專利名稱：含有類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種能夠降低血糖、降低血脂，降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)的活性，有效地治療糖尿病、并且可以預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化和延緩衰老的組合物，具體涉及含有類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物。
背景技術(shù)：
所說的類黃酮物質(zhì)及其衍生物，是指2個(gè)苯環(huán)通過碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物，目前已經(jīng)分離的有4000余種，按結(jié)構(gòu)可分為13類，包括黃酮類、耳酮類、異黃酮、黃酮醇、異黃酮醇、黃烷酮、異黃烷酮、查兒酮、口山酮等。天然狀態(tài)的類黃銅物質(zhì)多為上述母體化合物的衍生物，常見的衍生物有甲基化、亞硫化等，天然游離的類黃酮物質(zhì)不多，大多數(shù)糖基化后以苷類形式存在。這里所指的類黃酮物質(zhì)及其衍生物是來源于植物和食物中的一類物質(zhì)，例如蔬菜、水果、谷類、豆類、堅(jiān)果、茶葉和紅酒等。為了更好的說明，表1列舉了主要類黃酮物質(zhì)的代表物和食物或植物分布，但不限于下述內(nèi)容。
表1主要類黃酮物質(zhì)的代表物和食物或植物分布

所說的肌醇磷酸包括肌醇六磷酸，D-1、2、4、5、6-五磷酸肌醇，D-1、2、3、4、5-五磷酸肌醇，1、2、5、6-四磷酸肌醇，1、2、3和1、2、6-三磷酸肌醇，1、2-二磷酸肌醇，1和2-磷酸肌醇的其中一種或多種混合物，所述的肌醇，系環(huán)己六醇族的六羥基環(huán)己烷，即環(huán)己六醇，是肌醇磷酸水解產(chǎn)物。這兩種化學(xué)以肌醇六磷酸鈣鎂脂的形式存在于谷物的種子、胚芽和表皮中，如稻殼、玉米、麥夫皮、米糠、向日葵、棉籽、蓖麻籽(去殼)、大豆、油菜籽、花生等。肌醇磷酸和肌醇，可以從上述物質(zhì)提取得到。
大多數(shù)類黃酮物質(zhì)在體外均具有較強(qiáng)的清除各種自由基的作用，包括不同自由基發(fā)生體系產(chǎn)生的超氧陰離子、羥自由基、脂質(zhì)過氧化作用等，類黃酮物質(zhì)是一種很強(qiáng)的O2捕捉劑和O2促滅劑。
類黃酮物質(zhì)清除自由基的能力與其結(jié)構(gòu)有關(guān)，特別與其含羥基的數(shù)量有關(guān)，其中3’和4’位上的羥基對(duì)于清除自由基的作用十分重，50H＞40H＞30H，其結(jié)構(gòu)中吡喃環(huán)上C2-3位間雙鍵和B環(huán)兩個(gè)鄰位羥基基因是作用所必須的?？傸S酮(TFA)是抗衰老清除自由基的主要活性成分，可以直接清除超氧陰離子自由基和羥基自由基，阻斷紫外線和H2O2誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對(duì)H2O2和γ射線所致的細(xì)胞DNA鏈斷裂有防護(hù)作用；黃酮醇清除羥基自由基的能力與異黃酮類似，黃烷酮清除羥基自由基的能力明顯大于異黃酮。它們清除50％的羥基自由基的濃度分別為黃酮醇7.8μmol/L，黃烷酮1.0μmol/L。
大量的研究表明，某些類黃酮物質(zhì)對(duì)許多酶活性具有顯著的作用，它們可以抑制一些氧化酶的活性。如，對(duì)脂氧合酶，環(huán)氧化酶等。
高血脂與動(dòng)脈粥樣硬化、心腦血管病的發(fā)生有密切關(guān)系。類黃酮物質(zhì)能夠明顯降低血液中血脂水平，用總黃酮(19mg/ml)給大鼠腹腔注射5ml/kgd，40d后，血清甘油三脂含量明顯降低(P＜0.01)，并且無肝腫大和過氧化物酶增生等不良反應(yīng)。黃酮類化合物含有25種微量元素，其中的Mn能改善動(dòng)脈粥樣硬化患者的脂質(zhì)代謝，可以抑制低密度脂蛋白(LDL)的氧化，有去脂作用。類黃酮物質(zhì)是血小板活化因子(PAF)的專屬性強(qiáng)拮抗劑，對(duì)PAF造成的損傷能加以改善。PAF可以通過引起血小板聚集、血管內(nèi)皮損傷、微血栓形成以及脂質(zhì)代謝紊亂等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，運(yùn)用銀杏黃酮組的血栓重量明顯減輕。有研究表明類黃酮物質(zhì)對(duì)缺血性腦血管病有較好的預(yù)防作用，對(duì)大鼠急性缺血后不同時(shí)間不同劑量進(jìn)行灌注，測定大鼠的EEG電位幅度，0.02g/kg的黃酮醇組10min即恢復(fù)為正常的93.3％，30min完全恢復(fù)正常(P＜0.01)，顯示有明顯的恢復(fù)作用。對(duì)小鼠缺血后存活時(shí)間的影響，對(duì)照組存活時(shí)間為3.15±1.82min；3g/kg和4g/kg的存活時(shí)間分別為7.74±4.07min和8.9±3.72min，顯示可以明顯延長小鼠的存活時(shí)間(P＜0.01)，證明黃酮醇有抗缺血、缺氧的作用。
此外，類黃酮物質(zhì)還可用于糖尿病的預(yù)防和治療。國外專利98814241.4，公開了一種作為降血糖劑的生物類黃酮，國內(nèi)專利00116167.9，公開了一種苦參黃酮在制備降血糖藥劑中的應(yīng)用。
肌醇或肌醇磷酸屬親脂肪性的維生素B族中的一種，是生物體中不可缺少的活性成分。這兩種化學(xué)物質(zhì)分別以肌醇六磷酸鈣鎂脂的形式存在于谷物的種子、胚芽和表皮中，如稻殼、玉米、麥夫皮、米糠、向日葵、棉籽、蓖麻籽(去殼)、大豆、油菜籽、花生等。在空氣中很穩(wěn)定，易溶于水，屬多羥基化合物，具有多羥基化合物所特有的化學(xué)性質(zhì)，只是因其具有穩(wěn)定的環(huán)己烷環(huán)存在，能抵抗多種化學(xué)試劑的作用，因而其化學(xué)性質(zhì)比糖類物質(zhì)更加穩(wěn)定，正是由于它們具有特殊的結(jié)構(gòu)，從而決定了它們具有獨(dú)特的生理、藥理功能和化學(xué)性質(zhì)，在醫(yī)藥、化工、化妝品、食品等許多領(lǐng)域有著極為廣泛的應(yīng)用。
肌醇或肌醇磷酸和膽堿結(jié)合后，參與脂肪和膽固醇的代謝，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已確認(rèn)肌醇或肌醇磷酸可使肝臟總脂肪含量和中性脂肪量明顯低下，在臨床實(shí)踐中，成功應(yīng)用肌醇磷酸治療高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化；與膽堿一樣，肌醇也是供給腦細(xì)胞營養(yǎng)的重要物質(zhì)，是生物細(xì)胞的第二信息系統(tǒng)，國外研究證明了以(1，2，6)三磷酸肌醇為主的三磷酸肌醇對(duì)多種疾病(如心腦血管疾病、糖尿病及其綜合癥、關(guān)節(jié)炎和前列腺肥大等)具有預(yù)防、減輕和治療效果，它可以消除多種藥物所產(chǎn)生的副作用，對(duì)人和動(dòng)物的多種組織損傷具有治療效果。
在藥品和食品工業(yè)領(lǐng)域，肌醇和肌醇磷酸作為一種營養(yǎng)性成分被廣泛應(yīng)用。國外專利99803418.5，公開了一種用于治療以高胰島素血癥、雄激素過多癥、高脂血癥和/或排卵停止為特征的代謝性疾病的含D-平性-肌醇的組合物；國外專利99807686.4，公開了一種用于改善胰島素敏感性和葡萄糖代謝的含有D-手性肌醇的藥物組合物。這些專利揭示了肌醇磷酸和肌醇在糖尿病預(yù)防和治療中的應(yīng)用。
糖尿病(diabetes mellitus)是一組常見的代謝內(nèi)分泌病，分原發(fā)性及繼發(fā)性兩類。前者占絕大多數(shù)，有遺傳傾向，其基本病理生理為絕對(duì)或相對(duì)胰島素分泌不足和胰高血糖素活性增高所引起的代謝紊亂，包括糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水及電解質(zhì)等，嚴(yán)重時(shí)常導(dǎo)致酸堿平衡失常；其特征為高血糖、糖尿、葡萄糖耐量減低及胰島素釋放試驗(yàn)異常。類黃酮物質(zhì)可能是通過抑制α-葡萄糖苷酶的作用而發(fā)揮降糖作用，其機(jī)理是競爭抑制小腸上皮刷狀緣葡萄糖淀粉酶、蔗糖酶及胰腺α-淀粉酶，阻止1，4-糖苷的水解，因此口服后蔗糖和麥芽糖的消化延遲，水解產(chǎn)生葡萄糖的速度減慢，從而達(dá)到控制血糖的目的。肌醇磷酸和肌醇可能是通過改善體內(nèi)對(duì)胰島素的敏感性和葡萄糖的代謝方式，從而緩解異常的葡萄糖耐受情況。
上述所披露的分別以類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇為主要成分的食品和藥物均忽略了這兩種成分組合應(yīng)用后，比較各成分單獨(dú)使用時(shí)用量減少的情況下，呈現(xiàn)的相輔相依的協(xié)同和增強(qiáng)作用，尤其是在降低血脂和血糖、降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)活性的卓越表現(xiàn)。因此提供一種能夠發(fā)揮協(xié)同和增強(qiáng)效應(yīng)的類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物是十分必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之一是提供一種類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物，以滿足人們的需要。
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之二是公開所述組合物在制備降低血液中血脂含量，有效地預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的食品和/或藥品中的應(yīng)用；本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之三是公開所述組合物在制備降低血糖、改善糖耐量異常、預(yù)防和治療糖尿病的食品和/或藥品中的應(yīng)用；本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之四是公開上述組合物在制備降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)以及延緩衰老的的食品和/或藥品中的應(yīng)用；本發(fā)明的組合物的質(zhì)量份數(shù)包括類黃酮物質(zhì)0.001～10000.0份肌醇磷酸(和/或肌醇) 0.001～10000.0份較優(yōu)選含量為類黃酮物質(zhì)0.1～1000.0份肌醇磷酸(和/或肌醇) 1.0～6000.0份更優(yōu)選含量為類黃酮物質(zhì)1.0～100.0份肌醇磷酸(和/或肌醇) 10.0～2000.0份。
本發(fā)明的組合物可采用常規(guī)的物理混合方法進(jìn)行制備。
本發(fā)明的組合物可以制備降低血液中血脂含量，有效地預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的食品和/或藥品；本發(fā)明的組合物可以制備降低血糖、改善糖耐量異常、預(yù)防和治療糖尿病的食品和/或藥品；本發(fā)明的組合物可以制備降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)以及延緩衰老的的食品和/或藥品；
該組合物中還可以含有維生素類、輔酶類、無機(jī)物、抗氧化劑、或甜味劑、調(diào)味劑、著色劑等添加劑；該組合物中還可以含有食品和藥品工業(yè)領(lǐng)域的專業(yè)人員熟知的“可接受的載體”，例如無毒的固體、半固體或液體填料、稀釋劑、包封材料、或用于藥品的任何類型的配方助劑，并采用本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員熟知的方法制成適宜不同給藥途徑的劑型，例如適合服用的劑型，片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑等，適合胃腸外給藥途徑的劑型，注射劑、靜脈輸注劑、脂質(zhì)體稀釋組合物等劑型。
應(yīng)理解根據(jù)在實(shí)際工藝過程中，以前述載體等會(huì)導(dǎo)致活性成分形成鹽。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，以下將用該組合物的安全毒理試驗(yàn)、與其單一成分的多種功效比較試驗(yàn)及結(jié)果來說明本發(fā)明的內(nèi)容。
本發(fā)明的組合物是按照“良好藥物生產(chǎn)規(guī)范(Good Medical Practical，GMP)”標(biāo)準(zhǔn)的車間和工藝程序生產(chǎn)的，組合物的各有效成分(類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇混合物)分別以冷凍干燥劑的形式按一定比例與食品和藥品工業(yè)領(lǐng)域的專業(yè)人員熟知的添加劑和賦形劑混合，按不同的生產(chǎn)工藝制成片劑、膠囊劑、口服液和注射劑。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1安全性毒理實(shí)驗(yàn)60只22月齡雄性Wistar大鼠(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供)，體重(497±28)g，平均分成4組，按實(shí)驗(yàn)鼠每公斤體重(/kg)計(jì)量，給予有效的含量計(jì)算，其有效成分的含量分別為類黃酮物質(zhì)10mg/kg，肌醇磷酸和肌醇混合物1mg/kg；類黃酮物質(zhì)100mg/kg，肌醇磷酸和肌醇混合物10mg/kg；類黃酮物質(zhì)1000mg/kg，肌醇磷酸和肌醇混合物100mg/kg，分給藥組和對(duì)照組(給予等量的生理鹽水)，連續(xù)喂養(yǎng)60天后停藥30天。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行動(dòng)物生長發(fā)育情況檢查，肝腎功能檢查，血常規(guī)檢查，臟器指數(shù)和內(nèi)臟組織病理切片檢查。
結(jié)果給藥組大鼠無死亡，比較各組體重情況、血液學(xué)和生化檢測、臟器重量和組織學(xué)檢查均正常，結(jié)果顯示服用組與對(duì)照組未見顯著差異。
上述結(jié)果說明，類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇組成的組合物無毒性，服用安全。
實(shí)施例2與單一成分比較，本發(fā)明的組合物在降血糖和改善糖耐量異常上的功效按照《中藥新藥藥理研究指導(dǎo)原則》對(duì)類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物進(jìn)行規(guī)范的實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)四氧吡啶和鏈尿佐菌素所致的糖尿病動(dòng)物模型及正常家兔糖耐量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行觀察。
組別A組合物2ml口服液，含類黃酮50mg，肌醇磷酸和肌醇混合物10mg；B類黃酮質(zhì)2ml口服液，含類黃酮質(zhì)100mg；C肌醇磷酸和肌醇混合物2ml口服液，含肌醇磷酸和肌醇混合物20mg；D對(duì)照組給予降糖藥物(拜糖平)治療。
結(jié)果見表2、表3和表4。
表2與單一成分比較本發(fā)明組合物對(duì)四氧吡啶所致的家兔糖尿病模型的影響

*P＜0.01表示用藥后血糖值有顯著差異；A組在給藥后第6天血糖值明顯下降，與造模3天后測定值相比，P＜0.01，有顯著差異；與D對(duì)照組比較，無差異，說明組合物的藥理作用在該模型實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出與降糖藥(拜糖平)同樣的作用；B和C組在給藥后的第12天血糖值下降，與造模3天后測定值相比，P＜0.05，有差異；A組和B、C組比較在給藥后第6天，P＜0.05，有差異；表3與單一成分比較本發(fā)明組合物對(duì)鏈尿佐菌素所致的家兔糖尿病模型的影響


*P＜0.01表示用藥后血糖值有顯著差異；A組在給藥后第6天血糖值明顯下降，與造模3天后測定值相比，P＜0.01，有顯著差異；與D對(duì)照組比較，無差異，說明組合物的藥理作用在該模型實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出與降糖藥(拜糖平)同樣的作用；B和C組在給藥后的第9天血糖值下降，與造模3天后測定值相比，P＜0.05，有差異；A組和B、C組比較在給藥后第6天，P＜0.05，有差異；表4與單一成分比較本發(fā)明組合物對(duì)四氧吡啶性糖尿病家兔糖耐量的影響

A組在60min后血糖下降明顯，在120min后血糖基本恢復(fù)正常，其血糖下降幅度與B組和C組相比，P＜0.05，有差異。
結(jié)果分析上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物對(duì)四氧吡啶和鏈尿佐菌素所致的家兔血糖升高和糖耐量異常有改善作用，在各組分用量減少的情況下，發(fā)揮的作用比其任何單一成分更有效。
實(shí)施例3與單一成分比較，本發(fā)明的組合物在治療糖尿病功效方面的臨床表現(xiàn)。
參照《新藥臨床研究指導(dǎo)原則》對(duì)類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物進(jìn)行臨床研究。根據(jù)WHO 1985年確定的II型糖尿病判定標(biāo)準(zhǔn)選取360例患者，分給藥組3組(A、B、C組)各100例和對(duì)照組(D組)60例，給藥組按一日三次，一次1粒的計(jì)量給予相對(duì)的試藥，對(duì)照D組給予降糖藥(拜糖平)，療程堅(jiān)持1個(gè)月后，觀察空腹血糖(FBG)，餐后2小時(shí)血糖(PBG)和臨床療效評(píng)定。同時(shí)進(jìn)行常規(guī)血、尿、肝功能、腎功能和異常體癥等檢查以判斷藥物的不良反應(yīng)。
臨床療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
顯效臨床癥狀明顯改善或消失，F(xiàn)BG＜7.2mmol/L，PBG≤8.3mmol/L，或血糖值比測定前下降30％；有效臨床癥狀有改善，F(xiàn)BG≤8.25mmol/L，PBG≤8.3～10.0mmol/L，或血糖值比測定前下降(10～29)％；無效臨床癥狀沒有改善，所測定的數(shù)值未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。
受試樣品A組合物含類黃酮100mg，肌醇磷酸和肌醇混合物20mg；B類黃酮質(zhì)含類黃酮質(zhì)200mg；C肌醇磷酸和肌醇混合物含肌醇磷酸和肌醇混合物40mg；D對(duì)照組給予降糖藥物(拜糖平)治療。
結(jié)果見表5和表6。
表5與單一成分比較本發(fā)明組合物對(duì)糖尿病FBG和PBG的影響

*治療前后，F(xiàn)BG和PBG P＜0.01，有顯著差異；A和B、C組比較P＜0.05，有差異；表6與單一成分比較本發(fā)明組合物治療糖尿病的臨床療效

*治療前后，P＜0.01，臨床癥狀有顯著改善，；A和B、C組比較P＜0.05，有差異；常規(guī)血、尿、肝功能、腎功能和異常體癥等檢查各組均沒有發(fā)現(xiàn)異常情況，也沒有發(fā)現(xiàn)明顯的藥物不良反應(yīng)。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物能安全地用于糖尿病的治療，在各組分用量減少的情況下，發(fā)揮的作用比其任何單一成分更有效。
實(shí)施例4與單一成分比較，本發(fā)明的組合物在降血脂和預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化上的表現(xiàn)。
依據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢測方法》，即在實(shí)驗(yàn)的環(huán)境下用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大耳白兔(成年，體重2.7±3.6Kg，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供)10天，然后取血樣，測定TC、TG、HDL、LDL觀察指標(biāo)正常值，根據(jù)血脂水平對(duì)實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行隨機(jī)分組，每組21只。自正式實(shí)驗(yàn)起，A、B、C、D組除了正常飼料喂養(yǎng)外，每餐還添加高脂飼料(膽固醇和大豆油1.5g，蛋黃5g)，連續(xù)進(jìn)行28天，同時(shí)隨餐服用配方制劑，對(duì)照組則隨餐服用同體積的生理鹽水。28天后，采血檢測各項(xiàng)血脂指標(biāo)，包括血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)結(jié)果見表7；同時(shí)經(jīng)右股淺動(dòng)脈，將3.5F球囊擴(kuò)張導(dǎo)管插至腹主動(dòng)脈20cm，球囊充液膨脹至2個(gè)大氣壓緩慢拉出，反復(fù)3次，用免疫組化的方法通過電鏡觀察動(dòng)脈硬化灶，硬化灶發(fā)生比例見表8。
受試樣品A組合物2ml口服液，含類黃酮物質(zhì)10mg，肌醇磷酸和肌醇混合物10mg；B黃酮類化合物2ml口服液，含類黃酮物質(zhì)20mg；C肌醇磷酸和肌醇混合物2ml口服液，含肌醇磷酸和肌醇混合物20mg；D對(duì)照組喂養(yǎng)同體積的生理鹽水。
表7各項(xiàng)血脂測定的平均結(jié)果

**與高脂對(duì)照組比較P＜0.01有顯著差異；*與高脂對(duì)照組比較P＜0.05有差異；A組與高脂對(duì)照組比較對(duì)TC、TG、HDL和LDL，P＜0.01有顯著差異；與B組和C組比較，P＜0.05有差異。
B組與高脂對(duì)照組比較對(duì)TC、HDL和LDL，P＜0.01有顯著差異；
C組與高脂對(duì)照組比較對(duì)HDL，P＜0.01有顯著差異；表8電鏡觀察動(dòng)脈硬化灶發(fā)生率

**與對(duì)照D組比較P＜0.01有顯著差異；*與對(duì)照D組比較P＜0.05有差異；A組與B組和C組比較，P＜0.05有差異，B組和C組比較，無差異。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物具有降低血脂的功效，并能有效地用于預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，在各組分用量減少的情況下，發(fā)揮的作用比其任何單一成分更有效。
實(shí)施例5與單一成分比較，本發(fā)明的組合物在降低脂質(zhì)過氧化、升高SOD，延緩衰老上的表現(xiàn)。
依據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢測方法》，選用體重為23.8±4.9g的昆明種雌性小鼠60只，四川省生物制品研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。將昆明種小鼠進(jìn)行一周適應(yīng)性喂養(yǎng)后，隨機(jī)平均分為5個(gè)組A、B、C組為給藥組，D衰老模型組、E正常對(duì)照組。小鼠每天按40mg/kg的劑量頸背皮下注射0.2％D-半乳糖溶液，與此同時(shí)實(shí)驗(yàn)組分別灌胃相應(yīng)劑量的不同受試物，而衰老模型組則灌胃蒸餾水；正常對(duì)照組每天頸背皮下注射滅菌生理鹽水0.5ml，并灌胃蒸餾水。連續(xù)40天后，宰殺動(dòng)物取血利用試劑盒測定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，結(jié)果見表9。
依據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢測方法》，進(jìn)行延緩衰老的證明實(shí)驗(yàn)—果蠅生存試驗(yàn)。收集10h內(nèi)孵出的成蠅(采用野生型黑腹果蠅，由四川大學(xué)生物系提供)，乙醚麻醉后按雌雄稱重，并分裝于是3.0cm×13cm培養(yǎng)指管內(nèi)。果蠅于25℃±2℃暗溫箱內(nèi)飼養(yǎng)，每4d更換飼料一次(基礎(chǔ)飼料玉米粉12g、蔗糖9g、瓊脂1.5g、酵母粉1g、苯甲酸0.2g、水110ml)。果蠅孵出兩周后開始喂食受試物，并每天定時(shí)記錄果蠅死亡數(shù)，直至全部死亡。統(tǒng)計(jì)分析，果蠅平均壽命和最高壽命的比較采用t檢驗(yàn)半數(shù)死亡時(shí)間(中位數(shù))的比較采用X2檢驗(yàn)，結(jié)果見表10。
受試樣品A組合物2ml口服液，含類黃酮物質(zhì)10mg，肌醇磷酸和肌醇混合物10mg；B黃酮類化合物2ml口服液，含類黃酮物質(zhì)20mg；C肌醇磷酸和肌醇混合物2ml口服液，含肌醇磷酸和肌醇混合物20mg；D對(duì)照組喂養(yǎng)同體積的生理鹽水。
表9對(duì)小鼠血清MDA、SOD活性的影響(X±S)

(1)衰老模型D組與正常E對(duì)照組相比SOD活性顯著降低(P＜0.05)、MDA儲(chǔ)量顯著增高(P＜0.01)，見表二。說明動(dòng)物亞急性衰老模型已建立。
(2)A組血清MDA含量與B、C組比較有差異(P＜0.05)，與正常對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
(3)A組血清SOD活性與B、C組比較有差異(P＜0.05)，與正常對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
表10對(duì)果蠅壽命的影響(X±S)

A組雄性和雌性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高壽命均大于對(duì)照D組，與B和C組比較P＜0.05，有差異。
B和C組與對(duì)照D組比較，雄性和雌性果蠅的平均壽命P＜0.05，有差異，而其他兩項(xiàng)指標(biāo)無差異。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物具有降低脂質(zhì)過氧化、升高SOD活性的功能，果蠅生存試驗(yàn)結(jié)果表明，該組合物使雄性和雌性果蠅的半數(shù)死亡時(shí)間、平均壽命和最高壽命均明顯延長，說明該組合物具有延緩衰老的功能，在各組分用量減少的情況下，發(fā)揮的作用比其任何單一成分更有效。
實(shí)施例6～10本發(fā)明的組合物的舉例說明，非限定如下所述的實(shí)施例實(shí)施例6類黃酮物質(zhì)混合物 100.0mg肌醇磷酸混合物 200.0mg其中肌醇六磷酸100mg、肌醇五磷酸50mg、肌醇四磷酸50mg實(shí)施例7大豆異黃酮 50.0mg肌醇六磷酸 300.0mg實(shí)施例8二氫黃酮類 30.0mg黃烷醇類 50.0mg肌醇 200.0mg實(shí)施例9類黃酮物質(zhì)混合物 200.0mg肌醇六磷酸 100.0mg肌醇 300.0mg實(shí)施例10二氫黃酮類 50.0mg黃烷醇類 25.0mg大豆異黃酮 25.0mg肌醇 150.0mg
肌醇六磷酸 150.0mg實(shí)施例11片劑處方實(shí)施例6的組合物類黃酮物質(zhì)混合物100.0g肌醇六磷酸 100.0g肌醇五磷酸 50.0g肌醇四磷酸 50.0g淀粉50.0g采用常規(guī)的方法，制備成為片劑，每片250mg，其中，含有類黃酮物質(zhì)混合物100.0mg，肌醇磷酸混合物200.0mg。
實(shí)施例12膠囊劑實(shí)施例7的組合物大豆異黃酮 50.0mg肌醇六磷酸 300.0mg淀粉150.0g采用常規(guī)的方法，制備成為膠囊劑，膠囊凈重500mg，其中，大豆異黃酮50.0mg，肌醇六磷酸300.0mg。
權(quán)利要求
1.含有類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物，其特征在于，質(zhì)量份數(shù)包括類黃酮物質(zhì)0.001～10000.0份肌醇磷酸和/或肌醇 0.001～10000.0份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，質(zhì)量份數(shù)包括類黃酮物質(zhì)0.1～1000.0份肌醇磷酸和/或肌醇 1.0～6000.0份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，質(zhì)量份數(shù)包括類黃酮物質(zhì)1.0～100.0份肌醇磷酸和/或肌醇 10.0～2000.0份。
4.由權(quán)利要求1、2或3所述的組合物與醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體組成的組合物。
5.權(quán)利要求1、2或3所述的組合物在制備降低血液中血脂含量，有效地預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的食品和/或藥品中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1、2或3所述的組合物在制備降低血糖、改善糖耐量異常、預(yù)防和治療糖尿病的食品和/或藥品中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求1、2或3所述的組合物在制備降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)以及延緩衰老的的食品和/或藥品中的應(yīng)用。
全文摘要
含有類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和/或肌醇的組合物，其特征在于，質(zhì)量份數(shù)包括類黃酮物質(zhì)0.001～10000.0份，肌醇磷酸和/或肌醇0.001～10000.0份。類黃酮物質(zhì)和肌醇磷酸和肌醇組成的組合物對(duì)在各組分用量減少的情況下，發(fā)揮的作用比其任何單一成分更有效?？梢杂糜谥委熀皖A(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，改善糖耐量異常、預(yù)防和治療糖尿病，以及降低脂質(zhì)過氧化和升高超氧化物歧化酶(SOD)以及延緩衰老。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1736262SQ200410053830
公開日2006年2月22日 申請(qǐng)日期2004年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月18日
發(fā)明者杜士明 申請(qǐng)人:杜士明