專利名稱：具有抗病毒作用的魚腥草油藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗病毒作用的藥物，具體講是以天然藥用原料的揮發(fā)油成分為有效藥用成分的藥物制劑，以及該藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
魚腥草是三白草科植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)的地上部分，為中華人民共和國藥典2000年版一部所收載的常用中藥之一，具有清熱解毒，消癰排膿，利尿通淋的作用，可用于肺癰吐膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒的治療。閆雙銀在《海峽藥學(xué)》2003；15(1)8，以及吳衛(wèi)在《中草藥》2001；32(4)367等研究中報(bào)導(dǎo)，魚腥草含揮發(fā)油，油中含抗菌成分魚腥草素(癸酰乙醛)、甲基正壬基酮、月桂烯、月桂醛、辛醛、癸醛等，葉含槲皮素、異槲皮素、瑞諾苷等黃酮類成分。
體外抗病毒試驗(yàn)已證實(shí)，由水蒸氣蒸餾收集的含魚腥草揮發(fā)油的蒸餾物，對(duì)甲型流感病毒、乙型流感病毒、流行性腮腺炎病毒、單純性皰疹I(lǐng)型病毒、人體免疫缺乏I型病毒等均具有明顯的抗病毒作用，抗病毒范圍廣，且無細(xì)胞毒性；對(duì)金黃色葡萄球菌、八疊球菌、肺炎球菌、乙型溶血性鏈球菌等也有抑菌作用。目前，由單味的上述魚腥草提取物成分加工制成的藥物制劑有魚腥草注射液和魚腥草滴眼液，對(duì)流行性出血熱病毒、腺病毒3型、7型和單皰病毒I型等有抑制細(xì)胞病變的作用，已為臨床廣泛使用。其中魚腥草注射液具有抗菌、消炎、解熱的作用，主要用于治療上呼吸道感染、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、小兒肺炎、慢性鼻炎鼻竇炎、萎縮性鼻炎、單純皰疹性角膜炎和難治性腎盂腎炎等癥。
由于目前被稱為魚腥草揮發(fā)油都是采用由常規(guī)的水蒸氣蒸餾法所收集得到的餾出物成分，其實(shí)際上只是一種含有魚腥草揮發(fā)油成分的油/水混合物芳香水，其中的揮發(fā)油成分與水難以分離。如目前已有使用的魚腥草注射液和魚腥草滴眼液等藥物制劑，均系采用水蒸氣蒸餾法收集的這種芳香水作為有效藥用成分。如《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第17冊(cè)170頁等規(guī)定，為提高其溶解性能和澄明度，通常必需加入助溶劑吐溫。公開號(hào)為CN1157164A和CN1268371A的中國專利文獻(xiàn)分別報(bào)道的以新鮮魚腥草經(jīng)水蒸氣蒸餾制備魚腥草注射液和等滲注射液的方法，亦必需要使用吐溫-80作為助溶劑。晏媛在《中國藥事》2003，17(7)451的研究報(bào)導(dǎo)中提出，以上述含魚腥草揮發(fā)油成分的芳香水作為藥效成分制成的魚腥草注射液，由于成分復(fù)雜，提取純度不高，易含有雜質(zhì)或過敏原而造成過敏反應(yīng)；在中藥注射劑加入吐溫等助溶劑，也是使人體致敏的抗原成分，這些都是導(dǎo)致魚腥草注射液在臨床上頻繁發(fā)生過敏反應(yīng)的因素。此外，由于在上述芳香水中的有效藥物濃度較低且難以提高，如其魚腥草注射液或滴眼液中的有效藥物濃度僅為2g(藥材)/ml，且需加入助溶劑吐溫才能得到澄清的溶液，故無法制成高濃度的有效藥物，從而影響了魚腥草注射液的藥物療效，也不便用于制備成其他形式的藥物制劑，如使用更為方便的多種形式固體藥物制劑(如滴丸、軟膠囊等)，尤其是不含有助溶劑吐溫等成分的注射劑等。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述情況，本發(fā)明將提供一種以純魚腥草揮發(fā)油成分為有效藥用成分的具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，可以制備成口服型、噴霧型、滴鼻型和注射型等多種可供使用的藥物制劑形式，并進(jìn)一步提供該藥物的制備方法，特別是具有可工業(yè)化生產(chǎn)的制備方法。
本發(fā)明所說的具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，是以魚腥草油為有效藥用成分，與藥物中允許接受的脂溶性油和其它輔助添加成分共同組成。該藥物可以為常用的多種形式口服型藥物制劑，或是為噴霧劑和/或黏膜滴劑形式的藥物制劑，尤其是不含有助溶劑吐溫的注射型藥物制劑。
上述具有抗病毒作用的魚腥草油藥物的制備方法，是將魚腥草原料——采用干魚腥草或是新鮮魚腥草原料均可，按常規(guī)方式進(jìn)行水蒸氣蒸餾，以同時(shí)具有上層油相/下層水相形式的兩相溶媒體系收集冷凝餾出液，得到經(jīng)萃取分離并被富集于油層中的魚腥草油有效藥用成分，再以該有效藥用成分與藥物中允許接受的輔助添加成分共同制成相應(yīng)藥物制劑。
由于魚腥草油是一種已有報(bào)道的具有廣譜抗病毒、抗菌作用的藥物成分，特別是采用本發(fā)明方法得到的高濃度甚至是純魚腥草揮發(fā)油成分，與藥物中允許接受的相應(yīng)藥用輔料或載體等輔助添加成分組合，并按相應(yīng)的制藥方法和工藝加工處理，即可制成為相應(yīng)的口服型、注射型或其它可用形式的藥物制劑。例如，與口服制劑中可以被接受的崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添加成份混合后，按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，即可制成為片劑、滴丸劑、膠囊劑或適當(dāng)形式的緩釋劑、控釋劑等固體制劑形式的口服藥物；與常用的增溶劑、助溶劑、乳化劑、潤濕劑等表面活性劑、pH調(diào)節(jié)劑、稀釋劑、穩(wěn)定劑、增稠劑等混合，按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，即可制成為乳劑、噴霧劑，及眼藥、滴鼻劑等外用黏膜滴劑。按注射藥物制劑中允許使用的適當(dāng)溶劑和附加劑配合及相應(yīng)的工藝操作處理后，可以制備成相應(yīng)的乳劑或粉針等肌肉或靜脈形式的注射制劑藥物。
對(duì)上述水蒸氣蒸餾的冷凝餾出液用具有上層油相/下層水相形式的兩相溶媒體系收集并同時(shí)被萃取分離而并被富集于油層中的魚腥草油有效藥用成分，可以進(jìn)一步進(jìn)行分離，也可以不再分離而直接用于后續(xù)的藥物制劑。是否需要進(jìn)行該進(jìn)一步的分離，主要可取決于在收集和萃取分離餾出液的溶媒體系中所用的油相層溶媒類型。因此，作為一種可供選擇的優(yōu)選方式，是所說的收集和萃取分離水蒸氣蒸餾冷凝餾出液所用溶媒體系中的油相層成分為在制藥中允許作為藥物制劑輔助成分使用的植物油、動(dòng)物油、礦物油或合成油脂等脂溶性油類成分中的一種，如目前已多有報(bào)道或使用的可供注射劑用的大豆油、芝麻油、茶油等，以及還可以在口服或外用等藥物制劑中使用的如亞麻子油、棉子油、紅花油、橄欖油、液體石臘或人工合成的甘油三脂肪酸酯等脂溶性油類成分中的一種。收集并萃取和富集有魚腥草油有效藥用成分的該油層混合液無需再經(jīng)分離即可直接供后續(xù)的藥物制劑使用。
在上述方法的基礎(chǔ)上，為提高兩相溶媒體系對(duì)所收集餾出物的萃取分離效率，還可以在收集和萃取分離水蒸氣蒸餾冷凝餾出液所用溶媒體系中的油相層中，裝填有制藥中允許使用且對(duì)油類成分呈惰性的材料制備的用以增大萃取接觸面的填料體，如目前允許和常用的陶瓷、不銹鋼等材料制成的環(huán)、圈、柱、孔板或團(tuán)絲球等常規(guī)形狀填料單元體。
在上述的制備方法中，由于在收集水蒸氣蒸餾的冷凝餾出液時(shí)，采用了具有上層油相/下層水相形式的兩相溶媒體系，含有魚腥草揮發(fā)油成分的餾出液混合物進(jìn)入該兩相收集體系后，其中脂溶性的有效藥用成分魚腥草揮發(fā)油即同時(shí)完成了與水性成分相分離的萃取處理過程，被富集于油相溶媒層中，從而可得到高濃度的魚腥草揮發(fā)油油性溶液，甚至是純凈的魚腥草揮發(fā)油，有效地減少了水溶性雜質(zhì)成分。所得到的高濃度魚腥草油藥用成分可被更廣泛地用于目前僅為芳香水混合物形式的水蒸氣餾出物所無法制備的藥物制劑，擴(kuò)大適用的藥物制劑范圍，例如可方便地制備成常用的膠囊劑、滴丸等形式的口服型制劑、噴霧劑或滴鼻劑等黏膜滴劑型的藥物。其中，特別是使用了在制藥中允許作為藥物制劑輔助成分使用的各種脂溶性油作為收集體系中的油相溶媒時(shí)，該經(jīng)萃取并富集了魚腥草揮發(fā)油的該油性混合物即可不必再作分離而直接被用于制備成相應(yīng)的藥物制劑，特別是可以直接制備成相應(yīng)的乳劑型注射藥物制劑，從而可以徹底解除了目前必須使用吐溫等助溶劑成分的依賴性。這些措施顯然有利于減少魚腥草注射液的臨床過敏反應(yīng)等副作用的發(fā)生，而且還可以大大提高魚腥草揮發(fā)油成分在各種藥物制劑中的有效濃度。
上述的制備方法還清楚顯示，采用本發(fā)明方法由魚腥草原料制備得到作為有效藥用成分魚腥草揮發(fā)油的過程簡(jiǎn)捷，操作十分簡(jiǎn)便，成本很低，具備極好的工業(yè)化生產(chǎn)可行性，有利于規(guī)?；纳a(chǎn)實(shí)施。
以下通過具體實(shí)施方式
的實(shí)例再對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段做出的各種替換或變更，均包括在本
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1將新鮮魚腥草200kg裝入常規(guī)的水蒸氣蒸餾器中。以普通的油水分離器作為冷凝餾出液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入注射用大豆油10L。對(duì)魚腥草原料水蒸氣蒸餾提取5小時(shí)，分離收集上述裝置中的油相層，得高濃度含量的魚腥草揮發(fā)油混合物，其中的魚腥草揮發(fā)油含量可達(dá)20g(藥材)/ml。將注射用豆磷脂12g、注射用甘油25ml與預(yù)熱的(80℃)適量注射用水進(jìn)行混合，于高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌3分鐘，反復(fù)三次，制成均勻的磷脂分散液。加入預(yù)熱至80℃的上述高濃度的魚腥草油混合液200ml，于同樣條件下再進(jìn)行三次高速攪拌，使成均勻的初乳液。加同樣預(yù)熱的注射用水至1000ml后，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)內(nèi)，進(jìn)行勻化三次，至油滴粒徑為1μm左右。取上述乳劑過濾后灌封于2ml或10ml安瓿內(nèi)，充氮，熔封，滅菌，即得到本發(fā)明的魚腥草油注射乳劑藥物。
實(shí)施例2將新鮮魚腥草200kg裝入水蒸氣蒸餾器中；在用作收集餾出液的油水分離器下層裝入適量水，上層裝入芝麻油10L。水蒸氣蒸餾4小時(shí)收集餾出液，棄去魚腥草藥渣，再于蒸餾器中加入新鮮魚腥草200kg，按同樣方式繼續(xù)蒸餾提取5小時(shí)。從油水分離器中分離的油相層即得到高濃度含量的魚腥草揮發(fā)油(40g藥材/ml)。取該魚腥草揮發(fā)油混合液300ml，預(yù)熱至80℃，加入到PEG-6000熔融液中，攪拌混勻，在滴丸機(jī)中制成4000粒滴丸，即成為魚腥草油丸劑藥物。
實(shí)施例3取干魚腥草200kg裝入水蒸氣蒸餾器中；在上述的油水分離器下層裝入適量水，上層裝入亞麻油10L。水蒸氣蒸餾5小時(shí)提取餾出液，棄去魚腥草藥渣；再于蒸餾器中加入干魚腥草200kg，按同樣方式繼續(xù)蒸餾提取5小時(shí)。從游說分離器中分離油相層即得高濃度的魚腥草揮發(fā)油(40g藥材/ml)。取該魚腥草揮發(fā)油混合液300ml預(yù)熱至80℃，加入到PEG-6000熔融液中，攪拌混勻，灌入膠囊殼中，或制備成小栓之后裝入膠囊殼中，扣帽，即得到所述的魚腥草油膠囊劑型藥物。
實(shí)施例4取新鮮魚腥草200kg裝入蒸餾器；上述的油水分離器下層裝入適量水，上層裝入豆油10L。按上述同樣方式水蒸氣蒸餾提取5小時(shí)，棄去魚腥草藥渣；于蒸餾器中再加入新鮮魚腥草200kg，繼續(xù)蒸餾提取5小時(shí)。分離收集溶媒體系中的油層即得高濃度含量的魚腥草揮發(fā)油(40g藥材/ml)。將豆磷脂25g與預(yù)熱的(80℃)水及甘油50ml混合，于高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，攪拌，制成均勻的磷脂分散液。加入預(yù)熱至80℃的上述魚腥草揮發(fā)油混合液400ml后，于同樣條件下再進(jìn)行高速攪拌，使成初乳液。加同樣預(yù)熱的水至1000ml后，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)，進(jìn)行勻化。分裝，置滴鼻用塑料軟瓶中，即為所述的滴鼻劑?；蛑媚蛪喝萜髦?，加閥門、封帽，壓入拋射劑，搖勻，即為所述的噴霧劑。
以上述實(shí)施例1的方法制成魚腥草油注射乳劑作為本發(fā)明的試驗(yàn)藥物，以病毒唑?yàn)殛栃詫?duì)照藥物，進(jìn)行了抗病毒作用的藥效學(xué)試驗(yàn)。
一、實(shí)驗(yàn)方法采用組織細(xì)胞半數(shù)感染量(TCID50)的方法，根據(jù)藥物對(duì)細(xì)胞病變的抑制效果，以確定魚腥草油注射乳劑對(duì)HSV-I和RSV的抗病毒效果。
1.藥液配制用RPMI-1640對(duì)試驗(yàn)藥物(4g藥材/ml)進(jìn)行對(duì)倍稀釋，其藥液濃度分別為40mg/ml(1∶100)；20mg/ml(1∶200)；10mg/ml(1∶400)；5mg/ml(1∶800)；2.5mg/ml(1∶1600)。病毒唑的濃度分別為0.062，0.031，0.015和0.008mg/ml。
2.藥物對(duì)Vero細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞的最大無毒濃度測(cè)定在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Vero單層細(xì)胞和Hep-2單層細(xì)胞中分別加入不同濃度的試驗(yàn)藥物，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中96小時(shí)，觀察細(xì)胞病變，測(cè)定其對(duì)Vero細(xì)胞和Hep-2單層細(xì)胞的最大無毒濃度。
3.魚腥草油注射乳劑對(duì)HSV-I病毒致Vero細(xì)胞病變的抑制試驗(yàn)在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Vero單層細(xì)胞內(nèi)，每孔感染HSV-I 10TCID50(7LgTCID50)病毒液，2小時(shí)后傾去病毒液，每孔內(nèi)再加入不同濃度的魚腥草注射乳劑藥液或病毒唑液，培養(yǎng)96小時(shí)后觀察細(xì)胞病變。
4、魚腥草油注射乳劑對(duì)RSV病毒致Hep-2細(xì)胞病變的抑制試驗(yàn)在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Hep-2單層細(xì)胞內(nèi)，每孔感染RSV 10TCID50(6LgTCID50)病毒液，2小時(shí)后傾去病毒液，每孔內(nèi)再加入不同濃度的魚腥草油注射乳劑藥液或病毒唑液，培養(yǎng)96小時(shí)后觀察細(xì)胞病變。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.魚腥草油注射乳劑藥液對(duì)Vero細(xì)胞的最大無毒濃度，經(jīng)CPE法測(cè)定，為40mg/ml(1∶100)，在正式藥物試驗(yàn)中，則采用＜40mg/ml的藥物進(jìn)行體外抗病毒試驗(yàn)。
2.魚腥草油注射乳劑藥液對(duì)HSV-I病毒致Vero細(xì)胞病變的抑制作用，結(jié)果如表1所示。
表1魚腥草油注射乳劑藥液體外對(duì)HSV-I的藥效

注-無細(xì)胞病毒；+25％細(xì)胞病變；++50％細(xì)胞病變；+++75％細(xì)胞病變；++++100％細(xì)胞病變。
從表1可見，魚腥草油注射乳劑藥液濃度為20～10mg/ml時(shí)，可以抑制HSV-I對(duì)Vero細(xì)胞的病理損害。
3.魚腥草油注射乳劑藥液對(duì)RSV病毒致Hep-2細(xì)胞病變的抑制作用。結(jié)果如表2所示。
表2魚腥草油注射乳劑藥液體外對(duì)RSV的藥效

注-無細(xì)胞病毒；+25％細(xì)胞病變；++50％細(xì)胞病變；+++75％細(xì)胞病變；++++100％細(xì)胞病變。
從表2可見，魚腥草油注射乳劑藥液濃度為20mg/ml時(shí)，可以抑制RSV對(duì)Hep-2細(xì)胞的病理損害。
上述試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物20～10mg/ml的魚腥草油注射乳劑可有效抑制HSV-I對(duì)Vero細(xì)胞的病變作用，20mg/ml的魚腥草油注射乳劑可有效抑制RSV對(duì)Hep-2細(xì)胞的病變作用，即魚腥草油注射乳劑藥液在體外有抗單純皰疹病毒I型和呼吸道合胞病毒的作用。
權(quán)利要求
1.具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，其特征是以魚腥草油為有效藥用成分，與藥物中允許接受的脂溶性油和其它輔助添加成分共同組成。
2.如權(quán)利要求1所述的具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，其特征是所說的藥物為口服型藥物制劑。
3.如權(quán)利要求1所述的具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，其特征是所說的藥物為噴霧劑和/或黏膜滴劑。
4.如權(quán)利要求1所述的具有抗病毒作用的魚腥草油藥物，其特征是所說的藥物為注射乳劑型藥物制劑。
5.制備權(quán)利要求1所述具有抗病毒作用的魚腥草油藥物的方法，其特征是將魚腥草原料按常規(guī)方式進(jìn)行水蒸氣蒸餾，以同時(shí)具有上層油相/下層水相形式的兩相溶媒體系收集冷凝餾出液，得到經(jīng)萃取分離并被富集于油層中的魚腥草油有效藥用成分，再以該有效藥用成分與藥物中允許接受的輔助添加成分共同制成相應(yīng)藥物制劑。
6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是所說的收集和萃取分離水蒸氣蒸餾冷凝餾出液所用溶媒體系中的油相層成分為在制藥中允許作為藥物制劑輔助成分使用的植物油、動(dòng)物油、礦物油或合成油脂中的一種，收集并萃取富集有魚腥草油有效藥用成分的油相層混合液直接用于藥物制劑。
7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征是所說的油相層成分為大豆油、芝麻油、亞麻子油、棉子油、茶油、液體石蠟中的一種。
8.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是在收集和萃取分離水蒸氣蒸餾冷凝餾出液所用溶媒體系中的油相層中，裝填有制藥中允許使用且對(duì)油類成分呈惰性的材料制備的用以增大萃取接觸面的填料體。
9.如權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征是所說的填料體為陶瓷、不銹鋼材料制成的常規(guī)形狀填料單元體。
10.如權(quán)利要求5至9之一所述的制備方法，其特征是所說的魚腥草原料為干魚腥草或新鮮魚腥草。
全文摘要
具有抗病毒作用的魚腥草油藥物及其制備方法。該藥物以魚腥草油為有效藥用成分與藥物中允許接受的脂溶性油和其它輔助添加成分共同組成。制備時(shí)將魚腥草原料按常規(guī)方式進(jìn)行水蒸氣蒸餾，以同時(shí)具有上層油相/下層水相的兩相溶媒體系收集冷凝餾出液，得到經(jīng)萃取分離并被富集于油層中的魚腥草油有效藥用成分。以該有效藥用成分與藥物中允許接受的脂溶性油和其它輔助添加成分共同制成相應(yīng)藥物制劑。該藥物的有效要用成分為純魚腥草揮發(fā)油，不同于目前只是采用以水蒸氣蒸餾收集的芳香水成分的方式，擴(kuò)大了藥物制劑的適用范圍，特別是有利于減少魚腥草注射液副作用產(chǎn)生的可能性。
文檔編號(hào)A61P31/12GK1583047SQ20041002277
公開日2005年2月23日 申請(qǐng)日期2004年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月11日
發(fā)明者陳剛, 楊秀清, 周家明 申請(qǐng)人:成都厚發(fā)科技開發(fā)有限公司