專利名稱：一種治療慢性腎功能衰竭的藥物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療慢性腎功能衰竭的藥物，該藥物為中藥藥物組合物，以大黃和黃芪為主藥，配以其他原藥制成。
背景技術(shù)：
腎病是常見(jiàn)病，每年每百萬(wàn)人群中約有96-100人由腎病發(fā)展為腎功能衰竭，尿毒癥是慢性腎功能衰竭的終末階段，除了水與電解質(zhì)代謝紊亂和酸堿平衡失調(diào)外，由于大量代謝產(chǎn)物在人體內(nèi)潴流而呈現(xiàn)消化道、心、肺、神經(jīng)、皮膚、肌肉、血液等全身各系統(tǒng)中毒癥狀，是臨床腎臟病學(xué)最復(fù)雜和難以處理的問(wèn)題之一，屬中醫(yī)學(xué)的癃閉、關(guān)格、溺毒、虛勞等范疇。經(jīng)大量臨床和實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，不同病因所致腎臟的免疫、非免疫損傷到一定程度后，基礎(chǔ)病變雖然已經(jīng)靜止，但腎功能仍然持續(xù)減退，且無(wú)有效療法控制其進(jìn)展。目前常用于臨床的腎功能衰竭的治療方法主要為透析和腎臟移植，這些治療方法雖然可以延長(zhǎng)患者的生命，但是存在許多難以解決的并發(fā)癥，并且治療費(fèi)用昂貴。對(duì)于這些患者需要更早期的治療，改善其癥狀，穩(wěn)定腎功能，控制肌酐、尿素氮等尿毒物質(zhì)上升速度或使其下降。
中醫(yī)認(rèn)為急者治其標(biāo)，緩者治其本。就慢性腎功能衰竭而言，西醫(yī)的降壓、利尿、糾正水電酸堿平衡等無(wú)降尿毒作用，故屬治標(biāo)；而中藥的多種治療作用正適合集各系統(tǒng)癥狀于一身的慢性腎功能衰竭的治療，不僅具有局部胃腸透析作用，還有全身性的降解尿毒、安和五臟治本的功效。因此，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者就中醫(yī)中藥治療慢性腎功能衰竭的機(jī)制、特別是對(duì)血清成分的影響做了大量的研究工作。長(zhǎng)澤哲郎以柴胡桂枝甘草湯、芍藥甘草湯、小青龍湯、小柴胡湯、三黃瀉心湯、乙字湯的提取物用于腺嘌呤所致的試驗(yàn)性腎衰的白鼠中發(fā)現(xiàn)，大黃、黃連、麻黃、芍藥、柴胡、甘草都有降尿素氮的作用(參見(jiàn)長(zhǎng)澤哲郎，“中藥對(duì)大鼠血清成分的影響”，國(guó)外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊(cè)1981；(1)27)。
60年代開(kāi)始由許錫彥等首次在扶正基礎(chǔ)上用大黃治療氮質(zhì)血癥，取得了一定療效。經(jīng)臨床實(shí)驗(yàn)證明，單味大黃同單用丹參一樣，個(gè)體差異較大，臨床療效不高；因而學(xué)者們開(kāi)展了對(duì)含大黃和不含大黃復(fù)方的研究，并在治療機(jī)理研究上取得了一定的進(jìn)展。無(wú)論如何，目前可以供實(shí)際應(yīng)用的治療慢性腎功能衰竭的藥物并不多見(jiàn)。
現(xiàn)有技術(shù)雖然披露了多種不同的治療腎病的藥物，對(duì)于與本發(fā)明類似的產(chǎn)品也有相關(guān)報(bào)道，但是，迄今為止，沒(méi)有任何報(bào)道記載了本發(fā)明所述藥物的具體原料配比關(guān)系，也沒(méi)有人披露過(guò)選擇本發(fā)明所述的原料配比關(guān)系所制成的藥物具有出人意料的治療效果。
本發(fā)明人經(jīng)過(guò)多年的研究和實(shí)踐總結(jié)，在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)上對(duì)原有的治療慢性腎功能衰竭的藥物進(jìn)行了改進(jìn)，開(kāi)發(fā)出新的治療慢性腎功能衰竭的藥物。
本發(fā)明人根據(jù)慢性腎功能衰竭的中醫(yī)病機(jī)及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)病機(jī)理，按照中醫(yī)的辯證及理法組方，用現(xiàn)代制藥工藝制成有效治療慢性腎功能衰竭的藥物，經(jīng)臨床試驗(yàn)證實(shí)，其改善癥狀迅速、穩(wěn)定腎功能確切。II期臨床試驗(yàn)的總有效率為69.33％。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是提供一種治療慢性腎功能衰竭的藥物，該藥物為中藥藥物組合物，以大黃和黃芪為主藥，配以其他原藥制成。
本發(fā)明的另一目的是提供上述治療慢性腎功能衰竭藥物的制備方法，該方法以中藥生藥為原料，經(jīng)現(xiàn)代制藥工藝制成。
本發(fā)明再一個(gè)目的是提供上述藥物在治療慢性腎功能衰竭中的應(yīng)用。
發(fā)明描述根據(jù)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明所述的藥物以大黃和黃芪為主藥，配以桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草等原藥制成。
在具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療慢性腎功能衰竭的藥物，該藥物由包括以下原料的生藥制成大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草，其中各原料的生藥組成比例以重量計(jì)如下大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝3-30∶9-30∶6-12∶4.5-9∶9-30∶6-12∶9-15∶6-12∶6-15∶9-15∶3-9∶5-9∶3-9∶9-30∶3-9∶1.5-9。優(yōu)選的是大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝1-1.6∶4-6.4∶3-4.8∶2-3.2∶3-4.8∶5-8∶5-8∶5-8∶3-4.8∶5-8∶3-4.8∶2.5-4∶2-3.2∶5-8∶1.5-2.4∶0.9-1.44。最優(yōu)選的是大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝1∶4∶3∶2∶3∶5∶5∶5∶3∶5∶3∶2.5∶2∶5∶1.5∶0.9。
本發(fā)明的藥物根據(jù)中醫(yī)中藥理論，采用辯證施治，取得了良好的治療效果。
在本發(fā)明的藥物原料中，大黃性味苦寒，作用峻猛，治胃中有熱之“食已即吐”當(dāng)量大，今治水邪，故減其量，與大量甘溫益氣之黃芪并為君藥。黃芪大量，不僅補(bǔ)脾肺之氣，且能利小便，通血脈，二藥相合，既利小便，又顧氣虛，祛邪而不傷正。桑白皮瀉肺行氣分之水，苦參去血分水濕之毒，均為臣藥，用以助大黃祛邪水。黨參、白術(shù)、茯苓也是臣藥，助黃芪益氣利水。肝受氣于腎，今腎久病而氣陰俱大傷，肝亦失養(yǎng)，而肝主筋，肝失養(yǎng)則筋急而為抽搐，肝風(fēng)動(dòng)而為痙厥，配補(bǔ)腎益精之制何首烏，斂陰養(yǎng)肝之白芍，活血養(yǎng)血之丹參，活血行氣之川芎，平肝熄風(fēng)之菊花，共奏滋腎養(yǎng)肝，舒筋熄風(fēng)之功以止抽搐、防痙厥，是第二組佐藥。“腎者，胃之關(guān)也。關(guān)門(mén)不利，聚水而從其類也”。今關(guān)門(mén)不利，水邪上逆而為嘔惡，故佐味辛性燥，功擅散結(jié)降逆，燥濕除痰，平嘔止吐之半夏?！侗窘?jīng)疏證》特別指出“中宮水停氣搏可用半夏”，“半夏為治嘔專劑”，正合本方之用。車前草利小便而不傷陰，柴胡升清陽(yáng)而利三焦，“三焦者，決瀆之官，水道出焉”，二藥是佐而兼使。甘草既能益氣解毒，又能調(diào)和諸藥，亦為佐而兼使之用。如此配伍，祛邪之中，兼有扶正之義，共奏健脾益腎，通腑降濁，活血化瘀之功，正符本病邪實(shí)正虛之治。
本處方特點(diǎn)在于減少大黃之量，配合利水之品，使不致泄瀉而專于利水道；而黃芪非大量不足以利小便，與“四君”合補(bǔ)氣而不壅；柴胡用小量，可升清而利三焦之氣。如此配伍，意在解救尿毒，所謂“急則治標(biāo)”，并顧扶正。使邪實(shí)去而脾胃之氣舒，然后再予補(bǔ)腎固本。若此時(shí)過(guò)用味厚補(bǔ)腎之品，反有滋膩壅滯之弊。臨床實(shí)踐也證明本方對(duì)脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證為主的慢性腎功能衰竭者療效顯著，可見(jiàn)用中藥，尤其是復(fù)方治病，當(dāng)以中醫(yī)理論為指導(dǎo)進(jìn)行辯證論治，遣藥組方，方可使群藥成為一個(gè)有機(jī)的整體，充分發(fā)揮中藥的療效。
根據(jù)本發(fā)明的目的，本發(fā)明還提供了所述治療慢性腎功能衰竭藥物的制備方法，該方法包括將各生藥按比例配料，制成清膏，并造粒。
在具體的實(shí)施方案中，上述藥物的制備方法包括將各生藥一同加水煎煮，優(yōu)選三次，合并煎液，過(guò)濾，濃縮濾液得清膏，造粒。
更具體地，所述藥物的制備方法如下將各生藥加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二次2小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，過(guò)濾，濃縮濾液至相對(duì)密度1.25(80℃)的清膏，取適量糊精制成顆粒，干燥。
本發(fā)明再一個(gè)目的是提供上述藥物在治療慢性腎功能衰竭中的應(yīng)用。在本發(fā)明中所述的慢性腎功能衰竭包括脾腎氣虛證、濕濁證及血瘀證。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明藥物的組方中大黃為君藥，該品本有瀉下攻積、清熱瀉火、解毒、活血祛淤之功效。大黃既通腑瀉熱，又通宣氣血，瀉壅滯水氣。然，因大黃苦寒，作用峻猛，今治水邪不能太過(guò)，故減其量而用之，使其能通輸水道，將濕濁邪毒由尿液排出，以解溺毒之重癥。與此同時(shí)，重用黃芪一味，黃芪有補(bǔ)氣升陽(yáng)益衛(wèi)固表和利水退腫之功效。該品適用于脾腎氣虛失運(yùn)、水濕停聚引起的小便不利之證。本方中，大黃與黃芪相配，同為君藥，即能利小便，通血脈，祛邪水，瀉濁毒，又能補(bǔ)脾肺之氣，祛邪而不傷正，兩者相得益彰，發(fā)揮主導(dǎo)作用。
本發(fā)明藥物的組方中，起輔助治療作用——作為臣藥而用的，有二類藥物。其一組為茯苓、桑白皮、苦參等三味。
茯苓，有利水滲濕、健脾安神之功效。臨床多用于小便不利、水腫停飲等水濕證。該藥利水而不傷氣，藥性平和，為利水滲濕之要藥。桑白皮利尿消腫，多用于小便不利之水腫實(shí)證?？鄥⒂酗@著的清熱利尿之作用，常用于濕熱蘊(yùn)結(jié)，小便不利之證。
另一組為黨參、白術(shù)，兩者均有補(bǔ)中益氣、健脾和胃之功。能輔助黃芪以達(dá)到扶正祛邪之目的。此外白術(shù)更兼有燥濕利水之功效用于脾虛不能運(yùn)化，水濕停留之證，甚為有效。
經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的臨床藥物實(shí)踐，我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)選擇本發(fā)明所述的各原料生藥組成比例制成藥物產(chǎn)品時(shí)，產(chǎn)生了意想不到的治療效果，同時(shí)使藥物的副作用減到最低，特別是當(dāng)大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草的原藥重量之比為1∶4∶3∶2∶3∶5∶5∶5∶3∶5∶3∶2.5∶2∶5∶1.5∶0.9時(shí)。
另外，本發(fā)明提供了特別優(yōu)選的本發(fā)明藥物制備方法。
在本發(fā)明藥物的制備過(guò)程中，原藥用清水洗凈后煎煮，第一次加8-10倍水煎煮2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濃縮至相對(duì)密度1.25(80℃)的清膏，置烘箱內(nèi)于75℃烘成干膏，第二次加6-8倍水煎煮2小時(shí)，第三次加6-8倍水煎煮1小時(shí)，同法分別制成干膏。
清膏的相對(duì)密度是重要的，當(dāng)清膏相對(duì)密度低于1.25(80℃)時(shí)，烘成干膏時(shí)間延長(zhǎng)超過(guò)10小時(shí)。如高于此密度，在濃縮罐中易焦化而影響成品的溶化性，同時(shí)因?yàn)檫^(guò)于粘稠不利完全取出而造成浪費(fèi)。
清膏置于烘箱中，溫度50-70℃時(shí)，所需烘干時(shí)間為14小時(shí)左右。溫度在80-90℃時(shí)需8小時(shí)左右，但容易焦化。
實(shí)施例實(shí)施例1顆粒劑稱取大黃40克、甘草36克、黃芪160克、桑白皮120克、苦參80克、黨參120克、白術(shù)200克、茯苓200克、白芍120克、菊花1000克、制首烏200克、川芎120克、丹參200克、姜半夏80克、車前草200克、柴胡60克，加水煎煮三次，第一次、第二次各2小時(shí)，第三次1小時(shí)。合并煎液，過(guò)濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度1.25(80℃)的清膏，置烘箱內(nèi)于75℃烘成干膏，粉碎成細(xì)粉。取干粉1.1份、蔗糖1份、糊精1份及淀粉適量制成顆粒，干燥，整粒，制成1000克，分裝成5克一包。
實(shí)施例2片劑將按照上述實(shí)施例的方法制備的干粉，采用常規(guī)方法壓片，制成片劑。
實(shí)施例3膠囊劑將按照上述實(shí)施例的方法制備的顆粒，裝入明膠膠囊，制成膠囊劑。
實(shí)施例4顆粒劑稱取大黃40克、甘草36克、黃芪160克、桑白皮120克、苦參80克、黨參120克、白術(shù)200克、茯苓200克、白芍120克、菊花1000克、制首烏200克、川芎120克、丹參200克、姜半夏80克、車前草200克、柴胡60克，加水煎煮三次，第一次、第二次各2小時(shí)，第三次1小時(shí)。合并煎液，過(guò)濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度1.25(80℃)的清膏，置烘箱內(nèi)于70℃烘成干膏，粉碎成細(xì)粉。取干粉1.1份、蔗糖1份、糊精1份及淀粉適量制成顆粒，干燥，整粒，制成1000克，分裝成5克一包。
實(shí)施例5顆粒劑稱取大黃40克、甘草36克、黃芪160克、桑白皮120克、苦參80克、黨參120克、白術(shù)200克、茯苓200克、白芍120克、菊花1000克、制首烏200克、川芎120克、丹參200克、姜半夏80克、車前草200克、柴胡60克，加水煎煮三次，第一次、第二次各2小時(shí)，第三次1小時(shí)。合并煎液，過(guò)濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度1.25(80℃)的清膏，置烘箱內(nèi)于80℃烘成干膏，粉碎成細(xì)粉。取干粉1.1份、蔗糖1份、糊精1份及淀粉適量制成顆粒，干燥，整粒，制成1000克，分裝成5克一包。
實(shí)驗(yàn)1 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)本試驗(yàn)用整體的動(dòng)物病理模型進(jìn)行。本發(fā)明藥物主要用于臨床治療慢性腎功能衰竭，其主要藥效是降低尿毒和改善尿毒癥患者癥狀。因此，試驗(yàn)中采用大鼠腺嘌呤誘發(fā)的慢性腎衰模型。除觀察模型動(dòng)物的一般狀況外，主要測(cè)定血尿素氮和肌酐水平和反映腎性貧血的紅細(xì)胞系的變化。無(wú)論是第一批預(yù)防性給藥或第二批治療性給藥，上述指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果均顯示該產(chǎn)品對(duì)慢性腎衰的藥效，部分結(jié)果呈量效關(guān)系趨勢(shì)；腎臟的肉眼觀察和組織病理學(xué)檢查亦表明給藥組的病變比單純?cè)煨?空白對(duì)照)組為輕。
一、本發(fā)明藥物對(duì)腺嘌呤誘發(fā)的慢性腎衰大鼠的藥效觀察(一)藥物 實(shí)驗(yàn)所用藥物為按照實(shí)施例1的方法制得的干膏，褐色粉末，每1g干浸膏相當(dāng)原生藥5.6g。實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配成所需濃度，文中所用該產(chǎn)品劑量(g/kg)均按干膏量計(jì)算。
動(dòng)物與慢性腎衰模型制作(1，2)Wistar大鼠由第一軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物所供應(yīng)，雌雄各半，體重180.6±(SD)18.0g。大鼠用動(dòng)物所配制的固體飼料喂養(yǎng)數(shù)天，按性別和體重隨機(jī)分組，除正常對(duì)照組動(dòng)物繼續(xù)用原來(lái)飼料喂養(yǎng)外，其余各組動(dòng)物用含0.5％腺嘌呤的飼料喂養(yǎng)7周。全部動(dòng)物均自由攝取飼料和飲自來(lái)水。
實(shí)驗(yàn)分組、給藥劑量和方法 實(shí)驗(yàn)分五組①正常對(duì)照組，每日以相應(yīng)量自來(lái)水灌胃；②造型對(duì)照組(即空白對(duì)照組，下同)，單給腺嘌呤，每日以相應(yīng)量自來(lái)水灌胃；③造型的同時(shí)，每日給該產(chǎn)品0.15g/kg一次灌胃(小劑量組，按體重相當(dāng)于臨床一日服藥總量)；④同上，該產(chǎn)品0.38g/kg(中劑量組，相當(dāng)臨床一日總量的2.5倍)。⑤同上，該產(chǎn)品0.94g/kg(大劑量組，相當(dāng)臨床一日總量的6.25倍)。
檢測(cè)項(xiàng)目和方法 血液學(xué)指標(biāo)；血清尿素氮、肌酐、鉀、鈉、鈣、磷、尿酸和膽固醇；血漿的中分子物質(zhì)。除中分子物質(zhì)用紫外分光光度法測(cè)定外，血液學(xué)和生化指標(biāo)分別用多參數(shù)血球計(jì)數(shù)儀(美國(guó)，Taxas International Laboratories)和血液生化全自動(dòng)分析儀(美國(guó)，Ciba-Corning)測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取腎臟作病理學(xué)檢查。結(jié)果(包括后面幾批實(shí)驗(yàn))用t-檢驗(yàn)處理平均數(shù)相差的顯著性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
(一)血尿素氮(BUH)和肌酐(Scr)水平五組動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后第2、4、7周，BUN和Scr的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。造型對(duì)照組動(dòng)物喂以含腺嘌呤飼料2周，已出現(xiàn)明顯氮質(zhì)血癥，BUN水平升至25.44±3.02mmoL/L(P＜0.01)，造型至4、7周，BUN進(jìn)行性升高，7周結(jié)束時(shí)為正常對(duì)照組的5倍多。Scr水平于2周末即升至223.7±36.2μmoL/L(P＜0.01)。每日以該產(chǎn)品灌胃的小、中、大劑量組，BUN和Scr水平均不同程度低于不給藥的造型對(duì)照組。
表1 對(duì)大鼠腺嘌呤慢性腎衰模型血尿素氮和肌酐水平的影響(X±SD)

與同期正常對(duì)照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與同期造型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
括號(hào)內(nèi)為檢測(cè)動(dòng)物數(shù)(二)血液學(xué)指標(biāo)大鼠以含0.5％腺嘌呤飼料喂養(yǎng)后，血液學(xué)變化主要表現(xiàn)于紅細(xì)胞系。造型達(dá)4周時(shí)，RBC、HGB、HCT和MCV均顯著低于正常對(duì)照組。同時(shí)給予該產(chǎn)品的中、大劑量組動(dòng)物，于實(shí)驗(yàn)的第4周和第7周，上述多個(gè)指標(biāo)有明顯改善(表2)。
(三)喂飼腺嘌呤七周對(duì)血中電解質(zhì)，中分子物質(zhì)等含量的影響大鼠于實(shí)驗(yàn)7周結(jié)束時(shí)，采血除檢測(cè)前述諸項(xiàng)外，尚測(cè)定鉀、鈉、鈣、磷、中分子物質(zhì)、尿酸和膽固醇等含量。造型組與正常組比較，鈉、磷、膽固醇和中分子物質(zhì)含量明顯升高(表3)。該產(chǎn)品各給藥組與造型組比較，各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表2 對(duì)大鼠腺嘌呤慢性腎衰模型血液學(xué)指標(biāo)的影響(X±SD)

#，##與同期正常對(duì)照組比較，P＜0.05和P＜0.01；*，**與同期造型對(duì)照組比較，P＜0.05和P＜0.01。
括號(hào)內(nèi)為檢測(cè)動(dòng)物數(shù)表3 喂飼腺嘌呤七周對(duì)大鼠血中其他成分的影響(X±SD)

#P＜0.05，##P＜0.01括號(hào)內(nèi)為檢測(cè)動(dòng)物數(shù)(四)腎臟病理學(xué)檢查實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，摘取各組大鼠兩側(cè)腎，肉眼觀察和稱重?？梢?jiàn)模型對(duì)照組大鼠腎臟明顯肥大，皇灰黃色；切開(kāi)腎臟可見(jiàn)斷面有許多散在的黃色斑點(diǎn)(腺嘌呤代謝物2，8-二羥基腺嘌呤(3))。腎臟重量顯著大于正常對(duì)照組(P＜0.01)。給該產(chǎn)品的三組大鼠，其平均腎重和腎重/體重比值顯著低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，見(jiàn)表4。腎臟組織切片證實(shí)慢性腎衰模型已形成，病變明顯。模型對(duì)照組腎臟可見(jiàn)腎小管破壞嚴(yán)重，部分腎小管破壞消失，部分腎小管極度擴(kuò)張；腎間質(zhì)及腎小管內(nèi)見(jiàn)大量腺嘌呤代謝物結(jié)晶沉積；間質(zhì)內(nèi)有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，部分腎小管腔內(nèi)有細(xì)胞壞死碎片和中性白細(xì)胞，可見(jiàn)蛋白及細(xì)胞管型。給該產(chǎn)品的三組大鼠腎組織病變基本同模型組，大和中劑量組的細(xì)胞及蛋白管型數(shù)量較少，部分腎小管形態(tài)接近正常。
表4 各組大鼠腎重和腎重/體重量比值(X±SD)

與正常對(duì)照組比較#P＜0.01；與模型對(duì)照組比較*P＜0.01括號(hào)內(nèi)為動(dòng)物數(shù)結(jié)論用含0.5％腺嘌呤的飼料喂養(yǎng)大鼠七周復(fù)制慢性腎衰模型觀察該產(chǎn)品的藥效。三組大鼠在接受腺嘌呤飼料的同時(shí)，每日以該產(chǎn)品灌胃，劑量分別為0.15、0.38和0.94g/Kg(分別為推薦臨床劑量的1、2.5和6.25倍)。結(jié)果表明，該產(chǎn)品能有效地降低腎衰模型大鼠的血尿素氮和肌酐水平；能改善腎衰大鼠的腎性貧血，表現(xiàn)在提高紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞比積和紅細(xì)胞平均體積。上述藥效有劑量依賴性趨勢(shì)。連續(xù)給藥七周后處死大鼠，見(jiàn)腎臟明顯小于模型組動(dòng)物。病理組織學(xué)檢查顯示模型組腎組織嚴(yán)重破壞，給藥組的病變基本同模型組，但嘌呤結(jié)晶沉淀物明顯減少。
二、本發(fā)明藥物對(duì)腺嘌呤誘發(fā)的慢性腎衰大鼠的藥效觀察(二)目的與方法上批實(shí)驗(yàn)在開(kāi)始喂含腺嘌呤飼料的同時(shí)，開(kāi)始給按照實(shí)施例1的方法制得的干膏。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠接受含腺嘌呤飼料14天后，血尿素氮和肌酐水平已顯著升高。因此，另行設(shè)計(jì)這批實(shí)驗(yàn)，待造型14天后才開(kāi)始給大鼠灌服該產(chǎn)品。目的是觀察在大鼠已形成明顯氮質(zhì)血癥的條件下該藥的藥效。
除了給藥時(shí)機(jī)作上述變動(dòng)外，給藥動(dòng)物只分大、小劑量?jī)山M。小劑量為0.45g/Kg，大劑量為1.35g/Kg，分別相當(dāng)于推薦臨床劑量的3倍和9倍。試驗(yàn)期為八周。其他實(shí)驗(yàn)條件、方法與上批實(shí)驗(yàn)相同。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.一般狀況 大鼠隨進(jìn)食腺嘌呤飼料時(shí)間延長(zhǎng)，明顯表現(xiàn)生長(zhǎng)抑制，該產(chǎn)品組在灌藥一周后體重有所增加，但遠(yuǎn)不如正常對(duì)照組增長(zhǎng)快。在給藥六周后，大、小劑量組體重比模型對(duì)照組分別重41％和21％。在實(shí)驗(yàn)的中、后期，模型組大鼠普遍出現(xiàn)多飲、多尿、毛干枯、畏寒、拱背、少動(dòng)、閉眼、尾和耳廓蒼白等現(xiàn)象。該產(chǎn)品治療組上述癥狀明顯較輕。在該產(chǎn)品大劑量組中，部分動(dòng)物于開(kāi)始灌藥約2周后糞便變軟，個(gè)別大鼠糞便不成形。繼續(xù)給藥的中、后期，糞便恢復(fù)正常。
2.血尿素氮和肌酐 各組大鼠于實(shí)驗(yàn)進(jìn)行4、8周后，BUN和Scr水平見(jiàn)表5。模型對(duì)照組在造型第四周和第八周，BUN和Scr水平進(jìn)行性升高，與正常對(duì)照組的差異非常顯著(P＜0.01)。該產(chǎn)品大、小劑量組與模型組比較，BUN和Scr水平有不同程度降低，大劑量組的藥效更為明顯。
表5 對(duì)大鼠腺嘌呤腎衰模型BUN、Scr水平的影響(X±SD)

##與正常對(duì)照組比較P＜0.01；*與模型對(duì)照組比較P＜0.05；**與模型對(duì)照組比較P＜0.01括號(hào)內(nèi)為動(dòng)物數(shù)3.RBC、HGB和HCT 表6妁結(jié)果表明，大鼠以含腺嘌呤飼料喂養(yǎng)4周以后，RBC、HGB、HCT均非常顯著地低于正常對(duì)照組。于第八周時(shí)，該產(chǎn)品大、小劑量組RBC、HGB、HCT均較模型組顯著提高。表中尚列出三種紅細(xì)胞平均值，即平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)，但組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
表6 該產(chǎn)品對(duì)大鼠腺嘌呤腎衰橫型血液學(xué)指標(biāo)的影響(X±SD)

##與正常對(duì)照組比較P＜0.01*，料與模型對(duì)照組比較P＜0.05，P＜0.01括號(hào)內(nèi)為動(dòng)物數(shù)4.血Ca、P 模型對(duì)照組實(shí)驗(yàn)第八周結(jié)束時(shí)血鈣1.64±0.16mmoL/L，低于正常組2.00±0.13mmoL/L(P＜0.01)。該產(chǎn)品1.35g/kg組為1.83±0.13mmoL/L，高于模型組(P＜0.01)。血磷的測(cè)定結(jié)果表明，于實(shí)驗(yàn)進(jìn)行4周后，模型組4.64±0.72mmoL/L顯著高于正常組2.50mmoL/L(P＜0.01)，該產(chǎn)品1.35g/kg組3.97±0.64mmoL/L，比模型組有所降低(P＜0.05)。以上表明該產(chǎn)品對(duì)慢性腎衰模型的低鈣、高磷血癥有改善作用。
5.腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察
(1)大體觀察正常對(duì)照組兩側(cè)腎臟大小、硬度、顏色均正常，表面光滑，腎包膜容易剝離，切面皮髓質(zhì)分界清楚，皮質(zhì)無(wú)增厚及變薄現(xiàn)象。
模型空白對(duì)照組腎臟體積明顯增大，重量增加(表7)，表面呈灰黃色細(xì)顆粒狀。腎包膜與腎實(shí)質(zhì)粘連不易剝離，切面皮髓質(zhì)分界不清。
表7 各組大鼠的腎重/體重比值(X±SD)

##與正常組比P＜0.01；**與模型組比P＜0.01括號(hào)內(nèi)為動(dòng)物數(shù)(2)組織學(xué)觀察正常對(duì)照組腎小球、腎小管、腎間質(zhì)均正常。
模型空白對(duì)照組腎小球無(wú)明顯變化；腎小管及腎間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量嘌呤代謝物結(jié)晶沉積，結(jié)晶周圍可見(jiàn)異物巨細(xì)胞反應(yīng)及異物肉芽腫形成。大部分腎小管破壞、萎縮消失。間質(zhì)結(jié)締組織增生，增生的結(jié)締組織內(nèi)可見(jiàn)灶性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。部分腎小管擴(kuò)張，其內(nèi)可見(jiàn)蛋白及顆粒管型。
治療組基本病變與模型空白對(duì)照組相同，但腎小管及腎間質(zhì)內(nèi)嘌呤結(jié)晶沉積物均不同程度地減少，大劑量治療組腎小管擴(kuò)張更為明顯，部分腎小管形態(tài)接近正常。
(3)病理切片圖像分析結(jié)果采用MIAS-300圖像分析儀(四川大學(xué)計(jì)算機(jī)系)分別測(cè)定各組大鼠腎內(nèi)嘌呤結(jié)晶沉積物灰度值及腎小管、結(jié)晶沉積物面積(μm2)。每組選5張切片、每張切片低倍隨機(jī)選擇5個(gè)視野，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表8。灌服該產(chǎn)品的兩組，腎內(nèi)結(jié)晶沉積物的面積和灰度值均顯著較空白對(duì)照組為小，給藥大劑量組和小劑量組之間亦有顯著差異(P＜0.01)。腎小管面積方面，該產(chǎn)品大劑量組顯著大于空白對(duì)照組(P＜0.01)，亦同樣呈劑量依賴性變化。
圖像分析結(jié)果的統(tǒng)計(jì)程序采用第一軍醫(yī)大學(xué)計(jì)算機(jī)教研室編制的《生物數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)》軟件包。機(jī)器采用IBMPC/286兼客機(jī)。
表8 各組腎內(nèi)結(jié)晶沉積物及腎小管變化圖像分析結(jié)果(X±SD)

與同期正常對(duì)照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與同期造型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
結(jié)論在前批藥效試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，改變了給藥時(shí)間，即大鼠接受含腺嘌呤飼料14天后開(kāi)始給本發(fā)明藥物。結(jié)果表明本發(fā)明藥物能改善腎衰大鼠的一般狀況，明顯降低BUN和Scr，RBC、HGB、HCT降低的貧血癥狀有所改善，低鈣、高磷血癥亦有改善。總之，本發(fā)明藥物對(duì)大鼠腺嘌呤慢性腎衰模型的藥效也同樣在這批實(shí)驗(yàn)中重復(fù)出來(lái)。
實(shí)驗(yàn)2治療慢性腎功能衰竭臨床試驗(yàn)一般資料病例來(lái)源本臨床試驗(yàn)病例均系各臨床試驗(yàn)單位住院病人，共觀察慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證患者420例，其中治療組300例，對(duì)照組120例。兩組病人治療前在性別、年齡、病因構(gòu)成、中醫(yī)證型分布、中醫(yī)證候分布、貧血程度及血清電解質(zhì)等方面的差異均無(wú)顯著性(P＞0.05)，表明組間均衡性較好，具有可比性。治療組病人的腎功能比對(duì)照組差，病情程度比對(duì)照組重，不影響對(duì)治療組的療效分析。
試驗(yàn)方法本臨床試驗(yàn)的兩個(gè)階段，即對(duì)照治療試驗(yàn)階段與擴(kuò)大對(duì)照治療試驗(yàn)階段同時(shí)進(jìn)行，共觀察慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證住院患者420例，其中治療組300例，對(duì)照組120例。
對(duì)照治療試驗(yàn)采用隨機(jī)分組法，分為治療組和對(duì)照組，治療組與對(duì)照組的比例為1∶1，共現(xiàn)察治療組病人60例，對(duì)照組病人60例。擴(kuò)大對(duì)照治療試驗(yàn)共現(xiàn)察治療組病人240例，對(duì)照組病人60例，其中160例治療組病人為開(kāi)放病例，不設(shè)對(duì)照組。
一、一般治療兩組相同，包括；
(一)飲食治療低蛋白、低磷、高熱量飲食。
(二)糾正水、電解質(zhì)、酸堿平衡失調(diào)。
(三)合并癥處理如有高血壓者予降壓藥物等。
二、分組治療(一)治療組口服按照實(shí)施例1的方法制備的藥物，溫開(kāi)水沖服，每日4次，于每日6、8、12時(shí)各服5g(1小包)，22時(shí)服10g(2包)。
(二)對(duì)照組口服包醛氧淀粉，溫開(kāi)水送服，每日3次，每次5g(1小包)。
(三)療程兩組均為2個(gè)月。
試驗(yàn)結(jié)果通過(guò)對(duì)420例慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證住院病人的臨床試驗(yàn)，結(jié)果表明，本發(fā)明藥物治療中醫(yī)辯證屬脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證的慢性腎功能衰竭病人療效確切，顯效率為20.67％(62/300)，總有效率為69.33％(208/300)；對(duì)照組的顯效率為10％(12/120)，總有效率為44.17％(53/120)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組療效差異有非常顯著性(P＜0.01)，本發(fā)明藥物的療效優(yōu)于對(duì)照組。同時(shí)，分別對(duì)對(duì)照治療試驗(yàn)及除開(kāi)放病例以外的臨床試驗(yàn)療效進(jìn)行分析的結(jié)果均表明，本發(fā)明藥物的療效優(yōu)于對(duì)照組。
本發(fā)明藥物治療慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證的顯效率為24.34％(37/152)，總有效率為69.08％(105/152)；治療慢性腎功能衰竭脾腎氣虛血瘀證的顯效率為16.89％(25/148)，總有效率為69.59％(103/148)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩種證型間療效差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，同時(shí)，分別與對(duì)照組比較，差異均有顯著性(P＜0.05)，表明本發(fā)明藥物對(duì)兩種證型均有效，且療效均優(yōu)于對(duì)照組。
本發(fā)明藥物對(duì)不同病情的慢性腎功衰竭的療效差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，對(duì)不同病因所致的慢性腎功能衰竭的療效差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。同時(shí)，對(duì)慢性腎功能衰竭各期的療效均優(yōu)于對(duì)照組，對(duì)慢性腎小球腎炎所致的慢性腎功能衰竭病人及病因不明者的療效均優(yōu)于對(duì)照組。
本發(fā)明藥物對(duì)慢性腎功能衰竭病人倦怠乏力、氣短懶言、納少腹脹、腰酸腿軟、夜尿清長(zhǎng)、口淡不渴、大便不實(shí)、惡心嘔吐、身重困倦、面色晦暗、腰痛、肌膚甲錯(cuò)、舌紫暗有瘀點(diǎn)及舌苔厚膩等脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證證候均良好的治療作用，其療效優(yōu)于對(duì)照組。
本發(fā)明藥物能明顯降低患者血BUN水平，其作用與對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性。同時(shí)，本發(fā)明藥物能明顯降低患者Scr、升高Ccr、改善腎功能，其作用優(yōu)于對(duì)照組。
本發(fā)明藥物能升高患者RBC數(shù)、升高血Ca++及降低血P+++，有助于慢性腎功能衰竭患者貧血及低鈣高磷血癥的治療，而對(duì)照組的作用不明顯。
對(duì)90例病人的隨訪觀察結(jié)果表明，長(zhǎng)期服用本發(fā)明藥物，能穩(wěn)定腎功能，延緩慢性腎衰病情的進(jìn)展，降低終末期腎衰發(fā)生率，降低透析率，提高患者生活質(zhì)量，其療效優(yōu)于對(duì)照組，且無(wú)明顯毒副反應(yīng)。
慢性腎功能衰竭是臨床常見(jiàn)的疑難重癥，是各種慢性腎臟疾病發(fā)展到晚期所致的嚴(yán)重綜合征。本病屬中醫(yī)“溺毒”、“關(guān)格”、“癃閉”等范疇，其病機(jī)十分復(fù)雜，常以正虛為本，邪實(shí)為標(biāo)，正虛邪實(shí)相混雜，貫穿疾病始終。正虛包括脾腎氣虛、脾腎陽(yáng)虛、肝腎陰虛、脾腎氣陰兩虛及陰陽(yáng)兩虛，邪實(shí)包括水氣、濕濁及瘀血等。
該產(chǎn)品由黃芪、黨參、何首烏(制)、大黃(生)、白術(shù)、茯苓、車前草、半夏(姜)、川芎、丹參等組成。方中用黃芪、黨參健脾益氣，制首烏補(bǔ)腎益精，共奏健脾益腎之功；用生大黃通腑泄?jié)幔節(jié)駶嶂皬拇蟊愣?，白術(shù)健脾除濕，茯苓、車前草利尿除濕，姜半夏燥濕和中、降逆止嘔，共奏通腑降濁之功；更用川芎、丹參等活血化瘀。綜觀全方，具有健脾益腎、通腑降濁、活血化瘀的功能，其組方合理，配伍精當(dāng)，切中慢性腎功能衰竭脾腎氣虛為本、濕濁瘀血壅塞為標(biāo)的病機(jī)，故對(duì)慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證的臨床療效顯著。
臨床試驗(yàn)過(guò)程中，未發(fā)現(xiàn)該產(chǎn)品對(duì)心臟、肝及胃腸道有明顯毒副作用，應(yīng)用十分安全。
結(jié)論該產(chǎn)品具有健脾益腎、通腑降濁、活血化瘀的功能，治療慢性腎功能衰竭脾腎氣虛濕濁證及脾腎氣虛血瘀證的療效確切，使用安全，服用方便，長(zhǎng)期服用能穩(wěn)定腎功能、延緩慢性腎功能衰竭的進(jìn)展，為慢性腎功能衰竭病人的治療提供了一種新的制劑。
權(quán)利要求
1.治療慢性腎功能衰竭的藥物，該藥物由包括以下原料的生藥制成大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草，其中各原料的生藥組成比例以重量計(jì)如下大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝3-30∶9-30∶6-12∶4.5-9∶9-30∶6-12∶9-15∶6-12∶6-15∶9-15∶3-9∶5-9∶3-9∶9-30∶3-9∶1.5-9。
2.權(quán)利要求1的藥物，其中各原料的生藥組成比例以重量計(jì)如下大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝1-1.6∶4-6.4∶3-4.8∶2-3.2∶3-4.8∶5-8∶5-8∶5-8∶3-4.8∶5-8∶3-4.8∶2.5-4∶2-3.2∶5-8∶1.5-2.4∶0.9-1.44。
3.權(quán)利要求2的藥物，其中各原料的生藥組成比例以重量計(jì)如下大黃、黃芪、桑白皮、苦參、黨參、白術(shù)、茯苓、制首烏、白芍、丹參、川芎、菊花、姜半夏、車前草、柴胡和甘草＝1∶4∶3∶2∶3∶5∶5∶5∶3∶5∶3∶2.5∶2∶5∶1.5∶0.9。
4.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)所述藥物的制備方法，該方法包括各生藥按比例配料，制成清膏，并造粒。
5.權(quán)利要求4的制備方法，該方法包括將各生藥一同加水煎煮，合并煎液，過(guò)濾，濃縮濾液得清膏，造粒。
6.權(quán)利要求5的制備方法，其中的生藥加水煎煮三次。
7.權(quán)利要求6的制備方法，該方法包括將各生藥加水煎煮三次，第一次、第二次各2小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，過(guò)濾，濃縮濾液至80℃相對(duì)密度1.25的清膏，取適量糊精制成顆粒，干燥。
8.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)所述藥物在治療慢性腎功能衰竭中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其中所述的慢性腎功能衰竭包括脾腎氣虛證、濕濁證及血瘀證。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療慢性腎功能衰竭的藥物及其制備方法和用途，該藥物為中藥藥物組合物，以大黃和黃芪為主藥，配以其他原藥制成。
文檔編號(hào)A61K9/16GK1579514SQ200410026488
公開(kāi)日2005年2月16日 申請(qǐng)日期2004年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月17日
發(fā)明者潘振邦, 石興華 申請(qǐng)人:廣州康臣藥業(yè)有限公司