專利名稱：一種抗癌藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物組合物。
背景技術(shù)：
腫瘤已經(jīng)成為嚴重威脅人類生存健康的重大疾病之一，其發(fā)病率及死亡率均呈上升趨勢。
雙嘧達莫(Dipyridamle，DP)是非硝酸酯冠狀動脈擴張劑，主要用于冠狀動脈供血不足，或心絞痛及心肌梗塞的預(yù)防和治療，分子式為C24H40N8O4，分子量為504.65，結(jié)構(gòu)式如式(I)所示，已載入中國藥典(2000年版)、美國藥典(XXI-XXIII)。但目前臨床已趨不用，其原因是本品主要擴張冠狀動脈的小阻力血管，而在心肌缺血區(qū)內(nèi)的血管已代償性地擴張，以維持其最大的血液供應(yīng)，因此，應(yīng)用本品不僅不能擴張缺血區(qū)的血管，改善其供血情況，反而會使缺血區(qū)的血液流向非缺血區(qū)，即發(fā)生所謂的“冠狀動脈偷竊”現(xiàn)象。DP毒性很小，小鼠口服DP的LD50為2.15g/kg，為低毒級藥物。
β-胡蘿卜素(Carotene，βC)，分子式為C4O5H6，分子量為536.88，結(jié)構(gòu)式如式(II)所示。βC作為色素添加劑載入《食品添加劑手冊》，作為色素添加劑、營養(yǎng)增補劑廣泛用于食品(食用油脂、人造奶油、起酥油、糕點、面包等)、化妝品及醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。β-胡蘿卜素(βC)與維生素A(VA)化學(xué)結(jié)構(gòu)極為相近，βC進入體內(nèi)分解為二個分子VA，故稱βC為VA源。流行病學(xué)調(diào)查顯示，腫瘤患者血中βC水平顯著低于健康人群或非腫瘤疾病人群血中βC水平。其中肺癌、胃癌、淋巴癌、腸癌、食管癌患者βC缺乏最為嚴重。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種毒性小、療效高的抗癌藥物組合物。
本發(fā)明所提供的抗癌藥物組合物命名為得帕卡洛(Dipycaro)，含有雙嘧達莫和β-胡蘿卜素。
其中，所述雙嘧達莫與β-胡蘿卜素重量份數(shù)比為1∶0.125-0.2。
需要的時候，在上述藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等，必要時還可以加入香味劑、甜味劑等。
本發(fā)明的藥物組合物主要通過口服給藥，可以制成片劑、膠囊、粉劑、顆粒、錠劑、栓劑，或口服液等多種藥物形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。
本發(fā)明的藥物組合物常用劑型為膠囊，所用藥劑輔料通常為淀粉、糊精、β-CD及微晶纖維素等，淀粉與雙嘧達莫的重量份數(shù)比一般為7-10∶1；糊精與雙嘧達莫的重量份數(shù)比一般為0.1-0.3∶1；β-CD與雙嘧達莫的重量份數(shù)比一般為0.1-0.3∶1。
本發(fā)明藥物組合物一般采用雙鋁包裝，每粒重約225mg，有效劑量為0.5g/人·天。
本發(fā)明與目前抗癌藥如化療藥等相比，具有以下特點與優(yōu)勢(1)毒性小，無明顯的不良反應(yīng)，是目前抗癌藥所少見的；(2)療效高，對人肺癌、人胃癌及人卵巢癌的抑瘤率達40％-96％；(3)具有廣譜抗癌活性，對多種惡性腫瘤均有不同程度的抑制作用；(4)可與抗代謝化療藥合用，達到增效、減毒的效果；(5)主要用藥途徑為口服膠囊制劑，用藥方便、安全，可在家庭及旅游途中用藥。


圖1為得帕卡洛膠囊制備工藝流程圖具體實施方式
實施例1、輔料、制粒條件及包裝對得帕卡洛(Dipycaro)的影響1、輔料篩選文獻報導(dǎo)β-胡蘿卜素遇氧極易被氧化，因此要在冰箱(4℃)中密閉存放；DP性質(zhì)較穩(wěn)定，但在高熱情況下也容易分解。得帕卡洛中兩種成分用量不大，大部分需要用輔料充填。
發(fā)明人選用了β-CD、淀粉、糊精、微晶纖維素分別與主藥混合，在強光(4900LX)、高溫(60℃)、高濕(濕度92％)的情況下，考察輔料對主藥的影響。
步驟如下稱取DP2.5g、10％β-胡蘿卜素干粉5g、輔料17.5g，共25g一份，混均，分成3份，分別放入光照箱(4900LX)、恒溫箱(60℃)和含有飽和KNO3液的干燥器中(濕度92％)進行加速破壞，同時放入DP和βC的原料，測定含量，結(jié)果如表1所示。
表1.輔料對主藥的影響

通過加速破壞性試驗，可看到這些輔料對藥物本身的變化無明顯的保護作用，尤其是βC加熱三天即分解80％以上，所以要使藥物穩(wěn)定只能從避光、隔絕空氣、低溫等方式來解決。
2、干壓制粒條件的確定因濕法制粒要經(jīng)過長時間的高溫干燥，對βC的影響很大，一般選用干法直接壓制成粒。本發(fā)明選擇β-CD和淀粉進行壓粒比較。
影響干壓顆粒質(zhì)量的因素很多，主要有輔料的種類、含水量和工作壓力等。淀粉和β-CD兩種輔料在不同的含水量條件下、不同壓力下制得顆粒，對其顆粒的密度、流動性等進行測試，并以水為介質(zhì)測定顆粒的崩解度，結(jié)果如表2所示。
表2.壓力與水分對顆粒的影響

結(jié)果表明，β-CD壓塑性好，在同樣的壓力和水分的情況下顆粒比較致密；淀粉在壓力50Kg/cm2，水分在5％-6％情況下，密度與流動性都較好，而兩者所得顆粒其崩解無明顯差異。
3、藥品包裝對藥品穩(wěn)定性的影響由于βC和DP對熱、空氣、光都較敏感，密閉、隔絕空氣和光是保護成分的很重要的因素，采用雙鋁包裝，可起到避光和隔絕空氣的作用。
對β-CD為輔料干法制粒和淀粉為輔料干法制粒裝膠囊，采用塑鋁膜(連云港中金包裝有限公司生產(chǎn)S1塑鋁膜)包裝成袋，放入溫度60℃與溫度40℃，濕度92％的兩種環(huán)境中進行加速破壞實驗，結(jié)果如表3所示。
表3.包裝材料對藥品穩(wěn)定性的影響

結(jié)果表明，包裝材料可大大降低了藥物的降解速度，起到了很好的保護作用。而以β-CD與淀粉為填充劑對藥物的影響無明顯差異。因β-CD價格貴，因此選用淀粉為其輔料。
實施例2、得帕卡洛(Dipycaro)膠囊的制備膠囊配方DP 25g10％βC 50g淀粉 150g制成1000粒膠囊，每粒225mg。
膠囊制備工藝流程圖如圖1所示，具體包括如下步驟(1)將淀粉于80℃-90℃干燥至含水量3％-5％備用；(2)取上述原料藥與干燥后的淀粉混合，充分攪拌，至混合藥粉為橙紅色，取出；(3)將上述混勻的藥粉進行干法制成粒；(4)膠囊填充，拋光；(5)雙鋁外包裝即得。
實施例3、得帕卡洛(Dipycaro)的抗腫瘤作用
1、體外細胞實驗選用人肺癌細胞(A549)、人肝癌細胞(BEL-7402)、人胃癌細胞(BCK-823)和人白血病(HL60)四種細胞，進行單方、復(fù)方及陽性對照藥(喃氟啶)分別對上述瘤株的試驗。
以0.1N鹽酸(HCl)配制雙嘧達莫，以20％二甲基亞砜(DMSO)配制β-胡蘿卜素，以生理鹽水配制得帕卡洛以及喃氟啶溶液。用RPMI-1640培養(yǎng)基在5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)37℃下靜置條件培養(yǎng)人肺癌細胞、人肝癌細胞及人胃癌細胞，培養(yǎng)24-36h時間后接種到細胞培養(yǎng)板中，向細胞培養(yǎng)板中加入上述溶液，使培養(yǎng)系中DP濃度分別為20、40、80μg/ml及βC濃度為4、8、16μg/ml，復(fù)方藥物為24、48、96μg/ml，陽性對照喃氟啶的濃度為0.3、0.6、1.2μg/ml，空白對照為0(不加藥)，繼續(xù)培養(yǎng)7-8天，顯微鏡下計數(shù)細胞集落(大于50個細胞的細胞團)數(shù)量，計算集落形成率，表示藥物對細胞生長的抑制程度。結(jié)果見表4及表5所示。
表4.單藥與復(fù)方對三種瘤株的抑制率(％)

表5.復(fù)方制劑比單方制劑的抑制率提高百分數(shù)

結(jié)果表明，在試驗濃度范圍內(nèi)，復(fù)方制劑得帕卡洛比單方制劑抑瘤率均有不同程度的提高對肺腺癌(A549)比DP提高7.36％-20.88％，比βC提高11.05％-15.54％，對胃癌(BCK-823)比DP提高5.67％-33.62％，比βC提高10.45％-33.80％，對肝癌(BEL-7402)比DP提高5.41％-14.08％，比βC提高4.82％-11.38％。復(fù)方制劑對三種腫瘤細胞株的抑制率以高低順序排列為肺腺癌、胃癌和肝癌，該藥對腫瘤抑制率在相同劑量時高于或相當于陽性對照藥(喃氟啶)的抑制率，表明該藥對多種腫瘤細胞有明顯的抑制作用，對HL60細胞也同樣有明顯的抑制作用。復(fù)方制劑抑制率高于單藥，表明雙嘧達莫和β-胡蘿卜素組成復(fù)方后抗癌作用均優(yōu)于單方。
2、動物實驗選用Balb/c-nu裸小鼠，每批70只，共三批，同批試驗同一性別，體重20g左右，無菌條件下飼養(yǎng)，分別采用皮下注射方式注射人肺癌(A549)、人胃癌(BCK-823)和人卵巢癌(A2780)三種瘤細胞株，細胞數(shù)106-107/只，7-8天長出腫瘤塊，選擇腫瘤塊直徑＞1cm的小鼠進行試驗。
以雙嘧達莫、β-胡蘿卜素和得帕卡洛為藥用實驗組，陽性對照為喃氟啶，陰性對照為不給藥物。小鼠每日口服給藥一次，單藥DP用量為200、80及20mg/kg，復(fù)方制劑用量分別240、96及24mg/kg，陽性對照喃氟啶用量為10.0mg/kg，連服一個月，觀察動物體重、食欲及一般活動情況，活殺后觀察瘤體重量與體積，以及各主要臟器(心、肝、腎、脾、胃)重量及臟器指數(shù)與組織病理學(xué)的變化。結(jié)果如表6及表7所示。
表6.單藥DP與復(fù)方制劑對腫瘤的抑瘤作用

表7.復(fù)方制劑比單方DP的增效作用

結(jié)果表明，復(fù)方得帕卡洛制劑對人肺癌(A549)、人胃癌細胞(BCK-823)和人卵巢癌(A2780)三個瘤株均有不同程度的抑瘤作用，其中對肺癌和卵巢癌抑瘤效果較好，抑瘤率達76.72％-90.1％；其次為卵巢癌，抑瘤率達64％-74％；對胃癌抑瘤率達40％-61％，表明該藥對多個人癌細胞株均有較好的抑瘤作用。如表7所示，復(fù)方制劑得帕卡洛抑瘤效果均好于單方DP，三種劑量分別對人肺癌增效作用提高百分數(shù)為1.0％-3.0％，對卵巢癌提高36％-54.4％，對胃癌小劑量時為88％，而中、大劑量無明顯增效作用。表明雙嘧達莫和β-胡蘿卜素組成復(fù)方后療效增強。
實施例4、得帕卡洛(Dipycaro)的毒理毒性1、得帕卡洛(Dipycaro)的一般毒性實驗取貓24只，雌雄各半，體重2.4-3.7kg，分為4組，每組6只；大鼠40只，雌雄各半，體重18-20g，分為4組，每組10只。三個受藥組貓試驗得帕卡洛劑量分別為120、60及30mg/kg；大鼠試驗得帕卡洛劑量分別為240、120及60mg/Kg，空白對照組為相同體積水，口服給藥，不同時間后分別觀察對心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及自主活動的影響。結(jié)果如表8至表13所示。
表8.復(fù)方得帕卡洛對小鼠自主活動次數(shù)的影響

*與空白對照組比較，相差顯著P＜0.05。
由表8可見，與空白對照相比，口服復(fù)方得帕卡洛后不同時間對小鼠自主活動沒有明顯影響。
表9-1.復(fù)方得帕卡洛對貓血壓的影響(KPa)


表9-2

表內(nèi)數(shù)字表示收縮壓/舒張壓的平均值±標準差。
※舒張壓與空白對照組比較，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。
表10.復(fù)方得帕卡洛對貓呼吸頻率(次/分)的影響


※與空白對照組比較，差異顯著，P＜0.05。
表11.復(fù)方得帕卡洛對貓呼吸輻度(KPa)的影響

表12.復(fù)方得帕卡洛對貓心率(次/分)的影響


表13-1.復(fù)方得帕卡洛對貓心電圖的影響

表13-2


表9-表13為復(fù)方得帕卡洛對貓的一般藥理試驗結(jié)果，結(jié)果表明得帕卡洛對貓心跳、血壓、呼吸等指標無明顯影響，組間比較未見顯著性差異(P＞0.05)。
2、得帕卡洛(Dipycaro)的急性毒性實驗取昆明種小鼠40只(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供)，雌雄各20只，分為兩組，每組20只(雌雄各10只)，受藥組小鼠一次最大給藥量復(fù)方制劑為10.63g/kg，單方DP為5.28g/kg，分別相當臨床擬用量(3.75mg/kg)的2834倍及1408倍。觀察28天，包括小鼠的食欲、體重、活動及死亡數(shù)。結(jié)果如表14所示。
表14.復(fù)方制劑與單方DP的小鼠急性毒性反應(yīng)

結(jié)果表明，單方與復(fù)方制劑給藥量分別相當于臨床用量的1408倍和2834倍，未見小鼠急性毒性反應(yīng)。
3、得帕卡洛(Dipycaro)的長期毒性實驗取SPF級Wistar大鼠176只(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供)，體重90-100g左右，雌雄各半，分為復(fù)方組和單方DP組，每組44只，分別按三個劑量復(fù)方450、225、112.5mg/kg和單方375、187.5、93.75mg/kg，對照組口服同體積生理鹽水，每日給藥一次，連續(xù)用藥6個月，分別觀察大鼠的外周血像、血液生化、肝功、腎功、體重及活殺后組織病理學(xué)等指標變化。結(jié)果如表15-19所示。
表15.復(fù)方制劑與單方DP的大鼠長毒試驗反應(yīng)

表16.復(fù)方與單方DP對大鼠外周血血凝時間的影響

表17-1.復(fù)方與單方DP對大鼠外周血生化指標的影響


表17-2

表18-1.復(fù)方與單方DP對大鼠外周血相指標的影響

表18-2

表19-1.復(fù)方與單方DP對大鼠臟器指數(shù)的影響

表19-2

以上結(jié)果表明，口服復(fù)方得帕卡洛后，大鼠各項指標均未見異常，組間比較無顯著性差異(P＜0.05)，表明得帕卡洛無長期累積毒性。
對已確診中晚期癌癥患者服用該藥后進行臨床觀察，對肺癌、肝癌、胃癌、白血病、淋巴癌、腸癌等10多種340多例的初步統(tǒng)計，其中204例記錄資料較完整，其結(jié)果如表20所示(1)療效完全緩解(CR)98例，占48.0％；部分緩解(PR)34例，占16.7％；無變化(NC)或無效72例，占35.3％，總有效率(CR+PR)為64.7％，其中白血病幾乎100％有效，其次肺癌有效率75.0％，肝癌71.8％，胃腸癌64.5％。
(2)副反應(yīng)基本上無明顯副反應(yīng)，少數(shù)患者服藥后感覺胃部發(fā)熱。
(3)服用方法口服，每次50-75mg，每日2-4次，根據(jù)病情而定，通常治療量為每日4次，維持量為每日2次或3次。
表20.不同腫瘤患者服用該藥后230例的初步療效觀察


※包括肺腺癌、鱗癌及小細胞肺癌等。
權(quán)利要求
1.一種抗癌藥物組合物，含有雙嘧達莫和β-胡蘿卜素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述雙嘧達莫與β-胡蘿卜素重量份數(shù)比為1∶0.125-0.20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述組合物還含有淀粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述淀粉與雙嘧達莫的重量份數(shù)比為7.0-10.0∶1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述組合物還含有糊精。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述糊精與雙嘧達莫的重量份數(shù)比為0.10-0.30∶1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述組合物還含有β-CD；β-CD與雙嘧達莫的重量份數(shù)比為0.10-0.30∶1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述組合物劑型為片劑、膠囊、粉劑、顆粒、錠劑、栓劑，或口服液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物采用雙鋁層包裝。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗癌藥物組合物，其特征在于所述組合物的有效劑量為0.5g/人·天。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗癌藥物組合物，目的是提供一種毒性小、療效高的抗癌藥物。本發(fā)明所提供的藥物組合物，含有雙嘧達莫和β－胡蘿卜素。本發(fā)明與目前抗癌藥如化療藥等相比，具有以下特點與優(yōu)勢(1)毒性小，無明顯的不良反應(yīng)，是目前抗癌藥所少見的；(2)療效高，對人肺癌、人胃癌及人卵巢癌的抑瘤率達40％～96％；(3)具有廣譜抗癌活性，對多種惡性腫瘤均有不同程度的抑制作用；(4)主要用藥途徑為口服膠囊制劑，用藥方便、安全，可在家庭及旅游途中用藥，具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號A61P35/00GK1718189SQ20041006272
公開日2006年1月11日 申請日期2004年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月7日
發(fā)明者劉國廉, 周淑珍 申請人:劉國廉