專利名稱：氨基生物蝶呤衍生物及其藥學(xué)上的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到設(shè)計(jì)與合成具有控制體內(nèi)一氧化氮自由基(簡(jiǎn)寫(xiě)為NO)過(guò)多產(chǎn)生的氨基生物蝶呤衍生物，尤其是具有抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(簡(jiǎn)寫(xiě)為iNOS)作用的氨基生物蝶呤衍生物，用以制備具有預(yù)防和治療體內(nèi)一氧化氮水平升高而產(chǎn)生的各種疾病的藥物。
背景技術(shù)：
NO是一種低分子量疏水性的具有高度反應(yīng)活性的自由基，NO分子可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜，作用于細(xì)胞內(nèi)的靶分子，理論上講NO存在于細(xì)胞和組織內(nèi)任何部位，故能在體內(nèi)調(diào)控多種細(xì)胞功能，產(chǎn)生廣泛的生物效應(yīng)。作為化學(xué)介質(zhì)NO能調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)具有維持血管平滑肌緊張度，抑制血小板聚集和黏附，調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞的增生，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞對(duì)低密度脂蛋白的氧化修飾等功能。作為神經(jīng)遞質(zhì)或神經(jīng)調(diào)質(zhì)，NO參與信息傳遞包括在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中參與記憶的形成、進(jìn)行神經(jīng)與血管之間的協(xié)調(diào)、參與一些行為調(diào)節(jié)、維持與強(qiáng)化痛覺(jué)；作用于植物神經(jīng)參與前列腺素介導(dǎo)的交感神經(jīng)活化作用；在外周神經(jīng)系統(tǒng)具有特殊的神經(jīng)信使功能，包括調(diào)節(jié)胃腸道功能、調(diào)節(jié)呼吸功能、調(diào)節(jié)生殖泌尿功能、介導(dǎo)某些神經(jīng)元性血管舒張作用、抑制嗜鉻細(xì)胞釋放兒茶酚胺和作為胰島素分泌過(guò)程的重要調(diào)質(zhì)。NO作為病理生理性信使介導(dǎo)炎癥過(guò)程和免疫反應(yīng)的作用已被確立，一方面，NO和O2-，形成超氧負(fù)離子ONOO-，產(chǎn)生強(qiáng)大的細(xì)胞毒性；另一方面，NO上調(diào)使巨噬細(xì)胞釋放活性氧中間體和炎癥性細(xì)胞因子，對(duì)機(jī)體起到炎癥介導(dǎo)過(guò)程，又起到對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)分化調(diào)節(jié)作用。NO在炎癥和免疫反應(yīng)中起著關(guān)鍵的損傷和保護(hù)雙重作用。
NO水平升高而引起的疾病和病癥主要包括病理性血壓下降，例如敗血癥或出血性休克；用細(xì)胞毒素進(jìn)行腫瘤的化學(xué)治療、化學(xué)物質(zhì)或藥物以及慢性肝炎引發(fā)的多種肝損傷(即化學(xué)性，病毒性和免疫性肝損傷)，肝硬化或肝萎縮，和肝功能衰退；也包括進(jìn)行性炎癥，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和潰瘍性結(jié)腸炎，以及胰島素依賴型糖尿病和器官移植排斥反應(yīng)等。
另外，下列一些疾病也與誘導(dǎo)產(chǎn)生的NO水平升高有關(guān)，在心血管循環(huán)方面，如心肌梗塞損傷、病毒性感染引起的心肌炎；在神經(jīng)和中樞神經(jīng)方面，如病毒性神經(jīng)退化(變性)疾病，以及痛覺(jué)過(guò)敏、癲癇、偏頭痛等。總之，過(guò)量NO產(chǎn)生與許多疾病有關(guān)，尤其iNOS的激活產(chǎn)生過(guò)多的NO是重要的致病因素，因此，研制iNOS選擇抑制劑是十分必要的。
鑒于NO的廣泛的病理生理功能，其調(diào)控劑的研究已成為當(dāng)代生物醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究的熱點(diǎn)與前沿。內(nèi)源性的NO的來(lái)源是一氧化氮合成酶(NO Synthase，簡(jiǎn)寫(xiě)為NOS)，以L-精氨酸(L_Arginine，簡(jiǎn)寫(xiě)為L(zhǎng)-Arg)和分子氧為底物，催化L-Arg中的兩個(gè)等價(jià)胍基氮之一，經(jīng)氧化反應(yīng)生成的，同時(shí)生成L-瓜氨酸(L-Citrulline，簡(jiǎn)寫(xiě)為L(zhǎng)-Cit)。
至今三種結(jié)構(gòu)獨(dú)特的NOS異構(gòu)酶已被分離、克隆和確定(參見(jiàn)FoerstermannU，Gath I，et al，Biochem Pharmacol，1995，501321-1332)，根據(jù)這三種NOS亞型來(lái)源于細(xì)胞或組織的不同和其表達(dá)方式而分別給與不同的命名，如集中于血管內(nèi)皮細(xì)胞中的亞型稱為內(nèi)皮型NOS(endothelial NOS，eNOS或NOS-III)，存在神經(jīng)組織中的稱為神經(jīng)元型NOS(neuronal NOS，nNOS或NOS-I)，這兩種異構(gòu)酶在細(xì)胞處于生理狀態(tài)下即有表達(dá)，一般來(lái)說(shuō)，它們是通過(guò)機(jī)體對(duì)Ca2+水平的控制而維持在低水平的持續(xù)表達(dá)狀態(tài)，在NO保持在低濃度下發(fā)揮生理功能，故常又將eNO和nNOS合稱為結(jié)構(gòu)型NOS(Constitutive NOS，cNOS)。第三種異構(gòu)酶即所謂的誘導(dǎo)型NOS(inducible NOS，iNOS或NOS-II)，它在巨噬細(xì)胞和許多暴露在細(xì)胞素下的細(xì)胞中表達(dá)，并且在對(duì)細(xì)胞毒素物質(zhì)產(chǎn)生的早期免疫應(yīng)答反應(yīng)方面起到關(guān)鍵作用。一般認(rèn)為iNOS在生理作用下不表達(dá)，不依賴于體內(nèi)的Ca2+水平和調(diào)鈣蛋白，重要的是它通過(guò)誘導(dǎo)后被合成，如敗血性休克，感染性、免疫性疾病，以及細(xì)胞因子，內(nèi)毒素等許多因素均誘導(dǎo)iNOS大量合成。一旦NO大量的生成，就會(huì)產(chǎn)生廣泛的損害。
初期的NOS抑制劑主要是內(nèi)源性底物L(fēng)-Arg的類似物，即結(jié)構(gòu)修飾了的L-Arg。在生物化學(xué)水平上NOS的一些輔因子已經(jīng)鑒明，它們有還原性尼克酰胺腺苷二核苷酸磷酸(NADPH)、黃素腺嘌呤二核苷酸(FDA)、黃素單核苷酸(FMN)、血紅素和四氫生物蝶呤(BH4)。故除以上L-Arg型的NOS抑制劑外，NOS上其它的結(jié)合位置也可以作為藥理學(xué)上的靶點(diǎn)，如考慮干擾NOS還原酶區(qū)黃素輔酶的結(jié)合位點(diǎn)，有人開(kāi)發(fā)了二亞苯基碘鎓(DPI)(參見(jiàn)Griffith OW，Gross SS，InMethods in Nitric Oxide ResearchFeelisch M，Stamler JS，ed；JohnWiley & Sons；New York，1996，p187-208。)和一喹啉類化合物(Fujisawa PharmCo Ltd.，WO 970225，1977)；針對(duì)NOS氧化酶區(qū)，Griffith和Gross合成出不同類型的吲哚和咪唑作為配體結(jié)合到血紅素輔基上，來(lái)達(dá)到抑制NOS的目的。但是上面介紹的NOS抑制劑都缺乏相當(dāng)明顯的對(duì)iNOS異構(gòu)酶的抑制選擇性。
生物蝶呤(Biopterin，BP)四氫生物蝶呤(Tetrahydrobiopterin，BH4)BH4是被第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的，已經(jīng)被鑒定的最重要的NOS輔酶之一，經(jīng)iNOS和BH4共結(jié)晶的X光衍射結(jié)構(gòu)分析，可以看到在iNOS的氧化酶區(qū)有一個(gè)帶有血紅素、L-Arg、Phe470、Ser112和Trp457等氨基酸所形成供嵌入BH4的iNOS的蝶啶結(jié)合區(qū)，在這里BH4分子中的N-3、O4、N-5、C6側(cè)鏈和血紅素上的丙酸基、Arg375、Phe470、Ser112等由親水或/和親脂的相互作用(參見(jiàn)Crane BR.et al，Science，1998，2972121-2126)，BH4的輔助作用主要是在iNOS發(fā)生催化作用的第一步，即L-Arg轉(zhuǎn)變?yōu)镹ω-羥基-L-Arg(NHA)時(shí)，向血紅素的丙酰基提供一個(gè)電子和BH4的3，4-酰胺上的一個(gè)氫質(zhì)子(參見(jiàn)Crane BR，et al，Biochemistry，2000，394608-4621)。
雖然目前對(duì)BH4催化NOS的機(jī)制還沒(méi)有完全研究清楚，但是有關(guān)研究已表明NOS以二聚體的形式才能發(fā)揮作用，而B(niǎo)H4對(duì)iNOS二聚體組裝及穩(wěn)定性起關(guān)鍵作用(Alderton WK，Cooper CE，Knowles RG，et al.Nitric Oxide SynthaseStruture，F(xiàn)unction and Inhibition[J]，Biochem J，2001，357593-615)；BH4能催化促進(jìn)各種NOS達(dá)到最大催化活性，哺乳動(dòng)物生物體內(nèi)BH4生成越多，NOS的催化活性越高(參見(jiàn)Gross SS，Levi RJ，Biol Chem，1992，26725722)；細(xì)胞因子，內(nèi)毒素等也能誘導(dǎo)BH4的大量生成，其原因是在生物體內(nèi)有從頭合成和補(bǔ)救合成兩條途徑來(lái)合成BH4，而B(niǎo)H4的從頭合成的關(guān)鍵酶GTP環(huán)水解酶和iNOS一樣，其表達(dá)也受內(nèi)毒素或細(xì)胞因子誘導(dǎo)，從而會(huì)增加細(xì)胞中的BH4的產(chǎn)生和水平的提高。有關(guān)BH4的研究還表明BH4是芳香氨基酸羥化酶的輔因子，而這些氨基酸羥化的產(chǎn)物是人體合成神經(jīng)遞質(zhì)的原料，直接抑制體內(nèi)BH4的生物合成必然會(huì)引起嚴(yán)重的副反應(yīng)。然而，BH4對(duì)NOS的催化機(jī)理同催化芳香氨基酸羥化酶的機(jī)理是不同的(Thny B，Auerbach G，Blau N；Tetrahydrobiopterin biosynthesis，regeneration and functions，Biochem.J.2000，3471-16.)在蝶啶化合物中，蝶呤類化合物(4-羰基化合物)和大多數(shù)4-氨(胺)基化合物都是芳香氨基酸羥化酶的輔因子(Kappock TJ，Caradonna JP，Pterin-Dependent Amino Acid Hydroxylase，Chem.Rev.1996，96，2650-2756)，故氨基生物蝶呤類NOS抑制劑不會(huì)對(duì)芳香氨基酸羥化酶產(chǎn)生不良影響。另外研究表明，BH4對(duì)iNOS的催化活性遠(yuǎn)強(qiáng)于對(duì)另外兩種NOS催化活性(Gibraeil HD，Dittrich P，Saleh S，et al.Inhibition ofendotoxin-induced vascular hyporeactivity by 4-amino-tetrahydrobiopterin.British J.of Pharmacology，2000，1311757-1765)。因此，BH4與其iNOS的結(jié)合區(qū)可作為理想的選擇性藥理干預(yù)靶點(diǎn)，基于此思想，我們?cè)O(shè)計(jì)合成了一系列的氨基生物蝶呤類衍生物，結(jié)構(gòu)式用分子式(I)表示。這些氨基生物蝶呤類衍生物可和BH4競(jìng)爭(zhēng)地結(jié)合到iNOS中的BH4結(jié)合區(qū)，從而改變iNOS結(jié)構(gòu)或電學(xué)性質(zhì)，達(dá)到抑制iNOS活性的目的。經(jīng)過(guò)生物活性測(cè)試的結(jié)果表明，氨基生物蝶呤類衍生物具有抑制iNOS活性的作用，可用于處理iNOS體內(nèi)過(guò)量表達(dá)導(dǎo)致NO升高而引發(fā)的疾病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題就是設(shè)計(jì)與合成具有控制體內(nèi)一氧化氮自由基(簡(jiǎn)寫(xiě)為NO)過(guò)多產(chǎn)生的氨基生物蝶呤衍生物，尤其是具有抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(簡(jiǎn)寫(xiě)為iNOS)作用的氨基生物蝶呤衍生物，用以制備具有預(yù)防和治療體內(nèi)一氧化氮水平升高而產(chǎn)生的各種疾病的藥物。
以BH4為靶點(diǎn)，合成較好的iNOS的抑制劑必須滿足以下條件(1)抑制劑應(yīng)是BP類似物，這樣才有可能適應(yīng)iNOS中的BH4結(jié)合區(qū)結(jié)構(gòu)上的需求；(2)所合成的BH4衍生物可以是非還原型的BP類似物，并且在BP的4-位和6-位的1，2-二羥基丙基上有較多的修飾基團(tuán)的變化，其作用和BH4競(jìng)爭(zhēng)地與iNOS結(jié)合。根據(jù)這兩點(diǎn)，本發(fā)明提供了一般通式為(I)的氨基生物蝶呤類衍生物能成為iNOS抑制劑。
下述通式(I)表示氨基生物蝶呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其水合物 R1和R2相同或不同，各自獨(dú)立的表示有取代基、無(wú)取代基的C1-C6直鏈、支鏈烷基或芳基；芐基；R1、R2、R3和R4不同時(shí)為H；R1為H或甲基時(shí)，R2代表有取代基的或無(wú)取代基的三元～六元環(huán)烷基；-(CH2)nOH(n＝1～6)；-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu、-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu，Glu代表-NHCH(COOR5)CH2CH2COOR6，R5與R6相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基或乙基等；-C6H4COOR7R8、-C6H4CH2COOR7R8，R7和R8相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基、乙基等；或NR1R2代表哌啶基、哌嗪基甲、基哌嗪基或三元～六元脂肪環(huán)單或二取代氨基。
R3和R4相同或不同，各自獨(dú)立的表示H、C1-C6直鏈或支鏈烷基；各種取代的酰基R9CO-、R9C6H4(CH2)nCO-等(n＝0～6)，其中R9為C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；R10C6H4(CH2)nCH2-等(n＝0～5)，R10為相同或不同的C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；通式(I)表示的氨基生物蝶呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物，其中較好的是R1和R2相同，為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、芐基；R1代表H時(shí)，R2為甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、正丁基、異丁基、環(huán)丁基、環(huán)己基、芐基、-CH2CH2OH。
R3和R4相同或不同，各自獨(dú)立的表示H、C1-C6直鏈或支鏈烷基；各種取代的酰基如R9CO-、R9C6H4(CH2)nCO-等(n＝0～6)，其中R9為C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；R10C6H4(CH2)nCH2-等(n＝0～5)，R10為相同或不同的C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；或者NR1R2代表哌啶基、哌嗪基、甲基哌嗪基或三元～六元脂肪環(huán)胺基。
氨基生物蝶呤衍生物I或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物，其中更為合適的是R1和R2相同，為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、芐基；R1代表H時(shí)，R2為甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、正丁基、異丁基、環(huán)丁基、環(huán)己基、芐基、-CH2CH2OH；R3、R4代表H、甲酰基、乙?；⒈郊柞；?。
以上所述的烷基、烷氧基、和胺基中的烷基可以是直鏈的烷基，或是有側(cè)鏈的烷基，或是環(huán)狀烷基。在分子式中如果出現(xiàn)立體異構(gòu)體，則本發(fā)明中的化合物包括這些全部的互變異構(gòu)體和立體異構(gòu)體。
由前述通式(I)表示的氨基生物蝶呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物在制備抑制誘導(dǎo)性一氧化氮合酶藥物中的應(yīng)用。
前述通式(I)表示的氨基生物蝶呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物在制備抑制誘導(dǎo)性一氧化氮合酶藥物中的較具體的應(yīng)用是制備在敗血性和(或)出血性休克，或用細(xì)胞毒素進(jìn)行腫瘤化學(xué)治療，肝硬化或肝萎縮和(或)肝功能衰退時(shí)所引起的血壓下降或(和)止血障礙藥物。更進(jìn)一步的應(yīng)用，是制備預(yù)防和治療炎癥疾病藥物；是制備預(yù)防和治療異體器官和組織移植的排斥反應(yīng)藥物以及胰島素依賴型糖尿病藥物；是制備預(yù)防和治療細(xì)胞毒素進(jìn)行腫瘤的化學(xué)治療、化學(xué)物質(zhì)或藥物以及慢性肝炎引發(fā)的多種肝損傷、肝功能衰退以及預(yù)防和治療心肌梗塞損傷、病毒性心肌炎藥物。所述的應(yīng)用還包括，是制備預(yù)防和治療病毒性神經(jīng)退化、變化疾病及痛覺(jué)過(guò)敏、癲癇、偏頭痛藥物。
藥物組合物，其中含有治療有效量的通式(I)氨基生物蝶呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其水合物，并含有常規(guī)藥用載體。
本發(fā)明所用的通式I表示的化合物可以它們的中性形式，也可以和無(wú)機(jī)酸或者有機(jī)酸加成形成相應(yīng)的鹽使用，對(duì)藥物中所能用的酸包括有如鹽酸、溴化氫、萘二磺酸(1，5)、磷酸、硝酸、硫酸、草酸、酒石酸、乳酸、水楊酸、苯甲酸、甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、丁二酸、庚二酸、己二酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、氨基磺酸、苯丙酸、葡糖酸、抗壞血酸、異煙酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸、檸檬酸，以及氨基酸等。通式II表示的化合物可和多摩爾的酸加成形成鹽，這些多摩爾的酸可以是單一的也可以是組合的，這主要根據(jù)需要用相應(yīng)的溶劑或稀釋劑的情況來(lái)決定。這些鹽也可以它們的水合物形式存在。這些加成的鹽可通過(guò)陰離子交換而去除。
本發(fā)明所涉及的氨基生物蝶呤衍生物和它們相應(yīng)的鹽類可和適合輔料(包括相應(yīng)的醫(yī)藥上準(zhǔn)許應(yīng)用的賦形劑、粘合劑、緩釋劑、穩(wěn)定劑、香料、調(diào)味劑和色素等)做成片劑或膠囊口服，也可做成相應(yīng)的針劑用于臨床。
對(duì)本發(fā)明中的通式I氨基生物蝶呤衍生物抑制iNOS活性的測(cè)定，根據(jù)已知的測(cè)定方法(參見(jiàn)鐘慈聲，孫安陽(yáng) 主編一氧化氮的生物醫(yī)學(xué)，上海上海醫(yī)科大學(xué)出版社，1997，p.361-363，381-385)進(jìn)行。
本發(fā)明通式I所表示的化合物是本發(fā)明首次合成的新化合物，均經(jīng)過(guò)各種分析方法進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，包括1H-NMR、MS、和元素分析。所有氨基生物蝶呤衍生物都是按照或者參照已發(fā)表的Viscontini方法進(jìn)行合成(參見(jiàn)Schircks B，Bieri JH，Viscontoni M；Helv Chim Acta，1985，681639-1643)。
通式I化合物的合成有以下步驟(1)中間體2，5，6-三氨基-4-取代胺嘧啶(A)的合成
式中NR1R2＝N(C2H5)2；HNCH(CH3)2；N(CH2CH2)2NCH3；HN(CH2)5；HNCH(CH2)2；HNCH(CH2)5；HNCH2CH2CH2CH3；N(CH2CH2CH2CH3)2；HNCH2CH2OH；HNCH2C(CH3)3等(與權(quán)力要求1中一致)。
首先將對(duì)氯苯胺重氮化，然后和2，6-二氨基-4-氯嘧啶結(jié)合生成2，6-二氨基-4-氯-5-對(duì)氯苯偶氮嘧啶，接著用取代胺取代氯，所得的化合物用鋅粉在酸性條件下還原偶氮基得化合物2，5，6-三氨基-4-取代胺嘧啶(嘧啶衍生物的合成方法參考Froehlich L，Kotsonis P，Traub H，et al，J Med Chem，1999，424108-4121。)(2)中間體2，3，4-三乙酰氧基-5-脫氧阿拉伯苯腙(B)的合成 出于簡(jiǎn)化制備操作的目的，采用了“一鍋煮”的方法首先，將L-鼠李糖與乙硫醇在低溫下縮合成縮硫醛，以有機(jī)酸(甲酸，乙酸等)為介質(zhì)用雙氧水氧化分子中的硫原子，形成二乙磺酰基L-鼠李糖，此化合物在pH＝9～10的水溶液中脫去一分子的CH2(SO2CH2CH3)2生成5-脫氧阿拉伯糖④。將5-脫氧阿拉伯糖與苯肼反應(yīng)后再經(jīng)過(guò)乙酰化即得(B)。
表 設(shè)計(jì)合成的氨基生物蝶呤衍生物編號(hào)和對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu) (3)目的化合物的合成
將前面制得的中間體(A)和(B)同醋酸鈉，保險(xiǎn)粉在醇水溶液中縮合后，經(jīng)用I2的醇溶液進(jìn)行芳構(gòu)化，得產(chǎn)品11，12，進(jìn)一步皂化水解得產(chǎn)品1-10。因部分中間體易于被氧化，所以反應(yīng)過(guò)程中必要的步驟需在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行。
具體實(shí)施例方式
1.合成中間體(A)按照文獻(xiàn)(Froehlich L，Kotsonis P，Traub H，et al，J Med Chem，1999，424108-4121)方法制備。
中間體(B)的制備(主要參見(jiàn)專利EP A1 0153095和文獻(xiàn)Schircks B，Bieri JHand Viscontoni M；Helv Chim Acta，1985，681639-1643.)L-鼠李糖二乙基縮硫醛②取L-鼠李糖一水合物40克加入到40mL 37％的濃鹽酸中，0℃下快速攪拌中再加入60mL乙硫醇，約15分鐘后有大量固體生成，產(chǎn)物略帶粉色。繼續(xù)攪拌15分鐘后加入50mL水?dāng)嚢瑁^(guò)濾水洗，五氧化二磷真空干燥，得白色固體②39克，m.p183-184℃，收率66.8％。
1，1-二乙磺?；?L-鼠李糖③取L-鼠李糖二乙基縮硫醛②2.7克(0.01mol)溶于10mL乙酸中冷卻到0℃，控溫在0℃以下滴加5.1克30％H2O2(0.08mol)，加畢維持溫度1小時(shí)后升到室溫下反應(yīng)48小時(shí)。反應(yīng)完畢減壓蒸去乙酸和過(guò)量的雙氧水，得無(wú)色或淺黃色粘稠液③，用于下一步。
5-脫氧-L-阿拉伯糖④將上一步制得的產(chǎn)品③溶于20mL水中，用濃氨水調(diào)pH＝9.5，于室溫下攪拌24小時(shí)，有白色固體[脫下來(lái)的CH2(SO2CH2CH3)2]生成，過(guò)濾，用20mL氯仿萃取12小時(shí)，將水層減壓蒸去水得黃色油狀物，即產(chǎn)品④，產(chǎn)率為65％(以②計(jì)算)。
5-脫氧-L-阿拉伯糖苯腙⑤將上步制得的產(chǎn)品④(0.0075mol)溶于20mL甲醇中。取苯肼0.89克(0.00825mol)加入到④的甲醇液中，再加入一滴冰醋酸，氮?dú)獗Ｗo(hù)下于室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)。真空濃縮蒸干后得橙紅色粘稠液。將此粘稠液用乙醚洗兩次(10mL/次)得橙色固化物，將此固體物溶于50mL乙酸乙酯中，用水洗兩次(50mL/次)，乙酸乙酯液用無(wú)水硫酸鈉干燥后，蒸干得橙色固體⑤1.91克(含有溶劑乙酸乙酯，到此總收率按②算為45％～50％)。
2，3，4-三乙酰氧基-5-脫氧-L-阿拉伯糖苯腙(B)將上步制得的產(chǎn)品1.91克⑤溶于10mL吡啶中，0℃以下滴加10mL乙酸酐，加畢氮?dú)獗Ｗo(hù)下保溫?cái)嚢?0分鐘后，升至室溫反應(yīng)5小時(shí)，減壓濃縮后，低溫下溶于50mL甲醇中得產(chǎn)品(B)的甲醇溶液，備用。
2-氨基-4-二乙氨基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(1)的“一鍋法”制備第一步縮合配制1.97克(0.024mol)NaAc，1.0克NaS2O4的40mL水溶液和1.67克(0.006mol)2，6-二氨基-4-二乙基胺基嘧啶鹽酸鹽，1.0克NaS2O4的60毫升水溶液，并先后加入上步制得的2，3，4-三乙酰氧基-5-脫氧-L-阿拉伯糖苯腙(按0.005mol計(jì))甲醇液中，攪拌，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于35-40℃反應(yīng)36小時(shí)。
第二步芳構(gòu)化方法1室溫下滴加I2/MeOH溶液，如淀粉碘化鉀試紙檢測(cè)碘過(guò)量，室溫下反應(yīng)3小時(shí)后，加入少量NaS2O4除去過(guò)量的碘，減壓蒸干，再加入50mL甲醇溶解，濾去不溶物，減壓蒸干后200～300目硅膠后柱層析(氯仿∶甲醇＝20∶1)。收集含產(chǎn)品部分。
方法2室溫下攪拌并通入氧氣24-48小時(shí)，芳構(gòu)化完全后減壓蒸干，再加入50mL甲醇溶解，濾去不溶物，減壓蒸干后200～300目硅膠后柱層析(氯仿∶甲醇＝20∶1)。收集含產(chǎn)品部分。
第三步分離將芳構(gòu)化所得的產(chǎn)品經(jīng)硅膠(100～200目)柱層析(氯仿∶甲醇＝40∶1，20∶1)，得淡黃色固體，丙酮重結(jié)晶得淡黃色固體2-氨基-4-二乙基氨基-6-〔(1S，2R)-二乙酰氧基〕蝶啶(11)0.15克，總產(chǎn)率4.0％(按二乙磺酰基L-鼠李糖②計(jì)算)，m.p165-167℃。ESI-MS377.4[M+H]+，753.5[2M+1]+(C17H24N6O4，Mr＝376.4)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.18(d，J＝6.54Hz，3H，3’-CH3)；1.19(bm，3H，N4-CH2CH3)；1.28(bm，3H，N4-CH2CH3)；1.97(s，3H，CH3-(OAc-2’))；2.28(s，3H，CH3-(OAc-1’))；3.83(bm，2H，N4-CH2CH3)；4.15～4.33(bm，2H，N4-CH2CH3)；5.33(m，1H，CH-2’)；5.96(d，J＝4.33Hz，1H，CH-1’)；8.86(s，1H，CH-7)。
Anal Calcd forC17H24N6O4·H2O(394.4)C51.77，H6.65，N21.30；FoundC52.21，H6.65，N20.75。
第四步水解方法1將含產(chǎn)品11部分，溶于20mL甲醇和20mL濃氨水的混合液中于50℃下反應(yīng)3-5小時(shí)，反應(yīng)完畢減壓蒸干，用30mL水溶解，用濃鹽酸調(diào)pH＝1，濾去不溶物，用稀NaOH/H2O調(diào)pH＝8減壓蒸干，硅膠(200～300目)柱層析(氯仿∶甲醇＝20∶1～10∶1)。得黃色固體，用甲醇-丙酮重結(jié)晶得淡黃色粉末狀產(chǎn)品2-氨基-4-二乙氨基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(1)，m.p154-156℃。
方法2將含產(chǎn)品11部分，溶于40mL濃氨水中于50℃下反應(yīng)1-3小時(shí)，反應(yīng)完畢減壓蒸去氨氣，濾去不溶物，處理后硅膠(200～300目)柱層析(氯仿∶甲醇＝10∶1)。得淡黃色固體，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色固體粉末2-氨基-4-二乙氨基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(1)0.5克(0.00152mol)，m.p154-156℃?？偸章蕿?5.3％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)；ESI-MS293.2[M+H]+(C13H20N6O2，M＝292.2)；1H-NMR(AV-300，D6-DMSO)δ1.05(d，J＝6.31Hz，3H，CH3-3’)；1.24[t，6H，N4-(CH2CH3)2]；3.98-3.88[bm，4H，N4-(CH2CH3)2]；3.94(m，1H，CH-2’)；4.38(d，J＝5.48Hz，1H，CH-1’)；8.86(s，1H，CH-7)。Anal Calcd forC13H20N6O2·HCl(358.81)C，43.51，H，5.90 N，23.41；FoundC，43.23 H，5.71 N，22.822-氨基-4-異丙基氨基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(2)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色固體粉末(2)0.13克，總產(chǎn)率4.7％(按二乙磺酰基L-鼠李糖②計(jì)算)，m.p185-189℃；ESI-MS279.1[M+H]+，301.1[M+Na]+(C12H18N6O2，M＝278.1)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.13(d，J＝6.30Hz，3H，CH3-3’)；1.25[d，J＝6.6Hz，6H，N4-CH(CH3)2]；4.43-4.35[m，2H，CH-1’，N4-CH(CH3)2]；3.94(m，1H，CH-2’)；4.39(d，1H，CH-1’)；8.68(s，1H，CH-7)。
Anal Calcd forC12H18N6O2·HCl(314.70)C，45.84 H，6.09 N，26.71；FoundC，45.33 H，6.51 N，26.532-氨基-4-(4-甲基)哌嗪胺基-6〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(3)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體0.15克，產(chǎn)率4.7％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p189-192℃；ESI-MS320.1[M+H]+，342.2[M+Na]+(C14H21N7O2，M＝319.1)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.08(d，J＝6.27Hz，3H，CH3-3’)；2.27(s，3H，NCH3)；2.54～2.49[m，4H，(-CH2)2NCH3]；3.90(bs，1H，CH-2’)；4.37(bs，1H，CH-1’)；4.30[bs，4H，N4(CH2-)2]；4.61(bs，1H，OH-2’)；5.50(bd，1H，OH-1’)；6.62(bs，2H，N2H2)；8.70(s，1H，CH-7)。
Anal Calcd forC14H21N7O2·0.5HCl·0.5CH3OH(353.62)C49.25，H6.70，N27.73；FoundC49.52，H6.70，N27.45.
2-氨基-4-吡嗪氨基-6-〔(1S，2R)-二乙酰氧基〕蝶啶(12)方法參見(jiàn)(11)的制備，將芳香化所得的產(chǎn)品經(jīng)硅膠(100～200目)柱層析(氯仿∶甲醇＝40∶1～20∶1)，得淡黃色粉末固體，丙酮重結(jié)晶得產(chǎn)品(12_1)0.15克，產(chǎn)率3.9％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p170-172℃；ESI-MS389.1[M+H]+，411.1[M+Na]+(C18H24N6O4，M＝388.1)；1H-NMR(BrukerAV-300，D6-DMSO)δ1.17(d，J＝6.60Hz，3H，CH3-3’)，1.64[bm，6H，N4(CH2)2(CH2)3]；4.20[bs，4H，N4(CH2)2(CH2)3]，1.95[s，3H，CH3-(OAc-2’)]；2.12[s，3H，CH3-(OAc-1’)]；5.31[m，1H，CH-2’]；5.81[d，J＝4.5Hz，1H，CH-1’]；6.72(b，0.3H，N2H2)；8.65(s，1H，CH-7)Anal Calcd forC18H24N6O4·H2O(406.44)C，53.19 H，6.45 N，20.68；FoundC，53.46 H，6.28 N，21.212-氨基-4-吡嗪胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(4)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體0.52克，產(chǎn)率16.4％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p160-161℃；
ESI-MS305.1[M+H]+，327.1[M+Na]+(C14H20N7O2，M＝304.1)；1H-NMR(BrukerAV-300，D6-DMSO)δ1.06(d，J＝6.30Hz，3H，CH3-3’)；1.68[s，6H，N4(CH2-)2(-CH2)3]；3.91(m，1H，CH-2’)；4.41(d，J＝4.50Hz，1H，CH-1’)；4.31[bs，4H，N4(CH2-)2]；4.67(bs，1H，OH-2’)；5.65(d，1H，OH-1’)；7.0-7.4(bs，2H，N2H2)；8.72(s，1H，CH-7)。Anal Calcd forC14H20N7O2·2HCl(377.46)C，44.55 H，5.87 N，22.26；FoundC，43.69 H，5.84 N，21.912-氨基-4-環(huán)己基胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(5)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.27克，產(chǎn)率8.5％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p120-125℃；ESI-MS319.1[M+H]+(C15H22N6O2，M＝318.1)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.14(d，J＝6.18Hz，3H，CH3-3’)；1.17-2.07[m，10H，N4-CH(-CH2-)5]；3.81(m，1H，CH-2’)；4.45(m，1H，CH-1’)；4.13(m，1H，N4-CH)；4.69(s，1H，OH-2’)；5.54(d，1H，OH-1’)；7.0-7.7(bs，2H，N2H2)；8.54(bd，1H，N4H)；8.75(s，1H，CH-7)。
Anal Calcd forC15H22N6O2·2.5HCl·0.5C2H5OH(432.56)C，44.43 H，6.39N，19.42；FoundC，44.16 H，5.62 N，19.232-氨基-4-環(huán)丙胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(6)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.35克，產(chǎn)率12.7％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p198-200℃(分解)；ESI-MS277.1[M+H]+(C12H16N6O2，M＝276.1)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.13(d，J＝6.22Hz，3H，CH3-3’)；0.73-0.82[m，4H，N4-CH(-CH2)2]；3.04(m，1H，N4-CH)；3.78(m，1H，CH-2’)；4.41(d，J＝6.47Hz，1H，CH-1’)；4.67(bs，1H，OH-2’)；5.43(bs，1H，OH-1’)；6.84(bs，2H，N2H2)；8.29(bs，1H，N4H)；8.71(s，1H，CH-7)。
Anal Calcd forC12H16N6O2·0.5HCl·CH3OH(326.57)C，47.81 H，6.32 N，25.73；FoundC，47.87 H，5.85 N，25.982-氨基-4-正丁基胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(7)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.15克，產(chǎn)率5.1％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p178-187℃(分解)；ESI-MS293.2[M+H]+，315.2[M+Na]+(C13H20N6O2，M＝292.2)；1H-NMR(Bruker AV-500，D6-DMSO)δ1.12(d，J＝6.25Hz，3H，CH3-3’)；0.93(t，J＝7.44Hz，3H，N4-CH2CH2CH2CH3)；1.35(m，J＝7.32Hz，2H，N4-CH2CH2CH2CH3)；1.61(m，J＝7.41Hz，2H，N4-CH2CH2CH2CH3)；3.48(m，2H，N4-CH2CH2CH2CH3)；3.86(m，1H，CH-2’)；4.40(d，1H，CH-1’)；4.63(d，J＝5.39Hz，1H，OH-2’)；5.42(s，1H，OH-1’)；6.62(bs，2H，N2H2)；8.14(bs，1H，N4H)；8.70(s，1H，CH-7)。Anal Calcd forC13H20N6O2·0.5H2O(301.35)C51.77，H7.03，N27.89；FoundC51.85，H7.17，N27.30。
2-氨基-4-二正丁基胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(8)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.31克，產(chǎn)率8.6％(按二乙磺酰基L-鼠李糖②計(jì)算)，m.p178-185℃(分解)；ESI-MS349.1[M+H]+，371.2[M+Na]+(C13H20N6O2M＝348.1)；1H-NMR(Bruker AV-500，D6-DMSO)δ1.07(d，J＝6.28Hz，3H，CH3-3’)；0.95[t，J＝7.37Hz，6H，N4(CH2CH2CH2CH3)2]；1.37[m，J＝7.37Hz，4H，N4(CH2CH2CH2CH3)2]；1.70[m，J＝7.37Hz，4H，N4(CH2CH2CH2CH3)2]；3.75-4.25[bm，5H，N4(CH2-)2，CH-2’]；3.86(m，1H，CH-2’)；4.43(d，J＝5.35Hz，1H，CH-1’)；4.67(bs，1H，OH-2’)；5.58(bs，1H，OH-1’)；6.83(bs，2H，N2H2)；8.72(s，1H，CH-7)；Anal Calcd forC17H28N6O2·1.75H2O(348.45)C，53.74 H，8.36 N，22.12；FoundC，54.12 H，8.36 N，21.632-氨基-4-(2-羥基乙基)胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶(9)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.23克，產(chǎn)率8.2％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p215-218℃(分解)。
ESI-MS281.0[M+H]+，303.1[M+Na]+(C11H16N6O3，M＝280)1H-NMR(Bruker AV-500，D6-DMSO)δ1.12(d，J＝6.24Hz，3H，CH3-3’)；3.65-3.58[m，4H，N4-CH2CH2OH]；3.89(m，1H，CH-2’)；4.47(d，1H，CH-1’)；4.72(bs，1H，OH-2’)；4.91[bs，1H，N4CH2CH2OH]；5.63(bd，1H，OH-1’)；7.25-7.75(bs，2H，N2H2)；8.81(s，1H，N4H)；8.79(s，1H，CH-7)；Anal Calcd forC11H16N6O3·HCl(316.64)C，41.69 H，5.41 N，26.54；FoundC，41.81 H，5.63 N，26.72
2-氨基-4-異丁氨基胺基-6-〔(1S，2R)-二羥基丙基〕蝶啶鹽酸鹽(10)方法同于(1)的制備，用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得黃色粉末固體產(chǎn)品0.39克，產(chǎn)率12.0％(按二乙磺?；鵏-鼠李糖②計(jì)算)，m.p275-280℃(分解)；ESI-MS293.2[M+H]+(C13H20N6O2，M＝292.2)；1H-NMR(Bruker AV-300，D6-DMSO)δ1.12(d，J＝6.24Hz，3H，CH3-3’)；0.93[d，6H，N4CH(CH3)2]；2.08(m，1H，N4CH2CH)；3.39-3.44(m，2H，N4CH2-)；3.92(m，1H，CH-2’)；4.54(d，J＝5.79Hz，1H，CH-1’)；4.79(bs，1H，OH-2’)；5.77(bs，1H，OH-1’)；7.89(bs，1H，N2H)；8.73(bs，1H，N2H)；8.85(s，1H，CH-7)；9.71(t，1H，N4H·HCl)；13.09(bs，1H，N4H·HCl)；Anal Calcd forC13H20N6O2·HCl·1.5H2O(355.2)C43.92，H6.81，N23.65；FoundC43.80，H6.73，N23.84。
表 設(shè)計(jì)合成目標(biāo)化合物的編號(hào)和對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu) 2.誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶抑制劑活性的研究
2.1樣品與試劑氨基生物蝶呤衍生物本發(fā)明中合成的14個(gè)化合物，其中13個(gè)進(jìn)行了iNOS的抑制活性研究，化合物121沒(méi)有進(jìn)行活性測(cè)試?；钚詼y(cè)定是以水作溶劑進(jìn)行的，將藥品配制成DMSO溶液，按需要量取一定量的用水進(jìn)行稀釋，或加入到測(cè)定溶液中。
誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶Rcombinnation from E.Col是Cayman Chenical公司產(chǎn)品。
四氫生物蝶呤(Tetrohtdro-L-biopterin)二鹽酸鹽，純度＞99％，由CaymanChenical公司提供。
一氧化氮合成酶試劑盒由南京建成生物工程研究所提供提供，批號(hào)20040511。
2.2.主要儀器HH-4電熱恒溫水浴箱常州國(guó)華電器有限公司。
BS110S分析天平北京塞多利天平有限公司。
52紫外光柵分光光度計(jì)上海分析儀器總廠。
2.3.藥物體外抑制誘導(dǎo)型一氧化氮百分率的測(cè)定試驗(yàn)方法在一氧化氮試劑盒的1號(hào)試劑中不加入四氫生物喋呤(BH4)，按試劑盒方法分別在試管中加入試劑1、試劑2、試劑3、iNOS樣品、BH4、受試藥物后混勻，37攝氏度水浴下準(zhǔn)確反應(yīng)20分鐘，加入試劑4終止反應(yīng)，再加入終止液后混勻，530nm處，1cm光徑，蒸餾水調(diào)零，比色測(cè)定吸光值。
測(cè)定BH4的飽和濃度按照試劑盒方法按步驟加入試劑，各個(gè)試管中分別加入不同濃度的BH4，測(cè)定各管吸光值，并計(jì)算其飽和濃度。
3.2.4.測(cè)定氨基生物蝶呤(ABP)及13個(gè)氨基生物蝶呤衍生物的iNOS活性抑制百分率根據(jù)文獻(xiàn)，配制藥物濃度為BH4飽和濃度的48倍，同樣按試劑盒的方法測(cè)定吸光值，并計(jì)算出抑制百分率。
抑制百分率＝(標(biāo)準(zhǔn)管吸光值-測(cè)定管吸光值)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光值-空白管吸光值)×100％3.2.5.氨基生物蝶呤衍生物IC50(半數(shù)抑制濃度)的測(cè)定根據(jù)前一次試驗(yàn)BH4飽和濃度測(cè)定結(jié)果，以及藥物的抑制百分率達(dá)100％的藥物濃度，我們推薦以下幾個(gè)劑量，分別為32倍、24倍、18倍、13.5倍。實(shí)驗(yàn)中每個(gè)試管中加入的誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)和BH4的濃度是固定的。測(cè)得各管在530nm處的吸光度，用直線回歸的方法計(jì)算出各自的半數(shù)抑制濃度。
表 氨基生物蝶呤衍生物對(duì)iNOS的抑制效果

注(1)表中iNOS活性數(shù)據(jù)測(cè)定時(shí)的抑制劑濃度均為110μmmol/L、BH4的飽和濃度2.3μM。Vmax為沒(méi)有抑制劑時(shí)在的BH4飽和濃度作用下的iNOS活性(2)ND表示沒(méi)有進(jìn)行測(cè)定。(3)ABP為4-氨基生物蝶呤。
從活性測(cè)定結(jié)果可以看出，設(shè)計(jì)合成的化合物多數(shù)具有iNOS抑制效果，而12號(hào)和4號(hào)化合物同屬類似結(jié)構(gòu)，具有增加iNOS活性的作用，設(shè)計(jì)的化合物具有調(diào)節(jié)iNOS活性作用。
權(quán)利要求
1.下述通式(I)表示的化合物 R1和R2相同或不同，各自獨(dú)立的表示有取代基、無(wú)取代基的C1-C6直鏈、支鏈烷基或芳基；芐基；R1、R2、R3和R4不同時(shí)為H；R1為H或甲基時(shí)，R2代表有取代基的或無(wú)取代基的三元～六元環(huán)烷基；-(CH2)nOH(n＝1～6)；-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu、-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu，Glu代表-NHCH(COOR5)CH2CH2COOR6，R5與R6相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基或乙基等；-C6H4COOR7R8、-C6H4CH2COOR7R8，R7和R8相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基、乙基等；或NR1R2代表哌啶基、哌嗪基甲、基哌嗪基或三元～六元脂肪環(huán)單或二取代氨基。R3和R4相同或不同，各自獨(dú)立的表示H、C1-C6直鏈或支鏈烷基；各種取代的?；鏡9CO-、R9C6H4(CH2)nCO-等(n＝0～6)，其中R9為C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；R10C6H4(CH2)nCH2-等(n＝0～5)，R10為相同或不同的C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；
2.如權(quán)利要求1表示的化合物，其中R1和R2相同或不同，各自獨(dú)立的表示有取代基、無(wú)取代基的C1-C6直鏈、支鏈烷基或芳基；芐基；R1、R2、R3和R4不同時(shí)為H；R1為H或甲基時(shí)，R2代表有取代基的或無(wú)取代基的三元～六元環(huán)烷基；-(CH2)nOH，n＝1～6；-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu、-C6H4COGlu、-C6H4CH2COGlu，Glu代表-NHCH(COOR5)CH2CH2COOR6，R5與R6相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基或乙基等；-C6H4COOR7R8、-C6H4CH2COOR7R8，R7和R8相同或不同，各自獨(dú)立地表示H、甲基、乙基等；或NR1R2代表哌啶基、哌嗪基甲、基哌嗪基或三元～六元脂肪環(huán)單或二取代氨基。R3和R4相同或不同，各自獨(dú)立的表示H、C1-C6直鏈或支鏈烷基；各種取代的酰基如R9CO-、R9C6H4(CH2)nCO-等，其中R9為C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基，(n＝0～6)；R10C6H4(CH2)nCH2-等，R10為相同或不同的C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基，(n＝0～5)；
3.權(quán)利要求1或2表示的化合物，其中R1和R2相同或不同，各自獨(dú)立的表示有取代基、無(wú)取代基的C1-C6直鏈、支鏈烷基或芳基；R3和R4相同，表示H、C1-C6直鏈或支鏈烷基；各種取代的酰基如R5CO-、R5C6H4(CH2)nCO-(n＝0～6)等，其中R5為C1-C6直鏈或支鏈烷基、烷氧基；
4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備誘導(dǎo)性一氧化氮合成酶藥物中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備在敗血性和(或)出血性休克，或用細(xì)胞毒素進(jìn)行腫瘤化學(xué)治療和肝硬化或肝萎縮和(或)肝功能衰退時(shí)所引起的血壓下降或(和)止血障礙藥物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備預(yù)防和治療炎癥疾病藥物中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備預(yù)防和治療異體器官和組織移植的排斥反應(yīng)藥物以及胰島素依賴型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備預(yù)防和治療細(xì)胞毒素進(jìn)行腫瘤的化學(xué)治療、化學(xué)物質(zhì)或藥物以及慢性肝炎引發(fā)的多種肝損傷、肝功能衰退以及預(yù)防和治療心肌梗塞損傷、病毒性心肌炎藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物在制備預(yù)防和治療病毒性神經(jīng)退化、變化疾病及痛覺(jué)過(guò)敏、癲癇、偏頭痛藥物中的應(yīng)用。
10.一種藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)的化合物并含有常規(guī)藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明設(shè)計(jì)并合成了一種具有控制體內(nèi)一氧化氮自由基(簡(jiǎn)寫(xiě)為NO)過(guò)多產(chǎn)生的氨基生物蝶呤類衍生物，它具有通式(I)所述的化學(xué)結(jié)構(gòu)。本發(fā)明具有選擇性抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶的作用，可用以制備具有預(yù)防和治療體內(nèi)一氧化氮水平升高而產(chǎn)生的各種疾病的藥物。
文檔編號(hào)A61P29/00GK1583745SQ20041004487
公開(kāi)日2005年2月23日 申請(qǐng)日期2004年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月26日
發(fā)明者姚其正, 姜力勛, 石靜波, 馮明聲, 郭平 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)