專利名稱：一種植物組培消毒方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物組培外植體的消毒方法，屬于植物組培技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
植物組織培養(yǎng)技術(shù)近幾年發(fā)展很快，已經(jīng)成為名優(yōu)植物工廠化育苗技術(shù)的重要手段之一。國內(nèi)外對(duì)植物組織培養(yǎng)重視，其原因在于，從一個(gè)優(yōu)良植物株選取組織、器官、作為培養(yǎng)材料，通過人為物理、化學(xué)等環(huán)境的調(diào)節(jié)，可以有計(jì)劃的在短期內(nèi)，培育多株遺傳特性相同的優(yōu)良種苗。植物組培外植體的消毒，屬于植物組培技術(shù)領(lǐng)域中不可缺少的首要環(huán)節(jié)，是組織培養(yǎng)成敗的第一要素。但是，由于植物材料的消毒較難掌握，名優(yōu)植物材料消毒實(shí)踐中出現(xiàn)的問題是，消毒時(shí)間長了植物材料死亡，消毒時(shí)間短了植物材料表面細(xì)菌不能殺死，致使植物材料污染死亡。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種毒副作用小，操作簡便，適應(yīng)范圍寬消毒效果好的方法及消毒劑組合物。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的這種植物組培消毒方法，其特征在于將植物的種子清洗干凈或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面污垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水余量的消毒劑浸泡5-30分鐘。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中次氯酸鈉與氯化汞的應(yīng)用比例為1-3∶0.1。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中含有過氧化氫3-10％。
所述的植物組培消毒方法，消毒劑中的水經(jīng)過1.2kg/cm2，121℃，30分鐘的高壓消毒處理。
所述的植物組培消毒方法，植物組培材料在消毒劑中的浸泡時(shí)間包括，水稻、小麥種子20～30分鐘，木本植物6～15分鐘，草本植物5～10分鐘。
所述的植物組培消毒方法，種子去殼后浸泡在消毒劑中用搖床振蕩30分鐘消毒。
所述的植物組培消毒方法，于植物莖段或莖尖用流水沖洗表面污垢，用70％酒精沖洗一次，再用消毒劑浸泡5-10分鐘。
本發(fā)明的植物組培消毒方法的適用范圍比較廣，不僅適用于裸露的種子，同時(shí)對(duì)木本植物，草本植物，藥用植物都顯示了很好的效果。尤其是對(duì)一些國外引進(jìn)的名優(yōu)資源，使用該方法以毒副作用小，效果明顯等優(yōu)勢(shì)，為名優(yōu)資源保存利用提供了有利的保障。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合本發(fā)明的植物組培消毒方法的應(yīng)用實(shí)例，說明本發(fā)明的具體實(shí)施方式
。
1、消毒器皿準(zhǔn)備選取200mL的三角瓶，使用前沖洗干凈，用塑料膜封口，經(jīng)高壓消毒后備用。
2、消毒劑的準(zhǔn)備分別配制0.1％氯化汞(重量％)溶液，1％、2％、3％的次氯酸鈉(重量％)溶液，5％、10％的過氧化氫(體積％)溶液，使用前按需要比例混合；經(jīng)高壓消毒的無菌水。
3、器械的準(zhǔn)備消毒濾紙、手術(shù)刀、剪刀、鑷子等。
實(shí)施例1將水稻種子去殼后放到150mL三角瓶中，用無菌水沖洗一遍，加入次氯酸鈉∶氯化汞為的3∶0.1消毒劑，置于搖床震蕩30分鐘，用無菌水沖洗3～4遍，接種到培養(yǎng)基中，在暗培養(yǎng)環(huán)境25～27℃的條件下，3天即可出芽，消毒效果100％。
實(shí)施例2從田間取轉(zhuǎn)基因油麻新鮮莖尖，用流水從洗表面污垢，用70％酒精沖一次，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為5～10分鐘，無菌水沖洗至清，而后選擇帶芽點(diǎn)或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經(jīng)備好的培養(yǎng)基中，材料的消毒效果95％以上，培養(yǎng)3～5天長出新芽。
實(shí)施例3從田間取轉(zhuǎn)基因油麻新鮮莖尖，用流水從洗表面污垢，用70％酒精沖一次，加入過氧化氫∶次氯酸鈉∶氯化汞為5∶1∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為10～15分鐘，無菌水沖洗至清，而后選擇帶芽點(diǎn)或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經(jīng)備好的培養(yǎng)基中，材料的消毒效果95％以上，培養(yǎng)3～5天長出新芽。
實(shí)施例4選取驅(qū)蚊草莖段或莖尖，用首先流水沖洗，然后用70％酒精10秒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為5～8分鐘，最后用備好的無菌水沖洗至清，用已消毒手術(shù)刀分割成0.5cm左右，接種到所需培養(yǎng)基中，采用該方法消毒效果達(dá)95％以上。
實(shí)施例5霍霍巴試管污染苗的消毒，根據(jù)污染程度不同，首先用無菌水沖洗，再用70％酒精消毒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為2∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為6～10分鐘，用無菌水沖洗至清，用濾紙吸去多余水分，接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基中，消毒效果可以達(dá)到90％以上。
實(shí)施例5草櫻花的消毒，選取草櫻花的莖段，經(jīng)流水沖洗去表面塵土，70％酒精消毒10秒，加入次氯酸鈉∶氯化汞為1∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為5～8分鐘，用無菌水沖洗至清，用濾紙吸去多余水分，接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基中，消毒效果可以達(dá)到90％以上；在正常的培養(yǎng)條件下，5天可以觀察到新的生長點(diǎn)。
實(shí)施例6珠美海棠試管苗的消毒，用流水從洗表面污垢，用70％酒精沖一次，加入過氧化氫∶氯化汞為10∶0.1的消毒劑浸泡，消毒時(shí)間為15～20分鐘，無菌水沖洗至清，而后選擇帶芽點(diǎn)或葉圓基的材料，剪成0.5cm的莖段或莖尖，接種到已經(jīng)備好的培養(yǎng)基中，材料的消毒效果95％以上，培養(yǎng)3～5天長出新芽。
權(quán)利要求
1.一種植物組培消毒方法，其特征在于將植物的種子清洗干凈或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面污垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水余量的消毒劑浸泡5-30分鐘。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培消毒方法，其特征在于消毒劑中次氯酸鈉與氯化汞的應(yīng)用比例為1-3∶0.1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培消毒方法，其特征在于消毒劑中含有過氧化氫3-10％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培消毒方法，其特征在于消毒劑中的水經(jīng)過1.2kg/cm2，121℃，30分鐘的高壓消毒處理，。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培消毒方法，其特征在于植物組培材料在消毒劑中的浸泡時(shí)間包括，水稻、小麥種子20～30分鐘，木本植物6～15分鐘，草本植物5～10分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的植物組培消毒方法，其特征在于種子去殼后浸泡在消毒劑中用搖床振蕩30分鐘消毒。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物組培消毒方法，其特征在于植物莖段或莖尖用流水沖洗表面污垢，用70％酒精沖洗一次，再用消毒劑浸泡5-10分鐘。
全文摘要
本發(fā)明提供一種植物組培消毒方法，其特征在于將植物的種子清洗干凈或植物材料剪成帶葉芽的莖段，洗去表面污垢，用組成至少包括如下比例的次氯酸鈉1－3％，氯化汞0.05－0.5％，水余量的消毒劑浸泡5－30分鐘。本發(fā)明的植物組培消毒方法的適用范圍比較廣，不僅適用于裸露的種子，同時(shí)對(duì)木本植物，草本植物，藥用植物都顯示了很好的效果。尤其是對(duì)一些國外引進(jìn)的名優(yōu)資源，使用該方法以毒副作用小，效果明顯等優(yōu)勢(shì)，為名優(yōu)資源保存利用提供了有利的保障。
文檔編號(hào)A61L2/18GK1561695SQ200410012209
公開日2005年1月12日 申請(qǐng)日期2004年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月26日
發(fā)明者王玉珍, 羅景蘭, 史印山, 徐進(jìn) 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所