專(zhuān)利名稱(chēng)：冰片脂肪酸酯衍生物及含有該衍生物的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說(shuō)是公開(kāi)一類(lèi)含冰片和脂肪酸的衍生物(冰片脂肪酸酯衍生物)及含有該衍生物的制劑。
背景技術(shù)：
冰片可分天然冰片和合成冰片兩大類(lèi)。天然冰片為腦香科植物龍腦香樹(shù)脂的加工品，因資源緊缺，現(xiàn)多使用以樟腦、松節(jié)油等為原料的人工合成品(江蘇新醫(yī)學(xué)院編.《中藥大辭典》上海人民出版社，1977年951.)冰片的結(jié)構(gòu)如下 冰片性辛、苦，微寒。歸心、脾、肺經(jīng)。具有開(kāi)竅醒神，清熱止痛。用于熱病神昏、痙厥，中風(fēng)痰厥，氣郁暴厥，中惡昏迷，目赤，口瘡，咽喉腫痛，耳道流膿。冰片有多種藥理作用1、對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用龍腦或其異構(gòu)體(異龍腦)、合成冰片250mg/kg腹腔注射，小鼠熱板法，能顯著延長(zhǎng)舔足時(shí)間；200mg/kg腹腔注射顯著延長(zhǎng)戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時(shí)間。2、抗炎作用5％龍腦或異龍腦乳劑涂耳對(duì)2％巴豆涂耳合劑所致小鼠炎癥反應(yīng)有抑制作用，其中異龍腦作用顯著。3、抗菌作用龍腦、異龍腦和人工合成冰片對(duì)金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌，草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌和大腸桿菌等，在試管內(nèi)均有明顯抗菌作用，三者的抗菌作用相似，低濃度抑菌，高濃度滅菌。4、抗生育作用5、與其他藥物的相互作用.最近，將冰片用于腦靶向、吸收促進(jìn)劑(陳艷明，王寧生 冰片對(duì)P-糖蛋白的影響《中藥新藥與臨床藥理》2003，14(2).-96-99；趙保勝 劉啟德 冰片促血腦屏障開(kāi)放與病理性開(kāi)放的比較《中藥新藥與臨床藥理》2002，13(5).-287-288；王寧生，謝獨(dú)，梁美容，等.CT動(dòng)態(tài)掃描觀(guān)察冰片對(duì)兔血腦屏障作用的影響《中藥新藥與臨床藥理》，1992，3(4)28；陳鐵峰，林曙光，陳露西，等.冰片促進(jìn)四甲基吡嗪的吸收《中國(guó)藥理學(xué)報(bào)》，1993，4(4)42.)。
由于冰片具有較強(qiáng)的揮發(fā)性，給制劑工藝帶來(lái)困難，同時(shí)也會(huì)在長(zhǎng)期貯存后，藥物損失嚴(yán)重，造成藥效不能保證，可以考慮在冰片分子上連上一脂質(zhì)基團(tuán)，制備冰片衍生物。已見(jiàn)報(bào)道的冰片衍生物有冰片葡(萄)糖苷酸(HUEBNER CF，LINK KP.Note on the bornyl ester of bornyl d-glucuronide.J Biol Chem.1950Sep；186(1)393-4.)等，但未見(jiàn)本發(fā)明中所指出的衍生物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種冰片脂肪酸酯衍生物，它可以降低冰片的揮發(fā)性，并將其用于制劑中，實(shí)現(xiàn)提高藥物的透皮吸收和提高藥物穿透血腦屏障、黏膜的目的。
一種含冰片與脂肪酸的衍生物---冰片脂肪酸酯衍生物，其結(jié)構(gòu)通式如下 在此所示的冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類(lèi)。所說(shuō)的脂肪酸為C5～C30的直鏈或支鏈脂肪酸(或R＝C4～C29)，包括飽和或不飽和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、特戊酸、(亞)油酸、亞麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。為了制備冰片脂肪酸酯衍生物，可以通過(guò)制備脂肪酰氯后與冰片進(jìn)行反應(yīng)。為了提高反應(yīng)速度和程度，可以在反應(yīng)液中加入常規(guī)的催化劑，如吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。所用的溶劑為除去水的有機(jī)溶劑，如氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚類(lèi)、酯類(lèi)、丙酮、烷烴類(lèi)、環(huán)己烷、二氧六環(huán)。另外，冰片脂肪酸酯衍生物還可以通過(guò)將脂肪酸與冰片混合溶解于有機(jī)溶劑后，加入脫水劑和常規(guī)的催化劑，如EDCI、DCC、NHS，還可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。也可以通過(guò)制備酸酐，如戊酸酐，在固體酸催化劑、固體超強(qiáng)酸催化劑S2O82-/ZRO2作用下來(lái)與冰片進(jìn)行酯化反應(yīng)，制備冰片脂肪酸衍生物。所制備的冰片脂肪酸衍生物，可被用于注射劑、口服劑和外用劑中，如脂質(zhì)體、乳劑、納米粒、乳膏、滴眼劑等，以提高藥物的腦靶向、透皮吸收或黏膜吸收，提高藥物的生物利用度。也可利用衍生物的低揮發(fā)性作為冰片替代品而用于含有冰片的制劑中，如速效救心丸、醒腦靜注射液。


圖1為不同衍生物在50℃條件下樣品的殘留率表。
圖2為阿霉素在腦組織中的濃度(ug/g)表。
圖3為腦組織伊文氏藍(lán)濃度(ug/g)表。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的描述實(shí)施例1冰片月桂酸酯(BL)取冰片5g加入50mL二氯甲烷溶解，按等摩爾量加入月桂酰氯，混均后，加入0.5ml吡啶，于30℃條件下反應(yīng)5小時(shí)，蒸除二氯甲烷，所得物中加入水10ml，30℃反應(yīng)0.5小時(shí)，消除未反應(yīng)的月桂酰氯，補(bǔ)加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷，用無(wú)水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除二氯甲烷，得產(chǎn)物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.4(酯，C＝O)，1160.3(C-O)，1112.8(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z337.6[M]+。元素分析(％)實(shí)測(cè)值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計(jì)算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。證明為目標(biāo)化合物。
實(shí)施例2冰片肉豆蔻酸酯(BM)
取冰片5g加入50mL甲苯溶解，按等摩爾量加入肉豆蔻酰氯，混均后，加入0.3克二甲基吡啶(DMAP)，于60℃條件下回流反應(yīng)3小時(shí)，蒸除甲苯，所得物中加入水5ml，60℃反應(yīng)0.5小時(shí)，消除未反應(yīng)的肉豆蔻酰氯，補(bǔ)加水100ml，混均后，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用無(wú)水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除乙酸乙酯，得產(chǎn)物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1 735.8(酯，C＝O)，1161.1(C-O)，1113.1(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z365.6[M]+。元素分析(％)實(shí)測(cè)值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計(jì)算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。證明為目標(biāo)化合物。
實(shí)施例3冰片油酸酯(BO)取冰片5g加入50mL異丙醚溶解，按1∶1.1摩爾量加入油酸酰氯，混均后，加入1ml三乙胺，于40℃條件下回流反應(yīng)7小時(shí)，蒸除異丙醚，所得物中加入水5ml，60℃反應(yīng)0.5小時(shí)，消除未反應(yīng)的油酸酰氯，補(bǔ)加水100ml，混均后，用二氯甲烷萃取，共三次，每次30ml，合并二氯甲烷萃取液，用無(wú)水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除二氯甲烷，得產(chǎn)物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.6(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1113.4(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z419.7[M]+。證明為目標(biāo)化合物。
實(shí)施例4冰片棕櫚酸酯(BP)取冰片5g加入50mL二氧六環(huán)溶解，按1∶1.5摩爾量加入棕櫚酸，混均后，加入1克碳酸鉀和0.3克DCC，于40℃條件下回流反應(yīng)10小時(shí)，蒸除二氧六環(huán)，所得物中加入水5ml，60℃反應(yīng)0.5小時(shí)，消除未反應(yīng)的油酸酰氯，補(bǔ)加水100ml，混均后，用氯仿萃取，共三次，每次30ml，合并氯仿萃取液，用無(wú)水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除氯仿，得產(chǎn)物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.5(酯，C＝O)，1160.1(C-O)，1113.2(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z393.7[M]+。元素分析(％)實(shí)測(cè)值C 62.17，N 8.82，H 3.22；計(jì)算值C 62.19，N 8.81，H 3.22。，證明為目標(biāo)化合物。
實(shí)施例5冰片二十二碳六烯酸酯(BDHA)取冰片5g，NHS，DCC加入四氫呋喃50mL溶解，按1∶1.5摩爾量加入二十二碳六烯酸，通氮?dú)?，混均后，室溫下攪拌反?yīng)8h。取出反應(yīng)混合物，過(guò)濾除去沉淀，濾液減壓除去溶劑，所得物中加入水25ml，混均振搖，用乙酸乙酯萃取，共三次，每次30ml，合并乙酸乙酯萃取液，用無(wú)水硫酸鈉出去殘余的水分，減壓蒸除乙酸乙酯，得產(chǎn)物。
IR(KBr壓片)ν/cm-1特征峰1735.0(酯，C＝O)，1160.6(C-O)，1112.5(C-O)。13C NMR(DMSO-d6)，δ172(酯，C＝O)。ESI-MS m/z465.7[M]+。證明為目標(biāo)化合物。
實(shí)施例6不同衍生物的揮發(fā)性將0.5克樣品置于50℃恒溫箱中，60分鐘后取出樣品，稱(chēng)重，計(jì)算殘留率，結(jié)果見(jiàn)附圖1。
注冰片己酸衍生物(BC)、冰片月桂酸衍生物(BL)、冰片肉豆蔻酸(BM)、冰片油酸(BO)、冰片二十二碳六烯酸(BDHA)由此可知，對(duì)冰片進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后，其揮發(fā)性大大下降，脂肪酸的碳數(shù)大于10時(shí)，藥物的揮發(fā)性可忽略不計(jì)。
實(shí)施例7阿霉素腦靶向脂質(zhì)體的制備及腦靶向效果脂質(zhì)體的制備處方組成氫化大豆卵磷脂(HSPC)0.5g，膽固醇(CH)0.1g，靶向輔料--冰片月桂酸酯(BL)0.02g，檸檬酸緩沖液(pH4.0)，阿霉素10mg，共成10mL。
將處方量的HSPC、CH、BL加入配置容器中，60℃條件下用適量乙醇溶解，并揮盡乙醇成膜，同溫度下加入檸檬酸緩沖液水化，制備空白脂質(zhì)體?？瞻字|(zhì)體經(jīng)超聲儀處理，通過(guò)0.22μm微孔濾膜整粒。整粒后的脂質(zhì)體采用pH梯度，60℃孵化20min，制備阿霉素脂質(zhì)體。其平均粒度為186nm粒度。
體內(nèi)分布取昆明種小鼠，體重18～22g，分3組阿霉素水溶液、普通脂質(zhì)體組、靶向脂質(zhì)體組，按10mg/kg的劑量尾靜脈給藥，于不同時(shí)間點(diǎn)斷頭處死動(dòng)物，放盡血液后，取出腦組織，用生理鹽水沖洗干凈，濾紙吸干，稱(chēng)重。經(jīng)組織勻漿，沉淀蛋白后，采用熒光分光光度法測(cè)定阿霉素的濃度。結(jié)果見(jiàn)附圖2。表明靶向脂質(zhì)體組阿霉素在腦中的濃度顯著提高。采用其它試驗(yàn)也可得到相同的結(jié)果。
實(shí)施例8腦靶向乳劑的制備及其對(duì)伊文氏藍(lán)腦中分布的影響乳劑的制備處方組成冰片肉豆蔻酸酯(BM)0.5g、注射用大豆油0.5g、大豆卵磷脂(SPC)1.0g、甘油2.2g，共成100ml。
制備工藝1、在配制設(shè)備中，將處方量的冰片肉豆蔻酸酯(BM)溶解于0.5g注射用大豆油中混合均勻；2、將處方量的SPC及甘油(無(wú)水)與適量的注射用水混合均勻；3、將2)在攪拌的條件下加入1)中，在40℃時(shí)攪拌后得初乳，過(guò)G3漏斗抽濾，所得液體經(jīng)微射流儀處理，過(guò)0.22um微孔濾膜除菌，腦靶向注射用乳劑。平均粒度212nm。
腦組織中伊文氏藍(lán)的測(cè)定小鼠經(jīng)尾靜脈注入腦靶向乳劑后2小時(shí)，按2ml/kg注射2％伊文氏藍(lán)，分別于15、30、60分鐘處死動(dòng)物，取出腦組織，經(jīng)組織勻漿，沉淀蛋白后，采用分光光度法測(cè)定伊文氏藍(lán)的濃度。結(jié)果見(jiàn)附圖3。表明腦靶向乳劑能增加伊文氏藍(lán)腦中的濃度。
實(shí)施例9促進(jìn)雙氯芬酸鈉的透皮吸收皮膚的制備取體重180～220g的大鼠飼養(yǎng)1天，處死，剪去大鼠背部或腹部毛，取下脫毛處皮膚，將之沖洗干凈后，剝離皮膚下脂肪組織組織，選完整皮膚用生理鹽水洗干凈，4℃冰箱短期保存，備用。
方法取備用皮膚，用棉花吸干表面水分，在整個(gè)大鼠皮膚表面涂上冰片油酸酯(BO)，隨后將鼠皮固定在擴(kuò)散池和接受池之間，角質(zhì)層朝向給藥室，取雙氯芬酸鈉溶液(1％)5ml置于給藥室中，接受池中充滿(mǎn)30％的乙醇，于32℃水浴中進(jìn)行透皮吸收試驗(yàn)。計(jì)算透皮速率，結(jié)果表明BO能極大提高雙氯芬酸鈉的透皮吸收量，其透皮速率由未用BO對(duì)照組(1％AZONE)的93.2μg/cm2·h提高到183.1μg/cm2·h。
實(shí)施例10 將速效救心丸中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，上述藥物具有同樣的效果。
實(shí)施例11 將醒腦靜注射液中含有的冰片用冰片脂肪酸酯衍生物代替，醒腦靜注射液具有同樣的效果?？梢?jiàn)冰片脂肪酸酯衍生物可替代冰片用于含有冰片的制劑中。
權(quán)利要求
1.冰片脂肪酸酯衍生物，其結(jié)構(gòu)通式如下
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類(lèi)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸為C5～C30的直鏈或支鏈脂肪酸或R＝C4～C29。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于所述的脂肪酸包括飽和或不飽和脂肪酸，己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、特戊酸、(亞)油酸、亞麻油酸、二十二碳六烯酸(DHA)等。
5.一種如權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于可以通過(guò)制備脂肪酰氯后與冰片進(jìn)行反應(yīng)制得，為了提高反應(yīng)速度和程度，可以在反應(yīng)液中加入常規(guī)的催化劑，所用的溶劑為除去水的有機(jī)溶劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于所述的常規(guī)催化劑包括吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于所述的除去水的有機(jī)溶劑為氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、二甲苯、醚類(lèi)、酯類(lèi)、丙酮、烷烴類(lèi)、環(huán)己烷、二氧六環(huán)。
8.一種如權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物的制備方法，其特征在于可通過(guò)將脂肪酸與冰片混合溶解于有機(jī)溶劑后，加入脫水劑和常規(guī)的催化劑制得，脫水劑和常規(guī)的催化劑為EDCI、DCC、NHS，還可加入吡啶、DMAP、三乙胺、碳酸鉀；也可以通過(guò)制備酸酐，用戊酸酐來(lái)與冰片進(jìn)行酯化反應(yīng)，制備冰片脂肪酸衍生物，此時(shí)可以用固體酸催化劑、固體超強(qiáng)酸S2O82-/ZrO2作催化劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于該衍生物可用于脂質(zhì)體、乳劑、納米粒、乳膏、外用口服注射，提高藥物的腦靶向、透皮吸收促進(jìn)劑，提高藥物的生物利用度，特別是提高藥物的透皮吸收和提高藥物穿透血腦屏障、黏膜。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冰片脂肪酸酯衍生物，其特征在于該衍生物可作為冰片替代品而用于含有冰片的制劑中。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種含冰片和脂肪酸的衍生物及其含有該衍生物的制劑，該類(lèi)衍生物是由冰片與脂肪酸經(jīng)酯化反應(yīng)而得到的。其結(jié)構(gòu)通式如圖所示。所述冰片包括異冰片，有天然的與合成的兩大類(lèi)，所述的脂肪酸為C
文檔編號(hào)A61P29/00GK1651395SQ20041008768
公開(kāi)日2005年8月10日 申請(qǐng)日期2004年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月29日
發(fā)明者鄧意輝, 吳紅兵, 王紹寧 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)