專利名稱：磺酰脲和磺酰硫脲衍生物在制備抗糖尿病藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及磺酰胺取代的磺酰脲和磺酰硫脲衍生物在制備抗糖尿病藥物中的新用途。
背景技術(shù)：
糖尿病是胰島素絕對或相對缺乏，并引起糖代謝紊亂、繼發(fā)脂肪、蛋白質(zhì)、水、鹽等代謝障礙及多種急、慢性并發(fā)癥的一種常見的代謝性疾病，發(fā)病率高，約占工業(yè)化國家總?cè)丝诘?％。糖尿病病因很復(fù)雜，常伴有血小板聚集性增加、動脈血脂異常、心肌梗塞、腦血管障礙等血管并發(fā)癥。糖尿病作為直接死因在患者中僅有1～4％，絕大多數(shù)死于慢性并發(fā)癥。糖尿病治療藥物近年來已取得較大的發(fā)展，如高效的磺酰脲類降糖藥、過氧化酶增殖體激活受體激動劑、胰島素分泌促進劑等新藥相繼上市，使糖尿病疾病的治療有更多的選擇?，F(xiàn)有的降糖藥雖能促進胰島素分泌，降低血糖，但是大多存在致低血糖副作用、對胰島素增敏作用不強、對心血管并發(fā)癥治療作用較差等缺點，因此開發(fā)高效理想的降糖藥和兼有治療糖尿病性并發(fā)癥的降糖藥具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
磺酰脲類口服降糖藥是臨床廣泛使用的治療II型糖尿病的藥物，通過阻斷β胰島細胞上的KATP通道，觸發(fā)胰島素分泌，導(dǎo)致血糖下降。新型的磺酰脲類口服降糖藥格列美脲不僅具有高效的降糖作用，同時還兼有能提高胰島素的敏感性，為較好的降血糖藥物。本發(fā)明以磺酰脲類降糖藥結(jié)構(gòu)為基本骨架，同時將苯磺酰胺基團引入所設(shè)計的分子結(jié)構(gòu)中，合成了一系列新的磺酰胺取代的磺酰脲和磺酰硫脲衍生物，并對它們的降血糖和抗血栓作用進行了測定，所得到的新的化合物具有降血糖活性，可開發(fā)成為新型的降糖藥物。
下面是本發(fā)明的具體內(nèi)容通式(I)化合物及其藥用鹽在用于制備抗糖尿病藥物中的用途 其中R1代表-H，-CH3，-OCH3，-OH，-NH2，鹵素，-NHCOCH3；R2代表1-8個碳原子的烴基，
R3代表-H，-CH3，-OCH3，鹵素；X代表O，S。
其中優(yōu)選的通式(I)化合物是1-[4-[2-(4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I1)；1-[4-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基)苯磺酰胺基]乙基苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I2)；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I3)；1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I4)；1-[4-[2-(5-甲基-2-乙酰氨基)苯磺酰胺基]乙基苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I5)；1-[4-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基)苯磺酰胺基乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I6)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺酰]-3-環(huán)己基脲(I7)；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-環(huán)己基脲(I8)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I9)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(4-氯苯基)硫脲(I10)；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-氯苯基)硫脲(I11)；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-氯苯基)硫脲(I12)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(2-甲基苯基)硫脲(I13)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(4-甲基苯基)硫脲(I14)；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-甲基苯基)硫脲(I15)；1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-甲氧基苯基)硫脲(I16)；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰基]-3-(4-甲氧基苯基)硫脲(I17)；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(4-甲氧基苯基)硫脲(I18)；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰基]-3-(4-甲氧基苯基)硫脲(I19)。
更優(yōu)選的化合物是1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I4)；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I3)；部分優(yōu)選化合物對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式為
X R1R2I1O4-NHCOCH3 I2O3-CH3，4-NHCOCH3 I3o4-ClI4O4-BrI5O2-NHCOCH3，5-CH3 I6O3-OCH3，4-NHCOCH3 I7OH I8O4-CH3 I9OH I10SH I11S4-CH3 I12S4-ClI13SH I14SH I15S4-CH3 I16S4-BrI17S4-CH3 I18SH I19S4-Cl通式(I)化合物制備方法如下用4-氨乙基苯磺酰胺與取代的苯磺酰氯反應(yīng)，生成中間體(II)，再與相應(yīng)的異氰酸酯或硫代異氰酸酯反應(yīng)生成目的化合物(I)。路線如下
其中關(guān)鍵中間體4-氨乙基苯磺酰胺的制備是通過先將苯乙胺乙?；龠M行氯磺化、氨化、水解獲得。具體反應(yīng)路線如下 本發(fā)明的化合物可制備成各種藥物制劑，制劑包含作為活性劑的通式(I)化合物和藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上可接受的載體是指一種或幾種惰性的、非毒性的固體或液體填充物、稀釋劑、助劑等，它們不逆向與活性化合物或病人發(fā)生作用。劑型可以是片劑、膠囊、丸劑、栓劑、軟膠囊、口服液、混懸劑、注射液等藥劑學(xué)上常用的劑型?？诜盟幤湍z囊含有傳統(tǒng)的賦形劑如填充物、稀釋劑、潤滑劑、分散劑以及粘合劑?？砂凑毡绢I(lǐng)域中熟知的方法進行制備。
以上活性劑的劑量將因配方而異。
一般地，已證明有利的量，為達到所需結(jié)果，每千克體重每24小時給藥的式(I)化合物的總量為約0.01-100mg，優(yōu)選總量約0.1-50mg/kg。如果必要，以幾次單劑量的形式給藥。
具體實施例方式實施例1體外試驗1.動物和試劑1.1動物Sprague-Dawley大鼠，體重280～350g，雌雄兼用，自由飲食，中國藥科大學(xué)動物中心提供，許可證號SCXK(蘇)2002-0001。
1.2受試化合物I1，I2，I3，I4，I5，I6，I7，I8，I11，I12，I13，I14，I15，I16，I17，I18。
1.3試劑與藥品臺盼藍，Chroma進口分裝；雙硫腙(Dithizone，DTZ)，上海試劑三廠；膠原酶II(collagenase type II)、膠原酶IV(collagenase typeIV)、牛血清白蛋白(FractionV，BSA)，Sigma產(chǎn)品；HEPES、Glutamine(谷氨酰胺)，Merck產(chǎn)品；格列美脲(Glimepiride)，格列苯脲(Glibenclamide)為天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司產(chǎn)品，均以DMSO助溶后用KRH孵育液配成1mg/ml的藥液，無菌分裝4℃保存；胰島素放射免疫分析藥盒(IMK414)、胰高血糖素放射免疫分析藥盒(IMK402)，2-Deoxy-D-[1-3H]Glucose(特異活性370GBq/mmol)，中國原子能科學(xué)研究院同位素研究所；DMEM培養(yǎng)基(無糖型)、新生小牛血清(用時56℃滅活30min)GIBCO-BRL產(chǎn)品；谷氨酰胺(Glutamine)，Merck公司；D-葡萄糖和胰島素，Sigma產(chǎn)品；PPO(2，5-二苯基噁唑)、POPOP[1，4-雙2-(5-苯基噁唑基)苯]]，中國醫(yī)藥集團上海生化試劑公司(進口分裝產(chǎn)品)；油紅-O(UK)，二甲基硅油、二甲苯、SDS(十二烷基硫酸鈉)及其它化學(xué)試劑均為市售分析純。
膠原酶II液 膠原酶II溶于PH7.4的KRH液，配成1.5mg/ml，無菌過濾分裝，-20℃保存。
膠原酶IV液膠原酶IV溶于PH7.4的KRH液，配成1.5mg/ml，無菌過濾分裝，-20℃保存。
2.方法2.1目標化合物刺激離體胰島釋放胰島素試驗(1)胰島分離參文獻方法(J.Brunstedt，J.H.Nielsen，A.Lernmark，et al.Isolationof islets from mice and rats.Joseph Larner，Stephenl Pohl(Eds).Methods In DiabetesResearch，vol 1.Laboratory Methods(Part C).Academic Press，Inc.New York，1984245-258)分離大鼠胰島，略加修改。腹腔內(nèi)注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)麻醉大鼠。75％(v/v)乙醇擦拭腹部，沿腹中線打開腹腔，并在腹中部作一橫向切口，充分暴露胰腺。于肝門處行膽總管插管，結(jié)扎膽總管與胰腺總管匯合入十二指腸處。從膽總管插管處逆行灌注10ml膠原酶IV(0.75mg/ml)，使胰腺充分膨脹，破壞腺泡組織。打開胸腔，用10ml注射器抽取心臟血液。迅速摘取胰腺，剔除脂肪和淋巴結(jié)，HBSS緩沖液洗二遍，置25ml硅化小燒杯中，眼科剪剪碎成0.5～lmm3的小塊，37℃水浴振蕩消化60min。見胰腺小塊明顯減小并有混濁產(chǎn)生且用粗口硅化吸管輕輕吹打即可分散成均勻懸液判為消化終點，迅速過80目不銹鋼篩網(wǎng)，加入20ml的4℃預(yù)冷HBSS緩沖液稀釋終止反應(yīng)并防止沉淀物聚集粘附消化下來的胰島。吸去上清液，再以4℃預(yù)冷HBSS緩沖液洗滌二次。參文獻方法(Zuhair A.Latif，JackNoel，Rodolfo Alejandro.A simple method of staining fresh and culturedislets.Transplantation，1988，45(4)827-830)加入雙硫腙染液4℃染色15min，解剖顯微鏡下(15×6)手工撿取染成猩紅色的圓形或橢圓形顆粒團塊(撿取胰島的過程應(yīng)在低溫下進行)。
(2)胰島素刺激釋放試驗按文獻方法(Bhonde RR，Parab PB，Sheorin VS.An invitro model for screening oral hypoglycemics.In Vitro Cell Dev Biol Anim，1999，35(7)366-368)進行，稍作改進。取24孔培養(yǎng)板，每孔加入0.9mlKRBH孵育液。將挑選出的大小接近(Ф50-100、Ф100-150μm)的胰島在解剖顯微鏡鏡下以8個/孔接種入培養(yǎng)板中，于37℃、5％CO2孵箱中預(yù)孵平衡1h。取出加入0.1ml不同濃度各受試藥物及溶劑0.25％(v/v)DMSO，繼續(xù)孵育4h。取出后在解剖顯微鏡下吸取上清液，-20℃低溫冰箱保存。6孔/濃度/藥物，試驗重復(fù)二次。
2.2目標化合物刺激刺激葡萄糖轉(zhuǎn)運試驗(1)脂肪細胞分離參文獻方法(Gliemann J.Glucose transport and metabolismin the adipocyte.Joseph Larner，Stephenl Pohl(Eds).Methods In Diabetes Research，vol 1.Laboratory Methods(Part C).Academic Press，Inc.New York，1984105-118)分離大鼠脂肪細胞。脫頸椎處死大鼠，75％(v/v)乙醇浸泡后在超凈臺無菌條件下打開腹腔，用眼科剪剪下二側(cè)附睪脂肪墊(注意避開血管和附睪)。無菌生理鹽水洗滌脂肪墊二次，眼科剪剪碎成約1mm3的小塊，置于50ml圓底塑料管(要求內(nèi)壁光滑)中，加入膠原酶IV液4ml/鼠，37℃、5％CO2孵箱中消化45min，每10min輕輕振搖一次并密切觀察脂肪塊的消化情況。約90％小塊明顯變小并在振搖后出現(xiàn)明顯渾濁時取出，過100目不銹鋼網(wǎng)，以20mlKRH緩沖液沖洗濾網(wǎng)并稀釋終止消化，棄未消化物。靜置3min，脂肪細胞懸浮在管上層，用14號針頭插入管底吸去下層緩沖液，再加入10ml KRH緩沖液洗滌脂肪細胞，靜置棄下層液體，如此反復(fù)3次，最后一次用DMEM培養(yǎng)液洗滌(注意整個操作過程均應(yīng)動作輕柔盡量避免油滴的產(chǎn)生)。將懸浮于DMEM培養(yǎng)液中的脂肪細胞取出0.25ml稀釋計數(shù)，配成終濃度為4×105cells/ml的細胞懸液。
(2)脂肪細胞活率測定取0.9ml脂肪細胞懸液，0.4％臺盼藍以1∶9與細胞懸液混合，3min內(nèi)計數(shù)未著色脂肪細胞(活細胞)數(shù)占總脂肪細胞數(shù)比率。染色結(jié)果顯示脂肪細胞存活率為100％。
(3)葡萄糖轉(zhuǎn)運試驗參文獻方法(BL Maloff and DH Lockwood.In vitro effectsof a sulfonylurea on insulin action in adipocytes.Potentiation ofinsulin-stimulated hexose transport.J Clin Invest，1981，68(1)85-90)復(fù)制模型，稍作改進。將已計數(shù)的脂肪細胞懸液(5×105cells/ml)輕輕搖勻，取0.5ml加入2ml聚丙烯塑料培養(yǎng)管中，37℃、5％CO2孵箱中預(yù)孵平衡30min。按實驗分組加入不同濃度的受試藥物，6管/濃度，37℃孵箱中預(yù)處理24h。再加和不加不同濃度的胰島素，繼續(xù)溫孵4h。按試驗分組加入0.2μCi/ml的2-Deoxy-D-[1-3H]Glucose，孵育1.5h后立即加入250μl的4℃預(yù)冷二甲基硅油終止反應(yīng)，10000rpm離心2min，吸去下層培養(yǎng)液。加入100μl的5％SDS裂解上層脂肪團塊，0.5h后放入含5ml閃爍液的10ml閃爍杯內(nèi)。避光靜置12h，液閃計數(shù)3H放射強度(dpm)。
2.3測定方法液閃計數(shù)2-Deoxy-D-[1-3H]Glucose的轉(zhuǎn)運量，單位dpm。
采用放射免疫分析藥盒測定上清液中胰島素含量，用μIU/ml表示。胰島素放射免疫分析藥盒(IMK414)為中國原子能科學(xué)研究院同位素研究所產(chǎn)品，各技術(shù)參數(shù)經(jīng)鑒定符合其說明書上的質(zhì)量標準本底信號比(S/B)大于50，靈敏度為1.5μIU/ml。
2.4統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)均以x±SD表示，組間比較采用student’s t檢驗。
3.結(jié)果1、目標化合物刺激離體胰島釋放胰島素試驗顯示，助溶劑(0.25％DMSO)不影響離體胰島的分泌活性，離體胰島在給予高糖刺激后胰島素分泌量較基礎(chǔ)分泌量升高了5.49倍，格列美脲(100ug/ml)組升高了2.03倍，格列苯脲(100ug/ml)組升高了3.35倍。16個目標化合物中I4(100ug/ml)的刺激作用最強，胰島素分泌率提高了3.64倍，其次是I3(100ug/ml，3.05倍)、I2(100ug/ml，1.58倍)、I1(100ug/ml，1.55倍)、I13(10ug/ml，1.36倍)，見表一。
表1.磺酰脲類化合物對大鼠離體胰島釋放胰島素的影響。


*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，與溶劑比較。
2.2目標化合物刺激葡萄糖轉(zhuǎn)運試驗格列美脲是已知磺酰脲類藥物中胰外作用最明顯的一個藥物，格列美脲(100μg/ml)處理后的脂肪細胞對葡萄糖的攝取率較基礎(chǔ)攝取率提高了2.5倍，并顯著增強胰島素(1.2nM)的刺激作用(P＜0.001)，是單用胰島素(1.2nM)作用強度的2.42倍。對離體脂肪細胞葡萄糖基礎(chǔ)攝取率有明顯提高的目標化合物(100μg/ml)有I4(1.73倍)、I11(1.59倍)、I6(1.58倍)、I3(1.57倍)。對低濃度胰島素(1.2nM)作用有協(xié)同增強的化合物有I4(100μg/ml，1.55倍)、I11(100μg/ml，1.43倍)、I18(10μg/ml，1.38倍)、I2(100μg/ml，1.32倍)，見表2。
表2.磺酰脲類化合物對大鼠脂肪細胞轉(zhuǎn)運葡萄糖的影響。



*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，與溶劑對照；#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001，與胰島素對照(1.2nM)；+P＜0.05，++P＜0.01，+++P＜0.001，+胰島素(1.2nM)與-胰島素(1.2nM)對照；-胰島素(1.2nM)表示化合物不加胰島素(1.2nM)，+胰島素(1.2nM)表示化合物加胰島素(1.2nM)。
實施例2體內(nèi)試驗1.動物昆明種小白鼠(20-23g)，SD大鼠(200～250g)，雌雄兼用，由江寧青龍山動物養(yǎng)殖場提供.合格證號SCXK(蘇)2002-0018；家兔，新西蘭種，2-2.5kg，雌雄兼用，由江寧青龍山動物養(yǎng)殖場提供，合格證號SCXK(蘇)2002-0027；清潔級C57BL/6J純系小鼠，18-22g，雌雄兼用，合格證號SCXK(滬)2002-0010，中科院上海實驗動物中心提供，受試前在本室適應(yīng)三天。
2.方法2.1化合物對正常小鼠空腹血糖的作用正常C57BL/6J純系小鼠50只，隨機均分為5組，10只/組溶媒對照組(0.5％CMC)，格列美脲組(20mg·kg-1，灌胃)，I4高、中、低劑量組(分別為20，7和2.5mg·kg-1，灌胃)。按實驗分組連續(xù)灌胃給藥3天，第4天，禁食不禁水12h后，分別在各組小鼠給藥前和給藥后不同時間經(jīng)小鼠眼眶靜脈叢取血，葡萄糖氧化酶法測定血糖值。
2.2化合物I4對四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖的作用昆明種小白鼠，20-23g，雌性，禁食過夜12h(不禁水)，所有小鼠均尾靜脈一次性快速注入四氧嘧啶(60mg/kg)，96h后(禁食12h)眼內(nèi)眥靜脈叢取血測空腹血糖，選用血糖＞11.1mmol/L者用于試驗，將小鼠隨機分為溶媒對照組(0.5％CMC)，格列美脲組(20mg·kg-1，ig)，G-004高、低劑量組(分別為20和7mg·kg-1，ig)。按試驗分組，在單次灌胃給藥后和連續(xù)給藥7天后不同時間經(jīng)眼內(nèi)眥靜脈叢取血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖值。
2.3化合物I4對正常家兔空腹血糖的作用正常家兔30只，隨機均分為5組，6只/組溶媒對照組(0.5％CMC)，格列美脲組(1.5mg·kg-1，灌胃)，G-003高、中、低劑量組(分別為4.5和1.5和0.5mg·kg-1，灌胃)。按實驗分組連續(xù)灌胃給藥3天。第4天，禁食不禁水12h后，分別在各組家兔給藥前和給藥后不同時間經(jīng)耳緣靜脈叢取血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖值。
3.結(jié)果3.1化合物I4對正常小鼠空腹血糖的影響結(jié)果見表3，化合物I4各組(20、7、2.5mg·kg-1)均明顯降低正常C57BL/6J純系小鼠空腹血糖，并呈顯著的劑量相關(guān)性，I4高劑量組(20mg·kg-1)降糖幅度幾乎達50％，作用持續(xù)6h以上。
表3.化合物I4對C57BL/6J純系小鼠空腹血糖的影響(x±SD，n＝10)組別 劑量 血糖濃度(mmol·L-1)0h 0.5h 1h2h4h6h對照6.77±1.60 7.33±1.886.91±1.226.59±1.466.40±1.226.35±0.99格列美脲 20mg·kg-17.29±1.41 4.42±0.94**3.58±1.08**3.62±1.08**3.95±1.08**4.14±0.99**I4 2.5mg·kg-17.14±1.60 5.92±1.324.66±1.83**4.84±1.08**5.17±1.13*5.46±0.80*
I47mg·kg-16.73±1.55 5.17±0.98*4.46±1.22**4.09±1.08**4.37±1.51**4.56±1.13**I420mg·kg-16.91±1.79 4.42±0.56**3.81±0.80**3.72±0.94**3.95±0.94**4.28±1.22***P＜0.05，**P＜0.01，與對照組比較。
3.2化合物I4對四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖的作用結(jié)果見表4，化合物I4高，低劑量、格列美脲單次給藥對四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖無明顯影響，連續(xù)(7天)給藥，也不明顯降低糖尿病小鼠空腹血糖，見表5，但對恢復(fù)有-定的促進作用。
表4化合物I4單次給藥對糖尿病小鼠空腹血糖的影響(x±SD，n＝10)

表5化合物I4連續(xù)(7天)給藥對糖尿病小鼠空腹血糖的影響(x±SD，n＝8)

2.3化合物I4對正常家兔空腹血糖的作用結(jié)果見表6，化合物I4各組(0.5、1.5和4.5mg·kg-1)均明顯降低正常家兔空腹血糖，并呈顯著的劑量相關(guān)性，I4高劑量組(4.5mg·kg-1)降糖幅度幾乎達50％，作用持續(xù)6h以上。
表6化合物I4對正常家兔空腹血糖的影響(x±SD，n＝6)組別 劑量 血糖濃度(mmol·L-1)0h 1h 2h 4h6h 8h對照 7.28±1.83 7.33±1.93 7.77±1.79 7.38±1.796.76±1.88 6.37±1.40格列美脲 1.5mg·kg-16.52±1.74 6.08±2.03 5.55±1.98*4.63±1.74**3.81 ±1.50**3.33±1.50**I4 0.5mg·kg-16.42±1.45 6.37±1.79 6.13±1.88 5.30±1.35*4.97±1.24*4.83±1.69*I4 1.5mg·kg-17.05±2.32 6.66±2.56 6.27±1.79 5.40±1.73*4.68±1.25*4.58±1.11*I4 4.5mg·kg-16.66±2.56 6.13±2.94 5.16±2.51*3.91±1.21**3.33±1.06**2.94±1.30***P＜0.05，**P＜0.01，與對照組比較。
實施例3N-乙酰苯乙胺在三頸燒瓶(250ml)中加入35ml苯乙胺和52.5ml的三乙胺，室溫攪拌，慢慢滴加26.6ml醋酐，攪拌10h，加水60ml，用40％鹽酸調(diào)節(jié)pH值近中性(5-6)，用二氯甲烷55ml萃取兩次，萃取液用水洗2次，加入無水NaSO4干燥，過濾得酒紅色液體，蒸干得黃色固體，粗品重38.9g，收率86.0％，mp50-52℃。
4-[2-(N-乙?；?乙基]苯磺酸氯在二頸燒瓶中加入ClSO3H24.5ml，冰浴機械攪拌，慢慢加入乙酰苯乙胺10g，繼續(xù)保持冰浴攪拌，反應(yīng)6小時后，將反應(yīng)液傾入大量碎冰中，攪拌，抽濾得白色固體20g(濕重)直接用于下步反應(yīng)。
4-[2-(N-乙酰基氨基)乙基]苯磺酸胺將20g濕重上步產(chǎn)品固體投入于由80ml氨水(25-28％)的燒瓶中攪拌6h。停止攪拌，將反應(yīng)液傾入燒瓶中，置于通風(fēng)櫥放置數(shù)天，抽濾得白色固體13.2g(89.9％)mp170-172℃。
4-氨乙基苯磺酸酰胺將13.2g上步產(chǎn)物加入5.61gNaOH和21.8ml的水中油浴120℃，攪拌回流3h。用濃鹽酸調(diào)節(jié)PH8-9，釋出白色固體，抽濾干燥得固體8.5g，收率78％，mp164-166℃。
實施例44-(2-(4-乙酰氨基)苯磺酰胺基)乙基苯磺酰胺(II1)的制備將4-氨乙基苯磺酰胺10.0g，無水K2CO38.5g投入有25ml水的反應(yīng)瓶中，再加入4-乙酰氨基苯磺酰氯8.8g，室溫攪拌3個小時。反應(yīng)完畢，抽濾得白色固體12.2g，用無水乙醇重結(jié)晶。收率58.3％，mp122-124℃。
IR(cm-1，KBr)3273，1527，1321，1154；1HNMR(DMSO-d6)δ2.139(s，3H，CH3)，2.61-3.19(m，4H，CH2CH2)，6.71-7.90(m，8H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)398.1(M+H，基峰)，420(M+Na)，436(M+K)實施例54-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰胺(II2)的制備將1.0g 4-氨乙基苯磺酰胺和1.5g 3-甲基-4-乙酰氨基苯磺酰氯，按II1的制備方法，得白色固體，收率44.3％，mp110～112℃。
IR(cm-1，KBr)3235，1667，1528，1318，1160；1HNMR(DMSO-d6)δ2.148(s，3H，CH3)，2.304(s，3H，Ar-CH3)，2.65-3.22(m，4H，CH2CH2)，7.18-8.20(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)412(M+H，基峰)，434(M+Na)，450(M+K)
實施例64-(2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基)苯磺酰胺(H3)的制備將4-氨乙基苯磺酰胺和4-氯苯磺酰氯，按II1的制備方法，得白色固體，收率63.8％，mp110～112℃。
IR(cm-1，KBr)3268，1584，1327，1157，1088，557；1HNMR(DMSO-d6)δ2.80-3.19(m，4H，CH2CH2)，6.96-8.00(m，8H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)375(M+H)，397(M+Na)，413(M+K，基峰)實施例74-(2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基)苯磺酰胺(II4)的制備將1.0g 4-氨乙基苯磺酰胺和1.55g 4-溴苯磺酰氯，按II1的制備方法，得1.5g白色固體，收率71.0％，mp135～136℃。
IR(cm-1，KBr)3267，1573，1327，1155，1093；1HNMR(DMSO-d6)δ2.64-3.10(m，4H，CH2CH2)，7.22-7.93(m，8H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)419(M+H)，441(M+Na，基峰)，457(M+K)。
實施例84-[2-(5-甲基-2-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰胺(II5)的制備將2.0g 4-氨乙基苯磺酰胺和2.9g 5-甲基-2-乙酰氨基苯磺酰氯，按II1的制備方法，得白色固體，收率60.0％，mp174～176℃。
IR(cm-1，KBr)3284，1662，1532，1318，1165，593；1HNMR(DMSO-d6)δ2.095(s，3H，CH3)，2.463(s，3H，Ar-CH3)，2.61-3.17(m，4H，CH2CH2)，7.00-8.15(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)412(M+H)，434(M+Na，基峰)，450(M+K)實施例94-[2-(3-甲氧基-4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰胺(II6)的制備將1.0g 4-氨乙基苯磺酰胺和2.0g 3-甲氧基-4-乙酰氨基苯磺酰氯，按II1的制備方法，得1.4g白色固體，收率40.0％，mp182～185℃。
IR(cm-1，KBr)3344，3297，1536，1329，1149；1HNMR(DMSO-d6)δ2.148(s，3H，CH3)，2.304(s，3H，Ar-CH3)，2.65-3.22(m，4H，CH2CH2)，7.18-8.20(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)428(M+H，基峰)，450(M+Na)，466(M+K)實施例104-(2-苯磺酰胺基)乙基苯磺酰胺(II7)的制備將4-氨乙基苯磺酰胺3.0g和苯磺酰氯3.2g，按II1的制備方法，得白色固體4.3g，收率84.3％，mp146～152℃。
實施例114-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰胺(II8)的制備
將4-氨乙基苯磺酰胺和對甲苯磺酰氯，按II1的制備方法，得白色固體收率71.0％，mp122～124℃。
實施例121-[4-[2-(4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I1)的制備將0.7g II1、10ml無水丙酮和0.7g無水碳酸鉀放入反應(yīng)瓶中，攪拌回流6hr，滴入0.42g 4-甲基環(huán)己基異氰酸酯，繼續(xù)回流6hr，冷卻，過濾，丙酮洗滌，所得粗品用甲醇重結(jié)晶，得0.3g產(chǎn)品，mp177～180℃。
IR(cm-1，KBr)3148，2927，1690，1535，1404，1158，577；1HNMR(DMSO-d6)δ0.6-1.93(m，13H，-C6H10CH3)，2.136(s，3H，CH3)，2.66-3.18(m，4H，CH2CH2)，6.3(d，1H，NH-C6H10CH3)，6.81-8.10(m，8H，aromaticH)，10.28(s，1H，NH)；MS(ESI，m/z)537(M+H，基峰)，559(M+Na)，575(M+K)。
實施例131-[4-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I2)的制備用1.0g II2，用I1相同的方法，制得0.8g I2，收率64.0％，mp123～125℃。
IR(cm-1，KBr)3283，2927，1678，1530，1157；1HNMR(DMSO-d6)δ0.71-1.95(m，13H，-C6H10CH3)，2.121(s，3H，COCH3)，2.295(s，3H，ArCH3)，2.61-3.07(m，4H，CH2CH2)，6.3(d，1H，NH-C6H10CH3)，7.15-8.17(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)551(M+H，基峰)，573(M+Na)，589(M+K)。
實施例141-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I3)的制備用1.0g II3，用I1相同的方法，制得0.8g I3，收率58.3％，I93～195℃。
IR(cm-1，KBr)3232，2927，1687，1336，1160，1093；1HNMR(DMSO-d6)δ0.75-1.96(m，13H，-C6H10CH3)，2.592-3.07(m，4H，CH2CH2)，6.13(d，1H，NH-C6H10CH3)，7.18-7.93(m，8H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)514(M+H，基峰)，536(M+Na)，552(M+K)。
實施例151-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I4)的制備G004收率60.0％，193～195℃IR(cm-1，KBr)3259，2927，1690，1336，1161，1090；1HNMR(DMSO-d6)δ0.75-1.96(m，13H，-C6H10CH3)，2.592-3.07(m，4H，CH2CH2)，6.13(d，1H，NH-C6H10CH3)，7.18-7.93(m，8H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)560(M+H，基峰)，582(M+Na)，608(M+K)。
實施例161-[4-[2-(5-甲基-2-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I5)的制備用1.0g II5，用I1相同的方法，制得0.3g I5，收率23.0％，mp137～140℃。
IR(cm-1，KBr)3156，2927，1675，1533，1159，590；1HNMR(DMSO-d6)δ0.71-1.95(m，13H，-C6H10CH3)，2.121(s，3H，COCH3)，2.295(s，3H，ArCH3)，2.61-3.07(m，4H，CH2CH2)，6.3(d，1H，NH-C6H10CH3)，7.15-8.17(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)551(M+H，基峰)，573.(M+Na)，589(M+K)。
實施例171-[4-[2-(3-甲氧基-4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲(I6)的制備用1.4g II6，用I1相同的方法，制得1.5g I6，收率80.0％，mp164～165℃。
IR(cm-1，KBr)3361，2928，1685，1530，1416，1157，588；1HNMR(DMSO-d6)δ0.73-1.97(m，13H，-C6H10CH3)，2.184(s，3H，COCH3)，2.60-3.11(m，4H，CH2CH2)，3.947(s，3H，OCH3)，6.0(d，1H，NH-C6H10CH3)，6.9-7.88(m，7H，aromaticH)；MS(ESI，m/z)567(M+H，基峰)，589(M+Na)，605(M+K)。
權(quán)利要求
1.通式(I)化合物及其藥用鹽在用于制備抗糖尿病藥物中的用途 其中R1代表-H，-CH3，-OCH3，-OH，-NH2，鹵素，-NHCOCH3；R2代表1-8個碳原子的烴基， R3代表-H，-CH3，-OCH3，鹵素；X代表O，S。
2.權(quán)利要求1的用途，其中通式(I)化合物是1-[4-[2-(4-乙酰氨基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基)苯磺酰胺基]乙基苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲)；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-[2-(5-甲基-2-乙酰氨基)苯磺酰胺基]乙基苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-[2-(3-甲基-4-乙酰氨基)苯磺酰胺基乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺酰]-3-環(huán)己基脲；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-環(huán)己基脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺酰基]-3-(4-氯苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰基]-3-(4-氯苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-氯苯基)硫脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(2-甲基苯基)硫脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(4-甲基苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-甲基苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-甲氧基苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-甲基苯磺酰胺基)乙基]苯磺?；鵠-3-(4-甲氧基苯基)硫脲；1-[4-(2-苯磺酰胺基乙基)苯磺?；鵠-3-(4-甲氧基苯基)硫脲；1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰基]-3-(4-甲氧基苯基)硫脲。
3.權(quán)利要求2的用途，其中通式(I)化合物是1-[4-[2-(4-溴苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲。
4.權(quán)利要求2的用途，其中通式(I)化合物是1-[4-[2-(4-氯苯磺酰胺基)乙基]苯磺酰]-3-(反-4-甲基環(huán)己基)脲。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及磺酰胺取代的磺酰脲和磺酰硫脲衍生物(通式I)在制備抗糖尿病藥物中的新用途。
文檔編號A61K31/17GK1557287SQ20041001402
公開日2004年12月29日 申請日期2004年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月9日
發(fā)明者巫冠中, 王廣基 申請人:中國藥科大學(xué)