專利名稱：用于治療肺動脈高血壓的雌二醇代謝物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及應(yīng)用雌二醇代謝物治療肺動脈高血壓及其后遺癥(該方法包括心力衰竭、和肺以及心機(jī)功能障礙)的方法。更具體地說，本發(fā)明涉及具有很弱的雌激素活性的雌二醇代謝物(如2-羥基雌二醇、4-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇和4-甲氧基雌二醇)的用途，這些物質(zhì)都可以以控釋制劑的形式傳輸，用于治療肺動脈高血壓以及相關(guān)疾病。
背景技術(shù)：
肺動脈高血壓(Pulmonary hypertension，PH)是綜合性的健康難題，其特征為肺動脈的血壓升高。在患有PH的患者中，肺動脈內(nèi)的血壓在靜止時升高至遠(yuǎn)高于正常水平的大約為14mm Hg。在PH患者中發(fā)現(xiàn)的一般的水平為從靜止時的25mm Hg到勞累時的30mm Hg或者更高的范圍。
這種升高的壓力是與肺內(nèi)小血管中的變化有關(guān)，導(dǎo)致血流過那些血管的阻力增加。反過來，這種增加的阻力置張力于右心室，使得其必須比平常更加用力地工作，以運(yùn)載足夠量的血液通過肺部。
一段時間后，肺內(nèi)血管的瘢疤化或纖維化使得這些血管對血流的阻力更大，而且一些血管變得被完全地阻塞。此外，血管內(nèi)瘢疤化和肺內(nèi)炎癥的存在增加了它們的總重量。在瘢疤組織中的持續(xù)增加和在血管內(nèi)的額外阻力導(dǎo)致心臟不得不更用力地泵送，以移動血液通過被損害的血管。最后，心臟擴(kuò)大以滿足這種需要，而且在大小方面的增加是與能最終導(dǎo)致心力衰竭的收縮性和效率的降低是相關(guān)的。遺憾的是，直到這種程度時，患有PH的大多數(shù)患者才被診斷出并開始治療。
尚無治愈PH的方法。存在一些可選擇的治療方法，這些方法該方法包括以增加血流為目的治療劑例如如抗凝血劑以防止血凝塊形成，和以減輕肺動脈內(nèi)收縮為目的的鈣通道阻滯劑。另外，通過留置導(dǎo)尿管，連續(xù)地靜脈或者皮下輸注前列環(huán)素或前列環(huán)素類似物可以緩解被壓縮的血管。其它的療法該方法包括給予內(nèi)皮素拮抗劑以降低肺動脈壓、給予利尿劑以降低全身流體(systemic fluid)的積存、給予地高辛以增加心輸出量和補(bǔ)充氧氣以增加對血液供應(yīng)氧。PH患者可以是在任何給出的時間進(jìn)行一種或者多種組合治療。
遺憾的是，許多患者對這些療法響應(yīng)較差或者一段時間后停止了對它們的響應(yīng)。到這種程度后所剩的唯一可選擇方案是肺移植。根據(jù)器官分享的聯(lián)合網(wǎng)絡(luò)(United Network for Organ Sharing，UNOS)(統(tǒng)計結(jié)果)，對于所有在1987年至1992年間進(jìn)行了肺移植的患者，其一個月、一年和三年的存活率分別為85％、69％和51％。在那些年之后，結(jié)果稍有好轉(zhuǎn)。對于患有PH的患者而言，另一個障礙是由于心力衰竭需要心臟和肺臟都移植。因此，需要一種有效的治療方法以幫助所有年齡的和任一性別的個體患者，作為對這種有風(fēng)險的且價格非常昂貴的最后求助手段的替代手段。
本發(fā)明是特別有用的，因為這里所用的雌二醇代謝物具有很少的副作用。而且，可以將雌二醇以可提供的緩釋藥物制劑形式進(jìn)行給藥，這一改進(jìn)將提供用途廣泛的組合物以作為治療肺動脈高血壓和相關(guān)疾病的治療方法。
本文引述的文獻(xiàn)并不意味著認(rèn)可所有的都與現(xiàn)有技術(shù)有關(guān)。所有的關(guān)于日期的敘述以及關(guān)于這些文獻(xiàn)內(nèi)容的表述，是基于本申請人可得到信息的主觀表達(dá)，但并不構(gòu)成對日期或者這些文獻(xiàn)內(nèi)容的準(zhǔn)確性的任一認(rèn)可。
發(fā)明的概述本發(fā)明提供了用于治療個體患者的肺動脈高血壓及與其相關(guān)的心力衰竭的其它疾病的方法。
本發(fā)明的這些和其它目的是通過一種或者多種下列的實施方案來實現(xiàn)的。
在一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療個體患者肺動脈高血壓的方法，共包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在優(yōu)選的實施方案中，所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
在另一優(yōu)選的實施方案中，所述的組合物是所述的雌二醇代謝物的藥物前體。
在進(jìn)一步優(yōu)選的實施方案中，所述的組合物該方法包括控釋制劑。
在另一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者的中心靜脈壓，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者的心臟重量，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在再一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者的肺臟重量，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在另一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者中的右心室肥大，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者的肺血管阻力，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在另一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以降低個體患者的肺血管纖維化，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在再一個方面，本發(fā)明的特征是用于治療肺動脈高血壓的方法，以減少在個體患者的肺臟、心臟和肺動脈中的炎癥、細(xì)胞的增殖、血管的改型和血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)，該方法包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明的特征是用于治療個體患者心力衰竭的方法，其包括對該患者給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
從下列優(yōu)選的實施方案和權(quán)利要求書的描述，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將是顯而易見的。
附圖的簡要說明下面的附圖構(gòu)成本說明書的一部分，并且被包括以進(jìn)一步說明某些實施方案。通過參考一個或多個這些圖并結(jié)合本文提出的特定實施方案的詳細(xì)描述可以更好地理解這些實施方案。


圖1.表示，根據(jù)本發(fā)明，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對肺臟重量(左圖)(“肺臟”)和肺臟重量與體重的比率(右圖)(“肺臟/體重”)的作用。左圖的Y軸是以克為單位，而右圖Y軸是以每公斤體重克為單位。用單因子方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較采用Fisher最小顯著性差異檢驗進(jìn)行(星號)。
圖2.表示，根據(jù)本發(fā)明對心臟重量(左圖)(“心臟”)和心臟重量與體重比率(右圖)(“心臟/體重”)的治療效果。以皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對動物進(jìn)行治療。左圖的Y軸是以克為單位，而右圖的Y軸是以每公斤體重克為單位。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較采用Fisher最小顯著性差異檢驗完成((星號)。
圖3.表示，根據(jù)本發(fā)明，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對右心室重量(左圖)(“右心室”)和右心室重量與體重的比率(右圖)(“右心室/體重”)的作用。左圖的Y軸是以克為單位，而右圖Y軸是以每公斤體重克為單位。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較采用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(星號)。
圖4.表示皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對右心室重量除以左心室加上隔膜重量的比率的作用。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較采用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(星號)。
圖5.表示，根據(jù)本發(fā)明，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對中心靜脈壓(“CVP”)的作用。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(星號)。
圖6A-6C表示皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對肺(圖6A)、右心室(圖6B)和肺動脈(圖6C)內(nèi)的細(xì)胞增殖(PCNA染色)的作用。標(biāo)記代表陽性染色的總檢驗區(qū)的百分比(“標(biāo)記指數(shù)”)。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較采用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(字母)。
圖7A和7B表示，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對肺(圖7A)和肺動脈(圖7B)內(nèi)的炎性細(xì)胞(ED1+細(xì)胞)(“ED1+細(xì)胞的數(shù)目”)的作用。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(字母)。
圖8.表示，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對肺內(nèi)的血管內(nèi)皮生長因子(“VEGF”)表達(dá)的作用。作為平均光密度(左y-軸)(“平均光密度”)來評價陽性區(qū)的染色強(qiáng)度；作為快速計數(shù)(quick score)(右y-軸)(“快速計數(shù)”)來評價用于平均光密度的被調(diào)整的總?cè)旧?。用單因素方差分?1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較用Fisher最小顯著性差異檢驗完成。
圖9.表示，皮下給予生理鹽水(1ml/kg)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(“對照組”)(n＝6)，皮下給予單豬尿豆堿(“MCT”)(60mg/kg，n＝7)和溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)，皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-羥基雌二醇(“MCT+2HE”)(10μg/kg/小時)(n＝7)以及皮下給予單豬尿豆堿(60mg/kg)和2-甲氧基雌二醇(“MCT+2ME”)(10μg/kg/小時)(n＝7)對小尺寸肺動脈內(nèi)的肌動蛋白染色來評價的以微米壁厚度(“壁厚度”)的作用。用單因素方差分析(1F-Anova)分析數(shù)據(jù)，以獲得每個組均值中的總差異。Post hoc比較用Fisher最小顯著性差異檢驗完成(字母)。
發(fā)明的詳述I.定義術(shù)語“可生物降解的”是指在特定治療情況中可接受的一段時間內(nèi)在體內(nèi)溶解或者降解的在特定聚合物。這段時間一般為少于5年并在曝露于生理學(xué)的pH值和溫度，例如pH值為從6至9，溫度為從25℃至40℃，之后通常少于一年。
“肺動脈高血壓”或“PH”是指任何一種或者所有與肺動脈高血壓相關(guān)的癥狀。PH的診斷類型該方法包括此肺動脈高血壓、原發(fā)性肺動脈高血壓、與其它原因有關(guān)的的肺動脈高血壓、與呼吸系統(tǒng)疾病有關(guān)的肺動脈高血壓、歸因于慢性血栓或栓塞疾病的肺動脈高血壓、歸因于直接影響肺動脈血管的疾病的肺動脈高血壓、與膠原血管疾病有關(guān)的肺動脈高血壓、與慢性HIV感染有關(guān)的肺動脈高血壓、與藥物或者毒素有關(guān)的肺動脈高血壓以及肺靜脈高血壓。此外，PH患者可以是由于中心靜脈壓的增加而處于危險中或者目前正患有心力衰竭。由于疾病的許多表現(xiàn)都被稱作PH，所以本發(fā)明使用的術(shù)語“肺動脈高血壓”或者“PH”是指任一的或者所有的上述疾病。
術(shù)語“雌二醇”是指17β-雌二醇。
術(shù)語“雌二醇代謝物”是指17β-雌二醇的代謝物，所述17β-雌二醇如兒茶酚雌二醇(catecholestradiol)和甲氧基雌二醇，其能發(fā)揮很弱的雌激素活性并且對雌激素受體具有較低的親合性，和/或其合成的衍生物及類似物，其實例包括于此2-甲氧基雌二醇、4-甲氧基雌二醇、2-羥基雌二醇和4-羥基雌二醇。
“個體患者”是指任意性別的動物或者人。
術(shù)語“藥物前體”是指能釋放雌二醇代謝物的化合物。
根據(jù)本發(fā)明，分離的或者生物純的雌二醇代謝物是已經(jīng)從天然環(huán)境中脫離的化合物。同樣地，“分離”和“生物純的”無需反映該化合物已被純化的程度。本發(fā)明分離的化合物可以從天然來源中獲得，也可應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)制造或者用化學(xué)合成制造。
II.方法本發(fā)明提供了應(yīng)用雌二醇代謝物來治療PH和相關(guān)疾病，例如心力衰竭以及肺動脈和心臟機(jī)能障礙的方法。
特別是，本發(fā)明提供了用于降低患有PH個體患者中的中心靜脈壓和/或動脈壓，以及減少心臟重量、肺重量、右心室肥大、血管阻力、血管纖維化和減少炎癥、細(xì)胞增殖、血管改型以及這類個體患者的肺動脈、心臟以及肺動脈內(nèi)的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的方法。本發(fā)明也提供了給予治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物來治療這類疾病的方法。
用于實現(xiàn)本發(fā)明所述方法的雌二醇代謝物包括17β-雌二醇的代謝物，所述17β-雌二醇如兒茶酚雌二醇(catecholestradiol)和甲氧基雌二醇，其能發(fā)揮很弱的雌激素活性并且對雌激素受體具有較低的親合性，其實例包括(但不限于此)2-甲氧基雌二醇、4-甲氧基雌二醇、2-羥基雌二醇和4-羥基雌二醇以及包括它們的合成衍生物及類似物的其它雌二醇。可將這類雌二醇代謝物結(jié)合在控釋制劑中，也可與另一種治療劑組合。這類雌二醇代謝物也可從藥物前體中釋放。
在控釋制劑中可使用的可生物降解微粒或者納米粒子該方法包括一種或多種聚合物，例如聚(丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(乳酸)、聚(羥基乙酸)、聚(乳酸-共-羥基乙酸)、聚己酸內(nèi)酯、聚碳酸酯、聚酰胺酯、聚酐、聚(氨基酸)、聚原酸酯、聚縮醛、聚氰基丙烯酸酯、聚醚酯、聚(二氧六環(huán)酮)、聚(亞烷基烷基化物)、聚乙二醇與聚原酸酯的共聚物、可生物降解的聚亞胺酯，及混合物和共聚物。
雌二醇代謝物用于本發(fā)明的雌二醇代謝物包括兒茶酚雌二醇如2-羥基雌二醇(雌甾-1，3，5(10)-三烯-2，3，17-三醇(17β))或者4-羥基雌二醇(雌甾-1，3，5(10)-三烯-3，4，17-三醇(17β))或甲氧基雌二醇如2-甲氧基雌二醇(雌甾-1，3，5(10)-三烯-2-甲氧基-3，17-二醇(17β))或者4-甲氧基雌二醇(雌甾-1，3，5(10)-三烯-4-甲氧基-3，17-二醇(17β))。所有這些化合物的商品化制劑都可以容易地得到。
也可以將雌二醇代謝物結(jié)合到控釋制劑中。這種控釋制劑可以是可生物降解的微粒、可生物降解的納米粒子、微片、結(jié)晶、凝膠、水凝膠、脂質(zhì)體等。此外，可以將該雌二醇代謝物結(jié)合到器械中如植入體、陰道環(huán)、滲透泵、擴(kuò)散器械和經(jīng)皮傳輸器械。根據(jù)本發(fā)明，也可使用雌二醇代謝物的藥物前體和/或其合成衍生物和類似物。特定的實例該方法包括羥基雌二醇和甲氧基雌二醇的酯。
顯而易見，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員，上面所列的化合物僅為示例性的，并可以根據(jù)在母體雌二醇化合物上的特定羥基化或者甲基化位點采取多種變化。例如，可將雌二醇在許多位點上進(jìn)行羥基化或者甲基化，而且這些變化在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。
給藥方式將本發(fā)明的治療組合物以待治療個體患者能耐受的賦形劑制成制劑。這類賦形劑的實例該方法包括水、生理鹽水、林格氏溶液、葡萄糖溶液、漢克氏溶液(Hank’s solution)及其他生理上平衡鹽溶液。也可應(yīng)用非水溶媒，如固定油、芝麻油、油酸乙酯或甘油三酯。其它有用的制劑該方法包括含有增稠劑如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或者右旋糖酐的懸浮液。賦形劑也可含有少量的添加劑，如增加滲透性和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)。
可用于實現(xiàn)本發(fā)明的緩沖劑的實例包括磷酸鹽緩沖劑、碳酸氫鹽緩沖劑和三羥甲基氨基甲烷緩沖劑，而防腐劑的實例包括乙基東硫代水楊酸鈉、甲酚、福爾馬林和芐醇。標(biāo)準(zhǔn)制劑也可以是可注射的液體或者固體，所述的固體可以用適宜的液體處理作為注射用的混懸液或溶液。因此，在非液體制劑中，所述的賦形劑可含有葡萄糖、人血清白蛋白、防腐劑等，在給藥前向其中加入無菌水或者生理鹽水。
也可使用本文提供的藥物化合物的合適的的局部、口服、全身和非胃腸制劑表，實施本發(fā)明。所述的制劑可以各種治療劑量的形式在用于給藥的常規(guī)溶媒中給藥。例如，可以將所述的化合物制成用于口服給藥的片劑、膠囊劑(每粒該方法包括定時釋放和緩釋制劑)、丸劑、粉劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、溶液、混懸劑、糖漿和乳劑的形式。同樣地，也可以靜脈給藥(推注和滴注)，在血管成形術(shù)/導(dǎo)管術(shù)期間，腹膜內(nèi)給藥、皮下給藥、有或無閉塞的局動脈給藥或者肌內(nèi)給藥，所有使用的形式對于藥學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言是熟知的。
本發(fā)明的治療組合物也可包括載體。載體包括在待治療的個體患者中增加治療組合物的半衰期的化合物。適宜的載體該方法包括此聚合的控釋媒介、可生物降解的植入體、脂質(zhì)體、細(xì)菌、病毒、其它細(xì)胞和二醇類。
控釋制劑本發(fā)明的方法可使用控釋制劑，該控釋制劑能將本發(fā)明的組合物緩慢地釋放至個體患者體內(nèi)。如本文所用的，控釋制劑可包括在控制媒介中的本發(fā)明組合物。這類控釋制劑在現(xiàn)有技術(shù)中是熟知的。適宜的控釋制劑包括此生物相容的聚合物、其它聚合的基質(zhì)、膠囊、微囊、微粒、納米粒子、微片(參見美國專利號6,238,284和5,736,154)、晶體(參見美國專利號5,827,531)、大丸藥(bolus)制劑、脂質(zhì)體(參見美國專利號6,339,069和6,143,716)脂質(zhì)球(lipospheres)、凝膠(參見美國專利號5,830,506)和水凝膠(參見美國專利號6,372,813、6,372,248和6,367,929)。這些控釋媒介也包括器械，如陰道環(huán)(參見美國專利號6,103,256和5,788,980)、植入體(參見美國專利號6,251,418和5,874,098)、滲透泵、擴(kuò)散設(shè)備以及經(jīng)皮傳輸系統(tǒng)。本發(fā)明的其它控釋制劑包括液體和混懸液，所述的液體和混懸液在給個體患者用藥時就地形成固體或者凝膠。優(yōu)選的控釋制劑是可生物降解的。在現(xiàn)有技術(shù)中所有的這些組合物都是已知的。
本發(fā)明的方法也可使用控釋制劑，該控釋制劑能以足夠獲得和維持所述組合物的治療劑量水平的速率釋放本發(fā)明的組合物至個體患者。優(yōu)選地，將治療組合物釋放一段時間，從1天至約12個月的范圍。更優(yōu)選地，將這類組合物在2至30天的時間內(nèi)釋放。
劑量為了以有效的方式給予本發(fā)明的治療組合物，在劑量方案中的參數(shù)是變化的。這些參數(shù)包括個體患難劑量大小、給藥次數(shù)、給藥的頻率以及給藥的方式?，F(xiàn)有技術(shù)人員可以完成這些參數(shù)的改變。適宜的單一劑量是這樣的劑量，當(dāng)給藥一次或者多次超過適宜的一段時間，其能夠保護(hù)(如預(yù)防或者治療)動物或人免于疾病。本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)患者給出的疾病可以確定是否需要額外給予治療組合物。
肺動脈高血壓的治療肺動脈高血壓可分為五種主要的種類。第一種是肺動脈高血壓(PAH)并包括肺動脈損傷的個體患者。有兩種類型的PAH，原發(fā)性肺動脈高血壓(PPH)和涉及其它起因的肺動脈高血壓。原發(fā)性肺動脈高血壓沒有任何明顯的起因而存在，盡管大約10％的病例可能具有遺傳成分；原因是它存在于有PPH史的家庭。此外，嬰兒期或者后期的嬰兒可能表現(xiàn)心臟或者肺動脈功能的困難。這種類型的PPH被稱作新生兒的持續(xù)性肺動脈高血壓，其特征為發(fā)紺和伴有呼吸困難的呼吸道窘迫。嬰兒的胸動脈X光照片可表現(xiàn)與吸氣相容的各種異常、肺炎、膈疝、玻璃狀膜疾病。新生兒的持續(xù)性肺動脈高血壓的診斷可以超聲心動圖來確定。
涉及其它起因的肺動脈高血壓是與接觸毒素(例如含有芬氟拉明或右芬氟拉明的減肥藥物、如可卡因或甲基苯丙胺的非法物質(zhì)或者污染的食物或水)有關(guān)。這種PAH亞種類的其它起因包括疾病，例如人類免疫缺陷病毒(HIV)感染；膠原血管疾病，例如硬皮癥、狼瘡或者類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；或者肝病，例如慢性肝疾病或者門靜脈阻塞。
第二種類的PH是與呼吸系統(tǒng)疾病相關(guān)的肺動脈高血壓。這在已經(jīng)患有肺氣腫、哮喘性支氣管炎、睡眠窒息癥、慢性阻塞性肺部疾病、間質(zhì)性肺部疾病、睡眠呼吸紊亂、肺泡換氣不足障礙、新生兒肺部疾病、肺泡-毛細(xì)管發(fā)育不良或者慢性曝露于高緯度的患者中是常見的。
第三種類的肺動脈高血壓是由于慢性血栓或者栓塞性疾病引起的。這在已經(jīng)呈現(xiàn)為肺動脈內(nèi)的血凝塊、肺部栓塞或者鐮刀狀細(xì)胞病的個體患者中是常見的。此外，患有末梢肺動脈阻塞(如由血栓、腫瘤、寄生蟲或者外物導(dǎo)致的)的個體患者也可分類為具有由于慢性血栓或者栓塞性疾病的PH。
第四種類的肺動脈高血壓是由于疾病直接影響肺動脈血管。此種疾病類在患有炎癥疾病(如血吸蟲病或者結(jié)節(jié)病或者肺動脈毛細(xì)管疾病)的患者中常見。
第五種類是肺靜脈高血壓(PVH)。這是由心臟左側(cè)的疾病或缺陷引起的，例如左側(cè)房性或室性心臟疾?。蛔髠?cè)心臟瓣膜疾??；中心肺靜脈的外部擠壓，如具有纖維性縱膈感染(fibrosing mediastinitis)或者腺病或者腫瘤；或者肺部靜脈-阻塞疾病。患有PVH的個體患者表現(xiàn)為肺動脈壓增加，但是這種很少導(dǎo)致嚴(yán)重的PAH。
PH的早期癥狀包括呼吸短促、持續(xù)地疲勞感、眩暈、暈厥踝或腿腫脹以及胸痛。通過超聲心動圖、心電圖、右心臟導(dǎo)管術(shù)、六分鐘走步測試進(jìn)一步評價患者的心臟和肺部和/或日常生活任務(wù)中的功能評價，它們可能不適于進(jìn)入特定的診斷種類，但是具有許多屬于PH的標(biāo)準(zhǔn)。此外，任何類型的PH患者由于中心靜脈壓的持續(xù)增加都有心力衰竭的風(fēng)險。由于疾病的多種表現(xiàn)都稱作PH，所以本發(fā)明使用的術(shù)語“肺動脈高血壓”或者“PH”是指上面所列癥狀的任何種類。
根據(jù)本發(fā)明，在治療PH時，可以將雌二醇代謝物結(jié)合至可生物降解的微?；蛘呒{米粒子中，并可對患者給藥。用與可生物降解的微粒或者納米粒子相關(guān)的雌二醇代謝物和至少一種其它的治療PH藥劑(“PH藥劑”)給藥，這也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。PH藥劑可以是，例如抗凝血劑、鈣通道阻滯劑、前列環(huán)素、前列環(huán)素類似物、利尿劑、地高辛、內(nèi)皮素拮抗劑、磷酸二酯酶抑制劑、前列腺素類似物、一氧化氮、腺苷、氧氣或者任何其它適宜的藥劑。通過給予單一組合物或者包含雌二醇代謝物和PH藥劑的藥物制劑，可以實現(xiàn)治療，或者同時用兩種截然不同組合物或制劑治療該患者，其中一種組合物包括雌二醇代謝物，含或者不含相關(guān)的可生物降解聚合物，以及另一種包括PH藥劑。
作為一種選擇，任何雌二醇代謝物的治療可以在間隔數(shù)分鐘至數(shù)周，先于或者后于PH藥劑治療。例如將PH藥劑和任何雌二醇代謝物分開給藥，人們通常確保在每一種藥物的傳輸時間之間尚為期滿的一段顯著的時間內(nèi)給藥，以使PH藥劑和雌二醇代謝物仍然能夠?qū)膊“l(fā)揮有益組合(例如協(xié)同)的作用。在這種實例中，可以考慮在彼此約12-24小時內(nèi)，和更優(yōu)選地在彼此約6-12小時內(nèi)，最優(yōu)選地約12小時的延遲時間內(nèi)給予兩種治療劑。在某些情況下，僅延長治療劑的治療持續(xù)期限是較理想的，例如，當(dāng)分別給藥之間經(jīng)過幾天(2、3、4、5、6、或7)至數(shù)周(1、2、3、4、5、6、7、或8)。適用于組合治療的藥劑是用于PH患者的任何化學(xué)制品化合物或者治療方法。
根據(jù)本發(fā)明治療肺動脈高血壓時，雌二醇代謝物可以被結(jié)合至可生物降解的微?；蚣{米粒子中，而且也可以與另一種藥劑共同給藥，這如此就會發(fā)揮作用以預(yù)防和/或治療肺部血管肥大和纖維化。這將發(fā)揮作用以降低肺部脈管系統(tǒng)內(nèi)壓力和/或減輕心臟和肺部的病狀。
下面的實施例將進(jìn)一步舉例說明但不意味著限制本發(fā)明。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，顯而易見的是，在實施例中描述的技術(shù)代表能夠在實施本發(fā)明中很好地發(fā)揮作用的發(fā)明者發(fā)現(xiàn)的技術(shù)，因此，可以被認(rèn)為組成了目前用于實施的優(yōu)選方式。盡管如此，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，顯而易見的是，在特定實施方案中可以做許多改變的，無論是物質(zhì)還是方法的改變，但仍沒有背離本發(fā)明的精神和范圍。
實施例1實驗設(shè)計在本實驗中使用了總共27只雄性Sprague Dawley大鼠(CharlesRiver，Wilmington，MA)(378+/-12克)。這些動物被飼養(yǎng)于匹茲堡醫(yī)學(xué)中心大學(xué)的動物飼養(yǎng)實驗室設(shè)施中(溫度22℃，光照周期12小時，相對濕度55％)。給動物喂食Pro Lab RHM 3000嚙齒類動物飼料(PMINutrition，Inc，St Louis，MO)并隨意地(ad libitum)給水。試驗遵循了動物福利規(guī)定的指南，以及動物看護(hù)和應(yīng)用委員會批準(zhǔn)的實驗議定書。
將動物隨機(jī)地分配，接受皮下給予生理鹽水(1ml/kg，n＝6)或者單豬尿豆堿(Sigma公司，St Louis，MO)(MCT，60mg/kg皮下給藥)(n＝21)。已知單豬尿豆堿是一種可誘導(dǎo)肺動脈高血壓癥的藥劑。在初始注射后6小時，用含有溶媒(聚乙二醇400，2.5μl/小時)(Sigma公司，St Louis，MO)滲透微泵(minipumps)(型號2ML4，Alza，Palo Alto，CA)植入對照組動物，而將被MCT治療的動物用含有溶媒(MCT組；n＝7)、2-羥基雌二醇(Steraroids公司，Newport，RI)(10μg/kg/小時，MCT+2HE組，n＝7)或者2-甲氧基雌二醇(Steraroids公司，Newport，RI)(10μg/kg/小時，MCT+2ME組，n＝7)的滲透微泵植入。隨機(jī)地分配入MCT、MCT+2HE和MCT+2ME組。
21天后，稱重動物，用戊巴比妥(Sigma公司，St Louis，MO)(50mg/kg)腹膜內(nèi)注射使其麻醉，并用儀器測量血壓、心率和中心靜脈壓。將PE-50導(dǎo)管插入右頸靜脈并前進(jìn)大約1英寸，和連接到低壓分析儀(LPA，Micro-Med.，公司，Louisville KY)用于連續(xù)地測量中心靜脈壓。將另一個PE-50導(dǎo)管插入左頸動脈并連接至血壓分析儀(BPA，Micro-Med.公司，Louisville KY)用于連續(xù)地測量血壓和心率。將連接到PE-50導(dǎo)管的22-G針插入尾靜脈用于傳輸補(bǔ)充的麻醉劑。60分鐘后，進(jìn)行30分鐘的血液動力學(xué)參數(shù)記錄。
通過過量的麻醉劑殺死動物，并取出心臟和肺臟，并稱重。小心地取出心房，并小心地將右心室從左心室剖開。稱重兩個心室，并計算右心室與左心室加上瓣膜的比率。
切除右心室、左心室、主肺動脈和肺的右內(nèi)葉，并用10％福爾馬林緩沖液固定。將該固定的樣品包埋于石蠟中，并切成4微米厚的切片，用于隨后的光學(xué)顯微鏡和免疫組織化學(xué)分析。
為了評價增殖，用原發(fā)小鼠單克隆抗體(1/200稀釋；Dako，Carpenteria，CA)標(biāo)記增殖細(xì)胞的核抗原(PCNA)，并用家兔多克隆抗體(1/50稀釋；Lab Vision，F(xiàn)remont，CA)測定VEGF表達(dá)。用對單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞胞質(zhì)抗原具有特異性的多克隆ED1抗體(Serotec，Raleigh，NC)來標(biāo)記血管(主肺動脈)和肺動脈巨噬細(xì)胞。為了測定非特異性染色，將原發(fā)抗體用磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)代替。沖洗切片，并使用含有被連接到抗生素蛋白的第二種抗體和偶合了生物素的過氧化物酶的LSAB2試劑盒，根據(jù)制造商(Dako公司，Carpinteria，CA)的說明書，進(jìn)一步顯影。用SAMBA 4000成像分析儀(Image Products International，Chantilly，VA)、應(yīng)用被設(shè)計用于免疫染色分析的專用計算機(jī)軟件(免疫-分析，4.1版，微軟公司，Richmond，WA)定量地評價用于PCNA和VEGF的免疫化學(xué)染色。通過平均化陰性對照組織上的幾個域，在所述的陰性對照組織中用PBS代替原發(fā)抗體，軟件設(shè)定密度閾值。
然后，在每個組織上進(jìn)行背景扣除。評價10個高功率域(×400)以獲得染色密度、壁厚度或者用于ED-1的陽性標(biāo)記細(xì)胞。用標(biāo)記指數(shù)報告PCNA和VEGF的結(jié)果，該標(biāo)記指數(shù)代表陽性染色的總檢測區(qū)域的百分比。也評價陽性區(qū)域的染色強(qiáng)度(平均光密度)，然后計算平均快計數(shù)(平均光密度×標(biāo)記指數(shù))。將炎癥響應(yīng)數(shù)據(jù)表達(dá)為每10個高功率域的ED1+細(xì)胞的總數(shù)。
為了評價血管改型，將肺動脈中的血管平滑肌細(xì)胞用平滑肌α-肌動蛋白Ab-1小鼠單克隆抗體(1/100稀釋，Lab Vision，F(xiàn)remont，CA)染色。應(yīng)用商業(yè)化的成像軟件來測定小尺寸肺動脈的內(nèi)壁和介質(zhì)厚度。僅分析具有近似環(huán)狀外形的血管。
應(yīng)用Number Cruncher統(tǒng)計軟件程序(Kaysville，Utah)進(jìn)行統(tǒng)計分析。用單因素方差(1-F ANOVA)的分析進(jìn)行組間比較，然后應(yīng)用FisherLSD檢驗進(jìn)行Post hoc比較。所有的數(shù)據(jù)表示為平均值±S.E.M。
結(jié)果對實驗動物給予單豬尿豆堿以創(chuàng)造一個肺動脈高血壓的模型(參見例如B.Meyrick等人.，Am.J.Physiology 239(5)H692(1980)，和Tanino，Y.，Nippon Rinsho59(6)1076(2001)，所公開的內(nèi)容引入本文僅作參考)。最初，由于單豬尿豆堿誘導(dǎo)血管內(nèi)的心肌內(nèi)膜增殖，在小和大的肺動脈中出現(xiàn)結(jié)構(gòu)的變化。這導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞活性的增加，該活性導(dǎo)致肺重量的增加，反之刺激各種炎癥介子。由于單豬尿豆堿的用藥在肺中的所有這些變化導(dǎo)致肺動脈血管阻力的增加和右心室肥大，其導(dǎo)致右心室重量的增加。
在本實驗中給予單豬尿豆堿產(chǎn)生了預(yù)計的結(jié)果。如圖1中所示，可觀察到肺重量的增加，而且使這些動物的肺部血管阻力增加。肺動脈血管阻力的增加導(dǎo)致肺動脈高血壓，反之，在用單豬尿豆堿治療的動物中，該肺動脈高血壓引起心臟肥大(如圖2中所示)和右心室肥大以及右心室重量的增加(如圖3中所示)。此外，如圖4中所示，單豬尿豆堿治療的動物表現(xiàn)為右心室與左心室加上瓣膜的重量比率變大。如圖5所示，在單豬尿豆堿治療的動物中，中心靜脈壓，肺動脈高血壓和心力衰竭的標(biāo)志也有所升高。
相反地，用單豬尿豆堿和2-羥基雌二醇或者2-甲氧基雌二醇治療的動物沒有表現(xiàn)出與單豬尿豆堿治療相關(guān)的相同水平的不利后果。該雌二醇代謝物顯著地降低了單豬尿豆堿的負(fù)面作用，因為，如圖1，2，3，和4中所示，這些動物并沒有經(jīng)歷肺動脈高血壓、肺重量增加、心臟肥大或者右心室肥大。此外，2-甲氧基雌二醇在降低中心靜脈壓方面是非常有效的，反之，這種降低作用保護(hù)了這些動物免于心力衰竭(見圖5)。
在圖6A-6C中分別表示了在肺部、右心室和主肺動脈中增殖(PCNA染色)的定量分析。明顯的增殖響應(yīng)伴隨單豬尿豆堿誘導(dǎo)的內(nèi)皮損傷和后續(xù)的肺動脈高血壓。在肺部(圖6A)、右心室(圖6B)和主肺動脈(圖6C)中，在單豬尿豆堿治療的動物與對照動物的比較中檢測到增殖細(xì)胞的染色增加。在右心室中的PCNA陽性細(xì)胞的分布暗示了心臟纖維原細(xì)胞的增殖增加；而在肺動脈中，在血管中層和動脈外膜中檢測到顯著的增殖響應(yīng)。2HE和2ME都顯著地(p＜0.001)抑制肺動脈部(-60％和-70％)(圖6A)、右心室(-81％和-77％)(圖6B)和主肺動脈(-83％和-94％，分別為2HE和2ME；圖6C)中的增殖響應(yīng)。
肺動脈高血壓的發(fā)展也與肺內(nèi)顯著的(p＜0.001)炎癥相關(guān)(圖7A，對照與MCT，p＜0.001)。在MCT治療動物的肺動脈中也檢測到炎癥(ED1+)細(xì)胞(圖7B)。雌二醇代謝物幾乎全部地地消除了肺內(nèi)的炎癥響應(yīng)(p＜0.001)，并且抑制了肺動脈中炎癥細(xì)胞的侵潤(分別為圖7A，圖7B)。VEGF表達(dá)的免疫組織化學(xué)分析揭示非常不顯著的變化。相似百分比的肺組織用VEGF的染色陽性(標(biāo)記指數(shù)34.2±2.2，42.8±2.6，37.6±3.3和37.6±3.9，對照，分別的，MCT，MCT+2HE和MCT+2ME組；p＝0.482)。但是，在MCT組中染色的密度(平均光密度)和快計數(shù)指數(shù)均高于對照動物組(圖8)。
在MCT治療大鼠組中的VEGF分布在肺中的半定量分析揭示，在氣管(例如上皮和上皮下平滑肌細(xì)胞)內(nèi)的表達(dá)最高。重要的是，兩種代謝物均傾向于消除這些變化。在MCT治療的動物組中，肺動脈高血壓的發(fā)展是與明顯的血管改型相關(guān)的。較小尺寸肺動脈(平滑肌α-肌動蛋白染色)的免疫組織化學(xué)分析在MCT大鼠中檢測到顯著的血管中層肥大(與對照動物比較，在MCT組中壁厚度增加了87％；圖9)。重要的是，兩種雌二醇代謝物都減少了MCT誘導(dǎo)的血管中層肥大(-50％和-40％，分別為MCT+2HE和MCT+2ME；p＜0.001)。
按照本發(fā)明的特定實施方案已描述和組合物公開方法，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明要求保護(hù)的概念、精神和范圍的情況下，實施一些變化是顯而易見的。更準(zhǔn)確地說，顯而易見的是當(dāng)本文描述的藥劑可以被與化學(xué)和生理學(xué)上都相關(guān)的某些藥劑替代時，仍可取得相同或相近結(jié)果。。所有這些對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的相似的替代和變化，，都視為是在后面所附的權(quán)利要求書所定義的本發(fā)明范圍之內(nèi)。相應(yīng)地，應(yīng)當(dāng)理解的是，這本文所提供的圖表和描述只是為了便于理解本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)解釋為對其范圍的限定。
權(quán)利要求
1.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，其包括給予所述患者治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其進(jìn)一步包括所述雌二醇代謝物的藥物前體。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
5.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述患者中的中心靜脈壓，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物是選自，2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
7.如權(quán)利要求5所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
8.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
9.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述患者的心臟重量，該方法包括給予所述患者治療有效量的一種含有雌二醇代謝物的組合物。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
11.如權(quán)利要求9所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
12.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的組合物包括控釋制劑。
13.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述患者的肺臟重量，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
16.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
17.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述患者中的右心室肥大，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
19.如權(quán)利要求17所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
20.如權(quán)利要求17所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
21.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述患者中的肺血管阻力，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
23.如權(quán)利要求21所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
24.如權(quán)利要求21所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
25.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以降低所述的肺血管纖維化，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
26.如權(quán)利要求25所述的方法，這里所述的雌二醇代謝物選自，2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
27.如權(quán)利要求25所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
28.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
29.一種治療患者心力衰竭的方法，其包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
31.如權(quán)利要求29所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
32.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
33.一種治療患者肺動脈高血壓的方法，以減少所述患者的肺臟、心臟和肺動脈的炎癥、細(xì)胞的增殖、血管的改型和血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)，該方法包括給予所述患者一種治療有效量的含有雌二醇代謝物的組合物。
34.如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述的雌二醇代謝物選自2-羥基雌二醇、2-甲氧基雌二醇、4-羥基雌二醇和4-甲氧基雌二醇。
35.如權(quán)利要求33所述的方法，其進(jìn)一步包括一種所述雌二醇代謝物的藥物前體。
36.如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述的組合物包括一種控釋制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于治療肺動脈高血壓和與其相關(guān)疾病的方法。特別是，該方法包括單獨(dú)使用雌二醇代謝物或者與可生物降解的微粒或納米粒子相關(guān)的雌二醇代謝物，或者與另一種治療藥物組合使用治療肺動脈高血壓。優(yōu)選的雌二醇代謝物該方法包括2－甲氧基雌二醇、4－甲氧基雌二醇、2－羥基雌二醇以及4－羥基雌二醇，和/或其合成的衍生物和類似物或者其藥物前體。該組合物也可以是以控釋制劑的形式存在。
文檔編號A61K31/58GK1764461SQ200480008077
公開日2006年4月26日 申請日期2004年2月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月20日
發(fā)明者斯蒂文·P·托夫維克, 愛德文·K·杰克森 申請人:匹茲堡大學(xué)