專利名稱：當(dāng)歸油在制備治療更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及當(dāng)歸油在制備治療更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
更年期綜合征，是婦女絕經(jīng)期前后出現(xiàn)的一種癥候群，是婦女由生育期向老年期過(guò)渡時(shí)期的常見(jiàn)病。主要表現(xiàn)為性腺功能衰退所引起生理和心理上的一系列癥狀，例如，潮熱、多汗、煩躁、記憶減退、失眠，嚴(yán)重的可并發(fā)心血管疾病或精神紊亂。目前有效的治療方法是激素替代療法和中藥方劑的治療。但由于激素替代療法的安全性受到國(guó)內(nèi)、外專家的置疑，中藥方劑的質(zhì)量控制問(wèn)題一直是待解決的問(wèn)題。因此開(kāi)發(fā)安全、有效、質(zhì)量可控的新的藥物具有深遠(yuǎn)的臨床意義。
本發(fā)明人通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)研究，提供了當(dāng)歸油在制備治療婦女更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。
技術(shù)內(nèi)容本發(fā)明提供了當(dāng)歸油在制備治療婦女更年期綜合征的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了當(dāng)歸油在制備治療骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了以當(dāng)歸油為活性成分用于婦女更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物組合物。
本發(fā)明所述的當(dāng)歸油可以通過(guò)水蒸氣蒸餾法或CO2超臨界萃取法獲得，優(yōu)選為CO2超臨界萃取法獲得的；可按中國(guó)專利CN00103336.0中公開(kāi)的方法制備。
本發(fā)明提供的藥物組合物可以制成口服劑型、注射劑型、皮膚給藥或粘膜給藥的劑型；可以以膠囊，片劑，含片，軟膠囊，注射液或皮膚貼劑形式存在，均按藥學(xué)常規(guī)方法制備。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1當(dāng)歸油對(duì)摘卵巢大鼠血清雌激素和骨組織形態(tài)計(jì)量的影響1藥品和試劑1.1受試樣品當(dāng)歸油按中國(guó)專利CN00103336.0中實(shí)施例3中所述方法制備，臨用前用植物油配制成所需濃度。
1.2陽(yáng)性對(duì)照藥龍牡壯骨顆粒(LM)，武漢健民藥業(yè)股份有限公司，5g/袋，批號(hào)0312322。
1.3低鈣飼料北京科奧協(xié)力飼料有限公司，配方(％)玉米43，面粉20，黃豆15，植物油3.5，干酪素15.2，維生素預(yù)混料0.05，無(wú)鈣礦物鹽3；鈣0.251.4試劑堿性磷酸酶(ALP)試劑盒，中生北控生物技術(shù)股份有限公司，批號(hào)030221；血清骨鈣素(BGP)，德國(guó)羅氏公司，批號(hào)167250-02；甲狀旁腺素(PTH)，德國(guó)羅氏公司，批號(hào)167058-02；雌二醇(E2)，德國(guó)羅氏公司，批號(hào)166781-02。
2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥普通級(jí)Wistar大鼠，雌性，6月齡，體重300±30g，由山東綠葉天然藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào)魯動(dòng)質(zhì)字200106005號(hào)。
將動(dòng)物隨機(jī)分為6組假手術(shù)(Sham)對(duì)照組，骨質(zhì)疏松模型組，當(dāng)歸油低劑量組(20mg/kg)，中劑量組(40mg/kg)，高劑量組(80mg/kg)，陽(yáng)性對(duì)照藥物龍牡壯骨顆粒組(5000mg/kg)，每組10只。其中除假手術(shù)組外均按[徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，第三版.北京人民衛(wèi)生出版社，20031539]方法做卵巢摘除手術(shù)。手術(shù)3個(gè)月后，各組分別按上述劑量給藥。1次/日，連續(xù)給藥3個(gè)月。假手術(shù)組和骨質(zhì)疏松模型組給予與給藥組等體積的植物油(10ml/kg)。飼養(yǎng)室溫度22℃～25C，濕度50％～70％，喂以低鈣飼料(含鈣量＜0.3％)，自由飲水，限量進(jìn)食，每周稱量一次體重，并按體重變化調(diào)整給藥量。實(shí)驗(yàn)各組大鼠于處死前16d和3d分別腹腔注射鹽酸四環(huán)素(SIGMA公司生產(chǎn))，30mg/kg體重，對(duì)骨進(jìn)行熒光標(biāo)記。
3測(cè)定指標(biāo)采用AUTOLab全自動(dòng)生化分析儀分別測(cè)定血清堿性磷酸酶(ALP)活性。采用Elecsys107電發(fā)光免疫分析儀(德國(guó)羅氏)測(cè)定血清骨鈣素(BGP)、甲狀旁腺素(PTH)、雌二醇(E2)。
4測(cè)定方法取大鼠左側(cè)脛骨近端1/3，去除軟組織，包埋塊，修塊后，在Reicheit-Jung 2040切片機(jī)(德國(guó))上，用鎢鋼刀分別切出5μm的縱向不脫鈣骨切片。用二甲苯溶掉樹(shù)脂后，梯度乙醇至水，甲苯胺藍(lán)染色。按照[章明放，張乃鑫，譚郁彬。運(yùn)動(dòng)對(duì)雌性大鼠去勢(shì)后骨質(zhì)疏松癥的作用.中華骨科雜志，1994，14(6)365]的方法，采用Leica Qwin圖象分析系統(tǒng)(德國(guó))進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量。
4.1骨小梁組織形態(tài)計(jì)量骨小梁體積百分比(TBV％)骨小梁體積占被測(cè)骨髓腔總體積的百分比，是骨量水平的主要標(biāo)志；骨小梁吸收表面百分比(TRS％)不規(guī)則、凹凸不平的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比；骨小梁形成表面百分比(TFS％)有成骨細(xì)胞被覆的類骨質(zhì)表面占骨小梁表面的百分比；活性生成表面百分比(AFS％)有熒光標(biāo)記帶的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比；骨小梁礦化率(MAR)骨小粱表面熒光雙標(biāo)記帶的平均距離除以兩次標(biāo)記相隔的天數(shù)；4.2皮質(zhì)內(nèi)表面形態(tài)計(jì)量類骨質(zhì)平均寬度(OSW)皮質(zhì)內(nèi)表面類骨質(zhì)的平均寬度；骨皮質(zhì)礦化率(mAR)皮質(zhì)內(nèi)表面雙標(biāo)記帶的平均距離除以兩次標(biāo)記相隔的天數(shù)。
5.結(jié)果當(dāng)歸油可明顯升高摘卵巢模型大鼠血清E2和BGP水平，降低ALP和PTH水平(表2)，明顯增加骨小梁體積百分比(TBV％)，并顯著降低骨小梁吸收表面百分比(TRS％)(表1，2)。
表1各組大鼠脛骨TBV％和TRS％的變化

與假手術(shù)組相比，+P＜0.05，++P＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
表2.當(dāng)歸油對(duì)骨質(zhì)疏松癥大鼠血清E2、BGP、PTH和BALP的影響(X±SD)

n＝10，與假手術(shù)組相比，+P＜0.05，++P＜0.01；與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
6.結(jié)論當(dāng)歸油可以明顯改善摘卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型的骨代謝狀態(tài)，提高體內(nèi)雌二醇水平。
實(shí)施例2當(dāng)歸油對(duì)beagle犬血清雌激素的影響2.1試驗(yàn)材料動(dòng)物同試驗(yàn)例1。
當(dāng)歸油軟膠囊按中國(guó)專利CN00103336.0實(shí)施例1方法制備。
Beagle犬購(gòu)自廣東科金實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司，雌性，體重4～6Kg，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK(粵)2003-0006堿性磷酸酶(ALP)試劑盒北京中生生物工程高技術(shù)公司，批號(hào)030221；自動(dòng)血液生化分析儀(意大利，AUTOLab)。
電發(fā)光免疫分析儀(德國(guó)羅氏，Elecsys107)。
2.2方法將犬隨機(jī)分為4組，分別為生理鹽水對(duì)照組、當(dāng)歸油軟膠囊低劑量組(6.7mg/kg)、中劑量組(20mg/kg)和高劑量組(60mg/kg)。每日口服(吞服)給藥一次，連續(xù)給藥3個(gè)月，根據(jù)體重調(diào)整給藥量。
觀察指標(biāo)每日觀察記錄一般情況。每周稱體重1次，分別于給藥前、給藥后3個(gè)月取血進(jìn)行檢查堿性磷酸酶和雌二醇(E2)。
結(jié)果當(dāng)歸油連續(xù)口服3個(gè)月可以明顯升高beagle犬血清雌激素和堿性磷酸酶水平(表3)。
表3.當(dāng)歸油口服給藥3個(gè)月對(duì)犬雌激素和堿性磷酸酶水平的影響

結(jié)論當(dāng)歸油連續(xù)口服3個(gè)月具有明顯升高beagle犬血清雌激素和堿性磷酸酶水平，由于堿性磷酸酶反應(yīng)骨質(zhì)生成的指標(biāo)，因此可以改善更年期婦女的雌激素水平和骨代謝紊亂狀態(tài)。
權(quán)利要求
1.當(dāng)歸油在制備治療婦女更年期綜合征的藥物中的應(yīng)用。
2.當(dāng)歸油在制備治療骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用。
3.當(dāng)歸油可以通過(guò)水蒸氣蒸餾法或CO2超臨界萃取法獲得。
4.當(dāng)歸油優(yōu)選為通過(guò)CO2超臨界萃取法獲得。
5.以當(dāng)歸油為活性成分的用于婦女更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，可以以膠囊、片劑、含片、軟膠囊、注射液或皮膚貼劑形式存在。
全文摘要
本發(fā)明提供了當(dāng)歸油在制備治療更年期綜合征和骨質(zhì)疏松的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明提供的當(dāng)歸油可以通過(guò)水蒸氣蒸餾法或CO
文檔編號(hào)A61P15/00GK1788739SQ20041007549
公開(kāi)日2006年6月21日 申請(qǐng)日期2004年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月16日
發(fā)明者劉志峰, 高永林, 李春梅, 韓兵, 李桂生 申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司