專利名稱：人參四逆注射劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種回陽救逆，養(yǎng)心復(fù)脈，益氣固脫，溫中祛寒(邪)，用于治療陰虛寒盛，陰衰陽脫，陰盛格陽之厥脫證(心源性、低血容量性、損傷性、中毒性等各類休克)和胸痹心痛證(冠心病心絞痛)、心肌梗塞、心力衰竭等急癥重癥的新藥——人參四逆注射劑。本發(fā)明的另一個(gè)目的是將四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)和紅參或人參的有效成分提取純化，制成適合靜脈給藥的小容量注射液、大容量注射液和凍干粉針劑。本發(fā)明具有顯著的強(qiáng)心作用，顯著增強(qiáng)心肌收縮力，顯著增加冠脈流量，極顯著改善休克患者血壓回升前微循環(huán)動(dòng)脈血灌流量，縮短紅細(xì)胞電泳時(shí)間，減輕小腸出血壞死，加強(qiáng)心臟泵血功能，顯著增加心臟排血量，改善重要器官及血管氧代謝，改善心肌缺血，升高并穩(wěn)定血壓，對(duì)心率異常具有良好的雙向調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)凝血酶活性和延長(zhǎng)凝血酶原時(shí)間，抑制血小板聚集和血栓形成，對(duì)垂體-腎上腺皮質(zhì)功能有興奮作用，具備中樞性鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗炎等藥理作用。本發(fā)明由四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)加紅參或人參提取物制成，涉及四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)的提取、純化工藝和紅參的提取、純化工藝，人參四逆注射劑的制備工藝等制備方法。
背景技術(shù)：
中醫(yī)理論所指的厥脫證，證見神志淡漠、面色蒼白、潮紅發(fā)紺、冷汗自出、四肢厥逆、氣息微弱、脈微結(jié)代或欲絕等。即現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的休克范疇。休克是指因各種原因(如大出血、創(chuàng)傷、燒傷、感染、過敏、心泵衰竭等)引起的急性血液循環(huán)障礙，微循環(huán)動(dòng)脈血灌流量急劇減少，從而導(dǎo)致各重要器官機(jī)能代謝系亂和結(jié)構(gòu)損害的復(fù)雜的全身性病理過程。病人表現(xiàn)為神志遲鈍、臉色蒼白、四肢濕冷、冷汗、脈博細(xì)速、血壓下降、尿量減少等。休克作為生命離開軀體的前奏，作為生命垂危的指針，為歷代醫(yī)家所重視。國(guó)家衛(wèi)生部2003年衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展情況統(tǒng)計(jì)公報(bào)顯示，死亡率排前五位的惡性腫瘤、腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病、損傷和中毒，出現(xiàn)休克的機(jī)率最高。隨著工業(yè)化進(jìn)程加快、環(huán)境污染、競(jìng)爭(zhēng)社會(huì)心理壓力加重、人口老齡化、交通便捷、家庭外部活動(dòng)頻繁，死亡率排名前四位的疾病已經(jīng)成為常見病、多發(fā)病，損傷和中毒也逐年呈上升趨勢(shì)。因此，現(xiàn)代社會(huì)迫切需求一種安全、速效、高效的抗休克新藥。
中醫(yī)理論所指的胸痹心痛證，《靈樞·厥病篇》“真心痛，手足青至節(jié)，心痛甚”?！督饏T要略》“胸痹之病，喘息咳唾，胸背痛，短氣，寸口脈沉而遲，關(guān)上小緊數(shù)”。證見胸痛胸悶，心悸氣短、舌質(zhì)紫暗、脈沉細(xì)微或結(jié)代等。屬現(xiàn)代醫(yī)學(xué)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(簡(jiǎn)稱冠心病)范疇，是目前工業(yè)化國(guó)家發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一。據(jù)國(guó)家衛(wèi)生部2003年衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展情況統(tǒng)計(jì)公報(bào)顯示，心臟病在我國(guó)居民主要死亡原因中排在第四位，占人口總數(shù)的76.2/10萬，年死亡人數(shù)約103萬。美國(guó)每年死于冠心病的人數(shù)達(dá)60萬，用于冠心病診治的費(fèi)用每年約50億美元。因此，冠心病被稱為工業(yè)化國(guó)家的“第一殺手”。
目前用于治療休克和冠心病的藥物，仍以化學(xué)藥品為主，療效確切，但毒副作用較大，不良反應(yīng)較多?，F(xiàn)有的中藥制劑效果還不夠理想，以參附注射液、參麥注射液、生脈注射液等為代表，用于厥脫證，參附回陽救逆療效顯著，然復(fù)脈固脫不足；參麥、生脈固脫復(fù)脈有效，回陽救逆之功較弱。用于胸痹心痛證，參附能解陽衰氣虛之急，卻不能寧心止悸，化痰行瘀；參麥、生脈補(bǔ)氣生陰顯著，然升陽止痛不足。四逆湯加人參方雖經(jīng)歷代醫(yī)家奉為回陽救逆，養(yǎng)心復(fù)脈、益氣國(guó)脫、溫中祛寒之經(jīng)典方，然至今仍未有任何制劑上市，只停留于原生藥處方煎劑。根據(jù)厥脫證和胸痹心痛證病因病機(jī)的特點(diǎn)，為臨床治療各類休克和心血管病提供既能適用于急癥、搶救，亦能適用于重癥拯救的標(biāo)本兼治的高效、速效、安全，更符合中藥現(xiàn)代化要求的新藥，故立題開發(fā)人參四逆注射劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，針對(duì)目前抗休克藥物和治療冠心病藥物存在的問題，為醫(yī)藥界提供一種生物利用度高，血藥濃度高，藥效作用快而持久穩(wěn)定，臨床安全性更好的新藥——人參四逆注射劑，其中包括小容量人參四逆注射液、大容量人參四逆氯化鈉注射液、大容量人參四逆葡萄糖注射液及注射用人參四逆(凍干粉針劑)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供這種人參四逆注射劑的制備方法。
本發(fā)明的目的是通過如下配方和制備工藝制取的藥物來實(shí)現(xiàn)的。
一種人參四逆注射劑的組合物，由四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)提取物、紅參或人參提取物、適量的藥用輔料和注射用水組成，其特征在于，所用的四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)提取物主要含烏頭總堿、姜辣素、甘草酸、甘草次酸，紅參或人參提取物為人參皂苷、人參多糖。
附加技術(shù)特征是a.小容量人參四逆注射液，白附片(黑順片)3～9g、干姜2～6g、紅參或人參1.5～4.5g(含人參皂苷1.8～5.4mg，人參多糖37.5～112.5mg)、炙甘草3～9g，加注射用水至5～20ml。
b.大容量人參四逆氯化鈉注射液，白附片(黑順片)3～9g、干姜2～6g、紅參或人參1.5～4.5g(含人參皂苷1.8～5.4mg，人參多糖37.5～112.5mg)，炙甘草3～9g，注射液總量的0.9％氯化鈉，加注射用水至50～200ml。
c.大容量人參四逆葡萄糖注射液，白附片(黑順片)3～9g、干姜2～6g、紅參或人參1.5～4.5g(含人參皂苷1.8～5.4mg，人參多糖37.5～112.5mg)、炙甘草(甘草)3～9g，注射液總量的5％葡萄糖，加注射用水至50～200ml。
d.注射用人參四逆(凍干粉針劑)，白附片(黑順片)1.5～4.5g、干姜1～3g、紅參或人參1～3g(含人參皂苷1.2～3.6mg，人參多糖25～75mg)，炙甘草(甘草)1.5～4.5g，以100～300mg的甘露醇或木糖醇或山梨醇作膨松劑，加注射用水至2～4ml，冷凍干燥制成0.25～0.5g凍干粉針劑。
本發(fā)明人參四逆注射劑，由四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)提取物的提取純化工藝，紅參或人參提取物的提取純化工藝及注射劑制備工藝組成，其中紅參(人參)提取物的提取工藝為人參皂苷的提取和人參多糖的提取，其特征是人參皂苷提取包括以下步驟取紅參或人參，用乙醇回流，用乙醚萃取，仲丁醇或正丁醇萃取，乙醇沉淀純化，濾液至清膏即得人參皂苷提取物。
人參多糖提取包括以下步驟乙醇提取后的紅參或人參藥渣，經(jīng)水提醇沉、聚酰胺吸附及層析柱洗脫、分離純化、洗脫液醇沉、沉淀經(jīng)干燥即得人參多糖。
四逆湯(白附片或黑順片、干姜、炙甘草或甘草)提取物的提取工藝為取白附片或黑順片、干姜、炙干草或甘草三味藥材，按3∶2∶3比例，依次水煮過濾，濾液加不同濃度的乙醇沉淀濃縮，即得四逆湯提取液。
四逆湯濾渣依次加硫酸沉淀，棄去上清液，收集沉淀，真空干燥粉碎，丙酮萃取，過濾回收丙酮，真空干燥，即得甘草酸、甘草次酸提取物。
人參四逆注射劑制備工藝為取處方量的人參皂苷提取液和四逆湯提取液混合，過濾澄明，備用；取處方量甘草酸、甘草次酸提取物，加注射用水，用氨水調(diào)節(jié)pH，加熱溶解，加入人參皂苷提取液和四逆湯提取液混合液，加熱煮沸，活性炭吸附，過濾澄明備用；取處方量的人參多糖，加注射用水煮沸溶解，過濾澄明，活性炭吸附，脫炭澄明，加入人參皂苷、四逆湯、甘草酸、甘草次酸提取液的混合液，加注射用水至全量，調(diào)節(jié)pH，精濾澄明，灌封，冷卻，燈檢，包裝，成品檢驗(yàn)；凍干粉針劑無菌條件下分裝冷凍干燥、包裝、成品檢驗(yàn)即得。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，生物利用度高，血藥濃度高，藥效作用快而持久穩(wěn)定，安全性更好。由四逆湯提取物與紅參(人參)提取物組方，藥效證明抗休克作用明顯，速效而持久穩(wěn)定；治療冠心病心絞痛、抗心肌梗塞、心力衰竭療效顯著。
本發(fā)明人參四逆注射劑治療厥脫證(各類休克)及胸痹心痛證(冠心病心絞痛)的理論依據(jù)如下中醫(yī)理論認(rèn)為，厥脫證的發(fā)病機(jī)理主要是寒溫邪毒內(nèi)陷營(yíng)血，極度耗損陰津氣血，導(dǎo)致正氣大虧、氣血逆亂；或因汗、吐、下、亡血失精、創(chuàng)傷、中毒等耗氣傷陰；或久病臟腑虛損，更遇外邪入侵、飲食失宜、情志刺激等使臟腑氣血陰陽更加損傷。邪毒閉阻于內(nèi)，正氣耗脫于外，終致陰竭陽脫而告警于生命。陰陽乃生命之大綱。孤陰不生，獨(dú)陽不長(zhǎng)，陰陽互生，陰陽調(diào)和則生，陰陽失衡則病，陰陽離絕則死。陰衰而生厥逆，陽衰而成脫證，厥脫之證基于心腎陽氣式微，幾乎欲絕。面對(duì)奄奄一息之生命，勢(shì)必回陽救逆，養(yǎng)心復(fù)脈、益氣固脫、溫中祛寒(邪)。醫(yī)圣仲景高屋建瓴，創(chuàng)四逆湯加人參方以拯救生命于垂危，遺后世而行大善。
四逆湯加人參方以附片為君，大辛大熱，上助心陽，中溫脾陽，下補(bǔ)腎陽?！秲?nèi)經(jīng)》曰“寒邪所勝，平以辛熱”。溫壯腎陽，主補(bǔ)命門之火，大刀闊斧以祛寒邪，直走腎宮，重升先天之氣；干姜為股肱之臣，再助辛熱，俗云“附子無姜不熱”。溫中祛寒，守中而溫脾陽，以挽欲絕的后天之氣；紅參為佐，大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，益氣攝血，輔佐姜附將挽回之陽敷布全身，重塑陰津，溝通陰陽；炙甘草為使，溫養(yǎng)陽氣，緩急調(diào)中，制姜附之燥烈，抑紅參之峻補(bǔ)。《景岳全書·本草正》云“毒藥得之解其毒，剛藥得之和其性，隨氣藥入氣，隨血藥入血”。尤如“國(guó)老”之無往不可，裨則益之。
厥脫證所傷最重者，心、腎、腦、脾、肺，治病求基本，四逆湯加人參方四藥合用，附子壯腎陽，干姜溫脾陽，紅參益心氣，炙甘草調(diào)和，抑參之竣補(bǔ)，制姜附之燥烈；附子善走，干姜善守，二者相須，回陽救逆之功更強(qiáng)；紅參益氣生津，以助陰生，與炙甘草合用而固脫復(fù)脈；附姜辛熱，參草甘溫，《內(nèi)經(jīng)》曰“寒邪所勝，平以辛熱”，“寒淫于內(nèi)，治以甘熱”。本方走、守、補(bǔ)、和兼?zhèn)?，調(diào)和陰陽，藥簡(jiǎn)力專而效宏，為回陽生陰之大劑，救厥固脫的良方，古今醫(yī)家驗(yàn)證，合理可行。
胸痹心痛證，主要由氣虛血瘀，臟氣不足，氣化失調(diào)，津血運(yùn)行不暢，以致津液凝取成痰，血液澀滯成瘀，痰瘀閉阻，心脈不通，脈絡(luò)受阻所致。尤以腎陽虛衰，心臟缺乏生化之源為主。心居上焦，屬陽主火，腎居下焦，屬陰主水，腎水上濟(jì)于心，使心火不亢，心火下降于腎，使腎水不寒，如此心腎相交，使陰陽協(xié)調(diào)，水火既濟(jì)。心為君火，腎藏相火，君相之火相互資生，相互制約。腎藏元陽，元陽乃諸陽之根，故爾腎陽虛衰，心陽亦隨之衰。故胸痹心痛證，病位在心，病根在腎。心陽虛衰，無力推動(dòng)心氣，《內(nèi)經(jīng)》曰“氣為血帥，血為氣母”。心氣乏力而成氣滯，氣滯則血瘀；腎陽虛衰，五臟缺少生化之源，津液缺乏腎陽溫煦而成痰；痰瘀互結(jié)而阻脈，脈阻成痹，痹則不通，不通則痛，則悶、則悸，故舌質(zhì)紫絳，脈微結(jié)代。
四逆湯加人參方，附片壯腎陽，使心陽有化生之根；干姜溫脾陽，以厚心陽后天之基；紅參主補(bǔ)心氣，復(fù)脈攝血，固本培元，迎陽歸心；炙甘草益氣補(bǔ)中，調(diào)和諸藥。四藥合用，補(bǔ)腎陽入手，以壯心陽；大補(bǔ)元?dú)?，以固心之根本；陽氣化育，以通心脈舒心絡(luò)。故本方用于胸痹心痛證，符合中醫(yī)理論，合理可行。
現(xiàn)代藥學(xué)研究證明，附子長(zhǎng)時(shí)間加熱煎煮炮制后，所含烏頭堿水解為烏頭原堿，加強(qiáng)心肌收縮力，增加心輸出量，具有較好的強(qiáng)心作用；能顯著增加冠脈流量，擴(kuò)張血管，改善心肌缺血，降低心肌耗氧量，具有良好的抗心律失常作用；升高血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，使血清補(bǔ)體含量增加，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，能明顯對(duì)抗平均主動(dòng)脈壓力、左心室收縮壓力及左心室上升最大速率的降低，抗休克作用較強(qiáng)，興奮垂體腎上腺皮質(zhì)機(jī)能，抗炎、鎮(zhèn)痛，并對(duì)各種心臟病和其他疾病伴有的心力衰竭有肯定的效果。
干姜具有抗?jié)?、抑制胃液分泌，減少胃液酸度；具有抗膽堿抗組胺作用而抑制腸管活動(dòng)；顯著增加膽汁分泌量，利膽強(qiáng)度和作用時(shí)間優(yōu)于脫氧膽酸鈉；抗缺氧作用；對(duì)血小板環(huán)氧化酶、血栓素B2(TXB2)和前列腺素生物合成的抑制，具有抗血栓及抗血小板聚集作用；收縮中樞性及末梢血管，具有升壓及強(qiáng)心作用；抑制前列腺生物合成而具有解熱鎮(zhèn)痛抗炎作用。
紅參具有“適應(yīng)原”樣作用，具有抗疲勞、抗缺氧、抗輻射，增加肌肉中DNA、RNA的含量，并對(duì)大腦有雙向調(diào)節(jié)作用；提高機(jī)體免疫功能；改善血液和造血功能；具有強(qiáng)心，抗心律失常作用；抗衰老和促智等作用。
炙甘草能明顯抑制肝中△4+-5β-還原酶；能延緩皮質(zhì)激素的代謝速率，延長(zhǎng)其作用時(shí)間及強(qiáng)度，表明有皮質(zhì)激素樣作用；降低胃液量、總酸度和游離酸度，抑制乙酰膽堿和組胺引起的胃液分泌，具有抗?jié)冏饔?；覆蓋發(fā)炎的咽喉粘膜，緩和炎癥刺激，發(fā)揮鎮(zhèn)咳作用，促進(jìn)咽喉及支氣管分泌，使痰容易咳出，呈現(xiàn)祛痰作用；抑制3H-醋酸和[3H]亞油酸參入平滑肌細(xì)胞中脂質(zhì)合成，抑制微粒體膽固醇的形成而顯著降低血漿膽固醇和甘油三脂含量，具有顯著降血脂作用，抑制組胺釋放，促進(jìn)細(xì)胞免疫抗體生成，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，對(duì)多種病毒有顯著抑制作用，抗心律失常，還有抗腫瘤、保肝、抗脂質(zhì)過氧化，抑制脂酶，增強(qiáng)內(nèi)耳聽覺功能等作用。
四逆湯加人參方是中醫(yī)治療厥脫證和胸痹心痛證的經(jīng)典方，藥理藥效相須、相佐、相使、相殺、相約具備，姜附相須，相約，參草相須，相約，參附相佐，姜附草相使，姜草與附相殺。干姜助附了以壯腎陽，附子助干姜以溫脾陽，炙甘草助紅參益氣，紅參輔佐附子回陽固脫，炙甘草使姜附藥效更好，干姜、炙甘草殺附子之毒，炙甘草制附子之燥烈，抑紅參之峻補(bǔ)，附子善走，干姜善守，姜附聯(lián)用以走約守，四藥合用，既增強(qiáng)了回陽救逆，養(yǎng)心復(fù)脈，益氣固脫，溫中祛寒，治療厥脫證和胸痹心痛證的藥效作用，又降抑毒性、燥烈而提高了臨床用藥安全性。
實(shí)驗(yàn)證明，附子單用，易出現(xiàn)心律失常，為附子所含烏頭堿所致，炙甘草含黃酮類物質(zhì)是解附子毒的有效成分，能拮抗烏頭堿引發(fā)的心律失常。炙甘草與附子同煎煮，甘草黃酮中甘草次酸的煎出率達(dá)80％以上，而甘草單煎的煎出率僅為50％左右，說明甘草與附子同煎更有利于解毒成分的溶出；炙甘草中蜂蜜富含多種氨基酸，能與烏頭堿結(jié)合成鹽，易溶于水，既提高藥效，又能降低毒性。紅參能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)有害物質(zhì)刺激的非特異性抵抗力，能顯著降低附子加快心率，引起心律失常的毒副作用。干姜解附子之毒的作用類似于甘草。在四逆湯加人參方中，附子的毒性降低了30倍。
本發(fā)明藥理毒理研究結(jié)果表明人參四逆注射劑能顯著提高微循環(huán)動(dòng)脈血灌流量，具有加強(qiáng)心肌收縮力，調(diào)整心率，升高并穩(wěn)定血壓，加強(qiáng)心臟泵血功能，增加心臟排血量，降低外周血管阻力，改善心臟與血管氧代謝，改善心、腎、腦、肺等重要器官和組織的供血，降低血液粘度，增加冠脈流量，改善心肌缺血，抑制血栓形成，增強(qiáng)凝血酶活性及延長(zhǎng)凝血酶原時(shí)間，降低毛細(xì)血管通透性等。按設(shè)定臨床使用量用于臨床，未見任何毒副作用和不良反應(yīng)。
a.抗體克研究表明，人參四逆注射劑能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈流量，改善休克患者血壓回升前微血管血流，縮短紅細(xì)胞電泳時(shí)間，減輕小腸出血性壞死，提高耐缺氧能力，對(duì)戊巴比妥鈉誘發(fā)的麻醉犬急性心力衰竭及心源性休克有明顯的保護(hù)作用，升高LVSP，降低LVEDP，增加dp/dtmax，增加CO、SBP和DEP，顯著降低創(chuàng)傷性休克小鼠死亡率(P＜0.01)，顯著降低感染性休克小鼠的死亡率(P＜0.01)。
b.強(qiáng)心研究表明人參四逆注射劑可增強(qiáng)心肌收縮能力和舒張能力，顯著增加冠脈流量，升高平均股動(dòng)脈壓，增加心輸出量，強(qiáng)心作用明顯。
c.升高血壓研究表明人參四逆注射劑能顯著提高微循環(huán)動(dòng)脈血灌流量，加強(qiáng)心肌收縮力，增加冠脈流量，加強(qiáng)心臟泵血功能，提高心臟排出量，降低外周血管阻力，降低微細(xì)血管通透性，具有迅速升高血壓，且血壓升至正常后能保持穩(wěn)定的作用。
d.調(diào)整心率研究表明人參四逆注射劑對(duì)休克患者過快心率有減緩作用，對(duì)因傳導(dǎo)阻滯而減慢心率又具有明顯的拮抗作用，表明對(duì)心率異常有良性的雙向調(diào)節(jié)作用。
e.抗心肌缺血研究表明人參四逆注射劑能顯著擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，降低缺血心肌丙二醛的含量，清除氧自由基，有明顯的抗心肌缺血作用。同時(shí)對(duì)氧自由基對(duì)心肌的損傷具有恢復(fù)作用，表明對(duì)心肌有保護(hù)作用。
f.抗心力衰竭研究表明人參四逆注射劑能增強(qiáng)心臟泵血功能，加強(qiáng)心肌收縮力，增加心臟每搏輸出量(SV)，提高左心室短軸縮短率(△D％)，提高心博量指數(shù)(SVI)，改善二尖瓣一室間隔間距(EPSS)，改善心臟指數(shù)(CI)，因此，具有良好的抗心力衰竭作用。
g.急性毒性試驗(yàn)表明，按60kg體重成人靜脈給藥日用量的899倍和719倍給予小鼠或大鼠注射給藥之后觀察14天，動(dòng)物無死亡，動(dòng)物的攝食量和體重?zé)o明顯減少，處死動(dòng)物后觀察重要器官(心、肝、肺、腎等)均無異常發(fā)現(xiàn)，其余也未見異常。
h.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)表明，連續(xù)對(duì)Beagle犬靜脈滴注成人靜脈給藥日用量100.38倍藥物組合物90天及停藥15天，未見明顯異常，亦無明顯延遲性毒性反應(yīng)。
i.臨床試驗(yàn)研究表明，人參四逆注射劑對(duì)厥脫證(心源性、低血容量性、損傷性、中毒性等各類休克)顯效率73.6％，有效率26.4％，總有效率100％；對(duì)胸痹心痛證(冠心病心絞痛)顯效率71.8％，有效率27.1％，總有效率98.9％；對(duì)心肌梗塞、心力衰竭等急癥重癥療效確切，安全可控。


圖1為本發(fā)明四逆湯提取物的提取工藝流程2為本發(fā)明紅參(人參)提取物的提取工藝流程3為本發(fā)明小容量人參四逆注射液制備工藝流程4為本發(fā)明大容量人參四逆氯化鈉注射液制備工藝流程5為本發(fā)明大容量人參四逆葡萄糖注射液制備工藝流程6為本發(fā)明注射用人參四逆(凍干粉針)制備工藝流程圖
具體實(shí)施例方式提取工藝a.四逆湯提取物的提取取附子、干姜和炙甘草三味藥材，加6倍量水煎煮3次，每次1.5小時(shí)，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮至4000ml(每1ml相當(dāng)于藥材2g)，加乙醇使乙醇濃度達(dá)80％，靜置過夜，濾過，濾渣備用，濾液回收乙醇后濃縮至2000ml(每1ml相當(dāng)于藥材4g)，加乙醇使乙醇濃度達(dá)85％，靜置過夜，濾過，濾渣備用；濾液回收乙醇后濃縮至1000ml(每1ml約相當(dāng)于藥材8g)，加乙醇使乙醇濃度達(dá)90％以上，靜置過夜，濾過，濾渣備用，濾液回收乙醇，并濃縮至1000ml(每1ml相當(dāng)于藥材8g)，加2倍量水至3000ml，并用10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至4.5左右，冷藏過夜，過濾，濾液濃縮至1000ml(每1ml相當(dāng)于藥材8g)，得四逆提取液，備用；合并3次濾渣，加3倍藥材量的水?dāng)噭?，在攪拌下緩慢加入硫酸，使硫酸含量達(dá)5％(V/V)左右，靜置過夜，棄去上清液，再加3倍藥材量的水?dāng)噭?，再加硫酸使硫酸含量達(dá)5％左右，靜置過夜，棄去上清液，再同法處理一次，棄去上清液后，收集沉淀，在70～80℃下干燥，粉碎，置回流裝置中，加5倍干粉量的丙酮萃取2次，每次30分鐘，合并回流液，濾過，在55℃下減壓回收丙酮，在70～80℃下干燥，得甘草酸、甘草次酸提取物，備用。
b.人參皂苷的提取取紅參切片，用75％乙醇回流提取4次，每次用8倍量提取1.5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.05左右(60℃測(cè)定)，冷至室溫，用1/4量乙醚萃取3次，棄去乙醚液，加熱煮沸，揮去殘留乙醚，過濾，濾液冷至室溫，用水飽和的等體積仲丁醇萃取4次，合并仲丁醇，用1/4量的水萃洗2次，棄去水液，減壓回收仲丁醇，濃縮至相對(duì)密度1.05～1.10(60℃測(cè)定)，加乙醇，使乙醇濃度達(dá)40％，冷藏過夜，濾過，濾液濃縮至每1ml約相當(dāng)于藥材5g的清膏，即得人參皂苷提取物。
c.人參多糖的提取乙醇提取后的藥渣，用10倍量水煎煮3次，每次1.0小時(shí)，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10～1.20(60℃測(cè)定)，加乙醇，使乙醇含量達(dá)80％，靜置12小時(shí)，濾取沉淀，于70～80℃下干燥，即得人參粗多糖，加30倍水煮沸溶解，冷藏過夜，取上清液濃縮至相對(duì)密度1.20左右(60℃測(cè)定)，加300g聚酰胺拌勻，干燥，裝于層析柱(柱徑與柱高比1∶8～10)中，用水4500ml以每分鐘20ml速度洗脫，收集洗脫液，濃縮至相對(duì)密度1.20左右(60℃測(cè)定)，加乙醇使乙醇含量達(dá)80％，攪勻，靜置12小時(shí)，濾取沉淀，沉淀用無水乙醇洗滌2～3次，在70～80℃下干燥，即得人參多糖。
實(shí)施例A 小容量人參四逆注射液由四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物，紅參中人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8～5.4mg，人參多糖37.5～112.5mg)，注射用水加至5～20ml組成。
例1 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(人參皂苷1.8g、人參多糖37.5mg)，注射用水5ml組成。
例2 由四逆湯(白附片6g、干姜4g、炙甘草6g)提取物，人參1.5g提取物(人參皂苷3.6mg、人參多糖75mg)，加注射用水5ml組成。
例3 由四逆湯(白附片9g、干姜6g、炙甘草9g)提取物，人參4.5g提取物(人參皂苷5.4mg、人參多糖112.5mg)，注射用水5ml組成。
例4 由四逆湯(黑順片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，注射用水5ml組成。
例5 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，人參1.5g提取物(人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，注射用水5ml組成。
例6 由四逆湯(白附片9g、干姜6g、炙甘草9g)提取物，紅參4.5g提取物(人參皂苷5.4g、人參多糖112.5mg)，注射用水10ml組成。
例7 由四逆湯(黑順片9g、干姜6g、炙甘草9g)提取物，紅參4.5g提取物(人參皂苷5.4g、人參多糖112.5mg)，注射用水20ml組成。
按下述方法制備小容量人參四逆注射液取處方量的四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取液，與人參皂苷提取液(紅參1.5g)混合，過濾澄明，備用，取處方量甘草酸、甘草次酸提取物，加處方量15％的注射用水?dāng)噭?，?0％氨水調(diào)節(jié)pH8左右，加熱溶解，加入四逆湯、人參皂苷提取液混合備用液，調(diào)節(jié)pH6.5左右，加熱煮沸約10min，待溫度降至70～80℃時(shí)，加2％(W/V)活性炭攪勻，吸附約10min，期間攪拌2～3次，過濾澄明備用；取處方量的人參多糖，用處方量60％的注射用水煮沸溶解，過濾澄明，濾液加0.3％(W/V)活性炭攪勻，吸附約15min，期間攪拌2～3次，過濾脫炭，澄明后，加入四逆湯提取液、人參皂苷提取液、甘草酸、甘草次酸提取液的混合液中，加注射用水至全量，調(diào)節(jié)pH至7.0左右，經(jīng)0.65μm、0.45μm、0.22μm精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于5ml曲頸安瓿中，于105℃滅菌30min，經(jīng)檢漏、燈檢、印字、包裝、成品檢驗(yàn)即得。
實(shí)施例B 大容量人參四逆氯化鈉注射液由四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物，紅參或人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8～5.4mg、人參多糖37.5～112.5mg)，組合物總量0.9％的氯化鈉，注射用水加至50～200ml組成。
例1 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，氯化鈉0.45g，注射用水加至50ml組成。
例2 由四逆湯(白附片6g、干姜4g、炙甘草6g)提取物、紅參3g提取物(含人參皂苷3.6mg、人參多糖75mg)，氯化鈉0.9g，注射用水加至100ml組成。
例3 由四逆湯(白附片9g、干姜6g、炙甘草9g)提取物、紅參4.5g提取物(含人參皂苷5.4mg、人參多糖112.5mg)，氯化鈉1.8g，注射用水加至200ml組成。
例4 由四逆湯(黑順片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物、人參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，氯化鈉0.9g，注射用水加至100ml組成。
例5 由四逆湯(生附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物、紅參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，氯化鈉0.9g，注射用水加至100ml組成。
例6 由四逆湯(白順片3g、干姜2g、甘草3g)提取物、人參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，氯化鈉0.9g，注射用水加至100ml組成。
按下述方法制備大容量人參四逆氯化鈉注射液取處方量四逆湯提取液與人參皂苷提取液混合備用液，加入處方量甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，制成混合備用液，加入氯化鈉0.9％，加注射用水至全量，攪勻，調(diào)節(jié)pH值5.5左右，用0.65μm、0.45μm和0.22μm復(fù)合微膜濾器精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于50～200ml輸液玻瓶中，105℃滅菌30min，經(jīng)冷卻、燈檢、貼標(biāo)、成品檢驗(yàn)、包裝即得。
實(shí)施例C 大容量人參四逆葡萄糖注射液由四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物、紅參或人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8～5.4mg，人參多糖37.5～112.5mg)組合物總量5％的葡萄糖，注射用水加至50～200ml組成。
例1 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，葡萄糖2.5g，注射用水加至50ml組成。
例2 由四逆湯(白附片6g、干姜4g、炙甘草6g)提取物，紅參3g提取物(含人參皂苷3.6mg、人參多糖75mg)，葡萄糖5g，注射用水加至100ml組成。
例3 由四逆湯(白附片9g、干姜6g、炙甘草9g)提取物，紅參4.5g提取物(含人參皂苷5.4mg、人參多糖112.5mg)，葡萄糖10g，注射用水加至200ml組成。
例4 由四逆湯(黑順片3g、干姜2g、甘草3g)提取物，人參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，葡萄糖5g，注射用水加至100ml組成。
例5 由四逆湯(黑順片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)，葡萄糖5g，注射用水加至100ml組成。
例6 由四逆湯(白附片9g、干姜6g、甘草9g)提取物，人參4.5g提取物(含人參皂苷5.4mg、人參多糖112.5mg)，葡萄糖10g，注射用水加至200ml組成。
按下述方法制大容量人參四逆葡萄糖注射液取處方量四逆湯提取物與人參皂苷提取物混合備用液，加入處方量甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，制成混合備用液，加入5％葡萄糖，加注射用水至全量，攪勻，調(diào)節(jié)pH值5.0左右，用0.65μm、0.45μm、0.22μm復(fù)合微膜濾器精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于50～200ml輸液玻瓶中，105℃滅菌30min，經(jīng)冷卻、燈檢、貼標(biāo)、成品檢驗(yàn)，包裝即得。
實(shí)施例D 注射用人參四逆凍干粉針劑由四逆湯(白附片或黑順片1.5～4.5g、干姜1～3g、炙甘草或甘草1.5～4.5g)提取物，紅參或人參1～3g提取物(含人參皂苷1.2～3.6mg、人參多糖25～75mg)，甘露醇或山梨醇或木糖醇100～300mg，加注射用水2～4ml，冷凍干燥制成0.25～0.5g凍干粉針劑。
例1 由四逆湯(白附片1.5g、干姜1g、炙甘草1.5g)提取物，紅參1g提取物(含人參皂苷1.2mg、人參多糖25mg)、甘露醇100mg，加注射用水2ml，冷凍干燥制成0.25g凍干粉針劑。
例2 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，紅參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)、甘露醇200mg，加注射用水3ml，冷凍干燥制成0.4g凍干粉針劑。
例3 由四逆湯(白附片4.5g、干姜3g、炙甘草4.5g)提取物，紅參3g提取物(含人參皂苷3.6mg、人參多糖75mg)、甘露醇300mg，加注射用水4ml，冷凍干燥制成0.5g凍干粉針劑。
例4 由四逆湯(黑順片1.5g、干姜1g、甘草1.5g)提取物，人參1g提取物(含人參皂苷1.2mg、人參多糖25mg)、山梨醇100mg，加注射用水2ml，冷凍干燥制成0.25g凍干粉針劑。
例5 由四逆湯(白附片3g、干姜2g、炙甘草3g)提取物，人參2g提取物(含人參皂苷2.4mg、人參多糖50mg)、木糖醇100mg，加注射用水2ml，冷凍干燥制成0.4g凍干粉針劑。
例6 由四逆湯(黑順片3g、干姜2g、甘草3g)提取物，人參1.5g提取物(含人參皂苷1.8mg、人參多糖37.5mg)、甘露醇100mg，加注射用水2ml，冷凍干燥制成0.3g凍干粉針劑。
按下述方法制備注射用人參四逆凍干粉針劑取處方量四逆湯提取物方人參皂苷提取物混合備用液，加入處方量甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，制成混合備用液，加入處方量的甘露醇攪拌溶解后，加注射用水至全量，攪勻，調(diào)節(jié)pH值6.5左右，用0.65μm、0.45μm和0.22μm復(fù)合微膜濾器精濾澄明，無菌條件下分裝于已滅菌的7～10ml西林瓶中，在-40～-55℃下預(yù)凍2～3h，再開機(jī)冷凍干燥，在抽真空前，凝結(jié)器先降溫至-50～-60℃，在第一階段，真空度維持在0.1mmHg柱左右，升華溫度-20～-30℃，干燥6～8h，待制品中水晶存在時(shí)(即已除去90％以上水份)，進(jìn)入第二階段干燥，此時(shí)將干燥箱中擱板的溫度升至30℃左右，并保持恒定，繼續(xù)干燥5h左右，取出封口，貼標(biāo)經(jīng)成品檢驗(yàn)，包裝即得。
權(quán)利要求
1.一種人參四逆注射劑組合物，其特征在于用四逆湯即附片、干姜、炙甘草的提取物、紅參或人參提取物、藥用輔料、注射用水組合制成人參四逆注射劑，四逆湯提取物主要含烏頭總堿、姜辣素、甘草酸、甘草次酸，紅參或人參提取物主要含人參皂苷和人參多糖。
2.按照權(quán)利要求1所述的人參四逆注射劑組合物，其特征在于含四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物，紅參或人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8mg～5.4mg、人參多糖37.5mg～112.5mg)，注射用水加至5ml～20ml制成人參四逆小容量注射液。
3.按照權(quán)利要求1所述的人參四逆注射劑組合物，其特征在于含四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物，紅參或人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8mg～5.4mg、人參多糖37.5mg～112.5mg)，注射液總量0.9％的氯化鈉，注射用水加至5ml～20ml制成大容量人參四逆氯化鈉注射液。
4.按照權(quán)利要求1所述的人參四逆注射劑組合物，其特征在于含四逆湯(白附片或黑順片3～9g、干姜2～6g、炙甘草或甘草3～9g)提取物，紅參或人參1.5～4.5g提取物(含人參皂苷1.8mg～5.4mg、人參多糖37.5mg～112.5mg)，注謝液總量5％的葡萄糖，注射用水加至50ml～200ml，制成大容量人參四逆葡萄糖注射液。
5.按照權(quán)利要求1所述的人參四逆注射劑組合物，其特征在于含四逆湯(白附片或黑順片1.5～4.5g、干姜1～3g、炙甘草或甘草1.5～4.5g)提取物，紅參或人參1～3g提取物(含人參皂苷1.2mg～3.6mg、人參多糖25mg～75mg)，甘露醇(山梨醇或木糖醇)100～300mg，加注射用水2ml～4ml，冷凍干燥制成0.2～0.4g注射用人參四逆凍干粉針劑。
6.按照權(quán)利要求1所述的四逆湯和紅參提取物的提取工藝，四逆湯提取工藝其特征在于取處方量的附片、干姜、炙甘草加水依次煎煮，合并煎煮液濾過濃縮，依次用不同含量乙醇沉淀、過濾、濃縮，得四逆提取液；濾渣依次加水，再加硫酸沉淀，丙酮萃取，得甘草酸和甘草次酸；紅參提取工藝其特征在于紅參藥材依次經(jīng)乙醇回流提取，乙醚萃取，仲丁醇或正丁醇萃取，乙醇沉淀純化，過濾得人參皂苷，紅參藥渣經(jīng)水提醇沉，聚酰胺吸附及層析洗脫分離純化，洗脫液醇沉得人參多糖。
7.按照權(quán)利要求1、2所述制備小容量人參四逆注射液，其特征在于取處方量四逆提取液與人參皂苷提取液制成混合備用液，加入處方量的甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，加注射用水至全量，調(diào)節(jié)pH，精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于5～20ml曲頸安瓿中，滅菌、檢漏、燈檢、印字，成品檢驗(yàn)，包裝即得。
8.按照權(quán)利要求1、3所述制備大容量人參四逆氯化鈉注射液，其特征在于取處方量四逆提取液與人參皂苷提取液制成混合備用液，加入處方量的甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，加入氯化鈉0.9％，加注射用水至全量，調(diào)節(jié)pH，精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于50～200ml輸液瓶中，滅菌、燈檢、貼標(biāo)，成品檢驗(yàn)、包裝即得。
9.按照權(quán)利要求1、4所述制備大容量人參四逆葡萄糖注射液，其特征在于取處方量四逆提取液與人參皂苷提取液制成混合備用液，加入處方量的甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，加入葡萄糖5％，加注射用水至全量，調(diào)節(jié)pH，精濾澄明，半成品檢驗(yàn)合格后，灌封于50～200ml輸液瓶中，滅菌、燈檢、貼標(biāo)、成品檢驗(yàn)、包裝即得。
10.按照權(quán)利要求1、5所述制備注射用人參四逆凍干粉針劑，其特征在于取處方量四逆提取液與人參皂苷提取液制成混合備用液，加入處方量的甘草酸、甘草次酸提取物備用液，再加入處方量人參多糖提取物備用液，加入處方量的甘露醇，加注謝用水至全量，調(diào)節(jié)pH，無菌條件下裝入已滅菌7～10ml西林瓶中，預(yù)凍，依次冷凍干燥，制成0.2～0.4g凍干粉針劑，封口，貼標(biāo)，成品檢驗(yàn)，包裝即得。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療厥脫證和胸痹心痛證新藥——人參四逆注射劑及制備方法；該藥含白附片或黑順片3～9g，干姜2～6g，紅參或人參1.5～4.5g，炙甘草3～9g，藥用輔料和注射用水組成；可制成小針劑、大輸液、凍干粉針劑；制備工藝有四逆湯提取物、紅參或人參提取物工藝和注射劑制備工藝；取四逆湯即附片，干姜，炙甘草藥材，依次水煮過濾，濾液用不同濃度乙醇沉淀，濃縮得四逆湯提取液，四逆湯濾渣依次加硫酸沉淀，干燥，丙酮萃取，過濾，干燥得甘草酸、甘草次酸；取紅參藥材經(jīng)乙醇回流，乙醚萃取，仲丁醇萃取，醇沉純化獲人參皂苷，紅參藥渣經(jīng)水提醇沉，聚酰胺吸附層析洗脫，洗脫液醇沉，沉淀干燥獲人參多糖；優(yōu)點(diǎn)是生物利用度高，血藥濃度高，藥效作用快而穩(wěn)定，抗各類休克、心絞痛、心梗、心衰高效速效、安全。
文檔編號(hào)A61P9/04GK1615956SQ20041004071
公開日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2004年9月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月20日
發(fā)明者羅明生, 高天惠 申請(qǐng)人:四川樂山三民藥物科技開發(fā)有限公司