專利名稱：一種治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，特別涉及一種以中藥為原料的藥物組合物的制備方法，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
急性氣管、支氣管炎，為臨床常見病、多發(fā)病，是由病毒或細(xì)菌感染、物理化學(xué)性刺激及過敏反應(yīng)等因素引起，只要積極治療，大多患者可于短期內(nèi)恢復(fù)，若失于治療、遷延不愈或反復(fù)發(fā)作，可演變?yōu)槁灾夤苎?。慢性支氣管炎為慢性非特異性炎證，一般是在呼吸道局部防御及免疫功能降低、植物神經(jīng)功能失調(diào)、過敏及遺傳等內(nèi)因基礎(chǔ)上，加之長期吸煙、感染、氣候寒冷等外因影響，而導(dǎo)致的支氣管粘膜及周圍組織的慢性非特異性炎癥，臨床以咳嗽、咯痰或伴喘息并反復(fù)發(fā)作為特征，病情進(jìn)展可并發(fā)阻塞性肺氣腫及慢性肺源性心臟病，我國的慢性肺源性心臟病約有90％繼發(fā)于慢性支氣管炎。
在中醫(yī)學(xué)中，急性氣管、支氣管炎屬于“咳嗽”、“喘證”等范疇，一般屬于外感咳嗽。慢性支氣管炎屬于“痰飲”、“咳嗽”及“喘證”等范疇，其急性發(fā)作者，多因正氣不足，外邪入侵，引動伏痰壅肺，是其主要原因。二者均為臨床常見，研制該病證的治療藥物，具有重要的應(yīng)用價值。目前，慢性支氣管炎急性發(fā)作期與急性氣管、支氣管炎的治療原則相同，多選用對癥治療的藥物，對有細(xì)菌感染者可適當(dāng)選用抗生素，但是由病毒感染及其他非感染因素引起的，一般不宜使用抗生素。目前在治療上述二病時，濫用抗生素的現(xiàn)象非常普遍，危害十分嚴(yán)重。在對癥藥中，鎮(zhèn)咳藥會使痰液潴留而加重病情，咳喘痰多者不宜使用。復(fù)方桔梗片等藥連續(xù)使用可發(fā)生耐受性和成癮性，宜控制使用，不能輕易久服。止咳平喘與祛痰類的成藥已有不少品種，但急、慢性支氣管炎的證型較多，主要有風(fēng)寒襲肺、風(fēng)熱犯肺、痰濁阻肺、痰熱郁肺、表寒里熱、肺脾氣虛等。其中能主治表寒里熱證的品種一直不多，常用者只有射麻口服液、咳寧片、降氣定喘顆粒、珠貝定喘丸、鎮(zhèn)咳寧膠囊等少數(shù)幾種。而上述品種中，有的僅長于平喘，不長于止咳；有的長于清里熱，不長于祛痰濁。對于風(fēng)寒外束、痰熱內(nèi)蘊(yùn)的咳嗽證，可供臨床選擇的中成藥十分有限，而該癥又較為常見，因此，上述藥物的選擇面較窄，手段比較單一。積極開發(fā)安全、有效，質(zhì)量穩(wěn)定而可控的中成藥，可為臨床治療急慢性支氣管炎提供更多更有針對性的選擇。
《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第07冊》第7頁中收載的“千金止咳丸”，其原料為麻黃、甘草、苦杏仁(炒)、法半夏、黃芩(酒蒸)、天南星(制)、紫蘇子(炒)、薄荷、桔梗、浙貝母、桑白皮、陳皮、紫菀共13味藥，系將全方13味藥物直接“粉碎為細(xì)粉，過篩，混勻，用水泛丸，干燥，即得。”其工藝和劑型落后，不便于保存和服用，生物利用度不高，制劑的質(zhì)量亦不能控制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)方案是提供一種藥物組合物的制備方法，具體地說，是以“千金止咳丸”的原料藥為原料的藥物組合物的制備方法，通過該藥物組合物的制備方法制備的藥物組合物有效、質(zhì)量穩(wěn)定、可控。
本發(fā)明提供了一種治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，它是由下列步驟制備而成a、按下列重量配比稱取各原料藥麻黃100～466份、甘草80～372份、炒苦杏仁50～234份、法半夏40～186份、酒蒸黃芩30～140份、制天南星30～140份、炒紫蘇子30～140份、薄荷30～140份、桔梗30～140份、浙貝母30～140份、桑白皮30～140份、陳皮30～140份、紫菀20～94份；b、將陳皮、薄荷用水蒸餾提取揮發(fā)油，濾過，提取揮發(fā)油后的藥液、藥渣備用；c、將麻黃、法半夏、浙貝母分別用50％～70％乙醇提取，合并濾液，減壓回收乙醇至清膏，清膏備用，藥渣備用；d、取甘草、炒苦杏仁、酒蒸黃芩、制天南星、炒紫蘇子、桔梗、桑白皮、紫菀與b、c步驟所得的藥渣，合并，加水煎煮，過濾，濾液與b步驟陳皮、薄荷提取揮發(fā)油后的藥液合并，濃縮至清膏，與c步驟所得的清膏合并，干燥，制粒，加入揮發(fā)油，加入藥學(xué)上常用的輔料，制成藥學(xué)上常用的劑型。其中，揮發(fā)油的加入可直接噴入揮發(fā)油，也可以采用環(huán)糊精包合技術(shù)。
其中步驟a所述的按重量配比稱取各原料藥麻黃283份、甘草226份、炒苦杏仁142份、法半夏113份、酒蒸黃芩85份、制天南星85份、炒紫蘇子85份、薄荷85份、桔梗85份、浙貝母85份、桑白皮85份、陳皮85份、紫菀57份。
其中步驟c中用60％乙醇回流提取，pH值為5，回流提取周期短、效率高；步驟d中制粒采用噴霧干燥、一步制粒聯(lián)合制粒，是將清膏量的5/6干燥，干燥方法為噴霧干燥；1/6清膏為粘合劑。進(jìn)一步地，步驟d中干燥采用噴霧干燥的條件是清膏相對密度1.08～1.10(60℃)，進(jìn)液物料溫度60±5℃，進(jìn)液速度50～55ml/min，進(jìn)風(fēng)溫度220±5℃，出風(fēng)溫度85±5℃，噴霧時藥液保持在60±5℃，有利于進(jìn)入干燥塔內(nèi)的物料中的水分快速蒸發(fā)，縮短干燥時間，提高干燥效率；同時藥液溫度升高，粘度降低，可防止藥液粘結(jié)噴頭。
步驟d所述的藥劑是膠囊劑、片劑、散劑、丸劑、顆粒劑。
具體地，本發(fā)明藥物組合物的制備方法是以上十三味，陳皮、薄荷加8倍量水蒸餾提取揮發(fā)油6小時，收集揮發(fā)油，濾過，濾液、藥渣備用。麻黃、法半夏、浙貝母分別用8倍量60％乙醇(用20％鹽酸調(diào)pH＝5)回流提取3次，每次1小時，濾過(300目)，合并濾液，減壓回收乙醇至清膏相對密度為1.06～1.08(60℃)，備用；藥渣備用。甘草、苦杏仁(炒)、黃芩(酒蒸)、天南星(制)、紫蘇子(炒)、桔梗、桑白皮、紫菀與陳皮、薄荷提油后的藥渣，麻黃、法半夏、浙貝母醇提后的藥渣合并，加水煎煮3次，每次用12倍量水，提取1小時，趁熱濾過，濾液與陳皮、薄荷提油后的藥液合并，離心(20000轉(zhuǎn)/分鐘)，離心液減壓濃縮至清膏相對密度為1.12～1.16(60℃)，與醇提清膏合并，攪拌均勻，取5/6量噴霧干燥{清膏相對密度1.08～1.10(60℃)，進(jìn)液物料溫度60±5℃，進(jìn)液速度50～55ml/min，進(jìn)風(fēng)溫度220±5℃，出風(fēng)溫度85±5℃}，得干燥浸膏粉，用剩余1/6量清膏做粘合劑，一步制粒{霧化壓力0.25Mpa，物料溫度55±5℃，進(jìn)風(fēng)溫度80±5℃，出風(fēng)溫度50±5℃}，整粒(22目)，噴入揮發(fā)油，密閉12小時，與藥學(xué)上常用的輔料混合，制成藥學(xué)上常用的制劑。
本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法制備的藥物組合物。其中本發(fā)明藥物組合物每制劑單位含麻黃堿，按鹽酸麻黃堿計(jì)算不低于2.3mg。
由于麻黃為方中君藥，其有效成分游離麻黃堿具有揮發(fā)性，而麻黃堿的鹽酸鹽無揮發(fā)性1。為此，為避免麻黃堿的揮發(fā)損失，將麻黃堿用鹽酸轉(zhuǎn)變?yōu)辂}酸麻黃堿，以總生物堿含量(以鹽酸麻黃堿計(jì))為評價指標(biāo)。
本方主治之證，外有風(fēng)寒，內(nèi)有痰熱。此證可因風(fēng)寒襲肺，肺氣郁閉，津液失于輸布，凝聚為痰。繼之外邪入里或久郁化熱，成為痰熱內(nèi)壅。尤多因于脾胃素有蘊(yùn)熱，化生痰熱，或痰濕蘊(yùn)久化熱，復(fù)感風(fēng)寒，而成此證。風(fēng)寒襲肺，肺氣失宣，故咳嗽新起或加重，且咳而聲重、氣急；風(fēng)寒束表，腠理閉塞，則見惡寒、發(fā)熱、頭身疼痛；痰熱內(nèi)盛，則見痰黃而粘稠等。治宜外散風(fēng)寒，使肺氣開宣；內(nèi)化痰熱，使肺金清肅下行，咳嗽咯痰諸癥自然得除。
方中麻黃，性味辛、微苦而溫，以升浮宣散為主之中，又略兼苦降之性。其發(fā)散風(fēng)寒與止咳平喘的功效，能全面針對此證的病因病理。方中重用本品，作為君藥。杏仁苦溫，以止咳平喘為主要功效，麻黃性剛烈，杏仁性柔潤，二藥合用，可以增強(qiáng)平喘止咳的效果，所以臨床上有‘麻黃以杏仁為臂助’的說法。甘草能止咳，兼能祛痰，還略具平喘作用。此二藥在方中用量亦較重，其與麻黃合用，有似《和劑局方》之三拗湯，取其散寒解表，止咳平喘之效，用以針對風(fēng)寒外襲，肺氣失宣之惡寒發(fā)熱、頭身疼痛、鼻塞流涕、咳嗽氣急等癥，作為臣藥。黃芩苦寒，長于瀉肺火，退壯熱，尤宜于肺熱壅盛，清肅失司，咳嗽痰黃之證。桑白皮長于清瀉肺熱以平喘咳，對內(nèi)兼痰熱壅盛及外有表寒者，亦可選用。此二藥主要用以清瀉肺金之蘊(yùn)熱，使肺氣清肅下降而利于咳喘緩解。法半夏、制天南星功能燥濕化痰，又兼止咳之力，宜于咳嗽而痰多之證。紫蘇子下氣祛痰，止咳平喘，桔梗以祛痰止咳、宣肺利咽為專功，為主治多種咳嗽痰多證的常用之藥。陳皮能燥濕化痰，又可行氣以理脾肺氣機(jī)；不但可使已成之痰濕易于祛除，還能調(diào)暢脾肺使痰濕不易內(nèi)生和停貯。浙貝母清熱化痰，宜于外感而痰熱壅盛之實(shí)證。紫菀長于祛痰，兼可下氣止咳。此七藥重在祛痰下氣，以使肺竅通暢。薄荷祛風(fēng)解表，清利咽喉，可協(xié)助全方外散表邪，內(nèi)祛痰濁之效。以上十味藥物，俱作佐藥。方中甘草還能調(diào)和諸藥，兼以為使。
由于本發(fā)明藥物組合物原料藥主要用于治療外感風(fēng)寒、止咳平喘，需制成吸收快、顯效快的劑型。而原方劑型為水泛丸，以藥材粉末入藥，吸收慢，顯效慢，且服用劑量大(一次服用原生藥材3g，一日2次)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究，本發(fā)明藥物組合物的制備方法出膏率為20％，因此可將其制成藥學(xué)上常用的劑型。由于采用本發(fā)明藥物組合物的制備方法對有效物質(zhì)進(jìn)行了提取和除雜處理，提高了有效物質(zhì)含量，除去部分雜質(zhì)，降低了服用量(本發(fā)明藥物膠囊劑服用方法為一日2次，一次4粒，每粒0.33g，每粒相當(dāng)于原生藥材1.5g)；同時，成型工藝采用噴霧干燥、一步制粒聯(lián)合制粒技術(shù)，改善了顆粒性狀，提高了藥物的溶出速率，滿足了臨床吸收快，顯效快的用藥要求，且選用君藥中的麻黃堿作為指標(biāo)性成分，達(dá)到控制質(zhì)量的目的。因此，通過本發(fā)明藥物組合物的制備方法制備的藥物組合物，安全，有效，穩(wěn)定，可控，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖1本發(fā)明藥物組合物的制備方法的工藝流程圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 本發(fā)明藥物組合物膠囊劑的制備麻黃283g、甘草226g、苦杏仁(炒)142g、法半夏113g、黃芩(酒蒸)85g、天南星(制)85g、紫蘇子(炒)85g、薄荷85g、桔梗85g、浙貝母85g、桑白皮85g、陳皮85g、紫菀57g；以上十三味，陳皮、薄荷加8倍量水蒸餾提取揮發(fā)油6小時，收集揮發(fā)油，濾過，濾液、藥渣備用。麻黃、法半夏、浙貝母分別用8倍量60％乙醇(用20％鹽酸調(diào)PH＝5)回流提取3次，每次1小時，濾過(300目)，合并濾液，減壓回收乙醇至清膏相對密度為1.06～1.08(60℃)，備用；藥渣備用。甘草、苦杏仁(炒)、黃芩(酒蒸)、天南星(制)、紫蘇子(炒)、桔梗、桑白皮、紫菀與陳皮、薄荷提油后的藥渣，麻黃、法半夏、浙貝母醇提后的藥渣合并，加水煎煮3次，每次用12倍量水，提取1小時，趁熱濾過，濾液與陳皮、薄荷提油后的藥液合并，離心(20000轉(zhuǎn)/分鐘)，離心液減壓濃縮至清膏相對密度為1.12～1.16(60℃)，與醇提清膏合并，攪拌均勻，取5/6量噴霧干燥{清膏相對密度1.08～1.10(60℃)，進(jìn)液物料溫度60±5℃，進(jìn)液速度50～55ml/min，進(jìn)風(fēng)溫度220±5℃，出風(fēng)溫度85±5℃}，得干燥浸膏粉，用剩余1/6量清膏做粘合劑，一步制粒{霧化壓力0.25Mpa，物料溫度55±5℃，進(jìn)風(fēng)溫度80±5℃，出風(fēng)溫度50±5℃}，整粒(22目)，噴入揮發(fā)油，密閉12小時，填充入膠囊，檢查，分裝，即得。
以上原輔料共制成膠囊1000粒?？诜?，一次4粒，每日2次。
實(shí)施例2 本發(fā)明藥物組合物片劑的制備麻黃466g、甘草80～372g、炒苦杏仁50～234g、法半夏40～186g、酒蒸黃芩30～140g、制天南星30～140g、炒紫蘇子30～140g、薄荷30～140g、桔梗30～140g、浙貝母30～140g、桑白皮30～140g、陳皮30～140g、紫菀20～94g；以上十三味，陳皮、薄荷加8倍量水蒸餾提取揮發(fā)油6小時，收集揮發(fā)油，濾過，濾液、藥渣備用。麻黃、法半夏、浙貝母分別用8倍量60％乙醇(用20％鹽酸調(diào)PH＝5)回流提取3次，每次1小時，濾過(300目)，合并濾液，減壓回收乙醇至清膏相對密度為1.06～1.08(60℃)，備用；藥渣備用。甘草、苦杏仁(炒)、黃芩(酒蒸)、天南星(制)、紫蘇子(炒)、桔梗、桑白皮、紫菀與陳皮、薄荷提油后的藥渣，麻黃、法半夏、浙貝母醇提后的藥渣合并，加水煎煮3次，每次用12倍量水，提取1小時，趁熱濾過，濾液與陳皮、薄荷提油后的藥液合并，離心(20000轉(zhuǎn)/分鐘)，離心液減壓濃縮至清膏相對密度為1.12～1.16(60℃)，與醇提清膏合并，攪拌均勻，取5/6量噴霧干燥{清膏相對密度1.08～1.10(60℃)，進(jìn)液物料溫度60±5℃，進(jìn)液速度50～55ml/min，進(jìn)風(fēng)溫度220±5℃，出風(fēng)溫度85±5℃}，得干燥浸膏粉，用剩余1/6量清膏做粘合劑，一步制粒{霧化壓力0.25Mpa，物料溫度55±5℃，進(jìn)風(fēng)溫度80±5℃，出風(fēng)溫度50±5℃}，整粒(22目)，噴入揮發(fā)油，密閉12小時，加入1％硬脂酸鎂，片壓，檢查，分裝，即得。
實(shí)施例3 本發(fā)明藥物組合物指標(biāo)性成分的含量控制精密稱取實(shí)施例1制備的本發(fā)明藥物內(nèi)容物約1.5g，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲處理60分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液10ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，并定量轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典二000年版一部附錄IVB)試驗(yàn)，吸取對照品溶液1μl與2μl，供試品溶液2μl，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置80℃烘箱烘約20分鐘，放冷，噴以茚三酮試液，置105℃烘至顯色清晰。立即覆蓋相同大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法(中國藥典二000年版一部附錄IVB)進(jìn)行掃描，波長λS＝510nm，λR＝640nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。
本品含麻黃按鹽酸麻黃堿(C10H16NOCl)計(jì)算制劑單位不得少于2.3mg。
通過控制制劑中鹽酸麻黃堿的含量而達(dá)到控制整個藥物組合物質(zhì)量的目的。
實(shí)施例4 本發(fā)明藥物組合物膠囊劑與原方丸劑比較千金止咳丸采用將處方十三味藥物粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，用水泛丸，干燥的工藝制成。全方入藥，體積大，服用困難；藥物成分被包裹在植物細(xì)胞內(nèi)，起效慢，生物利用度低。本發(fā)明藥物組合物制備方法制備的膠囊劑針對處方中每味藥物所含有效成分種類、性質(zhì)，將方中十三味藥物分為三條工藝路線，用最佳提取條件提取，提高了處方有效成分的含量，降低了無效物質(zhì)含量，大大降低了服用量；采用噴霧干燥技術(shù)，改善了浸膏粉性狀，縮短了干燥時間；顆粒成型采用沸騰制粒技術(shù)，使得顆粒色澤、溶化性、流動性等均較原丸劑劑型有所改善和提高；以提取物直接使用，顯效快，生物利用度高。本發(fā)明藥物組合物膠囊劑與千金止咳丸比較見表。
表本發(fā)明藥物組合物膠囊劑與千金止咳丸比較

可見將千金止咳丸劑改為本發(fā)明藥物組合物膠囊劑，通過對組方原料提取方法的改變，與丸劑相比具有明顯優(yōu)勢。
以下通過具體藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果實(shí)驗(yàn)例1 本發(fā)明藥物的藥效學(xué)試驗(yàn)一、試驗(yàn)?zāi)康挠^察本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對大鼠氣管中插入的毛細(xì)玻璃管內(nèi)排痰量的影響，對二氧化硫所致小鼠咳嗽潛伏期的影響，對氯化乙酰膽堿所致豚鼠哮喘的引喘潛伏期的影響，對金黃色葡萄球菌腹腔注射所致小鼠死亡數(shù)的影響。
二、試驗(yàn)材料1)受試藥物本發(fā)明藥物組合物膠囊劑(浸膏)，棕褐色，2.1g生藥/ml。四川省仁德制藥有限公司提供，批號030508。臨用前將浸膏用蒸餾水配制成0.24、0.12與0.06g生藥/ml的混懸藥液供小鼠試驗(yàn)給藥用，配制成0.250、0.125與0.062g生藥/ml的混懸藥液供大鼠、豚鼠試驗(yàn)組藥用。
2)原劑型對照藥物千金止咳丸(藥材粉)，四川省仁德制藥有限公司提供，批號030505。臨用前用蒸餾水配制成0.25、0.24g生藥/ml的混懸藥液供試驗(yàn)用。
3)陽性對照藥物氯化銨，500g/袋，自貢鴻鶴制藥有限責(zé)任公司，批號021116。批準(zhǔn)文號川衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1984)第002907號。臨用前用蒸餾水將其配制成0.06g/ml的藥液供試驗(yàn)用。
磷酸可待因片，30mg/片，北京中順制藥廠，批號020303。批準(zhǔn)文號京衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1996)第115002號。臨用前反復(fù)研磨后用蒸餾水將其配制成1.2mg/ml的混懸藥液供試驗(yàn)用。
博利康尼(硫酸特布他林片)，2.5mg/片，阿斯特拉(無錫)制藥有限公司，批號200203009c。批準(zhǔn)文號蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1985)第334301號。臨用前反復(fù)研磨后用蒸餾水將其配制成0.156mg/ml的混懸藥液供試驗(yàn)用。
阿莫西林膠囊，250mg/粒，中美合資昆明貝克諾制藥有限公司，批號021021。批準(zhǔn)文號滇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1995)第001550號。臨用前反復(fù)研磨后用蒸餾水將其配制成16mg/ml的混懸藥液供試驗(yàn)用。
4)試劑、儀器與其它物品試劑烏拉坦，分析純，500g/瓶，成都化學(xué)試劑廠，批號990212。
亞硫酸氫鈉，分析純，500g/瓶，上海試劑四廠，批號010512。
硫酸，分析純，500ml/瓶，成都化學(xué)試劑廠，批號000917。
氯化乙酰膽堿，化學(xué)純，1g/支，上海試劑三廠，批號011208。
營養(yǎng)肉湯，生物試劑，250g/瓶，杭州天和微生物試劑有限公司，批號20021015。稱取本品22g，加入蒸餾水1000ml，加溫溶解，分裝，蒸氣消毒器121℃，15分鐘滅菌，4℃保存?zhèn)溆谩?br> 儀器自制小鼠二氧化硫引咳裝置，加入適量亞硫酸氫鈉與硫酸制備二氧化硫，并可定量將其注入染毒瓶內(nèi)。
402型超聲霧化治療器，上海四菱醫(yī)療器械廠生產(chǎn)。滬器監(jiān)(準(zhǔn))字91第223001號。
自制4L染毒柜。
全自動微生物分析儀，VITEK-32型，法國。
醫(yī)用凈化工作臺，VJ-1450DA型，蘇州凈化設(shè)備廠。
隔水式電熱培養(yǎng)箱，303S-1型，上海浦東萊豐科學(xué)儀器有限公司。
YXQG01型蒸氣消毒器，山東新華醫(yī)療器械廠。
Sartoriius電子天平，d＝0.01mg，德國。
T1000型電子天平，d＝0.1，美國雙杰兄弟(集團(tuán))有限公司。
其它物品金黃色葡萄球菌102495株，臨床新近從慢性支氣管炎急性發(fā)作患者痰液標(biāo)本中分離，經(jīng)全自動微生物分析儀GPI鑒定，由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科細(xì)菌室提供。
毛細(xì)玻璃管，內(nèi)徑0.8mm，管長10cm，四川成都華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠提供。橫斷成約5cm長備用。
5)試驗(yàn)動物昆明種小鼠，一級動物，由四川抗菌素工業(yè)研究所動物中心提供，許可證川實(shí)動管質(zhì)第99-30號。
白色豚鼠，一級動物，由四川省實(shí)驗(yàn)動物專業(yè)委員會養(yǎng)殖場提供，許可證川實(shí)動管質(zhì)第99-12號。
大、小鼠飼料為鼠顆粒料，豚鼠飼料為兔顆粒料，均由四川省實(shí)驗(yàn)動物專業(yè)委員會養(yǎng)殖場提供。
6)統(tǒng)計(jì)分析計(jì)量資料以X±SD表示，用t檢驗(yàn)處理。
計(jì)數(shù)資料用校正X2法或簡化直接概率法處理。
三、方法和結(jié)果1、大鼠毛細(xì)玻璃管排痰量法大鼠72只，體重210～250g，按性別隨機(jī)分為6組，每組12只，雌雄各半。分別為對照組、本發(fā)明藥物組合物膠囊劑4.0、2.0、1.0g生藥/kg(相當(dāng)于推薦臨床試驗(yàn)60kg成人日用劑量的20、10、5倍)組，千金止咳丸4.0g生藥/kg(相當(dāng)于臨床60kg成人日用劑量的20倍)組，氯化銨1.0g/kg(相當(dāng)于原臨床60kg成人最大日用劑量的33倍)組。禁食約10小時后，每只大鼠腹腔注射25％烏拉坦溶液，0.4ml/100g體重麻醉，仰位固定，縱向剪開頸中部皮膚，鈍性剝離分離出氣管，于甲狀軟骨下緣正中兩軟骨之間用眼科剪剪一T型切口，斜向下插入一根毛細(xì)玻璃管，使其插入端剛好接觸氣管底部表面，暴露部分用膠布適當(dāng)固定，若管內(nèi)充滿痰液，則立即另換一根。記錄給藥前2小時的正常排痰量(即管內(nèi)吸取的痰液長度)后，各組采用等容積不等濃度藥液法一次性灌胃給予不同藥液，給藥容積為1.6ml/100g體重，對照組大鼠灌胃給予等容積的蒸餾水。繼續(xù)記錄給藥后2小時的排痰量。計(jì)算每只大鼠給藥前后2小時內(nèi)平均每小時的排痰量及排痰量變化值，各組每小時排痰量及排痰量變化值均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差，比較每組給藥前后每小時排痰量及給藥后各組間每小時排痰量變化值差異的顯著性。結(jié)果見表1。
表1 本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對大鼠氣管中毛細(xì)玻璃管內(nèi)排痰量的影響組別 每小時排痰量(cm)劑量(g生藥 動物數(shù) 每小時排痰/kg×d)(只)量變化值給藥前 給藥后(cm)對照 -122.45±0.44 2.67±0.62 0.22±0.54本發(fā)明藥物組合物膠4.0×1 122.59±0.39 3.58±0.85△△0.99±0.61**囊劑本發(fā)明藥物組合物膠2.0×1 122.63±0.55 3.37±0.78△0.74±0.51*囊劑本發(fā)明藥物組合物膠1.0×1 122.54±0.40 2.84±0.62 0.30±0.39囊劑千金止咳丸 4.0×1 122.47±0.47 3.14±0.62△△0.67±0.47*氯化銨 1.0g/kg×1 122.66±0.60 3.45±0.82△0.79±0.70*
自身前后比較△P＜0.05，△△P＜0.01與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由表1可見，一次性灌胃給予大鼠4.0、2.0g生藥/kg的本發(fā)明藥物組合物膠囊劑后，其氣管中毛細(xì)玻璃管內(nèi)每小時排痰量均較給藥前顯著增加，且每小時排痰量變化值亦較對照組顯著增加；劑量降低至1.0g生藥/kg，上述指標(biāo)變化不明顯，表明本發(fā)明藥物組合物膠囊劑有增加大鼠排痰的作用。且與丸劑比較，服用相同劑量的原生藥，由于提取工藝的改變，使藥效學(xué)發(fā)揮了顯著的差異，充分說明本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)越性。
2、小鼠二氧化硫引咳法小鼠84只，體重18.2～21.7g，按性別隨機(jī)分為6組，每組14只，雌雄各半。分別為對照組、本發(fā)明藥物組合物膠囊劑6.0、3.0、1.5g生藥/kg(相當(dāng)于推薦臨床試驗(yàn)60kg成人日用劑量的30倍)組。采用等容積不等濃度藥液法灌胃給予不同藥液，給藥容積為0.25ml/10g體重，對照組小鼠灌胃給予等容積的蒸餾水，每日一次，連續(xù)給予三天。末次給藥后約1小時，將小鼠逐只放入二氧化硫引咳裝置末端的250ml三角燒瓶中，立即向內(nèi)注入5ml二氧化硫，觀察并記錄每只小鼠的咳嗽潛伏期，即注入二氧化硫至小鼠出現(xiàn)咳嗽的時間；每只小鼠測量完畢后，需將三角燒瓶內(nèi)壁擦拭干凈，再將瓶口朝下用清潔空氣吹數(shù)遍。計(jì)算各組咳嗽潛伏期均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差，比較各組間差異的顯著性；結(jié)果見表2。
表2本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對二氧化硫引咳小鼠咳嗽潛伏期的影響組別劑量(g生藥/kg×d)動物數(shù)(只)咳嗽潛伏期(s)對照 -14 15.8±4.6本發(fā)明藥物組合物膠囊劑 6.0×3 14 24.9±6.7***本發(fā)明藥物組合物膠囊劑 3.0×3 14 22.1±7.8*本發(fā)明藥物組合物膠囊劑 1.5×3 14 20.7±5.9*千金止咳丸 6.0×3 14 22.6±5.7**磷酸可待因片30mg/kg×3 14 29.2±7.5***與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
由表2可見，預(yù)防性給予小鼠6.0、3.0與1.5g生藥/kg的本發(fā)明藥物組合物膠囊劑3天后，各給藥劑量組咳嗽潛伏期與對照組比較差異顯著，均明顯延長，尤以6.0g生藥/kg組的咳嗽潛伏期延長最為顯著(***P＜0.001)，表明本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對二氧化硫小鼠咳嗽反應(yīng)與原丸劑相比，具有更明顯的抑制作用，充分說明本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)越性。
3、豚鼠氯化乙酰膽堿引喘法白色豚鼠一批，雌雄兼有，體重180～220g。將豚鼠逐只置于4L的染毒柜中，用402型超聲霧化治療器，霧量開至最大，按下開關(guān)，霧化的2％氯化乙酰膽堿溶液迅速導(dǎo)入染色柜內(nèi)，噴霧時間為15秒，觀察并記錄豚鼠引喘潛伏期，即按下開關(guān)噴霧開始至豚鼠出現(xiàn)喘息性抽搐跌倒的時間。每只測量完畢后，需用清潔空氣吹染毒柜數(shù)秒。選取潛伏期為32～77秒的豚鼠60只，按潛伏期分層隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半。分別為對照組，本發(fā)明藥物組合物膠囊劑4.0、2.0、1.0g生藥/kg組，千金止咳丸4.0g生藥/kg組，博利康尼2.5mg/kg(相當(dāng)于臨床60kg成人日用劑量的20倍)組。采用等容積不等濃度藥液法灌胃給予不同藥液，給藥容積為1.6ml/100g體重，對照組豚鼠灌胃給予等容積的蒸餾水，每日一次，連續(xù)給予三天。末次給藥后約1小時，同法引喘并觀察記錄豚鼠的引喘潛伏期。計(jì)算各組給藥后引喘潛伏期均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差，比較各組間差異的顯著性。結(jié)果見表3表3本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對氯化乙酰膽堿所致豚鼠哮喘潛伏期的影響組別 劑量(g生藥/kg×d) 動物數(shù)(只) 引喘潛伏期(s)給藥前 給藥后對照 - 10 51.4±10.554.5±9.7本發(fā)明藥物組合物膠囊劑4.0×310 52.4±12.371.9±15.7**本發(fā)明藥物組合物膠囊劑2.0×310 51.6±10.466.8±13.1*本發(fā)明藥物組合物膠囊劑1.0×310 51.4±10.863.7±14.4千金止咳丸4.0×310 52.3±13.065.7±12.5*博利康尼 2.5mg/kg×3 10 51.0±11.290.8±16.1***與同期對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001由表3可見，以不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊劑預(yù)防性給予豚鼠3天后，4.0、2.0g生藥/kg組的引喘潛伏期延長，與對照組比較差異顯著，尤以4.0g生藥/kg組與對照組比較有顯著差異；而1.0g生藥/kg組的引喘潛伏期雖有延長，但與對照組比較差異無顯著意義(P＞0.05)。表明本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對氯化乙酰膽堿誘發(fā)的豚鼠哮喘與原丸劑比較，在服用相同劑量的原生藥時，平喘作用具有顯著差異，充分說明本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)越性。
4、小鼠體內(nèi)抗菌法小鼠120只，體重18.0～21.0g，按性別隨機(jī)分為6組，每組20只，雌雄各半。分別為對照組、本發(fā)明藥物組合物膠囊劑6.0、3.0、1.5g生藥/kg組，千金止咳丸6.0g生藥/kg組，阿莫西林膠囊400mg/kg(相當(dāng)于臨床60kg成人一般日用劑量的16倍)組。采用等容積不等濃度藥液法灌胃給予不同藥液，給藥容積為0.25ml/10g體重，對照組小鼠灌胃給予等容積的蒸餾水，每日一次，連續(xù)給予五天。第五天于感染菌液前后2小時各組按每日給藥量的1/2分別給予一次。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，用經(jīng)16小時培養(yǎng)的以無菌營養(yǎng)肉湯作1∶1稀釋后的金黃色葡萄球菌菌液，小鼠按0.5ml/只進(jìn)行右下腹部(皮膚已消毒)腹腔注射造成感染，記錄感染后一周內(nèi)死亡動物數(shù)，比較各組間死亡動物數(shù)差異的顯著性，計(jì)算各組存活保護(hù)率(％)，結(jié)果見表4表4本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對金黃色葡萄球菌腹腔注射感染小鼠死亡數(shù)的影響劑量(g生藥動物數(shù)死亡動物與對照組存活保護(hù)組別/kg×d) (只) 數(shù)(只)比較 率(％)對照 -2019 5本發(fā)明藥物組合物膠囊劑6.0×5 2010 P＜0.01 50本發(fā)明藥物組合物膠囊劑30×5 2013 P＜0.05 35本發(fā)明藥物組合物膠囊劑1.5×5 2017 P＞0.05 15千金止咳丸6.0×5 2012 P＜0.05 40阿莫西林膠囊 400mg/kg×520 7 P＜0.01 65由表4可見，以各劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊劑給藥5天，6.0、3.0g生藥/kg組小鼠死亡數(shù)顯著少于對照組，尤以6.0g生藥/kg組具有更顯著差異，而1.5g生藥/kg組小鼠死亡數(shù)雖少于對照組但差異無顯著意義。表明本發(fā)明藥物組合物膠囊劑對金黃色葡萄球菌感染的小鼠模型具有一定的抗感染作用，與原丸劑比較，在使用相同劑量的原生藥的條件下，具有差異，說明本發(fā)明藥物的優(yōu)越性。
四、試驗(yàn)結(jié)論本發(fā)明藥物組合物膠囊劑4.0、2.0g生藥/kg可以明顯增加大鼠氣管中插入的毛細(xì)玻璃管內(nèi)的排痰量；6.0、3.0、1.5g生藥/kg能夠顯著延長二氧化硫所致小鼠咳嗽潛伏期；4.0、2.0g生藥/kg可以顯著延長氯化乙酰膽堿所致豚鼠哮喘的引喘潛伏期；本發(fā)明藥物組合物膠囊劑6.0、3.0g生藥/kg還能夠明顯減少金黃色葡萄球菌腹腔注射感染小鼠的死亡數(shù)。本發(fā)明藥物具有祛痰、止咳、平喘作用及一定的體內(nèi)抑菌作用。
通過上述藥效學(xué)試驗(yàn)說明，將原劑型(丸劑)改成其它劑型(包括丸劑)并非是同一水平的不斷重復(fù)，以本發(fā)明藥物組合物的制備方法為基礎(chǔ)，制備的藥劑克服的原劑型的缺陷，且通過藥效學(xué)試驗(yàn)證明與原丸劑相比有顯著性差異，充分說明本發(fā)明藥物組合物及其制備方法是可行的，對所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員來說并非是顯而易見，為臨床提供了一種安全、有效、穩(wěn)定、可控的藥物組合物。
參考文獻(xiàn)1肖崇厚主編，中藥化學(xué)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1994，141.
權(quán)利要求
1.一種治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，它是由下列步驟制備而成a、按下列重量配比稱取各原料藥麻黃100～466份、甘草80～372份、炒苦杏仁50～234份、法半夏40～186份、酒蒸黃芩30～140份、制天南星30～140份、炒紫蘇子30～140份、薄荷30～140份、桔梗30～140份、浙貝母30～140份、桑白皮30～140份、陳皮30～140份、紫菀20～94份；b、將陳皮、薄荷用水蒸餾提取揮發(fā)油，濾過，提取揮發(fā)油后的藥液、藥渣備用；c、將麻黃、法半夏、浙貝母分別用50％～70％v/v乙醇提取，合并濾液，減壓回收乙醇至清膏，清膏備用，藥渣備用；d、取甘草、炒苦杏仁、酒蒸黃芩、制天南星、炒紫蘇子、桔梗、桑白皮、紫菀與b、c步驟所得的藥渣，合并，加水煎煮，過濾，濾液與b步驟陳皮、薄荷提取揮發(fā)油后的藥液合并，濃縮至清膏，與c步驟所得的清膏合并，干燥，制粒，加入揮發(fā)油，加入藥學(xué)上常用的輔料，制成藥學(xué)上常用的劑型。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于步驟a按重量配比稱取各原料藥麻黃283份、甘草226份、炒苦杏仁142份、法半夏113份、酒蒸黃芩85份、制天南星85份、炒紫蘇子85份、薄荷85份、桔梗85份、浙貝母85份、桑白皮85份、陳皮85份、紫菀57份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于步驟c中用60％v/v乙醇回流提取，pH值為5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于步驟d中干燥，制粒采用噴霧干燥、一步制粒聯(lián)合制粒。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于步驟d中干燥采用噴霧干燥的條件是清膏相對密度1.08～1.10，進(jìn)液物料溫度60±5℃，進(jìn)液速度50～55ml/min，進(jìn)風(fēng)溫度220±5℃，出風(fēng)溫度85±5℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于步驟d所述的藥劑是膠囊劑、片劑、散劑、丸劑、顆粒劑。
7.權(quán)利要求1所述的治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法制備的藥物組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于每制劑單位含麻黃堿，按鹽酸麻黃堿計(jì)算不低于2.3mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療急、慢性支氣管炎的藥物組合物的制備方法，它是由麻黃、甘草、苦杏仁(炒)、法半夏、黃芩(酒蒸)、天南星(制)、紫蘇子(炒)、薄荷、桔梗、浙貝母、桑白皮、陳皮、紫菀為原料制備的藥物組合物的制備方法，通過本發(fā)明藥物組合物的制備方法制備的藥物組合物有效成分含量高，降低服用量，同時選用麻黃堿作為指標(biāo)性成分，使本發(fā)明藥物組合物安全，有效，穩(wěn)定，可控，為臨床提供了一種新的用藥選擇。
文檔編號A61K9/16GK1557432SQ20041002172
公開日2004年12月29日 申請日期2004年2月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月2日
發(fā)明者陳仁德, 張廷模 申請人:四川省仁德制藥有限公司