專利名稱：雙嘧達(dá)莫在制備抗惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物的新用途，特別是涉及雙嘧達(dá)莫在制備抗惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，惡性腫瘤已成為各國(guó)的常見(jiàn)病和多發(fā)病，其發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅到人類的健康與生存。雙嘧達(dá)莫(Dipyridamole，DP)是上世紀(jì)80年代合成的一種非腫瘤治療藥物，臨床上用于治療冠心病，并作為心血管擴(kuò)張劑載入中華人民共和國(guó)藥典(2000年版)和美國(guó)藥典(XXI-XXIII)，但因其存在所謂“冠狀動(dòng)脈偷竊”現(xiàn)象，即與肝素、香豆素類及纖維蛋白溶解藥合用時(shí)可引起出血傾向，故臨床上已趨不用。
DP的分子式為C24H10N8O4，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式I所示，分子量為504.65道爾頓，橙黃色。DP具有毒性小的特點(diǎn)，按2.15g/Kg或10.62g/Kg(相當(dāng)臨床擬用量的2814倍)的劑量給小鼠口服DP，均未出現(xiàn)動(dòng)物急性毒性反應(yīng)；再分別按175、187.5及93.75g/Kg的劑量，每日一次，給三組實(shí)驗(yàn)大鼠口服DP，連續(xù)給藥6個(gè)月，觀察并記錄各項(xiàng)指標(biāo)(包括外周血相，血液生化，肝功、腎功等主要臟器指數(shù)及組織學(xué)檢查結(jié)果)，均未見(jiàn)異常，證明DP也無(wú)長(zhǎng)期毒性反應(yīng)。
(式1)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明發(fā)明人的研究表明，雙嘧達(dá)莫具有抗惡性腫瘤的作用，可以在制備抗惡性腫瘤的藥物中得到廣泛應(yīng)用。
以雙嘧達(dá)莫為活性成分的抗惡性腫瘤藥物，需要的時(shí)候，還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料，所述輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑、穩(wěn)定劑等，必要時(shí)還可加入香味劑、甜味劑及色素等。
以雙嘧達(dá)莫為活性成分的抗惡性腫瘤藥物除制成膠囊外，還可以制成片劑、粉劑、粒劑、口服液、注射液等多種藥物形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。當(dāng)采用膠囊劑型、片劑、粉劑、粒劑時(shí)，所添加的輔料可為藥用淀粉，糊精，β-CD(β-環(huán)糊精)及微晶纖維素中的任意一種，雙嘧達(dá)莫與藥用淀粉，糊精，β-CD及微晶纖維素的重量份數(shù)比分別為1∶5-15、1∶0.05-0.5、1∶0.01-0.5、1∶0.05-0.5。
膠囊可采用鋁塑封包裝，每粒膠囊的重量約為225mg，其中有效成分雙嘧達(dá)莫的重量約為25mg，成人口服用量一般為75-100mg/天，療程為10至20天。
以雙嘧達(dá)莫為活性成分的抗惡性腫瘤藥物與目前臨床上常用的抗代謝化療藥(如5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、阿糖胞苷等)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)1)毒性小，無(wú)明顯不良反應(yīng)；2)療效明顯，對(duì)人的肺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌等抑瘤率可達(dá)40％-96％；3)具有廣譜抗癌活性，對(duì)多種惡性腫瘤及白血病均有不同程度的抗癌作用，其中對(duì)白血病、肺癌、肝癌的療效較佳，總有效率可達(dá)80％以上；4)可與抗代謝化療藥合用，以達(dá)到增效減毒的作用，并可降低化療藥的多藥耐藥性；5)主要用藥途徑為口服，用藥方便、安全，在家庭及旅途中均可用藥；6)其抗癌作用具有多種藥理功能，包括阻斷細(xì)胞核苷轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的核苷補(bǔ)救合成途徑，其抗癌作用超過(guò)抗代謝化療藥的阻斷核苷從頭合成途徑；體內(nèi)誘生干擾素，其有效量明顯低于其它低分子干擾素誘導(dǎo)劑；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化，降低其惡性表型及標(biāo)志酶活性，阻滯細(xì)胞進(jìn)入S期而不損傷DNA鏈；逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)多種藥的耐藥性，增強(qiáng)對(duì)化療藥的敏感性；增強(qiáng)NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的活力，提高機(jī)體免疫的功能等。以上這些性能均顯示出雙嘧達(dá)莫在抗癌作用中的獨(dú)特之處，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。


圖1為本發(fā)明膠囊劑型抗腫瘤藥物的制備工藝流程圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1、輔料、制粒條件及包裝材料對(duì)DP的影響1、輔料選擇主要成分DP在膠囊劑中的含量很少，因而需用輔料充填，本試驗(yàn)將β-CD、藥用淀粉、糊精及微晶纖維素分別與DP混合，在強(qiáng)光(4900LX)、高溫(60℃)、高濕(濕度為92％)的條件下，考察上述輔料對(duì)DP的影響，具體步驟如下每次稱取DP2.5g，分別與上述四種輔料各22.5g混勻，每份共計(jì)25g，再將其分成三小份，分別放入光照箱(4900LX)、恒溫箱(60℃)和含有飽和KNO3溶液的干燥器中(濕度為92％)進(jìn)行加速破壞，同時(shí)放入DP原料(對(duì)照)，測(cè)定DP含量，試驗(yàn)結(jié)果如表1所示
表1 輔料對(duì)DP影響的試驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)加速破壞試驗(yàn)，表明所選用輔料對(duì)DP本身的變化無(wú)明顯的保護(hù)作用，說(shuō)明要使藥物穩(wěn)定，需采取避光、隔絕空氣及冷藏條件。
2、干壓制粒條件的確定以DP為活性成分的膠囊型藥物的制備工藝是采用干法直接壓制成粒。影響干壓制粒質(zhì)量的因素很多，包括輔料種類、含水量及工作壓力等。本實(shí)驗(yàn)選擇淀粉和β-CD兩種輔料，在不同含水量和壓力條件下制成顆粒，并對(duì)其顆粒的密度、流動(dòng)性等進(jìn)行測(cè)試，以水為介質(zhì)測(cè)定顆粒的崩解度，結(jié)果如表2所示表2 以水為介質(zhì)測(cè)定顆粒的密度、流動(dòng)性及崩解度試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，β-CD的壓塑性好，在同樣的壓力和水分條件下，顆粒較緊密，淀粉在壓力50Kg/cm2，水分在5％-6％的條件下，其密度與流動(dòng)性均較好，二者所制得顆粒的崩解度無(wú)明顯差異。
3、藥品包裝對(duì)其穩(wěn)定性的影響由于DP對(duì)溫度、空氣濕度及光照條件均較敏感，因而采取密閉、隔絕空氣和避光的措施是保證藥物療效的重要因素。本實(shí)驗(yàn)采用干法用β-CD和淀粉填充膠囊，塑鋁膜，包裝成袋，將其分別置于溫度為60℃和40℃下，濕度為92％的兩種環(huán)境中，以未包裝的相同的膠囊為對(duì)照，進(jìn)行加速破壞實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表3所示表3 藥品包裝對(duì)DP穩(wěn)定性的影響

結(jié)果表明，包裝材料可大大降低藥物的降解速度，起到對(duì)藥物很好的保護(hù)作用。兩種輔料(淀粉、β-CD)作為DP的填充劑對(duì)DP的影響無(wú)明顯差異。但因β-CD的價(jià)格相對(duì)昂貴，因而本發(fā)明下述實(shí)施例中選用淀粉為本發(fā)明應(yīng)用的輔料。
實(shí)施例2、DP膠囊劑的制備1、膠囊劑的配方DP 25g，淀粉 200g；制成1000粒膠囊，每粒重225mg，每粒含DP11.1％；2、如圖1所示，本發(fā)明制備抗腫瘤DP膠囊的具體步驟如下1)將淀粉于80℃-90℃下干燥至含水量為3％-5％，備用；2)取雙嘧達(dá)莫與干燥后的淀粉混合，充分?jǐn)嚢瑁粱旌纤幏蹫槌赛S色，取出；3)用干法制粒；4)填充膠囊，拋光；5)用雙鋁進(jìn)行外包裝即可。
實(shí)施例3、DP的抗腫瘤實(shí)驗(yàn)1、體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)選用人肺癌(A549)、人肝癌(BEL-7402)、人胃癌(BCK-823)及人白血病(HL60)四種瘤株，喃氟啶(T-207)為陽(yáng)性對(duì)照藥，檢測(cè)不同計(jì)量的DP對(duì)體外腫瘤細(xì)胞的抑制作用。實(shí)驗(yàn)時(shí)，用0.1N HCl溶解DP，再用HK液(原料采購(gòu)自北京化工廠)稀釋至所需的培養(yǎng)體系中藥物終濃度分別為0、20、40、80μg/ml，T-207的終濃度分別為0.3、0.6、1.2μg/ml，空白對(duì)照組不加藥，將容積為30ml的方瓶中接種約1000個(gè)左右細(xì)胞，37℃培養(yǎng)24h后加藥，再培養(yǎng)7-8天，取樣，用結(jié)晶紫染液染色，統(tǒng)計(jì)含50個(gè)以上細(xì)胞團(tuán)的克隆數(shù)，按下式分別計(jì)算其克隆形成率(％)及抑制率(％)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4所示


表4 不同劑量的DP對(duì)瘤株的抑制率試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，DP在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，對(duì)四株人癌細(xì)胞均有較好的抑制作用，在相同濃度下，對(duì)各瘤株的抑制率并無(wú)明顯差異(ρ＞0.05)，且高于陽(yáng)性對(duì)照藥喃氟啶對(duì)瘤株的抑制率(除大劑量對(duì)BCK-823瘤株的抑制率)。
2、荷瘤裸鼠試驗(yàn)選用Balb/c荷瘤裸鼠試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，每?0只，分成空白對(duì)照組、陽(yáng)性藥對(duì)照組(T-20710.0mg/ml)及DP三個(gè)劑量組(20、80、200mg/Kg)，同批試驗(yàn)同一性別，體重20g左右，在無(wú)菌條件下飼養(yǎng)，每次接種瘤細(xì)胞數(shù)為106-107個(gè)/只，皮下注射7-8天長(zhǎng)出瘤塊，選擇腫瘤塊直徑大于1cm的裸鼠試驗(yàn)，每日按上述劑量給藥一次，連續(xù)給藥30天，平行做三次試驗(yàn)，觀察試驗(yàn)動(dòng)物的體重、食欲、一般活動(dòng)情況，活殺后測(cè)量瘤重及直徑，各主要臟器(包括心、肝、腎、脾、胃等)的重量、臟器指數(shù)及其組織病理學(xué)等指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5-6所示表5 三批荷瘤裸鼠試驗(yàn)的抑瘤率統(tǒng)計(jì)


表6 對(duì)A2780荷瘤裸鼠瘤體直徑及病理學(xué)檢查結(jié)果

注腫瘤結(jié)節(jié)直徑若小于1cm，則表明瘤體明顯縮??；無(wú)結(jié)節(jié)表明瘤體消退情況。
上述動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明DP對(duì)A549，BCK-823，A2780三種人癌均有較好的抑瘤效果。其中對(duì)A549的瘤體縮小率及抑瘤率較高，接近于T-207陽(yáng)性對(duì)照藥水平(83％-88.6％)，但各劑量組間無(wú)明顯差異；對(duì)BCK-823瘤株，除20mg/Kg劑量組的腫瘤縮小率(7.22％)和抑瘤率(27.7％)較低外，其余兩個(gè)劑量組的上述兩項(xiàng)指標(biāo)均隨劑量的增大而增高，并超過(guò)T-207陽(yáng)性對(duì)照組的水平(38.5％-56.2％)；對(duì)A2780獲得了同樣的效果隨用藥劑量的增大，腫瘤縮小率和抑瘤率增高，相當(dāng)于T-207水平(37.4％-55.8％)。A2780荷瘤裸鼠臟器病理學(xué)檢查結(jié)果表明，空白對(duì)照組瘤體直徑均超過(guò)1cm，未見(jiàn)瘤體消退現(xiàn)象，而T-207和DP組的瘤體直徑普遍小于1cm，T-207及DP劑量組分別有1只動(dòng)物和2只動(dòng)物未見(jiàn)瘤塊，而且空白對(duì)照組有5只動(dòng)物的癌細(xì)胞有肌肉侵潤(rùn)現(xiàn)象，T-207及DP各組個(gè)有2只動(dòng)物的癌細(xì)胞有肌肉侵潤(rùn)現(xiàn)象，但除DP的高劑量組有1只動(dòng)物的發(fā)生癌細(xì)胞的臟器轉(zhuǎn)移外，其余均未見(jiàn)癌細(xì)胞發(fā)生臟器轉(zhuǎn)移，說(shuō)明DP可有效防止癌細(xì)胞的擴(kuò)散。
3、毒理、毒性試驗(yàn)1)一般藥理試驗(yàn)采用貓和大鼠試驗(yàn)?zāi)Ｐ?購(gòu)自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院)，用貓(24只，雌、雄各半，體重2.4-3.7Kg，分為4組，每組6只，用藥劑量分別為30、60、120mg/Kg)試驗(yàn)，觀察DP對(duì)血壓、呼吸頻率、心率等影響；用鼠(40只，雌、雄各半，體重18-20g，分為4組，每組10只，用藥劑量分別為60、120、240mg/Kg)試驗(yàn)，觀察DP對(duì)大鼠自主活動(dòng)情況的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，DP的三個(gè)劑量組對(duì)貓的血壓、呼吸頻率與幅度、心率、心律均無(wú)明顯影響，對(duì)大鼠的自主活動(dòng)次數(shù)也無(wú)明顯影響。
2)DP的急性毒性試驗(yàn)采用小鼠試驗(yàn)?zāi)Ｐ?購(gòu)自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院)，昆明種小鼠(40只，分為空白對(duì)照組和DP組，每組各20只)，一次最大灌胃口服給藥量10.63g/Kg，相當(dāng)于臨床擬用量(3.75mg/Kg)的2834倍，觀察28天，包括小鼠體重增減率、活動(dòng)情況及死亡情況，試驗(yàn)結(jié)果如表7所示表7 DP對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，一次灌胃口服最大給藥量10.63g/Kg，相當(dāng)于臨床給藥量的2834倍，但試驗(yàn)動(dòng)物均未發(fā)生急性毒性反應(yīng)，僅見(jiàn)雄性小鼠體重的增長(zhǎng)率高于雌性小鼠，說(shuō)明DP的毒性很小。
3)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)采用大鼠試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，SPF級(jí)Wistar大鼠(購(gòu)自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院，176只，體重90-100g)，分為空白對(duì)照組及DP三個(gè)劑量組(93.75、187.5及375mg/Kg)，共四組，每組44只大鼠，空白對(duì)照組給予同劑量的生理鹽水，每日灌胃給藥一次，連服6個(gè)月，觀察指標(biāo)包括試驗(yàn)動(dòng)物的一般生理指標(biāo)及外周血相、血液生化、肝功、腎功等主要臟器器官指數(shù)及組織病理學(xué)檢查檢查等的變化，試驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠口服不同劑量(93.75、187.5及375mg/Kg)的DP，分別為臨床用藥量的25、50及100倍，連續(xù)給藥6個(gè)月，未見(jiàn)各項(xiàng)指標(biāo)異常，不同劑量組間也無(wú)明顯差異(ρ＞0.05)，說(shuō)明長(zhǎng)期服用DP是安全的，無(wú)毒性的累積效應(yīng)。
實(shí)施例4、DP膠囊劑的臨床試驗(yàn)對(duì)已確診為中晚期的癌癥患者服用實(shí)施例2制備的DP膠囊劑后進(jìn)行初步臨床觀察，包括療效及不良反應(yīng)等，先后對(duì)肺癌(各型)、肝癌、胃癌、腸癌、白血病、卵巢癌、淋巴癌、鼻咽癌等10多種340例惡性腫瘤患者進(jìn)行觀察，對(duì)其中記錄資料較完整的204例病例進(jìn)行初步分析，結(jié)果如表8所示表8 DP膠囊劑的臨床試驗(yàn)結(jié)果

注根據(jù)國(guó)際通用標(biāo)準(zhǔn)CR為完全緩解，PR為部分緩解，NC為無(wú)變化，PD為增大。
試驗(yàn)結(jié)果表明，DP對(duì)多種癌癥均有較好的療效，其中對(duì)白血病及卵巢癌的療效尤為突出，其余病證的療效均在同一水平上，總有效率達(dá)64.7％以上，且未見(jiàn)明顯不良反應(yīng)，僅見(jiàn)服藥后一過(guò)性胃部不適。
權(quán)利要求
1.雙嘧達(dá)莫在制備抗惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物的劑型為膠囊、片劑、粉劑、粒劑、口服液或注射液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述膠囊劑、片劑、粉劑或粒劑中添加有藥用淀粉，雙嘧達(dá)莫與藥用淀粉的重量份數(shù)比為1∶5-15。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述膠囊劑、片劑、粉劑或粒劑中添加有糊精，雙嘧達(dá)莫與糊精的重量份數(shù)比為1∶0.05-0.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述膠囊劑、片劑、粉劑或粒劑中添加有β-CD，雙嘧達(dá)莫與β-CD的重量份數(shù)比為1∶0.01-0.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4或5所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物采用鋁塑封包裝。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了雙嘧達(dá)莫的新用途，即在制備抗惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的藥物除制成膠囊外，還可以制成片劑、粉劑、粒劑、口服液、注射液等多種形式。當(dāng)采用膠囊、片劑、粉劑或粒劑時(shí)，所添加的輔料可為藥用淀粉，糊精，β－CD及微晶纖維素中的任意一種，雙嘧達(dá)莫與藥用淀粉，糊精，β－CD及微晶纖維素的重量份數(shù)比分別為1∶5－15、1∶0.05－0.5、1∶0.01－0.5、1∶0.05－0.5。雙嘧達(dá)莫具有毒性小、對(duì)腫瘤的療效高、廣譜抗癌的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)人的白血病、實(shí)體癌抑瘤率達(dá)40％－96％，臨床試用總有效率達(dá)64.7％以上，在醫(yī)學(xué)上將具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61K9/16GK1768754SQ20041008886
公開(kāi)日2006年5月10日 申請(qǐng)日期2004年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月5日
發(fā)明者周淑珍, 劉國(guó)廉 申請(qǐng)人:劉國(guó)廉