專利名稱：：一種治療心腦血管病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療心腦血管病的藥物，具體地說是黃芪和銀杏的有效部位組成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：銀杏(白果)我國古來就作藥用，主要用于益心斂肺，平喘止痛，用于肺熱、咳嗽、冠心病，心絞痛?，F(xiàn)代主要用于(1)心腦血管系統(tǒng)缺血性疾??；(2)改善器質(zhì)性神經(jīng)癥狀；(3)中樞神經(jīng)賦活，增強記憶，防治老年癡呆；(4)末梢血管循環(huán)障礙。銀杏葉主要成分為黃酮類化合物、萜類化合物。從化學(xué)角度，其中重要的有效成分是銀杏內(nèi)酯類，迄今僅從銀杏一種植物中發(fā)現(xiàn)?，F(xiàn)代藥理研究表明，銀杏內(nèi)酯為目前天然抗血小板激活因子(PAF)受體拮抗劑中最有臨床應(yīng)用前景的藥物，其中銀杏內(nèi)酯B拮抗PAF受體的選擇性和活性最強。銀杏內(nèi)酯可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善缺血病人的微循環(huán)，減少血栓形成；同時穩(wěn)定細(xì)胞膜，減少血管緊張素的滲透；具有抗過敏、抗炎、抗休克作用，對缺血損傷及器官移植的排斥反應(yīng)亦有保護作用。黃芪是一益氣固表、對心臟有保護作用、能提高機體免疫功能的傳統(tǒng)中藥。它主要含有皂苷、多糖，此外還含有氨基酸、黃酮等成分。黃芪皂苷對急梗犬心有改善心肌收縮功能，縮小心肌梗塞面積，減輕心肌損傷的作用；黃芪皂苷能有效改善心肌缺血，保護心腦血管，改善心微循環(huán)。其主要起效成分為黃芪甲苷?，F(xiàn)有黃芪藥材中黃芪甲苷含量很低，約為0.04％?，F(xiàn)市售黃芪注射液，如成都地奧、上海福達生產(chǎn)的黃芪注射液等，由于工藝原因，一般采用水提多次醇沉法，而水提黃芪皂苷的提取率較低，且濾過比較困難，慢而易堵塞濾布，不易操作；醇沉?xí)r黃芪皂苷的損失也比較大，因而制劑中黃芪皂苷的含量較低。此外，現(xiàn)有黃芪注射液補氣作用較強，而活血作用較差。目前治療腦中風(fēng)、心肌梗塞等心腦血管疾病尚缺乏非常理想的治療藥物，西藥常用尼莫地平、肝素、蚓激酶、蝮蛇抗栓酶等鈣拮抗劑和溶栓劑，中藥常用燈盞花素注射液、丹參注射液、復(fù)方黃芪注射液、黃芪注射液、血塞通(三七皂甙注射液)等活血化瘀藥物等，但由于很多中藥品種作用的物質(zhì)基礎(chǔ)與療效不夠明確，使得中藥在急性缺血性中風(fēng)中的使用受到較大限制，市場急需成分明確、安全有效的急性缺血性中風(fēng)治療藥。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是提供一種治療心腦血管病的藥物組合物，該藥物組合物能產(chǎn)生協(xié)同作用，療效顯著提高。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種治療心腦血管病的藥物組合物，它由從黃芪中提取的黃芪皂苷和從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯兩種原料組成。本發(fā)明藥物所用原料的重量配比可以為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.1-10份。本發(fā)明藥物所用原料的優(yōu)選配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.2-5份。本發(fā)明藥物所用原料的更優(yōu)選配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.5-2份。本發(fā)明藥物所用原料的最佳配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯1份。本發(fā)明藥物的劑型可以是注射液、輸液、粉針、滴丸、片劑、緩釋片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑中任何一種現(xiàn)有藥物劑型。本發(fā)明藥物所治的心腦血管病主要包括腦血栓、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心衰、心律失常等。本發(fā)明的藥物組合物可采用一般方法將黃芪皂苷和銀杏內(nèi)酯均勻混合后，按現(xiàn)有制劑工藝制成各種劑型。原料中黃芪皂苷可采用以下方法從黃芪中提??；取黃芪藥材，用乙醇提取，收集提取液，回收乙醇后的提取液過大孔吸附樹脂，先用水或5-20％的低濃度乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質(zhì)，棄去不用，再用40-95％的高濃度乙醇洗脫，收集此高濃度乙醇洗脫液，將回收乙醇后的洗脫液干燥，即得黃芪皂苷。銀杏內(nèi)酯可以采用以下方法從銀杏中提取取銀杏藥材，用乙醇提取，收集提取液，在回收乙醇后的提取液中，加水稀釋，靜置沉淀，過濾，取上清液濃縮成浸膏；將所述浸膏過大孔吸附樹脂，先用水或5-20％的低濃度乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質(zhì)，棄去不用，再用40-95％的高濃度乙醇洗脫，收集此高濃度乙醇洗脫液，將回收乙醇后的洗脫液干燥，即得銀杏內(nèi)酯。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是該藥物組合物含有黃芪皂苷和銀杏內(nèi)酯，它能產(chǎn)生協(xié)同作用，比單用同劑量黃芪皂苷或單用同劑量銀杏內(nèi)酯的效果均大大提高，經(jīng)藥效學(xué)試驗證明其療效顯著。本發(fā)明藥物的療效由以下藥效學(xué)試驗證明設(shè)計了黃芪皂苷、銀杏內(nèi)酯及兩者的不同配比樣品，以犬大腦中動脈結(jié)扎所致腦缺血模型試驗，測定犬大腦中動脈結(jié)扎后的腦組織缺血區(qū)重量，犬大腦中動脈血流速度；以犬冠狀動脈前降支結(jié)扎法所致心肌梗塞模型試驗，考察對心肌缺血酶學(xué)指標(biāo)及左室梗塞范圍的影響，從而考察黃芪皂苷、銀杏內(nèi)酯及兩者的不同配比樣品對心腦血管疾病的治療作用。材料動物中國草種犬(雜種犬)，體重8.5-12.5kg。器材ACS-0-6T型天平，Model-820型組織切片機，OLYMPUSPM-10AD攝影顯微鏡，ES-1000SPM多譜勒超聲血流探測儀，Basic型半自動生化分析儀，泰盟BL-420型生物機能信號系統(tǒng)，Model-820型組織切片機，，RODENTVENTILATORDH-150型呼吸機，BB6220型CO2培養(yǎng)箱，OLYMPUSIX70型倒置相差顯微鏡，DU640型紫外可見分光光度計，眼科剪、眼科鑷及常用手術(shù)器械、0號手術(shù)絲線、血管夾等。藥品及試劑黃芪皂苷及銀杏內(nèi)酯不同配比(黃芪皂苷/銀杏內(nèi)酯分別為10/0、10/1、5/1、1/1、1/5、1/10、0/10)的藥物；以市售黃芪皂苷注射液(血塞通)、銀杏注射液為陽性藥對照；戊巴比妥鈉，中國醫(yī)藥集團(上海)化學(xué)試劑公司進口分裝；龍膽紫，成都科龍化工試劑廠；CPK試劑盒，北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品；LDH試劑盒，北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品；DMEM培養(yǎng)液，HyClone公司，試驗時加入小牛血清20％、青、鏈霉素各100U/ml使用；0.25％胰蛋白酶，HyClone公司，試驗時用D-Hanks液稀釋為0.08％使用；D-Hanks，實驗室自己配置，-20℃保存，用時恢復(fù)至室溫；LDH測試盒，南京建成生物工程研究所；AST測試盒，南京建成生物工程研究所；CK測試盒，南京建成生物工程研究所；小牛血清，HyClone公司。試驗方法1、犬大腦中動脈結(jié)扎所致腦缺血模型試驗草犬60只，隨機分成10組，每組6只，腹腔注射3％戊巴比妥鈉1.0ml/kg(30mg/kg)麻醉，固定于犬手術(shù)臺上，然后在犬右外眼角與右耳根部1/2處(中點)，用電刀切開皮膚，分離肌肉，用手術(shù)專用顱骨鉆鉆開顱骨，以咬骨鉗擴大顱骨孔，切開硬腦膜，找到大腦中動脈。先用多譜勒超聲血流探測儀測定大腦中動脈血流速度，然后靜脈注射給藥，給藥15min后，再次同前法測定大腦中動脈血流速度，隨后立即將大腦中動脈結(jié)扎造成腦缺血。大腦中動脈結(jié)扎6小時后，分離雙側(cè)頸總動脈并夾閉之，即刻從右側(cè)頸總動脈夾閉處的遠(yuǎn)心端灌注20ml龍膽紫飽和溶液對腦組織進行染色，然后處死動物，開顱取出腦組織，稱全腦重，遂切下未染色的腦組織(即缺血區(qū)腦組織)稱重，求出其占全腦重量的百分率，并進行病理組織學(xué)檢查(按常規(guī)取腦組織，10％甲醛固定1周，H.E染色，石臘包埋切片，光學(xué)顯微鏡下觀察)，以判斷其是否屬于腦缺血性損傷，結(jié)果見表一、表二。試驗方法2、犬冠狀動脈前降支結(jié)扎法所致心肌梗塞模型試驗健康犬60只，雌雄兼用，用戊巴比妥納30mg/kg靜脈麻醉后氣管插管(備作開胸時人工呼吸用)，分離左側(cè)頸總動脈，插入適當(dāng)口徑的聚乙稀管(內(nèi)充滿肝素生理鹽水)，連接壓力換能器測定外周血壓(AP)，股靜脈插管接輸液管以備給藥，同時測定心電圖(ECGII)。從胸骨左緣沿第四或第五肋間開胸，切開一根肋骨并用撐開器撐開使全心充分暴露。剪開心包作心包吊籃，插入適當(dāng)口徑的聚乙稀管(內(nèi)充滿肝素生理鹽水)，連接壓力換能器測定左室內(nèi)壓(LVP)，左心室舒張未期壓(LVEDP)及左心室內(nèi)壓最大上升速率(LV+dp/dt)和最大下降速率(LV-dp/dt)；分離深主動脈根部，用多譜勒超聲血流探測儀測定主動脈血流速度(用于折算心輸出量CO)。除直接測取上述參數(shù)外，按公式1[1]計算，間接測定左心室心肌耗氧量。以上指標(biāo)均同步記錄于泰盟BL-420型生物機能信號系統(tǒng)上，等各項指標(biāo)穩(wěn)定后，經(jīng)靜脈恒速滴注藥物，注射容量均為2ml/kg，注射前、注射后15min兩個時間點，均記錄上述各項參數(shù)一次。然后于左冠狀動脈前降支(LAD1/3處，供應(yīng)心室前壁及心尖部的第一級血管分支起始部)雙重結(jié)扎，結(jié)扎后5、10、15、30、60和120分鐘分別開機記錄上述各項參數(shù)。并在結(jié)扎LAD前和結(jié)扎后3小時，取靜脈血測定乳酸脫氫酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)含量；然后迅速放血摘取心臟，NBT染色法稱重并計算心室梗塞范圍。用配對T檢驗對模型組給藥前后差異進行顯著性比較，用組間T檢驗對各試驗組間結(jié)扎LAD增減比率(按公式2計算)進行顯著性比較，結(jié)果見表三。公式1左心室心肌耗氧量MVO2=K1(BPs×HR)+K2(0.8BPs+0.2BPd)×HR×SVBW+1.43]]>MVO2＝左心室心肌耗氧量(mlO2/min/100g)，K1＝4.08×10-4，K2＝3.25×10-4，BPs＝收縮壓(mmHh)，BPd＝舒張壓(mmHh)，HR＝心率(bats/min)，SV＝每搏輸出量(ml/beat)，BW＝體重(kg)公式2結(jié)扎LAD增減比率表一不同配比的黃芪皂苷和銀杏內(nèi)酯藥物(注射)對實驗性犬腦缺血的影響(x±SD)<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="710">組別犬?dāng)?shù)(只)全腦重(g)腦缺血區(qū)重(g)缺血區(qū)重/全腦重(％)對照組黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(10/0)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(10/1)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(5/1)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(1/1)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(1/5)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(1/10)黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯(0/10)黃芪注射液銀杏注射液666666666662.65±5.6052.82±4.2258.82±5.8161.12±5.8562.67±5.2058.62±6.2259.62±5.8256.88±6.2249.26±6.2255.92±6.2218.90±4.8215.55±3.2216.25±2.6918.62±3.66*7.65±2.88**9.20±8.02**11.68±2.02**15.82±4.0216.25±4.2216.22±3.5229.50±6.2226.27±4.8025.16±4.2622.02±3.52*12.21±4.89**16.98±6.02**19.22±2.69**22.28±8.8025.26±4.5228.28±6.65</table></tables>注各給藥組與對照組比較*P＜0.05**P＜0.01表一結(jié)果顯示，對照組缺血區(qū)重/全腦重(％)為29.50±6.22，說明動物模型造模成功，各給藥組均可不同程度地降低犬大腦中動脈結(jié)扎后的腦組織缺血區(qū)重量(P＜0.01和P＜0.05)，其中以黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯1/1、1/5、1/10效果最好(P＜0.01)，黃芪皂苷/銀杏內(nèi)酯10/1、5/1效果次之，黃芪皂苷與銀杏內(nèi)酯配比使用比單用黃芪皂苷或單用銀杏內(nèi)酯效果好，并且效果均優(yōu)于市售黃芪注射液及銀杏注射液。效果最好的配比為黃芪皂苷∶銀杏皂甙＝1∶1。表二不同配比的黃芪皂苷和銀杏內(nèi)酯藥物(注射)對犬大腦中動脈血流速度的影響注各給藥組與對照組比較*P＜0.05**P＜0.01表二結(jié)果顯示，各給藥組均可明顯和顯著升高犬大腦中動脈平均血流速度(P＜0.05和P＜0.01)，其中以黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯1/1、1/5效果最好(P＜0.01)，黃芪皂苷/銀杏內(nèi)酯10/1、5/1、1/10效果次之，黃芪皂苷與銀杏內(nèi)酯配比使用比單用黃芪皂苷或單用銀杏內(nèi)酯效果好。并且效果均優(yōu)于市售黃芪注射液及銀杏注射液。效果最好的配比為黃芪皂苷∶銀杏皂甙＝1∶1。表三對麻醉犬結(jié)扎LAD心肌缺血酶學(xué)指標(biāo)及左心室梗塞范圍的影響(X±SD，N＝6)注與NS對照組比較*P＜0.05**P＜0.01。由表三可見，各給藥組均可使左心室梗塞范圍明顯縮小(P＜0.05)，顯著和明顯降低模型動物的LDH和CPK(P＜0.01和P＜0.05)，其中以黃芪皂苷∶銀杏內(nèi)酯1/1、1/5、1/10效果最好(P＜0.01)，黃芪皂苷/銀杏內(nèi)酯10/1、5/1效果次之，黃芪皂苷與銀杏內(nèi)酯配比使用比單用黃芪皂苷或單用銀杏內(nèi)酯效果好。并且效果均優(yōu)于市售黃芪注射液及銀杏注射液。提示兩組分配伍使用后，對LAD結(jié)扎的心機梗死有更好的保護作用。其中，效果最好的配比為黃芪皂苷∶銀杏皂甙＝1∶1。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明作進一步的詳細(xì)描述。實施例一取黃芪皂苷10g，黃芪皂苷1g，植物油25g，混勻，用明膠作囊殼材料，壓制成軟膠囊，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和0.1份黃芪皂苷的軟膠囊劑型的藥物組合物。實施例二取銀杏內(nèi)酯1g，黃芪皂苷10g，溶于1000ml注射用水中，采用現(xiàn)有粉針劑制備工藝，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和10份黃芪皂苷的粉針劑型的藥物組合物。實施例三取銀杏內(nèi)酯10g，黃芪皂苷2g，淀粉100g，混合均勻，采用膠囊制備工藝，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和0.2份黃芪皂苷的膠囊劑型的藥物組合物。實施例四取銀杏內(nèi)酯1g，黃芪皂苷15g，混合均勻，采用滴丸制備工藝，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和15份黃芪皂苷的滴丸劑型的藥物組合物。實施例五取銀杏內(nèi)酯10g，黃芪皂苷10g，蔗糖80g，混合均勻，制粒，過篩，干燥，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和1份黃芪皂苷的顆粒劑型的藥物組合物；或?qū)⒅频玫念w粒經(jīng)進一步壓片，干燥，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和1份黃芪皂苷的片劑劑型的藥物組合物。實施例六取銀杏內(nèi)酯2g，黃芪皂苷20g，聚乙烯60g，混合均勻，制粒，壓片，干燥，即制得含有1份黃芪皂苷和10份銀杏內(nèi)酯的緩釋片劑型的藥物組合物。實施例七取銀杏內(nèi)酯2g，黃芪皂苷10g，溶于1000ml注射用水中，采用注射劑制備工藝，即制得含有1份銀杏內(nèi)酯和5份黃芪皂苷的注射液(含輸液)劑型的藥物組合物。以上各實施例中采用的原料，黃芪皂苷可采用以下方法從黃芪中提??；取黃芪藥材，用乙醇提取，收集提取液，回收乙醇后的提取液過大孔吸附樹脂，先用水或5-20％的低濃度乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質(zhì)，棄去不用，再用40-95％的高濃度乙醇洗脫，收集此高濃度乙醇洗脫液，將回收乙醇后的洗脫液干燥，即得黃芪皂苷。銀杏內(nèi)酯則可通過下述方法制得取銀杏葉藥材，用乙醇提取，收集提取液，在回收乙醇后的提取液中，加水稀釋，靜置沉淀，過濾，取上清液濃縮成浸膏；將所述浸膏過大孔吸附樹脂，先用水或5-20％的低濃度乙醇洗脫，除去溶于極性溶劑的雜質(zhì)，棄去不用，再用40-95％的高濃度乙醇洗脫，收集此高濃度乙醇洗脫液，將回收乙醇后的洗脫液干燥，即得銀杏內(nèi)酯。權(quán)利要求1.一種治療心腦血管病的藥物組合物，它由從黃芪中提取的黃芪皂苷和從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯兩種原料組成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.1-10份。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.2-5份。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯0.5-2份。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為從黃芪中提取的黃芪皂苷1份，從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯1份。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的治療心腦血管病的藥物組合物，其特征在于它的劑型可以是注射液、輸液、粉針、滴丸、片劑、緩釋片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑中任何一種現(xiàn)有藥物劑型。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療心腦血管病的藥物，它由從黃芪中提取的黃芪皂苷和從銀杏中提取出的銀杏內(nèi)酯兩種原料組成。該藥物組合物能產(chǎn)生協(xié)同作用，療效顯著提高，比單用同劑量黃芪皂苷或單用同劑量銀杏內(nèi)酯的效果均大大提高。文檔編號A61K31/7042GK1689580SQ200410022428公開日2005年11月2日申請日期2004年4月30日優(yōu)先權(quán)日2004年4月30日發(fā)明者陳謹(jǐn),李文軍申請人:陳謹(jǐn),李文軍