，sterreich)的EZ4U試劑盒進行增殖試驗，該增殖是基于四唑翁。借助于Elisa讀取器確定各個孔的光學(xué)密度(OD)，其中，將對照介質(zhì)設(shè)置為100％(OD490nm＝0.5-1.5)。這些值在表1中以％示出，并在其中示出對濃度為400μg/ml(最高值)和200μg/ml(最低值)的細胞增殖的抑制。
表1
在400μg/ml下，CHP對于所有的6個細胞系具有最高的活性(40±10.1％抑制，平均值±SEM)，包括A1.21(36.5±11.4)和A0.21(16.3±2.7)以及A1.23、A2.21、A2.23具有低于8％的活性。A1.21具有與CHP不同的光譜，且與CHP相比在低濃度下具有低得多的活性。
令人吃驚的是，在孔腺癌細胞系的兩種情況下，N-甲基-順式-羥基脯氨酸乙酯對適宜細胞系，例如MDA-MB435和BT20顯示出較高的活性。在另外的試驗中，將物質(zhì)溶解于水中并測試其對作為目標(biāo)的結(jié)腸-腺癌細胞系Colo205和胰腺癌細胞系BxPC3的效果。獲得的結(jié)果以μg/ml的IC50濃度在表2中示出。
表2物質(zhì)，IC50-Colo205、IC50-BxPC3
令人吃驚地發(fā)現(xiàn)，對于特定的測試的細胞系，順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯(A1)、順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯(A2)、順式-4-羥基-1-環(huán)己基-脯氨酸異丁酯(A-2-03)和4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物(A-2-04)具有比對比物質(zhì)CHP高出數(shù)倍的效果。尤其是與順式-4-羥基-L-脯氨酸相比，順式-4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸乙酯碘化物(A-1-01)對胰腺-腺癌細胞系(BxPC3)具有特別高的效果。
IC50(為了獲得50％抑制所需的活性物質(zhì)濃度)的確定是用于測定活性物質(zhì)的藥物活性的相對參數(shù)。使用物質(zhì)順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯、順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯、順式-4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物和順式-4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸乙酯碘化物，相對于其它的物質(zhì)例如順式-4-羥基-L-脯氨酸和/或順式-4-羥基-1-甲基-脯氨酸具有更大的治療優(yōu)勢。
在這些情況下，所需的治療劑量要少得多，相應(yīng)地可以將多次的每日劑量替換成例如用于每日一次(較少的劑量和每日一次)的藥物口服配方。這需要考慮患者的生存質(zhì)量、治療費用和患者的順從性。
由IC50(為了獲得50％抑制所需的活性物質(zhì)濃度)的測定結(jié)果可以看出，使用物質(zhì)順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯、順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯、順式-4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物和順式-4-羥基-1，1-二甲基酯碘化物，相對于其它物質(zhì)例如順式-4-羥基-L-脯氨酸和/或順式-4-羥基-1-甲基-脯氨酸具有較大的治療優(yōu)勢。
尤其令人驚訝的是，順式-4-羥基-L-脯氨酸與順式-4-羥基-1-甲基-L-脯氨酸的組合對于特定的細胞系Colo205、SW620和T47D具有拮抗效果，其中，對結(jié)腸癌細胞系的效果排在第一位，對乳腺癌癥細胞系的效果排在最后。如上所述，增殖測試通過開始稀釋為400μg/ml進行，其單獨或與400、200或100μg CHP組合測試。使用的細胞系在表3中示出?！癈on”一欄表示通過不同濃度的A0.21對增殖的抑制％(負號)。結(jié)果總體表明，CHP將A0.21的抗增殖效果轉(zhuǎn)向反面。在多數(shù)情況下，增殖得到提高，或者由單一物質(zhì)達到的抑制由于組合藥劑而降低。單獨CHP的效果被示于表的左側(cè)，以對于最高濃度的CHP(400μg/ml)的每一個細胞系的說明示出。這些值在表3中示出，其中A0.21和CHP在相對和重要濃度的上述條件下具有拮抗效果。
表3CHP與A0.21(4-羥基-1-甲基-脯氨酸)的組合
此外，對(R)-(+)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇和(S)-(-)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇進行測試。表4示出了兩種異構(gòu)體的值。結(jié)果以IC50(μg/ml)表示。
表4二苯基-2-吡咯烷甲醇
此外，對本發(fā)明化合物進行了試驗，以下通過順式-4-羥基-L-脯氨酸進行闡述。
在28天的時間里，將順式-4-羥基-L-脯氨酸對老鼠重復(fù)給藥。在血清和尿試樣中，借助于LC/MS技術(shù)對順式-4-羥基-L-脯氨酸進行分析。
可以發(fā)現(xiàn)的是，在重復(fù)給藥后，順式-4-羥基-L-脯氨酸在血清或在尿中的水平相對迅速地減少。采用LC/MS技術(shù)測定的順式-4-羥基-L-脯氨酸的水平的減少與順式-4-羥基-L-脯氨酸的異構(gòu)體和代謝產(chǎn)物在研究試驗中的證明相關(guān)。
令人吃驚的是，可以對順式-4-羥基-L-脯氨酸的下述生物轉(zhuǎn)化進行檢測順式-4-羥基-L-脯氨酸反式-4-羥基-L-脯氨酸順式-4-羥基-L-脯氨酸反式-4-羥基-D-脯氨酸順式-4-羥基-L-脯氨酸反式-3-羥基-D-脯氨酸順式-4-羥基-L-脯氨酸 D-脯氨酸這些生物轉(zhuǎn)化通過CHP-同向異構(gòu)酶和/或CHP-差向異構(gòu)酶催化，其迄今為止尚未公開。
順式-4-羥基-L-脯氨酸或其他生物轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物的產(chǎn)生是有害的，因為這些物質(zhì)通常沒有藥物活性。
通過CHP-同向異構(gòu)酶和/或CHP-差向異構(gòu)酶的有特效的抑制，可以避免生物轉(zhuǎn)化或順式-4-羥基-L-脯氨酸轉(zhuǎn)化成反式-4-羥基-L-脯氨酸、反式-4-羥基-D-脯氨酸、反式-3-羥基-D-脯氨酸或通常向D-脯氨酸的轉(zhuǎn)化，從而使順式-4-羥基-L-脯氨酸在生物體中的濃度維持在高的水平上。
如果將順式-4-羥基-L-脯氨酸或其衍生物同時或分時間地與CHP-同向異構(gòu)酶抑制劑和/或CHP-差向異構(gòu)酶抑制劑一起口服給藥或其他方式給藥，可以減少順式-4-羥基-L-脯氨酸或其衍生物的劑量，這是因為，由于在生物體中的生物轉(zhuǎn)化(同向異構(gòu)和差向異構(gòu))的損失被避免。
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物和/或其鹽， 式中，R1是羥基、芳基或氨基酸基團；R2是氫、烷基(C1-C4)、取代的烷基(C1-C4)基團、二烷基(C1-C4)、環(huán)己基、苯基或二苯基基團；R3是烷基(C2-C5)基團；其條件是，當(dāng)R1是羥基基團時，R2不是甲基基團。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其特征在于R1是羥基、苯基氨基或氨基酸基團；R2是氫、甲基、二甲基、環(huán)己基或二苯基甲基基團；R3是乙基、異丁基和/或氫基團。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其特征在于，所述的鹽是該化合物的碘化物、溴化物和/或氯化物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其特征在于，所述的苯基氨基基團含有改性的氨基基團，尤其是苯基氨基羰基氧基基團。
5.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的化合物，其特征在于，所述的化合物選自4-羥基脯氨酸乙酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸乙酯碘化物、4-羥基脯氨酸異丁酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸異丁酯碘化物、4-羥基-1-環(huán)己基脯氨酸-異丁酯、4-羥基-1-二苯基甲基脯氨酸-異丁酯氫溴化物、4-羥基-1-甲基脯氨酸、4-羥基-1-甲基脯氨酸乙酯、4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯、1-甲基-4-苯基氨基-羰基-氧基-脯氨酸和/或1-甲基-4-苯基氨基-羰基氧基-脯氨酸異丁酯。
6.一種藥劑，包含有根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的化合物，任選具有常規(guī)的輔助物質(zhì)，優(yōu)選藥物可接受的載體、輔藥和/或賦形劑。
7.根據(jù)上述權(quán)利要求的藥劑，其特征在于，所述的載體選自填充劑、填料、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、溶解阻滯劑、吸收促進劑、浸透劑、吸附劑和/或潤滑劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的藥劑，其特征在于，所述的載體是脂質(zhì)體、Siosomen和/或Niosomen。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一項的藥劑，其特征在于，還含有化療劑。
10.根據(jù)上述權(quán)利要求的藥劑，其特征在于，所述的化療劑選自氧代鉑、順式-氧代鉑、紫杉酚(Taxole)、吉西他濱、長春瑞濱、太平洋紫杉醇、環(huán)孢素和/或其組合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求6-10中任一項的藥劑，其特征在于，還含有選自抗病毒劑、抗真菌劑、抗細菌劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑中的一種或多種藥劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中的任一項的藥劑用于制造與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂相關(guān)的疾病的診斷、預(yù)防、過程控制、治療和/或術(shù)后治療的藥劑的用途。
13.4-羥基脯氨酸乙酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸乙酯碘化物、4-羥基脯氨酸異丁酯、4-羥基-1，1-二甲基脯氨酸異丁酯碘化物、4-羥基-1-環(huán)己基脯氨酸異丁酯、4-羥基-1-二苯基甲基脯氨酸-異丁酯氫溴化物、4-羥基-1-甲基脯氨酸、4-羥基-1-甲基脯氨酸乙酯、4-羥基-1-甲基脯氨酸異丁酯、1-甲基-4-苯基氨基-羰基-氧基-脯氨酸、1-甲基-4-苯基氨基-羰基氧基-脯氨酸異丁酯、(R)-(+)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇和/或(S)-(-)-α，α-二苯基-2-吡咯烷甲醇和/或其衍生物、代謝產(chǎn)物、對映異構(gòu)體和/或同分異構(gòu)體用于與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂相關(guān)的疾病的診斷、預(yù)防、過程控制、治療和/或術(shù)后治療的用途。
14.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的疾病是腫瘤。
15.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的腫瘤疾病選自贅生腫瘤、發(fā)炎性腫瘤、膿腫、積液和/或水腫。
16.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的腫瘤是固態(tài)腫瘤或白血病。
17.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的固態(tài)腫瘤是泌尿生殖道和/或胃腸道的腫瘤。
18.根據(jù)權(quán)利要求12-17中任一項的用途，其特征在于，所述的腫瘤是結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、小腸癌、卵巢癌、子宮頸癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、腎細胞癌、腦部腫瘤、頭-喉腫瘤、肝癌和/或上述腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
19.根據(jù)權(quán)利要求12-18中任一項的用途，其特征在于，所述的固態(tài)腫瘤是乳腺、支氣管、結(jié)腸直腸和/或前列腺癌和/或上述腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
20.根據(jù)權(quán)利要求12-19中任一項的用途，其特征在于，所述的泌尿生殖道的腫瘤是膀胱癌和/或該腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
21.根據(jù)權(quán)利要求12-20中任一項的用途，其特征在于，所述的過程控制是對抗腫瘤治療效果的監(jiān)視。
22.根據(jù)權(quán)利要求12-21中任一項的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑被用于轉(zhuǎn)移、侵襲、浸潤、腫瘤生長和/或血管生成的預(yù)防(Prophylaxe)、防止(Prevention)、診斷、減輕、治療、過程控制和/或術(shù)后治療。
23.根據(jù)權(quán)利要求12-22中任一項的用途，其特征在于，所述的過程控制是對抗腫瘤治療效果的監(jiān)視。
24.根據(jù)權(quán)利要求12-23中任一項的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑被用于聯(lián)合治療。
25.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的聯(lián)合治療包括化療、細胞生長抑制治療和/或放射治療。
26.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的聯(lián)合治療包括輔助的、生物特定的治療形式。
27.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的治療形式是免疫治療。
28.根據(jù)權(quán)利要求12-27中任一項用于提高腫瘤細胞對細胞生長繁殖抑制和/或放射線的敏感性的用途。
29.根據(jù)權(quán)利要求12-28中任一項用于抑制細胞的生存能力、增殖速率、引發(fā)細胞死亡和/或細胞循環(huán)停止的用途。
30.根據(jù)權(quán)利要求權(quán)利要求12-29中任一項的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑被配制成凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋片劑、預(yù)混物、乳液、浸液配方、滴劑、濃縮液、顆粒、糖漿、小丸、大丸劑、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑，并使用。
31.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑在制劑中存在的濃度為0.1-99.5重量％，優(yōu)選為0.5-95.0重量％，更優(yōu)選為20.0-80.0重量％。
32.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的制劑經(jīng)口服、皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)和/或局部使用。
33.根據(jù)權(quán)利要求12-32中任一項的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑以每24小時大于0.1g/kg體重的總量使用。
34.根據(jù)權(quán)利要求12-33中任一的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑以每24小時0.05-500g/kg、優(yōu)選5-100g/kg體重的總量使用。
35.用于治療腫瘤疾病的方法，其特征在于，將根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或具有有效量的權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑與生物體接觸。
36.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑用于抑制膠原IV和/或谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶(GST)的用途。
37.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基-1-甲基-脯氨酸-乙酯與異氰酸苯酯在乙腈中反應(yīng)，獲得1-甲基-4-苯基氨基羰基氧基-脯氨酸乙酯。
38.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基-1-甲基-脯氨酸-異丁酯與異氰酸苯酯在乙腈中反應(yīng)，獲得1-甲基-4-苯基氨基羰基氧基-脯氨酸-異丁酯。
39.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基脯氨酸在甲醛和Pd/C中、在氫化裝置中進行反應(yīng)，獲得4-羥基-1-甲基-脯氨酸。
40.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基-脯氨酸乙酯和甲醛在乙醇中反應(yīng)，獲得4-羥基-1-甲基-脯氨酸乙酯。
41.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使甲醛、Pd/C和乙醇與4-羥基-脯氨酸異丁酯反應(yīng)，獲得4-羥基-1-甲基-脯氨酸異丁酯。
42.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使甲醛和4-羥基-脯氨酸異丁酯在Pd/C的存在下、在乙醇中反應(yīng)，獲得4-羥基-1-甲基-脯氨酸異丁酯。
43.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基-脯氨酸在乙醇中與HCl接觸，獲得順式-4-羥基-L-脯氨酸乙酯
44.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基脯氨酸在異丁醇中反應(yīng)，獲得順式-4-羥基-L-脯氨酸異丁酯。
45.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使羥基脯氨酸乙酯在乙腈中與甲基碘和三乙胺反應(yīng)，獲得4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸乙酯碘化物。
46.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基脯氨酸異丁酯與甲基碘在三乙胺和乙腈中反應(yīng)，獲得4-羥基-1，1-二甲基-脯氨酸異丁酯碘化物。
47.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基脯氨酸酯懸浮在乙腈中并在乙醚存在下與相應(yīng)的烷基溴接觸，獲得4-羥基-1-烷基-脯氨酸酯溴化物。
48.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過將相應(yīng)的氫溴化物溶解在氯仿中，并與氨氣接觸，獲得4-羥基-1-環(huán)己基-脯氨酸異丁酯。
49.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的方法，其特征在于，通過使4-羥基脯氨酸異丁酯、甲基碘、三乙胺在乙腈中接觸，獲得4-羥基-1-二苯基甲基-脯氨酸異丁酯氫溴化物。
50.試劑盒，包含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的的化合物和/或根據(jù)權(quán)利要求6-11中任一項的藥劑，任選地具有用于組合試劑盒內(nèi)含物的信息。
51.根據(jù)上述權(quán)利要求的試劑盒用于預(yù)防或治療腫瘤疾病的用途。
52.含有根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的雜交分子和/或前藥分子。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的雜交分子、前藥分子和/或根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的衍生物、代謝產(chǎn)物、對映異構(gòu)體和/或同分異構(gòu)體用于預(yù)防或治療腫瘤疾病的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及脯氨酸衍生物及其鹽、含有所述衍生物或其鹽的藥劑以及所述藥劑用于治療腫瘤的用途。本發(fā)明還涉及用于制備所述化合物和藥劑的方法。
文檔編號A61K31/402GK1942438SQ200380110862
公開日2007年4月4日 申請日期2003年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月18日
發(fā)明者措澤·B·扎拉馬 申請人:措澤·B·扎拉馬