專利名稱：動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(cc株)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物制品領(lǐng)域，尤其涉及一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)。
背景技術(shù)：
一、1996年8月，從長(zhǎng)春一養(yǎng)雞場(chǎng)分離一毒株，經(jīng)雞胚和細(xì)胞培養(yǎng)，電鏡觀察、基因克隆和序列分析、血凝譜測(cè)定，紅細(xì)胞凝集價(jià)測(cè)定、病毒含量測(cè)定、特異性實(shí)驗(yàn)、最小免疫量測(cè)定、最小致死量雞胚平均死亡時(shí)間測(cè)定，腦內(nèi)致病指數(shù)測(cè)定，對(duì)一日齡雞的毒力試驗(yàn)等，證明系新城疫自然弱毒株。又經(jīng)疫苗制備工藝研究、疫苗安全性實(shí)驗(yàn)、免疫劑量和免疫途徑篩選試驗(yàn)、抗體消長(zhǎng)規(guī)律和攻毒試驗(yàn)、疫苗毒穩(wěn)定性試驗(yàn)，同居感染試驗(yàn)以及田間和區(qū)域?qū)嶒?yàn)、證明該毒株為自然弱毒疫苗株。
二、正常情況下，動(dòng)物的免疫系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。但是，我國(guó)的養(yǎng)殖業(yè)受飼料質(zhì)量、抗生素藥和化藥等的不當(dāng)使用、環(huán)境因素、病原微生物的侵襲等，常使動(dòng)物群體免疫功能低下、免疫系統(tǒng)障礙和紊亂，因而發(fā)病率高，動(dòng)物的生產(chǎn)性能大大降低。
機(jī)體對(duì)疫苗抗原的免疫應(yīng)答是綜合性的，包括特異和非特異，體液和細(xì)胞介導(dǎo)等。但是，對(duì)于某些病毒和細(xì)菌等，相應(yīng)抗原疫苗使機(jī)體的免疫應(yīng)答不足以抵御侵襲，而必須輔佐性的調(diào)動(dòng)、調(diào)節(jié)、增強(qiáng)整個(gè)免疫系統(tǒng)的功能，才能使疫苗有效地起到保護(hù)作用。
用細(xì)胞因子和雞新城疫活疫苗而組合的新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑能非特異性地激活、調(diào)節(jié)、增強(qiáng)動(dòng)物的細(xì)胞介導(dǎo)免疫和體液免疫，廣譜地增強(qiáng)動(dòng)物的抗感染能力，提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。而與疫苗合用，調(diào)節(jié)體液免疫和細(xì)胞免疫的平衡，提高特異性抗體的產(chǎn)生，提高抗體效價(jià)和延緩抗體在體內(nèi)的分解，調(diào)節(jié)疫苗抗原引起的免疫反映，刺激各種細(xì)胞因子的產(chǎn)生。
綜上所述，研制的新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)強(qiáng)劑的使用對(duì)象，一是針對(duì)動(dòng)物群體免疫功能低下，生產(chǎn)性能低下而作為免疫激活、調(diào)節(jié)和增強(qiáng)劑；二是針對(duì)某些疫苗免疫原性差、保護(hù)率低而作為免疫佐劑。由于病毒性免疫增強(qiáng)劑的創(chuàng)新應(yīng)用，而使這兩種作用提高到新的層次和水平。

發(fā)明內(nèi)容
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的構(gòu)思是科學(xué)地將細(xì)胞因子(胸腺肽，轉(zhuǎn)移因子)和新城疫弱毒免疫激活劑按最佳比例配伍在一起，研制成新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑。本發(fā)明的積極效果在于1.安全性好胸腺肽，轉(zhuǎn)移因子是充分定性的，是無(wú)毒的，雞新城疫弱毒對(duì)動(dòng)物亦無(wú)免疫毒性。該產(chǎn)品進(jìn)行的小白鼠、大鼠急性毒性試驗(yàn)；家兔、豬的慢性毒性試驗(yàn)；以及特殊毒性試驗(yàn)，均證明毒性極其輕微。需說(shuō)明的是，雞新城疫病毒的抗腫瘤作用亦是科學(xué)界被證實(shí)而成為研究的熱點(diǎn)并普遍用于研制人的抗腫瘤制劑。
2.臨床應(yīng)用效果好。一是與疫苗合用，使動(dòng)物的細(xì)胞免疫(包括淋巴細(xì)胞數(shù)、CD4/CD8比值，IL-2，干擾素等)增強(qiáng)，持續(xù)時(shí)間達(dá)20天之久；體液免疫(特異性抗體效價(jià))增強(qiáng)，效價(jià)提高2個(gè)滴度以上，大大提高了疫苗的免疫效果。二是給哺乳動(dòng)物單用于新型免疫增強(qiáng)劑；動(dòng)物的低下、障礙、紊亂的免疫功能，迅速得以糾正，動(dòng)物的細(xì)胞免疫(淋巴細(xì)胞數(shù)、CD4/CD8比值，IL-2，干擾素等)增強(qiáng)，發(fā)病率迅速降低，動(dòng)物的體質(zhì)、體能得到改善，生產(chǎn)性能(增重等)提高。如豬增重顯著。
3.新型免疫增強(qiáng)劑不含抗生素和化藥，給動(dòng)物使用不會(huì)造成細(xì)菌的耐藥性和在動(dòng)物性產(chǎn)品中的殘留。雞新城疫弱毒抗腫瘤的供銷，亦使動(dòng)物性產(chǎn)品的食用加大安全力度?？傊景l(fā)明在保障人類健康上亦發(fā)揮巨大的作用。
具體實(shí)施例方式
具體方案如下1.小牛胸腺—漂細(xì)—摘取結(jié)締組織和脂肪—絞碎—?jiǎng)驖{—反復(fù)凍融—甩干—提取—離心—超濾—胸腺肽超濾液—中間品檢驗(yàn)。
2.豬脾臟—漂洗—摘除結(jié)締組織和脂肪—搗碎—?jiǎng)驖{—反復(fù)凍融—離心—超濾—轉(zhuǎn)移因子超濾液—中間品檢驗(yàn)。
3.雞新城疫弱毒株(CC株)—雞胚成纖維細(xì)胞—營(yíng)養(yǎng)液換維持液—調(diào)PH值—觀察細(xì)胞病變—凍融—弱毒細(xì)胞培養(yǎng)物—中間品檢驗(yàn)。
4.配制10mg/ml的胸腺肽超濾液—配制5mg/ml的轉(zhuǎn)移因子超濾液—配制每0.1ml含毒108.5TCID50的弱毒細(xì)胞培養(yǎng)物-0.5∶1∶0.1的比例混合。
5.凍干品加適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑—分裝—凍干—貼簽—包裝；2ml/支，內(nèi)含0.5ml(5mg)胸腺肽，1ml(5mg)轉(zhuǎn)移因子，0.1ml(含毒108.5TCID50)弱毒細(xì)胞培養(yǎng)物，0.4ml(5％脫脂乳)。每支為1頭份。濕品分裝—蓋塞—封蠟—貼簽—包裝；3.2ml/瓶，內(nèi)含1ml(10mg)胸腺肽，2ml(10mg)轉(zhuǎn)移因子，0.2ml(含毒2×108.5TCID50)弱毒細(xì)胞培養(yǎng)物，每瓶為2頭份。
6.本發(fā)明的使用對(duì)象為豬、牛、羊、犬等哺乳動(dòng)物。仔畜，每頭使用劑量為1頭份。成畜每頭使用劑量為2頭份。即為動(dòng)物最佳使用劑量。與疫苗合用若疫苗為滅活疫苗，與新星免疫增強(qiáng)劑應(yīng)分別注射，不能合注；若疫苗為活疫苗，新型免疫增強(qiáng)劑的濕品可用作溶媒，溶后一并注射，亦可分別注射。如果動(dòng)物的免疫程序中使用多種疫苗，只要和其中一種疫苗聯(lián)合使用，即可達(dá)到和所有使用疫苗聯(lián)合的效果。如果一種疫苗需多次免疫，在一免時(shí)，合并應(yīng)用新型免疫增強(qiáng)劑為宜。
權(quán)利要求
1.一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)其特征在于用新分離鑒定的雞新城疫自然弱毒疫苗株(CC株)，制備新城疫活疫苗(CC株)，按新城疫活疫苗含毒108.5TCID50、胸腺肽5mg、轉(zhuǎn)移因子5mg的比例制備成哺乳動(dòng)物使用的細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)，其特征在于本發(fā)明產(chǎn)品，用作哺乳動(dòng)物的廣譜、非特異免疫激活、調(diào)節(jié)和增強(qiáng)劑，適應(yīng)癥是動(dòng)物的免疫功能低下、障礙、紊亂和生產(chǎn)性能低下。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)，其特征在于給幼畜的使用劑量為1頭劑，肌注，給成畜的使用劑量為2頭劑，肌注。1頭劑含雞新城弱毒108.5TCID50、胸腺肽5mg、轉(zhuǎn)移因子5mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)，其特征在于本發(fā)明產(chǎn)品亦可和動(dòng)物免疫程序中所使用的疫苗聯(lián)合應(yīng)用，免疫程序中如使用多種疫苗，只和其中的一種聯(lián)合即可達(dá)到和所有使用疫苗聯(lián)合的效果，如為弱毒疫苗，可與任何弱毒疫苗合并注射或作為疫苗稀釋劑使用，如為滅活疫苗，應(yīng)分開(kāi)注射，如同一種疫苗多次免疫，只和首免聯(lián)合即可，也可多次重復(fù)使用。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物制品領(lǐng)域，尤其涉及一種動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑細(xì)胞因子佐劑雞新城疫活疫苗(CC株)。本發(fā)明是科學(xué)地將細(xì)胞因子(胸腺肽，轉(zhuǎn)移因子)和新城疫弱毒免疫激活劑按最佳比例配伍在一起，研制成新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)劑。研制的新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)強(qiáng)劑的使用對(duì)象，一是針對(duì)動(dòng)物群體免疫功能低下，生產(chǎn)性能低下而作為免疫激活、調(diào)節(jié)和增強(qiáng)劑；二是針對(duì)某些疫苗免疫原性差、保護(hù)率低而作為免疫佐劑。
文檔編號(hào)A61P31/14GK1759886SQ200410011139
公開(kāi)日2006年4月19日 申請(qǐng)日期2004年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月11日
發(fā)明者金擴(kuò)世, 金寧一 申請(qǐng)人:金擴(kuò)世, 金寧一