專利名稱：一種可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法，屬于醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前醫(yī)院的手術(shù)止血敷料，多用明膠海綿，這種材料親水性差、被機(jī)體吸收不徹底，容易產(chǎn)生疤痕組織，止血效果很差，已經(jīng)是一種淘汰用品。還有一種近年來出現(xiàn)的纖維蛋白封閉劑，在臨床上有一定范圍的應(yīng)用，但也存在以下缺點1、使用前需在手術(shù)臺下將纖維蛋白原和凝血酶分別溶解，約耗時十多分鐘，遇難溶產(chǎn)品還要水浴加熱，溶解完后還要組裝成噴霧裝置，使用過程繁瑣、費時，影響手術(shù)進(jìn)程；2、僅能止住毛細(xì)血管滲血，因而不能滿足大部分臨床所需；3、對創(chuàng)面的黏附性差，易被生理鹽水或組織液沖脫，器官蠕動時也易致脫落。
上述產(chǎn)品已在臨床上使用多年，但因上述原因而限制了其在臨床上的推廣使用，目前還未出現(xiàn)更好的替代產(chǎn)品。
據(jù)統(tǒng)計，在戰(zhàn)場和平時的創(chuàng)傷急救中，死亡的傷員中有超過10％死于失血過多。這是因為僅靠普通止血繃帶壓迫不能很好地止住動脈、靜脈出血。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提出一種可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法，將其應(yīng)用于內(nèi)臟的手術(shù)和體表創(chuàng)傷止血，以縮短手術(shù)時間、降低手術(shù)風(fēng)險、加速創(chuàng)面愈合，挽救更多的生命。
本發(fā)明提出的可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法，包括以下步驟(1)將核黃素、纖維蛋白原和凝血酶凍干粉按比例加入研缽中充分研細(xì)，顆粒度為10～50微米，其中核黃素與纖維蛋白原的重量比為核黃素∶纖維蛋白原＝1∶900～1200，每1～5毫克纖維蛋白原中加入一個活性單位的凝血酶凍干粉；(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇攪拌成均勻的懸浮液，每1毫升無水乙醇中加入6～10毫克混合干粉，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上，每平方厘米的膠原海綿上黏附有4～8毫克混合干粉顆粒；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，消毒。
上述方法中的纖維蛋白原和凝血酶從豬血、牛血、馬血或人血中提取。
上述方法中的膠原海綿的制備方法包括如下步驟(1)取豬腿、牛腿或馬腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～500微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的乙酸溶液中加入5～8克肌腱顆粒和15～20活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡50～100小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，將所得膠原濾液倒入平底盤中，液體厚度為1.5～2.5厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中，冷凍干燥得到醫(yī)用膠原海綿。
上述制備膠原海綿的濾液中可加有青霉素或頭孢拉定，加入量青霉素為每100毫升中加入100～250萬U，頭孢拉定為每100毫升中加入0.75～2.5克。
上述制備膠原海綿的濾液中可加有抗腫瘤藥物，加入量為每100毫升膠原濾液中加入鹽酸氮芥10～15毫克，或加入鹽酸平陽霉素15～20毫克，或甲氨蝶呤100～200毫克。
上述制備膠原海綿中冷凍干燥的溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空。
用本發(fā)明所提出的制備方法生產(chǎn)的纖維蛋白止血貼中，纖維蛋白原和凝血酶已經(jīng)附在固體膠原海綿上，由于不接觸水，凝血酶不能與纖維蛋白原反應(yīng)，當(dāng)敷在傷口創(chuàng)面上時，纖維蛋白原和凝血酶與血、淋巴液或生理鹽水接觸后便會溶解，凝血酶與纖維蛋白原起反應(yīng)，將可溶性的纖維蛋白原催化成不溶性的纖維蛋白(生化止血)，同時膠原海綿立即變成薄而致密的敷料緊緊地黏附在傷口或器官的表面，膠原海綿的網(wǎng)孔可吸附大量血小板和其它凝血因子，形成血栓(機(jī)械止血)，因此用本發(fā)明所提出的制備方法生產(chǎn)的纖維蛋白止血貼同時具有生化止血和機(jī)械止血的功能，大大提高了止血效果，可止住小動脈、靜脈和毛細(xì)血管的出血。如在制備膠原海綿過程中將抗生素加入膠原溶液，用這種膠原海綿制成的纖維蛋白止血貼在被機(jī)體吸收的過程中可緩慢釋放抗生素，增加了局部抗菌的功能。如參照臨床用量在膠原濾液中加入各種抗腫瘤藥物，用這種膠原海綿制成的纖維蛋白止血貼在被機(jī)體吸收的過程中則可緩慢釋放抗腫瘤藥物，增加了局部給抗腫瘤藥的功能，專用于腫瘤切除后的創(chuàng)面貼敷。
本發(fā)明提出的制備方法生產(chǎn)的可吸收纖維蛋白止血貼具有以下優(yōu)點1、本止血貼與機(jī)體生物相容性好、無毒副作用，在體內(nèi)可徹底降解；2、本發(fā)明制備的止血貼撕開包裝即可貼敷，無需溶解，因此使用時方便、快捷；3、生化止血和機(jī)械止血相結(jié)合，大大提高了止血效能，不但能止住毛細(xì)血管的滲血，還能止住小動脈、靜脈的出血，大大拓展了臨床應(yīng)用范圍，可用于內(nèi)臟手術(shù)止血和較大的體表創(chuàng)傷止血。
本發(fā)明制備的止血貼在醫(yī)學(xué)上可以用于止血、堵漏(瘺)、促進(jìn)組織再生和創(chuàng)傷愈合，防止機(jī)體組織粘連。本發(fā)明的止血貼可廣泛應(yīng)用于普通外科、肝膽外科、婦產(chǎn)科、口腔科、微創(chuàng)外科(如腹腔鏡、胸腔鏡、盆腔鏡)、神經(jīng)外科、心胸外科、泌尿外科等需要止血、堵漏(瘺)的手術(shù)中，使手術(shù)時間縮短，降低手術(shù)風(fēng)險，減少病人出血，加速創(chuàng)傷愈合，縮短住院時間。
具體實施例方式
下面介紹
具體實施例方式實施例一(1)取核黃素1毫克、纖維蛋白原950毫克和凝血酶凍干粉475活性單位，加入研缽中充分研細(xì)，其中纖維蛋白原和凝血酶來自豬血；(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇100毫升攪拌成均勻的懸浮液，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入10×20平方厘米的平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，按預(yù)定的規(guī)格裁剪，抽真空密封包裝后鈷源照射消毒。
實施例二(1)取核黃素1毫克、纖維蛋白原1000毫克和凝血酶凍干粉250活性單位，加入研缽中充分研細(xì)，其中纖維蛋白原和凝血酶取自人血；(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇100毫升攪拌成均勻的懸浮液，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入10×20平方厘米的平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，按預(yù)定的規(guī)格裁剪，抽真空密封包裝后鈷源照射消毒。
實施例三(1)取核黃素1毫克、纖維蛋白原1100毫克和凝血酶凍干粉300活性單位，加入研缽中充分研細(xì)，其中纖維蛋白原和凝血酶取自牛血；(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇100毫升攪拌成均勻的懸浮液，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入10×20平方厘米的平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，按預(yù)定的規(guī)格裁剪，抽真空密封包裝后鈷源照射消毒。
實施例四(1)取核黃素1毫克、纖維蛋白原1000毫克和凝血酶凍干粉500活性單位，加入研缽中充分研細(xì)，其中纖維蛋白原和凝血酶取自馬血；
(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇100毫升攪拌成均勻的懸浮液，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入10×20平方厘米的平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，按預(yù)定的規(guī)格裁剪，抽真空密封包裝后鈷源照射消毒。
本方法中的膠原海綿的制備實施例如下實施例五(1)取豬腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6克肌腱顆粒和18活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡60小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，將所得濾液倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為1.8厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
實施例六(1)取馬腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入7克肌腱顆粒和16活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡90小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，在所得膠原濾液中加入青霉素，每100毫升膠原濾液中加入150萬單位，充分混勻后倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為1.8厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
實施例七(1)取牛腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱顆粒和19活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡90小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，在所得膠原濾液中加入頭孢拉定，每100毫升膠原濾液中加入0.8克，充分混勻后倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為1.8厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
實施例八(1)取牛腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱顆粒和19活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡90小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，在所得膠原濾液中加入抗癌藥鹽酸氮芥，每100毫升膠原濾液中加入13毫克，充分混勻后倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為2.0厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
實施例九(1)取牛腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱顆粒和19活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡90小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，在所得膠原濾液中加入抗癌抗生素鹽酸平陽霉素，每100毫升膠原濾液中加入18毫克，充分混勻后倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為2.3厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
實施例十
(1)取牛腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～100微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的0.1％乙酸溶液中加入6.5克肌腱顆粒和19活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡90小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，在所得膠原濾液中加入頭孢拉定和甲氨蝶呤，每100毫升膠原濾液中加入頭孢拉定2.3克，甲氨蝶呤180毫克，充分混勻后倒入10×20平方厘米的平底盤中，液體厚度為1.9厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中冷凍干燥，溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空，將平底盤從凍干機(jī)中取出，用密封袋封嚴(yán)實，避免受潮，密封好的膠原海綿一周之內(nèi)可在室溫下保存，如長期保存則應(yīng)置于2～8℃。
本發(fā)明所提出的制備方法生產(chǎn)的可吸收纖維蛋白止血貼與可吸收縫合線編織成的孔徑3～5毫米的網(wǎng)兜結(jié)合使用，可處理和治療肝臟、脾臟破裂，即將纖維蛋白止血貼粘貼于破裂的肝臟、脾臟表面，再用適宜大小的可吸收網(wǎng)兜包回在外層。將本發(fā)明制備的止血貼與普通繃帶相結(jié)合，即可得到可吸收纖維蛋白止血繃帶，用于外傷。使用該發(fā)明時先將可吸收纖維蛋白止血貼敷于傷口，再用普通繃帶包扎，這樣可迅速止住動脈、靜脈和毛細(xì)血管出血，普通繃帶不會與傷口組織粘連。本發(fā)明的繃帶可用作戰(zhàn)傷救治和平時創(chuàng)傷急救，大幅度降低死亡率。
權(quán)利要求
1.一種可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)將核黃素、纖維蛋白原和凝血酶凍干粉按比例加入研缽中充分研細(xì)，顆粒度為10～50微米，其中核黃素與纖維蛋白原的重量比為核黃素∶纖維蛋白原＝1∶900～1200，每1～5毫克纖維蛋白原中加入一個活性單位的凝血酶凍干粉；(2)在上述混合均勻的干粉中加入無水乙醇攪拌成均勻的懸浮液，每1毫升無水乙醇中加入6～10毫克混合干粉，震蕩使懸浮顆粒均勻分布；(3)將均勻分布的懸浮液倒入平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，懸浮液中的顆粒黏附在膠原海綿上，每平方厘米的膠原海綿上黏附有4～8毫克混合干粉顆粒；(4)對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，消毒。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于其中的纖維蛋白原和凝血酶從豬血、牛血、馬血或人血中提取。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的膠原海綿的制備方法包括如下步驟(1)取豬腿、牛腿或馬腿的肌腱，粉碎至顆粒度為50～500微米；(2)將粉碎后的肌腱浸泡于濃度為0.1％的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶，每100毫升的乙酸溶液中加入5～8克肌腱顆粒和15～20活性單位的胃蛋白酶，充分混勻，在常溫下浸泡50～100小時；(3)對上述浸泡液進(jìn)行過濾除渣，將所得膠原濾液倒入平底盤中，液體厚度為1.5～2.5厘米，將裝有濾液的平底盤放入凍干機(jī)中，冷凍干燥得到醫(yī)用膠原海綿。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(3)的濾液中加有青霉素或頭孢拉定，加入量青霉素為每100毫升中加入100～250萬U，頭孢拉定為每100毫升中加入0.75～2.5克。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(3)的濾液中加有抗腫瘤藥物，加入量為每100毫升膠原濾液中加入鹽酸氮芥10～15毫克，或加入鹽酸平陽霉素15～20毫克，或甲氨蝶呤100～200毫克。
6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于其中冷凍干燥的溫度控制流程為經(jīng)3小時從室溫降至-40℃，保溫2小時，凍實后抽真空升華16小時，經(jīng)8小時升溫至0℃，每小時升溫5℃，0℃保溫8小時，經(jīng)3小時升溫至15℃，15℃保溫1小時，經(jīng)3小時升溫至25℃，緊接著經(jīng)1小時升溫至35℃，保溫10小時，去真空。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種可吸收纖維蛋白止血貼的制備方法，屬于醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域。本方法是將核黃素、纖維蛋白原和凝血酶凍干粉按比例加入研缽中充分研細(xì)，然后加入無水乙醇攪拌成均勻的懸浮液，將均勻分布的懸浮液倒入平底盤中，使膠原海綿的一面與懸浮液接觸，對黏附有混合干粉顆粒的膠原海綿抽真空干燥，消毒。本發(fā)明制備的止血貼，與機(jī)體生物相容性好，在體內(nèi)可徹底降解；生化止血和機(jī)械止血相結(jié)合，大大提高了止血效能，不但能止住毛細(xì)血管的滲血，還能止住小動脈、靜脈的出血，大大拓展了臨床應(yīng)用范圍，可用于內(nèi)臟手術(shù)止血和較大的體表創(chuàng)傷止血。還可在其中的膠原海綿中加入抗生素和抗癌藥物，使本止血增加了藥物緩釋、局部給藥的功能。
文檔編號A61L15/16GK1602967SQ200410033680
公開日2005年4月6日 申請日期2004年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月5日
發(fā)明者胡慶柳 申請人:胡慶柳