專利名稱：一種生物粘附微粒藥物制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬制藥領(lǐng)域，涉及藥物制劑的制備方法，具體涉及一種生物粘附微粒藥物制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
自上世紀八十年代初，即有研究表明，高荷負電的羧基化聚合物(如丙烯酸類聚合物)對體外培養(yǎng)的人眼結(jié)膜上皮細胞具有顯著高的生物粘附作用和低生物毒性[Park K.et al，Int J Pharm 1984，19107-127]；動物體內(nèi)外胃腸道粘附實驗證明，丙烯酸類聚合物(如Polycarbophil)與胃腸道表面粘蛋白的相互作用，使胃腸道對其排空時間明顯延長，從而得出該類聚合物可作為口服定位釋藥制劑的生物粘附材料[Ch’ng H.S.et al，J Pharm Sci 1985，74399-405]。研究認為生物粘附作用的發(fā)生是一個連續(xù)的過程，主要分兩個階段。首先是生物粘附劑的吸水膨脹或表面潤濕作用產(chǎn)生了與表面之間的緊密接觸，緊接著粘附劑滲入組織表面縫隙或與粘液相互滲透而發(fā)生相互作用產(chǎn)生粘附性。目前常用的生物粘附材料有聚卡波菲[Polycarbophil(CarbopolEX-55 resin)]、卡波姆(Carbomer，Carbopol934P)、脫乙酰殼多糖(chitosan)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、透明質(zhì)酸鈉等。
已知，具有以下性質(zhì)的藥物比較適宜制成生物粘附制劑，如體內(nèi)溶解度小、吸收窗狹窄、吸收速度慢或有飽和吸收，生物半衰期短；或在有效作用部位停留時間過短，不足以發(fā)揮療效。具有上述性質(zhì)的藥物經(jīng)制成生物粘附制劑后，藥物制劑可在設(shè)定給藥部位，如胃腸道、眼部、口腔、鼻腔等粘附滯留，達到定位釋藥，提高療效；或改善吸收，提高生物利用度。有報道，將茶堿制成生物粘附片[Peppas NA et al，Adv Drug Deliv Rev1993，11(1-2)1-7]，或?qū)⒙揉玎褐瞥砂椎鞍最w粒后與PVP顆?；旌虾笱b膠囊[Longer MA et al，J Pharm Sci 1985，74(4)406-415]，或以PEG400和Carbopol為基質(zhì)制備尼莫地平鼻用凝膠劑[Park K et al，Int J Pharm1984，19(2)107-127]，或以CMC-Na和HPMC為粘附劑制備的鹽酸索他洛爾胃內(nèi)漂浮劑[Chueh HR et al，Drug Dev Ind Pharm 1995，21(15)1725-1747]，或單以Polycarbophil、Carbomer包衣的、或以Carbomer和EudragitRL100混合包衣的小腸粘附微球[Lehr CM et al，J Controlled Release 1990，1351-57]、或以Carbomer分散于四甘油五硬脂酸(TGPS)和四甘油單硬脂酸酯(TGMS)制成的胃粘附微球[Akiyama Y et al，Pharm Res 1995，12(3)397-405]，或以脫乙酰殼多糖制成的阿昔洛韋眼上皮粘附微球[Genta I et al，J PharmPharmacol 1997，49737-42]，均證明，上述生物粘附制劑或明顯延長制劑在給藥部位滯留時間、或顯著提高藥物的生物利用度。
幽門螺桿菌(HP)已被普遍認為是胃及十二指腸等消化道潰瘍的主要病因。HP屬于生長緩慢的微生物，對抗菌劑較易產(chǎn)生耐藥性。目前臨床上抗HP感染的有效給藥方案多為抗菌藥與標準抗?jié)兯幬锫?lián)用，目的是根除HP、減少潰瘍的復發(fā)率。HP的根除率取決于它對藥物的敏感性和藥物與它的作用時間。許多抗菌藥物經(jīng)口服給藥后，胃內(nèi)停留時間較短，不能在胃粘膜層或上皮細胞表面等HP存在的部位達到有效的殺菌濃度或持續(xù)時間，故而影響了它們對HP的根除率。1995年，Akiyama等報道了可在胃腸道粘膜表面粘附停留的阿莫西林聚卡波菲粘附微球，結(jié)果表明，阿莫西林生物粘附微球具有較高的HP清除率。此外，已報道的阿莫西林其他粘附制劑還有，Wang J等人制備的陽離子交換的明膠微球劑(2000年)、Guna M等人制備的離子交換粘附微粒劑(2001年)、Fontana G等人研制的聚烷基腈基丙烯酸酯粘附納米粒(2001年)等。
洛伐他汀(lovastatin)是第一個上市的3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑的他汀類藥物。其具有預防和減少原發(fā)性和繼發(fā)性冠心病風險及其死亡率的功效[Gotto AM et al，issues from theInterdisciplinary Council on Reducing the Risk for Coronary HeartDisease，ninth council meeting.Circulation 1999，99E1～E7]。對各種大量研究數(shù)據(jù)的分析結(jié)果還揭示，他汀類藥物的上述作用與它們降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的幅度有關(guān)并呈線性正相關(guān)關(guān)系[Olsson AG et al，Am J Cardial 2001，8733～36]。洛伐他汀的體內(nèi)生物利用度不高，已在美國上市的洛伐他汀緩釋片劑的生物利用度(AUC2-24hr)是常規(guī)片劑的1.71倍。
氫溴酸右美沙酚為中樞性鎮(zhèn)咳藥，鎮(zhèn)咳作用顯著，與相同劑量的可待因大體相同或稍強，但無止痛作用，長期服用無成癮性和耐受性。治療劑量不會抑制呼吸，作用快且安全。可與對乙酰氨基酚等解熱鎮(zhèn)痛藥、氨茶堿等平喘藥、氯化銨和愈創(chuàng)木酚等祛痰藥、氯苯那敏等抗過敏藥以及苯丙醇胺等擬交感神經(jīng)藥配伍制成復方制劑。鹽酸苯丙醇胺緩釋膠囊(康泰克緩釋膠囊)中成分之一就是氫溴酸右美沙酚。
目前已有的粘附微粒的制備方法有溶媒蒸發(fā)法[Ogawa，Y.et al，Chem.Pharm.Bull.1988，361095-1103]；熱融成囊法[Mathiowitz，et al，J.Control.Rel.1987，513-22]；溶媒移去法[Carino，P.G.，et al，Novel Approaches and Develop-ment’98.Marcel Dekker，New York，459-475]；交聯(lián)固化法[Lim，F(xiàn).，et al，J.Pharm.Sci.1981，70351-354]；相倒置成囊技術(shù)[Chickering，D.，et al，Biotechnol.Bioeng.1996，5296-101]；噴霧干燥法[Bodmeier，R.，et al，J.Pharm.Pharmacol.1988，40754-757]；噴霧—驟冷法[Nagahara N.et al，Antimicrobial Agents and Chemother-apy 1998，42(10)2492-2494]；粘附材料外包法[Cuna M.，et al，European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 2001，51(3)199-205]。
常用的超臨界流體技術(shù)包括快速膨脹分離技術(shù)(RESS)、氣體抗溶劑法或超臨界抗溶劑法(GAS或SAS)及其改良方法，包括溶劑霧化超臨界萃取法(ASES)、溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)、飽和氣體溶液制粒法(PGSS)，二氧化碳由于其臨界溫度和壓力都不高(Tc＝31.1℃，Pc＝7.15MPa)，且無毒，因此是最常用的介質(zhì)。
GAS或SAS是將溶解有材料的溶液分散于大量的超臨界二氧化碳中，使其中所溶解材料溶解度急劇下降而析出的技術(shù)，是目前最廣泛使用的一類超臨界流體制粒技術(shù)。其中，超臨界二氧化碳為反溶劑。SEDS是通過同心噴嘴同時向腔室中噴入超臨界流體介質(zhì)和材料溶液，以期能達到更好的混合效果。目前運用超臨界流體技術(shù)制備的微粒劑型有微球(微粒)、微囊、脂質(zhì)體等，還未見有運用超臨界流體技術(shù)制備粘附微粒(顆粒)方面的相關(guān)文獻報道及專利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種生物粘附微粒藥物制劑制備方法，尤其是一種胃腸道生物粘附微粒藥物制劑制備方法。本方法包括選用經(jīng)口服吸收藥物、載體材料和生物粘附材料，在有機溶媒為分散相的介質(zhì)中分散均勻，運用超臨界流體技術(shù)中的氣體抗溶劑法(GAS)和溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)制備含藥的生物粘附微粒。本方法所制得的生物粘附微粒具有良好的體內(nèi)外粘附效果和緩釋效果。本方法所制得的生物粘附微?？芍瞥深w粒劑，也可裝膠囊制成膠囊劑或進一步壓制成片劑。
所述的超臨界流體技術(shù)中的氣體抗溶劑法和溶液被超臨界流體增強分散法，是在維持一定壓力、溫度條件下，連續(xù)通入超臨界流體介質(zhì)帶走分散介質(zhì)溶媒而得到生物粘附微粒的方法。通過調(diào)節(jié)溫度、壓力、載體材料濃度可以控制微粒粒徑。所制得含粘附材料的微粒具有良好的緩釋效果和粘附效果。
本發(fā)明涉及的藥物載體材料可在有機溶媒中溶解。所述載體材料選用包括但不限于乙基纖維素，其他包括乙基纖維素(EC)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚羥基乙酸(PGA)和丙烯酸甲酯共聚物(MA)等。
本發(fā)明涉及的生物粘附材料可在有機溶媒中溶解或良好分散。所述生物粘附材料包括丙烯酸類聚合物及其衍生物，如聚卡波菲和卡波姆等；羥丙基纖維素；殼多糖和脫乙酰殼多糖；海藻酸及其鈉鹽，透明質(zhì)酸及其鈉鹽，羧甲基纖維素及其鈉鹽，羧甲基右旋糖酐及其鈉鹽；羧甲基纖維素及其鈉鹽與聚異丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚維酮及其共聚物；瓜耳膠等。
本發(fā)明所涉及的生物粘附微粒藥物制劑可選用上述一種或一種以上混合的可粘附藥用輔料。
所述的有機溶媒能同時溶解載體材料和生物粘附材料，或只能溶解載體材料、而生物粘附材料能在其中良好分散。
所述經(jīng)口服吸收的藥物以溶解方式或以固體粉末、固體顆粒形式分散于有機溶媒中。
本發(fā)明涉及的超臨界流體介質(zhì)是超臨界二氧化碳，也可以是其它流體介質(zhì)。
本發(fā)明涉及的維持一定壓力條件是通過通入的超臨界流體介質(zhì)來達到的，其壓力范圍優(yōu)選8-12MPa，流體流速控制在3.5ml/min。
本發(fā)明涉及的一定溫度條件是通過帶有夾套的反應容器連接的恒溫水浴控制溫度，其溫度范圍優(yōu)選30-50℃。
本發(fā)明涉及的載體材料濃度的優(yōu)選條件為1-5％。通過調(diào)節(jié)溫度、壓力和載體材料濃度可以控制微粒粒徑。
本發(fā)明所制得的微粒在電鏡下或為球形、或為多個球形微粒的聚合體、或為不規(guī)則顆粒狀等形態(tài)，肉眼觀察為粉末狀物質(zhì)。微粒粒徑為3-200μm，其中生物粘附材料與微粒載體材料重量比為1∶6-1∶10。
本發(fā)明選用卡波姆934P為生物粘附材料、乙基纖維素為骨架材料，運用氣體抗溶劑法(GAS)和溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)研制成具有胃腸道粘附作用的阿莫西林生物粘附微粒、右美沙酚生物粘附微粒和洛伐他汀生物粘附微粒。所制得含粘附材料的微粒具有良好的緩釋效果和粘附效果。
本發(fā)明方法相對于已有的如溶媒蒸發(fā)法、外包法、相倒置成囊等技術(shù)而言，具有如下優(yōu)點①制備過程中不用或少量用到有機溶媒，其主要介質(zhì)是二氧化碳，對環(huán)境影響小，二氧化碳能循環(huán)使用；②制備步驟少，一步就能得到?jīng)]有有機殘留的產(chǎn)品；③整個工藝簡單，便于GMP控制。


圖1是電鏡照片其中，圖1a微粒電鏡照片(×2,000)GAS方法，條件9MPa，35℃，材料濃度2.8mg/ml；圖1b微粒電鏡照片(×2,000)GAS方法，條件9MPa，38℃，材料濃度2.8mg/ml；圖1c微粒電鏡照片(×2,000)GAS方法，條件9MPa，40℃，材料濃度2.8mg/ml；圖1d微粒電鏡照片(×5,000)和(×1,500)，GAS方法，條件9MPa，40℃，材料濃度2.8mg/ml；圖1e微粒電鏡照片(×2,000)SEDS方法，條件9MPa，40℃，材料濃度3.5mg/ml；圖1f微粒電鏡照片(×2,000)SEDS方法，條件12MPa，40℃，材料濃度3.5mg/ml。
圖2是藥物溶出曲線。
其中，微粒制備條件、參數(shù)GAS法，參數(shù)條件40℃，9MPa，載體材料濃度3.5％；微粒中藥物釋放度測定儀器裝置按中國藥典2000年二部附錄XC溶出度測定項下第三法規(guī)定，轉(zhuǎn)速為100rpm，溫度37℃±0.5℃。
具體實施例方式
以下結(jié)合實施例進一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明并不僅限制于如下實施例的范圍。
實施例1 制備阿莫西林生物粘附微粒藥物-材料混懸膠狀液的制備 采用無水丙酮為溶解介質(zhì)，將乙基纖維素(20cps)配置成濃度為100mg/ml的透明膠狀液，備用。取上述乙基纖維素液再以丙酮稀釋成不同濃度，加入卡波姆934P攪拌混勻，得到良好分散的乙基纖維素-卡波姆混懸液。加入阿莫西林粉末，繼續(xù)攪拌，使阿莫西林均勻分散在上述混懸膠狀液中，備用。
微粒制備 運用氣體抗溶劑法(GAS)和溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)，控制體系壓力和溫度，在連續(xù)通入超臨界二氧化碳的狀態(tài)下(二氧化碳流速3.5ml/min)，帶走藥物混懸膠狀液中的極性有機溶媒，得到粉末狀顆粒物質(zhì)。在這個過程中的連續(xù)通入超臨界二氧化碳的時間為20分鐘。微粒體外粘附效果測定微粒在離體小鼠胃粘膜粘附粘附效果試驗和微粒在大鼠翻轉(zhuǎn)小腸粘附效果試驗，結(jié)果表明粘附微粒比對照品顯著提高了對組織的粘附效果。
表1是阿莫西林生物粘附微粒的制備條件及其結(jié)果。
表2是微粒在離體小鼠胃粘膜粘附試驗結(jié)果。
表3是微粒在翻轉(zhuǎn)大鼠小腸粘附試驗結(jié)果。
表1方法溫度(℃) 壓力(MPa) 乙基纖維素濃度(％) 載藥量(％)微粒平均粒徑(μm)GAS 40 8.5 2.8 6.95 24.41GAS 40 11 2.8 7.11 81.87GAS 35 92.8 11.78 27.10GAS 40 92.8 9.44 23.87GAS 40 95 8.32 55.33GAS 40 94.3 9.50 43.02GAS 40 93.5 9.19 35.37GAS 50 92.8 15.36 113.73GAS 45 92.8 13.6 33.12GAS 38 92.8 15.04 24.52GAS 30 92.8 14.26 40.02GAS 40 83.5 9.82 36.07GAS 40 10 3.5 10.25 90.22SEDS 40 12 3.5 12.41 2.85SEDS 40 93.5 9.19 5.48
表2

n＝6，P＜0.01表3

n＝6，P＜0.05實施例2 氫溴酸右美沙酚生物粘附微粒制備藥物-材料混懸膠狀液的制備 采用無水丙酮為溶解介質(zhì)，將乙基纖維素(20cps)配置成濃度為100mg/ml的透明膠狀液，備用。取上述乙基纖維素液再以丙酮稀釋成不同濃度，加入卡波姆934P攪拌混勻，得到良好分散的乙基纖維素-卡波姆混懸液。加入氫溴酸右美沙酚粉末，繼續(xù)攪拌，使氫溴酸右美沙酚溶解在上述混懸膠狀液中，備用。
微粒制備 運用氣體抗溶劑法(GAS)和溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)，控制體系壓力和溫度，在連續(xù)通入超臨界二氧化碳的狀態(tài)下(二氧化碳流速3.5ml/min)，帶走藥物混懸膠狀液中的極性有機溶媒，得到粉末狀顆粒物質(zhì)。在這個過程中的連續(xù)通入超臨界二氧化碳的時間為20分鐘。表4是氫溴酸右美沙酚生物粘附微粒的制備條件及其結(jié)果。
表4方法 溫度(℃)壓力(MPa) 乙基纖維素濃度(％) 載藥量(％) 微粒平均粒徑(μm)SEDS35102.511.51 15.76SEDS40122.57.4122.49SEDS408 2.59.2729.35SEDS40102.57.6819.73SEDS45102.57.9122.94
實施例3 洛伐他汀生物粘附微粒制備藥物-材料混懸膠狀液的制 采用無水丙酮為溶解介質(zhì)，將乙基纖維素(20cps)配置成濃度為100mg/ml的透明膠狀液，備用。取上述乙基纖維素液再以丙酮稀釋成不同濃度，加入卡波姆934P于磁力攪拌器上攪拌混勻，得到良好分散的乙基纖維素-卡波姆混懸液。加入洛伐他汀，繼續(xù)攪拌，使洛伐他汀溶解在上述混懸膠狀液中，備用。
微粒制備 運用氣體抗溶劑法(GAS)和溶液被超臨界流體增強分散法(SEDS)，控制體系壓力和溫度，在連續(xù)通入超臨界二氧化碳的狀態(tài)下(二氧化碳流速3.5ml/min)，帶走藥物混懸膠狀液中的極性有機溶媒，得到粉末狀顆粒物質(zhì)。在這個過程中的連續(xù)通入超臨界二氧化碳的時間為20分鐘。表5是洛伐他汀生物粘附微粒的制備條件及其結(jié)果。
表5方法溫度(℃)壓力(MPa) 乙基纖維素濃度(％)載藥量(％) 微粒平均粒徑(μm)SEDS 409 2.5 5.1613.29GAS 409 2.5 2.9171.9權(quán)利要求
1.一種生物粘附微粒藥物制劑的制備方法，其特征是藥物、載體材料和生物粘附材料，在有機溶媒為分散相的介質(zhì)中分散均勻，用超臨界流體技術(shù)制備含藥生物粘附微粒，所述超臨界流體技術(shù)包括其中的氣體抗溶劑法和溶液被超臨界流體增強分散法。
2.按權(quán)利要求1所述的生物粘附微粒藥物制劑的制備方法，其特征是所述超臨界流體技術(shù)是在維持壓力、溫度條件下，連續(xù)通入超臨界流體介質(zhì)帶走分散介質(zhì)溶媒制備粘附微粒。
3.按權(quán)利要求1的方法，其特征是所述藥物是經(jīng)口服吸收的胃腸道給藥的藥物。
4.按權(quán)利要求3所述的方法，其中的經(jīng)口服吸收藥物是溶解度小、吸收窗狹窄、吸收速度慢或有飽和吸收、生物半衰期短、在胃腸道停留時間短的藥物，或是其它適宜制成粘附制劑的藥物。
5.按權(quán)利要求3的方法，其特征是所述的藥物是阿莫西林、氫溴酸右美沙酚或洛伐他汀。
6.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述載體材料可在有機溶媒中溶解。
7.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述載體材料是乙基纖維素，或是聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸共聚物、聚乙醇酸和丙烯酸甲酯共聚物的一或一種以上混合的藥用輔料。
8.按權(quán)利要求1的方法，其特征是所述生物粘附材料是卡波姆934P，或是其他適宜的粘附材料包括羥丙基纖維素；殼多糖和脫乙酰殼多糖；海藻酸及其鈉鹽，透明質(zhì)酸及其鈉鹽，羧甲基纖維素及其鈉鹽，羧甲基右旋糖酐及其鈉鹽；羧甲基纖維素及其鈉鹽與聚異丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚維酮及其共聚物和瓜耳膠其中一種或一種以上混合的輔料。
9.按權(quán)利要求1所述的制備生物粘附微粒藥物制劑的方法，其特征是所述生物粘附材料與載體材料重量比為1∶6-10。
10.按權(quán)利要求1的方法，其特征是所述生物粘附材料為在有機溶媒中溶解或良好分散。
11.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的有機溶媒是同時溶解載體材料和生物粘附材料，或只溶解載體材料而生物粘附材料在其中良好分散的有機溶媒。
12.按權(quán)利要求12的方法，其中的有機溶媒是極性有機溶媒或弱極性有機溶媒。
13.按權(quán)利要求13的方法，其中極性有機溶媒是無水乙醇、丙酮，弱極性有機溶媒是二氯甲烷。
14.按權(quán)利要求2的方法，其中溫度條件的范圍是30-50℃。
15.按權(quán)利要求1的方法，其中載體材料濃度條件為1-5％。
16.按權(quán)利要求1或2的方法，其中所述的微粒為球形或多個球形微粒的聚合體或不規(guī)則顆粒狀或粉末狀，粒徑為3-200μm。
全文摘要
本發(fā)明屬制藥領(lǐng)域，具體涉及一種生物粘附微粒藥物制劑的制備方法。本發(fā)明選用經(jīng)口服吸收藥物、載體材料和生物粘附材料，在有機溶媒為分散相的介質(zhì)中分散均勻，運用超臨界流體技術(shù)中的氣體抗溶劑法和溶液被超臨界流體增強分散法制備含藥生物粘附微粒。本發(fā)明是在維持一定壓力、溫度條件下，通過連續(xù)通入超臨界流體介質(zhì)帶走分散介質(zhì)溶媒而制得生物粘附微粒。通過調(diào)節(jié)溫度、壓力和載體材料濃度可以控制微粒粒徑。所制得含粘附材料的微粒具有良好的緩釋效果和粘附效果。
文檔編號A61K9/14GK1568940SQ20041001800
公開日2005年1月26日 申請日期2004年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月28日
發(fā)明者陸偉躍, 劉哲鵬, 潘俊, 陳嵐, 張巖, 李保國 申請人:復旦大學, 上海理工大學