專利名稱：一種銀杏葉提取物的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所要保護的技術(shù)領(lǐng)域?qū)儆诶勉y杏葉提取物制成對人體有保健作用的組合物這一技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
銀杏葉的提取物具有增加腦血管流量，降低腦血管阻力，改善腦血管循環(huán)等功能，其主要功能成分為銀杏黃酮甙和銀杏苦內(nèi)酯，它具有消除氧自由基，防止過氧化脂質(zhì)引起的損傷，改善血液流變學(xué)，降低體內(nèi)過氧化脂質(zhì)和提高超氧化物歧化酶的活力等作用。其中的還原性羥基官能團，可直接發(fā)揮抗氧化作用?？梢员Ｗo腦細胞免受缺血損害；擴張冠狀動脈，防止心絞痛及心肌梗塞，抑制血栓形成，清除有害的氧化自由基。
維生素C為抗體及膠原形成，組織修補(包括某些氧化還原作用)，苯丙氨酸、酪氨酸、葉酸的代謝，鐵、碳水化合物的利用，脂肪、蛋白質(zhì)的合成，維持免疫功能，羥化5-羥色胺，保持血管的完整，促進非血紅素鐵吸收等所必需。
生物體在代謝過程中不斷有自由基產(chǎn)生，而自由基化學(xué)性質(zhì)非常活潑，能損傷膜結(jié)構(gòu)以及多糖、蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子并導(dǎo)致功能障礙，即表現(xiàn)為機體的逐漸衰老。由于茶多酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有多個羥基，這些羥基是十分活躍的化合物，它能有效地阻斷體內(nèi)的自由基連鎖反應(yīng)，使自由基形成受到抑制，故生物膜和不飽和脂肪酸不會發(fā)生脂質(zhì)過多氧化，由此產(chǎn)生抗衰作用。目前，國內(nèi)外學(xué)者對茶多酚的大量研究表明，茶多酚具有增強機體抵抗力、抗氧化、防癌、抗腫瘤、抗輻射、抑菌、抗病毒、降血糖和血脂、預(yù)防心血管疾病、抗衰老等多種天然生物活性。
中國專利文獻公開了申請?zhí)枮?3102087.5，發(fā)明名稱為“一種銀杏茶及制作方法”的技術(shù)方案，它提供了一種飲用方便，口感好的銀杏茶。它的技術(shù)方案是將銀杏葉(干的)或者銀杏葉原液和已制成的茶葉混勻而成。但茶葉中含有一定量的咖啡因及其他雜質(zhì)，銀杏葉原液中也含其他雜質(zhì)，這兩種物質(zhì)混勻，有效成份偏低，同時由于各種雜質(zhì)同時存在，即影響藥物的生理吸收，同時大量雜質(zhì)的存在對人體也存在一定的不利因素。
中國專利文獻公開銀杏維生素C泡騰片(申請?zhí)?011257.0)，它是主要用于防治心、腦血管疾病。它是將銀杏葉提取物加入β-環(huán)糊精中，從而使銀杏葉提取物不容易被氧化。而維生素C的藥理作用在該技術(shù)方案中并沒有表現(xiàn)出來。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題就是提供一種較現(xiàn)有技術(shù)更能體現(xiàn)對人體有益作用、效果優(yōu)于上述單一組分的銀杏葉提取物組合物。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種銀杏葉提取物的組合物，含有銀杏葉提取物，維生素C，茶多酚，其重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.50-0.70∶0.35-0.66。
本發(fā)明優(yōu)選的重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.59-0.61∶0.39-0.55。
本發(fā)明最優(yōu)選的總量比是銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.6∶0.39-0.41。
將上述組合物依照通常的制藥方法添加如淀粉或食用纖維素藥用輔料后制備成各種膠囊、片劑、顆粒等劑型，其中以膠囊劑型最佳。本發(fā)明推薦每天服用兩次，每天服用銀杏葉提取物總量為180毫克的成型后組合物。
所使用的銀杏葉提取物符合《中國藥典》2002年增補版之規(guī)定，維生素C符合《中國藥典》2000年版之規(guī)定，茶多酚符合QB2154-1995之規(guī)定，淀粉符合GB2760-1996之規(guī)定。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比更加能發(fā)揮三種組分的協(xié)同作用，效果優(yōu)于上述單一組分，并且無毒副作用。本發(fā)明經(jīng)湖南省疾病預(yù)防控制中心及湖北省疾病預(yù)防控制中心確證，具有緩解體力疲勞，降血脂、增強免疫力、安全無毒副作用特點。
具體實施例方式
以下用正交試驗取得最佳配方，通過實施例對本發(fā)明作出進一步的描述，但它們不是對本發(fā)明的限定。
膠囊劑的制備方法1、將銀杏葉提取物、維生素C、茶多酚、淀粉或纖維素類，過80目篩，備用；
2、按配方量稱取銀杏葉提取物、維生素、茶多酚、淀粉或纖維素類，放入混勻機進行混均；3、混合好的物料在自動膠囊灌裝機上灌裝；4、對灌裝好的膠囊在膠囊拋光機上拋光；5、將拋光好的膠囊用聚烯烴塑料瓶進行封裝。
上述工藝的要求與現(xiàn)有技術(shù)中膠囊劑制備工藝的要求和條件一致所使用的銀杏葉為上海杏林制藥有限公司生產(chǎn)的銀杏葉提取物，銀杏總黃酮含量大于24％，符合《中國藥典》2002年增補版之規(guī)定，維生素C為華北制藥總廠生產(chǎn)，符合《中國藥典》2000年版之規(guī)定、茶多酚為黃山歙縣茶葉生物堿廠生產(chǎn)，符合QB2154-1995之規(guī)定、淀粉符合BG2760-1996之規(guī)定。
按下表的配制比例制成膠囊其中銀杏葉提取物的重量為450克，混合后的組合物制成粒重為260毫克的膠囊10000粒。

一、實施例安全性、毒理性試驗(1)急性口服試驗試驗方法為選用體重為18-22g的健康昆明種小鼠，雌雄各半。取樣品按21500mg/kg.bw劑量，間隔4小時分兩次經(jīng)口灌胃，每次灌胃體積為0.2ml/10g.bw。灌胃后連續(xù)觀察兩周，記錄中毒表現(xiàn)及死亡情況。
標(biāo)準(zhǔn)為《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》中的急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)。
表1實施例1-9與對照組1、2對小鼠的急性毒性試驗

對照樣1、2是指按照申請?zhí)枮?3102087.5、0011257.0的最優(yōu)選的實施方式分別配制的樣品，按照同樣條件喂養(yǎng)。
表1顯示，實施例1-8及對照樣1、2對小鼠均無毒，實施例9對小鼠有一定的毒性。
二、保健功能試驗(1)用1-8號實施例經(jīng)口服給予小鼠30天，同時與服用空白樣小鼠進行對比，測量試驗組與對照組的負重游泳時間、運動后小鼠血乳酸曲線下面積。
負重游泳試驗方法末次給小鼠受試物30min后，置于游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫25℃±0.5℃，鼠尾根部負荷5％體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間，作為小鼠負重游泳時間。
末次給予受試物30min后從內(nèi)眥靜脈叢采血20μl，然后不負重在溫度為30℃的水中游泳10min，分別于運動后0min和20min同上采血20μl，測定血乳酸，計算血乳酸曲線下面積。
表2空白、實施例1-8、對照組1、2抗疲勞功能試驗結(jié)果

上述試驗數(shù)據(jù)表明，實施例4、5、6緩解體力疲勞的功能較實施例1-3、7-8、對照組1、2強。
(3)用2-8號實施例經(jīng)口服給予小鼠30天，測量試驗組的半數(shù)溶血值、抗體生成細胞數(shù)、單核一巨噬細胞碳廓清、遲發(fā)反應(yīng)能力是否明顯提高。
半數(shù)溶血值的試驗方法取羊血，用生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(V/V，用生理鹽水配制)壓積RBC0.2ml進行免疫。5天后，摘除眼球取血于離心管內(nèi)，放置約1小時，將凝固血與管壁剝離，使血清充分析出，2000rpm離心10min，收集血清。用SA緩沖液將血清稀釋為200倍，取1mlL置試管內(nèi)，依次加入10％壓積RBC0.5ml，補體1ml。另設(shè)不加血清的對照管。置30℃恒溫水浴中保溫30min后，冰浴終止反應(yīng)，2000 rpm離心10min，取上清1ml，加都氏試劑至4ml于另一試管中，充分混勻，放置10min后，于540nm處以對照管作空白，分別測定各管光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值表示，按下式計算半數(shù)溶血值＝樣品光密度值/SRBC半數(shù)溶血時的光密度值×稀釋倍數(shù)。
抗體生成細胞試驗方法取羊血，用生理鹽水洗滌3次，每次離心10min(2000r/min)，將壓積SRBC用生理鹽水配成2％的細胞懸液，每鼠經(jīng)腹腔注射0.2ml。將免疫后4天的小鼠處死，取脾，輕輕撕碎，用Hanks液制成細胞懸液，200目篩網(wǎng)過濾，洗滌、離心2次，最后將細胞懸浮在5mlHanks液中，將表層培養(yǎng)基加熱溶解后與等量的pH7.4、2倍濃度的Hanks液混合，分裝小試管，每管0.5ml，再向管內(nèi)加入用SA液配制的10％SRBC50μl、20μl脾細胞懸液，迅速混勻后傾倒于已刷薄層瓊脂糖的玻片上，待瓊脂糖凝固后將玻片水平扣放在玻片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中溫育1.5小時，然后用SA液稀釋的補體(1∶10)加入到玻片凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5小時后計數(shù)溶血空斑數(shù)。
小鼠碳廓清實驗方法小鼠尾靜脈注射以生理鹽水稀釋4倍的印度墨汁，每10g體重注射0.1mL，墨汁注入后立即計時，于注入墨汁后第2、10min，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20μl加入到2ml碳酸鈉溶液中，搖勻，以碳酸鈉溶液作空白對照，用722型分光光度計在600nm波長處比色測光密度值(OD)。將小鼠處死，取肝、脾，稱重，計算吞噬指數(shù)。
小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗方法小鼠腹腔注射20％壓積的雞紅細胞(200rpm，10min)懸液1ml，間隔30min，頸椎脫臼處死，取腹腔巨噬細胞洗液1ml，滴于載玻片上，放入墊有濕紗布的搪瓷盒內(nèi)，置37℃孵箱溫育30min。孵畢，于生理鹽水中漂洗，以除去未貼片細胞。晾干，以甲醇∶丙酮(1∶1)固定，4％(V/V)Giemsa-磷酸緩沖液染色，再用蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數(shù)，每片計數(shù)100個巨噬細胞，按下式計算吞噬率和吞噬指數(shù)吞噬率％＝吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞×100吞噬指數(shù)＝被吞噬雞紅細胞總數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞數(shù)對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響試驗方法小鼠腹腔注射2％(v/v)SRBC(0.2ml/每鼠)，于注射后24小時測量左后足跖部厚度，同一部位測量三次，取平均值。以攻擊前后足跖厚度差值(足跖腫脹度)來表示遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)程度。
表3實施例2-8的增強免疫力功能試驗

上述試驗結(jié)果表明，各實施例具有較好的增強免疫力功能。
三、對比試驗(1)用實施例4、5、6口服給予小鼠30天分別與只含銀杏葉的提取物450克的膠囊(對照組4)、只含維生素C 270克的膠囊(對照組5)、只含茶多酚180克的膠囊(對照組6)進行對比，測量試驗組與對照組的半數(shù)溶血值、運動后小鼠血乳酸曲線下面積(p)。
表4實施例4-6和只含單一銀杏葉提取物、維生素c、茶多酚功能測試試驗結(jié)果

試驗表明實施例4、5、6的保健功能明顯優(yōu)于只含銀杏葉的提取物、維生素C、茶多酚的對照組。為了解本專利與申請?zhí)枮?3102087.5和申請?zhí)枮?011257.0的兩個專利的對自由基的清除反應(yīng)效果，我們設(shè)計了試驗研究了三個產(chǎn)品對Fe2+/Fe3+誘致的突觸體脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的脂質(zhì)自由基的清除反應(yīng)，三者均有清除脂質(zhì)自由基的作用，清除50％自由基所需的申請?zhí)枮?3102087.5和申請?zhí)枮?011257.0的產(chǎn)品及本專利產(chǎn)品的濃度分別為0.38、0.11和0.0056mg/ml，當(dāng)三者濃度分別提高到0.79、0.23和0.023mg/ml時，抑制率達100％。
權(quán)利要求
1.一種銀杏葉提取物的組合物，含有銀杏葉提取物，維生素C，茶多酚，藥用輔料，其特征在于其重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.50-0.70∶0.35-0.66。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉提取物的組合物，其特征在于其重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.59-0.61∶0.39-0.55。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種銀杏葉提取物的組合物，其特征在于其重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.6∶0.39-0.41。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉提取物的組合物，其特征在于可添加的藥用輔料為淀粉、乳糖、食用纖維素類。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏葉提取物的組合物，其特征在于其劑型為膠囊劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種銀杏葉提取物的組合物，屬于利用銀杏葉提取物制成對人體有保健作用的組合物這一技術(shù)領(lǐng)域。含有銀杏葉提取物，維生素C，茶多酚，藥用輔料，其重量比為銀杏葉提取物∶維生素C∶茶多酚＝1∶0.50－0.70∶0.35－0.66。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比更加能發(fā)揮三種組分的協(xié)同作用，效果優(yōu)于上述單一組分，并且無毒副作用。
文檔編號A61P9/10GK1650947SQ200410065438
公開日2005年8月10日 申請日期2004年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月1日
發(fā)明者黃秀峰, 王勤, 方貴林 申請人:蕪湖康奇制藥有限公司