專利名稱：螺旋藻制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種養(yǎng)血固本的中藥制劑，特別是含有螺旋藻的新的提取物的藥物制劑。
背景技術(shù)：
螺旋藻又名藍(lán)藻，為純天然植物。螺旋藻有以下特點(diǎn)，一是蛋白質(zhì)含量高(65％左右)，為目前地球上含蛋白質(zhì)量最高的植物；二是必須氨基酸構(gòu)成合理，接近聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)蛋白質(zhì)咨詢小組確定的理想蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)；三是易被消化吸收，蛋白質(zhì)真消化率達(dá)75％；四是藻體內(nèi)含豐富的維生素及多種微量元素如硒，鋅，鐵等，因此，不少科學(xué)家認(rèn)為它是“人類未來的超級(jí)保健食品”。
目前螺旋藻作為保健食品在超級(jí)市場廣為銷售。
螺旋藻具有保健功能，但螺旋藻的優(yōu)良的醫(yī)藥功能尚未開發(fā)。
近幾十年來，人類與放射性物質(zhì)接觸而受輻射損傷的機(jī)會(huì)正在增大。以癌癥為例，全世界每年約600萬新病人(中國約100萬)，其中約70％需用放射線治療，約40％需用放療根治，其它如鈾、釷礦開采、冶煉，核電站，核燃料加開廠，核武器試驗(yàn)，使用放射性核素的科研、醫(yī)療、工家業(yè)部門，都不同程度地使有關(guān)人員遭到輻射損傷的危害，尤其是進(jìn)行放療的癌癥病人，部分人因毒、副反應(yīng)太大中斷治療，其它人亦飽受輻射損傷的痛苦。
目前，盡管許多化學(xué)合成藥物被廣泛用于抗輻射研究，但由于其細(xì)胞毒性及遺傳毒性，實(shí)際使用上尚不盡如人意，尋找天然抗輻射物質(zhì)，已引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛重視。
螺旋藻多糖蛋白。在中醫(yī)古籍無記載，系現(xiàn)代新發(fā)現(xiàn)的中藥材。經(jīng)測定，螺旋中含有65％左右的蛋白質(zhì)和15％左右的碳水化合物(多糖)。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)用螺旋藻制備的螺旋藻提取物(含有多糖蛋白)，有良好的抗輻射、抗化療副反應(yīng)作用和一定的抗腫瘤效果，為此開發(fā)了用螺旋藻制成的提取物以及含有該提取物的藥物制劑，并將其用于腫瘤放化療的輔助治療藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種螺旋藻提取物，該提取物是由天然植物螺旋藻(SpiruIimapIatcmsis)中提取的有效部位。
本發(fā)明還提供本發(fā)明的螺旋藻提取物的制備方法，以及含有生理有效量的以本發(fā)明的螺旋藻提取物為藥物活性成分的藥物制劑。
本發(fā)明還提供用本發(fā)明的螺旋藻提取物在制備益氣養(yǎng)血，扶正固本。對(duì)放、化療的癌癥患者有升高白細(xì)胞、保護(hù)骨髓的作用的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的螺旋藻提取物，其特征在于，與硫酸蒽酮反應(yīng)呈蘭色，與茚三酮反應(yīng)呈紫色，多糖含量不低于10％，蛋白質(zhì)的含量不低于5％。
本發(fā)明的螺旋藻提取物，是通過以下方法制備的螺旋藻用水提取，提取液濃縮后加入醇類物質(zhì)或其他單一或混合的有機(jī)溶劑使溶液中產(chǎn)生沉淀，該沉淀物即為本發(fā)明的螺旋藻提取物，該提取物可以通過干燥方法得到干燥物，用該提取物作為藥物活性成分，通過制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)，可以制成可以服用的藥物制劑。
本發(fā)明的螺旋藻提取物優(yōu)選的制備方法是用水提取，用乙醇進(jìn)行沉淀，得到沉淀物。
本發(fā)明的螺旋藻提取物更優(yōu)選的制備方法是用水提取三次，提取液濃縮后加入乙醇使乙醇的濃度達(dá)到70％，得到的沉淀物。
本發(fā)明的螺旋藻提取物特別優(yōu)選的制備方法是取螺旋藻，分別加水7倍、5倍、5倍量、80℃提取三次，每次0.5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.15-120(60℃測)，放冷，加乙醇使含醇量至70％，攪勻，放置24小時(shí)，濾過，收集沉淀物，減壓干燥(70℃)，粉碎。
本發(fā)明提供的含有本發(fā)明的螺旋藻提取物的藥物制劑可以是任何適合服用的劑型，優(yōu)選的是口服劑型。本發(fā)明的藥物制劑，可以是單位劑量的制劑形式，根據(jù)制劑的需要，其中可以加入藥物可接受的載體。載體的比例可根據(jù)制劑的需要占組合物重量比的0.1-99.9％，其余為活性組分，活性組分的量在單位劑量的制劑中可以是1-1000mg，優(yōu)選的是50-500mg，更優(yōu)選的是100-400mg，其余為藥物可接受的載體。
本發(fā)明的藥物制劑的制備方法可以是常規(guī)的藥物制劑的制備方法，如將原料和輔料混合均勻，根據(jù)制劑學(xué)常規(guī)技術(shù)制成不同的適合服用的劑型。
本發(fā)明的藥物制劑可以制成任何適合服用的劑型，這些劑型選自片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、糖漿劑、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑、貼劑、緩釋制劑、控釋制劑。優(yōu)選的是口服劑型。
本發(fā)明的藥物制劑，其口服給藥的制劑如片劑和膠囊通常為一種單位劑量，并含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和濕潤劑。對(duì)于片劑，還可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。
適用的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑。適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉。適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉。
可通過混合，填充，壓片等常用的方法制備固體口服組合物。進(jìn)行反復(fù)混合可使活性成分分布在整個(gè)使用大量填充劑的那些藥物制劑中。
口服液體制劑的形式例如可以是水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可以是一種在使用前可用水或其它適宜的載體復(fù)配的干燥產(chǎn)品。這種液體制劑可含有常規(guī)的添加劑，諸如懸浮劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(它們可以包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、諸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常規(guī)的香味劑或著色劑。
對(duì)于注射劑，制備的液體單位劑型含有本發(fā)明的原料和無菌載體。根據(jù)載體和濃度，可以將此化合物懸浮或者溶解。溶液的制備通常是通過將原料溶解在一種載體中，在將其裝入一種適宜的小瓶或安瓿前過濾消毒，然后密封。輔料例如一種局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑也可以溶解在這種載體中。為了提高其穩(wěn)定性，可在裝入小瓶以后將這種組合物冰凍，并在真空下將水除去。
本發(fā)明的藥物制劑，在制備成藥劑時(shí)可選擇性的加入適合的藥物可接受的載體，所述的載體選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
本發(fā)明的制劑在使用時(shí)根據(jù)病人的情況確定用法用量，可每日服1-3次，每次1-20劑，如1-20針或?；蚱?br> 在用本發(fā)明的提取物制成藥物制劑時(shí)，優(yōu)選的是膠囊劑，優(yōu)選的膠囊劑可以通過以下方法制備取碳酸鈣適量，與螺旋藻提取物混勻，用乙醇制粒，70℃干燥，整粒，裝入膠囊，即得。
本發(fā)明的膠囊制劑具有如下特征[性狀]本品為膠囊劑，內(nèi)容物為灰綠色的粉末氣腥，味咸。
(1)取本品內(nèi)容物0.6g，加水50ml，置85℃水浴上加熱1小時(shí)，時(shí)時(shí)攪拌，濾過。取濾液1ml，加硫酸蒽酮試液(取蒽酮0.5g，硫脲1g，硫酸100ml使溶解，即得)4ml，搖勻，即顯藍(lán)色。
(2)取鑒別(1)項(xiàng)下濾液1ml，加茚三酮試液1滴，置水浴上加熱數(shù)分鐘，即顯紫色。
(3)取內(nèi)容物0.2g，加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，靜置，傾出上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取螺旋藻對(duì)照藥材0.6g，加水60ml，80℃加熱1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml，超聲處理30分鐘，靜置，傾出上清液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
淀粉取鑒別(1)項(xiàng)下濾液4ml，加碘試液1滴，不得顯藍(lán)色。
取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻、精密稱取適量，照氮測定法(中國藥典2000年版一部附錄IX L)測定，即得。
本品每粒含部氮(N)量不得少于23.0mg。
益氣養(yǎng)血，扶正固本。對(duì)放、化療的癌癥患者有升高白細(xì)胞、保護(hù)骨髓的作用。
口服，一次2粒，一日2次。
本發(fā)明是利用螺旋藻提取物中多糖蛋白能溶解于水，而不溶解于醇的特性進(jìn)行設(shè)計(jì)的，多糖蛋白為水溶性，不溶于有機(jī)溶媒，也難溶于60％以上的乙醇中，故本制備工藝以水提取醇沉淀法制備多糖蛋白粗品。多糖蛋白長時(shí)間煮沸或在酸堿條件均易水解，因而本法采用85℃左右的提取溫度(其研究結(jié)果詳見資料5)。在整個(gè)制備過程中，溫度均應(yīng)控制在85℃以下。本發(fā)明處方中碳酸鈣起分散疏松和稀釋作用，若不加入碳酸鈣，則其膠囊成品的溶散時(shí)限不符合要求。為了不使蛋白質(zhì)變性凝固以及不使多糖遇熱糊化，在工藝上進(jìn)行了反復(fù)的模索，多糖蛋白平均得率在10％左右，能適應(yīng)工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明在質(zhì)量控制方面主要是控制多糖蛋白，定性方面利用多糖與硫酸蒽酮的反應(yīng)以及蛋白質(zhì)茚三酮反應(yīng)進(jìn)行化學(xué)鑒別；定量方面，多糖的含量采用硫酸蒽酮法進(jìn)行測定，多糖含量不得低于10％，蛋白質(zhì)的含量采用FOLIN酚法測定，不得低于5％，其它應(yīng)符合中國藥典一部膠囊劑下有關(guān)規(guī)定。
本發(fā)明的藥物制劑經(jīng)過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示具有優(yōu)良的效果抗輻射研究結(jié)果表明本發(fā)明的螺旋藻提取物能明地升高小鼠因注射環(huán)磷酰胺后的外周白細(xì)胞數(shù)，本發(fā)明的螺旋藻提取物組的外周白細(xì)胞數(shù)為3010±285(106/L)明顯高于模型組2460±380，P＜0.01。同時(shí)，也能降低小鼠因環(huán)磷酰胺引起的微核率增長數(shù)，經(jīng)股骨骨髓涂片計(jì)微核數(shù)表明本發(fā)明的螺旋藻提取物組的骨髓微核率(％)為5.5±2.0，與模型組14.8±6.7相比較有顯著性異P＜0.01，與咖啡酸組比較優(yōu)于咖啡酸組的8.3±3.7。說明本發(fā)明的螺旋藻提取物有對(duì)抗化學(xué)物質(zhì)引起的致突變作用。
另一組試驗(yàn)，改用60C0照射，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的螺旋藻提取物能顯著逆轉(zhuǎn)小鼠因進(jìn)行60C0照射引起的白細(xì)胞低下癥，同時(shí)也能對(duì)抗因照射引起的骨髓微核率的增高。
本發(fā)明的螺旋藻提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤的試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明的螺旋藻提取物1.2g/kg對(duì)小鼠腹水型肝癌有明顯的延長生命作用，與對(duì)照組相比生命延長率分別為39.6％、36.6％、36.2％。(三批)P值均小于0.01。
另一組試驗(yàn)表明本發(fā)明的螺旋藻提取物白對(duì)小鼠肉瘤(S180)的生長有明顯的抑瘤作用，三批的抑制率分別為36.6％，29.6％、36％，與對(duì)照組相比P＜0.01。以上實(shí)驗(yàn)提示本發(fā)明的螺旋藻提取物，具有抗輻射及抗腫瘤作用，具有很高的臨床使用價(jià)值。
本發(fā)明的螺旋藻提取物能明顯地提高小鼠因注射環(huán)磷酰胺后的外周白細(xì)胞下降數(shù)，同時(shí)能降低小鼠因注射環(huán)磷酰胺引起的微核率增長。
此外，本發(fā)明的螺旋藻提取物對(duì)因鈷60照射引起的小鼠低白癥及骨髓微核率增高癥也取得了滿意的實(shí)驗(yàn)效果。說明螺旋藻多糖蛋白具有對(duì)抗化學(xué)物質(zhì)引起的致突變作用，提示本品對(duì)因放療化療及各種輻引起的毒副反應(yīng)有一定的保護(hù)作用?？鼓[瘤實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的螺旋藻提取物對(duì)小鼠腹水型肝癌有膽顯的延長生命作用，其生存天數(shù)平均增長了37％左右，與對(duì)照組相比P＜0.01，其延長生存天數(shù)接近于5-Fu。螺旋藻多糖蛋白對(duì)小鼠肉瘤S180的生長也有明顯的抑瘤作用，三組實(shí)驗(yàn)的平均抑瘤率為35％，用藥組的腫瘤生長率明顯輕于對(duì)照組的腫瘤生長率，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理P＜0.01。以上實(shí)驗(yàn)由中國藥科大學(xué)生理室進(jìn)行。
本發(fā)明的螺旋藻提取物的藥物制劑的毒性實(shí)驗(yàn)研究情況急性毒性試驗(yàn)結(jié)果用螺旋藻多糖蛋白15g連續(xù)8天灌胃給藥，給藥期間無不良反應(yīng)發(fā)生，在觀察期8天內(nèi)無一例死亡，各組小鼠體重增加，于給藥后第8天處死全部小鼠，并對(duì)其心、肝、脾、肺、腎進(jìn)行檢查亦未見任何異常；表明螺旋藻多糖蛋白灌胃給藥的LD50大于15g/kg。
長期毒性試驗(yàn)結(jié)果用相當(dāng)于人臨床治療量的5倍和50倍螺旋藻多糖蛋白，對(duì)小鼠連續(xù)給藥150天，給藥期間大鼠的生長，食欲活動(dòng)等均無明顯變化，停藥后處死70％的大鼠，其余30％的大鼠停藥后14天(恢復(fù))處死；對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行血液學(xué)及臟器組織形態(tài)學(xué)鏡檢，結(jié)果表明；大鼠未引起不可逆性的病理變化。各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍。給藥組與對(duì)照組比較無明顯差異。
本發(fā)明的螺旋藻提取物的藥物制劑的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)在中國藥科大學(xué)植化室進(jìn)行了螺旋藻多糖蛋白膠囊的穩(wěn)定性試驗(yàn)，試驗(yàn)期間每隔一個(gè)月進(jìn)行性狀、水份、崩解時(shí)限、含量及衛(wèi)生學(xué)等項(xiàng)目檢查，結(jié)果表明，在室溫下密閉放置，本品基本穩(wěn)定。
本發(fā)明采用了新的工藝技術(shù)，制備出了新的螺旋藻提取物，并通過實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的螺旋藻提取物具有優(yōu)良的治療效果，本發(fā)明的螺旋藻提取物及其制劑具有工藝簡單，有效成分含量高，質(zhì)量穩(wěn)定，藥效高，副作用少，吸收好等特點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1取螺旋藻1200g粉，分別加水7倍、5倍、5倍量、80℃提取三次，每次0.5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.15-120(60℃測)，放冷，加乙醇使含醇量至70％，攪勻，放置24小時(shí)，濾過，收集沉淀物，減壓干燥(70℃)，粉碎，加入碳酸鈣適量(30％)，混勻，用乙醇制粒，70℃干燥，整粒，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
實(shí)施例2螺旋藻粉1200g，加水85℃，熱提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾合并三次濾液。減壓濃縮至相對(duì)密度1.15-120(60℃)，放冷，加入乙醇使具含醇量達(dá)70％，攪勻，加入適量碳酸鈣(30％)，混勻，用乙醇制粒，70℃減壓干燥，整粒裝入1000顆硬膠囊即得。
實(shí)施例3螺旋藻提取物280g，碳酸鈣100g，混勻，用乙醇制粒，70℃減壓干燥，整粒裝入1000顆硬膠囊即得。
實(shí)施例4螺旋藻提取物280g，碳酸鈣100g，混勻，用乙醇制粒，70℃減壓干燥，整粒，加入10g硬脂酸鎂，壓片，包衣，制成1000片包衣片。
實(shí)施例5螺旋藻提取物280g，蔗糖100g，糊精50g，混勻，用糖漿制粒，70℃減壓干燥，整粒，裝入250袋顆粒袋中。
權(quán)利要求
1.一種螺旋藻提取物，其特征在于，與硫酸蒽酮反應(yīng)呈蘭色，與茚三酮反應(yīng)呈紫色，多糖含量不低于10％，蛋白質(zhì)的含量不低于5％。
2.權(quán)利要求1的提取物的制備方法，經(jīng)過螺旋藻用水提取，提取液用乙醇沉淀的步驟。
3.權(quán)利要求2的制備方法，所述用水提取是用水提取三次，所述提取液是經(jīng)過濃縮的，所述用乙醇沉淀是濃縮液加入乙醇使乙醇的濃度達(dá)到70％，得到沉淀物的過程。
4.權(quán)利要求3的制備方法，經(jīng)過以下步驟，取螺旋藻，分別加水7倍、5倍、5倍量、80℃提取三次，每次0.5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.15-120(60℃測)，放冷，加乙醇使含醇量至70％，攪勻，放置24小時(shí)，濾過，收集沉淀物，減壓干燥(70℃)，粉碎。
5.含有生理有效量的權(quán)利要求1的提取物的藥物制劑。
6.權(quán)利要求5的藥物制劑，含有權(quán)利要求1的提取物的量在單位劑量的制劑中是1-1000mg，其余為藥物可接受的載體。
7.權(quán)利要求5的藥物制劑，含有權(quán)利要求1的提取物的量在單位劑量的制劑中是50-500mg，其余為藥物可接受的載體。
8.權(quán)利要求5的藥物制劑是任何適合服用的藥物劑型。
9.權(quán)利要求5的藥物制劑是膠囊劑。
10.權(quán)利要求1的提取物或含有它的藥物制劑在制備治療和/或預(yù)防益氣養(yǎng)血，扶正固本，對(duì)放、化療的癌癥患者有升高白細(xì)胞、保護(hù)骨髓的作用的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種螺旋藻制劑，特別是含有螺旋藻的新的提取物的藥物制劑，該制劑具有養(yǎng)血固本之功效，本發(fā)明的螺旋藻提取物，其特征在于，與硫酸蒽酮反應(yīng)呈藍(lán)色，與茚三酮反應(yīng)呈紫色，多糖含量不低于10％，蛋白質(zhì)的含量不低于5％。
文檔編號(hào)A61P1/14GK1562332SQ20041000899
公開日2005年1月12日 申請(qǐng)日期2004年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月23日
發(fā)明者張玉國 申請(qǐng)人:海南思邁藥業(yè)有限公司